160
Abstract Short Article
Antibiotic resistance pattern and biofilm production in Staphylococcus aureus isolates and Staphylococcus epidermidis isolated from hospital infections Tehran in 2016
Sina Mashaiekhi1, Kumarss Amini2
Background and Aim: Staphylococci are common pathogens of humans and livestock that able to produce a wide range of diseases. Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus are the important factors for biofilm production in patients. This study was designed to determine the ability of biofilm production and the resistance pattern of Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus strains that isolated from hospital and food infectious.
Materials and Methods: This descriptive cross-sectional study was performed on 117 hospital samples.
First, biochemical tests were used in order to isolate and confirm Staphylococcus epidermidis and aureus strains. To determine biofilm production, the Microtiter plate method was applied and the presence of icaA and icaD genes are were identified using PCR. Antibiotic resistance pattern of strains was evaluated by Disk diffusion method related to 7 antibiotics.
Results: 12 strains of Staphylococcus epidermidis and 20 strains of Staphylococcus aureus were isolated from 117 hospital samples by biochemical tests, of these, 6 strains of the Staphylococcus epidermidis and 16 strains of the Staphylococcus aureus were the producers of biofilm. PCR results shown that icaA and icaD genes were present in 15 strains of Staphylococcus aureus and 6 strains of the Staphylococcus epidermidis.
The highest antibiotic resistance in the antibiotic resistance test was related to penicillin, gentamicin, and amikacin respectively.
Conclusion: Extending clinical samples of biofilm producers with multiple antibiotic resistance can be considered as a serious risk for patients and lead to increase mortality rate in hospitals.
Key Words: Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Biofilm, Antibiotic Resistance
Journal of Birjand University of Medical Sciences. 2018; 25(2): 160-166.
Received: June 24, 2017 Accepted: June 11, 2018
1Department of Microbiology, Sirjan Branch Islamic AzadUniversity, Sirjan, Iran.
2Corresponding Author; Department of Microbiology, Facultyof basic science, Saveh Branch, Islamic Azad University, Saveh, Iran.
Tel: 09125454074 Fax:021-44850954 Email:[email protected]
تمواقم یوگلا یسررب تنآ
ی ب ی تو ی ک رد ملیفویب دیلوت و ی ای
هلوس اه ی
سوکوکولیفاتسا سوئروا
سوکوکولیفاتسا و سیدیمردیپا
زا هدشادج
تنوفع اه
نارهت رهش یناتسرامیب ی
، د لاس ر 5931
س ی ان اشم ی خ
1ی
، ک ی ثرمو ما ی ن
2ی
هدیکچ
ٌِیهس فدّ ٍ
عٛوٛوّٛیفبشػا :
