rekombinan DNA.pdf

R

REEKKOOMMBBIINNAAN N DDNNAA

Oleh : Oleh :

Dera Ratna Kumala (1723071002) Dera Ratna Kumala (1723071002) Ni Luh Gee !ri

Ni Luh Gee !ri "rati#i (1723071003)"rati#i (1723071003)

"RODI "ENDIDIKAN I"A "RODI "ENDIDIKAN I"A

"ROGRAM "A!$A!AR%ANA "ROGRAM "A!$A!AR%ANA

&NI'ER!IA! "ENDIDIKAN GANE!A &NI'ER!IA! "ENDIDIKAN GANE!A

201* 201*

KAA "ENGANAR 

Om Swastyastu,

Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Allah SWT, karena berkat rahmat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan makalah yang berjudul “Rekmbinan !NA"

Pada kesempatan ini penulis mengu#apkan terima kasih kepada $

%& Pr'& !r& Ni P& Ristiati, (&Pd&, yang telah memberikan tugas makalah sehingga  penulis dapat mengembangkan kemampuan diri dalam menulis makalah&

)& Rekan-rekan mahasiswa Prgram Studi S) Pendidikan *PA yang telah banyak  memberikan masukan untuk penyempurnaan makalah ini&

Penulis menyadari bahwa makalah ini belum sempurna seperti apa yang diharapkan, untuk itu mhn kritik dan saran demi kesempurnaan makalah ini& Semga makalah ini dapat berman'aat bagi penulis dan pemba#a& Tidak lupa penulis mhn maa' atas segala kekurangan maupun kesalahan yang tidak disengaja pada tulisan ini&

Om Santhi, Santhi, Santhi Om

Singaraja, +ebruari )%

DA+AR I!I

.alaman KAA "ENGEANAR &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& i DA+AR I!I &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& ii BAB 1, "ENDA&L&AN &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& % %&% /atar 0elakang &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& % %&) Rumusan (asalah &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& % %&1 Tujuan &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& % BAB 2, "EMBAA!AN &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& ) )&% Teknlgi !NA Rekmbinan&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& ) 2,2/angkah-/angkah Pembuatan !NA Rekmbinan&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2 )&1Aplikasi dan man'aat !NA Rekmbinan 3&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 4 BAB 3, KE!IM"&LAN &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 5 DA+AR "&!AKA &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& %

BAB 1, "ENDA&L&AN

1,1 Latar Bela-an.

Teknlgi !NA rekmbinan merupakan teknik penggabungan !NA dari spesies yang  berbeda sehingga akan diperleh rganisme baru dengan si'at-si'at yang diinginkan& Se#ara

garis besar, teknlgi !NA rekmbinan 6rekayasa genetika7 melibatkan penyisipan in'rmasi genetik baru ke dalam rganisme, biasanya bakteri, untuk memberikan kemampuan baru& (etde ini tidak mengikuti rangkaian prsedur yang pasti& Pemilihan metde bergantung kepada gen mana yang akan dipindahkan dan jenis rganisme mana yang akan menerima in'rmasi genetik baru& Pilihan tersebut bergantung pada sampai sejauh mana keterlibatan  pilihan pribadi ilmuwan yang bersangkutan& !engan kemajuan teknlgi mlekuler ini,  perpindahan gen dapat terjadi antar rganisme yang sama sekali tidak berkerabat dekat, misalnya gen manusia dipindahkan ke bakteri atau gen manusia dipindahkan ke ternak babi dan lain sebagainya 6(uladn, ))7& 8emungkinan memindahkan gen dari satu rganisme ke rganisme lain merupakan prspek yang sangat memikat, karena rekayasa genetika dapat mengurangi biaya dan meningkatkan penyediaan sejumlah besar bahan yang sekarang dipergunakan di dalam kedkteran, 'armasi 6(urdiyatm, %55)7, pertanian, dan industri 6Prentis, %557, maupun bidang kelautan&

1,2 Rumu/an Ma/alah

0erdasarkan latar belakang di atas maka rumusan masalah yang diajukan pada makalah ini adalah sebagai berikut$

%& Apa yang dimaksud teknlgi !NA rekmbinan9

)& 0agaimana langkah-langkah membuat !NA rekmbinan9 1& 0agaimana aplikasi dan man'aat teknlgi !NA rekmbinan9

