Efek antidiabetes dekokta daun paitan (Tithonia diversifolia) pada tikus jantan galur wistar terinduksi Streptozotosin

(1)

EFEK ANTIDIABETES DEKOKTA DAUN PAITAN (Tithonia diversifolia) PADA TIKUS JANTAN GALUR WISTAR TERINDUKSI

STREPOZOTOSIN SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Farmasi

Oleh:

Meliana

NIM : 138114055

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA

(2)

(3)

(4)

(5)

v

HALAMAN PERSEMBAHAN

“There is no path to happiness.

Happiness is the path.”

― Buddha―

“Jangan menunggu bahagia dating baru bersyukur, tapi bersyukurlah maka kebahagiaan akan datang.”

―Author Unknown―

Kupersembahkan skripsi ini untuk :

Tuhan Yang Maha Esa atas berkah dan rahmat-Nya

Orang tua dan adik-adikku terkasih

Teman-teman yang telah mendukungku

(6)

vi PRAKATA

Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Masa Esa atas segala berkat, kasih dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang

berjudul “EFEK ANTIDIABETES DEKOKTA DAUN PAITAN (Tithonia diversifolia) PADA TIKUS JANTAN GALUR WISTAR TERINDUKSI STREPTOZOTOSIN” dengan baik dan lancar. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu persyaratan untuk memperoleh gelar sarjana Strata Satu Program Studi Farmasi (S.Farm.) Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

Penyusunan skripsi ini tidak lepas dari bantuan dan dukungan dari berbagai pihak, baik secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu, penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Ibu Aris Widayati, M.Si., Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

2. Bapak drh. Sugiyono, M. Sc., selaku Dosen Pembimbing dan Dosen Penguji pada skripsi ini, atas segala bimbingan, bantuan, dan saran yang telah diberikan kepada penulis selama proses pengerjaan skripsi ini.

3. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dosen Penguji pada skripsi ini yang telah memberikan saran dan bantuan untuk kesempurnaan skripsi ini.

4. Ibu Dr. Yustima Sri Hartini, Apt. selaku Dosen Penguji pada skripsi ini yang telah memberikan bantuan dan saran untuk kesempurnaan skripsi ini.

5. Bapak Heru Purwanto, Bapak Kayatno, dan Bapak Parjiman selaku Laboran Laboratorium Fakultas Farmasi atas segala bantuan dan dukungannya kepada penulis selama proses pengerjaan skripsi.

(7)

vii

7. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu oleh penulis yang telah ikut membantu selama proses penyusunan skripsi ini

Penulis menyadari bahwa dalam skripsi ini masih terdapat kekurangan, mengingat keterbatasan pengetahuan dan kemampuan yang dimiliki oleh penulis. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun. Penulis juga berharap semoga skripsi ini dapat

bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan dan bagi masyarakat.

Yogyakarta, Juni 2017 Penulis

(8)

(9)

ix DAFTAR ISI

Hal.

HALAMAN JUDUL ... i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ... ii

HALAMAN PENGESAHAN ... iii

PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ... iv

HALAMAN PERSEMBAHAN ... v

PRAKATA ... vi

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ... viii

DAFTAR ISI ... ix

Persiapan Sampel dan Pembuatan Dekokta ... 2

Pembuatan Buffer Sitrat dan Streptozotosin... 3

Pembuatan CMC Na 0,5% dan Glibenklamid ... 3

Penyiapan dan Pengelompokkan Hewan Uji ... 3

Penyiapan dan Pengukuran Kadar Glukosa Darah ... 3

(10)

x

DAFTAR TABEL

Hal.

Tabel I. Rerata kadar glukosa darah tikus setiap kelompok (mean  SD)

(n=3) ... 4 Tabel II. Hasil uji Post Hoc Tamhane kadar glukosa darah hari ke-7

pada kelompok uji efek antidiabetes (n=3)... 6 Tabel III. Hasil uji Post Hoc Tamhane kadar glukosa darah hari ke-14

pada kelompok uji efek antidiabetes (n=3)... 7

Tabel IV. Rerata penurunan kadar glukosa darah tikus (mean  SD)

(n=3) ... 7 Tabel V. Hasil uji Post Hoc Tamhane penurunan kadar glukosa darah

(11)

xi

DAFTAR GAMBAR

Hal.

Gambar 1. Rerata kadar glukosa darah tikus antar waktu (n=3) ... 5

Gambar 2. Rerata penurunan kadar glukosa darah tikus (n=3) ... 8

Gambar 3. Tanaman paitan ... 13

Gambar 4. Daun paitan ... 13

Gambar 5. Serbuk daun paitan ... 13

Gambar 6. Dekokta daun paitan ... 13

Gambar 7. Pengambilan sampel darah tikus ... 14

Gambar 8. Pembuatan serum menggunakan sentrifuge ... 14

Gambar 9. Pengukuran kadar glukosa darah dengan mikrovitalab... 15

Gambar 10. Penyuntikan streptozotosin secara intraperitonial ... 15

(12)

xii

DAFTAR LAMPIRAN

Hal.

Lampiran 1. Serbuk daun paitan dan dekokta daun paitan ... 13

Lampiran 2. Perlakuan pada tikus ... 14

Lampiran 3. Surat keterangan determinasi daun paitan ... 16

Lampiran 4. Surat Ethical Clearance (EC) ... 17

Lampiran 5. Surat hasil penetapan kadar air serbuk daun paitan ... 18

Lampiran 6. Reagen GOD-PAP Diasys ... 19

Lampiran 7. Surat legalitas penggunaan aplikasi SPSS ... 20

Lampiran 8. Perhitungan ... 21

Lampiran 9. Skema uji efek antidiabetes dekokta daun paitan ... 23

Lampiran 10. Analisis statistik rerata kadar glukosa darah hari 7 ... 24

Lampiran 11. Analisis statistik rerata kadar glukosa darah hari 14 ... 27

(13)

xiii ABSTRAK

Diabetes Melitus merupakan penyakit metabolik yang ditandai dengan hiperglikemik. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian dekokta daun paitan dibandingkan glibenklamid dan menghitung persentase penurunan kadar glukosa darah terhadap efek antidiabetes pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi streptozotosin. Penelitian ini menggunakan 18 ekor tikus yang dibagi dalam 6 kelompok yaitu kelompok I (kontrol basal) tanpa diberikan perlakuan, kelompok II (kontrol pankreotoksik) streptozotosin 40 mg/gBB, kelompok III (kontrol positif) glibenklamid 0,45 mg/gBB serta kelompok IV-VI (perlakuan dekokta daun paitan) dengan dosis 1 (400 mg/kgBB); dosis 2 (800 mg/kgBB); dan dosis 3 (1600 mg/kgBB). Pengukuran kadar glukosa darah pada hari ke-0, 4, 7, dan 14 dengan metode enzimatik. Data dianalisa menggunakan uji

