Mpn

(1)

METODE

MPN

(MOST PROBABLE NUMBER)

MIKROBILOGI

INDUSTRI

(2)

M MPPNN ( ( MMOOSST T _P_P_R_R_O_O_B_B_A_A_B_B L LEE N NUUMMBBEERR₎₎ Metode

Metode MPNMPN_{(Most Probable Number}_{(Most Probable Number}₎₎_{adalah metode yang dguna!an}_{adalah metode yang dguna!an}

untu! menghtung !ol"orm d dalam ar dengan mengguna!an #engu$an

"ermentas dalam tabung% Pada umumnya !elom#o! &ol"orm sebaga

nd!ator #engu$annya% 'elom#o! &ol"orm mena!u# ba!ter yang bers"at

aerob! dan anaeorob! "a!ultat" batang gram negat" dan tda! membentu!

s#ora% &ol"orm mem"ermentas!an la!tosa dengan #embentu!!an asam

dan gas dalam *a!tu +, $am

(3)

Metode MPN basanya dla!u!an untu! menghtung $umlah m!roba d

dalam meda yang berbentu! ar% Metode MPN dguna!an medum ar d

dalam tabung rea!s dmana #erhtungannya dla!u!an berdasar!an

$umlah

$umlah tabung tabung yang yang #ost" #ost" yatu yatu yang yang dtumbuh dtumbuh oleh oleh $asad $asad ren! ren! setelahsetelah

n!ubas #ada suhu dan *a!tu tertentu%

Pengamatan tabung yang #ost" da#at dlhat dengan mengamat

tmbulnya !e!eruhan atau terbentu!nya gas d dalam tabung !el

(tabung durham) yang dleta!!an #ada #oss terbal! yatu untu! $asad

ren! #embentu! gas% Untu! seta# #engeneran #ada umumnya

dguna!an tga atau lma ser tabung%

Untu! metode MPN (

Untu! metode MPN (Most Probable Number Most Probable Number ) #erhtungan d) #erhtungan d

la!u!an berdasar!an $umlah tabung yang #ost" yatu tabung yang

mengalam #erubahan #ada medumnya ba! tu beru#a #erubahan

*arna atau terbentu!nya gelembung gas #ada dasar t

(4)

Ba!ter

ColiformColiform

_{meru#a!an golongan m!roorgansme}

yang la0m dguna!an sebaga nd!ator d mana ba!ter n

da#at men$ad snyal untu! menentu!an suatu sumber ar

telah ter!ontamnas oleh #atogen atau tda!%

BA'TER1

COLIFORM

Coliform

Coliform _{adalah ba!ter gram negat" berbentu! batang bers"at}_{adalah ba!ter gram negat" berbentu! batang bers"at}

anaerob

anaerob atau "a!ultat"atau "a!ultat" anaerobanaerob tda! membentu! s#ora dan tda! membentu! s#ora dan

da#at mem"ermentas la!tosa untu! menghasl!an asam dan gas

#ada suhu -./&2-3/& ('nehtges 4566)% 7olongan ba!ter

Coliform

Coliform adalahadalah Citrobacter Citrobacter  Enterobacter Enterobacter  Escherichia coli Escherichia coli  dan dan

Klebsiella

Klebsiella (Batt 456+)%(Batt 456+)%

&ontoh ba!ter

&ontoh ba!ter ColiformColiform_{adalah ba!ter}_{adalah ba!ter} E. coli E. coli _{yang basanya terda#at}_{yang basanya terda#at}

#ada sstem #enernaan manusa

(5)

MED1A PERTUMBU8AN PADA PEN7U91AN

&OL1:ORM DEN7AN METODE

MPN

Meda Latose broth (LB) dguna!an sebaga meda untu!

mendete!s !ehadran ol"orm dalam ar ma!anan dan

#rodu! susu sebaga !aldu #emer!aya (#re2enrhment

broth) untu!

Salmonella

dan dalam mem#ela$ar

"ermentas la!tosa oleh ba!ter #ada umumnya% Pe#ton

dan e!stra! bee" menyeda!an nutren esensal untu!

memetabolsme ba!ter% La!tosa menyeda!an sumber

!arbohdrat yang da#at d"ermentas untu! organsme

!ol"orm%

LB (LACTOSE BROTH)

(6)

EMBA (Eosin Methylene Blue Agar)

Meda EMBA (Eosn Methylene Blue Agar) mem#unya !estme*aan

mengandung la!tosa dan ber"ungs untu! memlah m!roba yang

mem"ermentas!an la!tosa se#ert

mem"ermentas!an la!tosa se#ert Staphylcoccus. aureus, P. aerugenosa, danStaphylcoccus. aureus, P. aerugenosa, dan

