STUDI AWAL PEMANFAATAN MINYAK BIJI KARET
Hevea brasiliensis
UNTUK PAKAN IKAN NILA
Oreochromis
sp.
SITI KOMARIYAH
SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR
PERNYATAAN MENGENAI TESIS DAN
SUMBER INFORMASI SERTA PELIMPAHAN HAK CIPTA
Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis berjudul “Studi Awal Pemanfaatan Minyak Biji Karet Hevea brasiliensis untuk Pakan Ikan Nila
Oreochromis sp.” adalah benar karya saya dengan arahan dari komisi
pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan dan tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir tesis ini.
Dengan ini saya melimpahkan hak cipta dari karya tulis saya kepada Institut Pertanian Bogor.
RINGKASAN
SITI KOMARIYAH. Studi Awal Pemanfaatan Minyak Biji Karet Hevea
brasiliensis untuk Pakan Ikan Nila Oreochromis sp.. Dibimbing oleh MUHAMMAD AGUS SUPRAYUDI dan DEDI JUSADI.
Penelitian ini dilakukan sebagai studi awal pemanfaatan minyak biji karet (MBK) untuk pakan dan pengaruhnya terhadap pertumbuhan ikan nila. Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan ikan nila strain sultana dengan bobot awal rata-rata 8.33±0.07 g. Ikan dipelihara dalam akuarium berukuran 100x50x50 cm3 dengan sistem resirkulasi. Lima macam pakan yang digunakan dalam penelitian ini memiliki kadar protein dan energi yang sama. Pakan kontrol mengandung 6% minyak jagung (0% MBK), digantikan dengan MBK sebesar 25%, 50%, 75% dan 100%. Pemeliharaan ikan dilakukan selama 40 hari. Ikan diberi pakan 3 kali sehari, yaitu pagi, siang dan sore.
Parameter uji yang diamati yaitu jumlah konsumsi pakan, efisiensi pakan, retensi protein, retensi lemak, laju pertumbuhan spesifik, kelangsungan hidup, indeks hepatosomatik (IHS), kadar lemak (hati dan otot), kimia darah (glukosa darah, total kolesterol, trigliserida, high density lipoprotein (HDL) dan gambaran darah. Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah rancangan acak lengkap dengan 5 perlakuan dan 3 ulangan. Data dianalisis secara statistik dengan one-way ANOVA (analysis of variance) menggunakan program SPSS 18.0, data yang berbeda nyata (p<0.05) dilanjutkan dengan analisis Duncan.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kinerja pertumbuhan, kimia darah dan gambaran darah semakin menurun dengan peningkatan MBK pada pakan. Hal ini disebabkan semakin menurunnya jumlah konsumsi pakan secara signifikan, yaitu 583.5 g menjadi 145.6 g dari perlakuan 0% ke 100%. Glukosa darah, hemoglobin dan laju pertumbuhan spesifik pada perlakuan 0% ke 100% masing-masing adalah 48.7 mg/dL-22.17 mg/dL, 7.6 g%-5.4 g% dan 3.5%-0.8%. Tingkat kelangsungan hidup terendah terjadi pada perlakuan 100%, yaitu 66.7%. Kinerja pertumbuhan pada perlakuan tanpa MBK (kontrol) lebih baik daripada perlakuan lainnya sehingga MBK belum dapat dimanfaatkan sebagai sumber lemak menggantikan minyak jagung pada pakan ikan nila.
SUMMARY
SITI KOMARIYAH. Preliminary Study on Utilization of Rubber Seed Oil (Hevea brasiliensis) for Nile Tilapia (Oreochromis sp.) Diet. Supervised by MUHAMMAD AGUS SUPRAYUDI and DEDI JUSADI.
This research was conducted as a preliminary study on the utilization of rubber seed oil (RBO) for Nile tilapia diet and to evaluate its effect toward growth performance for Nile tilapia. The research was conducted using sultana strain with average body weights 8.33±0.07 g. The fish were reared in aquaria (100x50x50 cm3) with recirculating system. Five feeds containing similar protein and energy were used in this experiment. Control diet (0% RBO) containing 6% corn oil, was replaced by 25%, 50%, 75% and 100% RBO. Fish were reared for 40 days and fed 3 times daily in the morning, afternoon and evening.
Some parameters were measured including feeding rate, feed efficiency, protein retention, lipid retention, specific growth rate, survival rate, hepatosomatic index (HSI), lipid content in hepatopancreas and muscle, glucose, cholesterol, triglycerides, high density lipoprotein (HDL) and hematology. Experimental design was set according to completely randomized design. Each treatment was repeated 3 replications. All data were analysed by One-Way Analysis of Variance then by Duncan test using software SPSS 18.0. Differences were considered significant at P<0.05.
The results showed that the growth performance, blood chemistry and hematology of fish decreased with increasing RBO in Nile tilapia diet. These are caused by feed intake decreased significantly, which were 583.5 g to 145.6 g of 0% to 100%. Blood glucose, haemoglobin and specific growth rate were observed in fish fed 0%to 100% diet were 48.7 mg/dL to 22.2 mg/dL, 7.6 g % to 5.4 g % and 3.5% to 0.8%, respectively. The lowest survival rate was observed in fish fed 100% RBO (66.7%). Fish growth performance of 0% RBO was better than others, so RBO can not be utilized as a source of lipid to replace corn oil on tilapia diet.
© Hak Cipta Milik IPB, Tahun 2014
Hak Cipta Dilindungi Undang-Undang
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan atau menyebutkan sumbernya. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan, penelitian, penulisan karya ilmiah, penyusunan laporan, penulisan kritik, atau tinjauan suatu masalah; dan pengutipan tersebut tidak merugikan kepentingan IPB
Tesis
sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains
pada
Program Studi Ilmu Akuakultur
STUDI AWAL PEMANFAATAN MINYAK BIJI KARET
Hevea brasiliensis
UNTUK PAKAN IKAN NILA
Oreochromis
sp.
SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR 2014
Judul Tesis : Studi Awal Pemanfaatan Minyak Biji Karet Hevea brasiliensis untuk Pakan Ikan Nila Oreochromis sp.
Nama : Siti Komariyah NIM : C151120251
Disetujui oleh Komisi Pembimbing
Dr Ir Muhammad Agus Suprayudi, MSi Ketua
Dr Ir Dedi Jusadi, MSc Anggota
Diketahui oleh
Ketua Program Studi Ilmu Akuakultur
Dr Ir Widanarni, MSi
Dekan Sekolah Pascasarjana
Dr Ir Dahrul Syah, MScAgr
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala limpahan rahmat dan karunia-Nya sehingga tesis yang berjudul ”Studi Awal Pemanfaatan Minyak Biji Karet Hevea brasiliensis untuk Pakan Ikan Nila Oreochromis sp.” ini
berhasil diselesaikan. Tesis ini bersumber pada hasil penelitian yang dilaksanakan sejak bulan Januari 2014 sampai April 2014 bertempat di Laboratorium Nutrisi Ikan, Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor.
