44
7.
LAMPIRAN
LAMPIRAN 1. Penentuan Waktu Fermentasi Kubis Putih
Waktu fermentasi ditentukan berdasarkan pengukuran pH acar kubis putih hingga mencapai pH stabil. Data perubahan pH acar kubis putih yang difermentasi dalam larutan garam 5% dan 7,5% pada suhu 30ºC dapat dilihat dalam Tabel 4.
Tabel 5. Perbedaan Karakteristik Genus Bakteri Asam Laktat
Genus Bentuk
Pertumbuhan di Suhu
Pertumbuhan di NaCl
Pertumbuhan
di pH Produksi Gas 10ºC 45ºC 6,5% 18% 4,4 9,6
Lactobacillus 1 Batang + / - + / - + / - - + / - - + / - Carnobacterium 1 Batang + - ND - ND - -
Pediococcus 1 Bulat,
tetrad + / - + / - + / - - + - - Aerococcus 1 Bulat,
tetrad + - + - - + -
Tetragenococcus 1 Bulat,
tetrad + - + + - + -
Leuconostoc 1 Bulat + - + / - - + / - - + Streptococcus 1 Bulat - + / - - - - Enterococcus 1 Bulat + + + - + + - Lactococcus 1 Bulat + - - - + / - - - Vagococcus 1 Bulat + - - - + / - - - Weissella 2 Bulat + - + / - - + / - - + Keterangan:
+ = positif
- = negatif
+ / - = respon berbeda antar spesies
ND = tidak diuji
LAMPIRAN 3. Data Uji Kemampuan Tumbuh Isolat BAL pada Berbagai Suhu, Kadar NaCl dan pH
Tabel 6. Hasil Pengukuran OD Isolat BAL yang ditumbuhkan pada Berbagai Suhu, Kadar NaCl dan pH
Kode Isolat Ul
Suhu 10ºC Suhu 45ºC NaCl 6,5% NaCl 18% pH 4,4 pH 9,6
Lanjutan Tabel 6.
Kode Isolat Ul
Suhu 10ºC Suhu 45ºC NaCl 6,5% NaCl 18% pH 4,4 pH 9,6
Lanjutan Tabel 6.
Kode Isolat Ul
Suhu 10ºC Suhu 45ºC NaCl 6,5% NaCl 18% pH 4,4 pH 9,6
Lanjutan Tabel 6.
Kode Isolat Ul
Suhu 10ºC Suhu 45ºC NaCl 6,5% NaCl 18% pH 4,4 pH 9,6
Media deMan Rogosa and Sharpe Agar (MRSA) “Merck”
Dibuat dengan cara melarutkan sebanyak 68,2 g bubuk MRSA ke dalam satu liter aquades dan dipanaskan hingga mendidih sambil di-stirrer, kemudian media disterilisasi pada suhu 121ºC selama 15 menit. Satu liter MRSA mengandung 20 g D(+)-glukosa, 14 g agar-agar, 10 g polipepton, 10 g meat extract, 5 g sodium asetat, 4 g ekstrak yeast, 2 g dipotasium hidrogen fosfat, 2 g diamonium hidrogen sitrat, 1 g Tween*80, 0,2 g magnesium sulfat hepatidrat dan 0,04 g mangan sulfat monohidrat.
Media deMan Rogosa and Sharpe Broth (MRSB) “Merck”
Media ini dibuat dengan cara sebanyak 52,2 g bubuk MRSB dilarutkan dalam satu liter aquades dan disterilisasi pada suhu 121ºC selama 15 menit. Komposisi satu liter MRSB terdiri atas 20 g D(+)-glukosa, 10 g polipepton, 8 g meat extract, 5 g sodium asetat, 4 g ekstrak yeast, 2 g diamonium hidrogen sitrat, 2 g dipotasium hidrogen fosfat, 1 g Tween*80, 0,2 g magnesium sulfat hepatidrat dan 0,04 g mangan sulfat monohidrat.
Media Nutrient Agar (NA) “Merck”
Dibuat dengan cara melarutkan sebanyak 20 g bubuk NA ke dalam satu liter aquades
dan dipanaskan hingga mendidih sambil di-stirrer, kemudian media disterilisasi pada suhu 121ºC selama 15 menit. Satu liter NA mengandung 12 g agar-agar, 5 g polipepton dan 3 g meat extract.
Media Nutrient Broth (NB) “Merck”
LAMPIRAN 5. Pembuatan Larutan Standar McFarland
Larutan standar McFarland dibuat dengan mencampur larutan BaCl2 1% dan H2SO4 1%
dalam perbandingan tertentu sesuai dengan skala larutan yang akan dibuat. Kekeruhan larutan McFarland setara dengan kepadatan sel bakteri dalam jumlah tertentu. Dalam penelitian ini digunakan larutan standar McFarland No. 3 dan 5 untuk tahap pengujian aktivitas antimikroba.
Tabel 7. Standar Kekeruhan Larutan McFarland
Skala McFarland
Perbandingan CFU (×108/ml) BaCl2 1% H2SO4 1%
0,5 0,05 ml 9,95 ml < 3
1 0,1 ml 9,9 ml 3
2 0,2 ml 9,8 ml 6
3 0,3 ml 9,7 ml 9
4 0,4 ml 9,6 ml 12
5 0,5 ml 9,5 ml 15
6 0,6 ml 9,4 ml 18
7 0,7 ml 9,3 ml 21
8 0,8 ml 9,2 ml 24
9 0,9 ml 9,1 ml 27
10 1 ml 9 ml 30