Salmonella

Salmonella% M!roba yang mem"ermentas!an la!tosa menghasl!an !olon% M!roba yang mem"ermentas!an la!tosa menghasl!an !olon

dengan nt ber*arna gela# dengan !la# logam% Sedang!an m!roba lan yang

da#at tumbuh !olonnya tda! ber*arna%

Adanya

Adanya eosn eosn dan dan methylene methylene blue blue membantu membantu mem#erta$am mem#erta$am #erbedaan#erbedaan

tersebut% Namun dem!an $!a meda n dguna!an #ada taha# a*al !arena

!uman lan $uga tumbuh terutama P% Aerugenosa dan

!uman lan $uga tumbuh terutama P% Aerugenosa dan Salmonella sp.Salmonella sp. dan da#at dan da#at

menmbul!an !eraguan% Bagaamana#un meda n sangat ba! untu!

meng!on"rmas bah*a !ontamnan tersebut adalah

meng!on"rmas bah*a !ontamnan tersebut adalah E.coli E.coli % Agar EMB (le;ne)% Agar EMB (le;ne)

meru#a!an meda #adat yang da#at dguna!an untu! menentu!an $ens ba!ter

E.coli

(7)

EMBA (Eosin Methylene Blue Agar)

Meda B7BB (Brllant 7reen Ble Broth) dguna!an untu! meng!on"rmas

hasl tes #ost" dugaan% Brllant 7reen Ble Broth (B7BB) $uga dsebut sebaga

Brllant 7reen Latose Ble Broth (B7LBB)%

Brllant 7reen menghambat #ertumbuhan ba!ter 7ram #ost" dan ba!ter

7ram negat" a!an sema!n banya! selan

7ram negat" a!an sema!n banya! selan E.coli E.coli % La!tosa meru#a!an sumber% La!tosa meru#a!an sumber

!arbohdrat% Ba!ter yang "ermentas la!tosa dan menghasl!an gas yang

terdete!s

terdete!s Penggunaan Penggunaan utama dar meutama dar meda n adda n adalah untu! menalah untu! mengdent"!asgdent"!as

!eberadaan

!eberadaan E.coli E.coli #ada ma!anan% Selama n!ubas 4+ $am #ada suhu -3 /& #ada ma!anan% Selama n!ubas 4+ $am #ada suhu -3 /&

E.coli

(8)

TA8APAN <AN7 DALAM PEN7U91AN

MPN

(

MOST PROBABLE NUMBER

)

U$

U$ PendugaPenduga ( (Presumptive est Presumptive est ))

U$ Penduga (

U$ Penduga (Presumptive est Presumptive est ) = satu ser yang bers > atau 64 t) = satu ser yang bers > atau 64 tabung yangabung yang

bers Latose Broth dan tabung durham dno!ulas!an dengan sam#el ar untu!

mengu$ a#a!ah ar tersebut mengandung ba!ter yang bsa mem"ermentas!an

la!tosa yang mem#rodu!s gas% 9!a setelah n!ubas gas tmbul #ada Latose

Broth dduga ada ba!ter ol"orm d

Broth dduga ada ba!ter ol"orm d sam#el ar tersebut%sam#el ar tersebut%

U$ #enduga meru#a!an tes #endahuluan tentang ada tda!nya !ehadran

ba!ter ol"orm berdasar!an terbentu!nya asam dan gas yang dsebab!an

!arena "ermentas la!tosa oleh ba!ter golongan

!arena "ermentas la!tosa oleh ba!ter golongan E.coli E.coli % Terbentu!nya asam% Terbentu!nya asam

dlhat dar !e!eruhan #ada meda la!tosa dan gas yang dhasl!an da#at dlhat

dalam tabung durham yang beru#a gelembung udara% Banya!nya !andungan

ba!ter

ba!ter Escherichia coli Escherichia coli da#at dlhat dengan menghtung tabung yang da#at dlhat dengan menghtung tabung yang

menun$u!!an rea!s #ost" terbentu!nya asam dan gas dan dbandng!an

dengan tabel MPN% dan $!a tda! terbentu! gas dalam tabung durham dhtung

sebaga hasl negat"%

(9)

U$

Penguat

(on"rmed test

)

U$ #enguat meru#a!an u$ dar tabung yang #ost" terbentu! asam dan gas

terutama #ada masa n!ubas 6 ? 4+ $am sus#ens dno!ulas!an #ada

meda Eosn Methylen Blue Agar (EMBA) seara ase#t! dengan

mengguna!an $arum no!ulas% 'olon ba!ter

mengguna!an $arum no!ulas% 'olon ba!ter Escherichia coli Escherichia coli tumbuh tumbuh

ber*arn

(10)

Pertama seta# !olon yang ber*arna h$au etal! #ada seta# ser

dno!ulas!an dalam medum latose broth dan nutrent agar mrng

!emudan dn!ubasba!!an dalam suhu -.2-35&elus selama 4+ $am

damat adanya asam dan gas dalam medum latose broth dan d atat

seta# !elom#o!@ser tabung rea!s yang

menun$u!!an u$ #ost"

U$

(11)