1,3 uuan

Adapun tujuan dari penulisan makalah ini sesuai dengan rumusan masalah yang diajukan adalah sebagai berikut$

%& (engetahui tentang teknlgi !NA rekmbinan&

)& (engetahui langkah-langkah membuat !NA rekmbinan& 1& (engetahui aplikasi dan man'aat teknlgi !NA rekmbinan

BAB 2, "EMBAA!AN

2,1 e-nl.i DNA Re-minan

Sejak ditemukannya en:im endnuklease restriksi yang dapat mengkatalisis  pemtngan mlekul !NA pada bagian atau tempat spesi'ik pada tahun %54%, maka lahirlah teknlgi baru dalam bidang bilgi mlekuler yang disebut teknlgi !NA rekmbinan ataurekayasagenetika 6(urdiyatm,%55)7& Teknlgi !NA rekmbinan merupakan teknik   penggabungan !NA dari spesies yang berbeda sehingga akan diperleh rganisme baru

dengan si'at-si'at yang diinginkan 6.ala, %5557& 0erhasilnya suatu teknik !NA rekmbinan sangat didukung leh #ara-#ara bagaimana kita menangani, mengembangkan mikrrganisme atau 'age dari seleksi;klning dari beberapa strain bakteri yang digunakan dalam sistem ini 6Artama, %55%7& (enurut 0rwn 6%55%7, bahwa mlekul !NA plasmid dan 'age mempunyai si'at-si'at dasar yang dibutuhkan sebagai <ektr klning& Namun si'at-si'at ini tidak berguna tanpa adanya teknik-teknik eksperimen untuk manipulasi mlekul !NA di dalam labratrium& /angkah-langkah dasar dalam klning gen;!NA membutuhkan beberapa keterampilan manipulasi& 0eberapa keterampilan dasar yang diperlukan untuk melakukan klning gen;!NA se#ara sederhana adalah$ preparasi sampel !NA murni, pemtngan mlekul !NA dengan en:im restriksi, analisis ukuran 'ragmen !NA, penggabungan mlekul !NA dengan en:im ligase, memasukkan mlekul !NA rekmbinan ke dalam sel inang 6#ara yang paling umum adalah dengan #ara trans'rmasi7, dan identi'ikasi sel yang mengandung mlekul !NA rekmbinan hasil klning&

Perangkat utama yang digunakan dalam pembentukan !NA rekmbinan adalah sebagai berikut$

1. _Plasmid

Plasmid adalah salah satu <ektr yang biasa digunakan dalam prses pengklnan gen& =ektr  adalah pembawa mlekul !NA di dalam prses pengklnan gen& Plasmid adalah mlekul !NA utas ganda sirkuler 6tak berujung7 yang berukuran ke#il yang terdapat di dalam sitplasma, dan dapat melakukan replikasi se#ara autnm& 8arakteristik yang penting dari  plasmid adalah dapat melakukan replikasi, terdapat di luar krmsm, dan se#ara genetik 

dapat ditrans'er dengan stabil& Plasmid ini terdapat baik se#ara alami, maupun sudah mengalami mdi'ikasi yang disesuaikan dengan keperluan di dalam manipulasi genetik& Satu sel dapat mengandung lebih dari satu kpi plasmid& Plasmid berukuran % > 1 kb, sehingga

dapat dibedakan dengan mudah dari krmsm bakteri yang berukuran 1 > ? kb& Plasmid yang terlibat dalam prses knjugasi 6plasmid +7 biasanya berukuran besar& @ntuk  replikasi plasmid dapat berada dalam keadaan terpisah dari krmsm 6nn-integrati'7 dan terintegrasi dalam krmsm bakteri 6epism7& Plasmid terdapat di dalam sitplasma rganisme prkaryt dan eukaryt sederhana uniseluler& Selain terdapat dalam bakteri,  plasmid juga terdapat pada Saccharomyces cerevisiae 6plasmid ) um7& Plasmid dapat dikelmpkkan berdasarkan si'at yang disandi leh gen yang dikandungnya, yaitu $ 6i7 Plasmid + 6'ertilitas7 membawa gen tra, yang bertanggung jawab terhadap prses knjugasi 6ii7 Plasmid R 6resistensi7 mengandung gen resistensi terhadap antibiti# atau lgam berat dan 6iii7 Plasmid yang mengandung gen penyandi tksin dan bakterisin seperti BlC% dari  E.coli 6i<7 Plasmid degradati' yang mempunyai kemampuan untuk melakukan metablisme mlekul rgani# seperti tluene 6TO/ dari Pseudomonas putida7 6<7 Plasmid <irulensi yang  bertanggung jawab terhadap patgenitas dari sel inang 6pTi pada  Agrobacterium tumefaciens7

