Uji Daya Bunuh Ekstrak Daun
Nerium oleander L
. Terhadap
Larva Nyamuk
Aedes aegypti
dan
Culex quinquefasciatus
Rina Isnawati*, Murni, Nelfita
Jl. Masitudju No.58 Labuan Panimba, Labuan, Donggala, Sulawesi Tengah, Indonesia Balai Litbang P2B2 Donggala, Badan Litbang Kesehatan, Kementerian Kesehatan RI
The use of synthetic larvacide can be harmful to enviroment. It also can lead to larvacide resistance. One of the alternatives to reduce the negative impact of synthetic larvacide is organic larvacide from plant, such as Nerium oleander L. The aim of study was to determine the efficacy of N.oleander leaves extract against Aedes aegypti and Culex quinquefasciatus larvae which was measured by LC and LC . The third instar larvae of50 90
Ae. aegypti and Cx. quinquefasciatus were used for the study which were divided into 10 groups. In addition, there were one positive control group with Bacillus thuringiensis and one negative control with water. The results showed that the LC and LC for50 90 Ae. aegypti
were and 2,67% respectively whereas the LC and LC for 50 90 Cx. quinquefasciatus were 0,14% and 0,71% respectively. Moreover, there was a mean difference in the death of
larvae between Ae. aegypti and Cx. quinquefasciatus (p-value=0.006). Extract of
N. oleander leaves were more effective against Cx. quinquefasciatus larvae than
Ae. aegypti larvae.
A B S T R A C T / A B S T R A K INFO ARTIKEL
Penggunaan larvasida sintesis sangat merugikan masyarakat seperti pencemaran lingkungan dan menyebabkan resistensi. Alternatif untuk mengurangi dampak negatif tersebut adalah dengan menggunakan larvasida nabati yang berasal dari tanaman yaitu Nerium oleander L. Tujuan dari penelitian ini adalah menentukan besarnya daya bunuh ekstrak daun Nerium oleander yang ditunjukkan dengan LC dan LC . Larva 50 90
nyamuk yang digunakan adalah larva nyamuk Aedes aegypti dan Culex quinquefasciatus
yang telah mencapai instar III yang dibagi menjadi 10 kelompok perlakuan dengan kontrol positif (Bacillus thuringiensis) dan kontrol negatif (Air). Hasil penelitian menunjukkan bahwa LC dan LC untuk 50 90 Ae. aegypti masing-masing adalah 0,68% dan 2,67%, sedangkan LC dan LC untuk 50 90 Cx. quinquefasciatus masing-masing adalah
0,14% dan 0,71%, dan terdapat perbedaan kematian yang bermakna antara
Ae. aegypti dan Cx. quinquefasciatus (p-value=0.006 ). Ekstrak daun N. oleander lebih efektif terhadap larva nyamuk Cx. quinquefasciatus dari pada Ae. aegypti.
© 2015 2015 Jurnal Vektor Penyakit. All rights reserved. Kata kunci:
larvasida
Nerium oleander Aedes aegypti
Culex quinquefasciatus Article History: Received: 28 Oct. 2015 Revised: 7 Dec.. 2015 Accepted: 10 Dec. 2015
*Alamat Korespondensi : email : rina_isnawati@yahoo.com
The Efficacy of
Nerium oleander L.
Leaves Extract Against
Aedes aegypti
and
Culex quinquefasciatus Larvae
Keywords: larvacide Nerium oleander Aedes aegypti
Culex quinquefasciatus
PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara tropis terbesar di dunia. Iklim tropis menyebabkan adanya berbagai penyakit tropis yang disebabkan oleh nyamuk diantaranya adalah Demam Berdarah Dengue (DBD) dan
1
filariasis. Nyamuk Aedes aegypti adalah
2
penular penyakit Demam Berdarah Dengue, sedangkan nyamuk sebagai vektor filariasis
3
adalah dari genus Culex dan Aedes.
d a n d a p a t m e nye b a b k a n ke c a c a t a n . Umumnya penyakit ini diketahui setelah timbul gejala klinis dan kronis. Prevalensi filariasis di Sulawesi Tengah berdasarkan hasil Riskesdas 2007 adalah 1,4‰, di atas
4
angka prevalensi nasional (1,1‰).