بٞ
، ٚ ٖبؼ٘ا ٗیث نششـٔ ٖطٛسبد
ٌٝ٘ٛ
بٞ
ّیّثبل ٝو زػا یٔاد فّشخٔ ی صا یؼیػٚ فیع دبدیا ز
ثی سبٕ
ی بٞ
دساد اس ی عٛوٛوّٛیفبشػا .
غیذیٔسذیدا عٛوٛوّٛیفبشػا ٚ
عٛئسٚا
، ػ
ٛ سد یٕٟٔ ُٔا سد ّٓیفٛیث دبدیا
.ذٙشؼٞ ٖاسبٕیث ٗیا
ٝؼِبغٔ
بث فذٞ
یٍِٛا ٚ ّٓیفٛیث ذیِٛس ییب٘اٛس ٗییؼس شٔٚبمٔ
ی
ٛػ ی
ٝ بٞ
عٛوٛوّٛیفبشػا ی غیذیٔسذیدا
عٛوٛوّٛیفبشػا ٚ عٛئسٚا
صا ٜذؿاذخ ز٘ٛفػ بٞ
.زفشٌ ْبد٘ا ییازغ داٛٔ ٚ ی٘بشػسبٕیث ی
شٍر قیقحت ٝؼِبغٔ ٗیا: كٛس
یف ی - ؼغمٔ
ی یٚس شث 117 د٘ا ی٘بشػسبٕیث ٕٝ٘ٛ٘
.ذؿ ْب اذشثا ؾیبٔصآ بٞ
یٚس شث ییبیٕیؿٛیث ی
ٕٝ٘ٛ٘
بٞ
ٝث سٛظٙٔ
ٚ یصبػاذخ س
یأ ی ذ غٙخ عٛوٛوّٛیفبشػا
عٛئسٚا عٛوٛوّٛیفبشػا ٚ
غیذیٔسذیدا ْبد٘ا
ذیدشٌ
یاشث غذػ ؛ یِٛس ٗییؼس
ذ
زیّدششیسٚشىیٔ ؽٚس صا ،ّٓیفٛیث سٛضح ٚ ذؿ ٜدبفشػا
ٖط بٞ
ی ٚicaA
صا ٜدبفشػا بثicaD
شٌ قخـٔPCR
زٔٚبمٔ یٍِٛا .ذید
ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى ی
ٛػ ی
ٝ بٞ
ٖطٛیفید هؼید ؽٚس ٝث یاشث
7 ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ه .ذؿ ٗییؼس
ِتفاي اّ
داذؼس: 12 ٝیٛػ عٛوٛوّٛیفبشػا
غیذیٔسذیدا ٚ
20 ٝیٛػ عٛئسٚا عٛوٛوّٛیفبشػا
ٝث ػٚ
ی
ّٝ
ؾیبٔصآ بٞ
صا ییبیٕیؿٛیث ی
117
ٕٝ٘ٛ٘
داذؼس ٗیا صا ٝو ذؿ یصبػاذخ ی٘بشػسبٕیث 6
عٛوٛوّٛیفبشػاٝیٛػ
غیذیٔسذیدا ٚ
16 ٝیٛػ عٛوٛوّٛیفبشػا
عٛئسٚا
ّٛٔ
ذِ
حیبش٘ .ذ٘دٛث ّٓیفٛیث
ٖبـ٘ PCR
ٜذٙٞد سٛضح
ٕٞ
ٖبٔض
ٖط یبٞ
ٚ icaA
سد icaD
15 ٝیٛػ فبشػا ی
ٛوٛوّٛ
ع عٛئسٚا ٚ 6 ٝیٛػ
فبشػا ی عٛوٛوّٛ
دا ی
ٔسذ ی ذ ی غ .دٛث ثی ششـ ی
ٗ زٔٚبمٔ
ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى زٔٚبمٔ ؾدٙػ سد ی ش٘آ
ی ث ی سٛ
ی ى ی
ٝث تیسشس یٙد ٝث طٛثشٔ
،ٗیّیػ
ٗیػبىیٔا ٚ ٗیؼیبٔبشٙخ دٛث
.
ِجیتً
يزیگ ؽششؼٌ :
ٕٝ٘ٛ٘
بٞ
ّٛٔ یٙیِبث ی بث ّٓیفٛیث ذِ
زٔٚبمٔ
بٞ
ی ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى
ٝ٘بٌذٙچ ی ،
ٔ ی ذ٘اٛس
ٝث
ٖاٛٙػ یاشث یّذخ یشغخ
ةٛؼحٔ ٖاسبٕیث ٜذؿ
دساٛٔ ؾیاضفا ثػبث ٚ يشٔ
ٚ ٔ ی ش سد ثی
ٖبشػسبٕ
بٞ
.ددشٌ
ُصاٍ
يدیلك ياّ
عٛوٛوّٛیفبشػا:
عٛئسٚا عٛوٛوّٛیفبشػا ،
غیذیٔسذیدا یش٘آ زٔٚبمٔ ،ّٓیفٛیث ،
یىیسٛیث
ذنجزيب يكشزپ مولع هاگشناد يولع هلجه .
7931
؛ 52 ( 5 :) 795 - 791 .
:تفايرد 9 / 4 / 7931 :شزيذپ 57 / 9 / 7931
ؾ٘اد1
ػبٙؿسبو ٝشخٛٔآ ی
ٌ ذؿسا
ٔ ٜٚش ی ثٚشى ی طِٛٛ
ی
ٔلاػا داصآ ٜبٍـ٘اد ی
، ػ ذحاٚ
ی
،ٖبخش ػ ی
،ٖبخش ا ی
ٖاش 2
؛لٍؤسه ُدٌسيًَ
،ٝیبد ّْٛػ ٜذىـ٘اد ،یطِٛٛیثٚشىیٔ ٜٚشٌ
ٖاشیا ،ٜٚبػ ،ٜٚبػ ذحاٚ ،یٔلاػا داصآ ٜبٍـ٘اد
:عسدآ
ٜٚبػ -
ٔلاػا داصآ ٜبٍـ٘اد ی
-
ٜٚبػ ذحاٚ
- بد ّْٛػ ٜذىـ٘اد ی
ٝ
:ٗفّس 09125454074
:شثبٕ٘
44850954 - 021 :یىی٘ٚششىِا زؼد
تهواقه یوگلا تنآ
ي ب ي تو ي ك رد نليفويب ذيلوت و ي اي
هلوز اه ی سوئروا سوکوکوليفاتسا .... و
س ي ان اشه ي خ ينيها ثزهويک و ي
همدقم عٛوٛوّٛیفبشػا بٞ
ٚ ٝشؿاد یؼیػٚ سبـش٘ا زؼیجع سد
ًبجِبغ
ٝث
ٛٙػ
ٖا
ٗیا .ذٙشؼٞ حشغٔ رب٘اٛیح ٚ ٖبؼ٘ا سد سّٛفٚشىیٔ
یششوبث بٞ
ٔ ی ذٙ٘اٛس
ٝث رسٛك بٞششسبو حغػ سد ّٓیفٛیث عبٕشخا
زٔٚبمٔ ٚ ذٙٙو ذؿس یساسدا یبٞذ٘ٛػ ٚ قٛف
ٜدبؼِا ا زجؼ٘ ی
ّذض ُٔاٛػ ٝث ٖبـ٘ دٛخ صا یثٚشىیٔ
ٔ ی ذٙٞد ( 1 )
ٓیّفٛیث .
