HUBUNGAN EKSPRESI PULASAN IMUNOHISTOKIMIA PROTEIN GENE PRODUCT (PGP9.5) PADA LAPISAN FUNGSIONAL ENDOMETRIUM DAN JARINGAN ENDOMETRIOSIS DI OVARIUM
TESIS
LOKOT DONNA LUBIS NIM. 087108009
PROGRAM PENDIDIKAN DOKTER SPESIALIS DEPARTEMEN PATOLOGI ANATOMI
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN
HUBUNGAN EKSPRESI PULASAN IMUNOHISTOKIMIA PROTEIN GENE PRODUCT (PGP9.5) PADA LAPISAN FUNGSIONAL ENDOMETRIUM DAN JARINGAN ENDOMETRIOSIS DI OVARIUM
TESIS
Untuk Memperoleh Gelar Spesialis Patologi Anatomi Dalam Program Pendidikan Dokter Spesialis Pada Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara
LOKOT DONNA LUBIS NIM. 087108009
PROGRAM PENDIDIKAN DOKTER SPESIALIS DEPARTEMEN PATOLOGI ANATOMI
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN
LEMBARAN PERSETUJUAN
Judul Penelitian : Hubungan Ekspresi Pulasan Imunohistokimia Protein Gene Product (PGP9.5) pada Lapisan Fungsional Endometrium dan Jaringan Endometriosis di Ovarium
Nama : dr. Lokot Donna Lubis
NIM : 087108009
Program Studi : Program Pendidikan Dokter Spesialis I Departemen Patologi Anatomi
Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara
Menyetujui
Pembimbing I, Pembimbing II,
Dr.H. Soekimin, SpPA(K) Dr. Joko S Lukito, SpPA(K)
NIP. 194808011980031001 NIP. 19460308 1978021001
Ketua Program Studi Ketua Departemen Patologi Anatomi FK USU Patologi Anatomi FK USU
Dr.H. Delyuzar, MKed(PA) SpPA(K) Dr.T.Ibnu Alferraly, MKed(PA) SpPA NIP. 196302191990031001 NIP. 196202121989111001
PERNYATAAN
Hubungan Ekspresi Pulasan Imunohistokimia Protein Gene Product (PGP9.5) pada Lapisan Fungsional Endometrium dan Jaringan
Endometriosis di Ovarium
Hasil Penelitian
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam tesis ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Medan, 1 April 2014
Telah diuji pada Tanggal : 7 April 2014
PANITIA PENGUJI TESIS
Penguji I : Prof. Dr. H. M. Nadjib Dahlan Lubis, SpPA(K) Penguji II : Dr. Sumondang Pardede SpPA
UCAPAN TERIMA KASIH
Alhamdulillah, puji syukur kehadirat ALLAH SWT berkat rahmat dan ridho-Nya sehingga Penulis dapat menyelesaikan penelitian dengan judul “Hubungan Ekspresi Pulasan Imunohistokimia Protein Gene Product (PGP9.5) pada Lapisan Fungsional Endometrium dan Jaringan Endometriosis di Ovarium”.
Tesis ini merupakan salah satu syarat yang harus dilaksanakan Penulis dalam rangka memenuhi persyaratan untuk meraih gelar untuk meraih gelar keahlian dalam Program Pendidikan Dokter Spesialis Patologi Anatomi pada Fakultas Kedokteran Universits Sumatera Utara.
Dengan selesainya tesis ini, perkenankanlah Penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Rektor Universitas Sumatera Utara, Prof. Dr. Syahril Pasaribu, SpA(K) dan seluruh jajarannya yang telah memberi kesempatan kepada Penulis untuk mengikuti pendidikan di Program Pendidikan Dokter Spesialis Patologi Anatomi pada Fakultas Kedokteran Universits Sumatera Utara. Prof. Dr. Chairuddin P. Lubis, SpA (K), DTM&H, selaku Rektor pada masa saya memasuki program Pendidikan Dokter Spesialis Patologi Anatomi, yang telah memberikan kesempatan kepada saya untuk mengikuti pendidikan Dokter Spesialis Patologi Anatomi pada Fakultas Kedokteran Universits Sumatera Utara.
Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara, Prof. Dr. Gontar A. Siregar, SpPD (KGEH) atas kesempatan dan fasilitas yang diberikan kepada Penulis untuk mengikuti dan menyelesaikan pendidikan di Program Pendidikan
Dokter Spesialis Patologi Anatomi pada Fakultas Kedokteran Universits Sumatera Utara.
