PEMERIKSAAN KADAR TOTAL CHOLESTEROL DAL AM SERUM DENGAH METODA LIEBERMANH HJRCHARD DANLBESI<III) CHLORIDA
SKRIPSI
DIHJAT UNTUK MEMENUHI SYARAT-SYARAT MENCAPAI GELAR SARJANA FAfMASl PADA FAKULTAS FAi&SASl
UNIVERSITAS AIRLAHGGA 1978
oleh
KATA PENGANTAR
Dengan nama Allah Yang Maha Pengasih dan ^aha Pe-nyayang, dengan memanjatkan puji syukur kehadirat fuhan- Yang Maha Esa atas taufiq dan hidayahnya, maka selesai * lah tuges skripsi yang diberikan kepada kami.
Dalam menyelesaikan tugas skripsi ini telah banyak bantuan dan budi baik yang kami terima dari berbagai pihak* Rasa terima kaslh kami ucapkan kepada Almamater kami, - Fakultas Farmasi Universitas Airlangga yang telah mendi-dik kami selama Ini.
!
Pada kesempatan ini perkenankanlah kami menyampai 1 "I
kafi rasa terima kasih dan penghargaan yang se-besar-besar nya kepada pembimbing kami dr*S.P* Edljanto dari bagian** Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga yang dengan rela hatl telah membimbing kami secara sekaa ma dan memberikan kesempatan yang seluas-luasnya dalam * menggunakan segala fasilitas yang ada pada Laboratorium-
Patologl Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Airlang-ga.
Tele lupa pula kami ucapksn terima kasitx kami kepa- da rekan-rekan mahasiswa serto pthak-pihak loin yang tak dapat koml sebutkan dalara kesempatan ini, yang telah ba* nyak membantu dalara penyusunan skripsi Ini*
Semoga Tuhan Xeng Haha Esa cnelimpahkan rakhraadNya kepada Bapak-Bapak, Ibu-Ibu ssrta rekan-rekan samua seau al dengan araal balk yang teleh diberikan kepada kaai%. Akhirnya kepada Panitis Skripsi yang teleh memeriksa dan menerima skripsi ini, kami ueapkan terima kasih*
Sebagai akhir kata kami berharap semoga skripsi » ini ada pula monf aafcnya Amin»;
Surabaya# akhir Mei 1970* Penyusun*
D4FIAR ISI I
Halaman KA$A PIKGAKTAH ... ... Ill
DAF3PAR ISI ... ... ... .. v
DAFTAI^ TABEL |Mi i H m • M i • M4 i i i t i • t « « i • H i m t i m ViHil DAFTjlP GAMBAH i>X
DAFSAB Xij^PXHAK # # *;* • * • • « . « « * • « t i n • « * » • * • * • » • • • * • •K
PMDAHOliUAR ... ... 1 B A B :
X * TXN*J AU AN PU5TAKA I* * * • ■• i • 6
1« Cholesterol dalam darah • 6
2* Motoda pemeriksaan kadar total
choleste-rol dalam ssnliB *« * Q
a* Motoda iilebermann Burchard ..».**»*** 8
Motoda B o s l ( X i l ) Chlorids -# • * • # * * * . • 10
Xi* Metoda Kerja •*«#♦*«•• ***•••*!** 12
1« Bah an penelitian **«*••*««•»•»•*****••••• 12 2» Pemeriksaan kadar ... 13 3* a.Pemerlksaan kadar total cholesterol ~
dalam serum dengan motoda Liebermann
-Burchard • #*..«*«***** ****.•**•*****« * 14 fc.Alat yang dipergunakan 14
c .Pembuatan reagencia . ... *«*« Ik d.Prosedur pemeriksaan kadar total cho
B A B
XIX.