Penulis menyadari bahwa selesainya tesis ini tidak lepas dari segala bantuan dan dukungan berbagai pihak, baik ide, pemikiran, tenaga, moril maupun material. Oleh karena itu penulis menyampaikan rasa terima kasih yang mendalam kepada Dr Ir Muhammad Agus Suprayudi, MSi dan Dr Ir Dedi Jusadi, MSc sebagai komisi pembimbing atas waktu dan bimbingannya mulai dari penyusunan proposal; pelaksanaan penelitian hingga penulisan tesis. Penulis juga menyampaikan rasa terima kasih kepada Dr Ir Mia Setiawati, MSi sebagai dosen penguji luar komisi dan Dr Alimuddin, SPi, MSc sebagai komisi program studi yang telah memberikan saran dalam ujian sidang tesis ini.
Terima kasih disampaikan pada Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi (DIKTI) Kementerian Pendidikan dan Kebudayaan (KEMENDIKBUD) atas penyediaan Beasiswa Pendidikan Pascasarjana Dalam Negeri (BPPDN) sehingga penulis dapat memperdalam ilmu di Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.
Terima kasih dan penghargaan yang tinggi penulis haturkan kepada Ayahanda Sukari dan Ibunda Saidah serta seluruh keluarga dan sahabat, atas segala doa dan kasih sayangnya. Terima kasih juga kepada seluruh rekan-rekan S2 Ilmu Akuakultur angkatan 2012 atas kebersamaannya dalam menempuh studi.
Akhir kata, semoga karya ilmiah ini bermanfaat untuk kemajuan ilmu pengetahuan umumnya dan perikanan khususnya.
Bogor, Oktober 2014
DAFTAR ISI
DAFTAR TABEL viii
DAFTAR LAMPIRAN ix
1 PENDAHULUAN 1
Latar Belakang 1
Perumusan Masalah 2
Tujuan Penelitian 2
Manfaat Penelitian 2
Hipotesis 2
2 METODE 2
Ikan Uji 2
Pakan Perlakuan 3
Pemeliharaan Ikan 3
Rancangan Penelitian 4
Analisis Kimia 4
Analisis Data 5
Parameter yang Diamati 5
3 HASIL DAN PEMBAHASAN 8
Hasil 8
Pembahasan 10
4 SIMPULAN DAN SARAN 13
DAFTAR PUSTAKA 13
DAFTAR TABEL
1 Formulasi, hasil analisis proksimat pakan uji dan analisis bilangan peroksida
MBK 3
2 Komposisi asam lemak pada pakan perlakuan 4
3 Kadar glukosa, protein darah, kolesterol, trigliserida dan HDL ikan uji 8 4 Sel darah merah (SDM), sel darah putih (SDP), hemoglobin (Hb), dan
hematokrit (Ht) 9
5 Kadar air dan lemak pada hati dan otot, serta indeks hepatosomatik (IHS) ikan nila pada berbagai perlakuan pakan yang berbeda 9 6 Jumlah konsumsi pakan (JKP), efisiensi pakan (EP), retensi protein (RP),
retensi lemak (RL), laju pertumbuhan spesifik (LPS) dan tingkat
kelangsungan hidup (TKH) 10
DAFTAR LAMPIRAN
1 Prosedur analisis proksimat pakan dan dan tubuh ikan 17
2 Prosedur pengukuran asam lemak 20
1 PENDAHULUAN
Latar Belakang
Ikan nila merupakan salah satu ikan ekonomis penting yang banyak dibudidayakan baik di Indonesia maupun di negara lainnya. Ikan nila membutuhkan nutrien-nutrien dalam pakan untuk menunjang pertumbuhan dan kelangsungan hidupnya, salah satunya adalah lipid. Lipid merupakan unsur yang penting tidak hanya karena nilai kalorinya yang tinggi, yaitu dua kali lebih besar dari karbohidrat dan protein, tetapi juga sebagai penyerap dan pembawa vitamin A, D, E dan K serta sumber asam lemak esensial yang dibutuhkan oleh ikan (NRC 1993). Asam lemak esensial dalam tubuh ikan merupakan komponen fosfolipid yang berperan penting pada biomembran sel, keberadaannya untuk memperbaiki fluiditas membran sehingga fungsi metabolisme tetap berjalan normal. Selain itu, lipid juga merupakan prekursor hormon steroid dan eikosanoid seperti prostaglandin (Sargent et al. 1995).
Ikan air tawar pada umumnya membutuhkan asam linoleat (18:2n-6), atau asam linolenat (18:3n-3), atau keduanya untuk pertumbuhan (NRC 1993). Menurut Teshima et al. (1982) ikan nila lebih membutuhkan n-6 seperti asam linoleat dan arakidonat (20:4n-6) untuk pertumbuhan daripada n-3. Namun Chen et al. (2013) melaporkan ikan nila membutuhkan 18:3n-3 sebesar 0.45-0.64% yang dikombinasikan dengan 18:2n-6 sebesar 0.61% untuk pertumbuhan yang optimal.
Sumber asam lemak pada pakan ikan air tawar pada umumnya dari minyak nabati, seperti minyak jagung dan minyak kedelai. Minyak nabati tersebut kini mulai mahal, sehingga dibutuhkan sumber lemak alternatif yang mengandung asam lemak esensial yang dibutuhkan oleh ikan. Sumber lemak alternatif tersebut salah satunya adalah minyak biji karet (MBK). Tepung bungkil biji karet sendiri telah dapat dimanfaatkan sebagai sumber protein pada beberapa pakan ikan, di antaranya adalah ikan nila (Alim 2013) dan ikan mas (Suprayudi et al. 2014). Selain mengandung protein, yaitu 18.20% dari biji kering, biji karet juga mengandung lemak yang tinggi, yaitu 47.38% (Siahaan 2009). Hasil penelitian Silam (1998) tentang ekstraksi minyak dari biji karet menghasilkan rendemen 50-56% dari 1 kg biji karet. Sementara itu produksi biji karet di Indonesia berkisar antara 2.7-4.1 juta ton/tahun (Dirjen Perkebunan 2004), sehingga jika dikonversi akan menghasilkan MBK berkisar antara 0.77-1.25 juta ton/tahun. Selain potensinya yang besar, MBK mengandung asam lemak tidak jenuh yang tinggi, yaitu 39.45% 18:1n-9; 33.12% 18:2n-6 (Setyawardhani et al. 2010); dan 16.3% 18:3n-3 (Ramadhas et al. 2005). Dengan kedua alasan tersebut, yaitu potensinya yang tinggi dan mengandung asam lemak esensial yang dibutuhkan ikan nila, maka MBK sangat berpotensi sebagai sumber lemak pada pakan ikan nila.
2
inilah yang bersifat toksik. Menurut Ravindran dan Ravindran (1988), biji karet mengandung sianida 164 mg/100 g dan akan mengalami penurunan hingga 93% saat dilakukan pemasakan biji karet. Pengaruh penambahan MBK pada pakan ternak seperti tikus (Nwokolo dan Kitts 1988; Babantune dan Pond 1990; Abdullah et al. 2012) dan ayam pedaging (Fajimi et al. 1993) telah diuji cobakan. Pada kedua hewan uji tersebut MBK tidak memberikan dampak toksik, namun menyebabkan penurunan pertumbuhan karena asupan pakan yang rendah.
