B1J010019 15.

(1)

24

Lampiran 3. Identifikasi golongan senyawa metabolit sekunder dari miselium dan filtrat kultur empat isolat L. edodes

a. Uji alkaloid

Uji alkaloid dengan teknik KLT dilakukan dengan menggunakan fase diam silica gel GF254, fase gerak metanol – amoniak pekat (200:3). Sampel yang

digunakan untuk uji KLT adalah 100 µl. Bercak yang terelusi dideteksi dengan UV 366 nm, serta dengan pereaksi Dragendorff. Adanya alkaloid ditunjukkan oleh terbentuknya bercak berwarna kuning jingga.

b. Uji terpenoid

Uji terpenoid dilakukan dengan menggunakan fase diam silica gel GF254 dan

fase gerak kloroform _– metanol _– amoniak 25% (100:20:3). Sampel yang digunakan adalah 100 µl. Bercak yang terelusi dideteksi dengan penyemprotan yaitu vanillin-asam sulfat. Adanya terpenoid ditunjukkan oleh terbentuknya bercak berwarna merah atau biru.

c. Uji flavonoid

Uji flavonoid dilakukan dengan menggunakan fase diam silica gel GF254 dan

fase gerak asam asetat glasial - air (15:85). Sampel yang digunakan adalah 100 µl. Bercak yang terelusi dideteksi dengan sinar UV 366 nm akan terbentuk warna kuning, biru atau hijau juga diperiksa setelah disemprot dengan pereaksi AlCl3 kemudian dipanaskan 100 oC selama 5 menit, dilihat pada sinar UV 366

nm.

(2)

Lampiran 4. Pembuatan pereaksi golongan senyawa metabolit sekunder empat isolat L. edodes (Harborne, 1987)

a. Pembuatan pereaksi Dragendorff

1. Larutan A : 0,85 g bismuth nitrat dilarutkan dalam 50 ml larutan (air : asam asetat) 40:10

2. Larutan B : 9 g kalium iodide dilarutkan dalam 20 ml air.

3. Larutan stok : larutan A dan B dicampur dengan perbandingan sama banyak kemudian campuran ini disimpan dalam lemari es.

4. Larutan penyemprot : 1 ml larutan stok ditambah 2 ml asam asetat glasial dan 10 ml air sebelum digunakan.

5. Larutan yang sudah jadi dimasukkan kedalam botol penyemprot. b. Pembuatan reagen vanillin-HCl

Sebanyak 1,25 g vanillin dilarutkan dengan 5 ml HCl pekat, dimasukkan ke dalam labu ukur 25 ml lalu diencerkan dengan etanol absolute hingga tanda batas.

(3)

26

Lampiran 5. Tabulasi data bobot kering miselium empat isolat L. edodes

Jenis isolat (t)

Ulangan (g)

Total (g)

Rataan (g)

1 2 3

Yogyakarta 0,31 1,01 0,37 1,69 0,56

LW 26 0,18 0,24 0,47 0,89 0,29

W4 0,39 0,34 0,31 1,04 0,34

Jambo 0,95 0,58 0,57 2,1 0,7

(4)

Lampiran 6. Tabulasi data pH medium YEMR empat isolat L. edodes

Perlakuan (t)

pH awal Ph akhir

Ulangan Ulangan

I II III I II III

t1 5,2 5,2 5,2 4,0 4,0 4,0

t2 5,2 5,2 5,2 4,0 4,0 4,0

t3 5,2 5,2 5,2 4,0 4,0 4,0

t4 5,2 5,2 5,2 4,0 4,0 4,0

(5)

28

Lampiran 7. Tabulasi data bobot ekstrak filtrat kultur empat isolat L. edodes pada medium YEMR

Jenis ekstrak (k) Jenis isolat (t) Ulangan (g)

Total Rataan

1 2 3

Kloroform Yogyakarta 0,16 0,08 0,07 0,31 0,103

LW 26 0,12 0,10 0,07 0,29 0,097

W4 0,04 0,09 0,07 0,2 0,067

Jambo 0,07 0,04 0,06 0,17 0,057

Etil asetat Yogyakarta 0,03 0,02 0,01 0,06 0,02

LW 26 0,01 0,01 0,01 0,03 0,01

W4 0,01 0,10 0,06 0,17 0,057

Jambo 0,03 0,01 0,01 0,05 0,017

(6)

Lampiran 8. Tabulasi data bobot ekstrak miselium empat isolat L. edodes pada medium YEMR

Jenis ekstrak (k) Jenis isolat (t) Ulangan (g)

Total Rataan

1 2 3

Kloroform Yogyakarta 0,01 0,02 0,01 0,04 0,013

LW 26 0,01 0,01 0,02 0,04 0,013

W4 0,03 0,02 0,01 0,06 0,02

Jambo 0,02 0,01 0,01 0,04 0,013

Etil asetat Yogyakarta 0,01 0,01 0,01 0,03 0,01

LW 26 0,01 0,01 0,01 0,03 0,01

W4 0,01 0,01 0,01 0,03 0,01

Jambo 0,01 0,01 0,01 0,03 0,01

(7)

30

Lampiran 9. Data pengukuran Rf (Retardation Factor) golongan senyawa alkaloid, flavonoid dan terpenoid dengan kromatografi lapis tipis

Rf Alkaloid (cm) Rf Flavonoid (cm) Rf Terpenoid (cm) No Perlakuan Ekstrak

k1t1 : ekstrak kloroform isolat Yogya k1t2 : ekstrak kloroform isolat LW 26 k1t3 : ekstrak kloroform isolat W4 k1t4 : ekstrak kloroform isolat Jambo k2t1 : ekstrak etil asetat isolat Yogya k2t2 : ekstrak etil asetat isolat LW 26 k2t3 : ekstrak etil asetat isolat W4 k3t4 : ekstrak etil asetat isolat Jambo

