i
UJI KETAHANAN BAKTERI ASAM LAKTAT (BAL) ISOLAT 18A (Lactococcus lactis ssp lactis 1) YANG DIISOLASI DARI KOLON SAPI
BALI TERHADAP pH RENDAH DAN NATRIUM DEOKSIKOLAT (NaDC)
SKRIPSI
Diajukan untuk Melengkapi Tugas-Tugas dan Memenuhi Persyaratan untuk Mencapai Gelar Sarjana Kedokteran Hewan
Oleh Sri Wahyuni NIM. 1109005101
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR 2015
ii
UJI KETAHANAN BAKTERI ASAM LAKTAT (BAL) ISOLAT 18A (Lactococcus Lactis ssp lactis 1) YANG DIISOLASI DARI KOLON SAPI
BALI TERHADAP pH RENDAH DAN NATRIUM DEOKSIKOLAT (NaDC)
SKRIPSI
Diajukan untuk Melengkapi Tugas-Tugas dan Memenuhi Persyaratan untuk Mencapai Gelar Sarjana Kedokteran Hewan
Oleh Sri Wahyuni NIM. 1109005101
Menyetujui / Mengesahkan :
Pembimbing I Pembimbing II
Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si. Drs. Yan Ramona, M.App.Sc., Ph.D NIP. 19700122 199512 1 001 NIP. 19641022 199003 1 002
DEKAN FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN UNIVERSITAS UDAYANA
Dr. drh. I Nyoman Adi Suratma, MP. NIP. 19600305 198703 1 001
iii
Setelah mempelajari dan menguji dengan sungguh-sungguh kami berpendapat bahwa tulisan ini baik ruang lingkup maupun kualitasnya dapat diajukan sebagai skripsi untuk memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran Hewan.
Ditetapkan di………. Tanggal……….
Panitia Penguji :
Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si. Ketua
Drs. Yan Ramona, M.App.Sc., Ph.D Prof. Dr. drh. I Nyoman Suarsana, M.Si Sekretaris Anggota
Dr. drh. Ida Bagus Ngurah Swacita, M.P Anggota
iv
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Sidrap, Kabupaten Sidenreng Rappang Sulawesi Selatan pada tanggal 28 Juni 1993. Penulis merupakan anak kedua dari dua bersaudara pasangan Bapak Ruslan, SP, M.Si dan Ibu Wahidah.
Penulis memulai pendidikan di Taman Kanak-Kanak Pertiwi Tanete dan lulus pada tahun 1999, dilanjutkan Sekolah Dasar SD 175 Bulo-Bulo dan lulus pada tahun 2005, kemudian melanjutkan Sekolah Menengah Pertama di SMP Negeri 1 Bulukumpa dan lulus pada tahun 2008, dan melanjutkan pendidikan Sekolah Menengah Atas di SMA Negeri 2 Bulukumba dan lulus pada tahun 2011. Pada Juli 2011, Penulis resmi terdaftar sebagai mahasiswa Kedokteran Hewan Universitas Udayana Denpasar, Bali melalui jalur Penelusuran Minat dan Kemampuan (PMDK).
Selama berada di Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana, penulis aktif menjadi Pengurus Minat dan Profesi (Minpro) “SATLI” pada periode kepengurusan 2012-2014 dan aktif menjadi Pengurus Suara Satwa Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana tahun 2012-2014.
Dalam rangka menyelesaikan tugas akhir dan untuk memenuhi salah satu persyaratan untuk mencapai gelar Sarjana Kedokteran Hewan (S.KH) penulis melakukan penelitian dengan judul “Uji Ketahanan Bakteri Asam Laktat (BAL) Isolat 18A (Lactococcus lactis ssp lactis 1) yang Diisolasi dari Kolon Sapi Bali Terhadap pH Rendah dan Natrium Deoksikolat (NaDC)”.
