Hasil Penelitian Penelitian yang telah peneliti lakukan termasuk pengembangan keilmuan yaitu pengembangan pemanfaatan daun jarong sebagai antidiabetes dan
antihiperlipidemia pada tikus resistensi insulin yang perlu riset lanjutan untuk mendapatkan dosis efektif terendah lalu diharapkan dapat dibuat formula produk jamu yang dapat digunakan dengan mudah oleh masyarakat
Rencana Tindak Lanjut
Tindak lanjut yang akan dilakukan oleh peneliti setelah penelitian ini selesai adalah studi lanjut dengan melakukan fraksinasi pada ekstrak daun jarong lalu dibuat formulasi produk jamu yang dapat diterima oleh masyarakat
33
DAFTAR PUSTAKA
Aba, P. E., & Asuzu, I. U. (2018). Mechanisms of actions of some bioactive anti-diabetic principles from phytochemicals of medicinal plants: A review. Indian Journal of Natural Products and Resources, 9(2), 85–96.
Adam, J. M. (2009). Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam Jilid III (5th ed.). Balai Penerbit FKUI.
Agustina, S., Ruslan, R., & Wiraningtyas, A. (2016). Skrining Fitokimia Tanaman Obat Di Kabupaten Bima. Cakra Kimia (Indonesian E-Journal of Applied Chemistry), 4(1), 71–76.
Ali, A., Amalia, L., & Suptijah, P. (2015). Pemberian Kitosan dan Pengaruhnya Terhadap Berat Badan dan Kadar Trigliserida Darah Tikus Sprague-Dawley yang Diberi Pakan Asam Lemak Trans. J. Gizi Pangan, 10(1), 9–16.
Arsana, P. M., Rosandi, R., Manaf, A., Budhiarta, A., Permana, H., Sucipta, K. W., Lindarto, D., Adi, S., Pramono, B., Harbuwono, D. S., Shahab, A., Sugiarto, Karimi, J., Purnomo, L. B., Yuwono, A., & Suhartono, T. (2015). Panduan Pengelolaan Dislipidemia di Indonesia. Pb.
Perkeni, 4. https://doi.org/10.1002/bit.22430
Artha, C., Mustika, A., & Sulistyawati, S. W. (2017). Pengaruh Ekstrak Daun Singawalang Terhadap Kadar LDL Tikus Putih Jantan Hiperkolesterolemia. EJournal Kedokteran Indonesia, 5(2), 105–109. https://doi.org/10.23886/ejki.5.7151.
Atmojo, R. D., Arifian, H., Ibrahim, A., & Rusli, R. (2016). Aktivitas Penurunan Gula Darah Kombinasi Ekstrak Daun Kumis Kucing (Orthosiphon aristatus) dan Ekstrak Daun Insulin (Tithonia diversivolia) terhadap MENCIT (Mus musculus). Prosiding Seminar Nasional Kefarmasian Ke-4, 53(9), 275–281. https://doi.org/10.1017/CBO9781107415324.004
Ayunda, R. (2014). Uji aktivitas jamu gendong kunyit asam ((Curcuma domestica Val.;
Tamarindus indica L.) sebagai Antidiabetes pada Tikus yang Diinduksi Streptozotocin.
Universitas Tanjungpura Pontianak.
Azhari, D., Yuliet, & Khaerati, K. (2016). Uji Aktivitas Serbuk Jamur Tiram Putih ( Pleurotus ostreatus ( Jacq .) P . Kumm ) Terhadap Kadar Glukosa Darah pada Model Hewan Hiperkolesterolemia-Diabetes. Galenika Journal of Pharmacy, 2(2), 96–102.
Chen, X., Liang, R., Hao, T., Zhang, X., & Lian, Y. (2016). Research progress on hypoglycemic
34
active components in natural products. Europian Journal of Biomedical Research, 21–26.
Dalimartha, S. (2008). Atlas Tumbuhan Obat Indonesia (Jilid 5). Pustaka Bunda.
Dalimartha, S. (2011). 36 Resep Tumbuhan Obat Untuk Menurunkan Kolesterol (Edisi Revi).
Penebar Swadaya.
Depkes. (2008). Farmakope Herbal Indonesia (1st ed.). Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Depkes, R. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan (Cetakan 1). Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan.
