Air SNI 01 6242 2000 Air Mineral Alami

5Nl

sNf

01-6242-2000

Standar Nasional lndonesia

Air

mineral

alami

il

:lr

Fend*h*llan

Ran*angan

st*ndar

Nasional Indonesia

_{RsM)

Air

miner*l

alsmi

$*qn

seb*gai ,i1un'r** yang siap

min*m.

Air

miner*r arami jerax d*pat

dibedakan

dari

air

minum

biasa

karen* cara

prod::ksinya

_{yang be*rda.}

$tand*r

iri

disusn* eelain

untuk

melindungi k**sumen

*ari

kesihatan dan

keselamata*. juga untuk :

a.

Melindungiprodusen

l

b.

Me*dukung pcrkembaxg*n agia i*dr"r*ri

c.

Menunjang ekspor non migas

d.

htenunjang inshuksi Menteri Perindu*triarr

No.O4rM-iNSll*ll98g

rentang pengawas&n makanan.

standar

i*i

disusun berdasark*n hasil _{pembahasan dalarq r*pat-rapat}

teknis, pra konsensus dan terakhir dirumuskan dalam rapat konsenior puou

t*aggal ? P*bruari 2000 y*ng dihadiri oteh wakil-wakll prcdusen, korsumerq

lembaga

ilrnu

pengetahuan dan

teknal*gi

*erta

in*tansi penrerintah yang

terkait.

$tar*dar

ini

disusun olah Balai Besar Litbang

l*duetri

Flasil Psrtenian Eogor.

Ilaft;:r iri

Pe*dahuli:an. D*&ar isi.."... l{alaman i

ii

1 I 7 J 4 4 1q 19 I9 l. 2. J. .t a 5 il-'l a q Rnang Lingkrip Acuan..,... ...,..

ilefir:isi

$yaral ftu{u... .,...

[)enga nrbi lan r-or]l.oh

Cara

_uji

.

Syarat lulus

uji

., ,. . .

Syarat penendaan . Pengenrasan

_...,

_....,".,

i

I *f

{

Air

nrineral al:rmi

1. Ru*ng

li*gkup

$tandar

ini

rn*liputi acuaR. definisi, syarat mutu, pengambila*

ccnt*h,

cara

uji,

syaral lulus uji" sy*rat penandaan dan pengemasan _{nntuk air mineral aJami.}

?. Aeuan

1)

$tand*rd meth*d

&r

Exarninatic:r of Water and Wastewai:er,

l8*

editio:r. American Fublic H*alth Assoeiation, Washington

lg*3

2)

Ccdex Standard furNatural _{Mineral$faters {C*dex Stan} 108-Ig8}" (Rev, 199?}

3)

SNI0f

-3553-1996 Air Minum Dala*r Kemasan

4)

Ferat*raa Menteri Kesehatan Rt No, 416/l\,{ENKES/pERJl}#lgg$

5)

SHI

*e-2467-t991 Metsde Fenguji*n

Kadar

Bariusr dalam

air

dengan alat $pektrafotameter S erapan Atcffi secara I a ngsu ng.

6)

Atomic Absorption Hydrid* $ystem, operati*n and service Manual.

3

Definisi

3.1

Air

mineral alami adalah air minurn

yang

dipercleh langsung

d*ri *ir

sumber alami

at*u

di

bar

dari sumur dalarn" _{dengan proses terkendali un€uk menghindari pencernar} ataLi pengaruh Iuar terhadap sifat kimia,

fisika

air

min*ral

alr*ni.

Air

mineral alami dicirikan :

a.

Kandungan

g*ram

rnineral tertentu d*ngan prop*rsi yang

relatif

dan

elemgnt" ata* eat-zflt l*innya

b.

Kompcnennya konstan se*a debit dan suhunya stahil den.gan catatafi fluktuasi alami yang kecil

6.

Diambil dengan kcndisi sedemikian rupa s*hingga

dap*t

menjamin keaslian dari

mikoba

dan keaslian serta stabilitas koarpcsisi

kimia dari

komponen-k*mponen esensiilnya

d.

Dikemas di lakasi sumber dengan cara higienis

e.

Tid*k

mengalami proses kecuali pemisahan kornponen tak stabil seperti kandungan besi, mangan, sulfida atau arsen elengan cara daeantasi dan atau penyaringan,

jika

perlu dipereepar didahului dengan aerasi.

3.2. Definisi tambahan

3.2.

t.

Air nrineral alami berkarbanat al*mi

Air

mjneral alami berka.rbonat alami adalah

air

rnineral alsmi serelah kemungkinan

*ie*galami perlaku*n sesuai butir

3.1.e

dan dica:npur dengan gas dari samber yang

sama

dan

_{setelah Feflgemasan dengan mempertimbangkan}

_hsl

_teknis

yang urnu{n. mempunyai kandungan CO2]ang sama pada suhu dan tekanan *ormal.

adanya "tra6e

1.2,?. Air menerai alami tanpa karbrrnat

Air

mineral alami tanpa karb*nat adalah

air

rnineral

alan

yang _{secara *lamiah dan}

s*teleh

kenrungkinan merrg*lainl per-iakLran _{resuai bLrtir _i.l ,: daii sefelah}

Fenge,rlasftn

:idak

n:rengandung

Co:

bebas dalam jurnlalr yang

_{berl*bitrn ya*g rliperiukai}

_xnruk

:-nenjaga _{kelarufan garan-garftm hidrogen kadreinat.}

1.2.3.

Air

nrinar*l alami dskarh*nari

Air

mineral alami _{dekarbonasi aclal*h}

_air

_{rnineral alami}

,,*ng

_{setelah ke*ungkinan}

meagalami perlakuan sesuai

_butir

_{3.1.e dan setelah pengenra:an. rrrenganeluag}

_e0,

_tealH

rend*h dari pada saat

air

keluar dan tidak rnelgandung gar CO2 yong

r***ra

spontan terliha: ketuar d*risumbernya pada kondisi _{suhu dan tekanan} rrrrrmai.

3 2

4

_&ir

_{mineral alami fortifika*r clerrgar: karbcn di*ksida rlari slrnilrernya adalah}

air mineral alan:i yang kemllngkinan setelah mengalami _{perlak.-ran sesuai}

_butir

_l.l.e

_dan

serelah pengemasan mengandung gas {iCI; lebih banyak qlilri sirilt keluar dari sunrbernya.

3 2 5.

Air

nineralalami dikarb*nasi

Air

mineral alami dikarbanasi arialah

air

mineral

alami

_3ang

serelal

kemungkian

xengalami

perlakuan sesuai

bulir

J 1.c

clan

setslah p{-itlsemasan

telah

dibuat "efleryeseent" dengan cara penambahan gas

col

dari sunrber" lniir.

