Uji Aktivitas Antibakteri Hasil Hidrolisis Enzimatis Minyak Kelapa Murni Terhadap Salmonella typhi dan Salmonella typhimurium Secara In-vitro dan In-vivo

(1)

Lampiran 1. Bagan alur penelitian

Ditambahkan 30 mL akuades

Ditambahkan 12,5 mL CaCl2 0,063M

Ditambahkan 25 ml buffer tris-HCl 1M, pH 8

Ditambahkan 500 mg lypozyme TL IM.

Dikocok dengan shakersetiap 1 jam, kecepatan 200 rpm, 10 menit

Diinkubasi selama 18 jam dengan interval waktu pengamatan nilai bilangan asam setiap 2 jam

-

0 jam (V0) - 10 jam (V10)

- 2 jam (V2) - 12 jam(V12)

- 4 jam (V4) - 14 jam(V14)

- 6 jam (V6) - 16 jam(V16)

- 8 jam (V8) - 18 jam(V18)

Dipindahkan ke corong pisah untuk diekstraksi

V

4

V

6

V

8

V

10

V

12

V

14

VCO hasil hidrolisis sebelum

ekstraksi (Lanjutan)

30 gram VCO masing-masing dimasukkan ke dalam Erlenmeyer 250 mL

V

16

V

2

V

18

(2)

Lampiran 1. Bagan alur penelitian (Lanjutan)

VCO hasil hidrolisis

sebelum ekstraksi

Diekstraksi dengan 50 ml n-heksan

Didiamkan beberapa saat

Residu: Fraksi Air

(lapisan bawah)

Filtrat I :

Fraksi n-heksan (lapisan atas)

Didiamkan beberapa saat

Residu

Filtrat II

Digabung

Ditambahkan 50 mg Na2SO4 anhidrat,

diamkan 15 menit

Diuapkan diatas penangas air untuk menghilangkan n-heksan

(3)

Lampiran 1. Bagan alur penelitian (Lanjutan)

Dihitung jumlah asam lemak bebas dengan penentuan nilai bilangan asam

Uji aktivitas antibakteri

secara

in-vitro

V

4

V

6

V

8

V

10

V

12

V

14

VCO hasil hidrolisis enzimatis

yang optimal

Uji aktivitas antibakteri

secara

in-vivo

Fraksi yang memberikan bilangan asam paling optimal selanjutnya diambil untuk diuji aktivitas antibakteri

secarain-vitro

konsentrasi uji aktivitas “VCO hasil hidrolisis enzimatis” secara in-vitro yang paling baik selanjutnya diambil

untuk pengujian in-vivo

V

2

V

16

VCO hasil hidrolisis: Asam lemak bebas, monogliserida, dan trigliserida

(4)

Lampiran 2. Bahan dan Alat yang digunakan

Gambar 1. Salmonella typhi

(A) dan

Salmonella typhimurium

(B) dalam

Microbank

Gambar 2.(A) Blank disc

; (B) Disc baku Kloramfenikol (30µg/disc)

(5)

Lampiran 2. Bahan dan Alat yang digunakan (Lanjutan)

Gambar 3. (A) VCO Palem Mustika; (B) Lipozyme® TL IM; (C) n-Hexane

(p.a); (D) Tris-buffer (p.a); (E) Formalin; (F) Etanol (p.a)

A

B

E

D

C

(6)

Lampiran 2. Bahan dan Alat yang digunakan (Lanjutan)

Gambar 4. Nutrient Broth(A); Nutrient Agar(B); Mueller Hinton Agar(C); Triple

Sugar Iron Agar(D); Brain Heart Infusion(E); Salmonella Shigella Agar(F)

A

B

C

E

(7)

Lampiran 2. Bahan dan Alat yang digunakan (Lanjutan)

Gambar 5. (A)Ultrasonic cleaner

; (B) Hotplate; (C) Neraca analitis; (D)

Water-bath; (E)

Shaker

A

E

D

C

(8)

Lampiran 2. Bahan dan Alat yang digunakan (Lanjutan)

