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P R O S ID IN G
S 6 M IN A R N A S IO N A L D A N
P A M E R A N P R O D U K A G R O IN D U S T R I
A P T A 2 0 1 3 I A s o s ia s i P r o fe s i T e k n o lo g i A g r o in d u s tr i
P e n g u a ta n A g r o te c h n o p r e n e u rs h ip
M e n u ju A g r o in d u s tri Y a n g T a n g g u h P a d a P a s a r G lobal
CD
RPTR
Penyunt ing:
Dr. Ir. Nur Hidayat, NP.
Dr. Panji Deoranto, STP. MP.
Mas'ud Effendi, STP, MP.
Nur Laifatui Rafimah, S.Si, M.Si.
J U R U S A I M T E K N0L0 6I I N O U S T R I P E R T A N I A N F A H U L T A S T E H N O I O G I P E R T A N I A N
U N I V E R S I T A S B R A L U I J A Y A M A L A N G 2 0 1 3
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Prosiding Seminar Nasional APTA - UB 2013
P R O S ID IN G
S E M IN A R N A S IO N A L
J u ru s a n T e k n o lo g i In d u s tri P e rta n ia n F a k u lta s T e k n o lo g i P e rta n ia n ,
b e k e ija s a m a d e n g a n A s o s ia s i P ro fe s i T e k n o lo g i A g ro in d u s tri
(A P T A )
T e m a :
P e n g u a ta n
Agrotechnopreneurship
M e n u ju A g ro in d u s tri y a n g
T a n g g u h p a d a P a s a r G lo b a l
P e n y u n tin g :
D r. Ir. N u r H id a y a t, M P
D r. P an ji D e o ra n to , S T P , M P
M a s ’ud E ffen d i, S T P , M P
N u r L aila tu l R a h m a h , S .S i, M Si
D e s a in S a m p u l d a n P e n a ta L e ta k :
R o ch m a t H id a y a t, A .M d .
P e n e r b it
Ju ru san T e k n o lo g i In d u s tri P e rta n ia n
F a k u lta s T ek n o lo g i P e rta n ia n
U n iv e rs ita s B raw ijaya
M a la n g
O k to b e r, 2 0 1 3
IS B N :9 7 8 -9 7 9 -9 9 0 0 2 -1 -0
i s b n
lillipill
K A T A P E N G A N T A R
P u ji s y u k u r k a rri p a n ja tk a n K e h a d ira t T u h a n Y a n g M a h a E sa ka re n a a ta s lim p a h a n
ra h m a t d a n h id a y a h -N y a P ro sid in g S e m in a r N a sio n a l J u ru s a n T e k n o lo g i In d u stri P e rta n ia n
b e ke rja sa m a d e n g a n A s o s ia s i P ro fe s i T e k n o lo g i A g ro in d u s tri (A P T A ) d e n g a n te m a
“P e n g u a ta n
Agrotechnopreneurship
M e n u ju A g ro in d u s tri y a n g T a n g g u h P a d a P a s a r G lo b a P d a p a t te rs e le s a ik a n d e n g a n b a ik. P ro s id in g in i te rsu su n a ta s m a ka la h y a n g te la hd ik e b m p o k k a n s e s u a i to p ik p a d a S e m in a r N a s io n a l m e ip u ti: T e k n o lo g i da n R e ka ya sa
(T o p ik I), T e k n o lo g i L in g ku n g a n (T o p ik II), M a n a je m e n In d u stri (T o p ik III), d a n S o s ia l
E ko n o m i (T o p ik IV ). P ro s id in g in i m e ru p a k a n ku m p u la n m a k a la h y a n g te la h d iie v is i d a n
d is e m in a rk a n s e c a ra o ra l p a d a S e m in a r N a s io n a l ta n g g a l 3 0 S e p te m b e r sa m p a i 1 O k fo b e r
2 0 1 3 d i G e d u n g W id y a lo k a U n iv e rs ita s B raw gaya, M a la n g .
K a m i m e n g u ca p ka n te rim a k a s ih k e p a d a p e m a ka la h d a n p e s e rta s e m in a r y a n g te la h
m e n g ik u ti ja la n n y a S e m in a r N a s io n a l se h in g g a d a p a t m e n yu m b a n g ka n id e , g a g a s a n d a n
h a s il p e n e fllia n ya n g d a p a t m e n in g k a lk a n fo ru m d is k u a ilm ia h d i ka la n g a n a k a d e m is i,
p ra k tis i b is n is d a n in s ta n s i p e m e rrrta h . K a m i ju g a m e n g u ca p ka n te rim a k a s ih k e p a d a
U n iv e rs ita s B ra w ija y a , F a ku lta s T e k n o lo g i P e rta n ia n a ta s s e g a la fa s lita s y a n g d ib e rik a n .
S e la in itu , ka m i ju g a m e n g u ca p ka n te rim a k a s ih k e p a d a p a ra s p o n s o r, P T . E rin d o M a n d iri,
P T . A m e rta Indah O tsu ka , B a n k B N I’4 6 k a n to r c a b a n g M a la n g , P T . A g rjja y a In d o tirta ,
R e p o e b lik T e lo , W a rd a h , P T . P e tro k im ia G re s ik , P T . P e lro s id a G re sik, P T A J G (A n e ka Jasa
G rh a d ik a ) G re s ik , P T . A Jn o m o to , D id ik P u ib a d i, S .S i (P T . J a b a b e ka , T b k), H o te l G ran d
K a ip a ta ru S y a ria h , U B H o te l, U M M Inn, A m a ris H o te l, G riy a d i M o n ta n a , T rio in d a h , B a nd u n g
G u e s t H o u se , d a n Y u b i T ra v e l. K a m i m e n y a d a ri b a h w a te rd a p a t b a n y a k ke ku ra n g a n d a n
k e te rb a ta s a n d a la m p e n yu su n a n p re s id in g in i w a la u p u n te la h d ik e ra h k a n s e g a la
kem a m p u a n d a la m p e n yu su n a n n ya . O le h k a re n a itu , ka m i m e n g h a ra p ka n sa ra n ya n g
m e m b angu n a g a r p ro s id in g in i b e rm a n fa a t b a g i y a n g m e m b u tu h ka n .