4

Authorisasi

i

I

---l

4

$y*r*t

rrl*fu

Syarat nlutu air *ineral atanri s*perti rlibarvah irri

Spesifikasi 'fabel

asr _r*talr r*r It

Nc,

_Kriteri:r

_*ii

_{$atn:rrl p}

7 "1 J I _{li{itrat firiO3}}

rg

m.:t1 rya&q,

1l

tn.ars il tlt t\ 1 _?.{ir;r {FAO?} 3. _{FIuo4da {F}} rngll

:t:$l

rnaks. I,S r:':*lrc f! fl? 4. .Sianid* (CN] 5 _{Fulfat {S04}}

*

ryEl

*aks.20*

6. _{Cemalqn log;rm}

6.I Antimon _{{Sb) m$il rrtsl.e}

f"l {1fl{ l) ,/ _Arsen {As) rn.c/l ftlltj.'r ll Il\ 6.3. _{Bariuni {Ba}} nrt/l

_raks

_{! ll}

6.4 _B*rate

_Goi

rndl nrxlr+

{

fl 6.5 _{Sadnduni_gd)} ffi.rgl lrc {1 alfli 6"6 _Khromiunr (Cri Tembagq{Cui t'ng3 nraks- 0 *5 6.7 _{nl ('rll} n:akg. *,5 :laks. 0,01 s.8. Timbal (Pb) % Mangarr (Mn) ngrti

69

m.e/l lliL-e fi flq 6.

l0

Raksa _{{Hg} merll} :rnks.0.00l :laks. 0.{J2 6.1 r Nikel

Ni)

% Seleniurn (Se)

Cenraran

_{Kinria Are;n ik}

n:gll 6.12

_*rdl

!T}AKS. U.U,\ l.

ysfu

q.*g#J

r:r*ic

ll

fi$i

a1_t,t Aldrin d*n dieJelrin _ntg'l wE$ 7.2

j,t

_{dikktr**rhrxt} {!epfack{$rel}{}xide ntg;tt I nkr fi {}{}f}} 7.4 Me$'toxr,ght*r. fitg;'l mal.t C,{}1

n*k*

CI.85 Delergett _lltXr'l 1A

_{t-t fis}

agl

*rtl+.+ {}

fitt{li

t_1 Mi*.yrrk

mite:.czl

\

_{m.q,:l ihir}

o

o. _{C*n:ar;rn nrikrob:r}

o.l T'ntal plate cerult arval _kolonilnrl

_;ak,.

Tiltr-82

I orar ptate _{count akhir kolonift;rl}

_{r:rakt I x}

1fl:

8.3 _{Sakteri bentuk coli kal*ni/25*}

nrl nrrl

84

Bakreri E_, ccli

SieptococcLrs

k*lonil?j0

ml rc'!

85

_{i\oic\ntlJ)uml} ftg rl 8.6

_L

pe$illgell

_kolnnilS0 rr:l nr.l

87

_{Ilseydon'icna! a*ru*i *osa}

_k*lonillS0

5.

Fengambilan

rant*h

'a

cara

_{pengarnbilaa c*ntoh, sesuai d*ngarr}

_sNI

_{l9-0"129-lgfi*}

Fetunjuk pengambilan

e*ntch **,iran dan semi padat.

6,

C*ra

ltji

6.1

Fersiapan contoh.

Hcr*ogenkan eontah dengan csra mengocok

_,

_{memh*lak-ba,ikkan kemasan ke atas} d*n kebawah

6 2 Nirrat

eara

uji Nitrat

sesuai dengan

sNl

01-3-554

*lgq8,

_Cara

_{xji i*r}

_{minum dalam}

kemasan

butir 8

6"3

Nitrit

eara

uji

nitrit

sesuai dengan

sNl

sl-3554

-llqa,

cara r.rji

air

minum dalam kemasan

butir

I.

6.4 Fla*rida

C'arauji flaurida sesuai dengan SNI 0l-3554 -:gqg" Cara uji air minum dalam kemasan

butir I

l.

6.5 Sianida

Cara uji sianida sesrai dengan

_sNI

0l-3554

_-l?98,

_Cara

_uji

_{air minum dalam kemasan}

butir 14

6.6. Sulfat

eara uji sul&t sesuai dengan

SM 0t-d554

-

1998. Cara

uji

;rir minum dalam kemasan

butir I

I

j

6.?. Cemaran logam

6.7"

l.

Cemaran furtimcn

Frinsip

Analisis cemaran logam Antimon dengan _{spektraphototreter s*rapan atoin berdararkan} pada proses penyerapan _{energi radiasi aleh arnn:-atom ya*g berbeda-bedo pud;}

riofr.u, tenaga dasar

l

Peralatar

a)

Fipet 1,2 5, I

*

rnl yang terkaiibra:i

b)

Buret 1S ml dengan _{ketelitian *,01 ml dan terkalibrasi}

c)

Labu ukrlr

I**ml

dan

t00*

m! terkalibrasi

d)

Spek:raph*iometer serapa* at0m

e)

Erlenreyer Fereaksi

a)

Asam klorida p a

b)

Air

suling hebas l*gam

*)

L*rutan baku Antlmon 100* ug/ml

d)

Larutan NaBH4 :3 gram lr^la0il + 3 gracr FJaBHa larutkan dengan air spli*g 500n:l

e)

Larutan standar 10 ug/ml

s)

Fipet

I

rul

}arutan baku

A:rtirl*n di

alas fnasukkan

ke

d*i;un tabu

ukur

10fi ml ditarnbah ?* ml HCI 5 N, repatkan sarnpai tanda garis denga* air suling betras tagam

tarutan standar lOilS ug/ml

Pipet

!0

ml larutan Antirnon

l0

ug:nrl di atas. mas*kkan ke ,lalam labu

uk*r l6*fi

rnl' ditambahkan ?0 rnlHCl 5 N. t*patkan sarnpai tanda garis dengen air suling bebas

logam

Lanrtan standar 5. ?,5;

l0;

12.5: 15, dan Z{}

ugllifer.

pipet 0,5 rnl. &,75

ml,l?,5

ml,

I5

ml larutan $andar Antimon 1000

uEliter

masinp*asing _{tre dalam}

₅

_{buah labu}

ukur 100 :nl' _{Eitarahah 20 ral}

_Hel5

_{N, tepatkan sarnp*i randi garis dengan air suting}

Fersiapan ca*toh

a)

Asamkan

contoh

sampai

dan

standar dengan

HCL

pekat

sampai mempunyai

konsentrasi asam

2 N,

tambahkan

KI

_{sampai rrertrpunyai konsentrasi}

_{K1 ?00}

_mg/I. Biarkan s*iama I

j*m

atau panaskan S0 . C selanra

l0

menll"

b) Conrah siap diuji

Cara Kerja

Periksa corrtnh pada alar AAS

Ferhitungan

I'litung

kadar

Antimiln

daiilnr

cortlch

dengan nrenggunakan

kr:ry*

kalibrasi atar!

persamaan garis regresi iinier

Kadar Antir**n

_{Sl;:

Hasil penrbacaan

672

CcrnaranArsen

Cara

uji

e€lraran arsen sesuai _{riengan Sl-Jl}

_CIl-i:5.{

_-ls*8,

_{fara u;i}

_air

_{rrri*urn clalarrr}

5.7.3

f*naran

Barium.

