PRINSIP DAN PELAKSANAAN PENGAMBILAN SAMPEL (SAMPLING) Marlia Singgih Wibowo School of Pharmacy ITB

(1)

PRINSIP DAN PELAKSANAAN

PENGAMBILAN SAMPEL

(SAMPLING)

Marlia Singgih Wibowo

School of Pharmacy ITB

(2)

Prinsip Umum

►

► PengambilanPengambilan SampelSampel ((SamplingSampling)) adalah tahap adalah tahap awalawal dalam dalam proses dimana data

proses dimana data hasilhasil karakterisasi satu batch produk karakterisasi satu batch produk dikumpulkan untuk proses evaluasi.

dikumpulkan untuk proses evaluasi.

►

► OlehOleh karenakarena hhanya sebagian anya sebagian sajasaja dari suatu batch yang dari suatu batch yang diambil sampelnya untuk pengujian, bagian tersebut harus

diambil sampelnya untuk pengujian, bagian tersebut harus

mewakili batch tersebut

►

► HHasil pengujian sampel tersebut akan menentukan nasib asil pengujian sampel tersebut akan menentukan nasib batch tersebut,

batch tersebut, sehinggasehingga prosesproses seleksiseleksi sampel merupakan sampel merupakan tahap kritis (penting) dalam sistem penjaminan mutu (Quality

tahap kritis (penting) dalam sistem penjaminan mutu (Quality

Assurance System).

(3)

Kuliah

3

(4)

PROSES DI INDUSTRI FARMASI

WARE HOUSE PREPARATION PPIC PRODUCTION PACKAGING WARE HOUSE DISTRIBU TION OUTLET

Raw material, packaging material, apparatus, instruments, etc

(5)

Pada

tahap

_tahap

mana

_mana

sampling

_sampling

harus

(6)

QC SAMPLING

WARE HOUSE PREPARATION PPIC PRODUCTION PACKAGING WARE HOUSE DISTRIBU TION OUTLET QC QC QC QC QC QC QC QC

(7)

►

Dalam setiap proses sampling, indikator kualitas atau

disebut sebagai

“

atribut

”

, harus ditetapkan dan

menggambarkan karakteristik batch yang dimaksud.

►

Dalam sampling mikrobiologi, tidak hanya

homogenitas dan random sampling yang menjadi

persyaratan, namun juga

HACCP (Hazard Analysis

and Control of Critical Points).

(8)

Masalah

Sampling dalam

konteks mikrobiologi

►

► KKontaminasiontaminasi merupakan hal yang harus diperhatikan. merupakan hal yang harus diperhatikan.

Penanganan khusus perlu diterapkan untuk beberapa jenis

bahan yang akan disampling, terutama yang berisiko tinggi

terhadap kemungkinan kontaminasi.

►

► Penanganan nya bisa bervariasi tergantung pada jenis Penanganan nya bisa bervariasi tergantung pada jenis

sampel. Misalnya sampling untuk produk yang dibuat secara

aseptik

aseptik, uji sterilitas harus dilakukan di ruang tertentu (, uji sterilitas harus dilakukan di ruang tertentu (LAF LAF cabinet kelas A di ruang bersih Kelas B

cabinet kelas A di ruang bersih Kelas B). ). ►

► Untuk produkUntuk produk--produk lain, sampling area khusus yang tidak produk lain, sampling area khusus yang tidak steril sudah cukup dapat digunakan.

(9)

SOP sampling

►

► SOP sampling harus dibuat karena sampling merupakan SOP sampling harus dibuat karena sampling merupakan

bagian penting dari Sistem

bagian penting dari Sistem PPenjaminan enjaminan MMutuutu

►

► Di dalam SOP harus tercantum halDi dalam SOP harus tercantum hal--hal yang harus hal yang harus

diperhatikan dalam melakukan sampling,

diperhatikan dalam melakukan sampling, antaraantara lain :lain :

metode dan alat yang harus digunakanmetode dan alat yang harus digunakan

siapa yang boleh melakukan samplingsiapa yang boleh melakukan sampling

jumlah sampel yang harus diambil, jumlah sampel yang harus diambil,

bagaimana pembagiannyabagaimana pembagiannya

jjenis wadah yang digunakanenis wadah yang digunakan

kondisi penyimpanan, kondisi penyimpanan,

selang waktu pengambilan sampelselang waktu pengambilan sampel, ,

(10)

(11)

Single sampling (Sampling Tunggal)

►

► Metode sampling klasik yaitu satu kali pengambilan sampel Metode sampling klasik yaitu satu kali pengambilan sampel

untuk satu wadah.