M a la n g , O k to b e r 2 0 1 3
1PTFI
D A F T A R 6 1
H A LA M A N J U D U I... ... ... ... ... .... . ... ... . i
K A T A P E N G ANTAR__
D A F T A R IS I_ _ _ _ _ _ _ _
K A T A S A M B U T A N ...
Prosiding Seminar Nasional APTA - UB 2013
K E Y N O T E S P E A K E R ....
D r. K e X in g _ _ _ _ _ _
h i
iv
1
... ... — ... - ... . ... . 9
B a m b a n g D a ru n d riy o ______ ___ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __ ________ _____ _ __ _ _ 10
D r. F a iz A c h m a d .M .S c ... . ... ... ... ... .... . ... . ... ... 11
P ro f. D r. Ir. S a m su lb a h ri, M S ... ... ... . ... . ... . ... 12
D r. Ir. S u s in g g ih W ija n a , M S ,...— _ _ _ _ _ _ _ _ _ _____ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ___ 13
T O P IK T E K N O L O G I D A N R E K A Y A S A P R O S E S _ _ _ _ _ ______ ___________ __ 2 6
A p lik a s i M ic ro w a v e R u m ah ta n g g a u n tu k m e n ja g a k u a lita s b e ra s m is k in d a ri
K e ru sa ka n A k ib a t K u tu B e ra s
(SitophMus oryzae)
O le h : A n g g o ro C a h yo S u k a rtik o _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 2 7
K a jia n P e m b u a ta n E d ib le F ilm d a ri P a ti A re n K u a lita s R e n d a h
O le h : W a h yu S u p a rto n o .... ... ... . ... .... ... . ... 3 3
A n a fis is P o te n s i s in g k o n g d a n s iru p g lu k o s e s e b a g a i b a h a n ba ku a te rn a tif in d u s tri
N a ta (S tu d i K a su s d i C V A g rin d o S u p ra fo o d )
O le h :J u m e ri____ __ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ 3 9
P ro d u k tiv ita s E th a n o l M e la lu i R e k a y a s a A ia t F e rm e rtto r F lu id is a s i d e n g a n
M e n g g u n a ka n
Saccharomyces cerevisiae
y a n g d ia m o b ilis a s i d e n g a n A g a rO le h : S P A b rin a A n g g ra in i_ _ _ _ __ _ ___ _ _ _ _ _ _ _ _ _____ ..._______ ___ 4 9
P e n g a ru h P e m b e ria n T e ri, T e ro n g , K e ca m b a h d a n D a u n K a tu k d a la m M e m p e rc e p a t
B ira h i d a n M e m p e rb e s a r K e b u n tin g a n S a p i
O le h : S h o b irin ... ... ... . ... 5 9
P ro d u ksi E k s o p o lis a k a rid a (E P S ) o le h B a k te ri A s a m L a k ta t
(L casei
d a nL Plantarum)
P a d a M e d iu m S a ri K u rin a d a n S a ri M u rb e i
O le h : E lo k Z u b a id a h ... ... ... . 6 5
P e n g a ru h P e m b e ria n E k s tra k K u lit P isa n g K e p o k te rh a d a p K a d a r T im b a l ya n g T in g g i
p a d a T ik u s W is ta r Ja n ta n
O le h : A h m a d Y a s ir H u d a _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _____ __ _ _ _ _ _ ____ __ _ _ _ 7 7
K a ra k te ris tik J a m u r T ira m
(Pleurotus ostreatus)
S e la m a P e n yim p a n a n d a la m K e m a sa nP la s tik P o ly p ro p ile n (P P )
O le h : D w i P u tra A ria n to ... ... ... - ... . ... 8 3
Id e n tifik a s i P e m b o ro s a n p a d a P ro d u ksi P e le t F o s fa t (P2O5) d e n g a n P e n d e ka ta n
Lean
Manufacturing
d a n F M E A(Failure Mode and Effect Analysis)
u n tu k P e rb a ik a nP ro s e s P ro d u ksi (S tu d i K a su s : P T M a d u ra G uano In d u stry)
O le h : R a kh m a w a ti___ ___ ___ __ - ... ... ... . ... 9 3
P e n g g u n a a n K e fir A ir s e b a g a i b a h an p e n g e m b a n g ro t' ku ku s
O le h : S ri R e je ki R e tn a P e rtiw i — --- - --- ---- --- 10 5
P e n g a ru h s u h u d a n je n is s u b s tra t te rh a d a p k o n id ia S e a i/v e n a
bassiana
F o rm u la s i co o Ides d e n g a n te p u n g k ro k o t
(Portulaca Oieracea
) s e b a g a i M aka n a nR in g a n ya n g K a y a A n tio k s id a n
O le h : S ukandi_____ __ _________ ___ - ... ... . ... ... ... 119
P e n g a ru h P e rb a n d in g a n B u n g a d a n D a un R o s e lla p a d a P e m b u a ta n T e h C e lu p
te rh a d a p K a n d u n g a n A n tio k s id a n
O le h : A m n a H a rtia ti--- --- - ---- --- ---- --- ---- 12 5
P ro s e s P e m u m ia n A s a p C a ir u n tu k P e n u ru n a n K a d a r B e n z o (A )P y re n e te rh a d a p
K e a m a n a n P a n g a n
O le h : S P A b rin a A n g g ra in i_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __ ____________ ___ _ __ 13 3
P ro d u ksi B io e ta n o l M e la lu i P ro s e s S a k a rifik a s i F e im e n ta s i S im u lta n : K a jia n
K o n s e n tra s i E n zim d a n W a k tu P ro s e s
O le h :W a y a n A m a ta ... ... ... ... ... ... ... 139
K o m p o s is i K im ia M in ya k A ts iri B u n g a K a m b o ja C e n d a n a (
Plumeria alba)
H a s il R e -E kstra ksi d e n g a n E ta n o l
O le h : N i M a d e W a rtin i... .... ... ... ... ... ... ... 14 5
K a ra k te ris tik c ro s s in k a s ila s i p a ti ta p io k a T e rs u b s titu s i T e p u n g K a ca n g N a g a ra
O le h : R in i H u s tia n ty _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 151
P o te n s i M in u m a n K u n y it A s a m d a n S in o m (
Curcuma domes tica Va\.-Tamarindus in die a
L )
