IMUNOGENISITAS HEAT KILLED Aeromonas hydrophila STRAIN GPl-02, GL-01, DAN GJ-01 PADA IKAN LELE DUMBO (Clarias gariepinus)

(1)

IMUNOGENISITAS

HEAT KILLED

Aeromonas hydrophila

STRAIN GPl-02, GL-01, DAN GJ-01 PADA IKAN LELE

DUMBO

(Clarias gariepinus)

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana (SI)

Oleh:

HANI INAYATI 1201070051

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

(2)

HALAMAN PERSETUJUAN

(3)

(4)

(5)

MOTTO

“Barangsiapa yang menapaki suatu jalan dalam rangka mencari ilmu maka Allah

akan memudahkan baginya jalan ke Surga”.

(H.R. Ibnu Majah & Abu Dawud)

“Man Jadda Wa Jadda”

Barang siapa yang bersungguh - sungguh maka akan mendapatkannya.

“Pendidikan merupakan perlengkapan paling baik untuk hari tua.”

(Aristoteles)

“Yang penting itu bukan apa yang kita ketahui tapi apa yang kita pelajari.”

(6)

HALAMAN PERSEMBAHAN

Segala puji syukur saya panjatkan kehadirat Allah SWT yang selalu

melimpahkan segala rahmat, hidayah dan inayahNya memberikan berkah

sehingga diberikan kemudahan dan kelancaran. Skripsi ini saya persembahkan

kepada:

 Bapa (Amrullah) dan Ummi (Siti Munjidah) yang sangat saya sayangi

dan cintai, yang tidak henti-hentinya selalu mendoakan, memberi

dukungan, motivasi yang sangat luar biasa secara moril maupun

materil, sehingga saya dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik.

Semoga Allah selalu memberikan kesehatan, rahmat dan hidayahNya.

 Adik saya satu-satunya yang saya sayangi Zaim Fikri Rabbani yang

selalu mendoakan dan memberikan semangat.

 Keluarga besar saya yang senantiasa mendoakan dan memberi

(7)

UCAPAN TERIMAKASIH

Alhamdulillahirobbil’alamin, puji syukur penulis panjatkan kepada Allah

SWT yang telah melimpahkan rahmat dan hidayahnya sehingga penulis dapat

menyelesaikan skripsi ini yang berjudul “IMUNOGENISITAS HEAT KILLED

Aeromonas hydrophila STRAIN GPl-02, GL-01, DAN GJ-01 PADA IKAN

LELE DUMBO (Clarias gariepinus)”. Sholawat dan salam senantiasa tercurahkan kepada junjungan kita Nabi Muhammad SAW.

Penulis menyadari bahwa berbagai keterbatasan, sehingga penyelesaian

skripsi ini tidak lepas dari bantuan dan dukungan berbagai pihak yang sangat

berarti, untuk itu penulis mengucapkan terima kasih kepada Dini Siswani Mulia,

S.Pi., M.Si selaku dosen pembimbing I dan Drs. Heri Maryanto, M.Si. selaku

dosen pembimbing II yang telah berkenan meluangkan waktu untuk membimbing,

mengarahkan, memberi masukan dan dukungan sehingga penyusunan skripsi ini

dapat terselesaikan.

Ucapan terimakasih dan penghargaan juga penulis sampaikan kepada:

1. Bapak Drs. Pudiyono, M.Hum Selaku Dekan Fakultas Keguruan Ilmu

Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

2. Bapak Arief Husin, M.Si selaku Ketua Progam Studi Pendidikan Biologi, yang

senantiasa memberikan wacana dan pelayanan mengenai proses akademik.

3. Bapa dan ummi tercinta serta keluarga besarku yang selalu memberikan doa,

semangat, dan dukungan.

4. Rekan penelitianku, Cintya Windarti dan Dio Alif Nugroho yang telah

membantuku dan berjuang bersama dalam penelitian. Terimakasih atas

kerjasama dan motivasinya.

5. Seluruh sahabat mahasiswa Progam Studi Pendidikan Biologi angkatan 2012,

(8)

6. Teman kos puri nuran, Cintya, Arum, Mbii, Lisa, Dika, Mila, dan Elsa yang

telah memberikan semangat dan dukungannya.

7. Semua pihak yang tidak mungkin peneliti sebutkan satu persatu yang telah

membantu baik secara langsung maupun tidak langsung.

Penulis berdoa dan berharap semoga semua kebaikan yang telah diberikan

mendapatkan balasan yang baik dari Allah SWT. Penulis menyadari bahwa skripsi

ini masih jauh dari kata sempurna. Oleh karena itu, kritik dan saran yang

membangun sangat penulis harapkan demi kesempurnaan skripsi ini dan semoga

skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua.

Purwokerto, 13 Agustus 2016

(9)

IMUNOGENISITAS HEAT KILLEDAeromonas hydrophila STRAIN GPl-02, GL-01, DAN GJ-01 PADA IKAN LELE DUMBO

(Clarias gariepinus)