Dorland. (2012). Kamus Saku Kedokteran. In Egc. https://doi.org/10.3233/WOR-2012-0462-2341 Eseyin, O., Ebong, P., Eyong, E., Awofisayo, O., & Agboke, A. (2010). Effect of Telfairia occidentalis on oral glucose tolerance in rats. African Journal of Pharmacy and Pharmacology, 4(6)(5), 368–372. https://doi.org/10.4158/EP09373.OR
Firdaus, Rimbawan, Marliyanti, S, A., & Roosita, K. (2016). Model Tikus Diabetes yang Diinduksi Streptozotocin- Sukrosa untuk Pendekatan Penelitian Diabetes Gestasional. Jurnal MKMI, 12(1), 29–34.
Gutierrez, R. M. P. (2013). Evaluation of the Hypoglycemic and Hypolipidemic Effect of Triterpenoids from Prosthechea michuacana in Streptozotocin-induces Type 2 Diabetic Mice.
Laboratoria de Investigacion de Product Naturales, Escuale Superior de Ingenieria Qufmica e Industrias Extractive IPN, MEXICO, 4(3), 170–179.
Hanani, E. (2015). Analisis Fitokimia. In Egc. Buku Kedokteran EGC.
Ikalinus, R., Widyastuti, S., & Setiasih, N. L. E. (2015). Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Kulit Batang Kelor (Moringa oleifera). Indonesia Medicus Veterinus, 4 (1).
International Diabetes Federation. (2017). IDF Diabetes Atlas. International Diabetes Federation.
https://doi.org/http://dx.doi. org/10.1016/S0140-6736(16)31679-8.
Jasmine, R., Ganesh K, A., & Rajaram, R. (2018). Probing the mechanism of the anti-diabetic potential of a terpenoid from elephantopus scaber L., an Indian ethnomedicinal plant in STZ diabetic rats- in vivo and in silico analysis. Indian Journal of Biochemistry and Biophysics, 55(6), 384–388.
35
Jia, Y., Bhuiyan, M. J. H., Jun, H. J., Lee, J. H., Hoang, M. H., Lee, H. J., Kim, N., Lee, D., Hwang, K. Y., Hwang, B. Y., Choi, D. W., & Lee, S. J. (2011). Ursolic acid is a PPAR-α agonist that regulates hepatic lipid metabolism. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 5876–5880.
https://doi.org/10.1016/j.bmcl.2011.07.095
Kamalakkannan, K., & Balakrishnan, V. (2015). Studies on the effect of antidiabetic activity of Achyranthes aspera L. on alloxan induced wistar rats. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 7(9), 61–64.
Kapoor, L. D. (2000). Ayurvedic Medicinal Plants. CRC Press LLC.
https://doi.org/10.1201/9781351070997-2
Katzung, B. G., & Trevor, A. J. (2015). Basic & Clinical Pharmacology. In Basic and Clinical Pharmacology (13th ed.). Mc Graw-Hill Education.
Kawada, T., Goto, T., Takahashi, N., & Hirai, S. (2010). Various Terpenoids derived from herbal and dietary plants function as PPAR modulators and regulate carbohydrate and lipid metabolism. PPAR Research, 1–9. https://doi.org/10.1155/2010/483958
Kemenkes RI. (2014). Pedoman Gizi Seimbang Kementerian Kesehatan RI 2014. Direktorat Jenderal Bina Gizi Dan Kia.
Kendran, A. A. S., Gelgel, K. T. P., Pertiwi, N. W. L., Anthara, M. S., Dharmayuda, A. A. G. O.,
& Anggreni, L. D. (2013). Toksisitas Ekstrak Daun Sirih Merah pada Tikus Putih Penderita Diabetes Melitus (TOXICITY OF RED BETEL EXTRACT IN DIABETIC WHITE RAT ).
Jurnal Veteriner, 14(4), 527–533.
Khan, N., Akhtar, M. S., Khan, B. A., De Andrade Braga, V., & Reich, A. (2015). Antiobesity, hypolipidemic, antioxidant and hepatoprotective effects of Achyranthes aspera seed saponins in high cholesterol fed albino rats. Archives of Medical Science, 11(6), 1261–1271.
https://doi.org/10.5114/aoms.2015.56353
Krishnakumari, S., & Priya, K. (2006). Hypolipidemic Efficacy of Achyranthes aspera on Lipid Profile in Sesame oil fed Rats. Ancient Science of Life, 25(3–4), 49–56.
Kumar, A., Gnananath, K., Gande, S., Goud, E., Rajesh, P., & Nagarjuna, S. (2011). Anti-diabetic Activity of Ethanolic Extract of Achyranthes aspera Leaves in Streptozotocin induced diabetic rats. Journal of Pharmacy Research, 4(June), 3124–3125.
Kumar, V., Cotran, R. S., & Robbins, S. L. (2013). Buku Ajar Patologi Robbins. In Patologi.
