Pengaruh Ekstrak Etanol Pegagan (Centella asiatica L.urban) terhadap Kerusakan Tubulus Seminiferus Testis Tikus (Rattus norvegicus) yang Diinduksi Stres Imobilisasi Kronik.

(1)

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

PENGARUH EKSTRAK ETANOL PEGAGAN (Centella asiatica L. urban) TERHADAP KERUSAKAN TUBULUS SEMINIFERUS TESTIS TIKUS

(Rattus norvegicus) YANG DIINDUKSI STRES IMOBILISASI KRONIK

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran

SATRIA ADI PUTRA G.0010172

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET

(2)

commit to user

PENGESAHAN SKRIPSI

Skripsidengan judul: Pengaruh Ekstrak Etanol Pegagan (Centella asiatica L.

Urban) terhadap Kerusakan Tubulus Seminiferus Testis Tikus (Rattus norvegicus) yang Diinduksi Stres Imobilisasi Kronik

Satria Adi Putra, NIM: G.0010172, Tahun: 2013

Telah diuji dan sudah disahkan di hadapan Dewan Penguji Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret

Pada Hari Kamis, Tanggal 19 Desember 2013

Pembimbing Utama

Nama : Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc

NIP : 19810208 200604 2 003

(...)

Pembimbing Pendamping

Nama : Brian Wasita, dr., Ph.D

NIP : 19790722 200501 1 003

(...)

Penguji Utama

Nama : Endang Sri Hardjanti, dr., PFarK, Mor

NIP : 19471007 197611 2 001

(...)

Penguji Pendamping

Nama : Nanang Wiyono, dr., M.Kes

NIP : 19760530 200212 1 002

(...)

Surakarta, ………...

Ketua Tim Skripsi Dekan FK UNS

Ari Natalia Probandari, dr., MPH., Ph.D Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., SpPD-KR-FINASIM

(3)

commit to user

ii

PERNYATAAN

Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang

pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan

sepanjang pengetahuan saya tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis

atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah

dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta, 19 Desember 2013

(4)

commit to user iv

ABSTRAK

Satria Adi Putra, G0010046, 2013, Pengaruh Ekstrak Etanol Pegagan (Centella asiatica L.urban) terhadap Kerusakan Tubulus Seminiferus Testis Tikus (Rattus norvegicus) yang Diinduksi Stres Imobilisasi Kronik.

Latar Belakang: Stres telah menjadi bagian masyarakat modern yang tidak dapat dihindari dan semakin meningkat. Padahal stres memiliki dampak negatif terhadap kesehatan reproduksi. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui efek protektif ekstrak Etanol Pegagan (Centella asiatica) terhadap tubulus seminiferus tetstis tikus yang diinduksi stres imobilisasi kronik.

Metode: Penelitian ini menggunakan subjek penelitian berupa sediaan organ testis

Rattus norvegicus galur Sprague Dawley yang telah mendapat ekstrak Etanol Pegagan dan stres imobilisasi selama 21 hari kemudian dibuat preparat blok parafin dengan pengecatan HE. Penelitian menggunakan rancangan simple random sampling dengan 6 kelompok yaitu: K (kelompok tanpa perlakuan), KP1 (kelompok yang mendapat induksi stres), KP2 (induksi stres dan ekstrak Pegagan 150 mg/kg, KP3 (induksi stres dan ekstrak 300 mg/kg), KP4 (induksi stres dan ekstrak 600 mg/kg), KP5 (induksi stres dan fluoksetin 10 mg/kg). Pengamatan pada 5 lapang pandang setiap sampel untuk mengetahui persentase kerusakan tubulus. Parameter yang digunakan meliputi kerusakan morfologi tubulus seminiferus, dislokasi sel germinal testis, dan pelebaran jarak antartubulus. Analisis data menggunakan uji statistika One Way Anova.

Hasil: Ekstrak Pegagan secara signifikan (p = 0.000) mengurangi kerusakan tubulus seminiferus pada tikus yang diinduksi stres imobilisasi kronik. Pemberian induksi stres secara nyata menunjukkan kerusakan tubulus (p = 0.000). Persentase kerusakan tubulus seminiferus pada kelompok K: 13.63%, KP1: 50.89%, KP2: 28.58%, KP3: 33.04% KP4: 14.27%, dan KP5: 13.9%. Setelah pemberian Pegagan menunjukkan perbedaan yang signifikan antara KP1 dan KP2, KP3, KP4 (p =

0.000). Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara KP4 dan fluoksetin sebagai positif kontrol ( p = 0.796).

Simpulan: Ekstrak Etanol Pegagan (Centella asiatica L.urban) mampu mencegah kerusakan tubulus seminiferus tikus (Rattus norvegicus) yang diinduksi stres imobilisasi kronik.