Gambar 6. (A) dan (D) Laminar Air Flow Cabinet

; (B)Neraca Analitis; (C)

Inkubator; (E)

Colony Counter

; (F) pipet volumetrik

A

C

E

D

B

(9)

Lampiran 2. Bahan dan Alat yang digunakan (Lanjutan)

Gambar 7. (A) Autoklaf; (B)Oven; (C) Bunsen; (D) spektrofotometer;

(E) Neraca hewan; (F) mikroskop & komputer

A

B

C

D

E

(10)

(11)

(12)

Lampiran 5. Data hasil perhitungan pembakuan NaOH



Rumus hitung pembakuan NaOH(Normalitas NaOH):

miligrek K. Biftalat = Miligrek NaOH

mg K. Biftalat

BE

= V × N NaOH

N NaOH =

mg K Biftalat

_{BE × V}

Keterangan: BE

K.Biftalat

= Bobot Ekuivalen = BM = 204,2

V =Volume titrasi NaOH

N = Normalitas

Tabel 5.1 Data pembakuan NaOH

Pembakuan

I

No.

Berat K. Biftalat

(mg)

Volume Titrasi

(ml)

Normalitas

(N)

1. 103,17

4,75

0,10637

2. 100,69

4,90

0,10064

3. 100,19

4,85

0,10117

Pembakuan

II

No.

Berat K. Biftalat

(mg)

Volume Titrasi

(ml)

Normalitas

(N)

1. 105,30

5,1

0,10111

2. 105,65

5,2

0,09950

3. 102,70

5,0

0,10059

Pembakuan

III

No.

Berat K. Biftalat

(mg)

Volume Titrasi

(ml)

Normalitas

(N)

1. 103,20

4,80

0,10274

2. 101,75

4,75

0,10320

3. 100,00

4,78

0,10296

Pembakuan

IV

No.

Berat K. Biftalat

(mg)

Volume Titrasi

(ml)

Normalitas

(N)

1. 104,71

4,8

0,10465

2. 102,83

4,7

0,10714

(13)

Lampiran 5. Data hasil perhitungan pembakuan NaOH (Lanjutan)



Normalitas rata-rata:

N̅ = N + N + N

Tabel 5.2 Data normalitas rata-rata NaOH

Pembakuan

I

(Orientasi 1)

No.

Normalitas

(N)

Normalitas Rata-Rata

(N)

1. 0,10637

0,1027

2. 0,10064

3. 0,10117

Pembakuan

II

(Orientasi 2)

No.

Normalitas

(N)

Normalitas Rata-Rata

(N)

1. 0,10111

0,1004

2. 0,09950

3. 0,10059

Pembakuan

III

No.

Normalitas

(N)

Normalitas Rata-Rata

(N)

1. 0,10274

0,1030

2. 0,10320

3. 0,10296

Pembakuan

IV

No.

Normalitas

(N)

Normalitas Rata-Rata

(N)

1. 0,10465

0,1065

2. 0,10714

3. 0,10771

(14)

Lampiran 6. Data hasil orientasi perhitungan bilangan asam

Rumus hitung bilangan asam (mg NaOH/g minyak):

Bilangan Asam =

ml × N × BM NaOH

_G

Tabel 6.1 Data hasil orientasi pertama

Masa



N

NaOH

yang digunakan yakni Normalitas NaOH Pembakuan I = 0,1027 N

Tabel 6.2Data hasil orientasi kedua

Masa

(15)

Lampiran 7. Data perhitungan bilangan asam

Tabel 7.1 Data perhitungan bilangan asam Virgin Coconut Oil

(VCO) non hidrolisis dan

Virgin Coconut Oil

(VCO) hasil hidrolisis

enzimatis

Rumus hitung bilangan asam (mg NaOH/g minyak):

Bilangan Asam =

ml × N × BM NaOH

_G

Keterangan:

ml

= volume titrasi

N

= normalitas NaOH

BM NaOH

= 40

G

= massa minyak yang diuji

Variasi

waktu

No.