One-Way ANOVA taraf kepercayaan 95%, dilanjutkan dengan analisis Post Hoc Tamhane. Dosis dekokta yang efektif pada penelitian ini yaitu 800 mg/kgBB. Penurunan kadar glukosa darah dekokta daun paitan tidak berbeda bermakna dibandingkan glibenklamid dengan persentase penurunan kadar glukosa secara bertutut-turut yakni dosis 1 (87,69%); dosis 2 (96,42%); dan dosis 3 (95,49%). Hasil penelitian menunjukkan bahwa dekokta daun paitan mempunyai pengaruh menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terinduksi streptozotosin pada hari ke-7 dan ke-14.

(14)

xiv

ABSTRACT

Diabetes Mellitus is a metabolic disease characterized by hyperglicemic. This study research aimed to examine antidiabetic effect of decoction of paitan leaves compared glibenclamid also to calculate percentage of blood glucose level reduction in male Wistar rats induced streptozotocin. This study used 18 rats divided into six group: group I (basal control) without treatment, group II (pancreotoxic control) streptozotosin 40 mg/gBB, group III (positive control) glibenclamid 0,45 mg/gBB, also group IV-VI (decoction of paitan leaves) with dose 1 (400 mg/kgBB); dose 2 (800 mg/kgBB); and dose 3 (1600 mg/kgBB). Measurement of blood glucose level at days 0, 4, 7, and 14 with enzymatic method. Data were analyzed by One-WayANOVA test with 95% confidence level, followed by Post Hoc Tamhane analysis. The decrease of blood sugar level of decoction of paitan leaves did not differ significantly compared to glibenclamid at day-7 and day-14 with percentage of decrease of blood sugar level in respectively dose 1 (87,69%); dose 2 (96,42%); and dose 3 (95,49%). The result showed that decoction of paitan leaves decreased blood glucose level in male Wistar rats induced streptozotocin.

(15)

1 PENDAHULUAN

Diabetes Melitus (DM) merupakan penyakit metabolik yang ditandai dengan hiperglikemik. Penyakit tersebut disertai kelainan terhadap karbohidrat, lemak, dan metabolisme protein sehingga menghasilkan komplikasi kronik termasuk mikrovaskular, makrovaskular, dan gangguan neuropatik (Dipiro et al., 2011). Survei Kesehatan Rumah Tangga (SKRT) 2001 mendapatkan prevalensi diabetes melitus pada penduduk usia 25-64 tahun di Jawa dan Bali sebesar 7,5%. Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas) tahun 2007 dan 2013 menunjukkan proporsi diabetes melitus pada Riskesdas 2013 meningkat hampir dua kali lipat dibandingkan tahun 2007 (Kementrian Kesehatan RI., 2014).

Angka prevalensi penderita diabetes semakin meningkat. Negara berkembang termasuk Indonesia menggunakan bahan alam sebagai obat tradisional karena mudah diperoleh, relatif murah, dan terjangkau oleh masyarakat. Menurut WHO (2013), penggunaan obat tradisional mengalami peningkatan pada berbagai negara. Oleh karena itu, penetapan kualitas, keamanan dan efikasi obat tradisional dibutuhkan untuk meningkatkan kepercayaan masyarakat.

Daun paitan (Tithonia diversifolia [Hemsley] A. Gray) merupakan salah satu

tanaman yang secara tradisional digunakan masyarakat sebagai obat antidiabetes. Penelitian Prasetyo, dkk., (2016) menunjukkan infusa daun paitan dapat menurunkan kadar glukosa darah. Berdasarkan penelitian Ezeonwumelu et al., (2012) ekstrak air daun paitan memiliki kandungan saponin, alkaloid, tanin, dan flavonoid. Penelitian Lavle et al., (2016) menunjukkan bahwa senyawa flavonoid dan saponin berperan sebagai antidiabetes.

Pemilihan bentuk sediaan dekokta berdasarkan cara pemanfaatan tanaman obat yang banyak digunakan oleh masyarakat yaitu dengan metode rebusan. Penelitian ini bertujuan mengetahui pengaruh pemberian dekokta daun paitan dibandingkan glibenklamid sebagai kontrol positif dan menghitung persentase penurunan kadar glukosa darah pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi streptozotosin

METODE PENELITIAN Bahan dan Alat

(16)

2

Laboratorium Imono Universitas Sanata Dharma, berusia 2-3 bulan dengan berat badan 160-200 g. Daun paitan diperoleh dari CV Merapi Farma, Yogyakarta.

Bahan penelitian lainnya yang digunakan adalah streptozotosin (Nacalai Tesque) digunakan sebagai zat diabetogenik, buffer sitrat sebagai pelarut streptozotosin, glibenklamid® sebagai kontrol positif, Na CMC 0.5% sebagai pelarut glibenklamid, serta aquadest sebagai pelarut Na CMC 0.5%. Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah ayakan nomor mesh 40, alat-alat gelas (gelas ukur, gelas beker, labu ukur, batang pengaduk, dan pipet tetes, corong), timbangan analitik (Mettler Toledo®), panci enamel, penangas air, kain flanel, termometer, stopwatch, spuit, vortex, mortir, stemper, pH meter, tabung efendorf, tabung sentrifugasi, mikropipet dan mikrovitalab.