،
ػ
ّىـشٔ یسبشخب ٝو زػا ییبیششوبث زیؼٕخ هی صا ُ
ٝث ػٚ
ی
ّٝ
یّدٚضٌا غىیشسبٔ هی یذیسبوبػ
ِٛس ی
ٜذؿذ یششوبث ظػٛس
،
سٛلحٔ
ٜذؿ ٝث َبلسا ییب٘اٛس یششوبث ٝث یٌظیٚ ٗیا .زػا
ٝث یسار زٔٚبمٔ ؾیاضفا ٗیٙچٕٞ ٚ فّشخٔ حٛغػ ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ه بٞ
اس
ٔ ی ذٞد ( 2 ).
ٜداٛ٘بخ یبضػا یٔبٕس ٖبیٔ صا
،ٝیػبوٛوّٛیفبشػا عٛئسٚا عٛوٛوّٛیفبشػا
عٛوٛوّٛیفبشػا ٚ
غیذیٔسذیدا
ٝث
ٖاٛٙػ
ٟٓٔ
شس ی
ٗ
ٖطٛسبد صا ٚ ذٙشؼٞ حشغٔ بٞ
ةٛؼحٔ ی٘بشػسبٕیث ز٘ٛفػ صٚشث ٟٓٔ ُٔاٛػ
ٔ ی ذ٘ٛؿ .
ٗیا
یششوبث بٞ
ٝث
ٝغػاٚ
ّٓیفٛیث ُیىـس
، حٛغػ ٝث َبلسا ییب٘اٛس
یجل صا فّشخٔ
ٖبثضیٔ زفبث ٚ ششسبو ،یىی٘بىٔ یبٞسٛسلایش٘ٚ ُ
ذٙشؼٞ اساد اس (
3 ).
ٝث شدٙٔ ّٓیفٛیث ُیىـس شٍید فشع صا
ز٘ٛفػ دبدیا ٖبٔسد ٝث ْٚبمٔ یبٞ
ٔ ی دٛؿ تجػ ٝدیش٘سد ٝو
ٝٙیضٞ ؾیاضفا دٛػ ٚ ی٘بٔسد زؼىؿ ،ٖبٔسد صا یؿب٘ یبٞ
ز٘ٛفػ ٔ ی ذ٘دشٌ
ٜدص ٗیٕخس .
ٔ ی دٛؿ ٝو 65 صا ذكسد
ز٘ٛفػ سد ی٘بشػسبٕیث یبٞ
ای رلاب
ٜذحشٔ
،
ّٓیفٛیث ُیىـس بث بٞ
ٜدٛث طبجسسا سد
ّٓیفٛیث صا یؿب٘ یدبلشلا راسبؼخ ٚ ٝ٘بیِبػ بٞ
دساد شثسد ٝٙیضٞ سلاد دسبیّیٔ هی صا ؾیث (
4 .)
ٗیا سد
٘بٌسا ی
ٓؼ بٞ
، ی٘ٚشدا زیِبؼف صا یؿب٘ ّٓیفٛیث ذیِٛس
ٖاٛٙػ زحس
icaABCD
ٔ ی ذؿبث ٝو
ٟٓٔ
شس ی
ٗ یاشث ُٔبػ
یّدٚضٌا غىیشسبٔ ُیىـس یٌذٙجؼچ ُٔاٛػ صا ٚ یذیسبوبػ
یِّٛػ ٗیث
PIA1
زػا ( 3 .)
ٖط بٞ
ی ،icaA
،icaB
ٚ icaC
ظػٛس icaD
ػ ی
ٓشؼ بٞ
َششٙو یدذؼشٔ یٕیظٙس ی
ٔ ی ذ٘ٛؿ .
ٗیا ػ ی
ٓشؼ بٞ
ُٔبؿ یٕیظٙس ی بٍٕیػ ٚ SarA
.زػا B
ٖٚشدا ٓشؼیػ شث ٜٚلاػ
icaABCD
ٓشؼیػ ، سد ضی٘ agr
دساد ؾم٘ ّٓیفٛیث دبدیا (
4 .)
ٖط ٖبیٔ صا عٛوِٛ یبٞ
،ica
1Polysaccharide Intercellular Adhesin
ٚ icaA
د یششـیث ؾم٘ icaD
سد ٓیّفٛیث ُیىـس س
عٛئسٚا عٛوٛوّٛیفبشػا غیذیٔسذیدا عٛوٛوّٛیفبشػا ٚ
یصبث
یٔ
ذٙٙو ( 2 ، 4 .)
