BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN
5.2. Saran
Identifikasi BAL yang diisolasi dari limbah cair tempe masih bersifat dugaan, sehingga disarankan untuk melakukan uji fisiologi dan biokimia lebih lanjut yang belum dilakukan pada penelitian ini agar dapat mengidentifikasi BAL sampai ke tingkat spesies.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
DAFTAR PUSTAKA
Anastiawan. 2014. Isolasi dan Karakterisasi Bakteri Probiotik yang Berasal dari Usus Itik Pedaging Anas domesticus. Skripsi: Universitas Hasanudin Makassar.
Aron, Nicoleta Maftei, Monica (Găureanu) Boev, dan Gabriela Bahrim. 2015.
Probiotics and Therapeutic Effect in Clinical Practice – Review. Romanian Biotechnological Letters, Vol. 20, No. 1.
Ashenafi, M. dan M. Busse. 1991. The Microflora of Soak Water During Tempeh Production from Various Beans. Journal of Applied Bacteriology, 70: 334- 338.
Breed, Robert S., E.G.D. Murray, dan Nathan R. Smith. 1957. Bergeys’s Manual of Determinative Bacteriology Seventh Edition. United States of America:
The Williams & Wilkins Company.
Bulut, Çisem. 2003. Isolation and Molecular Characterization of Lactic Acid Bacteria From Cheese. Tesis: Biotechnology and Bioengineering, İzmir Institute of Technology Turkey.
Candra, Joddi Iryadi. 2006. Isolasi dan Karakterisasi Bakteri Asam Laktat dari Produk Bekasam Ikan Bandeng (Chanos chanos). Skripsi: Teknologi Hasil Perikanan IPB.
Collin and Lyne’s. 2004. Microbial Methods Eight Edition. Arnold, a member of the Hodder Headline Group, 338 Euston Road, London NW1 3BH.
Desai, Ankur. 2008. Strain Identification, Viability and Probiotics Properties of Lactobacillus casei. Tesis: School of Biomedical and Health Sciences Victoria University Australia.
Dewi, Amalia Krishna. 2013. Isolasi, Identifikasi, dan Uji Sensitivitas Staphylococcus aureus terhadap Amoxicillin dari Sampel Susu Kambing
38
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Peranakan Ettawa (PE) Penderita Mastitis di Wilayah Girimulyo, Kulonprogo, Yogyakarta. Jurnal Sain Veteriner 31 (2), ISSN: 0126-0421.
Firmansyah, Agus. 2001. Terapi Probiotik dan Prebiotik pada Penyakit Saluran Cerna Anak. Sari Pediatri, Vol. 2, No. 4: 210-214.
Fitriyani, Ida. 2010. Isolasi, Karakterisasi, dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL) dari Buah Matang yang Berpotensi Menghasilkan Antimikroba.
Skripsi: Biologi UIN Sunan Kalijaga Yogyakarta
Gogineni, Vijaya K, Lee E Morrow, dan Philip J Gregory, dan Mark A Malesker.
2013. Probiotics: History and Evolution. Journal of Ancient Diseases &
Preventive Remedies Vol1, No 2: 107. doi:10.4172/2329-8731.1000107.
Harrigan W.F. and McCance M.E. 1976. Laboratory methods in food and dairy microbiology 1st Ed. London: Acad Press, 25-29.
Harley, John P. 2005. Laboratory Exercises in Microbiology, Sixth Edition. New York: The McGraw-Hill Companies, Inc
Hidayat, Nur dan Sri Suhartini. 2006. Mikrobiologi Industri. Teknik Industri Pertanian FTP Universitas Brawijaya Malang.
Holzapfel, Wilhelm H, Petra Haberer, Rolf Geisen, Johanna Björkroth, and Ulrich Schillinger. 2001. Taxonomy and important features of probiotic microorganisms in food and nutrition. The American Society for Clinical Nutrition. Am J Clin Nutr;73(suppl):365S–73S.