Prinsip :

Analisis l*gan: Earium

rr:*g1I

spektrcphoronlerer _{serapan atcn i:ercj*sarkan pada}

:::::-

peny*raFan energi raetiasi

cfel

arcn arnm yang bei.beda.beda _{tingkal tenaga}

Peralalan

a)

Labu

*kur

95,

5*,

!fiCI dan ltl${i ml rerkalibresi

b)

Labu ukr:r

I0**

mt rerkalibrasi

c)

Buret I0 rnl terkalibrasi

d)

Fipet nkur 5 dan t 0 mt terkalibrssi

ei

S*!as piala

l}

Pemanas li*rrik

g]

Spektraphoiometer _{Serapan At*rr.r}

Pereaksi a) b) c) d) e) Persipan eontoh {iara Kerja

P*riksa *clnt*h pad:r _{alat AAS}

Larutan Induk Barium i0S0

mgl

It:b-lF

1'436 mg

*1tu=

kering ke dalan rabu r.:kur r000 r::r, _{Ta*rbahkan 20 ml}

Hfl

1N

" tambahkan air suling san"rpai tanrla garis

HNO3 p.a

HCI

lhl.

Larurkan iG

n{

Her p.a menjadi

i60

_{rnrdengan air *uling daram geras ukur}

Air

s*ling bebas logan:

Larutan standar Bariura 5, 10, 15,

Z*,

25dan

j0

_crglliter

Piper 10

rnl

laruian

_{induk Farium}

_{t0{ro-'urg,i;;;"tl}

Coto*

labu

ukur

t00

ml, tarnbahkan _{air suling bebas lagarn}

ye,rg mengnnduog HNO3 _{i-l,5 ml HNG3 p.alliter),}

k*cok

l?

kali _{10* uglml}

Tuangkan larutan

l*0

ug/r-nl _{Barium kedalam buret rnikro}

t{r

n11. Alirkan _{ke dalam}

50

nl

rnasing-masing

_?,5;5;

_?,5;

_i0;

_{1?,5; dan}

l*{ ial. _{tepar};an sampai tancla garis}

!;XTlair

suling bebas _{logarn yang mengaldung F[NO;}

_{p_[*1'l*r_k}

masing_n.rasing

a)

bi

Asamkan ccntoh sarnpai

pH.:?

dengan HNC: pekat

Fipel

l0*

ml canr*h-ke"daran: _{piara geras}

_{?j0 r'r,}

uapkan _{rria{as penangas ristrrk,} sampai volumenya

_*

5 *.rl

Piadahkan _{eontoh ke dalarrr tabu}

_{ukur r0;nr,}

[:iras pia]a _{g*r*s c*ngan}

_*ir

_{sirring yang}

mengandung HNO-: C*ntnh siap rliuji c)

Ferhitunga* :

F{itr:ng kad*s B*rir:rn dalam *ontoh dengan _{rnengg**akan k*rvEkslibrasi atau} psrsanlaan regresi lir*er

Hasil pembaca*n Kadar Eariu*r _{8a}

-t0

6.7,4 .e*maran Scrcn

l'

rnnslp

:

-Eila santoh yang

freilgaldlog

Boron _{dan curcurnin eliaramkan} rta:r _diuspkan akan

lerbenfuk w&m* merah dari rasecvanine,

Peralatan :

ai

Spekrr*ph*toft€t€r dengan Iebar celah I,0 crn pada panjang g*l*mbang

54fi

lrrn

b)

Cawan pcnguap

t0*

-

1j0

rnt, mempunyai trentuk

d;

_r,ffi;;

_t;;-;E

_i-rltr"

d*ri kearsa ataa platina

Penangas air yang _{dilengkapi dengar pengatur suhu}

Pipet nk*raan

t,

?" I0 dau 25 ml terkalib,rasi Labu

uhrr

35, 5s, 10S dan

ls**

ml terkelibrasi Fipet ukur

l0

ml rerkalibrasi

Gclas ukur

i00

mi c)

d)

ei

s

s)

Pereaksi : Sirnpan seffiua pereaksi dalam botol polieiiler"l.

4

_{?*1ry-indr:k Forarl}

larutkan 5?1,6 mg asam borat anhidrat;

H3Fcr

keelalam labu uleur 100S ml dar: tarnbahkan *ir suling sampai randa garis

1

ml:

l*0

ug

B*r**.

b)

Lar*tan baku Boron" Fipet 10,0* rntr larutan induk

Brrcn

_{kedalanr labu ukur I00CI n*}

tarnbahkan

air:uiing

sampai tanda gi:ris.

I

ml

=

1,00 ug Boron.

c)

Larutan per*aksi k*rkumin

Larutkan 4S mg kurku:nin dan 5,0 grar?r asam oksalat kedalam

80 ml etil

alkohsl 95% didalarn labu

uk*r

1000

*ri.

Tambahk*n 4.? rnl HC! p.e. Teparkan dengan etil alkoh*l 95s/n sarnpai tanda garis.

Cara Kerja

a)

Fipet _{0 {*lanko}" ?5- 50, ?5 dar:}

_ll}*

_{ml larutan bak* Bcrron !,00}

_ug

_{lalu masuklean} kedalarn

iabu

ukur

100

ml.

tembahkan

air

suling

sanrpai t*nda"

garis

**hingga diperaleh kadar Born:: r?rasing-masing _0; 0,?

l;

*.50:-er,:

j

da* i _{,fi n,g}

p*,

lirer

goi*n

b)

Pipet larutan

bak*

Br:ron. csntr:h

d*n

blanka

_{*ir

suting} masing-rnasi*g

I

rnl

kedalan sawfin _FeEgueF

e]

Tamb*hka*

4'*

ml larutan pereaksi kurkumin. uapkan diatas p€*al:gas eir pada sulru 55 +

2*e

selama lebil.r kurang Bfl rn*nit sanrpai _{harnpir k*ring;, ke*:udian dinginkan}

pada suhu karnar

eJ

Bilas cap':rr dengarr

_etil

_.rlkoh*1 g5-*;,s, _t,lntbahk;rn

ctil

alkr:hr_ll ?Soli: sarnpai tanela

garls

*

P*riksa *er::.ar spektr*pr:r:r*lrielcr pada pa*tang g.-r'*rbang

_i4*

_nr*

Ferfrit*r:ga* .

Hltr:ng kaclar

*oron

dalanT cot.lloh dergan rnengeun;ikan _{kurva I.;.librasi ara* p*rsarjjann} garis regresi linier.

6.7"5 Kadmir:in

cara uji kadn:iunr sesr:*i der;g:n sN{

0i-:5i4

_'lq{}g,cera

_{uii ai:.irirrxnr dalern kexia*an}

butir 17.3

6.7.6, Klrrorrriurrr

Cara uji khr*nririnr sesuaid*ngan _{SlJl Ul=-j554-l9ig.}

531s gji ail rninrrr:r dalarn kernasan

butir 1?.

6.?.7, Ternbaga

cara uji teinbaga sesr.:ai rl*ngan

sl'll

e _{1-i554 -1998, cara r:ji air minunr daianr}

kerRasan

b*tir

17 ?

5.7.8. Tinrbal

cara uji tinrbal scsrrai rlertgan

_{sl\tl *l-i-554}

_-l?g8,

_cara

_uji

_air

rxinum dala*r ke;nasan

butir 1? I

6 7 9. h4angar.r

{lara uji _{ffia*qat} sesu*i dengan}

_{Sxt 01-i5:4 -l!?g,}

cara uji air rninur:r dalarn k*masan

butir 16.