ز٘ٛفػ یلابث سبیؼث عٛیؿ ٝث ٝخٛس بث ی٘بشػسبٕیث یبٞ
صا یؿب٘
عٛوٛوّٛیفبشػا بٞ
ُٔاٛػ ؽششؼٌ ٗیٙچٕٞ ٚ
اضفا ی ؾ
ٜذٙٞد زٔٚبمٔ
ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى ی ، ٝؼِبغٔ ٗیا بث
فذٞ
فٛیث ُیىـس ٖاٛس یػسشث زٔٚبمٔ یٍِٛا ٗییؼس ٚ ّٓی
ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى ٗیا ی
ٛػ ی
ٝ بٞ
ذیػس ْبد٘ا ٝث .
شور قیقحت یفیكٛس ٝؼِبغٔ ٗیا -
یؼغمٔ
قلاخا ذو بث
IR. 1396. IAUC. 332127630
ٔلاػا داصآ ٜبٍـ٘اد سد ی
ػ ذحاٚ
ی
ٖبخش دشٌ ْبد٘ا ی
ذ .
ٕٝ٘ٛ٘
بٞ
ٝػ صا یٙیِبث ی ثی
ٖبشػسبٕ
بٔا( ٖاشٟس یؿصٛٔآ
ْ ٚ یشؼیشؿ ،یٙیٕخ )َبفعا یجع ضوشٔ
سد
ی٘بٔص ٜصبث هی 6
ٞبٔ
ٝ زـٟجیدسا یاذشثا صا بس
ٖبیبد شٟٔ
1395
غٕخ سٚآ .ذؿ ی
ٕٝ٘ٛ٘
بٞ
ُٔبؿ : غیبٔ ،ٓخص ،نشچ ،ساسدا ،ٖٛخ
َبمش٘ا صا غد .دٛث ٝؼثآ ٚ ظّخ ،یػبخ٘ یضغٔ
ٕٝ٘ٛ٘
بٞ
یٚس شث
سبٌآ ظیحٔ
ٖٛخ ساد ٜبٍـیبٔصآ ٝث )ٖبِٕآ ،نشٔ زوشؿ(
( دبٌسبػبد یسبمیمحس )ٖاشٟس سد غلاٚ
، یٔبٕس
ٕٝ٘ٛ٘
بٞ
ٜدبفشػا بث
صا زؼس بٞ
ٗییؼس ییبیٕیؿٛیث ٚ یىیطِٛٛیثٚشىیٔ دساذ٘بشػا ی
ّیٛٞ
.ذ٘ذؿ ز ػبؼح ی ز ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى ی
ٚس شث ی حٔ
ی ظ
ٞ شِٛٔ
ی
ٖٛشٙ
ٚ سبٌآ
د صا سبـش٘ا ؽٚس صا ٜدبفشػا بث ی
هؼ اشث ی ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ه بٞ
ی
ػاضٌا یّ
ی
ٗ ( 1µg
ػ ،) ی ػبؼوّٛفٚشذ ی
ٗ ( 5µg
ٙد ،) ی ػ یّ
ی
ٗ
( 10µg
سا ،) ی بٔٚشش ی ؼ ی
ٗ ( 15µg
بػاششس ،) ی
ّى ی
ٗ ( 30µg
،)
ٔآ ی ػبى ی
ٗ ( 30µg
بٔبشٙخ ٚ ) ی
ؼ ی
ٗ ( 10µg
عبػا شث )
بٔصآ دساذ٘بشػا ُٕؼِاسٛشػد ی
ٜبٍـ
ِبث ٚ ی
ٗ ( 5 ) صا ٜدبفشػا بث ٚ
َط صا سبـش٘ا ؽٚس
،
ٟس صا غد ی
ٝ
٘ زظّغ ی
ٓ هٔ
ذِٙسبف
،
ٚس شث ی
حٔ
ی ظ
ٞ شِٛٔ
ی
ٖٛشٙ
ؼ٘بذػٛػ .ذؿ ْبد٘ا سبٌآ ی
ٖٛ
ٟس ی
ٝ
ٜذؿ
ٝث ػٚ
ی
ّٝ
ششػا حآٛػ ی
ُ
ٝجٙد یا
،
ٚس ی حٔ
ی ظ
ٞ شِٛٔ
ی
ٖٛشٙ
سبٌآ
ٝث ٓواششٔ رسٛك زـو
ذؿ ٜداد
؛ د غذػ ی
هؼ یبٞ
ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى ی ششػا غٙد بث ی
ُ حٔ حغػ سد ی
ظ ساشل ٚ ٝشفشٌ
حٔ
ی ظ
ٝث زـو
ّذٔ
ر 24 - 18 بٔد سد زػبػ ی
37 ٝخسد
ش٘بػ ی داشٌ
.ذؿ ٜداد ساشل سٛسبثٛى٘ا سد زیبٟ٘سد
بٞ شغل ْذػ ِٝ
ٝث ذؿس ػٚ
ی
ّٝ
ِٛو ی غ
ٜصاذ٘ا
ٌ ی ش ی ذیدشٌ
. ٝؼِبغٔ ٗیا سد
عٛئسٚا عٛوٛوّٛیفبشػا 25923
عٛوٛوّٛیفبشػا ٚ ATCC
غیذیٔسذیدا 12228
ٝث ATCC
ٖاٛٙػ ٜدبفشػا زجثٔ َششٙو
.ذؿ
ٝیاذخ سد ّٓیفٛیث ُیىـس ییب٘اٛس دسٛٔ یبٞ
ػسشث ی ، بث
ذؿ ْبد٘ا زیّد ششیسٚشىیٔ ؽٚس
ٝیاذخ ؽٚس ٗیا سد .