36
Lakshmi, V., Agarwal, S., Mahdi, A., & Khanna, A. (2012). Steroidal saponin from Chlorophytum nimonii (Grah) with lipid-lowering and antioxidant activity. Chronicles of Young Scientists, 3(3), 227. https://doi.org/10.4103/2229-5186.99592
Lavle, N., Shukla, P., & Panchal, A. (2016). Role of Flavonoids and Saponins in the Treatment of Diabetes Mellitus. Journal of Pharmaceutical Science Bioscientific Research, 6(64), 535–
541.
Mahley, R. W., & Bersot, T. P. (2003). Terapi Obat untuk Hiperkolesterolemia dan Dislipidemia.
In Dasar Farmakologi Terapi (10th ed., pp. 943–966). egc.
Mais, M., Simbala, H. E. I., & Koneria, R. (2018). Pemanfaatan Tumbuhan Obat Oleh Etnis Sahu dan Loloda. Jurnal Mipa Unsrat Online, 7(1), 8–11.
Murray, R. K., & Davis, J. C. (2015). Harper’s Illustrated Biochemistry. In Molecular Physiology (30th ed.). https://doi.org/10.1016/0307-4412(88)90029-5
O., Nduka, F., N., Ogugua, V., O., Nwigwe, J., B., Nwaso, C., & B., Abdulrasheed, M. (2019).
Effect of Aqueous Leaf Extract of Eriosema psoraleoides on Antihyperglycemic and Hypolipidemic Potentials in Alloxan-Induced Diabetic Rats. Asian Journal of Research in Biochemistry, 4(1), 1–8. https://doi.org/10.9734/ajrb/2019/v4i130061
Pardede, A., Ratnawati, D., & Martono, A. H. P. (2013). Ekstraksi dan Karakterisasi Pektin dari Kulit Kemiri (Alleurites mollucana Wild). Media Sains, 5.
Prameswari, O. M., & Widjanarko, S. B. (2014). The Effect of Water Extract of Pandan Wangi Leaf to Decrease Blood Glucose Levels and Pancreas Histopathology at Diabetes Mellitus Rats. Jurnal Pangan Dan Agroindustri, 2(2), 16–27.
Purwandari, H. (2014). Hubungan Obesitas Dengan Kadar Gula Darah pada Karyawan Di RS Tingkat IV Madiun. Efektor, 1(25), 65–72.
Ram, P., Rastogi, B. N., & Mehrotra. (2004). Compendium of Indian Medicinal plants. Central Drug Research Institute, Lucknow and National Institute of Science Communication and Information Resources, 7–11.
Ramadani, F. H., Intannia, D., & Ni, M. (2016). Profil Penurunan Kadar Glukosa Darah Ekstrak Air Rambut Jagung ( Zea Mays L .) Tua dan Muda Pada Mencit Jantan Galur Balb-C. 3(1), 37–44.
37
Sarvesh, C. N., & Fernandes, J. (2017). Evaluation of antihyperlipidemic activity of leaves of Achyranthes aspera Linn. Using hyperlipidemic rats. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, 10(4), 211–215. https://doi.org/10.22159/ajpcr.2017.v10i4.16576
Sendy, A. M., & Widodo, A. (2019). Pengaruh Ekstrak Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa Blimbi L.)Terhadap Kadar Kolesterol Ldl Serum Tikus Wistar (Rattus Norvegicus) Hiperkolesterolemia. Jurnal Kedokteran Diponegoro, 8(2), 642–652.
Setyowati, W. A. E., Ariani, S. R. D. A., Mulyani, B., & Rahmawati, C. P. (2014). Skrining Fitokimia dan Identifikasi Komponen Utama Ekstrak Metanol Kulit Durian ( Durio zibethinus Murr .) Varietas Petruk. Seminar Nasional Kimia Dan Pendidikan Kimia VI.
Siadi, K. (2012). Ekstrak Bungkil Biji Jarak Pagar ?Jatropha Curcas? Sebagai Biopestisida Yang Efektif Dengan Penambahan Larutan Nacl. Jurnal MIPA, 35(1), 77–83.
Srivastav, S., Singh, P., Jha, K. K., Mishra, G., Srivastava, S., Karchuli, M. S., & Khosa, R. L.
(2011). Diuretic activity of whole plant extract of Achyranthes aspera Linn. European Journal of Experimental Biology, 1(2), 97–102.
Sunaryo. (2014). Kombinasi Ekstrak Etanol Rimpang Zingiber Officinale Roscoe Dengan Zn Sebagai Hipolipidemia pada Mencit Diabetik Diet Tinggi Kolesterol. Media Farmasi, 11(1), 62–72. https://doi.org/10.12928/mf.v11i1.1398
Susilawati. (2015). Ragam Asam-Asam Lemak Daging Kambing dan Sapi Segar Serta Olahannya pada Lokasi Karkas yang Berbeda. Prosiding Seminar Agroindustri Dan Lokakarya Nasional, September, 100–107.