6.7.1{} Raksa

cara

ujl

raksa s*suai eir.ngan

_Sxl

_0l-i-i-i.i

_{-1gc:s. f_iar.a}

_uji

_{:tir *rinur:r rJal*m}

kenlasan

6,7 I 1"

f**rar*n

Seleniunr

Prinsip

Analisis e€ffa!'en logarn Seleniunr dengan spektr*phatorlleter se:,3Fan at*l:r berdasarkan pada pr*ses penyeraFa* errergi _{radiasi oleh at*n:-:rtorn yartg i:erbeda-bsita pada tingkat} tenaga dasar

Peialatan

a)

Fipet

I,?

5, 10 mlyang terkalibrasi

b)

Euret 10 nrl deng*n ketelitian 0,01

*:l

dan terk*tibrasi

c)

Labu r"rkur l00ml dan 100f rnl terkalibrasi

di

Spektr*phctomet*r serapail atom

e)

Erlenmeyer

Pereaksi

a)

Asarn klarida pekat

L''i

Air suling bebas logam

*)

Len:tan baku $eleniuni lCIi)0 ug/r.nl

d)

Larutan NaSFL : 3 gr NaCH +3 grarn lriaBi

_L

larxtkan der:garr air sutlng 5gilr:ri.

e)

tarutan staneiar seleniu*r l0.uglrnl.

Pipet 1

mi

laruian baku Selenium cliatas rnas*kkan

ke drlarr lab* ukur

lflf]

mI ditambah 20 nrl HCI 5 N. tepatkan sampai fancla _{garis dengar air s*ling} bebas lagarn

i)

Larutan standar seteni$itr 1000 ug/rnl

Pipet 10 *rl Iarutan Selenii"rnr

_l0

_{uglndclialas. rnasukkan kedirlam labu ukur I{]00 rni,}

ditarr:bahka* 20*rl

HCI

5

N,

lepatkan sampai tanela gari* :iengan

air

suling bebas

logam

g]

Larutan st6'r.lar seleniun

5;7,5;

l0;

12,-5.

li,

dan 30

uglliter.

Fipet CI,-i ml. 0.?5 ml, 1?,5

nrl,

15

ntl

lamtan standar Seleniulr

l0f0

uglliter

masing-masi*g ke da!an.:5 buah labu

uk*r

100

*rl.

Ditar:'ibah

20

r:-ll

HCI 5

N.

_{tepat.lan sainpai tanda garis}

dengan air suiing

Fersiapan ecnlclr

aJ

b)

Asarnk*n c*rrtoh dan *lanilar dengnn HCI pckat sarnpai nrernprnyai k*nsrntrasi asa*r

5

N

panaskanT*n

c

_{s*lanrir -i0} r*cnit. dinginkar.r sar:-,pai surru ksmar Cont*h *iap diriji

{-araKrrja

Ileriks* eonlCIh pada alat AAS

Perhltungan

Hitung karlar

Seleniu*: dalam

fonioh

d*ngan r:rengnrrrakar:

kun;r

kalibra:i

atau

persar'tlaaii gari* reqresi linier

Kadar Seleniun'r _{Sel --. H:rsil pertrl;acilan

6.8. Cer::aran Kimia

*rga*ik

6.8"

l.

cemaran _{Festis;d:r {atdri*,} die}drin" diklrrra*, h*ptakl*r, r*e.:hr:ksiklcr,

pfB}

Llara

uji

kadar pesrisiela _{ses*ai d*ngan}

_SNl

_{06 -250s}

_-ltigl,

_{l"{et*rie p*:igujian} kadar pestisida klar:organik clalan: air derrgan alat kr*;.rrat*grapi

6.8.?. lleterg*n

Cara

uji

_{kaei*r *etergen sesi:ai de:rgan}

_sNl

_{ij6-:4?{:-1991, Ir{e:ode pengujian kadar} det*rg*n datam air d*ncan arat *pektrt-rfcrometer secara binr metrl*na

6.S-3. h{inyak mi::er*l

cara

uji

rninyak _{mi*eral s*srai riensan}

_sl{l

_{{i6-?I0?-t?91, h4etade}

_uji

_Minyak

dan

Iarnak e1alam air sceara gravinr*{ri

6.9

Cenraran mikrcl::r

Persyaraf an

Mikr*biclcgi

Selarna pemaseran- _{air *rineral alarni}

a)' harus bermutu sedernikian rupa sehingga tidak menimbulkan gf;lnsgua* keeehatarr

terhadap kcnsume:r _{bebas dari nrikroarganis:ne pat*gen} b). hanrs aremcnuhi persyararan rnikr*biol*gi sebagai neJt*ut ,

l{anrs tidak terdireiesi pada setiap ccntoh Bila

>

1

at*u

pel.rgrijian ke ? diker,jaka*

./1

bila > 2 dirclek

c

:- nilai rnaksirnutn vang _{eiapat cliteri*ra atau}

j*rtlair

_{eont*lr yang rtiijirkari}

ada

bakterinya

nr : j*nrlah rraksirnurn bak:eri _{tler griirll}

jl4 _{r nllai yar:g digunakarr untuk ti*gkat}

peneri*aan eiirrima at;ru

dlr'lak

Fersiauan 0e*ama Pergujian pertarna

E. Coli atau calif*r*r iahan panas Ix?50 Bakteri bentuk ecli _{tatal} tx?-:,0 ml Feeal steftocacci lx?51) mI

Psedntrnnas aen:ginosa

_Ix

350 *rl Anaerab pr*duksi sulfite

lx

50 nrl

Pencuiian kc dua

Bakteri bentuk Ccli _{taral}

Streptecocei feeal

Sulptritc-r*elusi ng a*aer*b Ps*udorncnas aeruainr:sa

n :jurnlai, contclr

I

fr

6.!.1

Cara*ji

ceffara* mikrsba,

TFf.

bakteri bentu!q er"rli, E, cr:li, Srrept*coccus, dan

C.

perfringens sesilai cicngan sesuai

SNI

C'

i-28qi-

ttg2

cara

uji

*e:xaran

mikr*ba.

6,9.2 Analisis

eslifsrs

metode _{pe::yaringan {merribran fitr:eri.}

*.?"?.1 Pri*sip

Fe*r.rrnb*han bakteri

cslifarm

setelah contch diinkubasikan d;ilam perr-r!:enihan vang

cccrk

seiama ?4-48 jam pada suhu

i6 1

l"C

6,9.?.2 Peralatan

*\

Fipet ukur

l0

mt atau gelas ukur 100 rnl

b)

Cawa* petridiam*ter 5fl - 60 rlrm

c)

Penyaring nrernbrarr 0,45

di

Finset

e)

Unit alat penyaringan _{filrration ur.:ii}

f)

Le*ari

pengerarn

i6

i

1" C

6,9.2.3 Pr:mbenihan

Vialer red bile agar

6924

Carakerja

ai

Pasang peralatan pe:iyaring :nsrnbr-** yang terdiri da:'i caro*g* nembran penyaring

dan pertan:pllng yang telah disterilkan lebih dahuft:, dan ir:.rbr.rngkan dengan vak'rm

sistem

bl

Masukan 100 ml cuplikan eont*lr atau sejumlalr yang dip*riukan kedalam rorong

dari alat penyering dengan n:enggtnakar: pipct atau gelas _uliur steril

c)

Fergunakan vakum untuk penyaring cuplika* rnelaui n:smbran dan saring crrpiikan selumhnya.