Halaman ©•Proeedur pemeriksaan kadar total cholesterol
dalam serum sampel **•.«*»•*.... **•... 16 f* a*Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam so
nun dengan metoda Besi(III) Chlorlda •»*«»•• 16 b.Alat yang dipergunakan • *... 17
caPembuatan reagensia ... ... 1? d «Pembuatan kurva absorbs! terhadap/Ranjang ge
lombang *.*«•** - .. * .••*.***»*«*,*.. * * . 16 ©.Pembuatan kurva baku **"••****.••'.* i • * • 19 f*Prosedur pemeriksaan kadar total cholesterol
dalam serum kontrol •.«*<•••*« . 20
g.Prosedur pemeriksaan kadar total cholesterol dalam serum compel « 21
HASIL P35ECOBAAK ... 22
L. Basil pengamatan dari metoda Liebcrmann Bur -chard ... 22 a. Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam
-serum kontrol 22
b* Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam * serum sarapel ... ***** 25 2* Hasil pengamatan dari metoda Besi{III) Chlo
-rida . ... *... 25 a* Pembuatan kurva absorbs! terhadap pancang
-gelonbang • •••••*•••**«•< •***»••*•*«••**«•• 25
B A B : Halaman
b* Pembuatan kurva baku *«.*...*<.... 2?
X. Perhitungan adanya korclaci linlair(Pear -* 80n) antara koneentrasi dengan absorbs! •• 30 2* Persamaan garis regressi linialr ... 33
c. Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam se-rum kontrol .«•*••«** * **•»*«« #«. *. **«*#.»«»• . 34 d* Pemeriksaan kadar total cholesterol,dalam se-rum sanpel *. * ... ... ... ... 35
3* Analisa hasil-hasil yang didapat dari dua me-toda k * * * * * * . * . . , . * * 3 9 1« Hasil pengamatan pengamatan dari dua meto-da terhameto-dap serum kontrol .*•*.. 39
2*a«Hasil pengamatan-pengamatan dari dua me * toda terhadap serura eompel .*»•««*.****»• 40 b.Paxred **t** test •««..#..#•*«*******«•**«• 40
IV* PEMBICARAAN. .•..*•*«*•#•» ..***.•*• *«•*■<•••••**•• 48 V. KESIMPULAN.... ... ... 49
VI* saran-saran... ... ...30
VII. hihgkasab ... ... .... ... 51
LAMPIRAN ... ... *... ** ... 45
DAJFTAR PUSTAKA ... ... ... ... 53
M W V m f A S S L
i Urnlmm
I# K#*U U*6*r fc©t«&
m l dti** i#S’Ua kontrol doarl mtatLQ *
Lftobtfmro «urchard •»**♦•»##*»*«**«*»* 22 21« Htail jp*rhltun£«ifc kftdtar fcafcal Cholo*fc**
r&X <Ul*ss ******** fs&mpei 1 4« * i u t t o e * *
Li « fr « r w ft s n Bu r e t i a r r t 33
I I I * f t a t i X t m r i g * » * t * n &U«lftb«o*frai t * r b e *
d®l> psnjtn* 6©rl «#*©£*
J3**i-(XIX) Chlorlfi. ... ... 26
If*... p w y p m z t m , nll«i &&#&rt>st $+rhft «
d a p f a m j t t a t r a f t i « a a u r u f c w a f c a d o B » « l {111 *
ChlOFldi *M«M<«««t*«**«t*lMt«#*M«ll 21?
V» Dtftm tcMitJk p « ssb u ktt« n AftMtJPft &$*•«&•*£ *
<mt*ris to»*e»tr**l €*oe*!» *b*or?>»i pad*
«*•**•**#•••«*•••**••• 50 T im Xhifca «m tufc m m fUk Qxm p a r a * » * a n £1*1# r a *
&*a«#l p#di« $p#te&3*etfo$os&trt ********** 33 VXX* &4t*i& jjarkittttt^ett fecfte* total Cfcoieafca*
&&% 6*lm aarwkontrol d«ri &*te£« %»i
( X I X } C h i o r i C * 3 5
9X11* Hmmil p * r h l t i m s * n feadar CtioXaafa**
roi dalasft 'sampell 6«rl ata*o6a U#»
« i {X X I ) C h l o r i d a • • * # * * • • • # * * « * * * # * # * * 3 7
XX* fia a ll r a t a - r a f c a t i t p a a a ^ a X a a r u a d a H *
dua c»to6« *»*•••**••***«**»*•**#****«* /+1
M W V m f A S S L
i Urnlmm
I# K#*U U*6*r fc©t«&
m l dti** i#S’Ua kontrol doarl mtatLQ *
Lftobtfmro «urchard •»**♦•»##*»*«**«*»* 22 21« Htail jp*rhltun£«ifc kftdtar fcafcal Cholo*fc**
r&X <Ul*ss ******** fs&mpei 1 4« * i u t t o e * *
Li « fr « r w ft s n Bu r e t i a r r t 33
I I I * f t a t i X t m r i g * » * t * n &U«lftb«o*frai t * r b e *
d®l> psnjtn* 6©rl «#*©£*
J3**i-(XIX) Chlorlfi. ... ... 26
If*... p w y p m z t m , nll«i &&#&rt>st $+rhft «
d a p f a m j t t a t r a f t i « a a u r u f c w a f c a d o B » « l {111 *
ChlOFldi *M«M<«««t*«**«t*lMt«#*M«ll 21?