6Anam, )57&

2. _{Cn:im Restriksi}

Cn:im restriksi adalah en:im yang bekerja untuk memtng 'ragmen !NA pada situs spesi'ik& Seperti diketahui, di dalam 0iteknlgi terdapat dua kategri en:im yang berperan dalam prses rekmbinasi !NA, yaitu en:im yang berperan dalam islasi !NA dan  penyiapan !NA rekmbinan 6di mana dua mlekul !NA dikmbinasikan7& !NA spesi'ik 

atau gen diislasi;diambil dari !NA dengan memtng “sugar > phsphat ba#kbne" !NA asalnya, dan !NA dari dua sumber yang berbeda di#ampur dan dikmbinasi& Setiap en:im restriksi mengenali urutan spesi'ik dan memtng hanya di tempat-tempat tertentu dari urutan  basa tersebut& Cn:im restriksi memtng !NA duble strands dengan memutus ikatan k<alen di antara phsphat dari satu deksiribnukletida dengan gula dari deksiribnukletida yang berbatasan dengannya& Terdapat dua tipe hasil pemtngan, ujung rata 6blunt end 7 dan ujung khesi' 6 sticky end 7& @jung rata 6blunt end 7 dihasilkan ketika dua utas mlekul diptng pada psisi yang sama, bagian akhirnya rata dan tidak ada nukletida yang tidak berpasangan& @jung khesi' 6 sticky end 7 dihasilkan ketika setiap mlekul !NA diptng pada psisi yang tidak sama sehingga salah satu utas 6?D atau 1D7 menggantung dengan beberapa nukletida& Akhiran single strand yang tidak rata ini dapat berpasangan se#ara spntan dengan basa pasangannya sehingga disebut “sti#ky" 6mudah lengket7 atau khesi'& Cn:im restriksi banyak diislasi dalam bakteri dimana en:im tersebut memtng atau memisahkan, !NA asing bakteri'age sebelum !NA bakteri'age menyerbu ke dalam

dinding sel bakteri hst untuk memprduksi 'age-'age yang baru& Sel bakteri resisten karena !NA mereka dimdi'ikasi se#ara kimia, terutama dengan penambahan gugus metil untuk  melindungi situs pengenalan dari restriksi endnuklease sehingga mereka tidak dapat diptng& Cn:im restriksi dinamakan berdasarkan rganisme dari mana en:im tersebut diislasi& Sebagai #nth Eco R* yang diislasi dari Escherichia coli RE%1$ Eco berasal dari huru' pertama nama genus dan dua huru' pertama nama spesies R adalah tipe strain dan * adalah en:im pertama dari tipe tersebut& Selain itu juga terdapat  Bam.* en:im pertama yang diislasi dari Bacillus amyloliquefaciens strain ., Sau1A merupakan en:im yang diislasi dari Staphylococcus aureus strain 1A, Taq* dari Thermus aquaticus, Hin'* merupakan en:im  pertama yang diislasi dari Haemophilus influenae tipe R', dan lain-lain& Satu unit akti<itas en:im restriksi dide'inisikan sebagai jumlah en:im yang dapat memtng % ug !NA 'age F  selama % jam dalam kndisi bu''er yang ptimum pada suhu 14 _{B 6Anam, )57&}

