BAB III TINJAUAN PUSTAKA
3.3 Laboratorium Mikrobiologi
3.3.3 Laboratorium Mikrobiologi TB
CARA KERJA:
1. Timbang media XLD sebanyaak 26,5 g 2. Larutkan dengan aquades sebanyak 500 ml 3. Panaskan hingga tampak jernih
4. Tunggu sebentar, tuang kedalam cawan petri dan biarkan hingga beku
1. Rak pewarnaan 3. Kanebo
2. Sumbu 4. Rak pengering
Bahan :
1. Carbol fuchsin 4. Air
2. Alhokol 5. Spirtus
3. Methylene Blue
SOP PEMBUATAN SEDIAAN BTA
Cara Kerja :
1. Susun Sampel Berurutan sesuai dengan nomer identitas
2. Tulis identitas sputum, tanggal kedatangan, visual dan jenis pemeriksaan sampel pada buku
3. Tulis nomor identitas sampel pada Objek Glass
4. Ambil sputum sebesar biji kacang hijau (pilih yang purulen)dengan lidi yang telah dipipihkan
5. Oleskan pada Objek Glass, ulir-ulir dengan tusuk gigi 6. Ulir dengan bentuk oval ukuran 2x3, ulir hingga kering 7. Fiksasi dengan cara dilewatkan diatas api 2-3 detik
Ket: Buang lidi dan tusuk gigi bekas pada wadah limbah infeksius yang telah diberi plastik dan desinfektan
SOP PEWARNAAN ZIEHL NEELSEN
Cara Kerja :
1. Susun sediaan pada rak pewarnan, beri jarak 1 jari
2. Genangi sediaan dengan carbol fuchsin 1%, gunakan saringan setiap mengalirkan CF, genangan ingga menutupi seluruh sediaan
3. Panaskan dengan menggunakan sulut api hingga beruap, Diamkan selama 10 menit
4. Bilas dengan air mengalir, buang sisa air
5. Genangi dengan asam alkohol 3%, diamkan selama 3 menit (Dekolorisasi)
6. Bilas dengan air mengalir, buang sisa air, jika masih merah ulangi dekolorasi 1x lagi
7. Genangi dengan Methylene Blue 0,1%, diamkan selama 1 menit 8. Bilas dengan air mengalir
9. Keringkan pada rak pengering
BAB IV
DATA PENGAMATAN dan PERHITUNGAN
4.1 Laboratorium Kimia Kesehatan Lingkungan 4.1.1 Laboratorium Air Limbah
4.1.1.1 Pemeriksaan Minyak dan Lemak
No sampel = 1/55/B062/187/ALRSKL
Berat erlenmeyer kosong(A) = 122,1113 Berat erlenmeyer + sampel(B) = 122,1120
% Minyak lemak = (B - A) x 2000
=(122,1120-122,1113) x2000
= 1,4 % 4.1.1.2 Pemeriksaan Zat Padat Tersuspensi (TSS)
No sampel = -/74/B0049/206/ALKL Berat kertas saring kosong(A) = 1,1767 gram
Berat kertas saring + sampel(B) = 1,1868 gram %TSS = (B – A) x 10000
= (1,1868 – 1,1767) x 10000 = 101 %
4.1.1.3 Pemeriksaan Detergen metode Metilen Blue
No sampel = -/75/B0060/207/ALKL
Hasil = 1,0906
4.1.1.4 Pemeriksaan Oksigen Kimiawi (COD)
No sampel = -/71/B038/203/ALHKL 4.1.1.5 Pemeriksaan (PO4) metode Molibdat
No sampel = 1/76/B0067/208/ALKL
Hasil = 2,7006
4.1.1.6 Pemeriksaan Ammoniak (NH3) metode Spektrofotometer
No sampel = 1/76/B0067/208/ALKL
Hasil = 6,3456
4.1.2 Laboratorium Air Bersih, Air Minum, dan Air Kolam Renang 4.1.2.1 Pemeriksaan Nitrat (NO3) metode K-NaTatrat
No sampel = -/9/B0002/16/AMKL
= -/49/B0089/116/ABKL
Rumus = m × 0,2258
Tabel
No ABS Ppm