Pengendalian vektor telah banyak dilakukan dengan berbagai cara dan salah satu cara yang terpenting adalah dengan
5
memutus rantai penularan. Sampai saat ini pengendalian masih di titik beratkan pada penggunaan insektisida kimia karena lebih efektif, mudah aplikasinya dan hasilnya dapat d i k e t a h u i d e n g a n c e p a t . S e i r i n g p e r k e m b a n g a n j a m a n d a n a d a n y a penggunaan insektisida yang berulang telah menimbulkan masalah baru yaitu timbulnya r e s i s t e n s i v e k t o r d a n p e n c e m a r a n
6
lingkungan.
Metode pengendalian vektor yang paling efektif adalah dengan membunuh larvanya. Sehubungan dengan hal tersebut, maka perlu dilakukan usaha untuk mendapatkan larvasida alternatif yaitu menggunakan larvasida nabati dari tanaman yang mempunyai kandungan beracun terhadap serangga pada stadium larva. Beberapa penelitian tanaman sebagai larvasida telah dilakukan diantaranya adalah ekstrak biji
mimba (Azadirachta indica) terhadap Ae. aegypti, ekstrak etanol minyak akar wangi
(Vetiveria zizanoides) terhadap Ae. aegypti, Culex sp, Anopheles sundaicus, ekstrak daun
teklan (Eupatorium riparium) terhadap
1,2,7
Ae. aegypti. Penelitian tanaman sebagai larvasida nabati masih perlu dikembangkan mengingat banyak tanaman yang tidak dikenal secara umum ternyata memiliki manfaat dan nilai ekonomis yang cukup
2
tinggi.
Tanaman Oleander N. oleander banyak dijumpai di Sulawesi Tengah sebagai tanaman hias di pekarangan rumah maupun di pinggir jalan. Tanaman tersebut berpotensi sebagai larvasida nabati karena bersifat toksik. Menurut Inchem, 2005 dalam Goktas, 2007 bahwa N. oleander banyak mengandung senyawa beracun, yang paling tinggi kandungannya adalah oleandrin dan nerin
8
sebagai glikosida jantung.
Bagian tanaman N. oleander yang dapat digunakan sebagai insektisida adalah akar,
batang, kulit batang, daun dan bunga, tetapi yang paling sering digunakan adalah daunnya karena paling banyak mengandung oleandrin. Zat tersebut bekerja sebagai racun perut dan penghambat daya makan larva. Racun perut akan mempengaruhi metabolisme larva setelah memakan racun, kemudian racun akan masuk ke dalam tubuh dan dicerna dalam saluran tengah yang kemudian diedarkan bersama cairan yang fungsi seperti darah. Racun yang terbawa cairan tersebut akan mempengaruhi sistem saraf larva dan
9
kemudian akan menimbulkan kematian. Beberapa penelitian telah dilakukan terhadap tanaman N. oleander yaitu penelitian Fakoorziba menggunakan ekstrak daun dan bunga N. oleander terhadap Anopheles stephensi, Komalamisra menggunakan ekstrak etanol daun oleander terhadap larva nyamuk Ae. aegypti diperoleh LC sebesar 50
10,11
197,97 mg/L. Penelitian yang dilakukan oleh Raveen menggunakan ekstrak hexan bunga oleander terhadap larva nyamuk Cx. quinquefasciatus hasilnya lebih tinggi dibandingkan ekstrak menggunakan air dengan nilai LC setelah 24 dan 48 jam 50
masing-masing sebesar 102,54 dan 61,11
12
ppm.