Isolauri, Erika, Yelda Sütas, Pasi Kankaanpää, Heikki Arvilommi, and Seppo Salminen. 2001. Probiotics: effects on immunity. The American Joournal of Clinical Nutrition;73(suppl):444S–50S.
Jay, M.J. 1992. Modern Food Microbiology, Fermented foods related products of fermentation. Fourth edition. Chapman & Hall. London, UK, pp. 372-403.
Khedid, K., M.Faid, A.Mokhtari, A.Soulaymani, A.Zinedine. 2006.
Characterization of Lactic Acid Bacteria Isolated from The One Humped
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Camel Milk Produced in Morocco. Microbiological Research 164 81—91 doi:10.1016/j.micres.10.008.
Khusnan, Wahyu Prihtiyantoro, dan Mitra Slipranata. 2012. Identifikasi dan Karakterisasi Fenotipe Staphylococcus aureus Asal Kasus Bumblefoot dan Arthritis pada Broiler. Jurnal Kedokteran Hewan Vol. 6 No. 2, September 2012 ISSN: 1978-225X.
Kormin, Salasiah, Gulam Rusul, Son Radu, and Foo Hooi Ling. 2001.
Bacteriocin-Producing Lactic Acid Bacteria Isolated from Traditional Fermented Food. Malaysian Journal of Medical Sciences, Vol. 8, No. 1, Januari (63-68).
Kusnadi. 2003. Mikrobiologi. Bandung: JICA IMSTEP.
Kusuma, Sri Agung Fitri. 2009. Bakteri Asam Laktat. Karya Ilmiah: Fakultas Farmasi Universitas Padjajaran.
Malago, J.J. 2011. Probiotic Bacteria and Enteric Infections-Cytoprotection by Probiotic Bacteria. London New York: Springer.
Moreno, M.R.F, J.J. Leisner, L.K. Tee, C. Ley, S. Radu, G. Rusul, M.
Vancanneyt, and L. De Vuyst. 2002. Microbial Analysis of Malaysian Tempeh, and Characterization of Two Bacteriocins Produced by Isolates of Enterococcus faecium. Journal of Applied Microbiology, 92, 147-157 Neha, Aurora, Singh Kamaljit, Bilandi Ajay, dan Garg Tarun. 2012. Probiotic: As
Effective Treatment of Diseases. International Research Journal of Pharmacy, 3 (1) ISSN 2230-8407
Nur, Hasrul Satria. 2005. Pembentukan Asam Organik oleh Isolat Bakteri Asam Laktat pada Media Ekstrak Daging Buah Durian (Durio zibethinus Murr.).
BIOSCIENTIAE Vol 2, No 1: 15-24.
Ozyurt, V. Hazal dan Semih Ötles. 2014. Properties of Probiotics and Encapsulated Probiotics in Food. Acta Sci. Pol., Technol. Aliment. 13(4), 413-424.
40
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Park, Pyong Woo, Timothy J. Foster, Eiichiro Nishi, Sheila J. Duncan, Michael Klagsbrun, and Ye Chen. 2003. Activation of Syndecan-1 Ectodomain Shedding by Stapyhlococcus aureus α-Toxin and β-Toxin. The Journal Of Biological Chemistry Vol. 279, No. 1, DOI 10.1074/jbc.M308537200
Pelczar, Michael J dan Chan, E.C.S. 2008. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Penerbit Universitas Indonesia (UI-Press)
Pisol, Balqis, Lilis Nuraida, Noriham Abdullah, Suliantari, dan Khalilah Abdul Khalil. 2013. Isolation and Characterization of Lactic Acid Bacteria from Indonesian Soybean Tempe. 4th International Conference on Biology, Environment and Chemistry IPCBEE vol.58 DOI: 10.7763/IPCBEE.
V58.7
Pisol, Balqis, Noriham Abdullah, Khalillah Abdul Khalil, dan Lilis Nuraida. 2015.