0 – 1 0,000 0,0000
0 – 2 0,000 0,0000
0 – m 0,000 0,0000
16 – 1 0,535 1,2615
16 – 2 0,535 1,2615
16 – m 0,535 1,2615
116 – 1 1,917 4,5181
116 – 2 1,917 4,5181
116 – m 1,917 4,5181
Tabel 4. 1 Pemeriksaan Nitrat
Hasil
Sampel 16 = 1,2615 × 0 2258 = 0,2850
Sampel 116 = 4,5181 × 0,2258 = 1,0202 4.1.2.2 Pemeriksaan Nitrit (NO2) metode Spektrofotometri
No sampel = -/6/B0054/24/AMKL
= -/21/B004/150/ABKL
Rumus = m × 0,3043
Recovery = mspike−widji
0.1 ×100 %
Tabel
No Abs Ppm
0 – 1 0,000 0,0000
0 – 2 0,000 0,0000
0 – m 0,000 0,0000
24 – 1 - 0,001 - 0,0012
24 – 2 - 0,001 - 0,0012
24 – m - 0,001 - 0,0012
150 – 1 0,001 0,0010
150 – 2 0,001 0,0010
150 – m 0,001 0,0010
Spike 24 – 1 0,066 0,1074
Spike 24 – 2 0,066 0,1078
Spike 24 – m 0,066 0,1076
Spike 150 – 1 0,066 0,1068
Spike 150 – 2 0,066 0,1066
Spike 150 – m 0,066 0,1067
Tabel 4. 2 Pemeriksaan Nitrit
Hasil
2. Sampel 24 = - 0,0012 × 0,3043
= 0,00
Recovery = o.1076– o . oo
0.1 ×100 %
= 107,6%
3. Sampel 150 = 0,0010 × 0,3043
= 0,0003
Recovery =
0.1067−0.0003
0.1 ×100 %
= 106,4%
4.1.2.3 Pemeriksaan Kesadahan Total metode Kompleksometri
No Sampel = -/49/B0089/116/ABKL
Rumus
Standarisasi = V1 × M1 = V2 × M2
Kadar =
1000
50 ×mL EDTA × M EDTA ×100,08
PMI =
1000
51 ×mL EDTA × M EDTA ×100,08
Spike =
1000
51 ×mL EDTA × M EDTA ×100,08
Recovery =
kadar spike – kadar sampel
PMI ×100 %
Tabel
Standar Sampel 116 PMI Spike
I II
V. awal 0,00mL 0,00mL 0,00mL 0,00mL 0,00mL
V. akhir 9,80mL 3,60mL 3,60mL 1,60mL 5,00mL
Rata-rata 3,60mL
Tabel 4. 3 Kesadahan Total
Hasil Standarisasi
10,00mL × 0,01 = 9,80 mL × M2
M2 = 10×0,01 9,80 = 0,0102 M
Sampel 116 =
1000
50 ×3,60mL×0,0102×100,08 = 73,50
PMI =
1000
51 ×1,60mL×0,0102×100,08 = 32,01
Spike =
1000
51 ×5,00mL×0,0102×100,08 = 100,4
Recovery =
100, 4–73, 50
32, 01 ×100 = 82, 91 %
4.1.2.4 Pemeriksaan Sisa Klor metode Ortotoluidin
No sampel = -/11/B0073/18/AMKL
= 1/56/B0067/123/ABKL
Hasil
Sampel 18 = 0,00
Sampel 123 = 0,05
4.1.2.5 Pemeriksaan Total Dissolved Solid (TDS)
No sampel = -/9/B0002/16/AMKL
= -/49/B0089/116/ABKL
Hasil
Sampel 16 = 63,15 mg/L
Sampel 116 = 87,85 mg/L
4.1.2.6 Pemeriksaan Zat Organik metode Permanganometri
No sampel = -/6/B0054/24/AMKL
= -/21/B054/150/ABKL
Rumus
Faktor = 10
mLlar standar × 0,01
Kadar =
1000
100 (10+mL KMnO)×faktor –(10×0,01)×31,6=¿
Tabel
No sampel Sampel 24 Sampel 150
V.awal 0,70mL 3,50mL
V. akhir 1,30mL 4,50mL
V. pemakaian 0,60mL 1,00mL
Tabel 4. 4 Pemeriksaan Zat Organik
Hasil
Faktor = 10
10, 1 × 0,01 = 0,0099
Sampel 24 =
1000
100 (10+0, 60mL)×0,0099–(10×0,01)×31,6=¿ 1,56
Sampel 150 =
1000
100 (10+1,00mL)×0,0099–(10×0,01)×31,6=¿ 2,81
4.1.2.7 Pemeriksaan pH dengan Alat pH Meter Metller Toledo
No sampel = -/6/B054/24/AMKL
= -/21/B004/150/ABKL
Hasil
Slope = 95,8%
pH 7,00 = 7,00
pH 4, 00 = 4,01
pH 9, 00 = 9,21
PMI = 6,955
Sampel 24 = 6,965
