i
AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL KULIT
BATANG SIRSAK (
Annona muricata
L.) TERHADAP SEL T47D
SERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
SKRIPSI
Oleh:
FIRSTCA AULIA RACHMA
K 100 080 014
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
AKTIV
BATAN
T47D
Diaj
Deraj
UN
VITAS SI
NG SIRSA
SERTA P
jukan unt
at Sarjana
Unive
F
NIVERSIT
ITOTOKS
AK (
Anno
PROFIL K
S
uk memen
a Farmasi
ersitas Mu
di
FIRSTCA
K 1
FAKUL
TAS MUHA
SUR
iiSIK EKST
ona Murica
KROMAT
SKRIPSI
nuhi salah
i (S.Farm)
hammadiy
Surakart
Oleh:AULIA R
100 080 01
LTAS FAR
AMMADI
RAKART
2012
TRAK ETA
ata
L.) TE
TOGRAFI
h satu syar
) pada Fak
yah Surak
a
RACHMA
14
RMASI
IYAH SU
TA
ANOL KU
ERHADAP
I LAPIS T
AKTIV
BATAN
T47D
F PembVITAS SI
NG SIRSA
SERTA P
Dipertaha akultas Far Uni D bimbing UtaPENGES
ITOTOKS
AK (
Anno
PROFIL K
FIRSTCA K
ankan di Ha rmasi Unive Pa Juma M Fak iversitas Mu Dr. Muham ama iii
SAHAN SK
Berjudul:SIK EKST
ona Murica
KROMAT
Oleh:A AULIA RA 100 080 014
adapan Pan ersitas Muh ada tanggal at, 25 Mei 2
Mengetahui, kultas Farm uhammadiy
Dekan,
mmad Da’i, M
P
Peni I
iii
KRIPSI
TRAK ETA
ata
L.) TE
TOGRAFI
ACHMA 4 nitia Penguj ammadiyah l: 2012 , asi yah Surakar M.Si., Apt. Pembimbing IndrayudhaANOL KU
ERHADAP
I LAPIS T
y T y d Deng yang pernah Tinggi, dan yang pernah diacu dalam
gan ini saya
h diajukan u
sepanjang p
h ditulis atau
m naskah ini d
DE
menyatakan untuk memp pengetahuan u diterbitkan dan disebutk ivEKLARAS
n bahwa dal
peroleh gela
n saya juga t
n oleh orang
kan dalam da
SI
am skripsi i
ar kesarjanaa
tidak terdapa
g lain, kecua
aftar pustaka
Surakar
(First
ni tidak terd
an di suatu
at karya atau
ali yang sec
a.
rta, 25 Mei 2
Peneliti
tca Aulia Ra
v
KATA PENGANTAR
Assalamualaikum wr. wb.
Alhamdulillah, puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan
kasih sayang-Nya sehingga penulis diberi kemampuan dan kesempatan untuk
menyusun dan menyelesaikan skripsi yang berjudul “Aktivitas Sitotoksik
Ekstrak Etanol Kulit Batang Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Sel T47D serta profil Kromatografi Lapis tipis”. Skripsi ini diajukan untuk memenuhi
salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas
Farmasi Universitas Muhammadyah Surakarta.
Dalam pelaksanaan penelitian sampai penyelesaian skripsi ini, tidak lepas
dari bantuan dan dukungan berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis ingin
menyampaikan ucapan terimakasih kepada:
1. Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta dan sekaligus penguji skripsi.
2. Rosita Melannisa, M.Si, Apt., selaku penguji skripsi.
3. Dr. Haryoto, M.Sc., selaku pembimbing utama.
4. Peni Indrayudha, M.Biotech, Apt., selaku pembimbing pendamping.
5. Andi Suhendi, S.Farm., Apt., selaku pembimbing akademik
6. Prof. dr. Supargiono, DTM&H., SU., PhD., SpPark dan Ibu Rumbiwati, ST,
selaku pembimbing di Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran
Universitas Gajah Mada.
7. Bapak Drs H Khabib dan Ibu Dra Hj Kus Indah M.pd, selaku orang tua.
8. Meicella Azni, Aulia Handayani dan Luthfiani Septiana, selaku tim peneliti.
9. Maz Azhar Dwi Astanto yang selalu mendampingi hingga skripsi ini selesai.
Semoga segala kebaikan yang diberikan menjadi sebuah amalan tersendiri.
Penulis berharap agar hasil penelitian ini dapat bermanfaat dan memberikan
sumbangan bagi perkembangan ilmu pengetahuan.
Wassalamualaikum wr. wb.