Terima kasih yang tidak terhingga dan penghargaan yang setinggi-tingginya Penulis sampaikan kepada Dr. H. Soekimin, SpPA(K) (pembimbing I) dan Dr. H. Joko S. Lukito, SpPA(K) (pembimbing I), yang telah mengorbankan waktu untuk memberikan bimbingan, bantuan serta sara-saran yang bermanfaat kepada Penulis dalam penyelesaian tesis ini.
Terima kasih yang sebesar-besanya kepada Dr. H. Soekimin, SpPA(K) dan Dr. Jessy Chrestella MKed(PA) SpPA, yang telah memberi izin kepada Penulis untuk untuk mengambil sampel data pada laboratorium Patologi Anatomi yang dipimpin.
Terima kasih kepada Prof. Dr. H. M. Nadjib Dahlan Lubis, SpPA(K) dan Dr. Sumondang Pardede SpPA yang telah bersedia untuk menguji tesis penelitian saya.
Terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Dr. T. Ibnu Alferraly, MKed(PA) SpPA selaku Ketua Departemen Patologi Anatomi FK USU dan Dr. H. Delyuzar, MKed(PA) SpPA(K) selaku Ketua Program Pendidikan Dokter Spesialis Patologi Anatomi FK USU atas segala bimbingannya selama penulis menjalankan Pendidikan Dokter Spesialis Patologi Anatomi pada Fakultas Kedokteran Universits Sumatera Utara. Tidak lupa penulis mengucapkan terima kasih kepada Prof. Dr. Gani W. Tambunan, SpPA(K), Prof. Dr. H. M. Nadjib D. Lubis, SpPA(K), Dr. Harkingto Wibisono SpPA, Dr. Joko S. Lukito, SpPA(K), Dr. H. Soekimin, SpPA(K), Dr. Hj. Kemala Intan, MPd, Dr. Betty, MKed (PA) SpPA,
Dr. Lidya Imelda Laksmi, MKed(PA) SpPA, Dr. Jessy Chrestella, MKed(PA) SpPA, Dr. Sumondang M. Pardede, SpPA, Dr. Jamaluddin Pane, SpPA, Dr. Stephan Udjung, SpPA, Dr. Lely Hartati, MKed(PA) SpPA yang telah membimbing penulis selama menjalankan Pendidikan Dokter Spesialis Patologi Anatomi pada Fakultas Kedokteran Universits Sumatera Utara dan di RSUP H. Adam Malik Medan, dan tidak lupa penulis mengucapkan terima kasih kepada seluruh staf di Departemen Patologi Anatomi FK USU yang telah membantu penulis menyelesaikan tesis ini.
Terima kasih kepada Dr. Yuki Yunanda yang membantu konsultasi statistik dan Dr. Herza Piasiska MKed(PA) SpPA yang telah bersedia untuk membantu penulis menyelesaikan tesis ini.
Akhirnya, Penulis menyadari bahwa isi hasil penelitian ini masih perlu mendapat koreksi dan masukan untuk kesempurnaan. Oleh karena itu Penulis berharap adanya kritik serta saran untuk penyempurnaan tulisan ini. Semoga penelitian ini bermanfaat bagi kita semua. Amin.