s e b a g a i M in u m a n F u n g s io n a lO le h : S ri M u tya n i__ _ _____ _ _ _ _ _ ____ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ ___ _____ 161
In o v a s i P e m b u a ta n B u b u k P o d e n g Jagu ng In sta n
O le h ■ SUOPtO ■ ■■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ • ■ •■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ B I m
■ ■ ■ ■
»• ua ■ ■ 1 6 7S e ie k s i
Pseudomonas sp
P e n d e g ra d a s i L ip id d a n D e te ije nO le h : N u r H id a y a t_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __________ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __ 17 5
P e la ru t d a n L am a E k s tra k s i T e rb a ik d a la m P e m b u a ta n P e k tin d a ri L im b a h B uah
N a n g ka
O le h : N u r L a ila tu l R a h m a h ...„...._ ...„...._ ...„...„... ... ... . 17 9
K a jia n P ro p o rs i T e p u n g T a p io k a D a n A ir E s D a la m P e m b u a ta n B a kso Q srbahan U ta m a
J a m u r T ira m
H*TB
Prosiding Seminar Nasional APT A
-UB 2013
P R O D U K S IB IO E T A N O L M E L A L U I P R O S E S S A K A R F IK A S I F E R M E N T A S 1 S IM U L T A N :
K A J IA N K O N S E N T R A S I E N Z iM D A N W A K T U P R O S E S
W avan A m atal . B. W ayan G unam 1. A A .M . Dewi Anggreni1 ,i W ayan Rai W idarta1 1>Teknologi Industri P e rta ria n U niversitas Udayana., 2)llmu dan Teknologi Pangan Universitas
Udayana
J a la n K a m p u s B u k it Jim b a ra n , B u k it-J im b a ra n , B a d u n g , B a li 8 0 3 6 4 Korespondensi E m ai:
yan_kadir@ yahoo.oom
ABSTRAK
B o e ta n o l m e n jp a k a n s a la h sa tu b a h a n b a k a r a lte rn a tiv e te rb a h a ru k a n y a n g te la h d ik e m b a n g k a n d e n g a n b e rb a g a i m acam te k n o lo g i p ro s e s . T e k n o lo g i s a k a rifik a s i fe rm e n ta si sim u lta n (S F S ) a d a la h s a la h s a tu te k n o b g i y a n g d ia n g g a p e fis ie n . P ro s e s S F S d ip e n g a ru h i o le h b e rb a g a i fa k to r d ia rtta ra n v a k o n s e n tra s i e n z im d a n w a k tu p ro s e s . P e n e itia n in i b e rtu ju a n u n tu k m e m p ro d u k s i b io e ta n o l d a ri te p u n g u b i ka yu m e la lu i p ro s e s s a k a rifik a s i fe rm e n ta s i s e c a ra s im u lta n . P e n e litia n d ia w a li d a ri ta h a p p ro d u k s i e n zim k a s a r a m ilo g lu k o s id a s e , p ro se s K kuifikasi d a n p ro s e s p ro d u ksi b o e ta n o l. P e n e itia n p a d a p ro se s p ro d u k s i b b e ta n o l d ira n c a n g m e n g g u n a ka n ra n c a n g a n a c a k k e lo m p o k fa k to ria l d e n g a n du a fa k to r y a itu k o n s e n tra s i e n z im k a s a r a m ilo g lu k o s id a s e y a n g te rd iri d a ri 3 ta ra f y a itu 10 % 15 % , 2 0 % (v/v), d a n fa k to r w a k tu p ro s e s S F S te rd iri d a ri 3 ta ra f y a itu : 4 8 , 7 2 , da n 9 6 ja m . P a ra m e te r y a n g d iu k u r a d a la h k o n s e n tra s i b io e ta n o l, re n d e m e n , d a n e fis ie n s i fe rm e n ta s i, D a ri h a s il p e n e litia n d ip e ro le h b a h w a p ro s e s fe rm e n ta s i se la m a 7 ha ri p a d a p ro d u ksi e n z im k a s a r a m ilo g lu k o s id a s e m e n g g u n a ka n
Aspergillus niger
d e n g a n ju m la h s p o ra a w a l 9 ,9 x1 Oasp o ra /m l m e n g h a s ilk a n a k tiv ita s e n zim k a s a r 5 1 ,8 4 U /m l. P a d a p ro s e s lik u ifik a s i d ih a s ik a n k o n s e n tra s i g lu k o s a 9 9 .1 2 g /L d a n to ta l g u la 3 2 9 .3 8 g /L . P a d a p ro s e s p ro d u ksi b io e ta n o l d ip e ro le h p e rla k u a n te rb a ik p a d a p e ria k u a n ko n s e n tra s i e n z im k a s a r a m ilo g lu k o s id a s e 20 % (v /v ) d a n w a ktu p ro s e s se la m a 7 2 ja m m e n g h a s ilk a n k o n s e n tra s i b io e ta n o l 6 ,5 3 % (v /v ), re n d e m e n 2 1 ,7 6 % (v /b ) d a n e fis ie n s i fe rm e n ta s i 6 8 ,3 9 % da ri p e ro le h a n b io e ta n o l s e c a ra te o ritis .K a ta K u n c i: b io e ta n o l, a m ilo g lu k o s id a s e , s a k a riffc a s i fe rm e n ta s i s im u lta n _________
PENDAHULUAN
S e c a ra um um p ro s e s p e m b u a ta n b io e ta n o l d im a s y a ra k a t d ila k u k a n s e c a ra b e rta h a p a n ta ra p ro s e s h id ro fs is d e n g a n fe rm e n ta s in y a , se h in g g a m e m e rfukan w a k tu p ro s e s y a n g re la tif la m a . P e n g g u n a a n e n z im -e n z im m u m i k o m e rsia l p a d a p ro s e s h id ro tis is n y a ju g a m e n y e b a b k a n tin g g in y a b ia y a p ro d u ksi b io e ta n o l. A d a n y a k o n d is i in i b e ra k ib a t p a d a tin g g in y a h a ig a b io e ta n o l p e r Ite r, s e h in g g a s u it b e rs a in g d e n g a n b a h a n b a k a r p re m iu m a ta u m in y a k ta n a h y a n g n o ta b e n e sa m p a i s a a t in i m a s ih d is u b s id i o le h p e m e rin ta h . S e la in itu , te k n o lo g i p ro s e s s e p e rti d ia ta s su d a h te n tu tid a k e fis ie n d a n la y a k u n tu k d ite ra p k a n p a d a s k a la k e ra kya ta n .