Perumusan Masalah
Pengaruh penambahan MBK pada pakan ikan belum diteliti, sehingga belum diketahui apakah MBK dapat dimanfaatkan sebagai sumber lemak pada pakan atau tidak. Tingginya kandungan asam lemak tidak jenuh terutama asam linoleat pada MBK menjadi pertimbangan untuk memanfaatkan minyak tersebut pada pakan ikan. Namun demikian, MBK mengandung zat anti nutrisi asam sianida (HCN) dan mudah teroksidasi sehingga dapat mempengaruhi kualitas pakan.
Tujuan
Tujuan penelitian ini adalah memanfaatkan sumber asam lemak dari MBK dalam pakan ikan nila dan mengevaluasi pengaruhnya terhadap pertumbuhan ikan nila Oreochromis sp. strain sultana.
Manfaat
Hasil penelitian ini diharapkan menjadi informasi tentang bahan baku alternatif sumber lemak nabati yang dapat digunakan pada pakan ikan nila.
Hipotesis
Asam lemak dari MBK dapat dimanfaatkan sebagian sumber asam lemak nabati pada pakan ikan nila.
2 METODE
Ikan Uji
3 Pakan Perlakuan
Pakan perlakuan yang digunakan pada penelitian ini adalah pakan buatan berbentuk pelet. Bahan pakan yang digunakan adalah tepung ikan dan tepung bungkil kedelai sebagai sumber protein dan sumber karbohidrat berasal dari dekstrin. Sumber lemak yang digunakan berasal dari minyak jagung dan MBK sebagai perlakuan. MBK yang digunakan berasal dari hasil pengepresan biji karet menggunakan hidrolic press pada suhu 80°C. Formulasi, hasil analisis proksimat pakan uji dan analisis bilangan peroksida MBK disajikan pada Tabel 1. Perbedaan penambahan MBK pada pakan menyebabkan kandungan asam lemak pada masing-masing pakan juga berbeda yang ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 1 Formulasi, hasil analisis proksimat pakan uji dan analisis bilangan peroksida MBK (% bobot kering)
Ket :
BETN = bahan ekstrak tanpa nitrogen.
GE = gross energy (Watanabe 1988) 1 g protein = 5.6 kkal GE, 1 g lemak = 9.4 kkal GE, 1 g karbohidrat/BETN = 4.2 kkal GE.
HCN = asam sianida.
Pemeliharaan ikan
Pemeliharaan ikan menggunakan akuarium berukuran 100x50x50 cm3 dengan volume air 150 liter. Ikan dipelihara dengan padat penebaran 15 ekor/akuarium. Nilai kualitas air yang harus dipertahankan selama pemeliharaan yaitu suhu air berkisar antara 29-30°C, pH sekitar 7, DO>3 mg/L dan amonia-N (NH3-N) <0.05 mg/L. Untuk menjaga kualitas air dilakukan penyifonan setiap
hari dan penggantian air setiap empat hari sekali sebanyak 50%.
Pakan diberikan secarasatiasi dengan frekuensi tiga kali sehari, yaitu pagi, siang dan sore. Ikan dipelihara selama 40 hari, pada awal dan akhir pemeliharaan dilakukan penimbangan biomassa dan analisis proksimat tubuh ikan uji.
Bahan baku Perlakuan
4
Penimbangan biomassa dilakukan setelah ikan dipuasakan selama 24 jam. Selain itu, pada akhir pemeliharaan beberapa ekor ikan dari setiap perlakuan diambil darahnya untuk uji parameter-parameter yang diperlukan.
Tabel 2 Komposisi asam lemak pada pakan perlakuan (% bobot basah)
Asam lemak Perlakuan
Penelitian ini didesain menggunakan rancangan acak lengkap dengan 5 perlakuan dan 3 ulangan. Perlakuan pada penelitian ini sebagai berikut:
Perlakuan 0% lemak dari MBK, 100% dari minyak jagung. Perlakuan 25% lemak dari MBK, 75% dari minyak jagung. Perlakuan 50% lemak dari MBK, 50% dari minyak jagung. Perlakuan 75% lemak dari MBK, 25% dari minyak jagung. Perlakuan 100% lemak dari MBK, 0% dari minyak jagung.
Analisis Kimia
5 Chromatography (Lampiran 2). Pengukuran zat antinutrisi HCN dilakukan menggunakan spektrofotometer (Lampiran 3).
Analisis data
Parameter yang diuji secara statistik adalah semua parameter hasil analisis kimia. Data yang diperoleh ditabulasi dengan program Excel MS. Office 2010 dan untuk uji one-way ANOVA dianalisis menggunakan program SPSS 18. Perlakuan yang berbeda nyata dilanjutkan dengan uji Duncan. Pengamatan kadar asam lemak pakan dianalisis dengan analisis deskriptif eksploratif menggunakan tabel.
Parameter yang Diamati Jumlah konsumsi pakan (JKP)
Tingkat konsumsi pakan diketahui dengan cara bobot pakan awal dikurangkan dengan bobot sisa pakan.
Laju pertumbuhan spesifik (LPS)
Laju pertumbuhan spesifik ikan dihitung berdasarkan persamaan sebagai berikut:
LPS = (LnWt – LnW0] x100 T
Keterangan:
Wt : Bobot rata-rata ikan akhir pemeliharaan (g)
W0 : Bobot rata-rata ikan awal pemeliharaan (g)
t : Waktu pemeliharaan (hari) Efisiensi pakan (EP)
Efisiensi pakan dihitung menggunakan rumus sebagai berikut (Takeuchi 1988):
EP = [(Wt + Wd) – W0] x100 F
Keterangan:
EP : Efisiensi pakan (%)
Wt : Biomassa ikan akhir pemeliharaan (g)
W0 : Biomassa ikan awal pemeliharaan (g)
Wd : Biomassa ikan yang mati selama pemeliharaan (g)
F : Jumlah pakan yang diberikan selama penelitian (g) Retensi protein (RP)
Retensi protein diketahui melalui analisis proksimat protein tubuh ikan pada awal dan akhir penelitian dengan metode AOAC (1990). Rumus perhitungan retensi protein sebagai berikut (Takeuchi 1988):
6
Keterangan:
F : Jumlah protein ikan pada akhir pemeliharaan dan ikan yang mati (g) I : Jumlah protein ikan pada awal pemeliharaan (g)
P : Jumlah protein yang dikonsumsi ikan (g) Retensi lemak (RL)
Retensi lemak diketahui melalui analisis proksimat lemak tubuh ikan pada awal dan akhir penelitian dengan metode AOAC (1990). Rumus perhitungan retensi lemak sebagai berikut (Takeuchi 1988):
RL = (F - I) x100 L
Keterangan:
F : Jumlah lemak ikan pada akhir pemeliharaan dan ikan yang mati (g) I : Jumlah lemak ikan pada awal pemeliharaan (g)
P : Jumlah lemak yang dikonsumsi ikan (g) Tingkat kelangsungan hidup (TKH)
Tingkat kelangsungan hidup dihitung menggunakan rumus sebagai berikut: TKH = Nt x100
N0
Keterangan:
TKH : Tingkat kelangsungan hidup ikan (%) Nt : Jumlah ikan pada akhir penelitian (ekor)
N0 : Jumlah ikan pada awal penelitian (ekor)
Nilai indeks hepatosomatik (IHS)
Kandungan HCN pada pakan diuji menggunakan metode Asam Barbiturat – Pyridin dan diukur menggunaka alat spektrofotometer (APHA 1998), bertujuan untuk melihat kualitas pakan.
