KARAKTERISASI DAN ISOLASI SENYAWA
TRITERPENOID/STEROID DARI DAUN NIPAH
(Nypa fruticans Wurmb.)
SKRIPSI
OLEH:
MUHAMMAD FAUZAN LUBIS
NIM 131524052
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
KARAKTERISASI DAN ISOLASI SENYAWA
TRITERPENOID/STEROID DARI DAUN NIPAH
(Nypa fruticans Wurmb.)
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
MUHAMMAD FAUZAN LUBIS
NIM 131524052
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
KARAKTERISASI DAN ISOLASI SENYAWA
TRITERPENOID/STEROID DARI DAUN NIPAH
(Nypa fruticans Wurmb.)
OLEH:MUHAMMAD FAUZAN LUBIS NIM 131524052
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 17 Desember 2015 Disetujui Oleh:
Pembimbing I, Panitia Penguji,
Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt. Prof. Dr. rer nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt NIP195108161980031002 NIP 195306191983031001
Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt. Pembimbing II, NIP 195108161980031002
Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt. Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. NIP 195709091985112001 NIP195109081985031002
Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt. NIP 195112231980032002
Medan, April 2016 Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Pejabat Dekan,
Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah melimpahkan rahmat dan anugerah-Nya sehingga penulis menyelesaikan skripsi ini yang berjudul “Karakterisasi dan Isolasi Senyawa Triterpenoid/Steroid Dari Daun Nipah (Nypa fruticansWurmb.)”.Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Penulis mengucapkan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt. Selaku Pejabat Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan bantuan dan fasilitas selama masa pendidikan. BapakProf. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt., dan Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan, dan nasehat selama penelitian dan penulisan skripsi ini berlangsung. Bapak Prof. Dr. rer nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt., dan ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang memberikan masukan, kritikan, arahan, dan saran dalam penyusunan skripsi ini. Ibu Almh.
Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt. selaku Kepala Laboratorium Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan fasilitas,
petunjuk dan membantu selama penelitian. Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., selaku pembimbing akademis, serta Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah membimbing penulis selama masa pendidikan.
v
Penulis mengucapkan terimakasih yang tak terhingga dan penghargaan yang tulus kepada ayahanda Imran Lubis, ibunda Rofiah, adik Husnul Amir Lubis, Muhammad Alfi Syahrin Lubis dan Luthfi Azmi Lubis, teman-teman saya di Fakultas Farmasi USU. Terima kasih atas doa, dorongan dan pengorbanan baik moril maupun materil dalam penyelesaian skripsi ini.
Penulis menyadari skripsi ini masih belum sempurna, oleh karena itu diharapkan kritik dan saran yang membangun untuk penyempurnaannya. Harapan saya semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan kefarmasian.
.
Medan, Desember 2015 Penulis,
Muhammad Fauzan Lubis NIM 131524052
KARAKTERISASI DAN ISOLASI SENYAWA TRITERPENOID/STEROID DARI DAUN NIPAH
(Nypa fruticans Wurmb.) ABSTRAK
Nipah (Nypa fruticans Wurmb.) merupakan tumbuhan palem yang banyak dijumpai di Indonesia dan memiliki peranan penting di kawasan hutan mangrove, secara tradisional digunakan sebagai obat sakit perut, diabetes, obat penurun panas, dan obat sakit gigi.Salah satu kandungan kimia dari daun tumbuhan ini adalah triterpenoid/steroid yang bermanfaat untuk pengobatan seperti antidiabetes, analgetik, antipiretik, dan antiinflamasi.Tujuan penelitian ini adalah melakukan isolasi dan karakterisasi senyawa triterpenoid/steroiddari daun nipah dengan spektrofotometer ultraviolet (UV) dan inframerah (IR).
Serbuk simplisia dikarakterisasi dan skrining fitokimia kemudian diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan pelarut n-heksana. Maseratyang diperoleh dipekatkan dengan rotary evaporator(± 40°C), selanjutnya dianalisis secara kromatografi lapis tipis (KLT) dengan fase gerak n-heksana-etilasetat dengan beberapa perbandingan, sebagai penampak bercak Liebermann-Burchard. Ekstrak n-heksana dipisahkan dengan KLT preparatif menggunakan fase gerak n-heksana-etilasetat (70:30) selanjutnya dilakukan uji kemurnian secara KLT satu arah dan KLT dua arah. Isolat yang diperoleh dikarakterisasi menggunakan spektrofotometer UV dan IR.