U n tu k m e n g a ta s i tin g g in y a b ia y a p ro d u k s i b io e ta n o l, m a ka a d a b e b e ra p a h a l y a n g d a p a t d ila k u k a n u n tu k
m e n in g ka tka n e fis ie n s i p ro d u ksi b io e ta n o l y a itu m e n ca ri te k n o b g i p ro s e s p ro d u k s i y a n g le b ih s in g k a t, m e n g g a n ti e n z im - e n zim m u m i k o m e rs ia l y a n g m a h a l d e n g a n e n z im -e n z im k a s a r d a n m e n g g a n ti k u ltu r m u m i d a la m fe rm e n ta s i d e n g a n k u ltu r-k u ltu r y a n g s u d a h u m um d ip e rg u n a k a n d im a s y a ra k a t s e p e rti ra g i ro ti d a n ra g i ta p e . E n zim -e n zim k a s a r d a p a t d ip ro d u k s i d a ri m ik ro o rg a n is m e , s e p e rti a m ilo g lu k o s id a s e d ih a s ilk a n o le h
Aspergillus
d anRhizopus.
R o s ita (2 0 0 8 ) m e n ya ta ka n b a h w aRizhopus sp
m am pu m e m p ro d u ksi e n z im k a s a r a m ilo g lu s id a s e d e n g a n a k tiv ita s 4 7 0 ,0 2 U /m l d a n e n zim k a s a r ct-a m ilase d e n g a n a k tiv ita s 3 8 5 ,1 4 U /m l.S a la h s a tu te k n o b g i p ro s e s p ro d u ksi b io e ta n o l y a n g d ico b a d ik a ji d a la m p e n e litia n in i a d a la h te k n o lo g i p ro se s s a k a rifik a s i fe rm e n ta s i sim u lta n (S F S ).
P a d a te k n o lo g i in i, p ro s e s h id ro lis is d a n fe im e n ta s i dU akukan s e c a ra s e re m p a k p a d a s a tu w a d a h , se h in g g a w a ktu p ro s e s d a p a t d ip e rs in g k a t d a n b ia y a in v e s ta s i p e ra ia ta n d a p a t d ite k a n (B a lle s te ro s e t at. 2 0 0 4 ). P a d a p ro s e s S F S d ip e n g a ru h i o le h b e rb a g a i fa k to r s e p e rfi k o n s e n tra s i e nzim d a n w a ktu p ro s e s . K o n s e n tra s i e nzim a k a n b e rp e n g a ru h te rh a d a p d e ia ja t hidro B lis p a ti m e n ja d i g iu k o s a . s e la n ju tn y a , g lu k o s a h a sil h id ro lis is a k a n b e rp e n g a ru h te rh a d a p tin g g i re n d a h n ya k o n s e n tra s i p ro d u k b io e ta n o l y a n g d ih a s ik a n . W a k tu fe im e n ta s i ju g a b e rp e n g a ru h te rh a d a p k o n s e n tra s i b io e ta n o l ya n g d i h a silka n . W a ktu y a n g te rla lu s in g k a t d a p a t m e n y e b a b k a n be lum o p tim a ln y a ko n v e rs i g lu k o s a m e n ja d i b io e ta n o l, s e b a lk n y a w a ktu y a n g te rla lu la m a d a p a t m e n y e b a b k a n d is im ila s i p ro d u k dala m b e n tu k b io e ta n o l m e n ja d i s e n y a w a - se n y a w a s a m p in g a n s e p e rfi g o lo n g a n a sa m -a sa m o rg a n ik . J ik a fa k to M a k to r d ia ta s d a p a t d ik e ta h u i d a n d ik e n d a lik a n k o n d is i p ro se sn ya , su d a h te n tu a k a n d a p a t m e n in g ka tka n p ro d u k ya n g d ih a s ik a n . M e lih a t p e n tin g n y a ko n s e n tra s i e n z im d a n w a ktu p ro s e s d a la m te k n o lo g i S F S , s e rta be lum d ik e ta h u in y a k o m b in a s i o p tim u m d a ri ke d u a fa c to r in i, m a ka d a la m p e n e litia n in i a k a n d ik a ji b a g a im a n a p e n g a ru h k o n s e n tra s i e n zim k a sa r a m ib g lu k o s id a s e d a n w a ktu p ro s e s te rh a d a p k o n s e n tra s i b io e ta n o l.
M E T O D O L O G I
B a h a n d a n a la t
B a h a n baku ya n g d ig u n a k a n a d a ia h ubi k a y u p u tih d ip e ro le h d a ri p a s a r tra d is io n a l J im b a ra n . M ik ro o rg a n is m e ya n g d ig u n a k a n u n tu k fe rm e n ta s i a d a ia h
Saccharomyces
cerevisiae
da nAspergtlus
niger
d id a p a t d a riL a b o ra to riu m P A U IP B, a q u a d e s da n b a h a n la m ia u n tu k a n a is a . A la t-a la t y a n g d ig u n a k a n m e lip u ti in k u b a to r, s p e k tro fo to m e te r d a n k ro m a to g ra fi g a s (A g ile n t 6 8 9 0 N ). P e n e ftia n in i d ila k s a n a k a n d i L a b o ra to riu m B b in d u s tri T e k n o lo g i P e rta n ia n U nud.
P e m b u a ta n te p u n g
P e n e litia n in i d ia k u k a n d a la m b e b e ra p a ta h a p y a itu p e m b u a ta n te p u n g ,
p e rs ia p a n k u ltu r
A.
niger
d a n S.cerevisiae,
p ro d u k s i e n zim k a s a ra m ib g lu k o s id a s e , lik u fik a s i d a n s a k a rifik a s i fe rm e n ta s i sim u lta n . P a d a p ro se s p e m b u a ta n te p u n g , p e rta m a -ta m a u b i kayu d ib e rs h k a n k u lit a rin y a d a n d ip o to n g -p o to n g ku ra n g le b ih 1 c m ke m u d ia n d ik e rin g k a n d e n g a n s in a r m a ta h a ri s e la m a 4 h a ri s e h in g g a k a d a r a im y a 9 ,6 9 % . P o to n g a n u b i y a n g su d a h k e rin g ke m u d ia n digiH ng d e n g a n a ya k a n 4 0 m esh.