Syah, M. I., Suwendar, & Mulqie, L. (2015). Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Daun Mangga Arumanis (Mangifera Indica L. “Arumanis”) pada Mencit Swiss Webster Jantan dengan Metode Tes Toleransi Glukosa Oral (Ttgo). Prosiding Penelitian Sivitas Akademika UNISBA, 297–303.
Tandi, J., Claresta, J. A., Ayu, G., & Irwan, I. (2018). Effect Of Ethanol Extract Of Kenikir (Cosmos caudatus Kunth.) Leaves in Blood Glucose, Cholesterol and Histopathology Pancreas of Male White Rats (Rattus norvegicus). Pharmaceutical Science and Technology, 1(1), 70–78.
Tatto. (2017). Efek Antihiperkolesterol dan Antihiperhgikemik Ekstrak Daun Ceremai (Phyllantus acidus (L.) Skeels) pada Tikus Putih Jantan (Rattus norvegicus) Hiperkolesterol Diabetes.
38
Galenika Journal of Pharmacy, 3(2), 157–164.
https://doi.org/10.22487/j24428744.2017.v3.i2.8769
Tatto, D., Dewi, N. P., & Tibe, F. (2017). Efek Antihiperkolesterol dan Antihiperhgikemik Ekstrak Daun Ceremai ( Phyllantus acidus ( L .) Skeels ) padaTikus Putih Jantan ( Rattus norvegicus ) Hiperkolesterol Diabetes ( Antihypercholesterol and Antihyperglicemic Effect of Ceremai Leaf ( Phyllantus. 3(2), 157–164. https://doi.org/10.22487/j24428744.2017.v3.i2.8769
Tiwari, P., Kumar, B., Mandeep, K., Kaur, G., & Kaur, H. (2011). Phytochemical screening and Extraction: A Review. Internationale Pharmaceutica Sciencia, 1(1), 98–106.
Togubu, S., Momuat, L. I., Paendong, J. E., & Salma, N. (2013). Aktivitas Antihiperglikemik dari Ekstrak Etanol dan Heksana Tumbuhan Suruhan (Peperomia pellucida [L.] Kunth) pada Tikus Wistar (Rattus norvegicus L.) yang Hiperglikemik. Jurnal MIPA, 2(2), 109.
https://doi.org/10.35799/jm.2.2.2013.2999
Wardani, D. (2015). Aktivitas Antihipertrigliserida dan Antihiperglikemik Ekstrak Daun Kelor (Moringa Oleifera Lam.) Pada Tikus Hipertrigliserida Diabetes. Media Farmasi, 12(2), 199–
212.
Wardani, E., & Pahriyani, A. (2018). Aktivitas Yoghurt Kacang Komak ( Lablab Purpureus ( L .) Sweet ) Sebagai Antihiperglikemia. Jurnal Jamu Indonesia, 3, 18–25.
Wulandari, W. (2016). Uji Efektivitas Antihiperglikemia Kombinasi Jus Pare (Momordica charantia L) dan Jus Tomat (Solanum lycopersicum L) pada Tikus Wistar Jantan dengan Metode Toleransi Glukosa. Pharmaceutical Sciences and Research, 3(3), 145–154.
https://doi.org/10.7454/psr.v3i3.3269
Zulkarnain. (2013). Perubahan kadar glukosa darah puasa pada tikus Sprague Dawley yang diinduksi streptozotocin dosis rendah. Jurnal Kedokteran Syiah Kuala, 13(2), 71–76.