Persiapan Sampel dan Pembuatan Dekokta

Daun paitan diperoleh dari CV Merapi Farma Yogyakarta berbentuk daun kering berwarna hijau pucat yang telah dibersihkan dan dijemur. Determinasi dilakukan di Departemen Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada Yogyakarta untuk mengidentifikasi daun paitan yang digunakan dalam penelitian. Hasil determinasi

menunjukkan bahwa tanaman paitan yang digunakan adalah benar (Lampiran 3). Serbuk daun paitan diserbuk dengan mesin penyerbuk dan diayak menggunakan ayakan nomor

mesh 40 untuk mendapatkan serbuk yang lebih halus dan ukuran partikel yang seragam. Penetapan kadar air dari serbuk dilakukan di Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu (LPPT) Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Pengukuran kadar air dilakukan untuk memastikan serbuk daun paitan memiliki kadar air kurang dari 10% (Badan Pengawas Obat dan Makanan RI., 2014). Hasil penetapan kadar air dari serbuk daun paitan sebesar 3,84% menunjukkan bahwa serbuk daun paitan memenuhi persyaratan serbuk yang baik (Lampiran 5).

(17)

3 Pembuatan Buffer Sitrat dan Streptozotosin

Buffer sitrat menggunakan Na sitrat sebesar 14,705 g dan asam sitrat sebesar 10,507 g yang masing-masing dilarutkan dalam 1 L aquadest. Titrasi buffer sitrat menggunakan 48 mL Na sitrat dan 11 mL asam sitrat hingga diperoleh pH 5,5 yang diukur dengan pH meter (Tokan, 2014). Berdasarkan Goud et al., (2015) dan Tokan (2014), dosis streptozotosin yang digunakan sebesar 40 mg/kgBB yang mampu meningkatkan kadar glukosa darah tikus dengan konsentrasi 1,6 mg/kg yang diberikan secara intraperitonial (Lampiran 8).

Pembuatan CMC Na 0,5% dan Glibenklamid

Serbuk CMC sebesar 0,5 g dilarutkan dengan 50 mL aquadest selama 24 jam dan ditambahkan aquadest hingga 100 mL. Suspensi glibenklamid terdiri dari tablet glibenklamid yang digerus homogen ditimbang setara 5 mg dan ditambahkan larutan CMC Na 0,5% hingga 100 mL (Tokan, 2014).

Penyiapan dan Pengelompokkan Hewan Uji

Penelitian penggunaan hewan uji ini telah disetujui oleh Komisi Etik, Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta (Lampiran 4). Tikus jantan putih galur Wistar yang berumur 2-3 bulan dengan berat badan 160-200 g sebanyak 18 ekor diadaptasikan dengan lingkungan penelitian selama 3 hari dengan kondisi dan perlakuan yang sama. Semua tikus ditimbang dan dibagi secara acak, kemudian dipuasakan selama 8-12 jam sebelum diberikan perlakuan yang dibagi menjadi 6 kelompok. Kelompok I (kontrol basal) tidak diberikan perlakuan apapun, kelompok II (kontrol pankreotoksik) terinduksi streptozotosin 40 mg/kgBB secara intraperitonial, kelompok III (kontrol positif) terinduksi streptozotosin dan diberikan glibenklamid (0,45 mg/kgBB secara peroral), kelompok IV-VI (kelompok perlakuan) terinduksi streptozotosin dan diberikan dosis dekokta daun paitan berturut-turut yaitu dosis 1 (400 mg/kgBB); dosis 2 (800 mg/kgBB); dan dosis 3 (1600 mg/kgBB) secara peroral (Lampiran 7).

Penyiapan dan Pengukuran Kadar Glukosa Darah

(18)

4

3500 rpm selama 15 menit (Bhavsar et al., 2009; Jadhav dan Puchchakayala, 2011; Tokan,

2014; Zhang et al, 2012). Serum sampel darah tikus diambil sebanyak 10 L dan

ditambahkan 1000 L reagen GOD-PAP. Serum tersebut divortex dan didiamkan dengan

Operating Time (OT) selama 10 menit. Setelah OT, serum tersebut diukur menggunakan mikrovitalab. Pengukuran kadar glukosa darah diambil hari ke-0; 4; 7; dan 14 (Lampiran 9).

Analisis Statistika

Analisis data kadar glukosa darah dilakukan antara kelompok perlakuan terhadap kontrol negatif, kontrol pankreotoksik dan kontrol positif. Pengujian statistik menggunakan uji Shapiro-Wilk, jika terdistribusi normal maka dilanjutkan uji One-Way

ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%, dilanjutkan dengan uji Post Hoc Tamhane untuk melihat perbedaan antar kelompok bermakna (p<0.05) atau tidak bermakna (p>0.05) (Dahlan, 2014).

HASIL DAN PEMBAHASAN

Penelitian ini bertujuan untuk menguji pengaruh pemberian dekokta daun paitan dibandingkan glibenklamid sebagai kontrol positif dan menghitung persentase penurunan kadar glukosa darah pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi streptozotosin. Indikator kuantitatif berupa kadar glukosa darah yang menunjukkan gangguan hiperglikemia yang dialami tikus. Hasil rerata kadar glukosa darah tikus pada semua kelompok perlakuan dapat dilihat dalam Tabel I dan Gambar 1.

Tabel I. Rerata kadar glukosa darah setiap kelompok (mean  SD) (n=3)

Kelompok Waktu (hari)

II : Kontrol pankreotoksik III : Kontrol positif

(19)

5

Gambar 1. Rerata kadar glukosa darah tikus antar waktu (n=3)

Tabel I dan Gambar 1 menunjukkan bahwa kadar glukosa darah tikus pada setiap kelompok dalam hari ke-0 termasuk dalam range normal. Menurut Boehm et al., (2007) range kadar glukosa darah tikus normal berkisar 91-166 mg/dl. Pengukuran tersebut dilakukan untuk memastikan hewan uji yang digunakan tidak menderita penyakit diabetes. Pada hari ke-4 menunjukkan kadar glukosa darah pada kontrol pankreotoksik, kontrol positif dan perlakuan dekokta daun paitan mengalami peningkatan kadar glukosa lebih dari 200 mg/dl. Peningkatan kadar glukosa darah lebih dari 250 mg/dl setelah tiga hari induksi

(Goud et al., 2015).