VCO

(gram)

BM

NaOH

Volume titrasi

(ml)

Bilangan

Asam

Mean Std. deviation

Normalitas NaOH pembakuan III = 0,1030 N

VCO

non

hidrolisis

1 5,1160

40 0,55

0,4429

0,3767

0,0569

2 5,0231

40 0,40

0,3281

3 5,1253

40 0,45

0,3617

0 jam

1. 5,1523

40 5,50

4,3980

4,0333

0,3602

2. 5,0353

40 _4,50

3,6820

3. 5,1252

40 5,00

4,0193

2 jam

1. 5,1826

40 10,00

7,9497

7,3633

0,5390

2. 5,0825

40 _8,50

6,8903

(16)

4 jam

1. 5,1362

40 28,00

22,4602

20,8333

1,4202

2. 5,0979

40 25,00

20,2044

3. 5,0876

40 _24,50

19,8404

6 jam

1. 5,1645

40 56,50

45,0731

45,4833

1,7471

2. 5,0584

40

54,00

43,9823

3. 5,1761

40

59,55

47,3998

8 jam

1. 5,1434

40

_122,00

_97,7252

95,9867

1,6129

2. 5,0338

40

_115,50

_94,5329

3. 5,1225

40

119,00

95,7111

10 jam

1. 5,0070

40

_154,00

_126,7186

122,2767

4,4251

2. 5,1573

40

_147,55

_117,8729

3. 5,1568

40

_153,00

_122,2386

12 jam

1. 5,1395

40

_169,50

_135,8770

133,4867

2,3280

2. 5,0980

40

_165,00

_133,3464

3. 5,0862

40

_162,00

_131,2257

14 jam

1. 5,0042

40

_171,50

_141,1974

140,3167

0,7697

2. 5,1284

40

_174,00

_139,7863

3. 5,1660

40

175,50

139,9651

Normalitas NaOH pembakuan IV= 0,1065 N

16 jam

1. 5,1764

40

171,15

140,8506

140,8667

1,2751

2. 5,0885

40

_169,80

_142,1535

3. 5,0138

40

_164,30

_139,5983

18 jam

1. 5,0678

40

_168,90

_141,9776

142,1733

1,3405

2. 5,1263

40

_172,80

_143,5983

(17)

Lampiran 8. Analisis statistik bilangan asam dari VCO dan hasil hidrolisis

enzimatisVCO

Uji Analisis Variansi (ANAVA)

Zona

Hambat

JK

DB

KT

F hitung

F tabel

Sig.

Perlakuan

Galat

Total

114377.302

74.221 114451.523

10

22

32 11437.730

3.374 3390.275

2.297 .000

(18)

Lampiran 9.Data hasil pengujian aktivitas antibakteri secara in-vitro

Tabel 9.1 Data hasil pengukuran zona hambat Virgin Coconut Oil

(VCO) hasil

hidrolisis enzimatis, VCO non-hidrolisis, Kloramfenikol dan Etanol

terhadap bakteri

Salmonella typhi

dan

Kontrol positif Konsentrasi Pengulangan (n=6)

Zona Hambat (mm)

S. typhi(1) S. typhimurium(2)

Etanol -

Mean ± SD 6,000±0,0000 6,000±0,0000

Kloramfenikol 30 μg/disc

1 19,3 9,7

Mean ± SD 7,583±0,2858 7,533±0,4274

(19)

4 12,9 12,9

5 12,0 13,6

6 12,7 12,8

Mean ± SD 12,250 ± 0,5244 12,983 ± 0,7026

1000 μl/ml

1 13,9 13,8

2 14,1 15,2

3 14,0 14,5

4 14,3 13,8

5 13,6 15,0

6 13,5 13,7

Mean ± SD 13,900 ± 0,3033 14,333 ± 0,6623

Tabel 9.2 Zona hambat Virgin Coconut Oil

(VCO) hasil hidrolisis enzimatis,

VCO non-hidrolisis, Kloramfenikol dan Etanol terhadap pertumbuhan

bakteri

Salmonella typhi

dan

Bakteri

Rata-Rata Zona Hambat (mm) Etanol Kloramfenikol

(30 μg/disc)

VCO non hidrolisis

(20)