3. _{!NA /igase}

/igasi adalah prses penyambungan antara satu 'ragmen !NA dengan 'ragmen !NA lainnya& !i dalam pengklnan gen, !NA insert disambungkan dengan <e#tr pengklnan& +aktr yang sangat berperan dalam prses ligasi adalah Cn:im /igase& Cn:im ligase adalah en:im yang  ber'ungsi menggabungkan 'ragmen !NA yang telah diptng dengan en:im restriksi dengan 'ragmen !NA <e#tr& !NA insert 6'ragmen !NA asing7 diptng pada bagian yang sesuai dengan bagian pemtngan !NA <e#tr, sehingga keduanya dapat saling berkmplemen& Terdapat dua jenis en:im ligase yang dihasilkan leh  Escherichia coli, diantaranya T2 !NA /igase yaitu en:im ligase yang dihasilkan leh bakteri  E. coli yang telah terin'eksi <irus T2 dan E.coli !NA /igase yaitu en:im ligase yang dihasilkan leh  E.coli sendiri& 8edua en:im tersebut mempunyai 'ungsi mensintesis pembentukan ikatan phsphdiester yang menghubungkan nukletida yang satu dengan nukletida di sebelahnya& Perbedaan dari kedua en:im tersebut hanya terletak pada k'aktrnya, pada T2 !NA /igase adalah ATP sedangkan  pada E.coli !NA /igase adalah NA!G 6(uladn, ))7&

4. _0akteri

Sebagai sel inang, tempat diintrduksikan <ektr rekmbinan ke dalam sel inang&

2,2 Lan.-ah "emuatan DNA Re-minan

Teknlgi !NA rekmbinan melibatkan beberapa teknik diantaranya adalah teknik  mengislasi !NA, memtng !NA, menggabung; menyambung !NA serta teknik  memasukkan !NA ke dalam sel hidup sehingga !NA rekmbinan dapat bereplikasi dan

dapat diekspresikan& Adapun langkah > langkah pembuatan !NA rekmbinan menurut (eljpawir adalah sebagai berikut$

%& *slasi sumber !NA

Elusi atau isolasi fragmen tunggal DNA adalah proses pemisahan fragmen DNA target dari campuran fragmen-fragmen DNA pengotornya. Hal ini penting dalam rekayasa genetik karena fragmen tersebut dapat digunakan untuk pelacak dalam mendeteksi gen DNA lain dan dapat dicangkokkan ke fragmen DNA lainnya. Fragmen DNA yang tidak tercampur dengan fragmen DNA lainnya diperoleh melalui beberapa tahap. Tahap pertama adalah pemisahan fragmen yang ingin diisolasi dari fragmen lainnya dengan pemotongan menggunakan enzim restriksi atau hasil !"# yang dilan$utkan dengan elektroforesis menggunakan gel agarose. Tahap selan$utnya adalah mendeteksi fragmen yang akan diisolasi dan memotong gel agarose yang mengandung fragment tersebut. Tahap terakhir adalah mengisolasi fragmen DNA dari gel agarose dengan cara mele%atkannya pada membran Hybon N netral dan memberi larutan buffer elusi yang berisi Tris buffer dan &odium Dodesil &ulfat.

)& Pemtngan Hen

"estriksi plasmid merupakan proses pemotongan fragmen DNA pada situs tertentu sesuai yang diinginkan dengan menggunakan enzim restriksi. 'olekul DNA rekombinan tidak dapat dibuat dengan mudah tanpa adanya dua $enis enzim# yaitu( enzim restriksi endonuklease yang berperan sebagai )gunting* untuk memotong DNA pada situs spesifik. &etiap enzim restriksi mengenali urutan spesifik dan memotong hanya di tempat-tempat tertentu dari urutan basa tersebut. Enzim restriksi memotong DNA double strands dengan memutus ikatan ko+alen di antara phosphat dari satu deoksiribonukleotida dengan gula dari deoksiribonukleotida yang berbatasan dengannya. Terdapat dua tipe hasil pemotongan# u$ung rata , blunt end  dan u$ung kohesif ,sticky end . $ung rata ,blunt end  dihasilkan ketika dua utas molekul dipotong pada posisi yang sama# bagian akhirnya rata dan tidak ada nukleotida yang tidak berpasangan. $ung kohesif ,sticky end  dihasilkan ketika setiap molekul DNA dipotong pada posisi yang tidak sama sehingga salah satu utas ,/0 atau 10 menggantung dengan beberapa nukleotida. Akhiran single strand yang tidak rata ini dapat berpasangan secara spontan dengan basa pasangannya sehingga disebut )sticky* ,mudah lengket atau kohesif.