Streptozotosin sebagai zat diabetogenik yang menyebabkan kerusakan sel β pankreas sehingga terjadi defisiensi insulin dan hiperglikemik pada hewan uji. Mekanisme

streptozotosin yaitu menembus sel β Langerhans pankreas melalui Glucose Transporter 2 (GLUT-2) dan gugus nitrosourea mengakibatkan alkilasi DNA sel β pankreas. Streptozotosin merupakan donor Nitric Oxide (NO) yang juga memiliki kontribusi terhadap kerusakan sel β pankreas melalui peningkatan aktivitas guanilil siklase dan pembuatan Cyclic Guanosine Monophosphate (cGMP) (Goud et al., 2015). Pelarut streptozotosin yaitu buffer sitrat tidak mempengaruhi perubahan kadar glukosa darah tikus (Sellamuthu et al., 2009).

Dekokta Dosis 1 Dekokta Dosis 2 Dekokta Dosis 3

(20)

6

Tabel II. Hasil uji Post Hoc Tamhane kadar glukosa darah hari ke-7 pada kelompok uji efek antidiabetes (n=3)

Kelompok I II III IV V VI

IV : Dekokta dosis 1 (400 mg/kgBB) V : Dekokta dosis 2 (800 mg/kgBB) VI : Dekokta dosis 3 (1600 mg/kgBB) BB : Berbeda Bermakna (p<0.05) BTB : Berbeda Tidak Bermakna (p>0.05)

Pengukuran pada hari ke-7 menunjukkan kontrol pankreotoksik dan kontrol positif berbeda bermakna dibandingkan dengan kontrol basal. Hal tersebut menunjukkan bahwa kontrol pankreotoksik dan kontrol positif mengalami penurunan kadar glukosa darah namun masih dalam konsiri diabetes (kadar glukosa darah > 200 mg/dl). Penurunan kadar glukosa darah kontol pankreotoksik mungkin disebabkan sel β pankreas yang terluka tidak rusak secara permanen sehingga sel-sel β pankreas dewasa yang mengandung sel β perkursor mengalami regenerasi (Zhang et al, 2012).

Perbandingan kontrol positif dengan perlakuan dekokta daun paitan menunjukkan berbedaan tidak bermakna. Hal ini menunjukkan bahwa penurunan kadar glukosa darah tikus hampir sebanding. Apabila perlakuan dekokta daun paitan dibandingkan dengan kontrol basal, menunjukkan perbedaan tidak bermakna yang berarti perlakuan dekokta daun paitan hampir mendekati kadar glukosa darah tikus kontrol basal.

Pengukuran kadar glukosa darah pada hari ke-7 dilakukan untuk mengetahui kemampuan kontrol positif dan pemberian dekokta daun paitan dalam menurunkan kadar glukosa dalam jangka waktu pemberian perlakuan selama 3 hari. Kemudian, pemberian perlakuan dilanjutkan hingga hari ke-14 untuk mengetahui kemampuan kontrol positif dan

(21)

7

Tabel III. Hasil uji Post Hoc Tamhane kadar glukosa darah hari ke-14 pada kelompok uji efek antidiabetes (n=3)

Kelompok I II III IV V VI

Hasil kadar glukosa darah pada hari ke-14 dianalisis secara statistik menggunakan

Post Hoc Tamhane dapat dilihat pada tabel II. Berdasarkan hasil pada tabel II menunjukkan bahwa kelompok kontrol positif dan perlakuan dekokta daun paitan mempunyai pengaruh efek antidiabetes dengan adanya penurunan kadar glukosa darah tikus. Apabila kelompok tersebut dibandingkan dengan kontrol basal, terlihat adanya perbedaan tidak bermakna maka kadar glukosa darah tersebut termasuk normal. Perbandingan perlakuan dekokta daun paitan dengan kontrol positif terlihat adanya perbedaan tidak bermakna, menunjukkan pengaruh perubahan kadar glukosa darah tikus dekokta daun paitan hampir sebanding dengan kontrol positif.

Tabel IV. Rerata penurunan kadar glukosa darah tikus (mean  SD) (n=3)

Kelompok Waktu penurunan (hari)

(22)

8

Gambar 2. Rerata penurunan kadar glukosa darah tikus (n=3)

Hasil rerata penurunan kadar glukosa darah tikus setiap kelompok dapat dilihat dalam tabel III dan gambar 2. Rerata penurunan kadar glukosa darah tertinggi hingga terendah pada hari 4-14 yaitu dekokta dosis 3 (395,33), kontrol positif (359,33), dekokta dosis 2 (350,33), kontrol pankreotoksik (323,33), dekokta dosis 1 (270,67) dan kontrol basal (1).

Tabel V. Hasil uji Post Hoc Tamhane penurunan kadar glukosa darah hari 4-14 (n=3) II : Kontrol pankreotoksik III : Kontrol positif

Penurunan kadar glukosa darah tikus pada dekokta daun paitan dosis 1, 2, 3 tidak berbeda bermakna dengan kontrol positif, menunjukkan penurunan kadar glukosa darah tikus dekokta daun paitan hampir sebanding dengan kontrol positif (tabel IV). Persentase penurunan kadar glukosa darah tertinggi hingga terendah pada hari ke 4-14 yaitu dekokta dosis 2 (96,42%), dekokta dosis 3 (95,49%), kontrol positif (94,73%), dekokta dosis 1

Kontrol Positif Dekokta Dosis 1 Dekokta Dosis 2 Dekokta Dosis 3

(23)

9

(87,69%), kontrol pankreotoksik (83,55%), dan kontrol basal (4,92%) (Lampiran 9). Maka dapat dlilihat dosis dekokta yang efektif pada penelitian ini yaitu 400 mg/kgBB.