P e re m a ja a n k u tu r
P a d a ta h a p p e rs ia p a n k u ltu r
A. niger,
k u ltu r se b e lu m d ip e rg u n a k a n d ik u ltiv a s i p a d a a g a r m irin g m e n g g u n a ka n m e d ia
Potato Dextrose Agar
(P D A ) dand iin k u b a s i p a d a su h u 2 8 eC se la m a 7 h a ri. P a d a a k h ir k u ltiv a s i d ila k u k a n p e n g h itu n g a n ju m la h s p o ra d e n g a n m e n g g u n a ka n h e m a c y to m e te r. S p o ra in i s e la n ju tn y a d ip e ig u n a k a n u n tu k p ro s e s p ro d u k s i e n z im k a s a r a m ib g lu k o s id a s e . P a d a ta h a p p e rs ia p a n k u ltu r S.
cerevisiae,
iso la t d ire m a ja k a n p a d a m e d ia P D A dan d iin k u b a s i se la m a 2 h a ri. S e te la h itu is o la t d itu m b u h ka n la g i p a d a 50 m l m e d ia Y M G P y a n g te rd iri d a ri e k s tra k y e a s t 5 g /l, m a t 5 g /l, g lu k o s a 10 g /l d a n p e p to n 5 g /l d i d a la m e rte n m e y e r 2 0 0 m l. Ink u b a si d ila k u k a n p a d a s u h u 3 0 °C sela m a 2 4 ja m .
P ro d u k s i e n z im k a s a r a m ib g lu k o s id a s e
Prosiding Seminar Nas tonal APT A - UB 2013
p ro s e s fe rm e n ta s i d iu k u r a k tiv ita s enzim a m ib g lu k o s id a s e nya.
U k u ffik a s i
P ro s e s fk u ifik a s i te p u n g u b i ka yu b e rd a s a rk a n p a d a p e n e litia n ya n g d ila k u k a n o le h B u d iy a n to (2 0 0 5 ). S u sp e n si te p u n g ubi ka yu d ib u a t d e n g a n k o n s e n tra s i 3 0 % (b /v), pH d ia tu r s a m p a i 6 ,5 d e n g a n m e n g g u n a ka n N a O H . E nzim a -a m ila s e (T h e rm a m yi, N O V O ) d ita m b a h k a n 1 ,2 m l/k g p a ti. L a ru ta n d ip a n a s k a n p a d a su h u 1 0 0 °C se la m a 1 ja m . S e la n ju tn y a h a s il p ro s e s fk u ifik a s i d ia n a iis is k o n s e n tra s i g u la re d u k s i d a n to ta l g u la n y a .
S a k a rif ik a s i fe rm e n ta s I s im u Ran
P ro s e s p ro d u k s i d e n g a n te k n o lo g i S F S d ila k u k a n s e c a ra b a tc h p ad a e rie n m e y e r 5 0 0 m l d e n g a n vo lu m e s u b s tra t 3 0 0 m l. S u b s tra t fe rm e n ta s i s e b e lu m d ip e rg u n a k a n d is te rilis a s i te rle b ih d a h u lu p a d a su h u 121 °C se la m a 15 m e n it d a n d ia tu r p H -n ya m e n ja d i 5 d e n g a n m e n g g u n a ka n N a O H 1N a ta u H C I 1N. S u b s tra t d ita m b a h k a n n u tris i b e ru p a N P K d a n N H 2(S0)4 m a sin g -m a sin g d e n g a n k o n s e n tra s i 0 ,0 4 % (b /v ) d a n 0 ,1 5 % (b /v ), ke m u d ia n e n zim k a s a r a m ilo g lu k o s id a s e , d a n k u ltu r S .
cerevisiae
d ita m b a h ka n s e c a ra s im u ta n . K o n s e n ta ra s i e nzim k a s a r d a n la m a w a k tu p ro s e s d is e su a ika n d e n g a n p e ria k u a n . P ro s e s fe rm e n ta s i d ila k s a n a k a n se la m a 4 h a il. D a n d ia k h ir p ro s e s d ila k u k a n p e n g u jia n te rh a d a p p a ra m e te r-p a ra m e te r y a n g d ia m a ti.R a n c a n g a n P e rc o b a a n
P e n e litia n in i m e n g g u n a ka n R a n ca n g a n A c a k K e b m p o k y a n g d is u s u n s e c a ra fa k to ria l d e n g a n 2 fa k to r p e ria ku a n y a itu k o n s e n tra s i e n zim k a s a r a m ib g lu k o s id a s e p a d a p ro s e s S F S te rd iri d a ri 3 ta ra f y a itu 10 % (v /v ), 1 5 % v /v , da n 2 0 % v /v s e d a n g k a n w a ktu p ro s e s S F S te rd iri d a ri 4 ta ra f y a itu : 2 , 3 , d a n 4 h a ri. D a ri fa k to r- fa k to r in i a k a n d ip e ro le h 9 p e ria k u a n k o m b in a s i d a n d ik e b m p o k k a n m e n ja d i 2 b e rd a s a rk a n w a k tu p e n g o la h a n , d e n g a n d e n rik ia n te rd a p a t 1 8 u n it p e rc o b a a n . A p a b ila p e ria k u a n b e rp e n g a ru h n ya ta te rh a d a p re s p o n y a n g d ia m a ti, m a ka d ila k u k a n u | la n ju t D u n ca n (S te e l d a n T o rrie 1 9 9 1 ).