(5)

commit to user v

ABSTRACT

Satria Adi Putra, G0010172, 2013, Effect of Ethanol Extract Pegagan (Centella asiatica L.urban) on Seminiferous Tubules Testis Damage of Rat (Rattus norvegicus) Induced by Chronic Immobilization Stress.

Background: Stress as a part of modern society could not be avoided. This increasing number of stress would give bad impact on reproductive health. The aim of this study was designed to determine the protective effect pegagan on seminiferous tubules damage of rats induced by chronic immobilization stress.

Methods: This study used Rattus norvegicus Sprague Dawley strain testis organ that had received the ethanol extract of Pegagan and immobilization stress for 21 days. The rats were randomly into 6 experimental groups: K (untreated group), KP1 (received stress induction), KP2 (stress induction and Pegagan extract 150 mg/kg), KP3 (stress induction and extract 300 mg/kg), KP4 (stress induction and extract 600 mg/kg), KP5 (stress induction and fluoxetine 10 mg/kg). The subjects were made Paraffin Block with HE staining. Tissue samples were obtained for tubular histopathological investigation on 5 fields of view each sample. Tubular damage were determined using germ cell dislocation, morphological changes, and enlarged intercellular spaces of tubules. The datas were analysed statistically using One Way Anovatest.

Results: Extract Pegagan significantly (p = 0.000) reduced tubulus seminiferous damage of rats induced by immobilization stress. KP1 showed meaningful damage after stress induction (p = 0.000). Respectively, the percentage damage of seminiferous tubules were K: 13.63%, KP1: 50.89%, KP2: 28.58%, KP3: 33.04%, KP4: 14.27%, and KP5: 13.9%. Co-administration of Pegagan to stress induction rats showed a significant difference between KP1 and KP2, KP3, KP4 (p = 0.000). No significant difference between KP4 and fluoxetin as positive control (p = 0.796).

Conclusion: The ethanol extract of Pegagan (Centella asiatica L.urban) is capable of preventing seminiferous tubules damage of rats (Rattus norvegicus) induced by chronic immobilization stress.

(6)

commit to user

vi

PRAKATA

Puji syukur penulis haturkan ke hadirat Allah SWT karena atas karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul ”Pengaruh Ekstrak Etanol Pegagan (Centella asiatica L.urban) terhadap Hitung Sperma Tikus (Rattus norvegicus) yang Diinduksi Stres Imobilisasi Kronik”. Penelitian dan penulisan skripsi ini dapat terlaksana dengan baik berkat bantuan, bimbingan, dan petunjuk dari berbagai pihak. Untuk itu, penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada: 1. Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., Sp.PD-KR-FINASIM selaku Dekan

Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret, Surakarta.

2. Ari Natalia Probandari, dr.,MPH,PhD selaku Ketua Tim Skripsi FK UNS. 3. Ratih Puspita Febrinasari, dr., MSc selaku Pembimbing Utama yang telah

menyediakan waktu di tengah kesibukannya untuk membimbing hingga terselesaikannya skripsi ini.

4. Brian Wasita, dr., P.hD selaku Pembimbing Pendamping yang telah menyediakan waktu di tengah kesibukannya untuk membimbing hingga terselesainya skripsi ini.

5. Endang Sri Hardjanti, dr., PFarK, Mor selaku Penguji Utama yang telah memberikan bimbingan, kritik dan saran demi kesempurnaan penulisan skripsi. 6. Nanang Wiyono, dr., M.Kes selaku Anggota Penguji yang telah memberikan

bimbingan, kririk dan saran demi kesempurnaan penulisan skripsi ini.

7. Seluruh Dosen dan Staf dari laboratorium Farmakologi dan Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret, Surakarta.

8. Bagian Skripsi FK UNS yang turut memberi kelancaran pembuatan skripsi ini. 9. Ayahanda Sumardi, Ibunda Sri Sulistyati, Mbak Eny Nugrohowati, Mas Agus,

Mas Anang Tri, Kakak Sri Setya, serta Adikku Dimas Subekti yang selalu mendewasakan dan memberikan teladan yang tiada henti, mendoakan, dan memberikan semangat dari jauh bagi penulis.

10.Sohib-sohib tercinta Sintin Khotijah yang selalu memberikan dukungan, Gunung Mahameru atas nasehat-nasehatnya, Nabiel, Faris, Hajar, Silvia, Dyna, Fajri, Erma yang setia menyemangati dan berjuang bahu membahu hingga terselesaikannya skripsi ini.

11.Teman diskusi Maleoasyikers yang selalu mendoakan dan membawakan hiburan hingga penelitian ini terselesaikan.