Medan, 10 April 2014 Penulis
Lokot Donna Lubis NIM. 087108009
DAFTAR ISI
Halaman
Lembar Persetujuan... i
Lembar Pernyataan... ii
Ucapan Terima Kasih... iv
Daftar Isi... vii
Daftar Gambar... xi
Daftar Tabel... xii
Daftar Singkatan... xiii
Abstrak... ix
Bab 1. Pendahuluan 1 1.1. Latar Belakang Penelitian... 1
1.2. Perumusan Masalah... 4 1.3. Hipotesa... 4 1.4. Tujuan Penelitian... 4 1.4.1. Tujuan Umum... 4 1.4.2. Tujuan Khusus... 5 1.4. Manfaat Penelitian ... 5
Bab 2. Tinjauan Pustaka 2.1. Anatomi... 6
2.2. Histologi... 12
2.3. Persarafan uterus dan ovarium... 24
2.5. Patogenesis... 28 2.6. Gambaran Klinis ... 31 2.7. Distribusi Endometriosis... 34 2.8. Pemeriksaan Patologi... 36 2.8.1. Gambaran Makroskopis... 36 2.8.2. Gambaran mikroskopis... 39 2.8.3. Imunohistokimia... 43 2.9. Klasifikasi Endometriosis... 43 2.10. Diagnosis Banding... 45
2.11. Penatalaksanaan dan Prognosis... 47
2.12. Serabut Saraf dan Endometriosis... 48
2.13. Protein Gene Product (PGP9.5)... 53
2.14. Kerangka Konsepsional... 54
Bab 3. Bahan dan Metoda... 55
3.1. Rancangan Penelitian... 55
3.2. Tempat Dan Waktu Penelitian... 55
3.3. Subjek Penelitian... 55
3.3.1. Populasi... 55
3.3.2. Sampel... 56
3.4. Jumlah Sampel... 56
3.5. Kriteria Inklusi Dan Eksklusi... 57
3.5.1. Kriteria Inklusi... 57
3.6. Cara kerja ... 58
3.6.1. Pembuatan Sediaan Mikroskopis... 58
3.6.2. Prosedur sebelum pulasan PGP9.5... 59
3.6.3. Protokol Pemulasan PGP9.5... 60
3.6.4. Penilaian Pulasan PGP9.5... 61
3.7. Alat dan bahan penelitian... 62
3.7.1. Alat-alat Penelitian... 62 3.7.2. Bahan penelitian... 62 3.8. Instrumen Penelitian... 64 3.9. Kerangka Operasional... 64 3.10. Variabel Penelitian... 65 3.11. Defenisi Operasional... 65 3.12. Analisis Data... 66
Bab 4. Hasil dan Pembahasan... 67
4.1. Hasil Penelitian... 67
4.1.1. Karakteristik Penderita Endometriosis Ovarium... 67
4.1.2. Distribusi Serabut Saraf pada Lapisan Fungsional Endometrium dan Lesi Endometriosis di Ovarium 68 4.2. Pembahasan... 70
Bab 5. Kesimpulan dan Saran ... 79
5.1. Kesimpulan... 79
5.2. Saran... 80
Daftar Pustaka... 81
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Sistem reproduksi perempuan dan struktur singkat ovarium... 12
Gambar 2. Anatomi uterus...……... 12
Gambar 3. Endometrium normal...……... 17
Gambar 4. Sel kelenjar endometrium... 18
Gambar 5. Stroma endometrium... 20
Gambar 6. Arteriole spiral pada fase proliferatif... 21
Gambar 7. Gambaran histologis utama pada setiap fase siklus menstruasi.... 22
Gambar 8. Epitel cuboidal permukaan ovarium pada perimenopause... 23
Gambar 9. Gambaran makroskopis endometriosis... 38
Gambar 10. Gambaran mikroskopis endometriosis... 40
Gambar 11. Gambaran mikroskopis epitel endometrium pada endometriosis ovarium... 46
DAFTAR TABEL
Halaman Tabel 1. Lokasi endometriosis berdasarkan hasil biopsi... 35 Tabel 2. Klassifikasi endometriosis berdasarkan revised american
Society for reproductive medicine... 44 Tabel 4.1. Distribusi penderita endometriosis ovarium berdasarkan usia 67 Tabel 4.2. Distribusi serabut saraf pada lapisan fungsional penderita
endometriosis ovarium untuk keseluruhan... 68 Tabel 4.3. Distribusi serabut saraf pada lapisan fungsional penderita
endometriosis ovarium dengan ekspresi PGP9.5 positif... 68 Tabel 4.4. Distribusi serabut saraf pada lesi endometriosis di ovarium
untuk keseluruhan... 69 Tabel 4.5. Distribusi serabut saraf pada lesi endometriosis di ovarium
DAFTAR SINGKATAN
CD : Cluster differentiation DNA : Deoxyribo Nucleat Acid LPB : Lapangan pandang besar
CGRP : Calcitonin gene related peptide
IgA : Immunoglobuline A
IgG : Immunoglobuline G
IgM : Immunoglobuline M
GNRH : Gonadotropin releasing hormone
MRI : Magnetic Resonance Imaging
NF : Neurofilament
NGF : Nerve Growth Factor NPY : Neuropeptida Y PAS : Periodic acid-Schiff PGP9.5 : Protein Gene Product
SD : Simpangan Deviasi
SP : Substance P
UCH-L1 : Ubiquitin Carboxyl-terminal hydroxylase VIP : Vasoactive intestinal polypeptide
ABSTRAK
Hubungan Ekspresi Pulasan Imunohistokimia Protein Gene Product (PGP9.5) pada Lapisan Fungsional Endometrium dan Jaringan
Endometriosis di Ovarium Lokot Donna Lubis, Soekimin, Joko S Lukito Departemen Patologi Anatomi, Fakultas Kedokteran
Universitas Sumatera Utara, Medan
Latar Belakang. Endometriosis adalah kondisi dimana jaringan endometrium yang terdiri dari epitel kelenjar maupun stroma ditemukan pada lokasi di luar rongga uterus. Pada penelitian endometriosis terbaru saat ini didapati bahwa terdapat perbedaan kepadatan distribusi serabut saraf antara perempuan penderita endometriosis dengan perempuan tanpa endometriosis. Beberapa penanda saraf digunakan untuk mengidentifikasi serabut saraf pada lapisan endometrium seperti Protein Gene Product (PGP9.5) yang merupakan penanda spesifik untuk serabut saraf bermyelin dan tidak bermyelin. Ekspresi PGP 9.5 dapat dijumpai pada berbagai lesi endometriosis termasuk lesi endometriosis di ovarium.