d.}

Bilas sel*ruh per:nukaan dalatn corong penyaring ric*g:r:r air pengenccr atau air suling steril yang jumlahny;r sama dengan junr,ali cuplik;.n I'ang disaring cairan pembilas

e)

Sesudah pernbilasarr selesai. hentihan vakum

*

Buka kemi:ali peralatan penyaring dan dengan pir:s*t yrlng steill angkat membran penyaring dari alat penyaring.

g]

Letakal lnerubr*n penyaring di atas peri:enilr viol*t red bil* ag::r elalar:r carvan petri

{usahakan jangan ada gelernbung udara di bawatr rnembr*r: i.

hi

lnkubasikan calvan dengan pcsisi terbalik paela 36

*

1

of

si:lama 48 j;un.

i)

Hitung kol*ni yang i:erwartta merah gelap yang berukuran 0.5

*nr

*:tau iebih pada

nembran yang ilenyatakan junrkh bakteri ciform dalarn 1ili] rnl coflroh.

tI

l

6"9.3

Analisls

Ersler*eorri (5tr*pt*co*cii

dengan :xe!*cla _;:eny*ri*gaa

6"9.3.

t

Pd*sip

tls{t:r*cnr:r:t$ g:t'ugy r**rupakan sub grup darl

fe*al

str*Ftoeor$*s

yaitu n:elipxti

:

5.

f*eralis,

,F-f*ec:ia.s, 5-

gullin*rnrr

da:: S. at'ittttt.

E*teret{}t:€:i dibedakan dzri streplrv:ocef yang lai* dengan k*r'r':ar*pua::ny* untuk tumbu}t dalam perber':ihan rnengandrrng 6i9'i' .,1"i*triunr k!*riela _{f:aCl} pad< perbenihan d*:gan

p}I

9,6 dan p*da

l0'f

darr 45'e .

K*l*ni-l:*lgnt ent*r*e**ei

berrv*rn*

rurerah

mud*

san":pai merah

d*rrg**

endapati berwarna coklat ke*rerah-i'ueraha:r dibawah saringan paela

prircnihan

E

Agar *nluk

e

nter***cti

setei*h dieram pada s*,hrr

4l'C

-.l, 0,SoC selan':a 48 jern.

6.*.3.?

Feralat**

a) Batnl c*r:t*h

bJ

Bot*l

pengencer c) Fipet

di Carva* petri

e) Unit alat pe*yarirrg

fl

Penyaiing mernbran 0,45pnr g) Finset h) lnkr:trat*r

i)

Mikroskop/kaea pembesar

j)

Tabung reaksi kJ

Aut*klaf

S.q.3.3 Perbenihan

a. rnE agar untuk crllt'r'(rcoc(i

P*ptone

i

0.0

_*q

Natriun

klarida,

NaCl

15,0

g

Ekstrak

ragi

:0,0

g

Eseulin

I,il

g Actidi*ne

ieycl*1":exirnide)

0,05 g Nalrium ezida

{Nnh0:}

0,1-< g

Agar

15.0

g Air

suting

I

t

Panaskan unt*k nelarutka:r bahan, sterilksn dan dinginkan paila penangas air pada sr:h* 44 * _{4{:*t.. farrlpur"kan 0,25}

_g

tralit/i-rie rrr:leJ $gnsnn

i

:*} air sul:ng. tarrtba}tkan be}:erapa

t*tes NaOH

*.1 N

*ntr-rk nrela*rtkan antibiotik d*n tarrrbahkan l":edalant rnseliunr Lrasal.

Tambahkan 0,15

g:,3.5

-

trilenit telraz*1!ulr"! khk:rida dan

k*i:ok

benar sr,rpaya lalr.it.

Tuangban agar kedalar:r caw&ft petri

I

x

50 r::nr srtrlratr 4 sanrplri 5 rnnr _{kira-kira 4

-

6

rnl)

darr biarkan ntcmadat, prH

akhir

l:arus

?.1

_;0,3.

Sirnpan cawan yang sririah

dituangkan, d*!am gelap pada suhu 2

-

1fi"C. Euang *etelah -10 hi,ri tr':enyin':panart

{fatatan

. Medium ini diliarankan r:rrluk nte:'rrbiakkart ctr{rrtrctu"ti dalaln

air

ilarr air laut

r:*t*k

k*perl*an rekr*asi).

Subrrr*t ll-i..1

il scu iirr

Fei;-ic i:iiraie

. \l|- St.rlillg,

pltr

sebel*l:T

iJi

au:r-:!l:if 1:;i;.tis

7.1

':' i.i.2

_{F:rrr;*t;,:* *nlLrk lt-q:lai-r!f!:an i,:rl:;r*-l:,.:?.:r:n,}

si*l'ilLell- Cal: di::ginkatt p;lda _{ilcr11il;1!.:t5;rir 1:;iri.r.s.lirrr .1J -.ir,"C.'i"L;;*:ri:L:,:n r.riciJirl:r} kr.dal**r Cfi!1'en _{p:clri trkirr'*ti 5rl}

_{rltr.r.er:il:l}

-{

_-

!

i:r:.lt _{ik;ie-kir;:.1} _ _{{: rrrij Carr 1.:iaik*::}

tll*11'ii1{jfi|. 5!npsn _{r.a1vft:l _v:ilrq} sutjall ditr;:at},*r.:

ii:lli.:r

_friai:

_i.;:rc:r sul:rr

: -

ia:,,(, 13*:*ig

5eaelah il.l haii penf inr;;arra*.

{: :lt a gai t t t lr rt ;t:t:t:t' tr.1 _{i1;tf t1}i.,{iar tt} / _{.tl t.t,}

t' :/ r ir,,r., I I il r; fIi r

_{.. :}

.Li tt ,,

lt

i tvplr-;.t<:

Ekstlat;aci

{,llukrsa

llip*1a,ti L:nr lt'rsi;i:. K j, I I

Pli;

X atriunt azirja, N ali{_},

3.,i. 5 -l r: f*rr i 1 ii:tra zoli;-: I'r k h I *ri;la

Agar Air sulinc 2i'i.{} 5.u 1.0

j.{l

r,,+ tl. l i ir.!l i

Panaski;*,,rr:tuk t:r*la; it i li an hl Jra n-brl ! r:-:a.

x

5ff rrrnr setebul _'1

-

5 n:rn {kir-n-kir;r 1 -ir;fit"tirtu

*f

*!.f

l:rtt:t

Iufittilt,t

r,f !.r'r.f

lit,

tt'l l't t. r) e t;-r- c y t i: 1 t / ts r z

t

fih"rkr:rs*

N*lri**:

l:iri*rida, N :rfll

llinalrill.;r hidrr:qr:n iirsl;:t. n r;H fr{};

Air

suiinu

e. .4,qir;' hru i t t- I r :cr t t t : fi t.t i i :: t

J ersan dirr;t',rlultl. Pir;r i,l:!,;.lrr

6 :r':li dan bi;irkari :nc:,:iid;i

l,*

catr,,il::