Gambaran darah
7 Total sel darah merah (SDM/Eritrosit)
Pemeriksaan total eritrosit bertujuan untuk mengetahui kondisi kesehatan ikan dengan cara menghitung total eritrosit dalam darah. Cara pengambilan sampel darah dihisap dengan pipet berskala sampai 0.5, selanjutnya larutan Hayem dihisap sampai skala 101, kedua bahan dalam pipet digoyangkan atau diayunkan membentuk angka delapan selama 3-5 menit agar bercampur homogen. Tetesan pertama dibuang, tetesan berikutnya diteteskan ke dalam hemositometer dan ditutup dengan kaca penutup (Blaxhall dan Daisley 1973). Penghitungan dilakukan pada lima kotak kecil haemositometer dan jumlahnya dihitung dengan rumus:
Keterangan:
A : Jumlah sel eritrosit terhitung
N : Jumlah kotak hemositometer yang diamati V :Volume kotak hemositometer yang diamati fp : Faktor pengenceran
Total sel darah putih (SDP/ Leukosit)
Cara penghitungan total leukosit sama seperti penghitungan total eritrosit, yang membedakan hanya pada larutan yang digunakan, yaitu larutan Turk’s. Jumlah leukosit total dinyatakan dengan n x 103/mm3 (Blaxhall dan Daisley 1973).
Keterangan:
A : Jumlah sel leukosit terhitung
N : Jumlah kotak hemositometer yang diamati V : Volume kotak hemositometer yang diamati fp : Faktor pengenceran.
Kadar hematokrit (He)
Pengukuran hematokrit dilakukan menggunakan tabung mikro hematokrit berupa pipa kapiler berlapis heparin. Sampel darah dihisap dengan menggunakan pipa kapiler, sampai pada ¾ bagian kapiler, kemudian ditutup dengan bahan penutup (lilin). Pipa kapiler yang berisi darah disentrifugasi dengan kecepatan 3500 rpm selama 15 menit. Pembacaan dilakukan dengan membandingkan bagian darah yang mengendap dengan seluruh bagian darah yang ada di dalam tabung mikro hematokrit, menggunakan mikro hematokrit skala dan hasilnya dinyatakan dalam persen (%) (Anderson dan Siwicki 1993).
Kadar hemoglobin (Hb)
8
tabung tersebut ditempatkan diantara 2 tabung yang berisi warna standar. Akuades ditambahkan ke dalam tabung Sahli sedikit demi sedikit menggunakan pipet, sampai warnanya sama dengan warna standar dan didiamkan selama 3 menit, dan hasilnya dinyatakan dalam g % (Wedemeyer dan Yasutake 1977).
Analisis kadar glukosa, trigliserida dan total kolesterol darah
Tiga ikan dari setiap perlakuan diambil secara acak pada akhir penelitian. Kadar glukosa diukur dengan metode uji enzimatik kolorimetri dengan uji GLUCOSE liquicolor menggunakan test kit Human mbH, Jerman (Trinder 1969). Kadar trigliserida diukur dengan metode uji enzimatik kolorimetri menggunakan menggunakan TRIGLYCERIDES liquicolormono dengan test kit Human mbH, Jerman (Jacobs & Vandemark 1960). Kadar kolesterol diukur dengan metode CHOLESTEROL liquicolor menggunakan test kit Human mbH, Jerman (Trinder 1969).
3 HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Setelah dipelihara selama 40 hari, ikan nila pada berbagai perlakuan memiliki kadar glukosa, trigliserida, kolesterol dan high density lipoprotein (HDL) yang berbeda (Tabel 3). Ikan yang diberi pakan mengandung 50% MBK
Tabel 3 Kadar glukosa, protein darah, kolesterol, trigliserida dan high density lipoprotein (HDL) ikan uji
119.4±13.06a 85.8±12.21b 75.8±8.74bc 53.3±25.91c
Trigliserida
(mg/dL) 107.5±2.15 a
88.9±3.28b 43.4±1.24c 41.6±11.84c 46.6±14.32c
HDL
(mg/dL) 123.0±10.03 a
118.2±12.57ab 90.3±16.44bc 87.7±14.04c 57.5±23.76d
9 Total SDM ikan pada semua perlakuan jumlahnya sama. Namun demikian, peningkatan kadar MBK pada pakan berdampak terhadap peningkatan total SDP, serta menurunkan kadar Hb dan Ht di dalam darah ikan (Tabel 4). Total SDP ikan yang diberi pakan perlakuan mengandung 100% MBK nilainya lebih tinggi dibandingkan dengan perlakuan lainnya. Sementara ikan yang diberi pakan pelakuan mengandung 50% MBK atau lebih memiliki kadar Ht dan Hb lebih rendah dibandingkan dengan perlakuan tanpa MBK atau 25% MBK.
Tabel 4 Sel darah merah (SDM), sel darah putih (SDP), hemoglobin (Hb) dan
Ket : Huruf yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan pengaruh perlakuan yang berbeda nyata (p<0.05). Nilai yang tertera merupakan nilai rata-rata dan simpangan baku.
Analisa kadar air dan lemak pada hati dan otot, serta indeks hepatosomatik (IHS) disajikan pada Tabel 5. Kadar air hati ikan yang diberi perlakuan MBK memiliki nilai yang lebih tinggi dibandingkan dengan perlakuan tanpa MBK. Hal sebaliknya terjadi pada kadar lemak hati dan otot yang memiliki nilai lebih rendah dibandingkan dengan perlakuan tanpa MBK. IHS dan kadar air otot ikan yang diberi pakan perlakuan 25% MBK memiliki nilai yang sama dengan perlakuan tanpa MBK, namun IHS ikan yang diberi pakan perlakuan 25% MBK memiliki nilai yang lebih tinggi dari perlakuan 50% MBK atau lebih, sementara kadar air otot ikan yang diberi pakan perlakuan 25% MBK memiliki nilai yang lebih rendah dari perlakuan 50% MBK atau lebih.
Tabel 5 Kadar air dan lemak pada hati dan otot, serta indeks hepatosomatik (IHS) ikan nila pada berbagai perlakuan pakan yang berbeda
Parameter (%)
Perlakuan
0% 25% 50% 75% 100%
Hati :
Kadar air 71.5±1.39c 75.3±1.75b 74.7±0.14b 78.1±0.55a 76.4±0.11ab Lemak 8.8±0.61a 7.2±0.50b 6.5±0.00bc 6.6±0.25bc 6.4±0.10c HSI 1.9±0.14a 1.8±0.32a 0.9±0.04b 1.1±0.31b 1.1±0.10b Otot :
Kadar air 78.8±0.17b 78.8±0.30b 81.5±0.42a 81.4±0.50a 81.2±1.15a Lemak 2.1±0.21a 1.8±0.00b 1.7±0.06b 1.2±0.15c 1.2±0.10c
Keterangan: Huruf yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan pengaruh perlakuan yang berbeda nyata (p<0.05). Nilai yang tertera merupakan nilai rata-rata dan simpangan baku.