1& enggabungan 2en

3igasi adalah proses penyambungan antara satu fragmen DNA dengan fragmen DNA lainnya. Di dalam pengklonan gen# DNA insert disambungkan dengan +ector 

pengklonan. Terdapat beberapa $enis +ector# diantaranya +ector untuk bakteri adalah plasmid# phage dan cosmid# serta beberapa +ector lain yang digunakan untuk organisme selain bakteri# yaitu 4east Artificial !hromosomes ,4A!# 5acterial  Artificial !hromosomes ,5A!# lant !loning 6ectors dan 'ammalian !ell 6ectors

,5arnum# 788/. Faktor yang sangat berperan dalam proses ligasi adalah Enzim 3igase. 3igasi berhasil bila kedua u$ung yang akan disambungkan berkomplemen. 9ecocokan yang sangat spesifik dibutuhkan bila fragmen DNA yang akan disambungkan mempunyai u$ung tidak rata , sticky end # karena penyambungannya harus mengikuti kaidah !hargaff# yaitu T berpasangan dengan A dan 2 berpasangan dengan !. &edangkan fragmen DNA yang mempunyai u$ung rata , blunt end  dapat disambungkan dengan sembarang fragmen DNA lain yang beru$ung rata. :leh karena itu untuk mengklon suatu fragmen DNA yang spesifik menggunakan u$ung tidak rata sedangkan pengklonan DNA yang tidak memerlukan spesifikasi tertentu menggunakan u$ung rata ,&uharsono# 7888.

2& Penyisipan Hen ke dalam 0akteri

Penyisipan gen dapat dilakukan melalui dua #ara yaitu$

a& 8njugasi $ perpindahan !NA dari satu sel 6sel dnr7 ke dalam sel bakteri lainnya 6sel resipien7 melalui kntak 'isik antara kedua sel

 b& Trans'rmasi $ pengambilan !NA leh bakteri dari lingkungan di sekelilingnya& #& Transduksi $ #ara pemindahan !NA dari satu sel ke dalam sel lainnya melalui

 perantara 'age&

!NA yang masuk ke dalam bakteri dapat berintegrasi dengan !NA atau krmsm bakteri sehingga terbentuk !NA rekmbinan atau krmsm rekmbinan& Adapun prses rekmbinasi !NA dari pemtngan hingga penggabungan seperti yang ditampilkan pada gambar berikut$

?& (emasukkan !NA Rekmbinan ke Sel Target ; Sel .idup dapat dilakukan dengan tiga #ara yaitu$

a& Trans'rmasi $ pengambilan !NA rekmbinan dari lingkungan di sekelilingnya&  b& !NA-pa#kaging $ memasukkan mlekul !NA-phage ke dalam partikel phage&

#& (inkrinje#tin $ memakai jarum super ke#il untuk menginjekasikan !NA rekmbinan langsung ke inti sel yang ditrans'rmasi&

Adapun prses pemasukan !NA rekmbinan ke dalam sel target, misalnya pada tumbuhan dapat ditampilkan seperti gambar berikut$

2,3 Ali-a/i an Man4aat DNA Re-minan

Teknlgi rekmbinan !NA banyak diaplikasikan dalam kehidupan sehari-hari baik  dalam bidang kesehatan, pertanian, kelautan, hukum dan ilmu pengetahuan& 0erikut adalah #nth aplikasi dan man'aat teknlgi rekmbinan !NA pada bebrapa bidang kehidupan $

%& 0idang 8esehatan

a & In/ulin manu/ia telah diprduksi se#ara massal menggunakan bakteri E.coli dan telah diperdagangkan untuk mengbati penyakit diabetis&

 b & 'a-/in heatiti/ B digunakan untuk men#egah in'eksi <irus hepatitis& Telah diprduksi se#ara kmersial menggunakan S.cereviciae dalam skala industri