P a ra m e te r y a n g d iu k u r
V a ria b e l y a n g d ia m a ti p a d a p ro s e s p ro d u k s i b io e ta n o l m e la lu i p ro s e s S F S a d a la h k o n s e n tra s i e ta n o l (G a s ch ro m a to g ra p h y), re n d e m e n p ro d u k s i, d a n ko n su m si p e n g g u n a a n s u b s tra t
H A S H . D A N P E M B A H A S A N
k a s a r
P ro d u k s i e n zim
A m ilo g lu k o s id a s e
P a d a p ro s e s p ro d u k s i e n zim k a s a r a m lo g lu k o s id a s e d ig u n a ka n is o la te
A.
niger
y a n g te la h d ik u ltiv a s i p a d a m e d ia a g a r m irin g P D A se la m a 7 h a ri. P a d a a w a l k u ltiv a s i te rd a p a t ra ta -ra ta ju m la h sp o ra 2 ,3 x 10® ± 4 ,3 x 105 sp o ra /m l. P a d a a k h ir k u ltiv a s i y a itu p a d a h a ri ke -7 te rd a p a t ju m la h s p ro ra ra ta 9 ,9 x 1(P ± 2 ,5 x 1 0 7 sp o ra /m l. Ju m la h s p o ra in i s e la n ju tn y a d iin o k u la s ik a n u n tu k p ro s e s p ro d u k s i e n zim k a s a r. P a d a p e n g u ku ra n a k tiv ita s e n zim k a s a r a m ib g lu k o s id a s e y a n g d ip ro d u k s i se la m a 7 h a ri d ip e ro le h a k tiv ita s s e b e s a r 5 2 ,5 3 ± 2 ,0 6 U /m l. S u n a rya n to (2 0 0 4 ) m e la p o rk a n b a h w a p ro d u k s i e n zim k a s a r g lu k o a m ila s e d e n g a n m e n g g u n a ka nA. niger
d e n g a n m e n g g u n a ka n ca m p u ra n d e d a k d e n g a n p a ti m e n g h a silka n a k tiv ita s s e b e s a r 8 2 3 U n it/m i, s e d a n g ka n R o s ita (2 0 0 8 ), m e m p ro d u ksi e n z im k a s a r g lu k o a m ila s e d e n g a n m e n g g u n a ka n s u b s tra t ca m p u ra n d e d a k p a d i dan o n g g o k m e n g h a silka n a k tiv ita s e n z im 2 3 0 ,7 9 U /m l. A rn a taeta!.,
(2 0 1 1 ) m e m p ro d u ksi e n zim k a s a r a m lo g lu k o s id a s e d e n g a n s u b s tra t o n g g o k y a n g d i in ku b a si se la m a 7 ha ri m e n g h a silka n a k tiv ita s e n z im 6 2 .7 7 ± 4 .4 9 U /m L. A d a n y a p e rb e d a a n d a la m a k tiv ita s e n zim k a s a r ya n g d ih a s ik a n p a d a m a s in g - m a sin g p e n e litia n d a p a t d is e b a b k a n o le h a d a n y a p e rb e d a a n m e to d e fe rm e n ta s i, la m a in k u b a s i d a n je n is m e d ia (K o m b o n g , 2 0 0 4 ). R a m a d a s
etal.
(1 9 9 6 ) b a h w a p a d a k o n d is i ya n g te p a t p ro d u k s i g lu k o a m ila s e d e n g a n m e n g g u n a ka n m e d ia p a d a t, tig a kafl le b ih tin g g i d to a n d in g ka n d e n g a n fe rm e n ta s i d e n g a n m e d ia c a ir. Lebih la n ju t, P a n d e yet al.,
(2 0 0 0 ) m e n y a ta k a n bahw a p a ra m e te r y a n g p e rlu d ip e rh a tik a n d i d a la m fe rm e n ta s i m e d ia p a d a t a n te ra la in k o n s e n tra s i s u b s tra t, p H , ke le m b a b a n , su h u , d a n p ro d u k s i m e ta b o lit s e k u n d e ry a n g m u n g kin d a p a t m e n y e b a b k a n ko n ta m in a s i.
S a k a s ifik a s i fe rm e n ta s i S vn u ltan
P ro s e s S F S p ad a ta h a p p ro d u ksi b io e ta n o l in i d ig u n a k a n s u b s tra t h a sil p ro s e s fik u ifik a s i te p u n g u b i k a y u s e c a ra e n z i m a t's m e n g g u n a ka n a -a m ila se d e n g a n d o s is 1 ,2 m l/kg p a ti (2 5 0 0 U /m l) y a n g dihidroU sis se la m a 1 ja m p a d a suhu 100°C . D a ri p ro s e s in i d ih a s ilk a n s u b s tra t u n tu k fe rm e n ta s i d e n g a n k a d a r g u la re d u k s i 9 ,9 1 ±0 ,8 6 % (b /v ) d a n to ta l gula 3 2 ,9 4 ± 0 ,9 6 % (b /v )
P a d a p ro se s fe rm e n ta s i m eng g u n a ka n te k n o lo g i S F S d ip e ro le h b a h w a p e ria k u a n k o n s e n tra s i e n zim k a s a r a m ilo g lu k o s id a s e d a n w a k tu p ro s e s b e rp e n g a ru h n ya ta te rh a d a p k o n s e n tra s i b io e ta n o l ya n g d ih a s ik a n (p < 0 ,0 5 ). K o n s e n tra s i b io e ta n o l te rtin g g i d ih a s ilk a n d a ri p e ria k u a n ko n s e n tra s i e n z im k a s a r 2 0 % d a n w a ktu p ro s e s 7 2 m e n it d e n g a n ko n s e n tra s i b io e ta n o l s e b e s a r 6 ,5 3 % (b /v ) P e ria ku a n in i tid a k b e rb e d a n y a ta d e n g a n p e ria k u a n k o n s e n tra s i e n zim 2 0 % d e n g a n w a ktu p ro s e s 4 6 m e n it y a n g m e n g h a s ilk a n k o n s e n tra s i b io e ta n o l 6 ,0 3 % (b /v). K o n se n tra si b io e ta n o l te re n d a h d ih a s ilk a n d a ri p e ria k u a n k o n s e n tra s s i e n zim k a s a r 1 0 % d e n g a n w a k tu p ro s e s se la m a 4 8 m e n it d e n g a n k o n s e n tra s i b io e ta n o l 1,82 % (b /vX p e ria k u a n in i ju g a lid a k b e rb e d a n y a ta d e n g a n p e ria k u a n k o n s e n tra s i e n z im 1 5 % d e n g a n w a k tu p ro s e s 4 8 m e n it. K o n s e n tra s i b io e ta n o l y a n g d ih a s ik a n d a ri p ro s e s S F S d i s a jik a n p a d a T a b e M .