_;:*lri

I

5ii:pkirn nrrdir:r:r s*:iat utlirlk tiap-til1r se{

irr:ttrh

{{laiarar:

h.'{ediL;r'u _{ini riisaralrk.rr unluk .\,i/.{il}iil{,,J{.,{,/}

_{n}p

_i}

rl;lla

d. 13r*tst-lttrt t

*tiiti;tlu

hr{}{lt

"l-ari:ba1ll'an

I:i.{i g

;,isar

krlliiiit:::

|:hir:t-i.;irr}

tr}tlgL

ii,lri":: 7""1 rc:Lldai: *le l:1:r::.ii

:r ;rir cJ::l ;ril ialirj

{v';;:ti-f:t:

tt'i

il

tlttti*u

l:rttllt

71)tt l, 1l l I tl- ai 2,t) 1. tl

:,:

t ,.1 I !'r {

I i\tiri i::lf ril'.li1ti

L-L::trrl. Lrr;:f' l),"-.t,,,'-' . \ !ir 1.'r '\

*xgall

!1s'.:r:1i:t

Ferric citrate Agar

Air

suling O5 t'

l5,S

g

ll

Panaskan untuk rnelarui!<a:r _{bahan-bair*n Findehkar S}

- l*

_mi

_{k*dalarn iabung}

_*nt*k

dibuar *gar miring atau ju:nlah _{secukupnya kedalarn labu agar dapat dituangkan k***lanr}

eawan. Fanaskan di autsklaf pada

i2l"C

selama

l5

n:enit. Jangan terlalu panas karena medit:m akan mertjadi benvar*a gelap" Di;'rgir:kax sanrpai

44

-

46.C

rla*

dii:uat slant pada tabung atau pindahkar': 15

ml ke

rlalalrr 15 carvan greiri 15

x

!00

mnr. ses*deh sterili*asi

pl{

akl*r'lrarus

6,61*"?.

Sinrp*n pada suhu 4

-

l0*C

6

9.i.4

Cara kerla

a.

il

etcda *tE,

l)

Saring

t00

_{nrl contoh lervat me*:brair steril ukuran 0.45 i:m r.r*tuk r:rendapatkan 2*} sarnpai

6i)

k*lo*i

pada perrttukaan nlsnrbran. tetakkan i*e:':rbran petryaring diatas

mediur* agar dalarn cawan petri, hindarkan jangan ar"la

get**b**g

udar*

dibawah

m*rnbran-?) lnkubasikan cawan d*rgan posisi terbalik pada suhu 41.{l -i

0,:oc

selama 4g jam"

l)

Se:elah dieram selama _{48 jarn, deng*n hati-hati ietakkan merrbran ke medium EIA.} lrrk*basikan pada

4l"C

+ 0,5uC selama ?0 r-rreriit.

4)

Hituxg

kol*ni

I:t'tlerrseaeci yang ber,varna nrerah n:uda s*:npai rnerah :nembentuk endapan hitam atau c*klat ke r"nerahan dil:alik penyaring.

_i{itplg

_{kolani r:renggunakan} lar:rpu flu*resen d*n kaca perirbesar"

li

Mettda

rn.I:'r #ertser: te* s

l)

Saring

I00

rnl c*ntch _{lewat nernbra* steril ukura* 0,45 iun *nluk;-ne:rdapatkan ZCI}

sampai 60

kcloni

pada perrnukaarr _{membran. Letakkan menrbran penyaring ellatas} medium agar dalanr cawan petri, _{hindarkan jangan ada gelembung udara dib*wah}

ntemlrran.

Biark*n

ca$ran selama

i0

n:errit, kernudian inkubasikan dengan pnsiri terbalik pada 35n

t

0,5uC *elama 48.iarn.

fiilung

s&rnr:a

koloni

yang benvarna nrerah terang

daa r:erah

gelap sebagai

err{n"aessc*i.

Hitung

k*1*ni

dengan ineng*unakan

lamp*

fluoresen

darr

kaca pembe*ar.

6 9"3.5 Perhitungan densiti

l;xuf

stt.t:ltto*x":ti ata*

lirl*r.ct:rnti

.

Hitung densiti dari ji:rnlah _{larnple vang *re*ghasilkan hit'*ng** rlalanl mcrlbrane {ilter}

k*lerni./c*ll slr€pl{}{od:ci ata* e;rlct'r.,e:.rf.:l _alltala

_3*

- _{60 ko!*ni.}

Knlani t:ttttr{}{"{tttt yang dihir.r:ng

x

l0S

Ci:ntslh yarrg elisa;ir:g _{nil} 21

i)

IJ

$.?.3.6 Ujipe*egasa;r

Aftbil

k*l*:'ti-kcilani yang diduga dari m*:nbr::n den

g*res kr:

afas pe.rrukaa* agar

brai*t'hesrt

infirsiat

etralam f&rvan _{Erarn pada suhLi J5iC}

+

₀

_i"e

_{seian:a 34}

_{g

_jarn

Findahkan satu sengkelit

koloni

yang terisolasi

deng** baik

na*a

agar lsrair>ie*t.r ittfusiisrz ke dala::r seb'uah tabxng _{ya*g berisi kaldu &rajlr-he*rt ti{rt.ri*t-daL.r ke} masing-:n*sing

k*

atas permukaa:r 2 gelas sediaarr ya;:g bersih. trram kaldu hy*itt-he*rt infrtsiott p*da suhu

35of

_t

*,5uC selan,a 24 jarx. Tambihk*n beberapa

t*:*s

hidrogen peruksida

{F{.Ct} segar

ke

atas *lesan pada gcfas sediaan. _{h.{irnc:;lnya {tin"rbulnya}}

gei*rlbung-gelernbung

_{udara pada *lesan}

_iersebut

_rrenrnjukka*

_uji

_latalai*

_pcsitif

cla*

mennnjukkan bahwa

k*lani

yang diduga buka* anggata darl

grup

_fecaf strepftse7sui" kala* u.ji kalalase _{negatif {tidak} ada gel*rr,l*ung-gele*rbr,t':g _{ud*r*} bual pervarn*uo grun";} dari gelas s*diaan kedua Fccsl s!rcpftlc*t:t'i

**n

ttsrcrrsrsici adalah bakieri gru,r, pouitiq sel-sel bul*t, diarneter 0.5

-

!,*

_{pn: paling b**yak rJitcr*uk*n dslam bentuk berpasangan}

aiau rantai pe*dek.

Findahkan salu sengkelit srrspensi _{perlumbuhan dari kaldrt hr*in-,iear-t ittfitsi*rt}

masing-rnesing

k*

dalam perbenihan sebagai berikut : agar

lflr

esesrlirr _{rram pad-a suhu 35*e

i:

s"5'c

_{*ela:ns 48

j*m}.

kaldu hr*ifi-}reart

iurttsiru

_{ieran", pada srihu}

_e5"c

_t

_0,5oc

{selama 4& jam} kalelu _{hruitt*hesrt i*fir.tirxt tleng*n g"5% N:rriiu::r klarid;r}

{fq*Cf

}

{eram

pada suhu 35.C

t

0,5of selarna 48 ja:nl.