Tujuan. Tujuan penelitian ini adalah melihat apakah serabut saraf yang dipulas dengan PGP9.5 dijumpai pada lapisan fungsional endometrium dan jaringan endometriosis di ovarium pada penderita endometriosis ovarium dan melihat hubungan ekspresi keduanya.
Metode. Penelitian ini adalah penelitian deskriptif analitik dengan pendekatan cross sectional. Sampel penelitian adalah blok parafin berasal dari jaringan endometriosis di ovarium dan jaringan endometrium uterus. Sejumlah 50 sampel dipulas dengan imunohistokimia PGP9.5 dan hasil ekspresi pulasan serta hubungannya dianalisis dengan uji statistik.
Hasil. Serabut saraf yang terpulas PGP9.5 dijumpai pada lapisan fungsional endometrium pada 16% penderita dan distribusinya adalah 0.049±0.147/mm2. Serabut saraf yang terpulas PGP9.5 pada lesi endometriosis ovarium dijumpai pada 12% penderita dan distribusinya adalah 0.173±0.498/mm2. Tidak terdapat hubungan antara serabut saraf yang terpulas dengan PGP9.5 pada lapisan fungsional endometrium dan pada lesi endometriosis di ovarium (p=0.422).
Kesimpulan. Tidak terdapat hubungan antara serabut saraf yang terpulas dengan PGP9.5 pada lapisan endometrium dan pada lesi endometriosis di ovarium.
Kata Kunci. Protein Gene Product (PGP9.5), Endometriosis, Lapisan Endometrium, Endometriosis ovarium.
ABSTRACT
The Correlation of Protein Gene Product (PGP9.5) Expression on Functional Endometrial Layer with Ovarian Endometriotic Lesions
Lokot Donna Lubis, Soekimin, Joko S Lukito Department of Anatomical Pathology, Faculty of Medicine
University of Sumatera Utara, Medan
Background. Endometriosis is a condition characterized by epithelial endometrial gland and stroma found outside of the uterine cavity. More recently, there is accumulating literature describing nerve fiber density differences between women with diagnosed endometriosis and women without endometriosis. Neuronal markers were used to discover nerve fibers presence within endometrial layers such as protein gene product 9.5 (PGP9.5) which was a specific marker for unmyelinated and myelinated nerve fibers. PGP9.5 has also been demonstrated in various endometriotic lesions such as ovarian endometriotic lesions.
Objectives. To investigate the expression of PGP9.5 in nerve fibers within functional layer of endometrium and ovarian endometriotic lesions and to analyze their correlations.
Methods. This is an analytical descriptive study with cross sectional approach. The samples are the ovarian endometriotic lesions and the endometrial layer tissue embbeded in paraffin wax. Fifty paraffin embbeded tissues will be stain with PGP9.5. The expressions and their correlations will be analyzed with statistical analysis.
Results. Nerve fibres stained with PGP9.5 were detected in functional layer of endometrium in 16% of women with ovarian endometriotic lesions and the density was 0.049±0.147/mm2. Nerve fibres stained with PGP9.5 were detected in ovarian endometriotic lesions in 12% of women with ovarian endometriotic lesions and the density was 0.173±0.498/mm2. No correlations found between
PGP9.5-immunoactive fibres expression in functional layer of endometrium and in ovarian endometriotic lesions (p=0.422).
Conclusions: No correlations found between PGP9.5-immunoactive fibres expression in functional layer of endometrium and in ovarian endometriotic lesions.
Key Words: Protein Gene Product (PGP9.5), Endometriosis, Endometrial Layer, Ovarian Endometriosis