Glibenklamid merupakan obat pilihan (drug of choice) untuk penderita diabetes dan digunakan sebagai obat standar dalam membandingkan aktivitas antidiabetes pada tikus sebagai model diabetes terinduksi streptozotosin Mekanisme glibenklamid dengan merangsang sekresi insulin di kelenjar pankreas yang masih bisa berproduksi (Departemen Kesehatan RI, 2005). Glibenklamid menghambat kanal Adenosine Phosphate-sensitive K+ (KATP) pada membran plasma sehingga terjadi depolarisasi membran. Hal tersebut

menyebabkan kanal Ca terbuka, meningkatnya Ca+ dan terlepasnya insulin (Sellamuthu et

al., 2009). Pelarut glibenklamid yaitu CMC Na 0,5% tidak mempengaruhi perubahan kadar glukosa darah tikus (Prasetyo dkk., 2016; Tokan, 2014).

Dekokta daun paitan memiliki efek antidiabetes dengan menurunkan kadar glukosa darah tikus yang terinduksi streptozosin. Efek tersebut mungkin dipengaruhi adanya kandungan flavonoid dan saponin. Senyawa flavonoid dapat meningkatkan penggunaan glukosa di jaringan perifer dan mengurangi resistensi insulin, inflamasi serta stress oksidatif pada otot dan lemak (Jadhav dan Puchchakayala, 2011; Lavle et al., 2016).

Senyawa saponin dapat meningkatkan sensitivitas insulin, menghambat gluconeogenesis dan meningkatkan ekspresi Glucose Transporter 4 (GLUT-4) (Bhavsar et al., 2009; Lavle

et al., 2016).

KESIMPULAN

Berdasarkan data yang diperoleh dan uji statistik yang dilakukan, maka dapat disimpulkan bahwa pemberian dekokta daun paitan dengan dosis 400; 800; 1600 mg/kgBB memiliki pengaruh menurunkan kadar glukosa darah pada tikus jantan galur wistar yang terinduksi streptozotosin pada hari ke-7 dan ke-14 dengan persentase penurunan kadar glukosa darah secara berturut turut sebesar 87,69%; 96,42%; dan 95.49%.

SARAN

(24)

10 DAFTAR PUSTAKA

Badan Pengawas Obat dan Makanan RI., 2010. Acuan Sediaan Herbal. Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, Jakarta, 4.

Badan Pengawas Obat dan Makanan RI., 2014. Persyaratan Mutu Obat Tradisional. Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, Jakarta, 10.

Bhavsar, S.K., Singh, S., Giri, S., Jain, M.R., dan Santani, D.D., 2009. Effect of Saponin from Helicteres isora on Lipid and Glucose Metabolism Regulating Genes Expression. Journal of Ethnopharmacology, 124, 426-433.

Boehm, O., Zur, B., Koch, A., Tran, N., Freyenhagen, R., Hartmann, M., dan Zacharowski, K., 2007. Clinical Chemistry Reference Database for Wistar Rats and C57/BL6 Mice. Bio. Chem., 388: 548.

Dahlan, M.S., 2014, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan. Edisi 6. Epidemiologi Indonesia, Jakarta, 14, 110-117.

Departemen Kesehatan RI, 2005, Pharmaceutical Care untuk Penyakit Diabetes Mellitus, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, 37-39.

Dipiro, J.T., Talbert, R.L., Yee, G.C., Matzke, G.R., Wells, B.G., dan Posey, L.M., 2011.

Pharmacotherapy Handbook 8th Edition. McGraw-Hill, 1256.

Ezeonwumelu, J.O.C., Omolo, R.G., Ajayi, A.M., Agwu, E., Tanayen, J.K., Adiukwu, C.P., Oyewale, A.A., Adju, B., Okoruwa, A.G., and Ogbonnia, S.O., 2012. Studies of Phytochemical Screening, Acute Toxicity and Anti-Diarrhoeal Effect of Aqueous Extract of Kenyan Tithonia diversifolia Leaves in Rats.

British Journal of Pharmacology and Toxicology, 3(3), 127-134.

Fahri, C., Sutarno, dan Listyawati, S., 2005. Kadar Glukosa dan Kolesterol Total Darah Tikus Putih (Rattus norvegicus L.) Hiperglikemik Setelah Pemberian Ekstrak Metanol Akar Meniran (Phyllanthus niruri L.). Biofarmasi, 3(1): 1-6.

Goud, B.J., Dwarakanath, V., dan Swamy, B.K.C., 2015. Streptozotocin-A Diabetogenic Agent in Animal Models. International Journal of Pharmacy & Pharmaceutical Research, 3(1): 253-265.

Harmita dan Radji, M., 2006. Buku Ajar Analisis Hayati. EGC, Jakarta, 66-67.

(25)

11

Kementrian Kesehatan RI, 2014. Situasi dan Analisis Diabetes. Kementrian Kesehatan RI, Jakarta, 1.

Lavle, N., Sukla, P., Panchal, A., 2016. Role of Flavonoids and Saponins in The Treatment of Diabetes Mellitus. Journal of Pharmaceutical Science and Bioscientific Research, 6(4): 535-541.

Prasetyo, A., Denashurya, T.G., Putri, W.S., Ilmiawan, M.I., 2016. Perbandingan Efek Hipoglikemik Infusa Daun Kembang Bulan (Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray) dan Metformin pada Tikus yang Diinduksi Aloksan. IAI, Pontianak, 91-94.

Sellamuthu, P.S., Muniappan, B.P., Perumal, S.M., dan Kandasamy, M., 2009. Antigyperglycemic Effect of Mangiferin in Streptozotocin Induced Diabetic Rats. Journal of Health Science, 55(2), 206-214.

Tokan, I.R., 2014. Efek Antihiperglikemik Ekstrak Etanol Daun Artocarpus altilis (Park.) Foesberg pada Tikus Terinduksi Streptozotosin. Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

Zhang, Y., Zhang, Y., None, R.N., Cui, W., Beng, J.B., Siegal, G.P., Wang, H., dan Wu, H., 2012. Regeneration of Pancreatic Non-β Endocrine Cells in Adult Mice following a Single Diabetes-Inducing Dose of Streptozotocin. Plos One, 7(5): e36675.