Bila

uji

pen€gasan pada koloni-kcilcini

tersangka

rr"renghasilkan

_uji

_{katalas* negati{}

tambah pada agar hile

es*lin,

merupakan hakteri b*lat gram

plsitii

d:rn tumbuh

_lada

suhu

45"C

dalam

kaldu

br'an>!r*at'l

_infitsirn,

_rriaka

_kal*ni

_yuog

_{diduga tersebut}

iermasek dalarn grup

_,&cs{

strtg;{etuocclrs. Bira

knl*ni-koloni

_1:ang ciiduga

itu

dapar tumbnh juga pada suhu 45nC dan kaldu hrtin-!t,ut

r

ntlir-vrtrr ynng rxenganduyrg 6,56r'o

NaCl

menunjukkan bahwa

koloni-k*lcni

tersebut ciinrilki

q:*'n-*runt

dalarn _Srup

etvter$e {}{:c!r"s .

6.9.4.

Pseudcmon*s aenrginasa

€,9.4.1 Metoda penyaringan _{rnembrane

filt*r)

6.9.4,1. _{1 "} Fririsip

fertunttrnlran P. aeruginr.rscr pada pengeringan _{me*rbran dengan}

_llat

_{in appearanee with} light auter rims dan bir:tik coklat sanrpni hijau hira;':r clitengair sereialr

ilierinr

pdea suhu

41,5

t

n,5'C

selama _{72 iart} rJar.:ra per:.rbenihan yans c*er:k.

6?.4

l?

Peralaran

a.

Gelas ukur

l0*

r:'rl

tr

Pipel I0$ nrl

e.

Finggan

p*tri

50

x l3

nm

d.

Pengering *rernbran garis tengah 0.45 n':rn

e.

Pinset steril

f.

Unit alat pengeringan _{{filtratir':n uniti}

g

l,ercari pengeram 41.5

t

fi,i

"C

ln r r - h

0..r.+. ! .-i. rernenrl'):rn

a.

R'{-PA agar

Agar ir:i tidak bis* didap*t dalam s*bagai* b*rikut :

L-

Lysine HCI

?=lairir"rrn kla rid a, NaCl

Yeast sxtract Xilosa Suhr**a Lakt*sa

Pher"r*1red

Ferric an:rncnium citrate Natrium tiostilfat, Na-S "O, Agar

.,\ir suting

bentuk clehydratcd

&

bisa rlis,i:pkan dari bahaa rlasar

Larutkan semua baharu-bahan dal.tm air suling. atur pH 6-5

::0.1,

rtsriikan menggr:nakan

aui*klap pada suh*

l?l

"C selama

l5

rnenit, setelah steril, dingir,!:an sanrpai suhu 5-5*S0

nC,

Aiur

pH kernbati rxenjadi 1,1

*t),?.

Tambal'rkan antibislrih

kerirg sulfapyridi**

176 mg; kanai:rycin $,5 mg,nalidixic acid

i7,0

nrg; dan cy*lcheximid* 150 nrg untuk

I

liter perbenih*r: iersebrit diaias {antibiatik ter:al'rllf pr*cluksi Sigr:ra Cl*lr:isal Ca., St. L*uis,

Mo.,

atau sejenitnya) Sesudali sei:1ua

aniibiatik

tereampur, :.*ang sebanyak

I

n{

perbenihan kedalam pinggan petri berukirran 50

x

1? mnr. Simp*r pir:gga:r-pinggan yang berisi perbenihan tersebut pada suhu 3-10 "C. Buang perbenih*n yang

tidak

t*rpakai

sesudah *atu bulan penyin:pa:ran.

b.

X,{odifikasi M-PA asar

{M-FA-C

agar yang iersedia secara kr:n,ersinl :udah menganrigng :nagnesium,sul&t, kananrycin, dan nalidixic acid).

c.

Agar susu _{{milk agar) nrr:difikasiBrrrvn} ci*:r Sc*tt f *ster

"1,{i gr itl cr 'I 1l *r ?.5 gr l.?5 gr I ?i trr 0,*8 gr flRcr 6,8 gr I5,0 gr

I

liter Bagian

A

Susu instan tirlak berle:xak

Air

sirling Bagian 13 ?rj*1:iel brc,)lh Natriurr kl*rida .

XlCl

Agar Air suling

{carnatiorr atar: sejeni sr:yaJ l0t) gr

50{} nrl

Steriiisasi bagian

A

d:in

B

secara

See.ara aseptik canrpurL*r: bagian

dalam plagan petri b*nikLrran trliO

l?'5 gr

? \ gr

15.0 gr

5{i0 rnl

terpisah. setr:lah sieril c*pat d:nginkan sar:rpai 55 *C. & da* B, Ialu t*anq lebih kura*g 2l]0 ruI _iierb*nihan ke

x

I 5 nirii

6.t.4.I

4. Cara kerja

a.

Uji pendugaan

-

Fasang _{peralat pelyaring necrb:'srr yang i*rcriri eiari}

cr:reng, Frea-:bran _{penya,i$g da*}

penenrpllng _{ya*g telah disterilkan iebih dal'rLrlu dan}

hub*ngkin ii,:ng*,r

uutu*

sislJr*.

- &4asukan 200 E:d cuplihanm contoi:{naiur*l waler} ata*

_i0*

_-

ji}i}

:*!

cL;plikan c*;'tch

{air kotamrenacg} keelala$} _{c{trong dari alat p*nyuiing <lengan}

Rrenggun*kan pip*r ;rta'

gelas

_*kur

steril.

-

Fergunaka:::

v*kuu

untuk _{menyaring cuplikan ;r:elalrii me*ri:ran dan saring cr;plikan}

selur*hnya.

- Bilas seluruh per:t;*kaalt _{dalail corong penyaring dengan}

air peng*ne*r fftau air

s*li*g

sterii _{yang jurxlalrrtya satxa dengan ju*.rlah i,Lrplikai yang disaring. $aring}

*airan

pernhila s

* _{Hentikan vakum s*telah penrbilasan} selesai

-

Buka kembali peralatan

,per':yaring dan riengan pinset ya::g sterir angka! membran penyaring dari alat

penyaring.

r "-'*

-

Letakkan membran penyaring

di

afas perbeniha*

_M-pA

_{

_{*sahakan .langan ada}

gdembxng udara di barvah mernbran _).

* Inkubasikan _{cal?an dengan p*sisi t*rbalik pada suhir 4I}

_5 -i 0":

f{l

selama 72 _iarn. - Amati kolcni yang diduga _{lJ.cerullinastL durgan ciri-eiri sebagai i:erikut:}

_kal*ni

dengan

diameter 0'8 - ?'2 mm. _{F€nampakan rata {f}aiJ cl*ngan lignr}

_o;ter

_ring

clar,r bintik ccklat

sampai _{hijau hitam ditengah Hitrrng kor*ni yons}

_dcugidari

membran penyaring yeng mengand*ng 20 - B0 kcloni.

b.

fuji penegasan.

s*res

kaloni _{lersangka diaras pern:ukaan perb*nihan agar susu s*panjarrg}

_z

_{_}

₄

em.

it*ubasi _{pinggan-pinggan tersebut dengan posisi}

terbalik"pada sulru 35

*

1,0

"c

selarna

?4 jam. _{fl,aerugin*.:* rnenghidrclisis casein}

dan rne:Tghauitt

.n

c;r-rrible pig:nen kuning

s*mpai hijau,

6.?.4 1.5. Ferhilungan

Hitung dan cata: jumlah koloni p.erentgi*r:su

_I

_{I00 r*1.}

*.9.,4.?. l\',leta<la Angka I?aling l\*-rr.:gkin,

6.q.4.2. l.Prinsip.