P e n e l i t i a n i n i b e r t u j u a n u n t u k menentukan besarnya daya bunuh ekstrak daun N. oleander sebagai larvasida nabati dengan menentukan LC dan LC terhadap 50 90
l a r v a n y a m u k A e . a e g y p t i d a n C x . quinquefasciatus, sehingga diharapkan dapat memberikan alternatif pengendalian vektor penyakit menggunakan larvasida nabati.
BAHAN DAN METODE Penyediaan Larva Nyamuk
Larva nyamuk Ae. aegypti (Instar III) diperoleh dari Instalasi Hewan Coba Balai Litbang P2B2 Donggala. Telur nyamuk Cx. quinquefasciatus diambil dari alam dan ditetaskan di laboratorium sehingga diperoleh keadaan yang stabil.
Pembuatan Ekstrak Daun Oleander
sehingga diperoleh serbuk halus. Serbuk halus kemudian diekstraksi dengan metode perkolasi, menggunakan pelarut etanol 70%
13
pada suhu kamar. Ekstrak ditampung dalam erlenmeyer, hasil ekstrak kemudian diuapkan sehingga diperoleh ekstrak kental. Ekstraksi dilakukan di Balai Besar Tanaman Obat dan Obat Tradisional Tawangmangu diperoleh sebesar 15,04%.
Uji Pendahuluan
Larutan uji dibuat dengan melarutkan ekstrak daun oleander sesuai dengan konsentrasi yang diinginkan sampai volume 100 ml masing-masing diisi 25 larva nyamuk. Percobaan dilakukan di mangkuk plastik yang
1 4
telah diisi larva nyamuk instar III. Konsentrasi yang digunakan pada larva nyamuk Ae. aegypti adalah 0.4% , 0.6%, 0.8%, 1%, 1.2%, 1.4% (b/v) diperoleh LC :0.781% 50
dan LC :1.617%, sedangkan pada larva 90
nyamuk Cx. quinquefasqiatus digunakan konsentrasi 1.4%, 1.6%, 1.8%, 2%, 2.2%, 2.4% (b/v) diperoleh LC :0.87% dan LC :1.31%50 90 Uji Larvasida
Larva nyamuk yang dipakai adalah larva nyamuk Ae. aegypti dan Cx. quinquefasciatus dibagi menjadi 10 kelompok perlakuan dengan kontrol positif Bacillus thuringiensis (H-14) dan air sebagai kontrol negatif. Masing-masing kelompok perlakuan terdiri dari 25 larva instar III akhir dengan konsentrasi N. oleander, untuk Ae. aegypti yaitu (0,4;0,6;0,8;1;1,2;1,4;1,6;1,8;2;2;2)%. Konsentrasi uji untuk Cx. quinquefasciatus adalah (0,2;0,4;0,6;0,8;1;1,2;1,4;1,6;1,8;2)%. Pengamatan dilakukan 24 jam setelah perlakuan. Untuk menghitung banyaknya ulangan (replikasi) di hitung menggunakan
15
rumus Federer.
(t -1) (n - 1) 15 Keterangan:
t : Jumlah perlakuan (10 konsentrasi ekstrak daun N. oleander)
n : Jumlah Ulangan (diperoleh ulangan sebanyak empat kali)
Pengamatan dilakukan dengan cara menghitung jumlah kematian larva nyamuk setelah 24 dan 48 jam perlakuan untuk penentuan nilai LC dan Lc . Uji statistik yang 50 90
digunakan adalah uji probit untuk mencari LC dan LC serta dilakukan uji 50 90 T-test untuk menghitung perbedaan kematian pada larva nyamuk Ae. aegypti dan Cx. quinquefasciatus.
HASIL
Hasil pengukuran suhu ruangan selama
o
pengujian berkisar rata-rata 27 C, merupakan kondisi yang sesuai untuk pertumbuhan larva. Sementara pH medium kontrol dan larutan uji selama pengujian rata-rata tujuh dan kelembaban 68%.