Sampel 150 = 6,99
4.1.2.8 Pemeriksaan Sulfat (SO4) metode Spektrofotometri
No Sampel = 1/41/B0052/108/ABKL
Rumus
Recovery =
ppm spike – ppm sampel
9, 9010 ×100 %
Tabel
No ABS Ppm
0 – 1 0,000 0,0000
0 – 2 0,000 0,0000
0 – m 0,000 0,0000
108 – 1 0,037 3,7581
108 – 2 0,038 3,8445
108 – m 0,038 3,8012
Spike 108 – 1 0,140 14,145
Spike 108 – 2 0,140 14,145
Spike 108 – m 0,140 14,145
Tabel 4. 5 Pemeriksaan Sulfat
Hasil
Recovery = 14, 15–3, 80
9, 9010 ×100 %
= 104,1%
4.1.2.9 Pemeriksaan Warna metode Spektrofotometri
No sampel = -/9/B0002/16/AMKL
= -/49/B0089/116/ABKL
Hasil
Sampel 16 = 9
Ssampel 116 = 5 4.1.3 Laboratorium Makanan dan Minuman
4.1.3.1 Pemeriksaan Kadar Karbohidrat
No sampel : -/24/B026/43/MMKL Berat sampel = 5,0161 gram
Volume sampel = 10 mL Volume blanko = 25,42 mL
Pemakaian thio = 17,95 mL (A), 18,19 mL (B)
N thio = 0,0990 N
A = (25,42−17,95)x0,0990
0,1 = 7,3953
Tabel :
Volume Hasil Selisih
7 20,2 2,8
8 33,6
Tabel 4. 6 Pemeriksaan % Karbohidrat A
20,2+(7,3953−7)x2,8
1 = 21,3068
1000
10 x 21,3068
5016,1 x 100% = 42,4768 B = (25,42−18,19)x0,0990
0,1 = 7,1577
Tabel :
Volume Hasil Selisih
7 20,2 2,8
8 33,6
Tabel 4. 7 Pemeriksaan % Karbohidrat B
20,2+(7,1577−7)x2,8
1 = 20,6416
1000
10 x 20,6414
5016,1 x 100% = 41,1507
Rata-rata = 42,4768+41,1507
2 = 41,8137
4.1.3.2 Pemeriksaan Kadar Air
No sampel = - / 17/ B002/ 36 MMKL
Berat sampel = 2,5400 g Berat cawan kosong = 51, 2195 g Berat cawan + sampel = 52, 7351 g Kadar Air = (51,2195+2,5400)−52,7351
2,5400 x 100 %
= 40,33 %
No sampel = - / 24/ B026/ 43 MMKL
Berat sampel = 2,5020 g Berat cawan kosong = 56,7702 g Berat cawan + sampel = 59,2463 g
Kadar Air = (56,7702+2,5020)−59,2463
2,5020 x 100 %
= 1,04 %
4.1.3.3 Pemeriksaan Kadar Lemak
No sampel = -/ 17/ B002/ 36 MMKL (A) Berat sampel = 5, 0160 g
Berat labu kosong = 102,0851 g Berat labu+ sampel = 103,2122 g Kadar lemak = 103,2122−102,0851
5,0160 x 100 % = 22,47%
No sampel = -/ 17/ B002/ 36 MMKL (B)
Berat sampel = 5,0078 g
Berat labu kosong = 102,4967 g Berat labu + sampel = 103,4136 g Kadar lemak = 103,4136−102,4967
5,0078 x 100 % = 18,31 %
Rata- rata = 22,47 %−18,31%
2 = 20,39 %
4.1.3.4 Pemeriksaan Kadar Formalin
No sampel = -/19/B049/38/MMKL
Berat kertas kosong = 0,7098 g Berat kertas + sampel = 20,9438 g Berat kertas + sisa = 0,9709 g
Berat sampel = 19,9729 g
No sampel 38 = negatif (tidak mengandung formalin)
4.1.3.5 Pemeriksaan Kadar Boraks
No sampel = -/19/B049/38/MMKL
Berat sampel = 20,8085 g
No sampel 38 = negatif(tidak mengandung boraks)
4.1.3.6 Pemeriksaan Arsen
No sampel = -/17/B002/36/MMKL
Berat sampel = 10,0034 g
No sampel 36 = negatif (tidak mengandung arsen)
4.2 Laboratorium Mikrobiologi
4.2.1 Laboratorium Air Makanan dan Minuman
4.2.1.1 Pemeriksaan Total Coliform, E-coli dan Colifecal (Quanti- Tray)
No.