(26)

12

(27)

13

Lampiran 1. Serbuk daun paitan dan dekokta daun paitan

Gambar 3. Tanaman paitan Gambar 4. Daun paitan

Gambar 5. Serbuk daun paitan

(28)

14 Lampiran 2. Perlakuan pada tikus

Gambar 7. Pengambilan sampel darah tikus

(29)

15

Gambar 9. Pengukuran kadar glukosa dengan mikrovitalab

Gambar 10. Penyuntikan streptozotosin secara intraperitonial

(30)

16

(31)

(32)

18

(33)

(34)

20

(35)

21 Lampiran 8. Perhitungan

a. Konsentrasi Streptozotosin

Dosis streptozotosin : 40 mg/kgBB Berat badan tikus : 200 g

Dosis glibenklamid pada manusia sebesar 5 mg dengan berat badan 70 kg.

Nilai konversi berat badan manusia (70 kg) ke tikus (200 g) = 0.018 (Harmita dan Radji, 2006).

Dosis glibenklamid = 5 mg x 0.018

= 0,09 mg/200gBB tikus = 0,45 mg/kgBB tikus c. Dosis dekokta akar daun paitan

Konsentrasi dekokta : 8% = 80 g/mL

g = 1600 mg/kgBB; dibuat peringkat dosis dengan dibagi 2

Maka, peringkat dosis yaitu : 400; 800; 1600 mg/kgBB d. Konversi dosis dari tikus ke manusia

Nilai konversi tikus 200 g ke manusia 70 kg = 56

Dosis untuk manusia 70 kg = dosis tikus 200 g x nilai konversi Dekokta daun paitan dosis 1 (400 mg/kgBB)

(36)

22

Dosis manusia = 0,08 g/200gBB x 56 = 4,48 g/70kgBB manusia Dekokta daun paitan dosis 2 (800 mg/kgBB)

800 mg/kgBB = 0,8 g/kgBB = 0,8 g/1000gBB = 0,16 g/200gBB Dosis manusia = 0,16 g/200gBB x 56 = 8,96 g/70kgBB manusia Dekokta daun paitan dosis 3 (1600 mg/kgBB)

1600 mg/kgBB = 1,6 g/kgBB = 1,6 g/1000gBB = 0,32 g/200gBB

Dosis manusia = 0,32 g/200gBB x 56 = 417,92 g/70kgBB manusia e. Perhitungan persentase penurunan kadar glukosa darah tikus

Penurunan pra-perlakuan = rerata penurunan kadar glukosa darah tikus hari 4-0 Penurunan post-perlakuan = rerata penurunan kadar glukosa darah tikus hari 4-14

% penurunan hari 4-14 = e a − e a a

e a a− e a a x %

(Fahri, dkk., 2005)

Dekokta dosis 1 = ,

, x % = 87,69%

Dekokta dosis 2 = ,

, x % = 96,42%

(37)

23

Lampiran 9. Analisis statistik kadar glukosa darah tikus

Gambar 2. Skema uji efek antidiabetes dekokta daun paitan Keterangan

STZ : streptozotosin

Kontrol (+) : kontrol positif

Kontrol P : kontrol prankreotoksik

Kelompok IV : dekokta daun paitan dosis 1 (400 mg/kgBB) Kelompok V : dekokta daun paitan dosis 2 (800 mg/kgBB) Kelompok VI : dekokta daun paitan dosis 3 (1600 mg/kgBB)

Hari ke-0

Diukur kadar glukosa darah

Hari ke-1

Kontrol basal

Kontrol (+)

18 ekor tikus dipuasakan selama 8-12 jam

Hari ke-4

Diukur kadar glukosa darah >200 mg/dL

Kontrol

Induksi STZ 40 mg/kgBB i.p.

Kontrol (P) Kelompok IV-VI

Kelompok VI

Diberi dekokta daun paitan

(38)

24

Lampiran 10. Analisis statistik rerata kadar glukosa darah tikus hari 7 a. Uji normalitas (Shapiro-Wilk)

Tests of Normality Wilk, nilai p setiap kelompok lebih dari 0.05, maka disimpulkan sampel terdistribusi normal, maka analisis dilanjutkan analisis One-Way ANOVA.

b. Uji homogenitas Lower Bound Upper Bound

Kontol Basal 3 82.3333 11.06044 6.38575 54.8577 109.8090 72.00 94.00 Kontrol

Pankreotoksik

(39)

26 Test of Homogeneity of Variances

Hari_7

Levene Statistic df1 df2 Sig.

6.721 5 12 .003

Jika nilai p>0.05 maka sampel dikatakan memiliki varian yang sama. Hasil uji homogenitas menunjukkan bahwa varian data berbeda (0.003), maka dapat ditarik kesimpulan bahwa paling tidak terdapat dua kelompok yang mempunyai varian berbeda dan analisis data dilanjutkan dengan One Way ANOVA.

c. Uji ANOVA

ANOVA

Hari_7

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 146722.500 5 29344.500 9.923 .001

Within Groups 35486.000 12 2957.167

Total 182208.500 17

Hasil uji analisis One-Way ANOVA menunjukkan 0.035 (p<0.05), maka dapat ditarik kesimpulan bahwa paling tidak terdapat dua kelompok yang mempunyai rerata kadar glukosa darah yang berbeda bermakna. Oleh karena itu, dilanjutkan analisis Post Hoc Tamhane untuk mengetahui antar kelompok mana yang mempunyai perbedaan.