Berdasarkan Gambar 1 dapat dilihat bahwa nilai rata-rata kematian larva nyamuk Ae. aegypti dan Cx. quinquefasqiatus semakin meningkat seiring dengan meningkatnya konsentrasi ekstrak daun N. oleander.
Ekstrak tersebut mampu menyebabkan kematian larva Ae. aegypti sebesar 44% pada konsentrasi terendah 0,4% dan mematikan 100% hewan uji pada konsentrasi 2,2%, sedangkan rata-rata kematian larva nyamuk Cx. quinquefasqiatus sebesar 64% pada konsentrasi terendah 0,2% dan mematikan 100% pada konsentrasi 1,2%; 1,8%; 2%.
Selanjutnya pada Gambar 2 dapat dilihat nilai LC sebesar 0,68% dan LC sebesar 50 90
2,67%, artinya pengaruh yang disebabkan oleh ekstrak daun N. oleander mampu menyebabkan kematian 50% larva Ae. aegypti
pada konsentrasi 0,68%, ekstrak daun N. oleander juga mampu menyebabkan
kematian 90% pada konsentrasi 2,67%. Hal ini berarti konsentrasi 0,68% dan 2,67% memberikan pengaruh kematian pada larva
Gambar 1. Data Kematian Larva Nyamuk
Ae. aegypti dan Cx. quinquefasciatus
Ae. aegypti. Hasil uji probit pada larva nyamuk Cx. quinquefasciatus diperoleh nilai LC 50
sebesar 0,14% dan LC sebesar 0,71%. 90
Pengaruh yang disebabkan oleh ekstrak daun N. oleander mampu menyebabkan kematian 50% pada konsentrasi 0,14% dan juga mampu m e n y e b a b k a n k e m a t i a n 9 0 % p a d a
konsentrasi 0,71%. Berdasarkan Tabel 1. hasil uji T-test menunjukkan adanya perbedaan kematian yang nyata antara larva nyamuk Ae. aegypti dan Cx. quinquefasqiatus dengan p-value 0,006(<0,05).
PEMBAHASAN
Kematian larva nyamuk meningkat seiring meningkatnya konsentrasi ekstrak daun N. oleander, hal ini menunjukkan dan memastikan bahwa ekstrak tersebut bersifat toksik. Pada penelitian ini suhu, pH dan kelembaban masih pada batas normal, maka kecil kemungkinan larva nyamuk dalam penelitian ini mati disebabkan oleh pengaruh luar seperti suhu, pH dan kelembaban.
Hal tersebut sesuai dengan penelitian Asiah yang menyatakan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun Nephelium lappaceum maka semakin tinggi pula rata-rata
16
kematian larva nyamuk Ae. aegypti. Adanya perbedaan atau variasi pada jumlah kematian larva nyamuk disebabkan oleh adanya variasi sensitifitas dan resistensi dari setiap larva terhadap bahan aktif yang terdapat dalam ekstrak.
Senyawa bioaktif yang terkandung dalam ekstrak daun N. oleander merupakan penyebab kematian larva karena senyawa bioaktif tersebut sebagai zat toksik. Kematian larva disebabkan oleh ketidakmampuan larva dalam mendetoksifikasi senyawa toksik yang
7
masuk ke dalam tubuhnya. Berdasarkan hasil pengamatan, larva uji memperlihatkan gejala kegelisahan yang ditandai dengan gerakan-gerakan naik turun pada media uji, sedangkan pada kontrol, larva menunjukkan kondisi istirahat di permukaan membentuk sudut tertentu.