Isolation and Identification of Lactic Acid Bacteria from Different Stages of Traditional Malaysian Tempeh production. Malaysian Journal of Microbiology, Vol. 11(4),pp. 358-364
Pratiwi, Sylvia T. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Penerbit Erlangga
Prescott LM, Harley JP, and Kelin DA. 2002. Microbiology Bacteria: The Low G+ C Gram Positive 5th edition. Boston: McGraw Hill: 529-530
Ray, B. 2004. Fundamental Food Microbiology. CRC Press: Boca Raton London.
Reid, Gregor, Jana Jass, M. Tom Sebulsky, dan John K. McCormick. 2003.
Potential Uses of Probiotics in Clinical Practice. Clinical Microbiology Reviews, Vol. 16, No. 4 p. 658–672.
Roberfroid, M., G. R. Gibson, L. Hoyles, A.L. McCartney, R. Rastall, I. Rowland, D. Wolvers, B. Watzl, H. Szajewska, B. Stahl, F. Gyarner, F. Respondek, K. Whelan, V. Coxam, M.J. Davicco, L. Léotoing, Y. Wittrant, N.M.
Delzenne, P.D Cani, A.M. Neyrinck, dan A. Meheust. 2010. Probiotic Effect: Metabolic and Health Benefits. British Journal of Nutrition. Vol 104:2:61-63. DOI: 10.1017/S0007114510003363.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Romadhon, Subagiyo, Sebastian Margino. 2012. Isolasi dan Karakterisasi Bakteri Asam Laktat dari Usus Udang Penghasil Bakteriosin Sebagai Agen Antibakteria Pada Produk-Produk Hasil Perikanan. Jurnal Saintek Perikanan Vol. 8. No. 1.
Sopandi, Tatang dan Wardah. 2014. Mikrobiologi Pangan – Teori dan Praktik.
Yogyakarta: Penerbit ANDI.
Sun, Yalian, Xiuyu Lou, Xuan Zhu, Han Jiang, Qing Gu. 2014. Isolation and Characterization of Lactic Acid Bacteria Producing Bacteriocin from Newborn Infants Feces. Journal of Bacteriology and Mycology.Vol 1 (2) ISSN : 2471-0172
Surono, Ingrid.S. 2004. Probiotik Susu Fermentasi dan Kesehatan. Jakarta: PT.
Tri Cipta Karya (TRICK)
Syafiq, A, Sauriasari R, Fikawati S, Amelia P, Soemijati A, Christy M, dan Saragih F. 2015. Effect of Inulin Supplemented UHT Milk Consumption on Faecal Bifidobacterium sp. And Lactobacillus sp. Of Healthy Children in Depok, Indonesia. Malaysian Journal of Nutrition 21 (2):219 – 230.
Syarief, R., J. Hermanianto, P. Haryadi, S. Wiraatmadja, Suliantari, D. Syah, N.
E. Suyatna, dan Y. P. Saragih. 1999. Wacana Tempe Indonesia. Univ.
Katolik Widya Mandala, Surabaya.
Thakkar, Pooja, H.A. Modi, dan J.B. Prajapati. 2015. Isolation, Characterization, and Safety Assessment of Lactic Acid Bacterial Isolates from Fermented Food Products. International Journal of Current Microbiology and Applied Science Vol 4, No 4: 713-725 ISSN: 2319-7706
Utami, Fauziah. 2013. Pengaruh Suhu Terhadap Daya Tahan Hidup Bakteri Pada Sediaan Probiotik. Skripsi:Farmasi FKIK UIN Syarif Hidayatullah
Vandenplas, Yvan, Geert Huys, dan Georges Daube. 2014. Prebiotics: an update.