Hasil karakterisasi serbuk simplisia diperoleh kadar air 4,98%, kadar sari yang larut dalam air 22,32%, kadar sari yang larutdalam etanol 18,02%, kadar abu total 7,96%, dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 1,99%. Hasil skrining fitokimia dari simplisia diperoleh senyawa flavonoid, triterpenoid/steroid, glikosida, glikosida antrakuinon, tanin dan saponin. Hasil pemisahan dengan KLT diperoleh dua senyawa triterpenoid/steroid yaitu isolat I (Rf 0,73) berwarna merah ungu dan isolat II (Rf 0,56) berwarna ungu dengan pereaksi Liebermann-Burchard. Hasil analisis dengan spektrofotometri UV terhadap isolat I dan isolat II
memberikan absorbansi maksimum pada panjang gelombang (λ) yang sama yaitu,
201.80 nmyang menunjukkan adanya gugus kromofor dan hasil spektrofotometri IR diketahui adanya gugus O-H, C-H alifatis, CH2, C=C, C-O untuk isolat I dan
O-H, C-H alifatis, C=C, dan C-O untuk isolat II.
Kata kunci: daun nipah, triterpenoid/steroid, kromatografi lapis tipis, spektrofotometer UV dan IR.
vii
CHARACTERIZATION AND ISOLATION OF
TRITERPENOID/STEROID COMPOUND FROM NYPA PALM LEAVES (Nypa fruticans Wurmb.)
ABSTRACT
Nypa (Nypa fruticans Wurmb.) is one of the most widely distributed in Indonesia and useful palm in the mangrove forests. It is traditionally used as antidiarrhea drug, antidiabetic drug, antipyretic drug, and analgetic drug. One of the chemical constituents of these leaves is triterpenoid/steroid that can be useful for the treatment like antidiabetic, analgetic, antipyretic, and antiinflamation. This study aimed to isolate and to characterize the triterpenoid/steroid from nypa palm leaves by means of spectrophotometries ultraviolet (UV) and infrared (IR).
The simplicia powder was characterized and phytochemically screened then extracted by maceration with n-hexane. The maserate was concentrated in rotary evaporator (± 40°C), then analyzed by thin-layer chromatography (TLC) with mobile phase n-hexane-ethyl acetate at varied composition with Liebermann-Burchard reagent. The n-hexane extract was separated into its components by preparative TLC using n-hexane-ethyl acetate (70:30) as mobile phase and the purity was confirmed by one-dimensional and two-dimensional TLC. Isolate was identified by UV and IR spectrophotometries.
The simplicia characterization gave water content 4.98%, water soluble extract 22.32%, ethanol soluble extract 18.02%, total ash soluble value 7.96% and acid insoluble ash 1.99%. Phytochemical screening showed that the simplicia contains flavonoid, triterpenoid/steroid, glycoside, antraquinon glycoside, tannin and saponin. The isolation result by TLC got two componens triterpenoid/steroid that is isolate I(Rf 0.73) a red purple colour and isolate II (Rf 0.56) a purple with Liebermann-Burchard reagent. The resulting isolate I and II was then analyzed by UV spectrophotometry that exhibited maximum absorption at same wavelength 201.80 nmto indicate the presence of chromophore and the result of IR spectrophotometry indicated the presence of O-H, C-H alifatis, CH2, C=C, and
C-O functional groups for isolate I and O-H, C-H alifatis, C=C, and C-O for isolate II.
Keywords: nypa palm leaves, triterpenoid/steroid, thin layer chromatography, UV and IR spectrophotometer.