►

► Jumlah wadah yang disampling tergantung dari jumlah Jumlah wadah yang disampling tergantung dari jumlah

batch yang datang, plus dua.

►

► BiasanyaBiasanya jumlahjumlah sampelsampel ygyg diambildiambil : : √√n +2 n +2 dimanadimana

n=

n=jumlahjumlah container container dalamdalam 1 batch1 batch

►

► Sampel Sampel yang yang diambildiambil lalulalu dicampurdicampur, , diuji dan hasilnya diuji dan hasilnya

menentukan

menentukan reject reject atau tidaknya suatu batch. atau tidaknya suatu batch.

►

► Dasar statistik skema sampling Dasar statistik skema sampling tunggaltunggal tidak diketahui tidak diketahui , ,

tetapi bila perlu, kumpulan sampel dapat di sampling

kembali dan hasil dari masing

kembali dan hasil dari masing--masing produk dapat masing produk dapat dievaluasi untuk melihat trend dalam periode waktu

dievaluasi untuk melihat trend dalam periode waktu

tertentu.

(12)

Attribute Sampling

►

► Salah satu metode pilihan untuk sampling di industri kosmetik Salah satu metode pilihan untuk sampling di industri kosmetik dan makanan melibatkan seleksi atribut (kriteria) yang harus

dan makanan melibatkan seleksi atribut (kriteria) yang harus

dipenuhi dalam sejumlah sampel yang telah ditentukan

sebelumnya, yang diambil dari satu batch.

►

► Hal ini disebut toleransi, yang memperbolehkan sejumlah Hal ini disebut toleransi, yang memperbolehkan sejumlah tertentu dari sampel yang diambil tidak memenuhi

tertentu dari sampel yang diambil tidak memenuhi

persyaratan, namun tentu saja skema ini tidak dapat

digunakan untuk produk steril.

►

► Sampel diambil, lalu diuji dan memberikan level of assurance Sampel diambil, lalu diuji dan memberikan level of assurance yang lebih tinggi dibandingkan metode klasik.

(13)

Skema Two

-

_-

class Atribut

_{class Atribut}

►

► Parameter yang Parameter yang pentingpenting ::

JJumlah sampel umlah sampel yang yang diambildiambil, , dan dan

jumlah maksimum hasil positif yang diperbolehkan jumlah maksimum hasil positif yang diperbolehkan

►

► SimbolSimbol yang yang telah ditetapkan (n dan c).telah ditetapkan (n dan c). ►

► ContohContoh : U: Uji bakteriologi ji bakteriologi suatusuatu sumber air minumsumber air minum >> Dari 5 Dari 5 sampel yang diambil (n),

sampel yang diambil (n), E.coliE.coli tidak boleh ada dalam setiap tidak boleh ada dalam setiap sampel, dan hanya 2 dari 5 sampel yang boleh mengandung

sampel, dan hanya 2 dari 5 sampel yang boleh mengandung

Enterobacteriaceae

Enterobacteriaceae. . ►

► Jadi Jadi adaada dua tingkat kualitas yang dipersyaratkandua tingkat kualitas yang dipersyaratkan ::

adalah tidak adanya adalah tidak adanya E.coliE.coli dan dan

sejumlah tertentu sampel masih boleh mengandung sejumlah tertentu sampel masih boleh mengandung Enterobacteriaceae

Enterobacteriaceae. .

►

► Dalam Dalam bidangbidang farmasi, metode ini cocok bila hasil positif tidak farmasi, metode ini cocok bila hasil positif tidak diperkenankan.

diperkenankan. Contoh : suatu bahan baku Contoh : suatu bahan baku alamalam misalnya misalnya bubuk tiroid, mungkin punya spesifikasi

bubuk tiroid, mungkin punya spesifikasi yaituyaitu tidak boleh ada tidak boleh ada

Salmonella

(14)

Parameter

dalam

sampling

dua

atribut

►

n =

jumlah

unit

sampel

yang

akan

diuji

►

m =

angka

yang

menunjukkan

batas

angka

yang

dinyatakan

reject/defect

►

c =

jumlah

maksimum

yang

masih

diijinkan

di

atas

angka

“

m

”

sebelum

lot

sampel

tersebut

di

reject

►

Contoh

:

Bila

m= 10

44

cfu/g

,

maka

hasil

analisis

10

22

,

9x10

33

_dinyatakan

_“

_acceptable

_”

_dan

_1,2x10

44

_dapat

dikatakan

(15)

Kuliah

(16)

Skema Tiga

-

class Attribute

►

► Dalam skema ini ada 3 level kualitas yang ditetapkan :Dalam skema ini ada 3 level kualitas yang ditetapkan :

Fully acceptable (AQL=Acceptable Quality LevelFully acceptable (AQL=Acceptable Quality Level))

Marginally acceptable Marginally acceptable

UnacceptableUnacceptable

►

► Metode ini banyak digunakan di dalam industri makanan dan Metode ini banyak digunakan di dalam industri makanan dan kosmetik, dan skema ini telah digunakan untuk establishment

kosmetik, dan skema ini telah digunakan untuk establishment

dan penggunaan

dan penggunaan angkaangka referensi mikrobiologi. (Mosses 1995, referensi mikrobiologi. (Mosses 1995, CTPA 1996).

CTPA 1996).

►

► PenggunaanPenggunaannyanya dalam mikrobiologi farmasi dalam mikrobiologi farmasi lebihlebih ketatketat , , dandan terutama terbatas

terutama terbatas hanyahanya untuk uji bahan baku dan produk untuk uji bahan baku dan produk non

(17)

►

Contoh

:

Suatu

batas

jumlah

mikroba

100

100 koloni

koloni

,

bila

kurang

dari

100,

dapat

dikategorikan

acceptable

,

lebih

dari

1000

koloni

adalah

unacceptable

,

sedangkan

antara

100

100 –

–

1000

koloni

disebut

marginally

acceptable

,

tergantung

pada

jumlah

sampel

yang

diambil

(18)

Re

-

sampling

►

► Jika ada keraguan dalam validitas sampling, sampling kedua Jika ada keraguan dalam validitas sampling, sampling kedua harus dilakukan.

harus dilakukan.

►

► Jika keakuratan metode perhitungan yang dipertanyakan, Jika keakuratan metode perhitungan yang dipertanyakan, atau karena distribusi mikroba yang dicurigai tidak homogen,

atau karena distribusi mikroba yang dicurigai tidak homogen,

uji ulang harus dilakukan.

►

► Populasi mikroba dapat sangat dinamis, berubah dari waktu Populasi mikroba dapat sangat dinamis, berubah dari waktu ke waktu, dapat menghasilkan profil mikroba yang berbeda

ke waktu, dapat menghasilkan profil mikroba yang berbeda

pada sampling kedua.

►

► Jika pada hasil uji sampling kedua muncul mikroba yang tidak Jika pada hasil uji sampling kedua muncul mikroba yang tidak diharapkan, maka tidak perlu lagi dilakukan uji ulang.

(19)

Sampel baku standar

►

► Sampel yang diambil sebagai baku standar harus mewakili Sampel yang diambil sebagai baku standar harus mewakili batch yang ada.

batch yang ada.

►

► Sampel ini harus ditandai dengan baik, ada nomor referensi Sampel ini harus ditandai dengan baik, ada nomor referensi nya, jumlah, no batch , tanggal sampling, dan dari wadah

nya, jumlah, no batch , tanggal sampling, dan dari wadah

mana sampel tersebut diambil.

►

► Sampel baku standar harus disimpan dari setiap batch produk Sampel baku standar harus disimpan dari setiap batch produk jadi sampai 1 tahun setelah waktu kadaluarsanya. Jumlah

jadi sampai 1 tahun setelah waktu kadaluarsanya. Jumlah

sampel harus cukup untuk sedikitnya uji ulang penuh.

►

► Peringatan atau perhatian tertentu harus dibuat untuk Peringatan atau perhatian tertentu harus dibuat untuk

mencegah kerusakan sampel selama penyimpanan yang

mungkin dapat menjadikan hasil uji tidak valid.