# & rmn tumuh manu/ia (G) diprduksi menggunakan E.coli dan digunakan untuk mengbati kelainan pertumbuhan 6misal$ #ebl7&

d & herai .en untu- en5a-it dilakukan dengan menggantikan gen yang mengalami kerusakan dengan gen yang nrmal, digunakan untuk mengbati penyakit- penyakit keturunan 6geneti# disrders7 dan penyakit lain yang disebabkan leh

kerusakan gen 6misal$ kanker7 )& 0idang Pertanian

a & Ba-teri I6e (ice minus) : bakteri yang telah direkayasa sehingga tidak membeku  pada suhu rendah& !igunakan 6disemprtkan7 pada tanaman agar tanaman tidak 

membeku di musim dingin&  b& mikrba pendegradasi limbah&

#& Tanaman tahan hama, misal kapas 0t, tmat 0t d& Tanaman tahan herbisida&

1& 0idang 8elautan $ penggunaan hrmn pertumbuhan untuk meningkatkan ukuran ikan 2& 0idang .ukum

a& Pelaku kejahatan dapat diidenti'ikasi dengan menggunakan analisis Sidik Iari !NA misalnya$ kasus perksaan

 b& @ntuk menentukan keturunan dan keluarga berdasarkan !NA 'ingerprint& ?& 0idang *lmu Pengetahuan

a & (embantu upaya memahami terjadinya kelainan pada manusia 6penyakit genetik7 misalnya kanker payudara

 b & 8emajuan Teknlgi !NA telah mendrng para ilmuwan 6knsrsium ilmuwan internasinal7 untuk mewujudkan pryek genm manusia dan genm rganisme lainnya&

BAB 3, KE!IM"&LAN

0erdasarkan pemaparan pada pembahasan maka dapat disimpulkan bahwa$

%& Teknlgi !NA rekmbinan merupakan kumpulan teknik atau metde yang digunakan untuk mengkmbinasikan gen-gen se#ara buatan dimana prsesnya dinamakan rekmbinasi !NA dan hasilnya dinamakan !NA rekmbinan&

)& /angkah-langkah pembuatan !NA rekmbinan meliputi islasi sumber !NA,  pemtngan gen leh en:im restriksi, penggabungan gen leh en:im ligase dan  penyisipan gen ke dalam bakteri se#ara knjugasi; trans'rmasi; transduksi untuk 

membentuk suatu !NA rekmbinan atau krmsm rekmbinan& Selanjutnya !NA rekmbinan dapat dimasukkan ke dalam sel target melalui trans'rmasi; !NA- pa#kaging; mikrinje#tin&

1& Aplikasi dan man'aat !NA rekmbinan sangat luas diantaranya pada bidang kesehatan seperti <aksin dan insulin, pada bidang pertanian seperti tanaman tahan hama dan herbisida, pada bidang kelautan seperti hrmn pertumbuhan ikan, pada  bidang hukum seperti analisis sidik jari !NA dan penentuan keturunan serta pada  bidang ilmu pengetahuan seperti ilmu tentang kelainan pada manusia dan pryek 

DA+AR "&!AKA

Anam, 8& )5& !"A #ekombinasi& /apran Praktikum& 0gr$ Pas#a& 0iteknlgi, *T0& Artama, W& T& %55%& #ekayasa $enetika& Egyakarta$ @H(& .al& %2&

0rwn, T& %55%& Pengantar %loning $ena& Egyakarta$ Eayasan Cssentia (edi#a& .al& )42& .ala, E& %555& Penggunaan $en Penanda &olekular untuk !eteksi Pelekatan dan %olonisasi

'ibrio harveyi pada (arva )dang *indu +Penaeus monodon, & Tesis& 0gr$ Prgram Pas#asarjana *P0& .al& %J&

(uladn& ))& Seputar Teknologi #ekayasa $enetika& 0gr$ Pustaka Wirausaha (uda& .al& %)1&

(urdiyatm, @& %55)& %loning dan -ver Ekspresi Struktural !ehalogenase dari  Pseudomonas cepacia &ba pada E. /oli & Prsiding Seminar .asil Penelitian dan Pengembangan 0iteknlgi& 0gr$ Pusat Penelitian dan Pengembangan 0iteknlgi, /*P*& .al& 5-%5&

Prentis, S& %55& Bioteknologi Suatu #evolusi 0ndustri yang Baru. Iakarta$ Crlangga& .al& )& Suharsn, S& )& Penuntun Praktikum Pelatihan Teknik Pengklonan $en dan Pengurutan