Sociedade Brasileira de Pediatria J Pediatr (Rio J). 91:6-21
42
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
LAMPIRAN Lampiran 1. Alur Penelitian
\
Preparasi Alat
Isolasi BAL
Identifikasi Makroskopis:
- Bentuk koloni - Bentuk tepian koloni - Warna koloni
Air rendaman kacang kedelai selama semalam
Pemurnian dan peremajaan isolat
Stok kultur Sterilisasi dengan
autoklaf
Uji aktivitas hemolisis Karakterisasi Morfologi Karakterisasi Fisilogi dan
Biokimia
Uji Keamanan
Pewarnaan Endospora Pewarnaan Gram
Uji Motilitas
Uji Katalase
Uji Ketahanan Suhu Uji Ketahanan NaCl
Uji Produksi gas
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 2. Sertifikat Analisa de Man Rogosa Sharpe Agar
44
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 3. Sertifikat Analisa de Man Rogosa Sharpe Broth
46
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 4. Hasil Isolasi BAL dari Limbah Cair Air Rendaman Kacang Kedelai
Pengenceran 10-5
Pengenceran 10-6
Pengenceran 10-7 Keterangan:
Hasil tiga pengenceran terakhir diinokuasikan ke media MRSA tersuplementasi CaCO3 1% yang dilakukan secara triplo
(Sumber: Dokumentasi prbadi, 2016)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 5. Hasil Perhitungan Total Plate Count (TPC) Keseluruhan Bakteri:
Koloni/mL koloni/mL koloni/mL Bakteri Asam Laktat:
Pengenceran Jumlah koloni Rata-Rata Koloni Jumlah Koloni 10-5
107 133,67
163
131 10-6
55 78,34
63
117 10-7
14 16,33 -
17 18
Koloni/mL BAL koloni/mL koloni/mL
Pengenceran Jumlah koloni Rata-Rata Koloni Jumlah Koloni 10-5
314 354,67 -
354 396 10-6
143 189,67
186
240 10-7
33 31
24
36
48
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 6. Hasil Pewarnaan Gram dan Bentuk Sel
ARK 5.1.a ARK 5.3.b ARK 6.1.c
ARK 6.1.d ARK 6.2.e ARK 6.3.f
ARK 7.2.g ARK 7.3.h Lactobacillus casei
Keterangan:
- Isolat yang diuji berumur 24 jam dengan perbesaran (100x10)
- ARK 5.1.a, ARK 5.3.b, ARK 6.1.c, ARK 6.1.d, ARK 6.3.f, ARK 7.2.g, ARK 7.3.h, dan Lactobacillus casei merupakan bakteri Gram positif ditandai dengan warna ungu
- ARK 6.2.e merupakan bakteri Gram negatif ditandai dengan warna merah Sumber: Dokumentasi pribadi, 2016
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 7. Hasil Pewarnaan Endospora
ARK 5.1.a ARK 5.3.b ARK 6.1.c
ARK 6.1.d ARK 6.3.f ARK 7.2.g
ARK 7.3.h Lactobacillus casei
Keterangan:
- Isolat yang diuji berumur 24 jam dengan perbesaran (100x10)
- ARK 5.1.a, ARK 5.3.b, ARK 6.1.c, ARK 6.1.d, ARK 6.3.f, ARK 7.2.g, ARK 7.3.h, dan Lactobacillus casei merupakan bakteri non-spora ditandai dengan warna merah
(Sumber: Dokumentasi pribadi, 2016)
50
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 8. Hasil Uji Katalase
ARK 5.1.a ARK 5.3.b
ARK 6.1.c ARK 6.1.d
ARK 6.2.e ARK 6.3.f
ARK 7.2.g ARK 7.3.h
Lactobacillus casei Keterangan:
- ARK 5.1.a, ARK 5.3.b, ARK 6.1.c, ARK 6.1.d, ARK 6.2.e, ARK 6.3.f, ARK 7.2.g, ARK 7.3.h, dan Lactobacillus casei merupakan bakteri katalase negatif ditandai dengan tidak terbentuk gelembung gas