Sampel Koliform E-Coli
KB KK Hasil KB KK Hasil
AB 354 0 0 <1 0 0 <1
AB 355 49 34 770,1 27 2 158,5
AB 356 49 46 1986,
3
0 0 6,3
AB 357 49 29 579,4 49 4 <1
AB 358 49 25 461,1 5 1 <1
AB 359 0 0 <1 0 0 <1
Tabel 4. 8 Pemeriksaan Total Coliform
4.2.1.2 Pemeriksaan Angka Lempeng Total
No. Sampel ALT
UDR 118 5
UDR 119 4
UDR 120 4
UDR 121 3
UDR 122 5
UDR 123 27
UDR 124 28
Tabel 4. 9 Pemeriksaan ALT
4.2.1.3 Penentuan Total Coliform Metode MPN Manual
No.
Sampel Laktosa BGLB MPN
cf ec
AM 361 240 X 101
AB 362 <1 <1
AL 363 3
3 3 3
3 3
3 3
3 3
2 3
333 332 1100 X 103
AL 364 302 002 3
3 0 3
2 3
0 3
0 3
2 3
23 Tabel 4. 10 Pemeriksaan MPN Manual
BAB V PEMBAHASAN
5.1 Pemerikaan Minyak dan Lemak Metode Gravimetri
Minyak dan lemak yang mencemari air, sering dimasukkan dalam kelompok padatan karena mengapung di atas permukaan air. Minyak dan lemak tidak dapat larut dalam air. Oleh karena itu perlu dilakukan penganalisaan limbah yang disebabkan karena adanya minyak dan lemak di dalam air, sebelum dibuang langsung ke lingkungan. Adapun tujuan dari penganalisaan tersebut untuk mengetahui kadar minyak dan lemak dalam air atau limbah cair, sehingga dapat diketahui layak atau tidak layaknya limbah tersebut dibuang langsung ke lingkungan.
5.2 Pemeriksaan Zat Padat Tersuspensi (TSS) Metode Gravimetri
Telah dilakukan analisa total padatan tersuspensi (TSS) dari air limbah domestik menggunakan metode gravimetri di Instalasi Pengolahan Air Limbah Laboratorium Kesehatan Provinsi Jawa Barat. Pemeriksaan kadar total padatan tersuspensi dilakukan dengan menggunakan metode gravimetri. Air limbah disaring dengan kertas saring yang telah ditimbang sehingga residu yang tertahan pada saringan dikeringkan sampai mencapai berat konstan pada suhu 103-105 ˚C dan kenaikan berat saringan itulah yang mewakili total padatan tersuspensi (TSS).
5.3 Pemeriksaan Detergen Metode Metilen Blue
Ekstraksi pelarut pada sampel limbah memiliki prinsipnya yaitu distribusi zat berdasarkan kelarutan terhadap pelarut yang ditambahkan. Tujuan dari perlakuan ini adalah agar detergen terikat dengan metilen blue dan terlarut dalam fase kloroform. Pada saat dilakukan pengocokan, akan timbul gelembung- gelembung yang merupakan emulsi sebab air limbah lebih kompleks kandungan materinya. Jika kadar detergen dalam sampel limbah tinggi, maka akan
menunjukkan warna biru pekat pada fase kloroform dan dibaca konsentrasinya menggunakan spektrofotometer.
5.4 Pemeriksaan Oksigen Kimiawi (COD)
Pemeriksaan Oksigen Kimiawi (COD) pada air limbah yaitu mereaksikan sampel air limbah dengan larutan kalium dikromat (K2Cr2O7) dalam suasana asam yang mendidih. kalium dikromat akan bekerja secara efektif dalam mengoksidasi bahan-bahan organik dalam suatu sampel perairan pada keadaan asam dan suhu yang tinggi.
5.5 Pemeriksaan Pospat (PO4) Metode Molibdat
Dalam larutan asam, orto-fosfat bereaksi dengan ammonium molibdat untuk membentuk asam molybdophosphoric, yang kemudian direduksi oleh Stannous Klorida (SnCl2) menjadi molibdenum berwarna biru yang intens. Warna biru yang dihasilkan berbanding lurus dengan konsentrasi fosfat. Reaksi menghasilkan larutan warna biru yang mengikuti hukum Lambert-Beer. Intensitas warna yang ada dalam sampel, yang kemudian ditentukan secara spektrofotometri.