v ABSTRAK
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui potensi bakteri asam laktat isolat BAL 18A yang diisolasi dari kolon sapi Bali sebagai kandidat probiotik. Penelitian diawali dengan tahapan konfirmasi isolat 18A melalui bebrapa uji, seperti uji penumbuhan pada MRS broth, uji katalase, dan pewarnaan Gram. Potensinya sebagai probiotik diuji dengan melakukan pengujian terhadap pH rendah (pH 2, 3 dan 4) dan Natrium Deoksikolat (NaDC) dengan konsentrasi 0,2 mM, 0,4 mM dan 0,6 mM. Hasil penelitian menunjukkan bahwa isolat BAL 18A mampu tumbuh dengan baik pada medium MRS broth dalam suasana anaerob, katalase negatif dan Gram positif, dan hasil ini mengindikasikan bahwa isolat 18A ini adalah isolat BAL. Dalam uji ketahanan terhadap pH rendah dan NaDC, isolat ini mampu bertahan hidup pada medium pH 2 dan NaDC pada konsentrasi sampai 0,6 mM. Hasil ini menunjukkan bahwa isolat BAL 18A berpotensi dikembangkan sebagai kandidat probiotik dimasa mendatang, meskipun masih diperlukan uji-uji lanjutan.
Kata kunci : Bakteri asam laktat, pH rendah, asam empedu, isolat BAL 18A, kolon sapi Bali.
vi ABSTRACT
The main aim of this study was to determine the potency of lactic acid bacteria (LAB) isolate 18A, isolated from the colon of Bali cattle as a probiotic candidate. The study was started with confirmation tests of the isolate, including test for growth response in MRS broth medium, test on catalase production, and Gram stain. Its potency for probiotic development was tested by growing this isolate in MRS broth medium with low pH conditions (pH 2, 3 and 4) and in MRS medium supplemented with various concentration of Sodium Deoksikolat or NaDC (0.2 mM, 0.4 mM and 0.6 mM). The results showed that isolates 18A was able to grow well in MRS broth medium under anaerobic condition. In addition, it also showed catalase negative dan Gram positive properties, indicating that this isolate was confirmed as an LAB isolate. In the main experiment, this isolate was found to be resistant to low pH conditions (up to pH 2) and to high concentration of NaDC (up to 0.6 mM), indicating that this isolate has potential to be developed as a probiotic candidate, although further tests need to be conducted.
Keywords: lactic acid bacteria, low pH, bile acids, LAB isolates 18A, Bali cattle colon.
vii
UCAPAN TERIMA KASIH
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, Tuhan Yang Maha Esa, berkat rahmat dan karunia-Nya penelitian dan penulisan skripsi yang berjudul “Uji Ketahanan Bakteri Asam Laktat (BAL) Isolat 18A (Lactococcus lactis ssp lactis 1) yang Diisolasi dari Kolon Sapi Bali Terhadap pH Rendah dan Natrium Deoksikolat (NaDC)” dapat terselesaikan. Skripsi ini ditulis sebagai salah satu persyaratan untuk mencapai gelar Sarjana Kedokteran Hewan pada Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih dan penghargaan yang setinggi-tingginya kepada :
1. Bapak Dr. drh. I Nyoman Adi Suratma, M.P, selaku Dekan Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana.
2. Bapak Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si selaku pembimbing pertama yang dengan penuh kebesaran hati telah meluangkan waktu untuk membimbing penulis dalam pelaksanaan penelitian dan penulisan skripsi sehingga skripsi ini dapat terselesaikan, serta dengan telah diikutkannya dalam proyek penelitian Hibah Bersaing Desentralisasi BOPTN TA. 2014.
3. Bapak Drs. Yan Ramona, M.App.Sc., Ph.D selaku pembimbing kedua yang dengan penuh kebesaran hati telah meluangkan waktu dan pikiran untuk membimbing penulis dalam penulisan skripsi sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik.
4. Para dosen penguji Bapak Prof. Dr. drh. I Nyoman Suarsana, M.Si, Bapak Dr. drh. Ida Bagus Ngurah Swacita, M.P, dan Drh. I Made Sukada, M.Si atas kesediaannya menjadi penguji skripsi dan telah memberikan saran dan kritik yang sangat baik dan membangun dalam rangka perbaikan skripsi ini.
5. Bapak Drh. Anak Agung Gde Jayawardhita, M.Kes. selaku pembimbing akademik yang telah membimbing penulis selama mengikuti perkuliahan di Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana.
viii
6. Bapak dan Ibu dosen, staf pimpinan dan pegawai Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana atas segala bimbingan dan bantuannya selama mengikuti masa perkuliahan sehingga penulis dapat meraih gelar sarjana kedokteran hewan.