Lampiran 10. Analisis statistik zona hambat VCO, hasil hidrolisis enzimatis

VCO, Kloramfenikol dan Etanol terhadap bakteri

Salmonella typhi

dan

Uji Analisis Variansi (ANAVA)

Zona Hambat Sumber

Variansi

JK DB KT F hitung F tabel Sig. S.typhi Perlakuan

Galat Total

774,903 11,453 786,357

7 40 47

110,700 0,286

386,614 2,249 0,000

S.typhimurium Perlakuan Galat Total

319,983 12,743 332,727

7 40 47

45,712 0,319

143,485 2,249 0,000

(21)

Lampiran 11. Hewan Percobaan

I. Mencit dalam Keadaan Sehat

II. Mencit yang Mengalami Diare

Keterangan : A = feses mencit dengan konsistensi berlendir/berair tidak

membentuk massa feses

B = bagian anus mencit tampak basah karena diare

A

(22)

Lampiran 12. Volume maksimum larutan sediaan uji yang dapat diberikan pada

hewan uji

Jenis hewan uji

Volume maksimum (ml) sesuai jalur pemberian

i.v.

i.m.

i.p.

s.c.

p.o.

Mencit (20-30 g)

0,5

0,05

1,0

0,5-1,0

1,0

Tikus (200 g)

1,0

0,1

2-5

5,0

Hamster (50 g)

-

0,1

1-2

2,5

Marmot (300 g)

-

0,25

2-5

5,0

10,0

Kelinci (2,5 kg)

5-10

0,5

10-20

5-10

20,0

Kucing (3 kg)

5-10

1,0

10-20

5-10

50,0

Anjing (5 kg)

10-20

5,0

20-50

10,0

100,0

(23)

Lampiran 13. Data berat badan mencit harian.