ٞ صا غد ب
ظیحٔ سد زـو یٚبحTSB
5 / 0 ذكسد ضوٌّٛ
، هی
ٝ٘بجؿ صٚس
یبٔد سد 37
یش٘بػ ٝخسد یِبخ صا ذؼث .ذ٘ذؿ ٝثٛى٘ا داشٌ
ٖدشو
ربیٛشحٔ
هٞبچ بٞ
ٛـشؼؿ ٚ ی
٘آ بٟ
بث ،PBS
زیّدٚشىیٔ
بٞ
ٝث سٛع .ذ٘ذیدشٌ هـخ اٛٞ مشؼٔ سد ُٔبو ذؼث ّٝحٔ سد
ً٘س
ٔآ ی ض هی ِٝٛیٚ َبشؼیشو صا ٜدبفشػا بث ی د
ذكس .ذؿ ْبد٘ا
یِٕٛؼٔ ةآ صا ٜدبفشػا بث هٞبچ شٞ سد دٛخٛٔ ً٘س غذػ ٚ ذؿ ٜداد ٛـشؼؿ یاشث
ٜساٛید سد دٛخٛٔ ً٘س یصبػداصآ
ششوبث ی بٞ
ّٓیفٛیث ذِٛٔ ٝو یی
ٔ ی ذٙؿبث ، 100 ششیِٚشىیٔ
ُىِا ُیدٚشدٚضیا 10
ذكسد
ٝث
ٜٚلاػ َٛ٘بسا 70 ٝث ذكسد شٞ
.ذیدشٌ ٝفبضا هٞبچ بٟ٘سد
ی ز ً٘س
ٜذؿداصآ د سد هٞبچ شٞ س
َٛع جٛٔ
یسٛ٘
570 یػسشث اضیِا ٜبٍشػد صا ٜدبفشػا بث ششٔٛ٘ب٘
ظیحٔ صا .ذؿ یٚبح TSB
هی ضوٌّٛ ذكسد
ٝث
ٖاٛٙػ َششٙو
ٜدبفشػا ؽٚس ٗیا سد یفٙٔ
ذیدشٌ
. یاشث
ّحك صا ٖبٙیٕعا ز
سبو
، یاشث ای
ِٝٚض بٞ
ی دسٛٔ
ٝؼِبغٔ
3 شٞ یسٛ٘ ةزخ ٝجسشٔ
صا هی ای
ِٝٚض بٞ
، دسٛٔ
ػسشث شل ی ساذمٔ ٝجػبحٔ ؽٚس .زفشٌ سا
َٚذخ سد ٜٚشٌ شٞ یاشث ّٓیفٛیث ذیِٛس هی
ٝئاسا
ٜذؿ .زػا
لٍدج 1 -
ِقبط تیلپزتیتٍزکیه شٍر ِلیسٍ ِب نلیفَیب لیکطت يدٌب
لیکطت یياًاَت نلیفَیب باصً دح ىاشیه ِبساحه
سا لصاح جياتً
بذج زثكادح يیگًایه ( يرًَ
)OD
یٛل
OD>4*ODC2 OD>0.332
ظػٛشٔ
2*ODC<OD<=4*ODC 0.166<OD<=0.332
فیؼض
ODC<OD<=2*ODC 0.083<OD<=0.166
َبلسا ْذػ
OD<=0.083 OD<=0.083
؛یسٛ٘ یِبٍچ :OD ذیِٛس ٝث سدبل ٝو زػا زجثٔ َششٙو یسٛ٘ یِبٍچ ٖاضیٔ :ODC
یٔ ّٓیفٛیث یفٙٔ َششٙو( ذؿبث یفٙٔ َششٙو ٗیٍ٘بیٔ(+)3*SD
ODC:OD )
ٔٛ٘ط DNA
ی ششوبث یب یی ا بث و ُٕؼِاسٛشػد صا ٜدبفشػ ی
ز
ػ جاشخشػا ی
ٖطبٙ
(
Cinna Pure DNA KIT-PR881613
)
ا ،صشجِا(
ی
ٖاش
ٝث ) َٛلحٔ فّٛخ ٝخسد ٚ ذٔآ زػد
جاشخشػا
ٜذؿ
َٛع سد جٛٔ
260 ششٔٛ٘ب٘
، ٜبٍشػد صا ٜدبفشػا بث
س ششٔٛسٛفٚششىذػا یأ
ی ذ .ذؿ
زؼس
M-PCR
اشث ی بػبٙؿ یی
ٖط بٞ
ی ذو
ّٓیفٛیث ٜذٙٙو
ٚ icaA
بث icaD
ِاٛس صا ٜدبفشػا ی
بٞ
ی ِا ی سٛئّوٍٛ٘ٛ
ی ذ ی
اشد ی شٕ
بٞ
ی كبلشخا
ی :ُٔبؿ
'
icaA-F:5'-
ACACTTGCTGGCGCAGTCAA-3
ٚ