7. Ibu Ni Wayan Nursini, S.Tp, M.P staf Laboratorium Biosains dan Bioteknologi Bukit Jimbaran yang telah membantu dalam penelitian saya. 8. Kedua orang tua tercinta, Ibunda Wahidah dan Ayahanda Ruslan, SP, M.Si,
yang tak henti-hentinya memanjatkan doa dan senantiasa memberikan nasehat dan dukungan moril maupun materi serta kakak tercinta, Muh. Safri Ruslan, SP. yang selalu menjadi penyemangat dan inspirasiku untuk maju. 9. Risha Catra Pradhany sebagai saudari terdekat yang selalu memberikan
penulis semangat dan motivasi untuk menyelesaikan skripsi ini.
10. drh. Elyda, Andi Isma Lestari, Rudy Haryono dan drh. Rasdiyanah serta anggota keluarga besar IKAMI (Ikatan Mahasiswa/Pelajar Indonesia) Sulsel Cab. Bali yang telah menjadi keluarga baru selama penulis tinggal di Bali. 11. Ferbian Milas Siswanto, Bang Suryansyah, Pipi, Widia, Findri, Chela, Rayni,
Tri Adi, Aida, Mbak Amel, Wardah, Kak Rian, Kak Adryn, drh. Ratih yang telah memberikan penulis semangat untuk lebih berkonsentrasi menyelesaikan skripsi ini.
12. Temen-temen satu tim penelitian Dewa Wid, Annisa, Yana, Hendro, Rizky, Mita yang memberikan semangat dan motivasi serta teman-teman seperjuangan angkatan 2011 khususnya kelas B, yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu.
13. Veby, Gusty, Ina, Ningsi, Vira, Iggink, Febby, Kiki, Puji, Ika, Afy, Dado yang selalu memberikan semangat dan motivasi.
Penulis menyadari skripsi ini masih jauh dari sempurna dan untuk itu segala kritik dan saran penulis harapkan demi sempurnanya skripsi ini. Sebagai akhir kata penulis berharap skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua.
Denpasar, 12 Maret 2015
ix DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL ... i HALAMAN PENGESAHAN ... ii RIWAYAT HIDUP ... iv ABSTRAK ... v ABSTRACT ... vi
UCAPAN TERIMA KASIH ... vii
DAFTAR ISI ... ix
DAFTAR TABEL ... xi
DAFTAR GAMBAR ... xii
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Rumusan Masalah ... 3
1.3 Tujuan Penelitian ... 3
1.4 Manfaat Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5
2.1 Sapi Bali ... 5
2.2 Bakteri Asam Laktat ... 6
2.2.1 Karakteristik bakteri asam laktat ... 9
2.2.2 Bakteri asam laktat dalam saluran pencernaan... 10
2.2.3 Faktor yang mempengaruhi bakteri asam laktat ... 12
2.2.4 Ketahanan hidup BAL pada media dengan pH rendah... 12
2.2.5 Kemampuan tumbuh BAL pada media yang mengandung garam empedu ... 13
2.3 Efek Fungsional BAL ... 13
2.3.1 Probiotik ... 14
2.4 Kerangka Konsep ... 16
BAB III MATERI DAN METODE ... 17
3.1 Materi Penelitian ... 17
3.1.1 Bahan penelitian ... 17
3.1.2 Alat penelitian ... 17
3.2 Variabel Penelitian ... 17
3.3 Prosedur Penelitian ... 18
3.3.1 Rekultur pada media MRS broth ... 18
3.3.2 Uji katalase ... 18
3.3.3 Uji pewarnaan Gram ... 18
3.3.4 Uji ketahanan terhadap pH rendah ... 19
3.3.5 Uji ketahanan terhadap NaDC ... 19
x
3.5 Lokasi dan Waktu Penelitian ... 20
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 21
4.1 Hasil Uji Konfirmasi Isolat BAL 18A ... 21
4.1.1 Uji ketahanan terhadap pH rendah ... 22
4.1.2 Uji ketahanan terhadap NaDC ... 24
BAB V PENUTUP ... 27
5.1 Simpulan ... 27
5.2 Saran... 27
xi
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
1. Komposisi Mikroflora dalam Saluran Pencernaan ... 11 2. Ketahanan Isolat BAL 18A terhadap pH rendah ... 23 3. Ketahanan Isolat BAL 18A terhadap Natrium Deoksikolat (NaDC) ... 25
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1. Jalur Embden–Meyerhof–Parnas pada BAL Homofermentatif dan Heterofermentatif ... 9 2. Kerangka Konsep Penelitian ... 16 3. Hasil Pewarnaan Gram Isolat BAL 18A ... 22