ta b le 1. Konsentrasi bioetanol pada proses SFS
P e riak u a n 4 8 m en it
W a k tu 7 2 _ m e n i t _
9 6 m e n it Konsentrasi
e n z im 10% 1 .8 2 * 3 - 2 7 “ 3 .5 6 *
Konsentrasi
e n z im 1 5 % 2 Z T 4 .4 2 c z s a c *
Konsentrasi
e n z im 20% 6 . 0 3 * 6 . 5 3 * 5 .6 0 ‘
T in g g i re n d a h n ya k o n s e n tra s i b io e ta n o l y a n g d ih a s ik a n p a d a p ro s e s S F S a ka n b e rp e n g a ru h p a d a tin g g i re n d a h n ya re n d e m e n y a n g d ih a s ilk a n . D a la m h a l in i, p a ra m e te r k o n s e n tra s i b io e ta n o l b e rh u b u n g a n in ie r d e n g a n p a ra m e te r
re n d e m e n , dim a n a s e m a k in tin g g i ko n s e n tra s i b io e ta n o l y a n g d ih a s ilk a n m a ka s e m a k in tin g g i pula re n d e m e n y a n g d ih a silk a n . P a d a p e n e litia n in i, re n d e m e n te rtin g g i ju g a d ih a s ilk a n d a ri p e ria k u a n ko n s e n tra s i e n zim k a s a r 2 0 % d a n w a ktu p ro se s 7 2 m e rit d e n g a n k o n s e n tra s i b io e ta n o l s e b e s a r 2 1 ,7 6 % . P e ria ku a n in i ju g a tid a k b e rb e d a n y a ta d e n g a n p e ria k u a n ko n s e n tra s i e n z im 2 0 % d e n g a n w a ktu p ro s e s 4 8 m e rit y a n g m e n g h a silka n ko n s e n tra s i b io e ta n o l 2 0 ,0 9 % . R e n d e m e n ya n g d ih a s ik a n d a ri p ro s e s S F S d i s a jik a n p a d a T a b e l2 .
T a b le 2. Rendem en pada proses SFS
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ W a k tu __________ P e r ia k u a n 48 72 gg
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ m a n it m en it m en it
K o nsentrasi
e n d m 10% 6 . 0 8 * 1 0 .9 0 " 1186" K o nsentrasi
e n a m 1 5 % 7 a s * 1 4 .7 2 ° 12 £ 9 “ ' K o nsentrasi
e r a i m20% 2 0 .0 9 ■ “ 2 1 . 7 6 * 18 B 7 ‘
E fis ie n s i fe rm e n ta s i m e ru p a ka n p e rse n ta se p e rb a n d in g a n a rrta ra ko n s e n tra s i e ta n o l y a n g d ip e ro le h s e c a ra a k tu a l d e n g a n k o n s e n tra s i e ta n o l s e c a ra te o ritis . K o n s e n tra s i e ta n o l s e c a ra te o ritis d ite n tu k a n b e rd a s a rk a n ju m la h s u b s tra t (to ta l g u la ) y a n g d ik o n s u m s i o le h kh a m ir se la m a fe rm e n ta s i u n tu k m e n g h a s ilk a n e ta n o l. P e rh itu n g a n d id a s a rk a n p a d a m e ta b o iis m e g lu k o s a m enja di e ta n o l m e la lu i ja lu r E M P . S e c a ra se d e rh a n a p ro se s fe rm e n ta s i a k o h o l d a ri b a h a n b a k u g lu k o s a te rtih a t p a d a p e rs a m a a n re a k s i b e rik u t
Ce Hi20b^2CiH50H + 2CO2+
2ATP +
5Kkai
[image:9.612.129.270.549.622.2]Prosiding Seminar Nasional APTA - UB 2013
fe rm e n ta s i d ik o n v e rs l m e n ja d i e ta no!, s e d a n g k a n s is a n y a d im a n fa a tk a n u n tu k p e m b e n tu ka n p ro d u k -p ro d u k la in , se p e rti te rb e n tu k a sa m -a sa m o rg a n ic d a n p e m b e n tu k a n b io m a s s a set. E fis ie n s i fe rm e n ta s i d a ri p ro s e s S F S d is a jik a n p a d a T a b e l3 .
T ab el 3. Efisiensi ferm entasi pada proses SFS
48 menit 72 merit 96 menlt Konsentrasi
enzim10% 21J00* 4258* 3251 ^
Konsentrasi
enzim 15% 2536* 48-47ed 3852
-Konsentrasi
enzim 20% 68.27* 6839' 5736 *
P e rs e n ta s e to n s u m s i s u b s tra t m e ru p a ka n p e rs e n ta s e p e rb a n d in g a n a n ta ra s u b s tra t y a n g d ik o n s u m s i se la m a p ro s e s fe rm e n ta s i d e n g a n k o n s e n tra s i s u b s tra t a w a l se b e iu m p ro s e s fe rm e n ta s i. ju m la h s u b s tra t y a n g d ik o n s u m s i se la m a p ro s e s fe rm e n ta s i m e ru p a ka n s e lis ih a n ta ra k o n s e n tra s i s u b s tra trto ta l g u la a w a l d e n g a n to ta l g u la a k h ir s e te la h fe rm e n ta s i. D a ri h a s il p e n e litia n d ik e ta h u i b a h w a in te ra k s i a n ta ra fa c to r k o n s e n tra s i em zim k a s a r d e n g a n w a k tu p ro s e s b e rp e n g a ru h n y a ta te rh a d a p p e rs e n ta s e to n s u m s i s u b s tra t (p < 0 ,0 5 ). P e rs e n ta s e ko n su m si s u b s tra t te rtin g g i d ih a s ifk a n d a ri p e ria k u a n k o n s e n lra s i e n zim k a s a r 10% d e n g a n w a k tu p ro s e s 9 6 m e n it. D a ri h a s il a n a lis a fa c to r tu n g g a l d ik e ta h u i b a h w a y a n g m e m b e rika n p e n g a ru h n y a ta te rh a d a p tin g g i re n da hnya p e rs e n ta s e to n s u m s i s u b s tra t a d a la h w a k tu p ro s e s , d h n a n a s e m a k in la m a w a k tu p ro se s, m aka s e m a k in tin g g i p e rs e n ta s e to n s u m s i s u b s tra t y a n g d ih a s ilk a n . P e rs e n ta s e K o n su m si s u b s tra t p a d a p ro s e s SF S d is a jk a n p a d a T a b e l 4.