39 LAMPIRAN Lampiran 1. Bukti Submit
40 Lampiran 2. Artikel Ilmiah
AKTIVITAS Achyranthes Aspera Linn. TERHADAP PENURUNAN KADAR KOLESTEROL DAN GLUKOSA DARAH PADA TIKUS RESISTENSI
INSULIN
ACTIVITY OF Achyranthes Aspera Linn. ON REDUCTION OF CHOLESTEROL AND BLOOD GLUCOSE LEVELS IN INSULIN RESISTANCE RATS
Daniek Viviandhari1 *, Maharadingga2, Farah Zahria1, Putri Hardiyanti1
1UnitFarmakologi, Fakultas Farmasi dan Sains, Universitas Muhammadiyah Prof. Dr. HAMKA, Jakarta, Indonesia
2Unit Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi dan Sains, Universitas Muhammadiyah Prof. Dr. HAMKA, Jalan Delima II/IV, Jakarta Timur, Indonesia
*E-mail:[email protected]
Diterima: (kosongkan) Direvisi: (kosongkan) Disetujui: (kosongkan) Abstrak
Resistensi insulin adalah keadaan dimana terjadi ketidakmampuan insulin berikatan dengan reseptor. Resistensi insulin merupakan faktor terbanyak pada pasien diabetes melitus tipe 2. Penggunan tanaman sebagai obat tradisional mempunyai manfaat yang lebih besar, dapat ditekan efek sampingnya, dan juga harga yang terjangkau. Salah satu tanaman yang dapat digunakan adalah jarong. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efek ekstrak etanol 70%
daun jarong dalam menurunkan kadar kolesterol total, trigliserida, glukosa darah, dan TTGO pada tikus resistensi insulin. Pengujian dilakukan dengan membagi 28 ekor tikus dalam 7 kelompok, yaitu kontrol normal tidak diinduksi, kelompok negatif diberikan Na-CMC 0,5%, kelompok positif 1 (fenofibrat), kelompok positif 2 (metformin HCl), kelompok ekstrak dosis 1 (250 mg/kgBB), dosis 2 (500 mg/kgBB), dan dosis 3 (750 mg/kgBB) selama 14 hari.
Pengambilan darah dilakukan melalui sinus orbitalis tikus lalu diukur kadar kolesterol total, trigliserida, glukosa darah, dan TTGO dengan menggunakan spektrofotometer klinikal. Data dianalisis menggunakan one way ANOVA dan dilanjutkan dengan uji Tukey. Hasil penelitian menunjukkan dosis 750 mg/kgBB dapat menurunkan kadar kolesterol total, trigliserida, glukosa darah, dan TTGO pada tikus resistensi insulin.
Kata kunci: Achyranthes aspera Linn.; kolesterol; glukosa darah; resistensi insulin
Abstract
Insulin resistance is a condition in which the insulin is unable to bind to the receptors. Insulin resistance is the most common factor in type 2 diabetes mellitus patients. Use of plants as traditional medicine has greater benefits, can be suppressed side effects, and also affordable prices. One of the plants that can be used is jarong. The purpose of this study was to determine the effect of 70% ethanol extract of jarong leaves in reducing levels of total cholesterol, triglycerides, blood glucose, and OGTT in insulin resistance rats. The test was carried out by dividing 28 rats into 7 groups, i.e. normal control (not induced), negative group (given with Na-CMC 0.5%), positive group 1 (fenofibrate), positive group 2 (metformin HCl), extract group dose 1 (250 mg / kgBW), dose 2 (500 mg / kgBW), and dose 3 (750 mg / kgBW) for 14 days. Blood sampling was performed via rat sinus orbitalis and then total cholesterol, triglyceride, blood glucose, and OGTT levels were measured using a clinical spectrophotometer. Data were analyzed using one way ANOVA and continued with the Tukey test. The results showed a dose of 750 mg / kgBW can reduce total cholesterol, triglycerides, blood glucose, and OGTT in insulin resistance mice.
Keywords: Achyranthes aspera Linn .; cholesterols; blood glucose; insulin resistance
41 PENDAHULUAN
Prevalensi penyakit diabetes melitus (DM) tipe 2, penyakit jantung, dan hipertensi mengalami peningkatan yang bermakna dari tahun 2013 ke tahun 2018 (1). Penyakit DM tipe 2, hipertensi, dan hiperlipidemia merupakan faktor risiko penyakit kardiovaskuler. Untuk pencegahan penyakit kardiovaskuler, perlu kesadaran tiap individu. Sebuah penelitian pada populasi Asia menunjukkan bahwa potensi ketidaksadaran risiko penyakit kardiovaskuler pada pasien DM tipe 2, hipertensi, dan hiperlipidemia adalah sebesar 30,7%, 43,1% and 40,9%. Rendahnya kesadaran pasien DM tipe 2 dan hiperlipidemia berkaitan dengan rendahnya kontrol penyakit sehingga menyebabkan risiko morbiditas dan mortalitas yang tinggi (2).
Hiperlipidemia/dislipidemia merupakan suatu keadaan yang menyatakan peningkatan kadar kolesterol total (>200 mg/dl) dan trigliserida (>150 mg/dl) serum (3). Salah satu faktor penyebab terjadinya hiperlipidemia adalah asupan makan dengan pola diet tinggi lemak (4).