Surakarta, 25 Mei 2012
Penulis
vi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ... ii
HALAMAN PENGESAHAN ... iii
HALAMAN DEKLARASI ... iv
KATA PENGANTAR ... v
DAFTAR ISI ... vi
DAFTAR GAMBAR ... ix
DAFTAR TABEL ... x
DAFTAR LAMPIRAN ... xi
DAFTAR SINGKATAN ... xii
INTISARI ... xiii
BAB I. PENDAHULUAN A.Latar Belakang ... 1
B.Perumusan Masalah ... 2
C.Tujuan Penelitian ... 2
D.Tinjauan Pustaka... 3
1. Tanaman Sirsak (Annona muricata L.) ... 3
a. Klasifikasi Tanaman ... 3
b. Nama Daerah ... 3
c. Morfologi Tumbuhan ... 4
d. Ekologi dan Penyebaran ... 5
e. Kandungan Kimia ... 5
f. Manfaat Tanaman ... 6
2. Kanker ... 6
3. Kanker Payudara ... 7
4. Sel T47D ... 8
5. Uji Sitotoksik ... 9
vii
F. Hipotesis ... 11
BAB II. METODE PENELITIAN A.Kategori penelitian ... 12
B.Alat dan bahan ... 12
1. Alat ... 12
2. Bahan ... 12
C.Jalannya Penelitian ... 13
1. Determinasi tanaman ... 13
2. Pengumpulan bahan dan pembuatan serbuk ... 13
3. Preparasi Ekstrak ... 13
4. Uji Aktivitas Antikanker ... 14
a. Sterilisasi ... 14
b. Preparsi sel ... 14
c. Panen sel ... 14
d. Pembuatan larutan uji ... 15
e. Uji sitotoksik menggunakan metode MTT ... 15
f. Uji kandungan senyawa dengan KLT ... 15
D.Tempat Penelitian ... 16
E.Analisis Data... 16
1. Uji sitotoksik ... 16
2. Analisis Kromatografi Lapis Tipis ... 16
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN A.Determinasi ... 18
B.Ekstraksi ... 18
C.Uji sitotoksik terhadap sel T47D dengan metode MTT ... 19
D.Analisis kualitatif kandungan kimia ... 21
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan ... 25
B. Saran ... 25
viii
ix
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Struktur umum senyawa asetogenin ... 5
Gambar 2. Reaksi reduksi MTT ... 10
Gambar 3. Skema jalannya penelitian ... 17
Gambar 4. Morfologi sel T47D ... 19
Gambar 5. Kristal formazan yang terbentuk setelah penambahan MTT ... 19
Gambar 6. Grafik hubungan antara Log konsentrasi versus Persen Sel Hidup...20
x
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Kandungan gizi sirsak dalam 100 g ... 6
Tabel 2. Persentase sel hidup dari sel T47D akibat pelakuan ekstrak etanol kulit
batang sirsak (Annona muricata L.) ... 19
Tabel 3. Identifikasi Golongan Senyawa Ekstrak Etanol Kulit Batang sirsak
xi
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat keterangan determinasi... 30
Lampiran 2. Foto tanaman sirsak (Annona Muricata L.) ... 32
Lampiran 3. Perhitungan seri kadar ... 33
Lampiran 4. Perhitungan Kepadatan Sel T47D pada Uji Sitotoksik dengan Metode
MTT assay ... 34
Lampiran 5. Tabel Harga Absorbansi pada Uji Sitotoksik dengan Plate 96
Sumuran Menggunakan ELISA Reader ... 35
Lampiran 6. Data Uji Sitotoksik dengan Metode MTT Akibat Perlakuan Ekstrak
Etanol Kulit Batang Sirsak (Annona Muricataa L.) ... 36
Lampiran 7. Perhitungan Persen Sel Hidup akibat Perlakuan Ekstrak Etanol Kulit
Batang Sirsak (Annona muricata L.) ... 37
Lampiran 8. Perhitungan harga IC50 ... 39
xii
DAFTAR SINGKATAN
DMSO Dimetil sulfoksida
ELISA Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay
FBS Fetal Bovine Serum
g gram.
Mg miligram.
IC50 Inhibitory Concentration 50%
KLT Kromatografi Lapis Tipis
LAF Laminar Air Flow
MTT 3-(4,5-Dimetilltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromide
PBS Phosphate Buffered Saline
Penstrep Penicillin Streptomycin
RE Retinol Ekuevalen
Rf Retardation factor
RPMI Rosewell Park Memorial Institute
UV Ultraviolet
xiii
ABSTRAK
Kanker adalah penyakit akibat pertumbuhan tidak normal dari sel-sel jaringan tubuh yang berubah menjadi sel kanker. Tanaman sirsak (Annona muricata L.) merupakan bahan alam yang berpotensi untuk dikembangkan sebagai obat antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek sitotoksik dari simplisia kulit batang sirsak (Annona muricata L.) terhadap sel T47D .
Uji sitotoksik dilakukan dengan metode MTT dengan menggunakan 4 seri konsentrasi, yaitu 250; 125; 62,50; 31,25 dan 15,63 µg/mL dengan kepadatan sel 10.000 sel/sumuran. Identifikasi golongan senyawa kimia menggunakan metode kromatografi lapis tipis dengan fase diam silika GF254 dan fase gerak etil asetat :
n-heksan 8:2 menggunakan beberapa pereaksi semprot yaitu FeCl3, Lieberman Burchard, Vanilin, Sitroborat, dan Dragendorff.
Hasil uji sitotoksik menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit batang sirsak (Annona muricata L.) kurang poten dalam menghambat sel kanker payudara dengan nilai IC50 sebesar 221,81 µg/mL. Hasil KLT menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit batang sirsak (Annona muricata L.) megandung alkaloid, flavonoid, saponin dan polifenol.