Hani Inayati 1201070051

Ikan lele dumbo (Clarias gariepinus) adalah salah satu spesies ikan air tawar yang memiliki prospek yang baik untuk dibudidayakan. Dalam proses budidaya masih terdapat kendala yaitu penyakit. Salah satu penyebab penyakit utama pada lele dumbo adalah bakteri A. hydrophila dan penyakit yang disebabkannya adalah penyakit MAS (Motile Aeromonas Septicemia). Upaya penanggulangan penyakit MAS dilakukan dengan antibiotik dan obat-obatan, tetapi akan mengakibatkan mikroorganisme menjadi resisten. Oleh karena itu dilakukan pencegahan menggunakan vaksin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui imunogenisitas antigen yang berasal dari bakteri A. hydrophila strain GPl-02, GL-01, dan GJ-01 yang diberikan dalam bentuk vaksin heat killed kepada ikan lele dumbo. Penelitian dilaksanakan dari bulan Januari sampai Mei 2016 di Laboratorium Mikrobiologi dan Laboratorium Zoologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Penelitian ini menggunakan metode eksperimen dengan 4 perlakuan 4 kali ulangan. Vaksin dibuat dengan teknik heat killed pada suhu 1000C selama 2 jam. Parameter utama yang diamati adalah titer antibodi dan uji reaksi silang, sedangkan parameter pendukung adalah suhu, pH, dan oksigen terlarut. Pengamatan titer antibodi dilakukan dengan metode Aderson (1974) selama 5 kali yaitu minggu ke-0 (sebelum vaksinasi), minggu ke-1 (setelah vaksinasi), minggu ke-2 (satu minggu setelah booster), minggu ke-3 (dua minggu setelah booster), minggu ke-4 (tiga minggu setelah booster). Data dianalisis menggunakan Analysis of Variance (ANOVA) dan Uji DMRT (Duncan Multiple Range Test) dengan taraf kepercayaan 95%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa strain GPl-02, GL-01, dan GJ-01 dapat meningkatkan imunogenisitas ditandai dengan meningkatnya produksi titer antibodi (P<0,05) dibandingkan kontrol. Hasil uji reaksi silang ketiga strain tersebut bereaksi positif baik dengan dirinya sendiri maupun dengan antigen lain dan merupakan isolat yang baik untuk dijadikan kandidat vaksin. Kualitas air selama penelitian dalam kisaran optimal yaitu suhu 27,0 – 29,00C, pH 6,9 – 7,4 dan oksigen terlarut 4,3 – 7,6 mg/l.

Kata kunci: Bakteri Aeromonas hydrophila strain GPl-02, GL-01, GJ-01; heat

(10)

HEAT KILLED IMMUNOGENICITY OF Aeromonas hydrophila STRAIN GPl-02, GL-01, DAN GJ-01 ON Clarias gariepinus

ABSTRACT

Clarias gariepinus is a species of freshwater fish that has a good prospect to be cultivated. There is still a constraint in the process of cultivation i.e. disease. one of the main causes of diseases on Clarias gariepinus is bacteria A. hydrophila

and the disease created by the bacteria is MAS (Motile Aeromonas Septicemia). An effort to cope with MAS disease is by giving antibiotics and drugs, but it will make the microorganism become resistant. Therefore, the prevention can be conducted using vaccine. This research aimed to know the immunogenicity of antigen of A. hydrophila strain GPl-02, GL-01, and GJ-001 given in the form of heat killed vaccine to Clarias gariepinus. The research was conducted from January to May 2016. The main parameter observed was titer 1000C for 2 hours in Microbiology Laboratory and Zoology Laboratory, Muhammadiyah University of Purwokerto. This research used experiment method whit 4 treatments and 4 repetitions. The vaccine was made using heat killed technique in antibody temperature and cross reaction test. Meanwhile, the supporting parameters were temperature, pH, and disolved oxygen. The observation of titer antibody was carried out using Anderson method (1974) for 5 times i.e. week 0 (before vaccination), week 1 (after vaccination), week 2 (one week after booster), week 3 (two weeks after booster), and week 4 (three weeks after booster). The data were analyzed using Analysis of Variance (ANOVA) and DMRT (Duncan Multiple Range Test) with significance level at 95%. The result of the research showed that strain GPl-02, GL-01, and GJ-01 could improve immunogenicity indicated by the increase in the production of titer antibody (P<0,05) compared to control. The result of cross reaction test of the three strains reacted positively to both themselves and other antigens and was a good isolate to be made as the candidate of vaccine. The water quality in optimum range was that with temperature at 27,0

– 29,00C, pH 6,9 – 7,4, and dissolved oxygen 4,3 - 7,6 mg/l.

(11)

DAFTAR ISI

2.3. Karakteristik Isolat GPl-02, GL-01, dan GJ-01 …………... 9

2.4. Vaksin ……… 11

2.5. Imunogenisitas ………. 12

2.6. Kualitas Air ………... 13

BAB III METODE PENELITIAN 3.1. Waktu dan Tempat Penelitian ………. 15

(12)

3.3. Metode Penelitian ……….. 17

3.4. Prosedur Penelitian ……… 21

3.5. Tahap Pelaksanaan ……… 23

3.6. Analisis Data ……….. 24

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Titer Antibodi ……… 25

4.2. Uji Reaksi Silang ……… 32

4.3. Kualitas Air ……… 33

BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan ………. 36

5.2. Saran ……….. 36

DAFTAR PUSTAKA ……… 37

(13)

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel. 2.3. Karakteristik Bakteri Aeromonas hydrophila ………. 10

Tabel. 4.1. Data titer Antibodi pada minggu ke-0 ……… 25

Tabel. 4.6. Uji Reaksi Silang ………. 33

(14)

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 3.1. Tata Letak Ember Pemeliharaan ……….... 17

(15)

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran. 1. Data Titer Antibodi Pada Masing-Masing Perlakuan ……… 42

Lampiran. 2. TransformasiLogaritma 2 Data Titer Antibodi Selama Penelitian 43

Lampiran. 3. Analisis Varian & Uji DMRT Titer Antibodi Minggu ke-0 ……. 44