10
kandungan MBK pada pakan menyebabkan JKP menurun. Seiring dengan penurunan JKP, maka LPS dan EP juga menurun, terutama dimulai pada kadar 25% MBK. Sementara retensi protein dan retensi lemak ikan yang diberi pakan dengan kadar 25% MBK sama dengan perlakuan tanpa MBK, dan mengalami penurunan pada ikan yang diberi 50% MBK atau lebih. Pemberian pakan yang mengandung 25%, 50% dan 75% MBK memberi pengaruh yang sama terhadap kelangsungan hidup ikan, namun penambahan hingga 100% menyebabkan kelangsungan hidup menurun.
Tabel 6 Jumlah konsumsi pakan (JKP), efisiensi pakan (EP), retensi protein (RP), retensi lemak (RL), laju pertumbuhan spesifik (LPS) dan tingkat
JKP (g) 583.5±11.79a 432.8±10.95b 216.7±6.79c 145.5±2.05d 145.6±3.16d LPS (%) 3.5±0.07a 2.6±0.41b 1.3±0.11c 0.7±0.04d 0.8±0.12d EP (%) 63.5±3.42a 49.0±11.07b 31.8±2.84c 20.8±5.88cd 12.2±3.62d RP(%) 33.5±4.16a 28.5±6.34a 15.5±1.72b 9.4±2.31bc 4.3±5.17c RL (%) 62.7±7.84a 47.1±8.71a 5.9±9.23b 3.2±8.55b -4.3±3.64b TKH (%) 95.6±3.85a 93.3±0.00a 88.9±3.85a 86.7±6.67a 66.7±11.55b Keterangan: Huruf yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan pengaruh perlakuan yang berbeda nyata (p<0.05). Nilai yang tertera merupakan nilai rata-rata dan simpangan baku.
Pembahasan
11 perlakuan mengandung 0.035% HCN, sedangkan ikan mas mampu menoleransi HCN hingga 0.45% (Suprayudi et al. 2014)
Setelah dicerna, nutrien diserap dan didistribusikan oleh darah ke jaringan tubuh. Hasil analisis kimia darah ikan nila pada Tabel 3 menunjukkan bahwa penurunan palatabilitas pakan seiring penambahan MBK menyebabkan kimia darah juga semakin menurun. Kimia darah sangat dipegaruhi oleh nutrien dalam pakan dan jumlah pakan yang dikonsumsi oleh ikan. Seperti yang dijelaskan oleh Cheng et al. (2006) bahwa glukosa darah, trigliserida dan total kolesterol pada ikan kerapu meningkat dengan kadar lipid yang tinggi dalam pakan. Kadar glukosa berperan penting dalam penyediaan energi. Jumlah konsumsi pakan yang rendah akan menurunkan kadar glukosa. Kadar glukosa darah ikan yang diberi perlakuan 50%, 75% dan 100% MBK lebih rendah dari perlakuan tanpa MBK dan 25% MBK. Demikian juga halnya pada kadar kimia darah lainnya, yaitu trigliserida, kolesterol dan HDL. Ini sejalan dengan Stepanowska et al. (2007) bahwa ikan dalam kondisi kekurangan asupan pakan akan mengalami penurunan trigliserida dan total kolesterol. Rendahnya kadar kimia darah pada perlakuan 50%, 75% dan 100% MBK diduga tubuh membutuhkan energi yang besar untuk mengatasi stres metabolik karena adanya HCN dan radikal bebas dalam pakan. Kebutuhan energi biasanya diperoleh dari karbohidrat, lemak dan protein. Karena asupan pakan rendah, maka energi dari karbohidrat juga rendah, sehingga kebutuhan energi dipenuhi dari lemak dan protein, akibatnya retensi protein dan retensi lemak menjadi rendah (Tabel 6). Penurunan retensi protein dan retensi lemak juga dilaporkan pada ikan nila yang diberi pakan mengandung 0.027% HCN atau lebih (Alim 2013), sementara ikan mas yang diberi pakan mengandung 0.67% HCN atau lebih hanya mengalami penurunan retensi protein (Inara 2011).
Ikan dalam kondisi stres (stres metabolik), dalam hal ini akibat adanya HCN dan radikal bebas pada pakan, biasanya mudah terserang penyakit. Hal tersebut ditunjukkan dengan semakin meningkatnya total sel darah putih ikan yang diberi pakan perlakuan MBK (Tabel 4). Hal ini sejalan dengan Alim (2013) dan Suprayudi et al. (2014) bahwa total sel darah putih ikan nila dan ikan mas yang diberi perlakuan tepung bungkil biji karet semakin meningkat. Selain itu, kadar hematokrit dan hemoglobin ikan yang diberi pakan perlakuan MBK radikal bebas juga diduga berdampak pada penurunan kadar hematokrit dan hemoglobin ikan nila. Seperti yang dijelaskan dalam Tacon (1992) bahwa pengaruh patologik minyak ikan yang teroksidasi pada pakan terhadap Oncorhynchus mykiss menyebabkan hematokrit dan kadar hemoglobin menurun.
12
bebas dalam pakan yang dikonsumsi ikan juga diduga menyebabkan kadar air hati dan otot meningkat. Tubuh ikan memiliki sistem pertahanan sendiri terhadap radikal bebas. Hampir setiap sel menghasilkan enzim antioksidan yang disebut superoxide dismutase (SOD), katalase dan glutation peroksidase (GPx) (Sargent et al. 2002). Enzim ini melindungi sel selama metabolisme oksigen, secara aman menangkap radikal bebas berbahaya menjadi unsur seimbang seperti H2O,
sehingga semakin banyak radikal bebas yang menyerang asam lemak PUFA maka semakin banyak H2O yang dihasilkan. Hal tersebut dapat dilihat dari kadar air hati
dan otot yang lebih tinggi pada ikan yang diberi perlakuan 75% dan 100% MBK (Tabel 5).
Pengukuran IHS bertujuan untuk melihat besarnya penimbunan nutrien pada hati. Rendahnya IHS ikan yang diberi perlakuan 50% MBK atau lebih dibandingkan dengan tanpa MBK atau 25% MBK menunjukkan rendahnya nutrien yang disimpan dalam hati, hal ini dibuktikan dengan rendahnya kadar lemak hati ikan yang diberi perlakuan 50% MBK atau lebih.
13
4 SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Studi awal minyak biji karet (MBK) sebagai sumber lemak pada pakan ikan nila menunjukkan bahwa MBK belum dapat dimanfaatkan sebagai sumber lemak menggantikan minyak jagung pada pakan ikan nila. Hal ini ditunjukkan oleh kinerja pertumbuhan ikan menurun seiring dengan penambahan MBK.