V» Dtftm tcMitJk p « ssb u ktt« n AftMtJPft &$*•«&•*£ *
<mt*ris to»*e»tr**l €*oe*!» *b*or?>»i pad*
«*•**•**#•••«*•••**••• 50 T im Xhifca «m tufc m m fUk Qxm p a r a * » * a n £1*1# r a *
&*a«#l p#di« $p#te&3*etfo$os&trt ********** 33 VXX* &4t*i& jjarkittttt^ett fecfte* total Cfcoieafca*
&&% 6*lm aarwkontrol d«ri &*te£« %»i
( X I X } C h i o r i C * 3 5
9X11* Hmmil p * r h l t i m s * n feadar CtioXaafa**
roi dalasft 'sampell 6«rl ata*o6a U#»
« i {X X I ) C h l o r i d a • • * # * * • • • # * * « * * * # * # * * 3 7
XX* fia a ll r a t a - r a f c a t i t p a a a ^ a X a a r u a d a H *
dua c»to6« *»*•••**••***«**»*•**#****«* /+1
M f T M &AIBAB
Oemfecr t itelrcaan
1* Xtirva rat let sbsorbei tsrfceda# jsftD^ang #© ~ lonbang derl Chole&tftrol fcansefttreet XQOmj/
10 0 ol{ 200 mg/lQQ&ti 300 «g/iOQ ml ... 28
2. £urva tiilsl ohe&rbsi ter&etiep
koneentraet^ftri Chaleatdvol» podo ptnjang goloabong -§90 Cta 51
3. Kurva bsfeta <5»rl psraeseaeR gori® regreesi
-y # 0f00262 x ~ 0,012 ... . 36
DAFfAR MIHMg
lampiran i Haldsssn
U Mfltrtboel *tw ... ... ».*-.... 45
2* Sebel £feooritl«si*l valuoe of correlation * «
1
PENDAHULUAN
Cholesterol akhir-akhir ini banyak dibicarakan di- masyarakat luas dinegara kita*
Didalam kesehatan manusia menurut beberapa penyelidik dinya-takan adanya hubungan yang erat antara type hyperlipoprote-inemia dengan konsentrasi cholesterol dal am darah dimaria
N
bagai manifestasi dari penyakit diabetes mellitusjhypothy - roidism;obstruktive biliaris;nephritis;pangkreatitis(l,10 20
).
Dan oleh beberapa penyelidik lainnya terdapat bukti-bukti yang menyokong adanya sangkut paut antara lemak darah dengan penyakit arteriosclerosis(20).
Dengan mengingat hal-hal tersebut diatas penting sekali terutama dokter untuk mengetahui secara tepat dan cepat kadar total cholesterol dalam darah seorang penderi-ta sehingga didalam menentukan diagnosa serpenderi-ta terapinya da- pat secara tepat dan memuaskan.