icaA-
R:5'-TCTGGAACCAACATCCAACA-3'
ٚ
icaD-F:5'-ATGGTCAAGCCCAGACAGAG-3'
ٚ
icaD-R:5'-AGTATTAATGTTTAAAGCAA-3'
َبٔشس ٜبٍشػد سد )ٖبِٕآ ،فسٚذٙدا( شّىیبػ
ٓدح سد
25
ٔی ى
ِٚش ی شش
ٚ ُٔبؿ ؾٙواٚ شٞ
200
ٔی
َٛٔٚشى
dNTP
،
10 دی
َٛٔٛى اشد شٞ صا ی
،شٕ
5 / 1 ٔ یّ
ی
ِ سد َٛٔ
ی شش
MgCl2
،
0 / 5 ض٘آ ذحاٚ
ی
ٓ ٚ Taq
50 ْشٌٛ٘ب٘
ٍِٛاDNA
ذیدشٌ ْبد٘ا .
ٝث
ٕعا َٛلح سٛظٙٔ
ی
ٖبٙ
اشد دشىّٕػ صا ی
،بٞشٕ
ِاٛس ی یبٞ
ِای سٛئّوٍٛ٘ٛ
ی ذ ی اشد ی بٞشٕ
بػ سد ی ز ،NCBI BLAST
ٚ ذؿ
ٗیا
ٌٝ٘ٛ
ِاٛس زحك ی
یبٞ
س ٜدبفشػا دسٛٔ
یأ ی ذ دشٌ
ی ذ . ظیاشؿ
ی ُٔبؿ ؾٙواٚ ٗیا سد ییبٔد ه
ػ ی
ُى 10 لد ی
ٝم یا سد
95
ٝخسد ؼّػ ی عٛ
ػاسٛسب٘د(
ی
ٖٛ
ِٚا ی
ٝ )،
غذػ 32 ػ ی
ُى
ُٔبؿ : زؿشػاٚ ّٝحشٔ
ٖذؿ 60
٘بث ی
ٝ سد 94 ؼّػ ٝخسد ی
،عٛ
َبلسا ّٝحشٔ
60
٘بث ی
ٝ سد 58 ؼّػ ٝخسد ی
عٛ
ّٝحشٔ ٚ
ٛع ی
ُ ٖذؿ هی لد ی
ٝم سد 72 ؼّػ ٝخسد ی
عٛ
ٚ سد بٟ٘
ی ز ی ه
ػ ی
ُى 10 لد ی
ٝم یا سد 72 ؼّػ ٝخسد ی
عٛ
دٛث رلاٛلحٔ .
شیثىس
ٝشفبی صا
ٖط سٛضح شظ٘
بٞ
ی شظ٘دسٛٔ
، صسٛفٚششىِا ْبد٘ا بث
ٚس شث ی صسبٌآ َط هی
ذكسد
ً٘س صا غد ٚ
ٔآ ی ض ی سا بث ی ذ ی
ْٛ
بٔٚشث ی ذ ػسشث ی .ذ٘ذؿ
هتفای اه داذؼس ٝؼِبغٔ ٗیا سد 117
ٗیِبث صا ٕٝ٘ٛ٘
، ٖبشػسبٕیث ٝػ صا
ٖاشٟس یؿصٛٔآ غٕخ
سٚآ ی ذیدشٌ
داذؼس ٗیا صا ٝو 20
دسٛٔ
تهواقه یوگلا تنآ
ي ب ي تو ي ك رد نليفويب ذيلوت و ي اي
هلوز اه ی سوئروا سوکوکوليفاتسا .... و
س ي ان اشه ي خ ينيها ثزهويک و ي
عٛوٛوّٛیفبشػا
عٛئسٚا (
09 / 17 ٚ )%
12 دسٛٔ
عٛوٛوّٛیفبشػا
غیذیٔسذیدا (
25 / 10 دٛث )%
. ربیئضخ
ٕٝ٘ٛ٘
بٞ
ٖآ داذؼس ٚ ٕٝ٘ٛ٘ زخا ُحٔ هیىفس ٝث
، َٚذخ سد 2
ئاسا ٜذؿ ٝ
.زػا داذؼس ٗیششٕو ٚ ٗیششـیث
ٛوّٛیفبشػا عٛو
عٛئسٚا ٚ
عٛوٛوّٛیفبشػا
غیٔسذیدا
، صا
ٕٝ٘ٛ٘
بٞ
یضغٔ غیبٔ ٚ ٓخص ی -
یػبخ٘
ٝث زػد
ٝؼِبغٔ ٗیا سد .ذ٘ذٔآ
، ظّخ صا یدسٛٔ چیٞ
اذخ
ٗیٙچٕٞ .ذـ٘
غیذیٔسذیدا عٛوٛوّٛیفبشػا ٕٝ٘ٛ٘ صا
CSF
ٝث زػد .ذٔبی٘
زٔٚبمٔ ٗیششـیث ٝو داد ٖبـ٘ حیبش٘
ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى ٚ ی