Saran
Studi ini akan menjadi topik yang menarik untuk penelitian selanjutnya dengan memperbaiki processing minyak biji karet sehingga kerusakan minyak rendah dan meningkatkan palatabilitas pakan.
DAFTAR PUSTAKA
Abdullah BM, Salimon J, Yousif E, Salih N. 2012. Occurrence of cyanogenic glycoside and cyanide in the Malaysian rubber seed oil. JAAUBAS (In press).
Alim S. 2013. Evaluasi tepung bungkil biji karet hevea brasiliensis difermentasi cairan rumen domba sebagai sumber protein pakan ikan nila (Oreochromis niloticus). [Tesis]. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Anderson DP, Siwicki AK. 1995. Basic hematology and serology for fish health programs. Paper presented in second symposium on diseases in Asian Aquaculture “Aquatic Animal Health and the Environment”. Phuket, Thailand. 25 – 29th October 1993. 17p.
[AOAC]. 1990. Official Methods of Analysis, 14th ed. Airlington, V. A. AOAC. [APHA]. Standards Methods for Examination of Water and Wastewater. America
Public Health Association Inc, Washington DC 20th Edition.
Babatunde GM, Pond WG. 1990. Effects of graded levels of rubber seed meal and oil on energy and nitrogen utilization by growing rats. In: Nutritive value of Nigerian rubber seed (Hevea brasiliensis) meal and oil. Anim Feed Sci Technol 31: 313-321.
Bahri S, Tarmudji. 1984. Keracunan sianida pada ternak dan cara mengatasinya. Wartazoa 1(3): 61-64.
Blaxhall PC, Daisley KW. 1973. Routine haematological methods for use with fish blood. J Fish Biol 5: 577-581.
Chen C, Sun B, Li X, Li P, Guan W, Bi Y, Pan Q. 2013. N-3 essential fatty acids in Nile tilapia, Oreochromis niloticus: Quantification of optimum requirement of dietary linolenic acid in juvenile fish. Aquaculture 416–417: 99-104.
14
Fajimi AO, Babatunde GM, Ogulana FF, Oyijide A. 1993. Comparative utilization of rubber seed oil and palm oil by broilers in a humid tropical environment. Anim Feed Sci Technol 43:177-188.
Garling DR Jr, Wilson RP. 1977. Effects of dietary carbohydrate to lipid ratio on growth and body composition of fingerling channel catfish. Prog Fish Cult 39:43-47.
Inara C. 2011. Kajian tepung bungkil biji karet (TBBK) Hevea brasiliensis sebagai bahan baku pakan benih ikan mas Cyprinus carpio Linn. [Tesis]. Bogor: Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor.
Jacobs NJ, Vandemark PJ. 1960. The purification and properties of the alpha-glycerophosphate-oxidizing enzyme of Streptococcus faecalis 10C1. Arch Biochem Biophys 88: 250–255.
Lieberei R. Nahrstedt A, Selmar D, Gasparotto L. 1986. Occurrence of lotaustralin in the genus Hevea and changes of HCN-potential in developing organs of Hevea brasiliensis. Phytochemistry 25: 573–1578.
[NRC]. 1993. Nutrient Requirements of Fish. National Academy Press, Washington DC :102–134.
Nwokolo EN, Kitts DD. 1988. Growth parameters and plasma-tissue fatty acid profiles of rats fed rubber seed oil. Food Chem 30: 219-229.
Ramadhas AS, Jayaraj S, Muraleedharan C. 2005. Biodiesel production from high FFA rubber seed oil. Fuel 84: 335-340.
Ravindran V, Ravindran G. 1988. Some nutritional and anti-nutritional characteristics of para-rubber (Havea brasiliensis) seeds. Food Chem 30: 93-102.
Sargent JR, Bell JG, Bell MV, Henderson RJ, Tocher DR. 1995. Requirement criteria for essential fatty acids. J Appl Ichthyol 11:183-198.
Sargent JR, Tocher DR, Bell JG. 2002. The lipids. In: Halver JE and RW Hardy (eds). Fish Nutrition 3rd Ed. San Diego, California: Academic Press. pp 181-257.
Setyawardhani DA, Distantina S, Dewi N, Utami MD. 2010. Pengambilan asam lemak dari minyak biji karet dengan hidrolisis multistage. Ekuilibrium 1 (9): 11-15.
Siahaan S. 2009. Potensi pemanfaatan limbah biji karet (Hevea bransiliensis) sebagai sumber energi alternatif biokerosin untuk keperluan rumah tangga (Studi kasus di Desa Nanga Jetak Kecamatan Dedai Kabupaten Sintang Kalimantan Barat). [Tesis]. Bogor: Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.
Silam. 1998. Ekstraksi minyak biji karet (Hevea brasiliensis) dengan alat pengempa berulir (expeller) dan karakteristik mutu minyaknya. [Skripsi]. Bogor: Fakultas Teknologi Pertanian. Institut Pertanian Bogor.
Stepanowska K, Nedzarek A, Rakusa-Suszczewski S. 2007. Effects of starvation on the biochemical composition of blood and body tissue in the Antarctic fish Notothenia coriiceps (Richardson, 1844) and excreted metabolic products. Polar Biosci 20: 46–54.
15 Tacon AGJ. 1992. Nutritional fish pathology: Morphological signs of nutrient deficiency and toxicity in farmed fish. FAO Fish Technical Paper. No. 330. Rome, FAO. 75p.
Takeuchi T. 1988. Laboratory work chemical evaluation of dietary nutriens. In: Watanabe T (ed). Fish Nutrition and Mariculture. Tokyo: Department of Aquatic Bioscience. Tokyo University of Fisheries. JICA. 179-226.
Teshima S, Kanazawa A, Sakamoto M. 1982. Essential fatty acids of tilapia nilotica. Mem Fac Fish 31: 201–204.
Trinder P. 1969. Determination of glucose in blood using glucose oxidase with an alternative oxygen receptor. Ann Clin Biochem 6: 24–27.
Watanabe T. 1988. Fish nutrition and mariculture. Department of aquatic Bioscience. Tokyo University of Fisheries. JICA. 233p.
16
17 Lampiran 1 Prosedur analisis proksimat pakan dan dan tubuh ikan
A. Prosedur Wet Ashing (Pengabuan)
1) Sampel ditimbang 1 gram dimasukkan ke dalam Erlenmeyer 125 mL. 2) Ditambahkan HNO3 65% sebanyak 5 mL, dikerjakan di ruang asam.
3) Dibiarkan 1 jam tanpa pemanasan diruang asam, kemudian dipanaskan di atas hot plate pada suhu 80 °C selama 4-6 jam lalu didinginkan.
4) Tambahkan 0.4 mL H2SO4 pekat (panaskan kembali jika ada letupan kecil
±1 jam).
5) Volume sampel akan berkurang pada saat ada perubahan warna, lalu
teteskan larutan campuran HCLO4 : HNO3 (2:1) sebanyak 3 tetes, panaskan
selama lebih kurang 1 jam. Terjadi perubahan warna coklat menjadi kuning lalu bening.