12.Rekan-rekan Kesuma Islam Kedokteran, Kastrat de Geneeskunde, Bulan Sabit Merah Indonesia, ikatan Beasiswa Aktivis Nusantara, ikatan mahasiswa berprestasi UNS atas keceriaan dan doa hingga penelitian ini terselesaikan. 13.Rekan-rekan dan pihak yang tidak dapat saya sebutkan satu-persatu yang turut

mendukung skripsi ini.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangan dan jauh dari kata sempurna. Penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun demi kebaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi dunia kedokteran umumnya dan pembaca khususnya.

(7)

commit to user vii DAFTAR ISI

Halaman

PRAKATA ... vi

DAFTAR ISI ... vii

DAFTAR TABEL ... ix

DAFTAR GAMBAR ... x

DAFTAR SINGKATAN ... xi

DAFTAR LAMPIRAN ... xii

BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang ... 1

B. Perumusan Masalah... 4

C. Tujuan Penelitian... 5

D. Manfaat Penelitian... 5

BAB II LANDASAN TEORI A. Tinjauan Pustaka ... 6

1. Pegagan (Centella asiatica) ... 6

2. Testis ... 10

3. Kerusakan Tubulus Seminiferus ... 12

4. Stres ... 14

5. Metode Blok Parafin ... 17

6. Fluoksetin ... 18

B. Kerangka Pemikiran ... 21

C. Hiposesis ... 22

BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian ... 23

B. Lokasi Penelitian ... 23

C. Subjek Penelitian ... 23

D. Teknik Sampling ... 23

E. Rancangan Penelitian ... 25

F. Identifikasi Variabel Penelitian ... 27

G. Definisi Operasional Variabel Penelitian ... 27

H. Alat dan Bahan Penelitian ... 28

I. Penentuan Dosis ... 29

J. Cara Kerja ... 30

K. Teknik Analisis ... 32

(8)

commit to user viii

B. Persentase Kerusakan Tubulus Seminiferus ... 39

BAB V PEMBAHASAN ... 43

BAB VI PENUTUP

A. SIMPULAN ... 53 B. SARAN ... 53

DAFTAR PUSTAKA ... 54

(9)

commit to user _ix DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 4.1._HasilMean_{dan Standar Deviasi ... 39}

(10)

commit to user _x

DAFTAR GAMBAR

halaman

Gambar 2.1._{Pegagan ...} ₆

Gambar 2. 2._{Gambaran Histologis Tubulus Seminiferus ...} ₁₂

Gambar 2.3. _{Gambaran Morfologis Tubulus Seminiferus Berbagai Kondisi 14} Gambar 2.4. _{Kerangka Pemikiran ... 21}

Gambar 3.1. _{Skema Rancangan Penelitian ...} ₂₆

Gambar 4.1._{Kelompok Kontrol Normal (K) ...} ₃₄

Gambar 4.2._{Kelompok Kontrol Negatif (KP1) ...} ₃₅

Gambar 4.3. _{Kelompok Perlakuan 2 (KP2) ...} ₃₆

Gambar 4.4. _{Kelompok Perlakuan 3 (KP3) ...} ₃₆

Gambar 4.5._{Kelompok Perlakuan 4 (KP4) ...} ₃₇

Gambar 4.6._{Kelompok Kontrol Positif (KP5) ...} ₃₈

(11)

commit to user

xi

DAFTAR SINGKATAN

HSE Health & Safety Executive

HPA Hypotalamic-Pituitary-Adrenal

GnRH Gonadotropin Releasing

Hormone

LH Luteinizing Hormone

FSH Follicle Stimulating Hormone

mdpl meter diatas permukaan laut

SOD superoxide dismutase

NO Nitric Oxyde

LDL Low Density Lipoprotein

AMP Adenosin Mono Phosphat

CRF Corticotropin-Releasing Factor

AVP Arginine Vasopressin

mRNA messenger Ribonucleicacid

ACTH adrenocorticotropic hormone

TNF Tumor Necrosis Factor

SSRI Serotonin Selective Reuptake

Inhibitor

SERT Serotonin transporter

NET Norepinephrine transporter

MAO Monoamine oxidase

PCO Protein Carbonil Oxyde

HE Hematoxilin Eosin

UPHP Unit Pengembangan Hewan

Percobaan

K Kontrol

KP Kelompok Perlakuan

PGA Pulvis Gum Arabic

LPPT Lembaga Penelitian dan

Pengujian Terpadu

GRs Glukocorticoid Reseptors

LHRH Luteinizing Hormone

Releasing Hormone

5-HTTLPR 5-HTT gene–linked

promoter region

(12)

commit to user

xii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Foto Preparat Menggunakan Opticlab

Lampiran 2. Persentase Kerusakan Tubulus Seminiferus

Lampiran 3. Analisis Data Menggunakan SPSS 17.00 for Windows

Lampiran 4. Dokumentasi Penelitian

Lampiran 5. Surat Ijin Penelitian