5.6 Pemeriksaan Ammoniak (NH3) Metode Nessler
Sebelum diukur menggunakan alat spektrofotometer UV-Vis, sampel ditambahkan dengan reagen Nessler. Penambahan reagen Nessler digunakan untuk mereaksikan amonia atau bertujuan untuk identifikasi ammonia didalam suatu sampel, reagen nesler ini berwarna pucat dan akan berubah menjadi kuning coklat jika di dalam larutan mengandung ammonia. Setelah sampel positif mengandung ammonia ditunjukan dengan perubahan warna kuning coklat pada larutan, selanjutnya sampel dilakukan pengukuran kadar amonianya dengan menggunakan instrumen spektrofotometer UV-Vis.
5.7 Pemeriksaan pH Air Menggunakan pH meter
Alat pH meter yang akan digunakan dibilas terlebih dahulu kemudian dikeringkan menggunakan tisu. Setiap pengecekan harus dibilas dan dikeringkan.
Sebelum mengecek pH pada sampel, alat pH meter dikalibrasi terlebih dahulu.
Tujuan dilakukannya kalibrasi yaitu agar hasil yang diukur akurat. Selain itu juga
bertujuan untuk nilai kebenaran atas menyimpangan nilai konvensional dengan menunjukkan suatu instrumen ukur. Kalibrasi bermanfaat untuk menjaga alat ukur dengan bahan yang akan diukur tetap sesuai dengan spesifikasinya.
5.8 Pemeriksaan Nitrat (NO3) Metode K-Na Tatrat
Nitrat (NO3-) adalah ion-ion anorganik alami, yang merupakan bagian dari siklus nitrogen. Aktivitas mikroba di tanah atau air menguraikan sampah yang mengandung nitrogen organik pertama – pertama menjadi ammonia, kemudian dioksidasikan menjadi nitrat, maka nitrat adalah senyawa yang paling sering ditemukan di dalam air bawah tanah dan air yang terdapat di permukaan.
Tingginya kadar nitrat pada air dapat menjadi sumber racun, hal ini berbahaya bila kandungan nitrat ini dikomsumsi oleh anak bayi dan dapat menimbulkan keracunan akut. Nitrat yang masuk dalam saluran pencernaan akan langsung diubah menjadi nitrit yang kemudian berikatan dengan hemoglobin membentuk methemoglobin yang terbentuk dalam tubuh mereka akan mengakibatkan timbulnya sianosis pada bayi.
5.9 Pemeriksaan Nitrit (NO2-) Metode Spektrofotometri
Nitrit (NO2) merupakan bentuk peralihan antara ammonia dan nitrat (nitrifikasi) dam antara nitrat dan gas nitrogen (denitrifikasi) oleh karena itu, nitrit bersifat tidak stabil dengan keberadaan oksigen. Kandungan nitrit pada perairan alami mengandung nitrit sekitar 0,001 mg/l. kadar nitrit yang lebih dari 0,06 mg/l adalah bersifat toksik bagi organisme perairan. Keberadaan nitrit menggambarkan berlangsungnya proses biologis perombakan bahan organik yang memiliki kadar oksigen terlarut yang rendah. Nitrit juga bersifat racun karena dapat bereaksi dengan hemoglobin dalam darah, sehingga darah tidak dapat mengangkut oksigen.Nitrit dalam jumlah tertentu dapat membahayakan kesehatan karena dapat bereaksi dengan hemoglobin dalam darah, hingga darah tidak dapat mengangkat oksigen lagi. Selain itu, NO2 dapat menimbulkan penyakit kanker.
5.10 Pemeriksaan Kesadahan Total Metode Kompleksometri
Ion Ca2+ dan Mg2+ yang merupakan komponen kesadahan total dikomplekskan dengan titran etilendiami tetraasetat (EDTA) sehingga
menghasilkan warna ketika titik ekivalen titrasi tercapai. Titrasi kompleksometri ini selektif terhadap pH sehingga kemudian perlu ditambahkan juga indikator Eriochrome Black T (EBT) lalu kemudian dititrasi dengan larutan baku NA2- EDTA 0,1M. Titrasi dihentikan ketika titik akhir titrasi tercapai yang ditunjukkan dengan perubahan warna dari merah keuunguan menjadi biru. Titrasi dilakukan masing-masing sebanyak dua kali.
5.11 Pemeriksaan Sisa Klor Metode Ortotoluidin
Pengukuran sisa klor sangat dipengaruhi oleh parameter pH karena proses desinfeksi membutuhkan nilai pH yang sesuai dengan standar baku mutu yang telah ditetapkan. Apabila nilai pH tidak memenuhi persyaratan maka proses desinfeksi tidak akan berjalan efektif.