Multiple Comparisons

Dependent Variable: Hari_7

Tamhane

(I) Kelompok (J) Kelompok

Mean

Kontrol Positif -298.33333* 15.23884 .006 -439.6913 -156.9754

Dekokta Dosis 1 -178.00000 34.75949 .379 -692.6902 336.6902

Dekokta Dosis 2 -223.33333 62.16287 .649 -1237.0069 790.3403

Dekokta Dosis 3 -153.33333 24.19137 .225 -465.3748 158.7082

(40)

26

Pankreotoksik Kontrol Positif -148.33333* 18.39082 .021 -264.4225 -32.2442

Dekokta Dosis 1 -28.00000 36.25220 1.000 -432.8297 376.8297

Dekokta Dosis 2 -73.33333 63.00970 .999 -994.3473 847.6806

Dekokta Dosis 3 -3.33333 26.29111 1.000 -226.4271 219.7605

Kontrol Positif Kontol Basal 298.33333* 15.23884 .006 156.9754 439.6913

Kontrol

Pankreotoksik 148.33333

*

18.39082 .021 32.2442 264.4225

Dekokta Dosis 1 120.33333 36.86311 .581 -256.0014 496.6681

Dekokta Dosis 2 75.00000 63.36315 .998 -812.8964 962.8964

Dekokta Dosis 3 145.00000 27.12727 .145 -63.7514 353.7514

Dekokta Dosis 1 Kontol Basal 178.00000 34.75949 .379 -336.6902 692.6902

Kontrol

Pankreotoksik 28.00000 36.25220 1.000 -376.8297 432.8297

Kontrol Positif -120.33333 36.86311 .581 -496.6681 256.0014

Dekokta Dosis 2 -45.33333 70.64622 1.000 -617.5160 526.8494

Dekokta Dosis 3 24.66667 41.37498 1.000 -265.6325 314.9659

Kontrol

Pankreotoksik 73.33333 63.00970 .999 -847.6806 994.3473

Kontrol Positif -75.00000 63.36315 .998 -962.8964 812.8964

Dekokta Dosis 1 45.33333 70.64622 1.000 -526.8494 617.5160

Dekokta Dosis 3 70.00000 66.09001 .999 -638.4762 778.4762

Kontrol

Pankreotoksik 3.33333 26.29111 1.000 -219.7605 226.4271

Kontrol Positif -145.00000 27.12727 .145 -353.7514 63.7514

Dekokta Dosis 1 -24.66667 41.37498 1.000 -314.9659 265.6325

Dekokta Dosis 2 -70.00000 66.09001 .999 -778.4762 638.4762

(41)

27

Lampiran 11. Analisis statistik rerata kadar glukosa darah tikus hari 14 a. Uji normalitas (Shapiro-Wilk)

Tests of Normality

Wilk, nilai p setiap kelompok lebih dari 0.05, maka disimpulkan sampel terdistribusi normal, maka analisis dilanjutkan analisis One-Way ANOVA.

b. Uji homogenitas

Pankreotoksik 3 146.3333 20.81666

12.0185

0 94.6219 198.0448 123.00 163.00

Kontrol Positif 3 102.0000 7.93725 4.58258 82.2828 121.7172 96.00 111.00

Dekokta Dosis 1

3 118.0000 37.26929 21.5174

3 25.4180 210.5820 75.00 141.00

Dekokta Dosis 2 3 96.3333 4.50925 2.60342 85.1317 107.5349 92.00 101.00

Dekokta Dosis 3 3 99.6667 2.08167 1.20185 94.4955 104.8378 98.00 102.00

(42)

Hari_14

7.081 5 12 .003

Jika nilai p>0.05 maka sampel dikatakan memiliki varian yang sama. Hasil uji homogenitas menunjukkan bahwa varian data berbeda (0.003), maka dapat ditarik kesimpulan bahwa paling tidak terdapat dua kelompok yang mempunyai varian berbeda dan analisis data dilanjutkan dengan One Way ANOVA.

c. Uji ANOVA

ANOVA

Hari_14

Between Groups 5896.444 5 1179.289 3.515 .035

Within Groups 4026.000 12 335.500

Total 9922.444 17

Dependent Variable: Hari_14

Tamhane

Pankreotoksik -51.33333 13.37078 .396 -170.3316 67.6650

Kontrol Positif -7.00000 7.43864 1.000 -55.7232 41.7232

Dekokta Dosis 1 -23.00000 22.30097 1.000 -311.3354 265.3354

Dekokta Dosis 2 -1.33333 6.41179 1.000 -62.5232 59.8565

(43)

29

Kontrol

Pankreotoksik

Kontol Basal

51.33333 13.37078 .396 -67.6650 170.3316

Kontrol Positif 44.33333 12.86252 .551 -92.5858 181.2525

Dekokta Dosis 1 28.33333 24.64639 .998 -169.7069 226.3736

Dekokta Dosis 2 50.00000 12.29724 .519 -124.2533 224.2533

Dekokta Dosis 3 46.66667 12.07845 .599 -150.8446 244.1780

Kontrol Positif Kontol Basal 7.00000 7.43864 1.000 -41.7232 55.7232

Kontrol

Pankreotoksik -44.33333 12.86252 .551 -181.2525 92.5858

Dekokta Dosis 1 -16.00000 22.00000 1.000 -329.4972 297.4972

Dekokta Dosis 2 5.66667 5.27046 .999 -36.1594 47.4927

Dekokta Dosis 3 2.33333 4.73756 1.000 -59.9839 64.6505

Dekokta Dosis 1 Kontol Basal 23.00000 22.30097 1.000 -265.3354 311.3354

Kontrol

Pankreotoksik -28.33333 24.64639 .998 -226.3736 169.7069

Kontrol Positif 16.00000 22.00000 1.000 -297.4972 329.4972

Dekokta Dosis 2 21.66667 21.67436 1.000 -325.9797 369.3130

Dekokta Dosis 3 18.33333 21.55097 1.000 -344.5921 381.2587

Kontrol

Pankreotoksik -50.00000 12.29724 .519 -224.2533 124.2533

Kontrol Positif -5.66667 5.27046 .999 -47.4927 36.1594

Dekokta Dosis 1 -21.66667 21.67436 1.000 -369.3130 325.9797

Dekokta Dosis 3 -3.33333 2.86744 .998 -29.9268 23.2602

Kontrol

Pankreotoksik -46.66667 12.07845 .599 -244.1780 150.8446

Kontrol Positif -2.33333 4.73756 1.000 -64.6505 59.9839

Dekokta Dosis 1 -18.33333 21.55097 1.000 -381.2587 344.5921

(44)

30

Lampiran 12. Analisis statistik rerata penurunan kadar glukosa darah tikus hari 4-14

a. Uji normalitas (Shapiro-Wilk)