6) Tambahkan 2 mL akuades + 0.6 mL HCl (p). 7) Panaskan kembali sampai larut lalu didinginkan.
8) Pindahkan ke dalam labu takar kemudian larutkan menjadi 100 mL. B. Preparasi Larutan
1. Larutan A ((NH4)6MO7O24.4H2O 10% = Amonium Molibdat 10%)
1) 10 gram Amonium Molibdat + 60 mL Akuades.
2) Tambahkan 28 mL H2SO4 pekat secara bertahap (panas).
3) Buat larutan sampai 100 mL dengan menambahkan akuades. 4) Dinginkan larutan tersebut dalam suhu kamar.
2. Larutan B (dibuat sebelum analisis)
1) 10 mL larutan A + 60 mL akuades + 5 gram FeSO4.7H2O.
2) Buat larutan sampai 100 mL dengan menambah akuades. 3. Larutan Standar untuk Analisis P
Larutkan 4.394 gram KH2PO4 dalam akuades sampai 1 liter (untuk
mendapatkan konsetrasi P = 1000 ppm). C. Analisis Fosfor
2) Masing-masing volume tersebut ditambah akuades sampai 3 mL lalu diaduk menggunakan vortex kemudian ditambah larutan B sebanyak 2 mL.
3) Baca pada spektrofotometer (UV Visible) dengan panjang gelombang 660 nm.
2. Pakan
1) Larutan hasil Wet Ashing pakan di labu takar 100 mL di pipet 0.2 mL lalu diencerkan dengan akuades bebas mineral 3 mL (diaduk) + 2 mL Larutan B (diaduk).
18
Kadar Protein Tahap Oksidasi
1) Sampel ditimbang sebanyak 0.5 g dan dimasukkan ke dalam labu Kjeldahl. 2) Katalis (K2SO4+CuSO4.5H2O) dengan rasio 9:1 ditimbang sebanyak 3 g dan
dimasukkan ke dalam labu Kjeldahl.
3) 10 mL H2SO4 pekat ditambahkan ke dalam labu Kjeldahl dan kemudian
labu tersebut dipanaskan dalam rak oksidasi/digestion pada suhu 400°C selama 3-4 jam sampai terjadi perubahan warna cairan dalam labu menjadi hijau bening.
4) Larutan didinginkan ditambah 100 mL air destilasi. Kemudian larutan dimasukkan ke dalam labu takar dan diencerkan dengan Aquades sampai volume larutan mencapai 100 mL. Larutan sampel siap untuk didestilasi. Tahap Destilasi
1) Beberapa tetes H2SO4 dimasukkan ke dalam labu, sebelumnya labu diisi
setengahnya dengan akuades untuk menghindari kontaminasi oleh amonia lingkungan. Kemudian didihkan selama 10 menit.
2) Erlenmeyer diisi 10 mL H2SO4 0.05 N dan ditambahkan 2 tetes indikator
methyl red diletakkan di bawah pipa pembuangan kondensor dengan cara dimiringkansehingga ujung pipa tenggelam dalam cairan.
3) Sebanyak 5 mL larutan sampel dimasukkan ke dalam tabung destilasi melalui corong yang kemudian dibilas dengan akuadesdan ditambahkan 10 mL NaOH 30% lalu dimasukkan melalui corong tersebut dan ditutup. 4) Campuran alkalin dalam labu destilasi disuling menjadi uap air selama 10
menit terjadi pengembunan pada kondensor.
5) Labu erlenmeyer diturunkan hingga ujung pipa kondensor berada di leher labu pada permukaan larutan. Kondensor dibilas dengan akuades selama 1-2 menit.
Tahap Titrasi
1) Larutan hasil destilasi ditritasi dengan larutan NaOH 0.05 N. 2) Volume hasil titrasi dicatat.
3) Prosedur yang sama juga dilakukan pada blanko.
Kadar Protein (%) = 0.0007 * x (Vb – Vs) x 6.25 ** x 20 x 100 S
Keterangan :
Vb : Volume hasil titrasi blanko (mL) Vs : Volume hasil titrasi sampel (mL) S : Bobot sampel (g)
* : Setiap mL 0.05 NaOH ekivalen dengan 0.0007 g Nitrogen ** : Faktor Nitrogen
Kadar Lemak
Metode ekstraksi Soxhlet
19 2) Sampel ditimbang sebanyak 3-5 gram (A), dan dimasukkan ke dalam selongsong tabung filter dan dimasukkan ke dalam soxhlet dan pemberat diletakkan di atasnya.
3) N-hexan 100-150 mL dimasukkan ke dalam soxhlet sampai selongsong terendam dan sisa N-hexan dimasukkan ke dalam labu.
4) Labu yang telah dihubungkan dengan soxhlet dipanaskan di atas waterbath sampai cairan yang merendam sampel dalam soxhlet berwarna bening. 5) Labu dilepaskan dan tetap dipanaskan hingga N-hexan menguap.
6) Labu dan lemak yang tersisa dipanakan dalam oven selama 15-60 menit, kemudian didinginkan dalam desikator selama 15-30 menit dan ditimbang (X2).
Metode Folch
1) Labu silinder dioven terlebih dahulu pada suhu 110°C selama 1 jam, didinginkan dalam desikator selama 30 menit kemudian ditimbang (X1). 2) Sampel ditimbang sebanyak 2-3 gram (A) dan dimasukkan ke dalam gelas
homogen dan ditambahkan larutan kloroform/methanol (20 x A), sebagian disisakan untuk membilas pada saat penyaringan.
3) Sampel dihomogenizer selama 5 menit setelah itu disaring dengan vacuum pump.
4) Sampel yang telah disaring tersebut dimasukkan dalam labu pemisah yang telah diberi larutan MgCl2 0.03 N(0.2 x C), kemudian dikocok dengan kuat
minimal selama 1 menit kemudian ditutup dengan aluminium foil dan didiamkan selama 1 malam.
5) Lapisan bawa yang terdapat dalam labu pemisah disaring ke dalam labu silinder kemudian dievaporator sampai kering. Sisa kloroform/methanol yang terdapat dalam labu ditiup dengan menggunakan vacuum setelah itu ditimbang (X2).
Kadar lemak (%) = X2 - X1 x 100 A
Kadar Air
1) Cawan dipanaskan dalam oven pada suhu 100oC selama 1 jam kemudian dimasukkan dalam desikator selama 30 menit dan ditimbang (X1).
2) Bahan ditimbang 2-3 g (A).
3) Cawan dan bahan dipansakan dalam oven pada suhu 110oC selama 4 jam kemudian dimasukkan dalam desikator selam 30 menit dan ditimbang (X2). Kadar air (%) = (X1 + A) - X2 x 100
A Kadar Abu
1) Cawan dipanaskan dalam oven pada suhu 100oC selama 1 jam dan kemudian dimasukkan dalam desikator selama 30 menit dan ditimbang (X1).
2) Bahan ditimbang 2-3 g (A).