5.12 Pemeriksaan Total Dissolved Solid (TDS)
Konduktivitas listrik air secara langsung berhubungan degan konsentrasi padatan terlarut yang terionisasi dalam air. Ion dari konsentrasi padatan terlarut dalam air menciptakan kemampuan pada air untuk menghasilkan arus listrik yang dapat diukur menggunakan konduktivity meter. Elktrikal konduktivity ini adalah mengukur konduktivitas listrik bahan-bahan yang terkandun dalam air. Semakin banyak bahan (mineral logam maupun non logam) dalam air, maka hasil pengukuran akan semakin besar pula. Sebaliknya bila sangat sedikit bahan yang terkandung dalam air maka hasilnya mendekati nol, atau yang kita sebut dengan air murni.
5.13 Pemeriksaan Zat Organik Metode Permanganometri
Untuk menentukan kadar zat organik menggunakan metode titarsi permanganometri, dimulai dengan pembakuan/standarisasi KMnO4. Hal ini bertujuan untuk mengetahui konsentrasi KMnO4. Kemudian, dilakukan titrasii penentuan nilai permanganat.
Penentuan nilai permanganat berdasarkan prinsip titrasi permanganometri dalam suasana asam yaitu zat organik dapat dioksidasi dengan KMnO4 dalam suasana asam dengan pemanasan. Sisa KMnO4 direduksi dengan asam oksalat berlebih.
Kelebihan asam oksalat dititrasi kembali dengan KMnO4. Titik akhir titrasi ditandai dengan perubahan warna menjadi merah muda.
5.14 Pemeriksaan pH Meter Metller Toledo
Keasaman (pH) larutan dapat diukur kadarnya dengan menggunakan alat pH meter, dimana pH adalah tingkat keasaman atau kebasaan suatu benda yang diukur menggunakan skala pH antara 0 sampai 14. Instrumen pH meter adalah sebuah alat elektronik yang dugunakan untuk mengukur pH (kadar keasaman atau alakalinitas). Penggunaan alat tersebut dengan cara mencelupkan elektroda ke dalam sampel yag akan diuji. Elelktroda suatu pH meter terlebih dulu dibersihkan dengan cara dibilas dengan air lalu dilap menggunakan tissue sebelum dimasukkan ke dalam sampel. pH meter harus dikalibrasi sebelum dan sesudah dilakukannya pengukuran . untuk penggunaan normal kalibrasi harus dilakukan pada awal pemakaian.
5.15 Pemeriksaan Sulfat (SO42-) Metode Spektrofotometri
Percobaan ini dilakukan dengan cara memasukan 10 mL sampel ke dalam dua labu Erlenmeyer. Larutan Kalium Dikromat (K2Cr2O7) berfungsi untuk kalibrasi absorbansi spektrofotometer. Prinsipnya adalah ion sulfat akan diendapkan dalam suasana asam dengan BaCl2 membentuk kristal barium sulfat (BaSO4). Spektrofotometer akan mengukur absorben dari suupensi BaSO4
(kekeruhan yang ditimbulkan akibat terbentuknya suspensi BaSO4) pada panjang gelombang 420nm. Tambahkan masing-masing erlenmeyer dengan 0,5 gram BaCl2 pastikan tidak ada BaCl2 yang menempel pada dinding erlenmeyer agar semua BaCl2 terlarut sempurna. Aduk larutan tersebut dengan magnetic stirer selama satu menit dengan kecepatan 150rpm. Pengadukan ini bertujuan untuk menghomogenkan larutan. Larutan tersebut lalu dimasukkan ke dalam kuvet, sebelum dimaukkan ke dalam spektrofotometer bersihkan dahulu bagian luar kuvet menggunakan tissue agar pengukuran berjalan sesuai yang diinginkan, karena spektrofotometer bekerja dengan mengukur cahaya yang dapat menembus kuvet.
5.16 Pemeriksaan Warna Metode Spektrofotometri
Spektrofotometri merupakan salah satu metode dalam kimia analisis yang digunakan untuk menentukan komposisi suatu sampel baik secara kuantitatif maupun kualitaif yang didasarkan pada interaksi antara materi dengan cahaya.
Menentukan pemeriksaan warna dengan cara Blanko dimasukkan ke dalam kuvet lalu bersihkan dan keringkan kemudian baca pada alat. Setelah alat barulah sampel yang dimasukkan sama dengan blanko. Setiap kali pengukuran pastikan untuk mendahulukan blanko agar pengukuran berjalan sesuai keinginan.