Kelompok Hari-0 Hari-1 Hari-2 Hari-3 Hari-4 Hari-5 Hari-6

CON 22,7 22,5 22,2 22,6 22,8 22,8 23,0

CON 21,3 21,6 21,4 21,8 21,6 21,7 21,9

CON 20,4 20,2 20,8 20,6 20,9 21,2 21,5

CON 20,7 20,6 20,9 21,0 21,2 21,5 21,6

CON 22,5 22,3 21,9 21,8 21,6 21,7 21,9

CON 20,6 20,6 20,8 21,1 21,3* mati mati

Rata-rata 21,4 21,3 21,3 21,5 21,6 21,8 22,0

SI 21,3 21,0 20,6 18,4 17,6 17,1 mati

SI 23,7 23,1 22,6 21,9 21,2 19,8 mati

SI 22,0 21,6 20,8 19,6 mati mati mati

SI 23,1 22,8 22,0 21,4 20,6 mati mati

SI 23,5 23,1 22,6 22,0 21,4 20,2 mati

SI 21,8 21,2 20,8 20,3 19,8* mati mati

Rata-rata 22,6 22,1 21,6 20,6 20,1 19.0 -

SI-Klor 22,4 22,0 21,5 21,1 19,6 18,8 18,4

SI-Klor 21,8 21,4 21,0 19,8 19,3 18,6 17,8

SI-Klor 20,5 20,2 19,8 19,4 19,0 18,7 18,2

SI-Klor 20,3 19,7 19,4 19,0 18,6 18,3 mati

SI-Klor 20,8 20,5 20,2 19,8 19,4 18,9 17,6

SI-Klor 20,6 20,4 20,0 19,7 19,3* mati mati

Rata-rata 21,1 20,7 20,3 19,8 19,2 18,7 18,0

SI-VCO 21,9 21,5 21,2 20,7 20,4 20,0 19,7

SI-VCO 21,2 21,0 20,8 20,5 20,2 19,9 19,5

SI-VCO 21,7 21,5 21,1 20,8 20,4 20,1 19,9

SI-VCO 21,9 21,5 21,2 21,0 20,6 20,3 20,1

SI-VCO 21,4 21,1 20,8 20,5 20,2 19,7 19,4

SI-VCO 20,6 20,3 20,1 19,6 19,4* mati mati

Rata-rata 21,5 21,2 20,9 20,5 20,2 20,0 19,7

SI-VCOH 22,3 21,8 21,3 20,8 20,2 20,0 19,7

SI-VCOH 22,4 22,0 21,6 21,1 20,8 20,6 20,2

SI-VCOH 23,4 23,1 22,6 21,8 21,4 20,4 20,0

SI-VCOH 22,0 21,6 21,4 20,9 20,5 19,7 19,5

SI-VCOH 22,8 22,5 22,3 21,8 21,4 21,1 20,8

SI-VCOH 23,8 23,6 23,0 22,4 22,1* mati mati

Rata-rata 22,8 22,4 22,0 21,5 21,0 20,4 20,0

(24)

Lampiran 14.Konsistensi Feses

Feses Mencit dengan berbagai konsistensi sebagai berikut:

a

b

c

d

Keterangan: a = konsistensi feses normal

b = konsistensi feses lembek

(25)

Lampiran15. Data jumlah koloni bakteri (CFU gram

-1

) dalam feses mencit tiap kelompok

Kelompok Hari-0 Hari-1 Hari-2 Hari-3 Hari-4 Hari-5 Hari-6

CON 0 0 0 0 0 0 0

CON 0 0 0 0 0/* mati mati

SI 0 5,8 x 103 _{3,3 x 10}3 _{1,6 x 10}4 _{3,2 x 10}5 _{6,5 x 10}5 _mati

SI 0 8,2 x 103 _{1,7 x 10}4 _{3,6 x 10}5 _{4,8 x 10}5 _{8,2 x 10}5 _mati

SI 0 1,6 x 105 _{1,9 x 10}4 _{5,3 x 10}5 _mati _mati _mati

SI 0 1,1 x 104 _{1,3 x 10}4 _{4,6 x 10}5 _{1,4 x 10}6 _mati _mati

SI 0 1,3 x 104 _{1,7 x 10}4 _{1,8 x 10}5 _{5,1 x 10}5 _{1,2 x 10}6 _mati

SI 0 9,4 x 103 _{1,3 x 10}4 _{2,3 x 10}4 _{2,2 x 10}5_/* _mati _mati

SI-Klor 0 4,7 x 103 _{3,7 x 10}3 _{1,4 x 10}4 _{1,8 x 10}4 _{2,1 x 10}4 _{1,7 x 10}5

SI-Klor 0 2,3 x 103 _{4,2 x 10}3 _{6,4 x 10}3 _{1,7 x 10}4 _{2,0 x 10}4 _{2,6 x 10}4

SI-Klor 0 3,4 x 103 _{6,2 x 10}3 _{5,2 x 10}3 _{7,8 x 10}3 _{1,7 x 10}4 _{2,4 x 10}4

SI-Klor 0 1,8 x 103 _{4,3 x 10}3 _{1,1 x 10}4 _{2,6 x 10}4 _{2,1 x 10}5 _mati

SI-Klor 0 9,6 x 103 _{1,5 x 10}4 _{2,3 x 10}4 _{2,4 x 10}4 _{1,6 x 10}5 _{1,7 x 10}5

SI-Klor 0 4,0 x 103 _{6,8 x 10}3 _{1,8 x 10}4 _{2,0 x 10}4_/* _mati _mati

SI-VCO 0 2,3 x 103 _{2,1 x 10}3 _{1,3 x 10}3 _{1,1 x 10}3 _{1,0 x 10}3 _{9,6 x 10}2

SI-VCO 0 5,1 x 103 _{3,2 x 10}3 _{1,8 x 10}3 _{1,5 x 10}3 _{1,3 x 10}3 _{1,1 x 10}3

SI-VCO 0 2,6 x 103 _{2,4 x 10}3 _{1,2 x 10}3 _{1,2 x 10}3 _{1,0 x 10}3 _{9,8 x 10}2

SI-VCO 0 1,7 x 104 _{6,5 x 10}3 _{4,9 x 10}3 _{4,1 x 10}3 _{3,5 x 10}3 _{2,9 x 10}3