20
Kadar abu (%) = X2– X1 x 100 A
Kadar Serat Kasar
1) Kertas filter dipanaskan dalam oven selama 1 jam pada suhu 110oC setelah itu didinginkan dalam desikator selama 15 menit dan ditimbang (X1). 2) Sampel ditimbang sebnayak 0.5 g (A) dimasukkan ke dalam Erlenmeyer
250 mL.
3) H2SO4 0.3 N sebanyak 50 mL ditambahkan ke dalam Erlenmeyer kemudian
dipanaskan di atas pembakar Bunsen selama 30 menit. Setelah itu NaOH 1.5 N sebanyak 25 mL ditambahkan ke dalam Erlenmeyer dan dipanaskan kembali selama 30 menit.
4) Larutan dan bahan yang telah dipanaskan kemudian disaring dalam corong Buchner dan dihubungkan pada vacuum pump untuk mempercepat filtrasi.
5) Larutan dan bahan yang ada pada corong Buchner kemudian dibilas secara berturut-turut dengan 50 mL air panas, 50 mL H2SO4 0.3 N, 50 mL air
panas dan 25 mL aseton.
6) Kertas saring dan isinya dimasukkan dalam cawan porselin lalu dipanaskan dalam oven 105-110°C selama 1 jam kemudian didinginkan dalam desikator 5-15 menit dan ditimbang (X2).
7) Setelah itu dipanaskan dalam tanur 600oC hingga berwarna putih atau menjadi abu (sekitar 4 jam). Kemudian dimasukkan dalam oven 105-110 ˚C selama 15 menit, didinginkan dalam desikator selama 5-15 menit dan ditimbang (X3).
Kadar serat kasar (%) = (X2 - X1 - X3) x 100 A
Lampiran 2 Prosedur pengukuran asam lemak (Takeuchi 1988)
Proses penyiapan analisis asam lemak Gas Liguid Chromatography (GLC) adalah sebagai berikut :
1. Ekstraksi lemak (metode Folch)
Sample dihancurkan dengan blender. Selanjutnya diambil sebanyak 15 g sampel dan ditambah dengan 100 mL campuran kloroform-metanol (2:1) dan dihomogenisasi selama 5 menit. Homogenat yang telah dipisahkan dengan cara penyaringan, dan hasil saringannya dipindahkan ke dalam labu pemisah (200-300 mL) dan ditambahkan 10 mL MgCl2 0.03 M, dikocok kuat-kuat selama 1 menit.
Setelah tercampur merata, pada labu tadi diisikan gas nitrogen dan ditutup rapat. Campuran tersebut dibiarkan selama satu malam pada temperature kamar sampai terjadi dua lapisan cairan. Lapisan atas dibuang dan lapisan bawah dipisahkan kedalam labu didih yang sudah diketahui bobotnya. Larutan tersebut dikeringkan dalam keadaan vacum. Lemak yang terkumpul ditimbang.
2.Saponifikasi
21 pindahkan kedalam corong pemisah (200-300 mL) dan ditambahkan 40 mL aquades dan 30 mL heksan. Selanjutnya dikocok selama satu menit sampai terjadi dua lapisan cairan. Lapisan atas yang terjadi dibuang dan lapisan bawah dipindahkan ke dalam corong pemisah lainnya lalu diekstraksi dengan heksan 40 mL. Larutan dikocok selama satu menit sampai terjadi dua lapisan cairan. Lapisan atas dibuang dan lapisan bawah dipindahkan ke dalam corong pemisah, dan kemudian ditambahkan heksan 50 mL, 2-3 tetes metal jingga dan 10 mL HCl 2 N dan dikocok lagi selam satu menit sampai terjadi dua lapisan cairan. Lapisan bawah dibuang dan lapisan atas dicuci dengan aquades 3-5 kali (20, 30, 40 dan 50 mL) dan dikocok kembali selama 1 menit. Lapisan bawah dibuang dan lapisan atas dicek pH-nya sampai netral, lalu diuapkan dalam vacum evaporator. Asam lemak yang terbentuk ditimbang.
3. Preparasi metal ester asam lemak
Tujuan preparasi metal ester asam lemak ini adalah untuk mendapatkan kandungan asam lemak dalam bahan yang dianalsis dalam bentuk metal ester asam lemaknya. Hasil saponifikasi dimasukkan ke dalam labu didih (100 mL) dan ditambahkan 5 mL campuran BF3-metanol 20%. Labu ditutup, kemudian mL dipanaskan pada suhu 45°C selama 30 menit dan ditambahkan 0.4-0.8 mL NaCl jenuh. Campuran tersebut diekstrak dengan 0.4 mL petroleum eter. Hasil ekstraksi tersebut ditambahkan 1 mL heksan dan siap untuk disuntikkan pada GLC.
Lampiran 3 Prosedur analisis asam sianida pada pakan Reagen/Pereaksi:
1) Buffer CN ( 138 gram NaH2PO4.H2O dilarutkan menjadi 1 liter aquadest) 2) Chloramin T 1% (1 g dilarutkan menjadi 100 mL aquadest)
3) Asam Barbiturat-Pyridin (3 g asam barbiturat ditambah 15 mL pyridin dan 3 mL HCl 37%, ditambahkan akuades hingga volumenya 50 mL)
Metode kerja:
1) Sampel sekitar 1 g, dilarutkan dengan akuades sebanyak 10 mL, ditutup dan didiamkan semalam.
2) Sampel disentrifugasi dengan kecepatan 5000 rpm.
3) Supernatan sampel dipipet sebanyak 0.1 mL, lalu dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan akuades sebanyak 1.9 mL.
4) Dimasukkan ke dalamnya 2 mL larutan buffer CN dan 0.5 mL Chloramin T 1%.
5) Larutan dihomogenkan dan didiamkan selama 2 menit. Setelah itu ditambahkan 0.5 mL larutan asam barbiturat-pyridin, kemudian dihomogenkan kembali.
6) Dibuat deret standar dari larutan standar KCN 10 ppm, dengan deret 0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1 ppm. Dan dilakukan prosedur yang sama dengan sampel, yaitu tahap 3 sampai tahap 5.
22
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Aceh tanggal 15 Desember 1988 dari ayah Sukari dan ibu Saidah. Penulis merupakan anak keempat dari 8 bersaudara. Pendidikan formal yang pernah dilalui penulis adalah SDN 1 Blang paku (lulus tahun 2001), SMPN 2 Wih Pesam (lulus tahun 2004), dan SMAN 1 Takengon (lulus tahun 2007). Penulis menempuh pendidikan sarjana setelah lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI) 2007. Setelah satu tahun melalui program Tingkat Persiapan Bersama (TPB), penulis masuk program studi Ilmu dan Teknologi Kelautan pada Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan (FPIK), dan lulus pada tahun 2011. Pada tahun 2012, penulis melanjutkan studinya dengan menempuh Program Magister pada program studi Ilmu Akuakultur, Sekolah Pascasarjana, IPB.
Program Magister ditempuh melalui Beasiswa Unggulan Dalam Negeri (BUDN) yang diberikan oleh Direktorat Pendidikan Tinggi (DIKTI), Kementerian Pendidikan dan Kebudayaan (Kemendikbud).