5.17 Kadar Karbohidrat
Dalam pengujian karbohidrat pH larutan harus diperhatikan dengan baik, karena pH yang terlalu rendah (terlalu asam) akan menyebabkan hasil titrasi menjadi lebih tinggi dari sebenarnya. Sedangkan apabila pH terlalu tinggi (terlalu basa), maka hasil titrasi akan menjadi lebih rendah daripada sebenarnya. Pada saat titrasi sampel ditambahkan H2SO4 dan KI kemudian larutan ini akan timbul buih dan warna larutan menjadi coklat. Larutan tersebut kemudian di titrasi dengan menggunakan Larutan Natrium thio sulfat (Na2S2O3) titrasi cepat dilakukan untuk menghindari penguapan KI. Indikator yang digunakan adalah amilum.
Penambahan indikator amilum dilakukan setelah campuran mendekati titik akhir, hal ini dilakukan karena apabila dilakukan pada awal titrasi maka amilum dapat membungkus iod dan mengakibatkan warna titik akhir menjadi tidak terlihat tajam. Maka berdasarkan praktikum dan perhitungan, kadar karbohidrat dalam sampel adalah 41,81 % .
5.18 Kadar Air
Prinsip analisis kadar air dengan metode thermogravimetri adalah menguapkan air dalam sampel dengan menggunakan energi panas kemudian ditimbang. Dipanaskan dengan menggunakan oven pada suhu tertentu (100- 105oC). hal pertama yang dilakukan yaitu menimbang cawan hingga konstan. Hal ini bertujuan agar cawan terbebas dari zat pengotor dan mencegah adanya tambahan air pada cawan yang mengakibatkan pengukuran kadar air menjadi tidak akurat. Pendinginan cawan menggunakan desikator karena desikator
memiliki RH konstan. Tujuan pendinginan cawan adalah agar suhu wadah sampel menurun sehingga pada saat ditimbang suhunya stabil. Pemindahan cawan harus menggunakan krustang yang bersih dan tidak dengan tangan agar tidak mempengaruhi berat cawan konstan. Pengovenan dan Pendinginan dilakukan berulang hingga beratnya konstan. Berat konstan berarti bahwa perbedaan berat antar penimbangan tidak melebihi 0,0002 gram.
5.19 Kadar Lemak
Analisis kadar lemak pada praktikum kali ini menggunakan metode soxhlet.
Langkah pertama yang dilakukan adalah mengoven Erlenmeyer hingga konstan.
Langkah selanjutnya adalah menimbang 5 gram sampel yang sudah dihaluskan.
Proses penghalusan sampel akan menyebabkan proses ekstraksi menjadi semakin mudah dan dapat berlangsung optimal. Setelah itu sampel dibungkus kertas saring kemudian dioven selama 1 jam. Kemudian sampel ditambahkan pelarut petroleum benzene, yang berfungsi untuk mengekstraksi (melarutkan) lemak pada sampel karena lemak hanya dapat larut pada pelarut organik non polar. Setelah itu dilakukan proses ekstraksi lemak selama 6 jam. Kemudian lemak dioven dan dimasukkan kedalam desikator dan ditimbang beratnya hingga konstan.
Berdasarkan hasil perhitungan, sampel memiliki kadar sebesar 20,39 %.
5.20 Kadar Formalin
Pada praktikum kali ini yaitu uji kualitatif formalin menggunakan asam kromatropat. Adanya formalin yaitu ditandai dengan adanya perubahan pada sampel yang sudah ditambahkan asam kromatropat sehingga menyebabkan perubahan warna menjadi ungu muda terang sampai ungu tua. Apabila tidak terjadi perubahan warna pada sampel setelah ditambahkan asam kromatropat maka hasilnya negatif. Hasil yang diperoleh setelah dilakukan uji formalin yaitu sampel negatif formalin.
5.21 Kadar Boraks
Pada metode ini tahap awal sampel dibasahi dengan Na2CO3 tujuannya untuk menguraikan sampel agar boraks yang terserap dapat dipisahkan, kemudian proses pengabuan dalam tanur pada suhu 600oC selama 30 menit. Proses
pengabuan ini bertujuan untuk menghilangkan zat zat organik dalam sampel, kemudian hasil pengabuan ditambah HCl yang berfungsi untuk mengendapkan asam boraks dan menghasilkan warna hitam keruh, kemudian dilakukan penyaringan dan menghasilkan warna coklat jenih, kemudian hasil penyaringan di masukkan kertas kurkumin untuk mengetahui apakah sampel ini positif atau tidak.