SI-VCO 0 3,1 x 103 _{2,6 x 10}3 _{2,2 x 10}3 _{2,0 x 10}3 _{1,7 x 10}3 _{1,3 x 10}3

SI-VCO 0 6,6 x 103 _{5,0 x 10}3 _{4,2 x 10}3 _{3,1 x10}3_/* _mati _mati

SI-VCOH 0 3,0 x 103 2,8 x 103 9,1 x 102 8,2 x 102 7,6 x 102 6,4 x 102

SI-VCOH 0 9,3 x 103 6,2 x 103 2,6 x 103 1,1 x 103 1,0 x 103 8,2 x 102

SI-VCOH 0 2,2 x 103 4,3 x 103 1,3 x 103 9,4 x 102 8,1 x 102 6,7 x 102

SI-VCOH 0 8,3 x 102 2,7 x 103 9,6 x 102 8,7 x 102 6,5 x 102 5,2 x 102

SI-VCOH 0 9,8 x 103 4,3 x 103 8,7 x 102 5,1 x 103 4,3 x 103 2,6 x 103

SI-VCOH 0 2,4 x 103 1,2 x 103 9,7 x 102 9,2 x 102/* mati mati

(26)

Lampiran 16. Data mentah jumlah koloni bakteri dalam feses mencit

Rumus perhitungan jumlah koloni bakteri dalam setiap cawan petri menggunakan

rumus sebagai berikut:

[ � − �

× �] + [ � − �

× �] + ⋯ + [ �6 − �

× �]

�

= ⋯ ��/

Jumlah keseluruhan koloni bakteri yang masuk dalam rumus antara 30-300

CFU/ml. Kurang dari 30 dan lebih dari 300 pertumbuhan koloni tidak dimasukkan

dalam rumus di atas.

Spesifikasi

Quality Control

untuk mengidentifikasi

S.typhimurium

dalam media

(27)

Lampiran 16. Data mentah jumlah koloni bakteri dalam feses mencit (lanjutan)

Kelompok Kontrol/Normal (KN)

Hari ke-0

No. Pengenceran Jumlah Koloni

Kelompok Kontrol/Normal (KN) Hari ke-1

(28)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

(29)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

(30)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Kelompok Salmonella Infected (SI) Hari ke-0

(31)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

(32)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

(33)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

(34)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Kelompok Salmonella Infected-Kloramfenikol(SI-Klor)

Hari ke-0

Hari ke-1

(35)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Hari ke-2

Hari ke-3

(36)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Hari ke-4

Hari ke-5

(37)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Hari ke-6

Kelompok Salmonella Infected–VCO (SI-VCO)

Hari ke-0

(38)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Hari ke-1

Hari ke-2

(39)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Hari ke-3

Hari ke-4

(40)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Hari ke-5

Hari ke-6

(41)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Kelompok Salmonella Infected– VCOH(SI-VCOH)

Hari ke-0

Hari ke-1

(42)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Hari ke-2

Hari ke-3

(43)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Hari ke-4

Hari ke-5

(44)

Lampiran 16. Data Mentah Jumlah Koloni Bakteri dalam Feses Mencit

(Lanjutan)

Hari ke-6

ALT (CFU/ml)

1

10-1 ₆₄

6,4x102 10-2 ₁₅

10-4 ₁ 10-6 ₀

2

10-1 ₈₂

8,2x102 10-2 ₂₁

10-4 ₂ 10-6 ₀

3

10-1 ₆₇

6,7x102 10-2 ₁₈

10-4 ₃ 10-6 ₀

4

10-1 ₅₂

5,2x102 10-2 ₁₃

10-4 ₁ 10-6 ₀

5

10-1 ₉₇

2,6x103 10-2 ₄₂

10-4 ₃ 10-6 ₀

6

10-1 _-

mati 10-2 _-

(45)

Lampiran 17. Jumlah koloni bakteri dalam feses mencit pada cawan petri secara

in-vivo

Gambar 1. Tidak ada koloni S.typhimurium

yang tumbuh dalam feses mencit

(jumlah koloni=0)

(46)