Dislipidemia dapat menyebabkan penyakit DM tipe 2, hal ini terjadi akibat dari peningkatan kadar lemak bebas di dalam darah sehingga terjadi oksidasi lemak yang mengakibatkan penggunaan glukosa dalam otot terhambat sehingga glukosa dalam darah akan meningkat (5). Sebaliknya, penyakit DM tipe 2 dapat berefek pada gangguan metabolisme lemak sehingga umumnya penderita DM tipe 2 juga mengalami dislipidemia, oleh karena itu kedua penyakit ini sangat berkaitan.
DM merupakan gangguan metabolik yang dikarakterisasi dengan tingginya kadar glukosa darah dan juga perubahan metabolisme lemak dan protein yang diakibatkan oleh kurangnya sekresi insulin, resistensi insulin, atau keduanya (6).
Kadar gula tinggi pada kasus DM menjadi masalah utamanya karena tubuh pasien DM tidak mampu memproduksi atau menggunakan hormon insulin dengan baik untuk memproses makanan (7). Resistensi insulin adalah suatu keadaan dimana insulin yang disekresikan oleh sel β–
pankreas tidak mampu menghasilkan efek biologis yang diharapkan pada berbagai jaringan tubuh manusia (8).
Tanaman jarong (Achyranthes aspera Linn.) merupakan salah satu tanaman tradisional yang dapat digunakan sebagai obat antihiperlipidemia dan antidiabetes. Penelitian pendahuluan tentang tanaman jarong menyebutkan bahwa daun jarong mengandung senyawa glikosida, triterpenoid, saponin, alkaloid, dan flavonoid serta menunjukan
bahwa ekstrak daun jarong efektif menurunkan kadar kolesterol dan trigliserida pada tikus putih jantan yang diinduksi triton dengan dosis 500 mg/KgBB (9). Penelitian lain menyebutkan bahwa biji tanaman jarong yang mengandung saponin secara signifikan menurunkan kolesterol total, trigliserida, dan LDL secara signifikan dan meningkatkan HDL pada tikus hiperlipidemia (10).
Penelitian yang dilakukan oleh Kamalakkannan dan Balakrishnan (2015) menunjukkan bahwa ekstrak air daun Achyranthes aspera Linn pada dosis 500 mg/kg dapat menurunkan secara signifikan kadar glukosa dan level glukosilat hemoglobin pada tikus wistar albino yang diinduksi alloksan (11). Pada penelitian potensi antidiabetes yang diinduksi STZ ekstrak etanol 96% daun Achyranthes aspera Linn. pada dosis 250 mg/kgBB dapat menurunkan glukosa darah dengan persentase 22,6% selama 24 jam dan pada dosis 500 mg/kgBB dengan persentase penurunan kadar glukosa darah sebesar 26,7% selama 24 jam (12).
Kebaruan pada penelitian ini adalah hewan uji yang dikondisikan multipatologi (hiperkolesterol dan hiperglikemia) dan membuat model tikus resistensi insulin agar dapat mencerminkan kondisi nyata di lingkungan saat ini bahwa DM tipe 2 yang kebanyakan dialami oleh masyarakat Indonesia adalah akibat resistensi insulin. Permasalahan penelitian ini adalah belum diketahuinya dosis efektif ekstrak etanol 70%
daun jarong yang dapat menurunkan kadar kolesterol total, trigliserida, glukosa darah dan TTGO tikus resistensi insulin.
Penelitian ini merupakan penelitian lanjutan untuk mengetahui efek dan menentukan dosis ekstrak etanol 70% daun jarong terhadap kadar kolesterol total, trigliserida, glukosa darah dan TTGO pada tikus resistensi insulin yang diinduksi pakan tinggi lemak dan streptozotocin (STZ).
METODE
Alat dan bahan
Aluminium foil, ayakan no. 40, mortir dan stamper, toples kaca atau bejana maserasi, blender, kertas saring, neraca analitik (OHAUS, CP214), vacuum rotary evaporator (Senco, R206D – China), batang pengaduk, labu ukur, erlenmeyer, gelas ukur, beaker glass, botol, tabung reaksi, pipet tetes, lemari
42 asam, hot plate (Akebonno inox hot plate, MSP 3101), oven (Cosmos, CO 9909 - Indonesia), waterbath (Lokal, H-WBE-8L digital Thermostat Water Bath), pipet tetes, kandang hewan coba yang dilengkapi tempat pakan dan minum, timbangan hewan, spuit injeksi, sonde/spuit oral, pH meter (Jenco, Vision Plus 6810 - United State), centrifuge (Eppendorf, MiniSpin/MiniSpin Plus – Germany), mikro pipet, microtube, vortex mixer (Gemmy, VM 300 – Taiwan) dan fotometer klinikal varta-506 (ELITechGroup, Microlab 300 - The Netherlands).