ث زیػبؼح
ٝ یٙد ٝث طٛثشٔ تیسشس ٚ ٗیؼیبٔٚششیسا ،ٗیّیػ
.دٛث ٗیػبىیٔآ
ٔ ؽٚس ی سٚشى ی شش
ّد ی ز
ٜصاذ٘ا عبػا شث یشیٌ
ةزخ ُو داذؼس صا ٝو داد ٖبـ٘ یسٛ٘
20
ِٝٚضیا عٛوٛوّٛیفبشػا
،عٛئسٚا 16
( ِٝٚضیا 80
ّٛٔ )%
ّٓیفٛیث ذِ
ذ٘دٛث
داذؼس ٗیا صا ٝو 12
،یٛل َبلسا ییب٘اٛس ِٝٚضیا 3
ِٝٚضیا
یب٘اٛس ٚ ظػٛشٔ َبلسا ی هی
اس فیؼض َبلسا ییب٘اٛس ِٝٚضیا
عٕٛدٔ صا .ذٙشؿاد 12
ِٝٚضیا غیذیٔسذیدا عٛوٛوّٛیفبشػا
، 6
( 50
ِّٛٔ ِٝٚضیا )%
ٛیث ذ س ٗیا صا ٝو ذ٘دٛث ّٓیف داذؼ
3 ِٝٚضیا
،یٛل َبلسا ییب٘اٛس 2
هی ٚ ظػٛشٔ َبلسا ییب٘اٛس ِٝٚضیا
.ذٙشؿاد اس فیؼض َبلسا ییب٘اٛس ِٝٚضیا حیبش٘
عٕٛدٔ صا ٝو داد ٖبـ٘ یِٛىِٛٔ ٖٛٔصآ صا ُكبح
یٔبٕس عٛئسٚا عٛوٛوّٛیفبشػا
،ٝؼِبغٔ زحس 15
ذخاٚ ِٝٚضیا
ٖط ٚد شٞ
ٚicaA
ی٘اٚاشف ٗیٙچٕٞ .ذ٘دٛثicaD
50 ذكسد صا
عٛوٛوٛیّفبشػا غیذیٔسذیدا
ٖط ٚد شٞ ذخاٚ
ٚicaA
ٚicaD
ٖط ذخاٚ ِٝٚضیا هی ُىؿ( دٛثicaD
1 .)
لٍدج 2 -
ًاٍازف ی فاتسا ی سَكَكَل ٍ سَئرٍا فاتسا
ی سَكَكَل پا ی هرد ی د ي س ادج کفت ِب ُدض ی
ک
ًَِوً عًَ
اّ
فاتسا ی سَكَكَل
سیهردیپا سَئرٍاسَكَكَلیفاتسا لك دادعت ًَِوً عًَ
2 ( 52 / 9
)% )%19/04 (4 21 ٖٛخ
4 ( 42 / 11
)% )%17/14 (6 35 ٓخص
2 ( 33 / 13
)% )%20 (3 15 ساسدا
1 ( 66 / 6
)% )%13/33 (2 15 نشچ
- - 7 ظّخ
- )%20 (1 5 CSF
3 ( 78 / 15
)% )%21/05 (4 19 ٝؼثآ
12 ( 25 / 10
)% )%17/09 (20 117 ُو غٕخ
لٍدج 3 -
ّیساسح صجٌس جياتً
یتًآ ت
ِيَس یکیتَیب سيدیهردیپا ٍ سَئرٍا سَكَكَلیفاتسا ياّ
مٍاقه ساسح ِویً ساسح
یتًآ کیتَیب فاتسا
ی سَكَكَل
سیهردیپا
فاتسا ی سَكَكَل
سَئرٍا
سا فات ی سَكَكَل
سیهردیپا
فاتسا ی سَكَكَل
سَئرٍا
فاتسا ی سَكَكَل
سیهردیپا
فاتسا ی سَكَكَل
سَئرٍا 10
( 25 / 31
)% )%62/5 (20 )%6/25 (2 - - - ٗیّیػیٙد
8 ( 25
)% )%40/62 (13 - )%9/38 (3 )%12/5 (4 )%12/5 (4 ٗیّیػاضٌا
4 ( 5 / 12
)% )%12/5 (4 )%15/63 (5 )%21/88 (7 )%9/38 (3 )%28/13(9 ٗیؼیٔبشٙخ 5
( 63 / 15
)% )%25 (8 )%15/63 (5 )%15/63 (5 )%6/25 (2 )%21/88 (7 ٗیّىیبػاششس 10
