Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Binara Dan Ekstrak Etanol Daun Ulam-Ulam Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus Dan Escherichia Coli

(1)

(2)

48

Lampiran 2. Gambar tumbuhan dan daun binara (Artemisia vulgaris L.)

Tumbuhan binara

(3)

49

Lampiran 3. Gambar tumbuhan dan daun ulam-ulam (Erechtites valerianifolia (Link ex Wolf) Less. ex DC.

Tumbuhan ulam-ulam

(4)

50

Lampiran 4. Gambar simplisia dan serbuk simplisia daun binara

Simplisia daun binara

(5)

51

Lampiran 5. Gambar simplisia dan serbuk simplisia daun ulam-ulam

Simplisia daun ulam-ulam

(6)

52

Lampiran 6. Gambar mikroskopik penampang melintang daun segar binara

(7)

53

Lampiran 7. Gambar mikroskopik serbuk simplisia daun binara

Keterangan: 1. Rambut penutup 2. Stomata tipe anisositik

3. Berkas pembuluh bentuk tangga 4. Parenkim tangkai daun

(8)

54

Lampiran 8. Gambar mikroskopik penampang melintang daun segar ulam-ulam

Keterangan:

1. Rambut penutup 7. Ca oksalat bentuk druse

2. Kutikula 8. Floem

3. Epidermis atas 9. Xilem

4. Jaringan palisade 10. Kolenkim

5. Jaringan bunga karang 11. Epidermis bawah

(9)

55

Lampiran 9. Gambar mikroskopik serbuk simplisia daun ulam-ulam

Keterangan : 1. Jaringan palisade 2. Rambut penutup

3. Stomata tipe anomositik 4. Ca oksalat bentuk druse

(10)

56 Lampiran 10. Bagan penelitian

Dipisahkan dari pengotor

Dicuci, ditiriskan dan ditimbang berat basah

Mikroskopik daun segar

Dikeringkan dalam lemari pengering pada suhu ± 40 - 500C daun binara dan daun

ulam-ulam

Serbuk simplisia

Karakteristik simplisia

Skrining fitokimia serbuk simplisia

Makroskopik Mikroskopik Pk air

Pk sari larut air Pk sari larut etanol Pk abu total Pk abu tidak larut

Steroida/triterpenoida serbuk simplisia

200 gram

(11)

57 Lampiran 11. Bagan pembuatan ekstrak etanol

200 gram serbuk simplisia daun binara dan 200 gram serbuk

simplisia daun ulam-ulam

Perkolat _Ampas

Ekstrak kental binara 63,35 gram dan Ekstrak kental ulam-ulam 73,25 gram Hasil perkolasi

Dimasukkan kedalam wadah tertutup

Serbuk simplisia direndam dalam bejana tertutup dengan etanol 70% selama 3 jam

Dimasukkan ke dalam alat perkolator

Dituang cairan penyari etanol 70% secukupnya sampai semua terendam dan terdapat selapis cairan penyari di atasnya

Ditutup mulut tabung perkolator dengan alumunium foil

Dibiarkan selama 24 jam

Dibuka kran, perkolat ditampung dan ditambah pelarut terus

menerus hingga tetesan perkolat

(12)

58

Lampiran 12. Bagan uji aktivitas antibakteri dari larutan uji

Biakan murni bakteri

Stok kultur bakteri

Suspensi bakteri 108

Suspensi bakteri 106

Diambil dengan jarum ose steril Ditanam biakan pada media NA

i i

Diinkubasikan pada suhu 37 0C selama 18 - 24 jam

Diambil dengan jarum ose steril Disuspensikan dalam 10 ml NB

steril dan inkubasi selama ± 2 jam Divorteks hingga diperoleh kekeruhan yang sama dengan standar Mc. Farland 108 CFU/ml

Dipipet 0,1 ml ke dalam tabung reaksi Ditambahkan 9,9 ml NB steril dan divorteks hingga homogen

Dipipet 0,1 ml ke dalam cawan petri Dituang 10 ml NB steril cair (45 - 500C), dibiarkan memadat

Hasil inkubasi

Diameter hambat

Dibuat lubang dengan punch hole pada permukaan media, diteteskan 0,1 ml larutan uji yang berbeda Dipra-inkubasikan selama 15 Diinkubasikan pada suhu 370C selama 18 - 24 jam

(13)

59 Lampiran 13. Perhitungan data

1. Perhitungan penetapan kadar air

(14)

60 b. Serbuk simplisia daun ulam-ulam Penjenuhan dengan 2 ml aquadest Volume penjenuhan = 1,8 ml