Bahan yang digunakan adalah simplisia daun jarong (Achyranthes aspera Linn.), etanol 70%, aquadest, aquadest panas, amoniak (Merck - Germany), larutan HCl 2N, H2SO4 pekat, buffer sitrat saline (asam sitrat, na sitrat) (Nitra Kimia – Indonesia), gelatine (Merck, 10% - Germany), Na-CMC (PT.
Brataco, 0,5% - Indonesia), pakan diet tinggi lemak (pakan standar (80%), lemak kambing (15%) dan kuning telur bebek (5%)), pereaksi dragendorf (Nitra Kimia – Indonesia), pereaksi mayer, pereaksi bouchardat, serbuk magnesium (Merck - Germany), ketamine (Combiphar, 50 mg/ml – Indonesia) streptozotocin (Sangon Biotech, 99.09% - China), reagen kolesterol (Human Diagnostics Worldwide - Germany), reagen trigliserida (Human Diagnostics Worldwide - Germany), reagen glukosa (Human Diagnostics Worldwide - Germany), kapsul fenofibrat (Medikon, Fenofibrat 200 mg – Indonesia) dan tablet Metformin HCl (Hexpharm Jaya, Metformin HCl 500 mg – Indonesia).
Prosedur kerja
1. Penyiapan Hewan Uji
Tikus jantan galur Sprague Dawley berumur 3-4 bulan dengan bobot 150-200 g sebanyak 28 ekor dibagi menjadi 7 kelompok, yaitu kelompok normal, kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol positif fenofibrat, kelompok positif metformin, dan 3 kelompok perlakuan dengan dosis yang berbeda yaitu 250 mg/kgBB, 500 mg/kgBB, 750 mg/kgBB.
2. Pembuatan Pakan Diet Tinggi Lemak Terdiri dari pakan standar (80%), lemak kambing (15%) dan kuning telur bebek (5%).
Jumlah konsumsi makanan setiap harinya maksimum sebanyak 20 g/tikus dan diberikan selama 28 hari (13).
3. Pembuatan Larutan Streptozotocin (STZ) STZ 300 mg dilarutkan ke dalam 30 ml buffer sitrat hingga pH 4,5. STZ diinduksikan secara intraperitoneal (i.p). Dosis STZ yakni 30 mg/kg BB.
4. Pembuatan Suspensi Fenofibrat Dosis fenofibrat untuk tikus sebesar 20,54 mg/kg yang dilarutkan dengan suspensi Na CMC 0,5% sebanyak 5 mL.
5. Pembuatan Suspensi Metformin HCl Dosis Metformin HCl untuk tikus sebesar 51,37 mg/kg yang dilarutkan dengan Na-CMC 0,5% hingga 5 ml.
6. Pembuatan Model Tikus yang Diinduksi Pakan Diet Tinggi Lemak, Injeksi Streptozotocin Dosis Rendah dan Pengujian Ekstrak
Setelah aklimatisasi, tikus diberikan pakan tinggi lemak kecuali pada kelompok normal selama 28 hari (hari ke-42) lalu dipuasakan ± 16 jam untuk diinjeksikan STZ dengan dosis rendah yaitu 30 mg/kg. Tiga hari (hari ke- 46) setelah diinjeksi STZ, tikus diukur kadar glukosa darah puasa, kolesterol total dan trigiserida. Diberi perlakuan selama 14 hari sesuai dengan kelompoknya secara oral. Pengambilan darah selanjutnya dilakukan pada hari ke 7 (hari ke-54) dan hari ke 14 (hari ke-61) setelah pemberian perlakuan. Pada hari ke 14 setelah 30 menit pengambilan darah, tikus diberikan larutan glukosa untuk pemeriksaan TTGO, kemudian dilakukan pengambilan darah kembali pada menit ke 30, 60, 90 dan 120.
7. Pengukuran Total Kolesterol (KT), Trigliserida dan Glukosa Darah
Pengukuran dilakukan dengan mencampurkan serum sebanyak 10 μl, lalu dicampur reagen enzim (kit) kolesterol, trigliserida dan glukosa sebanyak 1000 μl, kemudian campuran dihomogenkan dengan vorteks, lalu diinkubasi selama 10 menit pada suhu 20-25˚C atau 5 menit pada suhu 37˚C, kemudian dibaca dengan spektrofotometer klinikal.