4uga sudah hampir merupakan hal yang rutin bila seorang pen derita menanyakan berapa tinggi kadar cholesterolnya untuk mencegah hal-hal yang tak diinginkan bterhubungandengan
kese-hatan tubuhnya. *
2
yang cepat serta masih mempunyai precision(ketelitian) yang baik(3)*
Suatu pemeriksaan dikatakan mempunyai precision(kete-r litian) yang baik apabila hasil pemeriksaan tersebut dilakukan berulang-ulang mempunyai selisih yang kecil*
Dalam kepustakaan banyak kita jumpai cara pe-meriksaan kadar total cholesterol dalam serum(3»6»7»
10,14,16,20) dan pada umumnya fase-fase analisanya
«
sbb:
^s I^strj&si j:
Ekstraksi cholesterol' bebas maupun dalam ben- tuk ester dengan pelarut-pelarut organik misalnyas chloroform5asam aeetat glasialjiso- propanol;
Ekstraksi dengan pelarut organik campuran mi-t
salnya ; chloroform-H^SO^pekat;ethyl asetat - etanoljchlorof®"®^^11©!» etanol-eter«
11:Sagoni fikasi£
III:Isolasi :
Baik cholesterol bebas maupun ester dapat dii-solasi dengan cara :
ekstraksi ci
presipitasi dengan suatu zat tertentu ; kromatografi kolom 5
Penentuan titik akhir ini dapat pula dibagi-bagi berdasarkan cara penentuannya yaitu3 l*secara gravlmetri
2*secara tetrasi 3«secara kolorimetri
^•secara spektrofotometri*
Pemeriksaan kadar cholesterol paling sering dilakukan secara spektrofotometri dengan mempergunakan metoda reaksi warna Liebermann Burchard (4,6,7*8) .
Kemudian pada akhir-akhir ini telah dimulai dipakai
metoda reaksi warna. Besi(III)Chlorida dalam lingkungan HgSO^pekat (3,6,10*16,19#20) .
Dalam pemeriksaan kadar total cholesterol dalam serum dari dua metoda tersebut pemeriksaannya, dapat secara pemeriksaan langsung dan dapat juga se-cara tidak langsung*
Pemeriksaan tak langeung ialah ; pemeriksaan kadar to*
ted cholectorol dilakuka» dongan ©katrakoi ataupun pre
alpltaei dari protein corunj *
Ponoriknaun secara epoktro £otoaotri kadar total »
cholcetorol dalem aorum dari penelitian kami ini*kaai~
memilih motoda roakoi warn kiobomonn Barchord dari *
Herckoteot kit (4) dan metoda roakcl trama Booi(III) ~
Chlorida (19) dari S5ak«B*
Metoda roaksl warno Lioboroonn Burehard dari
ltor-koteot kit ini s
pemeriksaannya oecara langsung; caranya nudah ; banyak
dipergunakan dHaboratorium-iafeoratoriua klinik ; tota
pl harpanya ralativ aafaal •
Sedangkan netoda roakci warna Bosi{XXI) Chlorida*
dan Sak*B* ini i
pmoz&keaannya cocnra tak lancoung $ waktu pcraerlkeaan
rolativ oingkat j barganya rclatlv mwah *
Balea ponolitiaa kami inl^kacl Ingin aengotahui *
apakah kodua notodo tersobut Gccurccy(kotopatamya) •
fcaiiv'tidak baik *
Untuk makeud toroobut nacin^nacinc notoda kaai*»
lokukan penoritoaan torhadap eorun kontrol yaitu n cm «*
porgunaitan "lilptd Control*1 Procilipj Bochringer Hannhoin
Serum kontrol tersebut mempunyai harga rata-rata choles-terol (x) & 133 mg% dan range pemeriksaan s 110 ** 166 rag# ( 1*2 S D ) *
Serum kontrol ialah suatu serum yang telah diperiksa * berulang-ulang kali kadar total cholesterolnya dengan - pemeriksaan yang telltt dan saksaraa dari metoda dan alat-alat yang terbaik sehingga menghasilkan harga rata- rata total cholesterol(x) dalam serum tersebut dengan - batas-batas pemeriksaan tertentu ( x * 2 S D ) *
Apabila hasil rata-rata pemeriksaan masing-masing* metoda tersebut sama/mendekati harga rata-rata dari se - rrnn kontrol dan juga memenuhi range pemeriksaan *maka - metoda tersebut accuracy(ketepatannya) baik *
Sebaliknya apabila hasil rata-rata pemeriksaan masing - macing metoda tersebut jauh dari harga rata-rata serum - kontrol dan juga tidak memenuhi range pemeriksaan* maka- metoda tersebut accuracy(ketepatannya) tidak baik •