Periumbuhan !''*entgitrr''1{? yang ditandai *danya pigrnen fl*nresccrr berra,arla trijau, _.}ika tabung-tabung

disi*ari

_{;:anjang ge}*rnlrang}

_{sinilr ultra}

_vio!*t

{

sinar

i:itam

_i

dalam

ruangan gelap sesudah _{dierarn pada suhu -15}

_-

_:?

_"f

_selarr:a

?4 jarn rJalarr perbe*ihan

yang cacok.

6.{}.4

2.2

Fer;rlatan

a. Tabu:rg reeksi b. Pipet ukur

c. Inkubslar { le*rari peng*r:tm } 35 -

i7

'{1,

6 9.4.2.i Perbenihan.

a. Asparaglne bn*thPeri;enitrra*

i*i

lieiak bi:a didap;il dalar:: ber,tuk dchydratcd dan bisa

disiapka:r dari baha* dasar sebagai berikut. Asparagine,

FL

fu*rydr**s

dikati*m hid r* gerr f,*sfat, K;} {FS1 Magnesiun suliat" l\4.r50+.? H:O

Air suii*g

Atur pH 6"q - 7.7 sebelunr nt*rilisasi.

b. Acetan:ide hrath. Ferbenihan tidak bisa

dasar sebagai bcrikut:

Ace:amide

didapat dalarn bentr.rk dehydrated eian hisa. dlriaptan dari bahan

l,o

g

l.o g

{15 cr

i

liter

Natriun: khlorida, Na Cl

iurhydrou s di k*liurn hidrog*rr fc sfat- K:HF *.r

Kalium dihidragen fo*fat, K[{zpO; Magnesi*rn sulfat" MgSOa.?H;O Fhenol red

Air suli*g

Atur

pi{

6,9 -

7,2

:ebelum st*rilisasi.

c.'

Agar :xiring acetan:ide.

10,il g 5On 'r'3 1"39 g tt ! \ ct

0ir'

.\'5

0rll?

' -'--

o

I

liter

Siapkan bahan-t-:ahafl se _Fsrti pada peitrbuatan afielerxide hr*iir. l:t

*

tantbairkan

l5

g agar

t*ntr"lk

i

I

perbeniha*. Panaskan hahan-bahart iersebut s:ulrp:ri agar larut, Pipet

3

ml p*rbenihitn

ke

rlalan: tabung r-eaksi

b*ruk*ran

1{: rnfit. Seti*dah $t€rilsa5i niiringka* tabung-tal:ur:g

dan

biarkan

sauil:ai

agar dingi* dan

rnen:l,ekir irtttr,rk merrriapat

pernrukaa:r miring vnng

llas

6.*"1.?.4. Cara kerla.

.

Uji p*nil*gaan

Pipet masing-rnasing

l{i

rll

eupiikan ke d;rlartt

I

_{iahurrg }:ang herisi}

l0

nrl asparagite broth double strenqll']

Pipet

rr:asir:g-nrasir:g

I

rr:l elan

{i.l

rnl euplikan kc rlalnrri 5 t*Lrung kcdLra dan kctiga yang

_bcrisi

lt)

irrl

pelh*nihan

aspar;rgine

br*th

si*glc stren,;th Pr:trgcncerall _-y*a*g lebih tinggi eliperl;:kar': urtt*k air kolattt relang.

Erar: tabung-lab:ing terschul pnela strhLi

i5

-

.i;''C.

Sesudah 34.ian.r dan sesirdalr 4$

j*rn

pcn**r*inan

nNtlati iid.'.lrrs-lalrtrng lerseh'rrt di i:arvah panje*g gelo::rbang sinar

ttltra

violet {sinar hi:arn}

f;lattt

l'i:a:rg g*lap, Bila tin:bul pi{inen tlutrese*tt hlau dirryatakan p*sitil'.

l:

Llii pe*-*ai:irl

-

lr:*kulerikar: t-l

I

:'r:l

₁

1 _{s,.:t:rkelii] bi,;l:;:r 1:i:tg 1,i:.,ifil',1:.,;.i;:} pr:rber:ii":ltir:lf*t;i111;dr'br'*thl1i:i'Lt _{{i:fits i;:;:ia:;:,.:;.;i:i;!:;:llt;ti:;}

-

l4i

p;:*c*a:-R;t riir:valrrL:t:: !.11i;iii Irila _]-srl. :r,,i

.:r

....,',.,ii ,,..*.;

L*rcla

pl{ ti*gti

se,t*drir ii,.:r.lu;r :e:ltn:;i

2J,i::l:r

.}* irl::

_l::ri:

.:.:i p*r::iilr::.':;:::

_kr

r-l::}:::r:

:

: :r : ri tt

_*

;,,er l ;..r::i r-j':

;t rrlrri.j;:i!i'.:r':qri {1:* r'6ii: ; .;; _{;1r: i}

_':

_\-l

"t-**{:_i

Pi'rl-:iixlgart

{'atat i*n.:l:il': tebLjng vanq

l'.

.t€*t€iit.3.!'.?

p*t

1aJil i::I

-r::

r

_-

1li.

poiitif

petla t:,.i':

pe;t*gitiilrl

E

eielr g*l'l r:tt:i.:aEl:n:k::;r {;:irr:l

;lLr

hin:l;:

:lngla _it;i;:,t!r rarr::g!"in

,11'11

_i;*';1'

5

r i

lrhr:l:ii

_f-i"*L*l

i.

53:tr*t lul*s

uji

Piirrlrrk iil;':,vci*kell lLritis _{rrji *};rbila;r;i::r::,::tilii iittl:.;i:ri}

_biiljr.i

_{ii,ur s,,niat r1-::.i:u br::!r .1}

E, S-var:rr p**a*d::;rrr

$yarat pe::arrda.:n scsLrai derrga:r

l.inj**g-ui;da;tt

_lll

_{n*l ?}

_tui:i

'tanq nlaini!: ai s*k r: rai : **!.ur*llqr1v3 _t.r:r.n

::

i:l _l

a. Na:;ia pr;elu!:

h

llafiar

hahan 1,;ri"rrr, ;.iigr:;tak,:rr

c. lSeral b*; sili al:iu

iri

bcr::rh

d

r\a:*li da;r ;ri;rrral pti:rlusc:r atar.L inrl:i:r-1ir

e

'lanl'ga1, hrillrl r:1;tn i;ilrlrn kariah-ial-ll:

*

ir,.i,l{r

lii}t!*n*

Fan::::.:

i

_{)'{*t*slalprri5e:i ilcrlthuatatl}

g

3*1;r r''lcrl'rr.rat kanriurge* {*rg,'i

}K

.

xa

.

{l;l

.

1ls

.

l;i'i}:.

.i{).r ,

\l).,

(

t

L

l'flrgrlnrts;r lr

P:cdi:k riiLsr:r:ir il;rlar:t _{n'ajah vi]ng t:i'1rlrr:Lri}

_{rai:;r.:irl:ik}

_{iiipr::gerirl;i ;:t:;u nr.:rr:pentlrrrihl} isi. Fr*riul'; lii-sir:rpar' _{il;rn ':i!,1**tr:t} clerrg;r:'r r.ir.i .,ilrurr

iik

rlr,ir ,lr-:r;

i t,:,,i.i. r.;t:, tli!.:::::