Berdasarkan hasil penelitian, ekstrak daun N. oleander lebih efektif untuk m e m b u n u h l a r v a n y a m u k C x . quinquefasqiatus dari pada Ae. aegypti karena konsentrasi yang dibutuhkan untuk
Gambar 2. Nilai LC dan Lc Ekstrak Daun 50 90
Oleander terhadap Larva Nyamuk Ae. aegypti dan Cx.
setelah 24 Jam Perlakuan
quinquefasciatus
Gambar 3. Nilai LC dan Lc Ekstrak Daun 50 90
N. Oleander terhadap Larva Nyamuk Ae. aegypti dan Cx. quinquefasciatus setelah 48 Jam Perlakuan
Selanjutnya pada Gambar 3. merupakan hasil pengamatan yang dilakukan sampai 48 jam setelah perlakuan. Nilai LC dan LC pada 50 90
pengamatan 48 jam lebih kecil dibandingkan pada pengamatan 24 jam setelah perlakuan, artinya pengamatan setelah 48 jam perlakuan untuk menegaskan bahwa kematian larva nyamuk yang diuji disebabkan oleh ekstrak daun N. oleander
Jenis Nyamuk Mean p-value 95%
Kematian Aedes 16,8(5,1) 0,006 1,8-9,6 Culex 22,5 (2,8)
Tabel 1. Kematian Ae. aegypti dan Cx.
m e m b u n u h l a r v a n y a m u k C x . quinquefasqiatus lebih kecil dibandingkan Ae. Aegypti. Hal ini berbeda dengan hasil penelitian Lokesh yang menyatakan bahwa d a r i t i g a l a r v a n y a m u k y a n g d i u j i menggunakan ekstrak daun N.oleander dan Trigonella faenum, Ae. aegypti adalah yang paling sensitif terhadap perlakuan tersebut dengan menunjukkan rata-rata kematian tertinggi dibandingkan dengan larva nyamuk
17
Cx. quinquefasqiatus dan Anopheles sp. Perbedaan tersebut disebabkan oleh kualitas ekstrak daun N. oleander yang dipengaruhi beberapa faktor seperti tempat tumbuh tanaman, metode ekstraksi dan pelarut yang digunakan, dan juga perbedaan sensitivitas
18
pada larva nyamuk yang diuji.
Pengaruh perbedaan kematian antara l a r v a n y a m u k A e . a e g y p t i d a n Cx.quinquefasqiatus tersebut juga berarti dalam ekstrak daun N. oleander terkandung senyawa yang efektif seperti oleandrin yang berpengaruh juga terhadap nyamuk An.
1 0
stephenai. Ekstrak daun N. oleander merupakan larvasida nabati yang bekerja sebagai racun perut dan penghambat daya m a k a n l a r v a . R a c u n p e r u t a k a n mempengaruhi metabolisme larva setelah memakan racun, kemudian racun akan masuk ke dalam tubuh dan dicerna dalam saluran tengah yang kemudian diedarkan bersama cairan yang berfungsi seperti darah. Racun yang terbawa cairan tersebut akan mempengaruhi sistem saraf larva dan
9
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terhadap daun N. oleander sebagai larvasida nabati untuk mengendalikan atau membunuh larva nyamuk.
UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih disampaikan kepada Pembimbing Dra. Blondine Ch. P M.Kes
(B2B2VRP Salatiga) dan Dr. Yani Sudiyani (Puslit Kimia LIPI) atas masukan dan saran yang membangun serta Teknisi Laboratorium Galenika B2P2TOOT Tawangmangu atas bantuannya selama proses ekstraksi daun N.oleander. Sains dan Teknol Kim. 2010;1(1):59-65. 2. Suirta IW, M PN, K GN. Isolasi Dan Identifikasi
Senyawa Aktif Larvasida Dari Biji Mimba (
Azadirachta indika A . Juss ) Terhadap Larva Nyamuk Demam Berdarah (Aedes aegypti). J Kim. 2007;1:47-54.
3. Ardias A, Setiani O, Darundiati YH. Faktor Lingkungan dan Perilaku Masyarakat yang Berhubungan dengan Kejadian Filariasis di Kabupaten Sambas. J Kesehat Lingkung I n d o n e s . 2 0 1 3 ; 1 1 ( 2 ) : 1 9 9 - 2 0 7 . http://ejournal.undip.ac.id/index.php/jkli/a rticle/view/5032.