(20)

HACCP

(Hazard Analysis of Critical Control Point)

►

► HACCP = HACCP = sistemsistem untukuntuk menjaminmenjamin bahwabahwa monitoring monitoring dandan kontrol

kontrol mikrobiologimikrobiologi padapada ppointoint--point kritis yang telah point kritis yang telah ditetapkan dalam setiap tahap produksi

ditetapkan dalam setiap tahap produksi, , sertaserta jumlahjumlah sampelsampel yang

yang harusharus diperiksadiperiksa, , telahtelah sesuaisesuai dandan tepattepat ►

► ProsesProses produksiproduksi harus dimonitor secara rutin dan intensifharus dimonitor secara rutin dan intensif ►

► Jika perlu langkahJika perlu langkah--langkah koreksi harus diambil untuk langkah koreksi harus diambil untuk menjamin pengawasan telah dipelihara setiap waktu.

(21)

Pengawasan

dalam

HACCP

►

► membatasi kontaminasi dengan cara menyeleksi bahan membatasi kontaminasi dengan cara menyeleksi bahan baku yang sesuai dan menerapkan pengukuran higienis

baku yang sesuai dan menerapkan pengukuran higienis

yang sesuai selama proses produksi

►

► meminimumkan semua kesempatan bagi mikroba untuk meminimumkan semua kesempatan bagi mikroba untuk

tumbuh di seluruh proses pembuatan produk, distribusi dan

penyimpanan

►

► proses untuk safety (misalnya proses untuk safety (misalnya dengandengan melakukanmelakukan sterilisasi) jika melalui dua cara sebelumnya

sterilisasi) jika melalui dua cara sebelumnya tidaktidak mungkinmungkin diperoleh

(22)

Sampling Khusus

►

► Produk SterilProduk Steril ►

► Sampling untuk Sampling untuk Bioburden Bioburden ► ► AirAir ► ► LingkunganLingkungan ►

► Alat keAlat kesehatsehatanan ►

► Peralatan (equipment)Peralatan (equipment) ►

► Operator (pekerja)Operator (pekerja) ►

(23)

Sampling

untuk

Produk

Steril

►

Probabilitas

hasil

uji

►

Jumlah

sampel

untuk

uji

►

(24)

Produk/wadah

steril

dan

non

-

steril

►

► PadaPada saatsaat kitakita akanakan sampling sampling utkutk sterilitassterilitas, , tingkattingkat jaminanjaminan kualitas

kualitas daridari suatusuatu batch batch merupakanmerupakan fungsifungsi daridari homogenitashomogenitas kondisi

kondisi produksiproduksi dandan jugajuga efisiensiefisiensi rencanarencana sampling sampling ►

► SecaraSecara matematismatematis, , perbandinganperbandingan wadahwadah (container) (container) sterilsteril dandan non

non--sterilsteril dalamdalam suatusuatu batch batch dapatdapat digambarkandigambarkan masingmasing- -masing

masing sebagaisebagai q q dandan p : p + q = 1 p : p + q = 1 atauatau q = (1q = (1--p)p) ►

► JikaJika diambildiambil n sample n sample daridari suatusuatu batch batch utkutk ujiuji, , nilainilai probabilitas

probabilitas (P) sample (P) sample tersebuttersebut sterilsteril sehinggasehingga batch batch tersebuttersebut dpt

dpt didi release :release : P =

(25)

Probabilitas

dalam

sampling

produk

steril

►

► MisalnyaMisalnya 1% 1% daridari wadahwadah tsbtsb terkontaminasiterkontaminasi, (, (berartiberarti p = 0,01), p = 0,01), dan

dan daridari wadahwadah tersebuttersebut 10 10 sampelsampel ygyg diambildiambil utkutk ujiuji makamaka P = (1

P = (1--0,01)0,01)1010 _atau_atau _{P = 0,904}_{P = 0,904}

►

► Hal Hal iniini berartiberarti : : dalamdalam mengambilmengambil 10 10 sampelsampel daridari batch batch ygyg 1%tidak

1%tidak sterilsteril, batch , batch tsbtsb akanakan loloslolos dengandengan kemungkinankemungkinan 9 9 dari

dari 10 , 10 , sehinggasehingga jumlahjumlah sample sample sangatsangat menentukanmenentukan kemungkinan

kemungkinan hasilhasil ygyg diperolehdiperoleh merepresentasikanmerepresentasikan keadaankeadaan sebenarnya

sebenarnya.. ►

► ((lihatlihat tabeltabel tentangtentang sample size sample size dandan probabilitasprobabilitas lolosnyalolosnya ujiuji sterilitas

(26)