Lampiran 17. Jumlah koloni bakteri dalam feses mencit pada cawan petri secara

in-vivo

(lanjutan)

(47)

(48)

Lampiran 19.Orientasi dosis kloramfenikol untuk mencit

Tabel. Jumlah koloni bakteri dalam feses mencit yang diberi 3 variasi konsentrasi

kloramfenikol

Kelompok Hari-0 Hari-1 Hari-2 Hari-3 Hari-4 Hari-5 Hari-6 SI-Klor

(300 μg/ml) 0 2,7 x 10

3 _{3,2 x 10}3 _{3,4 x 10}3 _{4,2 x 10}4 _{3,6 x 10}4 _{3,8 x 10}4

SI-Klor

(300 μg/ml) 0 3,7 x 10

3 _{3,4 x 10}3 _{1,8 x 10}4 _{2,3 x 10}4 _{2,0 x 10}4 _{1,2 x 10}5

SI-Klor

(500 μg/ml) 0 3,4 x 10

3 _{4,1 x 10}3 _{4,8 x 10}3 _{5,8 x 10}3 _{1,7 x 10}4 _{2,4 x 10}4

SI-Klor

(500 μg/ml) 0 2,8 x 10

3 _{4,5 x 10}3 _{1,1 x 10}4 _{2,0 x 10}4 _{2,4 x 10}5 _{2,8 x 10}5

SI-Klor

(1000 μg/ml) 0 5,6 x 10

3 _{1,5 x 10}4 _{2,3 x 10}4 _{2,4 x 10}4 _{1,6 x 10}5 _{1,7 x 10}5

SI-Klor

(1000 μg/ml) 0 4,0 x 10

3 _{6,8 x 10}3 _{1,8 x 10}4 _{2,2 x 10}4 _{2,7 x 10}4 _{1,4 x 10}5

(49)

Lampiran 20.Jurnal Publikasi International Journal PharmTech Research

Judul: Paper NO.= 75/M14 : Letter of Acceptance, Charges to be

paid ,Undertaking to be signed and Information on ELSEVIER

REPORT-RANKING…..

Dari: Journal sphinx (submitpaper@rediffmail.com)

Kepada: elysa_hong@yahoo.co.id;

Cc: submitpaper@rediffmail.com;

Tanggal: Minggu, 16 Februari 2014 21:27

Dear Elysa Sir, 16/02/2014

Greetings and Seasons Wishes.

We would like to inform you that,

your paper titled,

“ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF ENZYMATIC

HYDROLYSIS OF VIRGIN COCONUT OIL AGAINST SALMONELLA”

has been accepted for publication in the upcoming issue: of International Journal

of PharmTech Research, (to get released on 10TH MARCH 2014).

Please check the status at: Log on to www.sphinxsai.com, c/o Journal Section, c/o

Paper status, c/o paper NO. 75/M14.

Accordingly every author will have to pay a nominal cost of US $ 20 for his full

paper. Journals do not have subscription base/any sponsorship and are available

for free search .Thus for existence/financial independencies of the journal, authors

have to pay as nominal charges. (Cost towards processing, maintenance of paper

in secured data storage system, databases; to meet various overhead expenses like

paper setting costs, employees charges, communication cost, maintenance cost,

time cost etc.). Thus your paper is charged with US $ 60(for 3 authors) + US $ 6

(Conveyance charges) = US $ 66 (SIXTY SIX) Total.

We request you to make the payment of US $ 66 (SIXTY SIX) at earliest, on or

before BEFORE 28TH February 2014, by the following mode and inform us by

email with accuracy. :

Send the charges US $ 66 by Western Union Money Transfer, to the name given

below…

Name of Receiver: VINAYAK BHIMRAO TEKADE.

Address of Receiver: MALKAPUR COLONY, AKOLA CITY, M.S., INDIA

444004.

On transfer, please inform us the details as….Name of sender, Country from

which money transferred, Date of transfer and MTCN CODE only at -

saiee_sevak@rediffmail.com OR submitpaper@rediffmail.com

( other modes of payments , cash in envelope by post are not accepted at all )

(50)