4. Badan Penelitian dan Pengembangan K e s e h a t a n . R i s e t K e s e h a t a n D a s a r (RISKESDAS) 2007. Lap Nas 2007. 2008:1-384. doi:1 Desember 2013.
5. Nugroho A, Setyaningrum E, Wintoko R, Kurniawan B. The influence of fruit extracts
Phaleria macrocarpa against Aedes aegypti
larvae development of instar III. Med J Lampung Univ. 2014:9-17.
6. Sukowati S. Masalah Vektor Demam Berdarah Dengue (DBD) dan Pengendaliannya di Indonesia. Bul Jendela Epidemiol. 2010;2:5-8 7. Yunita EA, Suprapti NH, Hidayat JW. Pengaruh
Ekstrak Daun Teklan (Eupatorium riparium) Terhadap Mortalitas Dan Perkembangan Larva Aedes aegypti. J Bioma. 2009;11(1). 8. Goktas O, Mammadov R, Duru ME, Ozen E,
Colak AM. Application of extracts from the poisonous plant , Nerium Oleander L ., as a wood preservative. African J Biotechnol.
2007;6(September):2000-2003.
9. Wahyudi A. Nerium oleander :Pestisida Botani Untuk Pengendalian Hama. War Litbang Tanam. 2010;16 (2).
10. Fakoorziba MR, Moemenbellah-Fard MD, Azizi K, Mokhtari F. Mosquitocidal efficacy of m e d i c i n a l p l a n t , N e r i u m o l e a n d e r
Liston (Diptera: Culicidae) larvae. AsianPacific J T r o p D i s . 2 0 1 5 ; 5 ( 1 ) : 3 3 - 3 7 . doi:10.1016/S2222-1808(14)60623-X. 11. Komalamisra N, Trongtokit Y, Rongsriyam Y,
Apiwathnasorn C. Screening for larvicidal activity in some Thai. Southeast Asian J Trop Med Public Heal. 2005;36(6).
12. Raveen R, Kamakshi KT, Deepa M, Arivoli S, Tennyson S. Larvicidal activity of Nerium oleander L . ( Apocynaceae ) flower extracts against Culex quinquefasciatus Say ( Diptera: Culicidae ). Int J Mosq Res. 2014;1(1):38-42. http://www.dipterajournal.com/vol1issue1/ mar2014/7.1.pdf.
13. Thakur M, Pathak S. Phytochemical and Anti-Bacterial Activity of Eclipta Alba. Asian Reson. 2015;IV(III):108-112.
14. WHO. Guidelines for laboratory and field testing of mosquito larvicides. World Heal O r g a n . 2 0 0 5 : 1 - 4 1 . d o i : R e f :
WHO/CDS/WHOPES/GCDPP/2005.11. 15. Yuniarti R a., Damar TB. Efikasi Kombinasi
Bacillus thuringiensis israelensis dan
Mesocyclops aspericornsis Sebagai Pengendali Hayati Aedes aegypti di Gentong Air. Bul Penelit Kesehat. 2008;36:26-32.
16. Asiah S, Gama A, Ambarwati. Efektifitas ekstrak etanol daun rambutan (Nephelium lappaceum l.) terhadap kematian larva nyamuk Aedes aegypti instar III. J Kesehat.
2009;2:103-114.
17. Lokesh R, Barnabas EL, Madhuri P, Saurav K, Sundar K. Larvicidal Activity of Trigonella foenum and Nerium oleander Leaves Against Mosquito Larvae Found in Vellore City , India.
Curr Res J Biol Sci. 2010;2(3):154-160.
18. Hernani, Marwati T, Winarti C. Pemilihan Pelarut Pada Pemurnian Ekstrak Lengkuas (
Al p i n i a ga l a n ga ) S e c a ra E ks t ra ks i .