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... vii
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xiii
DAFTAR GAMBAR ... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ... xv BAB I PENDAHULUAN ... 1 1.1 Latar Belakang ... 1 1.2 Rumusan Masalah ... 3 1.3 Hipotesis ... 3 1.4 Tujuan Penelitian ... 3 1.5 Manfaat Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5
2.1 Uraian Tumbuhan ... 5
2.1.1 Morfologi tumbuhan ... 5
2.1.2 Habitat tumbuhan ... 5
ix 2.1.5 Nama daerah ... 6 2.1.6 Kandungan kimia ... 7 2.1.7 Kegunaan tumbuhan ... 7 2.2 Uraian Kimia ... 8 2.2.1 Triterpenoid/steroid ... 8 2.2.2 Alkaloid ... 11 2.2.3 Glikosida ... 11 2.2.4 Flavonoid ... 12 2.2.5 Saponin... 12 2.2.6 Tanin ... 12 2.3 Ekstraksi ... 13 2.3.1 Metode ekstraksi ... 13 2.4 Kromatografi ... 15
2.4.1 Kromatografi lapis tipis ... 16
2.4.2 Kromatografi lapis tipis preparatif ... 18
2.4.3 Kromatografi lapis tipisdua arah ... 19
2.5 Spektrofotometri Ultraviolet ... 20
2.6 Spektrofotometri Infrared ... 20
BAB III METODE PENELITIAN ... 22
3.1 Alat dan Bahan ... 22
3.1.1Alat ... 22
3.1.2 Bahan ... 22
3.2 Pembuatan Larutan Pereaksi ... 23
3.2.1 Pereaksi Liebermann-Burchard ... 23
3.2.2 Pereaksi asam sulfat 2 N ... 23
3.2.3 PereaksiMolisch ... 23
3.2.4 PereaksiMeyer ... 23
3.2.5 Pereaksi besi (III) klorida 1% ... 23
3.2.6 Pereaksi Dragendorff ... 24
3.2.7 Pereaksi Bouchardat ... 24
3.2.8 Pereaksi natrium hidroksida 2 N ... 24
3.2.9 Pereaksi asam nitrat 0,5 N ... 24
3.2.10 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M ... 24
3.3 Pengambilan dan Pengolahan Sampel ... 24
3.3.1 Pengambilan sampel ... 24
3.3.2 Identifikasi tumbuhan ... 25
3.3.3 Pembuatan simplisia ... 25
3.4 Karakterisasi Simplisia ... 25
3.4.1 Penetapan kadar air ... 25
3.4.2 Penetapan kadar abu total ... 26
3.4.3 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam ... 26
3.4.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam air ... 27
3.4.6 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol ... 27
3.5 Skrining Fitokimia ... 27
3.5.1 Pemeriksaan triterpenoid/steroid ... 27
xi
3.5.4 Pemeriksaan glikosida antrakinon ... 29
3.5.5 Pemeriksaan flavonoid ... 29
3.5.6 Pemeriksaan saponin ... 29
3.5.7 Pemeriksaan tanin ... 29
3.6 Pembuatan Ekstrak ... 30
3.7Analisis Ekstrak n-Heksana Secara KLT ... 30
3.8 Isolasi Senyawa Triterpenoid/steroid Secara KLT Preparatif .... 31
3.9 Uji Kemurnian Isolat ... 32
3.9.1 Uji kemurnian isolat dengan KLT satu arah ... 32
3.9.1 Uji kemurnian isolat dengan KLT dua arah ... 32
3.10 Karakterisasi Isolat ... 33
3.10.1 Karakterisasi isolat dengan spektrofotometri UV ... 33
3.10.2 Karakterisasi isolat dengan spektrofotometri IR ... 33
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 35
4.1Identifikasi Sempel ... 35
4.2 Karakterisasi Simplisia ... 35
4.3 Skrining Fitokimia ... 36
4.4Ekstraksi Serbuk Simplisia ... 37
4.5 Analisis Ekstrakn-HeksanaSecara KLT ... 37
4.6 KLT Preparatif ... 39
4.7 Uji Kemurnian Isolat ... 39
4.7.1 Isolat I ... 39
4.7.2 Isolat II ... 40
4.8 Karakterisasi Isolat Dengan UV dan IR ... 41
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 43
5.1 Kesimpulan ... 43
5.2 Saran ... 43
DAFTAR PUSTAKA ... 44
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Hasil pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia daun nipah ... .... 35
4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia daun nipah ... 36
4.3 Harga Rf hasil analisis KLT ekstrak n-heksanadaun nipah ... 38
4.4 Harga Rfuji kemurnian isolat I ... 39
4.5 Harga Rf uji kemurnian isolat II .. ... 40
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Struktur kimia isopren ... 8
2.2 Strukturdasar triterpen ... 9
2.3 Skualen ... 9
2.4 Ambrein ... 9
2.5 Lanosterol ... 10
2.6 α- Amirin ... 10
2.7 Struktur dasar steroid dan sistem penomorannya …………... 10
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Hasil identifikasi tumbuhan nipah (Nypa fruticans Wurmb.) ... 47
2 Gambar tumbuhan nipah ... 48
3 Gambar helaian, serbuk simplisia dan mikroskopik daun nipah ... 49
4 Bagan kerja penelitian... 52
5 Perhitungan karakterisasi serbuk simplisia daun nipah ... 55
6 Gambar kromatogram ekstrak n-heksanadaun nipah ... 60
7 Gambar kromatogram ekstrak daun nipah dengan KLT preparatif ... 61
8 Gambar kromatogram KLT satu arah dari isolat I ... 62
9 Gambar kromatogram KLT satu arah dari isolat II ... 63
10 Gambar kromatogram KLT dua arah dari isolat I ... 64
11 Gambar kromatogram KLT satu arah dari isolat II ... 65
12 Gambar spektrum ultraviolet isolat I ... 66
13 Gambar spektrum inframerah isolat I ... 67
14 Gambar spektrum ultraviolet isolat II ... 68
15 Gambar spektrum inframerah isolat II ... 69