(8)

No Perlakuan

1 k1t1 Biru + Biru - Tidak terelusi dengan

sempurna

Kuning - Tidak terelusi dengan

sempurna

(9)

32

Lampiran 11. Dokumentasi peremajaan empat isolat L. edodes

Isolat Yogya Isolat LW 26

Isolat W4 Isolat Jambo

(10)

Lampiran 12. Dokumentasi kultivasi miselium empat isolat L. edodes selama 40 hari

Isolat Yogya Isolat LW 26

(11)

34

Miselium Basah Isolat W4 Miselium Basah Isolat Jambo

Menyaring Miselium Dan Filtrat Filtrat Empat Isolat

(12)

Lampiran 13. Dokumentasi ekstraksi filtrat dan miselium empat isolat L. edodes

Ekstraksi Kloroform Ekstraksi Etil Asetat

Penguapan ekstrak Etil Asetat Penguapan ekstrak Kloroform

(13)

36

Lampiran 14. Dokumentasi ekstrak filtrat empat isolat L. edodes pelarut kloroform

Isolat yogya Isolat LW26

(14)

Lampiran 15. Dokumentasi ekstrak filtrat empat isolat L. edodes pelarut etil asetat

Isolat Yogya Isolat LW26

(15)

38

Lampiran 16. Dokumentasi ekstrak miselium empat isolat L. edodes pelarut kloroform

(16)

Lampiran 17. Dokumentasi ekstrak miselium empat isolat L. edodes pelarut etil asetat

(17)

40

BIODATA PENULIS

Dena Rahayu, lahir di Tangerang, 28 Desember 1991 anak dari ayah Tanto Sumartoyo dan Ibu Partinah. Penulis berasal dari Perum Bumi Indah RT 01/02, Kec. Pasar Kemis, Kab. Tangerang. Penulis berhasil menamatkan pendidikannya di TK Pertiwi lulus tahun 1997, SD N Pasar Kemis 2 tahun lulus 2003, SMP N 1 Tangerang lulus tahun 2007, SMA Yuppentek 1 Tangerang lulus tahun 2010, kemudian melanjutkan studi di Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman tahun angkatan 2010. Pengalaman organisasi antara lain tergabung dalam kepengurusan Unit Kegiatan Mahasiswa Islam (UKMI) Fakultas Biologi selama empat tahun. Staff Departemen Humas Divisi Infokom 2011, Staff Departemen Kewirausahaan (KWU) Divisi Pengembangan Skill Usaha 2012, Kepala Departemen KWU 2013, Dewan Riset 2014. Penulis juga aktif pada beberapa kegiatan meliputi; Anggota bela diri Bandung Karate Club (BKC) 2011, Panitia OSMB Matriks sebagai Tatib 2011, Panitia OSMB Taksonomi sebagai Humas 2012, Peserta Training Kemuslimahan 2010, Peserta Indigenus 2011, Stadium General UKMI 2011, Peserta Training Kehumasan 2011, Peserta Seminar dan Toefl HIMAPAS 2013, Peserta Talkshow Lentera Jiwa 2013, Peserta Workshop Optimize Your Presentation Skills (OPYS) 2014, peserta Talkshow Dialog Kebangsaan 2014, Peserta Seminar Kewirausahaan 2014, Peserta SIMPOSIUM UKMI 2014. Prestasi yang pernah diraih adalah Juara 1 Ganda Campuran Biology Badminton Cup 2011, Juara 2 Tunggal Putri dan Juara 2 Ganda Campuran Badminton Pekan Olahraga Fakultas Biologi (PORFABI) 2013.

Purwokerto, Januari 2015

Penulis

(18)

BIODATA PENULIS

Dena Rahayu, lahir di Tangerang, 28 Desember 1991 anak dari ayah Tanto Sumartoyo dan Ibu Partinah. Penulis berasal dari Perum Bumi Indah RT 01/02, Kec. Pasar Kemis, Kab. Tangerang. Penulis berhasil menamatkan pendidikannya di TK Pertiwi lulus tahun 1997, SD N Pasar Kemis 2 tahun lulus 2003, SMP N 1 Tangerang lulus tahun 2007, SMA Yuppentek 1 Tangerang lulus tahun 2010, kemudian melanjutkan studi di Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman tahun angkatan 2010. Pengalaman organisasi antara lain tergabung dalam kepengurusan Unit Kegiatan Mahasiswa Islam (UKMI) Fakultas Biologi selama empat tahun. Staff Departemen Humas Divisi Infokom 2011, Staff Departemen Kewirausahaan (KWU) Divisi Pengembangan Skill Usaha 2012, Kepala Departemen KWU 2013, Dewan Riset 2014. Penulis juga aktif pada beberapa kegiatan meliputi; Anggota bela diri Bandung Karate Club (BKC) 2011, Panitia OSMB Matriks sebagai Tatib 2011, Panitia OSMB Taksonomi sebagai Humas 2012, Peserta Training Kemuslimahan 2010, Peserta Indigenus 2011, Stadium General UKMI 2011, Peserta Training Kehumasan 2011, Peserta Seminar dan Toefl HIMAPAS 2013, Peserta Talkshow Lentera Jiwa 2013, Peserta Workshop Optimize Your Presentation Skills (OPYS) 2014, Peserta Seminar Kewirausahaan 2014, Peserta SIMPOSIUM UKMI 2014. Prestasi yang pernah diraih adalah Juara 1 Ganda Campuran Biology Badminton Cup 2011, Juara 2 Tunggal Putri dan Juara 2 Ganda Campuran Badminton Pekan Olahraga Fakultas Biologi (PORFABI) 2013.