Tests of Normality Wilk, nilai p setiap kelompok lebih dari 0.05, maka disimpulkan sampel terdistribusi normal, maka analisis dilanjutkan analisis One-Way ANOVA.

b. Uji homogenitas

Pankreotoksik 3 323.3333 24.70493 14.26340 261.9629 384.7038 297.00 346.00

Kontrol Positif 3 359.3333 20.74448 11.97683 307.8012 410.8655 337.00 378.00

Dekokta Dosis 1 3 270.6667 55.50976 32.04857 132.7728 408.5606 220.00 330.00

Dekokta Dosis 2 3 350.3333 71.34657 41.19196 173.0986 527.5680 268.00 394.00

Dekokta Dosis 3 3 395.3333 96.46416 55.69361 155.7031 634.9636 284.00 454.00

(45)

Penurunan_H_4_14

4.839 5 12 .012

Jika nilai p>0.05 maka sampel dikatakan memiliki varian yang sama. Hasil uji homogenitas menunjukkan bahwa varian data berbeda, maka dapat ditarik kesimpulan bahwa paling tidak terdapat dua kelompok yang mempunyai varian berbeda dan analisis data dilanjutkan dengan One Way ANOVA.

c. Uji ANOVA

ANOVA

Penurunan_H_4_14

Between Groups 312844.667 5 62568.933 20.200 .000

Within Groups 37169.333 12 3097.444

Total 350014.000 17

Dependent Variable: Penurunan_H_4_14

Tamhane

(I) Kelompok (J) Kelompok

Mean

Kontrol Positif -358.33333* 12.87547 .004 -492.1976 -224.4691

Dekokta Dosis 1 -269.66667 32.39513 .171 -774.5078 235.1744

Dekokta Dosis 2 -349.33333 41.46216 .175 -1018.4394 319.7728

Dekokta Dosis 3 -394.33333 55.89375 .247 -1319.2293 530.5626

(46)

32

Pankreotoksik Kontrol Positif -36.00000 18.62495 .871 -154.9039 82.9039

Dekokta Dosis 1 52.66667 35.07928 .983 -281.6894 387.0228

Dekokta Dosis 2 -27.00000 43.59154 1.000 -521.1331 467.1331

Dekokta Dosis 3 -72.00000 57.49106 .997 -836.1604 692.1604

Kontrol Positif Kontol Basal 358.33333* 12.87547 .004 224.4691 492.1976

Kontrol

Pankreotoksik 36.00000 18.62495 .871 -82.9039 154.9039

Dekokta Dosis 1 88.66667 34.21338 .779 -280.4941 457.8274

Dekokta Dosis 2 9.00000 42.89781 1.000 -528.0729 546.0729

Dekokta Dosis 3 -36.00000 56.96685 1.000 -845.1837 773.1837

Dekokta Dosis

1

Kontol Basal 269.66667 32.39513 .171 -235.1744 774.5078

Kontrol

Pankreotoksik -52.66667 35.07928 .983 -387.0228 281.6894

Kontrol Positif -88.66667 34.21338 .779 -457.8274 280.4941

Dekokta Dosis 2 -79.66667 52.19089 .968 -422.2630 262.9297

Dekokta Dosis 3 -124.66667 64.25643 .900 -629.8748 380.5415

Dekokta Dosis

2

Kontol Basal 349.33333 41.46216 .175 -319.7728 1018.4394

Kontrol

Pankreotoksik 27.00000 43.59154 1.000 -467.1331 521.1331

Kontrol Positif -9.00000 42.89781 1.000 -546.0729 528.0729

Dekokta Dosis 1 79.66667 52.19089 .968 -262.9297 422.2630

Dekokta Dosis 3 -45.00000 69.27161 1.000 -510.4100 420.4100

Dekokta Dosis

3

Kontol Basal 394.33333 55.89375 .247 -530.5626 1319.2293

Kontrol

Pankreotoksik 72.00000 57.49106 .997 -692.1604 836.1604

Kontrol Positif 36.00000 56.96685 1.000 -773.1837 845.1837

Dekokta Dosis 1 124.66667 64.25643 .900 -380.5415 629.8748

Dekokta Dosis 2 45.00000 69.27161 1.000 -420.4100 510.4100

(47)

33

BIOGRAFI PENULIS

Penulis skripsi dengan judul “Efek Antidiabetes Dekokta Daun Paitan (Tithonia diversifolia) Pada Tikus Jantan Galur Wistar Terinduksi Streptrozotosin” yang memiliki nama lengkap Meliana, lahir di Singkawang pada tanggal 25 Agustus 1995. Penulis merupakan anak pertama dari tiga bersaudara dari pasangan Bapak Alisana dan Ibu Djiu Mie. Pendidikan formal yang ditempuh yaitu TK Pangudi Luhur Santa Maria (2000-2001), pendidikan tingkat Sekolah Dasar di SD Pangudi Luhur Santo Yosep Ketapang (2001-2007), pendidikan Sekolah Menengah Pertama di SMP Pangudi Luhur Santo Albertus Ketapang (2007-2010), dan pendidikan Sekolah Menengah Atas di SMA Kristen Immanuel Pontianak (2010-2013). Penulis melanjutkan pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta (2013). Semasa menempuh pendidikan sarjana penulis aktif dalam berbagai kepanitiaan, antara lain menjadi anggota divisi perlengkapan dalam Seminar Nasional Your Health, Your Happiness (2013), sekretaris dan bendahara dalam Acara Bakti Sosial KMBK-DV (2014), sekretaris dan bendahara dalam Acara Latihan Kepemimpinan KMBK-DV (2014), ketua panitia dalam Malam Keakraban KMBK-DV (2014), koordinator humas dalam Kampanye Informasi Obat (2015), steering committee dalam Seminar Nasional First

Love Yourself (2015), volunteer dalam 14th Sakyadhita International Association Conference of Buddhist Women, dan anggota among tamu dalam Sidang Terbuka Pengambilan Lafal Sumpah/Janji Apoteker Angkatan XXX (2016). Penulis ikut aktif

(48)

32