(15)

61 Lampiran 13 : (Lanjutan)

1. Perhitungan penetapan kadar sari yang larut dalam air

( )

a. Serbuk simplisia daun binara

Sampel Berat sampel (g) Berat sari air (g)

Kadar sari larut dalam air = 0,1370

5,0000

×

100

20

×

100% = 13,7%

Berat sampel II = 5,0020

Berat sari = 0,1365

5,0020

×

100

20

×

100% = 13,6%

Berat sampel III = 5,0010

Berat sari = 0,1325

5,0010

×

100

20

×

100% = 13,2%

Kadar sari rata-rata = 13,7% + 13,6% + 13,2%

(16)

62 b. Serbuk simplisia daun ulam-ulam

Sampel Berat sampel (g) Berat sari air (g)

5,0050

×

100

20

×

100% = 13,8%

Berat sari = 0,1372

5,0020

×

100

20

×

100%= 13,7%

Kadar sari rata-rata = 13,8% + 13,8% + 13,7%

(17)

63 Lampiran 13. (Lanjutan)

3. Perhitungan penetapan kadar sari yang larut dalam etanol

( )

Sampel Berat sampel (g) Berat sari etanol (g)

I 5,0000 0,1390

II 5,0020 0,1360

III 5,0040 0,1310

Berat sampel I = 5,0000

Berat sari = 0,1390

Kadar sari larut dalam etanol = 0,1390

5,0000

×

100

20

×

100% = 13,9%

Berat sari = 0,1360

5,0020

×

100

20

×

100% = 13,5%

Berat sari = 0,1310

5,0040

×

100

20

×

100% = 13%

Kadar sari rata-rata = 13,9% + 13,5% + 13%

(18)

Sampel Berat sampel (g) Berat sari etanol (g)

I 5,0030 0,1315

II 5,0015 0,1380

III 5,0010 0,1330

Berat sari = 0,1315

5,0030

×

100

20

×

100% = 13,7%

Berat sari = 0,1380

5,0015

×

100

20

×

100% = 13,7%

Berat sari = 0,1330

(19)

4. Perhitungan penetapan kadar abu total

Kadar abu total

=

Berat abu (g)

Berat sampel (g)

×

100%

Sampel Berat simplisia (g) Berat abu (g)

(20)

(21)

5. Perhitungan penetapan kadar abu yang tidak larut asam

( )

I 2,0000 0,0286

Kadar abu tidak larut asam = 0,0291

2,0001

×

100%= 1,4%

Kadar abu tidak larut asam rata-rata = 1,4% + 1,3% + 1,4%

(22)

I 2,0000 0,0289

II 2,0001 0,0293

III 2,0001 0,0279

Berat abu = 0,0289

2,0000

×

100%= 1,4%

2,0001

×

100%= 1,3%

Kadar abu tidak larut asam rata-rata = 1,4% + 1,4% + 1,3%

(23)

69

Lampiran 14. Hasil pengukuran daerah hambat pertumbuhan bakteri dari ekstrak etanol daun binara.

Konsentrasi ekstrak etanol daun

binara (mg/ml)

Diameter daerah hambat pertumbuhan bakteri (mm) Staphylococcus aureus Escherichia coli

DI DII DIII D* DI DII DIII D*

D : Diameter daerah hambatan pertumbuhan bakteri

(24)

70

Lampiran 15. Hasil pengukuran daerah hambat pertumbuhan bakteri dari ekstrak etanol daun ulam-ulam.

Diameter daerah hambat pertumbuhan bakteri (mm) Staphylococcus aureus Escherichia coli

DI DII DIII D* DI DII DIII D*

D : Diameter daerah hambatan pertumbuhan bakteri

(25)

71

Lampiran 16. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun binara bakteri Staphylococcus aureus

A B

C

(26)

C D

(27)

73

Lampiran 17. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun ulam- ulam bakteri Staphylococcus aureus

A B

C

(28)

C D

(29)

75

Lampiran 18. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun binara terhadap bakteri Escherichia coli

A B

C

(30)

C D

(31)

77

Lampiran 19. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun ulam- ulam terhadap bakteri Escherichia coli

A B

C

(32)

78 Lampiran 19. ( Lanjutan)

C D

(33)

79

Lampiran 20. Gambar hasil uji aktivitas blanko (etanol 96%) terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan bakteri Escherichia coli

A B

(34)

80

Lampiran 21. Gambar hasil pewarnaan Gram positif bakteri Staphylococcus aureus dan Gram negatif bakteri Escherichia coli

A B