8. Pengukuran Tes Toleransi Glukosa Oral (TTGO)
Kadar glukosa darah awal tikus diukur dengan mengambil sampel darah pada sinus orbitalis (T0) lalu diberikan bahan uji secara per oral. Setelah 30 menit seluruh tikus diberikan larutan glukosa 2 g/kg secara oral. Pengukuran
43 kadar glukosa darah kembali dilakukan pada menit ke-30, 60, 90, 120 menit (14).
Analisa Data
Data yang diperoleh berupa hasil penurunan kadar kolesterol total, trigliserida, glukosa darah, dan TTGO yang dianalisis menggunakan uji statistik One Way Anova dengan taraf kepercayaan 95%. Jika terdapat perbedaan yang signifikan, maka dilakukan uji lanjut Post Hoc Tukey untuk mengetahui kelompok perlakuan yang berbeda signifikan dibandingkan kelompok perlakuan lainnya. Pengolahan data dilakukan menggunakan program Software SPSS 24.0.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Ekstraksi Daun Jarong
Metode ekstraksi yang digunakan adalah maserasi. Metode maserasi dipilih karena metode pengerjaan dan alat-alat yang digunakan sederhana serta untuk menghindari rusaknya senyawa-senyawa pada simplisia yang tidak tahan pada pemanasan (15). Etanol 70% digunakan sebagai cairan penyari karena etanol selektif, kapang dan bakteri sulit tumbuh, tidak beracun, netral, dan panas yang diperlukan untuk pemekatan lebih sedikit (16).
Hasil Karakteristik Mutu Hasil Organoleptis
Ekstrak etanol daun jarong berbentuk kental, dengan bau khas, rasa pahit, dan warna coklat kehitaman.
Hasil Kadar Air
Pengujian ini bertujuan untuk mengetahui batasan maksimal atau rentang banyaknya kandungan air yang terdapat di dalam bahan (17).
Hasil kadar air yang diperoleh sebesar 6,75%
(memenuhi persyaratan mutu).
Hasil Uji Penapisan Fitokimia
Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol 70% daun jarong yang diperoleh menunjukkan hasil: (1) positif alkaloid (endapan merah kecoklatan pada pereaksi Dragendorff dan endapan coklat pada pereaksi Bouchardat); (2) positif flavonoid (perubahan warna merah tua atau jingga setelah pemberian logam Mg dan HCl); (3) positif saponin (terbentuknya buih yang stabil setelah pemberia HCl 2N); (4) positif tanin (perubahan warna menjadi hijau kehitaman dengan pereaksi FeCl3) dan (5) positif terpenoid
(warna merah muda setelah pemberian eter, AAA, dan H2SO4)(15); (18).
Hasil Uji Aktivitas Ekstrak Etanol 70%
Daun Jarong Terhadap Penurunan Kadar Kolesterol Total, Trigliserida, Glukosa darah, dan TTGO
Penelitian ini menggunakan STZ dosis rendah. Pada dosis rendah, STZ bekerja dengan menganggu aksi dan sekresi insulin pada reseptor insulin yang menyebabkan resistensi sehingga akan membuat kondisi DM tipe 2, sedangkan pada dosis tinggi akan membuat rusaknya sel-β pankreas sehingga kondisi yang dihasilkan adalah DM tipe 1 (19). Penurunan kadar kolesterol total ditunjukkan pada gambar 1.
Gambar 1 disini
Gambar 1. Rata-Rata Persentase Penurunan Kadar Kolesterol Total
Gambar 1 menunjukkan peningkatan rata- rata persentase penurunan kadar kolesterol total dengan adanya peningkatan dosis sediaan uji.
Penurunan kadar kolesterol juga terjadi pada kelompok negatif. Hal ini disebabkan karena hewan uji sudah tidak diberikan pakan tinggi lemak sehingga hewan uji tetap turun kadar kadar kolesterol total darah walau tanpa diberikan sediaan uji.
Uji statistik (ANOVA) terhadap penurunan kadar kolesterol total ditunjukkan pada tabel 1.
Tabel 1. Efek Ekstrak Terhadap Kadar Kolesterol Total
Tabel 1 disini
Hasil uji menunjukkan nilai P=0,000 (P<0,05), hal ini menunjukkan adanya pengaruh perlakuan terhadap penurunan kadar kolesterol total dari masing-masing kelompok. Pada uji Tukey terdapat perbedaan bermakna (Sig.<0,05) pada tiap kelompok. Ekstrak dosis 3 (750 mg/kg) merupakan dosis yang paling baik jika dibandingkan dengan ekstrak dosis 1 dan 2 dalam menurunkan kadar kolesterol total, namun tidak sebaik kontrol positif (fenofibrat).
Penurunan kadar trigliserida ditunjukkan pada gambar 2.
Gambar 2 disini