Sampel yang positif akan berubah warna menjadi merah bata, dan sampel yang negatif tidak terdapat perubahan warna. Pada praktikum kali ini sampel yang kita uji hasilnya adalah negatif.
5.22 Pemeriksaan Arsen
Arsen merupakan logam anorganik berwarna abu-abu, dengan kelarutan dalam air sangat rendah. Arsen banyak digunakan sebagai intektisida, racun semut, cat, kertas tembok, keramik dan gelas. Arsen pada konsentrasi rendah terdapat pada tanah, air, udara, dan makanan. Hasil praktikum menunjukkan sampel tidak mengandung arsen. Sampel yang mengandung arsen akan berwarna hitam pada kapas, dan sampel yang negatif tidak akan berubah warna. Bahaya arsen pada makanan adalah akan mengganggu sistem syaraf, kerusakan otak, dan kelumpuhan.
5.23 Most Probable Number (MPN) dengan Quanty-Tray
Uji MPN kualitas air bersih di Laboratorium Kesehatan Prov. Jawa Barat ini dilakukan dengan modern menggunakan MPN Quanti-Tray dan reagen Colilert- 18 yang digunakan reagen utama agar uji bakteriologis Coliform dan E. coli dapat diamati. Reagen ini memiliki fungsi utama untuk pengamatan secara kualitatif melalui enzim pada Coliform dan E. coli. Enzim yang digunakan pada Coliform adalah enzim -galaktosida sesedangkan pada E. coli adalah -glucuronidase.
- glucuronidasepada Coliform dan E. coli dapat diamati melalui aktivitas kemampuannya dalam mengubah laktosa menjadi asam atau gas. Hampir 97%
dari E. coli dapat memproduksi -D- glucuronidase (GUR) dimana kebanyakan jenis Coliform lain tidak dapat memproduksinya. Indikator yang dihasilkan dari Coliform adalah warna kuning sedangkan untuk E.colia dalah pendaran atau fluoresensi pada Coliform (warna kuning) ketika disinari lampu ultraviolet 365
nm. Hal ini dikarenakan enzim -galaktosidasepada Coliform akan bereaksi dengan reagen Colilert-18 yang mengandung -D- galaktopyranositdan o- nitrofenil yang menyebabkan putusnya ikatan o-nitrofenil menjadi o-nitrofenol yang menjadikan warna kuning.
Menurut Menteri Kesehatan, Peraturan Menteri Kesehatan Nomor:
416/MEN.KES/PER/ IX/1990 Tentang Syarat-syarat dan Pengawasan Kualitas Air dijelaskan bahwa syarat air untuk air bersih adalah memenuhi parameter mikrobiologi yaitu kadar maksimum yang diperbolehkan adalah total Coliform (MPN) adalah 0/100 ml dengan keterangan bukan air pipaan, sedangkan Coliform tinja belum diperiksa adalah 0/100 ml dengan keterangan bukan air pipaan. Syarat air untuk air kolam renang atau pemandian adalah memenuhi parameter mikrobiologi yaitu kadar maksimum yang diperbolehkan adalah Coliform total adalah 0/100 ml, sedangkan jumlah kuman adalah 200/100 ml.
5.24 Angka Lempeng Total (ALT)
Pemeriksaan Angka Lempeng Total yaitu menghitung jumlah koloni yang tumbuh pada media dari pengenceran sampel. Pengenceran bertujuan untuk mengurangi jumlah populasi mikroorganisme. Tanpa dilakukannya pengenceran, koloni yang tumbuh akan menumpuk dan menyulitkan dalam perhitungan jumlah koloni. Perhitungan angka lempeng total mikroorganisme dipilih dari cawan petri yang jumlah koloninya antara 30-300. Hal ini dikarenakan media agar dengan jumlah koloni tinggi (> 300 koloni) tidak sah dihitung sehingga kemungkinan besar kesalahan per-hitungan sangat besar sedangkan jumlah untuk koloni sedikit (< 30 koloni) tidak sah dihitung secara statistik.
Pada penentuan angka lempeng total ini digunakan metode agar tuang (pour plate), jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada media agar dihitung setelah diinkubasi pada suhu 370C selama 24 jam. Setelah inkubasi 4 x 24 jam, perhitungan koloni dilakukan. Dianggap bahwa tiap koloni berasal dari sebuah sel, maka jumlah koloni dapat diperhitungkan sebagai jumlah sel mewakili dan terdapat di dalam bahan yang dianalisis.