Probabilitas

Probabilitas suatusuatu batch batch loloslolos ujiuji sterilitassterilitas padapada beberapa

beberapa tingkattingkat kontaminasikontaminasi dandan ukuranukuran sampelsampel

Persentase

Persentase kontaminasikontaminasi dalamdalam suatusuatu batchbatch Sample Sample size size 0.1 0.1 0.50.5 1.01.0 3.03.0 5.05.0 10 10 0.990.99 0.960.96 0.910.91 0.740.74 0.600.60 20 20 0.980.98 0.900.90 0.820.82 0.540.54 0.350.35 50 50 0.950.95 0.780.78 0.610.61 0.220.22 0.080.08 100 100 0.910.91 0.610.61 0.370.37 0.050.05 0.010.01 Baird, et.al, 2000

(27)

Bioburden

Sampling

►

► BioburdenBioburden testing testing umumnyaumumnya dilakukandilakukan untukuntuk mengestimasimengestimasi jumlah

jumlah mikroorganismemikroorganisme yang yang mungkinmungkin terdapatterdapat padapada : : produkproduk sebelum

sebelum prosesproses sterilisasisterilisasi dilakukandilakukan (pre(pre--sterilization count), sterilization count), bahan

bahan komponenkomponen padatpadat, , komponenkomponen cairancairan, , alatalat bantubantu prosesproses bahan

bahan bakubaku kimiakimia, , dandan komponenkomponen gasgas ►

► ProdukProduk mengandungmengandung air : air : BilaBila terkontaminasiterkontaminasi diasumsikandiasumsikan homogeneously contaminated

homogeneously contaminated

►

► ProdukProduk nonnon--air (nonair (non--aqueous product) : aqueous product) : kontaminasikontaminasi mungkinmungkin terjadi

terjadi beragamberagam tergantungtergantung jenisjenis produknyaproduknya ►

(28)

Sampling Air

►

► Cara Cara dandan jumlahjumlah sampelsampel untukuntuk air air tergantungtergantung padapada tujuantujuan penggunaan

penggunaan air, air, metodemetode penyiapanpenyiapan air, air, dandan caracara penyimpanan

penyimpanan airair ►

► UntukUntuk air yang air yang digunakandigunakan untukuntuk prosesproses produksiproduksi harusharus disampling

disampling paling paling sedikitsedikit 1x/minggu1x/minggu ►

► Air Air deionisasideionisasi ((DeionizedDeionized water) water) harusharus disamplingdisampling 1x/minggu, 1x/minggu, atau

atau setiapsetiap selesaiselesai siklussiklus regenerasiregenerasi ►

► SelamaSelama melakukanmelakukan prosesproses validasivalidasi sistemsistem, , harusharus dijamindijamin tidaktidak terjadi

(29)

►

► SemakinSemakin tinggitinggi kualitaskualitas air yang air yang akanakan digunakandigunakan, , semakinsemakin kecil

kecil jumlahjumlah kontaminankontaminan yang yang diijinkandiijinkan, , dandan semakinsemakin besarbesar volum

volum sampelsampel air yang air yang harusharus diambildiambil ►

► MenurutMenurut FDA : FDA :

Air untukAir untuk pembersihanpembersihan dandan pencucianpencucian : 3x100 mL: 3x100 mL

Air Air untukuntuk produksiproduksi atauatau bilasanbilasan akhirakhir alatalat dandan wadahwadah : 3x250 : 3x250 mLmL atau

atau lebihlebih daridari satusatu titiktitik sampling yang sampling yang samasama

Air Air untukuntuk prosesproses pendinginanpendinginan produkproduk setelahsetelah sterilisasisterilisasi : 3x1 L : 3x1 L atauatau lebih

lebih daridari satusatu titiktitik sampling yang sampling yang samasama

Air untukAir untuk ujiuji endotoksinendotoksin : < 1 mL: < 1 mL, , disamplingdisampling daridari wadahwadah yang yang depirogenasi

depirogenasi (depyrogenized(depyrogenized containers)containers)

►

► Sampling air Sampling air dapatdapat dilakukandilakukan padapada tempattempat keluarkeluar (outlet) (outlet) dandan air

(30)

Sampling

Lingkungan

►

► Sampling Sampling udaraudara didi dalamdalam ruanganruangan dapatdapat dilakukandilakukan dengan

dengan caracara meletakkanmeletakkan cawancawan petripetri berisiberisi medium medium pertumbuhan

pertumbuhan mikrobamikroba padapada tempattempat--tempattempat tertentutertentu.. ►