- Staphylococcus aureus sebagai kontrol positif katalase menghasilkan gelembung gas
(Sumber: Dokumentasi pribadi, 2016)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 9. Hasil Uji Motilitas
ARK 5.1.a ARK 5.3.b ARK 6.1.c ARK 6.1.d
ARK 6.3.f ARK 7.2.g ARK 7.3.h L.casei
Keterangan:
- ARK 5.1.a, ARK 5.3.b, ARK 6.1.c, ARK 6.1.d, ARK 6.3.f, ARK 7.2.g, ARK 7.3.h, dan Lactobacillus casei merupakan bakteri non motil ditandai dengan pertumbuhan hanya tempat penusukan inoculum
(Sumber: Dokumentasi pribadi, 2016)
52
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 10. Hasil Uji Produksi Gas
ARK 5.1.a ARK 5.3.b ARK 6.1.c ARK 6.1.d
ARK 6.3.f ARK 7.2.g ARK 7.3.h L.casei
Keterangan:
- ARK 5.1.a, ARK 5.3.b, ARK 6.1.c, ARK 6.1.d, ARK 6.3.f, ARK 7.2.g, dan ARK 7.3.h merupakan bakteri heterofermentatif ditandai dengan adanya gas pada tabung durham
- Lactobacillus casei merupakan bakteri homofermentatif ditandai dengan tidak adanya gas pada tabung durham
(Sumber: Dokumentasi pribadi, 2016)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 11. Hasil Uji Ketahanan Suhu
Isolat Suhu
10° C 37° C 45° C
L. casei
ARK 5.1.a
ARK 5.3.b
ARK 6.1.c
ARK 6.1.d
54
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
ARK 6.3.f
ARK 7.2.g
ARK 7.3.h
Keterangan:
- Pada suhu 10° C ARK 5.1.a, ARK 5.3.b, ARK 6.1.c, ARK 6.1.d, ARK 6.3.f, ARK 7.2.g, ARK 7.3.h, dan Lactobacillus casei tidak terdapat pertumbuhan ditandai dengan tidak adanya kekeruhan
- Pada suhu 37° C ARK 5.1.a, ARK 5.3.b, ARK 6.1.c, ARK 6.1.d, ARK 6.3.f, ARK 7.2.g, ARK 7.3.h, dan Lactobacillus casei terdapat pertumbuhan ditandai dengan adanya kekeruhan
- Pada suhu 45° C ARK 5.1.a, ARK 5.3.b, ARK 6.1.c, ARK 6.1.d, ARK 6.3.f, ARK 7.2.g, ARK 7.3.h, dan Lactobacillus casei terdapat pertumbuhan ditandai dengan adanya kekeruhan
(Sumber: Dokumentasi pribadi, 2016)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 12. Hasil Uji Ketahanan NaCl
Isolat Konsentrasi NaCl
4% 6,5%
L. casei
ARK 5.1.a
ARK 5.3.b
ARK 6.1.c
ARK 6.1.d
56
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
ARK 6.3.f
ARK 7.2.g
ARK 7.3.h
Keterangan:
- Pada NaCl 4% ARK 5.1.a, ARK 5.3.b, ARK 6.1.c, ARK 6.1.d, ARK 6.3.f, ARK 7.2.g, ARK 7.3.h, dan Lactobacillus casei terdapat pertumbuhan ditandai dengan adanya kekeruhan
- Pada NaCl 6,5% ARK 5.1.a, ARK 5.3.b, ARK 6.1.c, ARK 6.1.d, ARK 6.3.f, ARK 7.2.g, ARK 7.3.h, dan Lactobacillus casei terdapat pertumbuhan ditandai dengan adanya kekeruhan
(Sumber: Dokumentasi pribadi, 2016)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 13. Hasil Uji Aktivitas Hemolisis
ARK 5.1.a ARK 5.3.b ARK 6.1.c
ARK 6.1.d ARK 6.3.f ARK 7.2.g
ARK 7.3.h Lactobacillus casei Staphylococcus aureus (Kontrol +) Keterangan:
- ARK 5.1.a, ARK 5.3.b, ARK 6.1.c, ARK 6.1.d, ARK 6.3.f, ARK 7.2.g, ARK 7.3.h, dan Lactobacillus casei merupakan bakteri yang aman ditandai dengan tidak adanya zona bening disekitar koloni
- Staphylococcus aureus sebagai kontrol positif menghasilkan zona bening disekitar koloni
(Sumber: Dokumentasi pribadi, 2016)