T able 4. Persentase tonsum si su b stra t pada ptose s SFS
Periakuan Waktu
48 msnlt 72 menlt 96 menlt Konsentrasi
enzim 10 % 50JB7* 44.73' 6382*
Konsentrasi
enzim 15 % 5449“ 5322 •* 5431 *
Konsenlrasi
enzim 20 % 5152* 5576* 5703 *
R o s ita (2 0 0 8 ) m e la p o rka n b a h w a p ro d u k s i b io e ta n o l d e n g a n m e n g g u n a ka n
e n zim k a s a r a m ilo g lu to s id a s e m e n g h a silka n k o n s e n tra s i b io e ta n o l 7 ,8 9 % (v /v ) d e n g a n e fis ie n s i fe rm e n ta s i 8 7 ,5 % . T e ija d in y a p e rb e d a a n k o n s e n tra s i b io e ta n o l d a n e fis ie n s i fe rm e n ta s i d a p a t d is e b a b k a n o le h a d a n y a p e rb e d a a n m e to d e fe rm e n ta s i, je n is s u b s tra t, su h u d a n p H a w a l fe rm e n ta s i. A rn a ta
et a l,
(2 0 1 1 ) m e n ya ta ka n b ah w a p ro d u k s i b io e ta n o l d a ri u b i ja la r d e n g a n te k n ik N d ro lis is d a n fe rm e n ta s i te rp is a h ya n g d ila k u k a n p a d a pH 4 ,5 d a n su h u 3 5 °C se la m a 3 h a ri m e n g h a s ilk a n k o n s e n tra s i b io e ta n o l 5 ,3 2 % (v /v ) d a n e fis ie n s i fe rm e n ta s i 7 0 ,1 % .
K E S IM P U L A N
P a d a p ro se s p ro d u ksi b io e ta n o l d ip e ro le h p e ria k u a n te rb a ik p a d a p e ria k u a n k o n s e n tra s i e n zim k a s a r a m ilo g lu k o s id a s e 2 0 % (v /v ) d a n w a ktu p ro s e s se la m a 7 2 ja m m e n g h a silka n k o n s e n tra s i b io e ta n o l 6 ,5 3 % (v/v), re n d e m e n 2 1 ,7 6 % (v /b ) d a n e fis ie n s i fe rm e n ta s i 68,39% d a ri p e ro le h a n b io e ta n o l s e c a ra te o ritis .
D A F T A R P U S T A K A
A m a ta I W , D w i S , N u r R . 2 0 1 1 . P ro d u c tio n O f A m y to g lu c o s id a s e F ro m “ O n g g o k 1 B y
AspergMus niger.
[P ro s id in g ] T h e 4 th In te rn a tio n a l S e m in a r o f In d o n e sia S o c ie ty fo r M ic ro b io lo g y a n d IU M S -IS M O u tre a c h P ro g ra m o n F oo d S a fe ty . U d a ya n a B a li.
A m a ta I W , B a m b a n g A .H , E s s e lo n P . 2 0 1 1 . E n z y m a tic a lly L iq u e fa c tio n S w e e t P o ta to (Ip o m e a b a ta ta s L ) to B io e th a n o l P ro d u c tio n U sin g
Saccharomyces
cerevisiae.
[P ro s id in g ] T h e 3 rd In te rn a tio n a l C o n fe re n c e o n B b s c ie n c e s and B io te c h n o lo g y , U d a ya n a B a li.
B a lle s te rro s M , O iv ia J .M , N e g ro M J , M a n za n a re s, B a lle s te ro s . 2 0 0 4 . E th a n o l fro m L ig n o c e llu b s ic M a te ria l
[image:10.612.105.281.594.670.2]b y a S im u lta n e o u s S a c c a rific a tio n and F e rm e n ta tio n P ro ce ss (S F S ) W ith
Kluyveromyces
mandanus
C E C T 1 0 8 7 5 . J P ro ce ss B io c h e m is try 3 9 :1 8 4 3 -1 8 4 8 .
C a y la k B . an d F a z ile t V .S . 1 99 8. C o m p a ris o n o f D iffe re n t P ro d u c tio n P ro ce sse s. T u rk J C h em . 2 2 : 3 5 1 - 3 5 9 .
niger
u n d e r d iffe re n t c u ltiv a tio n re g im e n s., W o rld . J . M ic ro b io l. B io te c h n o l 1 2 2 6 7 -2 7 1 .R o s ita , 2 0 0 8 . P ro d u k s i E ta n o l d a ri O n g g o k M e n g g u n a ka n E k s tra k K a s a r E n zim A lfa a m ila s e , G lu ko a m ila se da n
Saccharomyces cerevisiae.
[T e ste ]P ro g ra m S tu d i M a g is te r B io te k n o b g i S IT H , IT B .
K o m b o n g H . 2 0 0 4 , E va lu a si D a ya H id ro lifk E n zim G lu k o a m ila s e D ari F iltra t K u ltu r
Aspergillus niger.
J.Hmu D a s a r 5 ( 1 ) : 1 6-20
P a n d e y A ., C a rio s R .S ., D a vid M . 2 0 0 0 . N e w d e v e lo p e m e n ts in so lid s ta te fe rm e n ta tio n b io p ro c e s s e s and p ro d u c t. J . P ro ce ss B io ch e m 3 5: 1 1 5 3 -1 1 6 9 .
S u n a ry a n to , R . 2 0 0 4 , P e n g a ru h K o m b in a s i M e d ia S u m b e r K a rb o n (D e d a k : T a p io k a ) D a n S u m b e r N itro g e n P a d a K u ltiv a s i M e d ia P a d a t P ro d u ksi E n zim G lu k o a m ila s e . [P ro s id in g ] S e m in a r N a s io n a l R e k a y a s a K im ia D an P ro s e s .