( 25 / 31
)% )%28/13 (9 )%6/25 (2 )%28/13 (9 - )%6/25 (2 ٗیؼیبٔٚششیسا
3 ( 38 / 9
)% )%18/75 (6 )%12/5 (4 )%25 (8 )%15/63 (5 )%18/75 (6 ٗیػبؼوّٛفٚشذیػ 2
( 25 / 6
)% )%9/38 (3 )%21/88 (7 )%25 (8 )%9/38 (3 )%28/13 (9 ٗیػبىیٔآ
لکض 1 - تلاَصحه سرَفٍزتکلا لص جياتً
ىص PCR ٍ icaA
ِب icaD تبثه لزتٌك ُازوّ
سَكَكَلیفاتسا سيدیهردیپا
ATCC 12228 .زطقه بآ یفٌه لزتٌك ،
هٞبچ 1 عٛوٛوّٛیفبشػا ؛ هٞبچ ،عٛئسٚا
2 ٚ 3 ،
غیذیٔسذیدا عٛوٛوّٛیفبشػا
ب جح ییب٘اٛس عٛوٛوّٛیفبشػا
بٞ
ّٓیفٛیث ُیىـس سد بٞ
ٝث ،
ٜذ٘ص هٕو ٖبثضیٔ ظیحٔ سد یششوبث ٖذ٘بٔ
ٔ ی ذٙو ٜصٚشٔا .
ّٓیفٛیث
ٝث
ٖاٛٙػ
ٗٔضٔ ُیلاد صا یىی ز٘ٛفػ ٖذؿ
یبٞ
یىؿضذٔاد سد ٓٞ ٚ یىؿضد سد ٓٞ یوٛوّٛیفبشػا حشغٔ
ٜذؿ
زػا . یّدٚضٌا ؾؿٛد یذیسبوبػ
ٜذٙٙوسٛلحٔ
ّٓیفٛیث
، تجػ
سٛجػ ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ه بٞ
ٝدیش٘سد ٚ ّٓیفٛیث غىیشسبٔ ٖٚسد ٝث
ٚشث ص زٔٚبمٔ
ٔ ی ددشٌ
( 3 .)
سد
ٝؼِبغٔ
ا َبػ سد ٝو ی 2009
ظػٛس ذّٙٞ سٛـو سد
Croes
شث ٜٚلاػ ،زفشٌ ْبد٘ا ٖاسبىٕٞ
وأس ی ذ دسٛٔ سد
ؽششؼٌ
زٔٚبمٔ
بٞ
سد ٝ٘بٌذٙچ ی
ٕٝ٘ٛ٘
بٞ
ی٘ٛفػ ی شث ،
سد ّٓیفٛیث ذیِٛس ییب٘اٛس 60
ا ذكسد ص
ای
ِٝٚض بٞ
ی
عٛوٛوّٛیفبشػا
ٜسبؿا
ٜذؿ ٝو زػا
ٝث سٛع حیبش٘ ٝثبـٔ یجیشمس
شضبح ٝؼِبغٔ صا ُكبح
ٔ ی ذؿبث شث ٜٚلاػ ٝو وأس
ی ذ ذیِٛس شث
ّٓیفٛیث
، شث اضفا ی ؾ زٔٚبمٔ
ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى سد ی
ٕٝ٘ٛ٘
بٞ
ی٘ٛفػ ی
دساد ٜسبؿا ضی٘
( 9 .) ظػٛس ٝو یشٍید ٝؼِبغٔ سد
Namvar
ٚ
َبػ سد ٖاسبىٕٞ
2013 صا ،ذیدشٌ ْبد٘ا 60
ٝیاذخ
عٛئسٚا عٛوٛوّٛیفبشػا صا ٜدبفشػا بث ،
ؽٚس بٞ
زیّدٚشىیٔ ی
ظیحٔ شث زـو ٚ ٖٛیػاششیس دس ٍٛٙو
،سبٌآ 65 صا ذكسد
ای
ِٝٚض بٞ
ّٛٔ
ؾٞٚظد حیبش٘ ٝثبـٔ ٝو ذ٘دٛث یٛل ّٓیفٛیث ذِ
شضبح
،
ٝث سٛع دذدٔ
یلابث عٛیؿ ذٞبؿ عٛوٛوّٛیفبشػا
یبٞ
ّٛٔ
ٓیشؼٞ ّٓیفٛیث ذِ
( 7 . ) ٝؼِبغٔ سد
Iorio
َبػ سد ٖاسبىٕٞ ٚ
2011
، ٖبیٔ صا 47
ٝیاذخ عٛوٛوّٛیفبشػا عٛئسٚا
صا ٜذؿاذخ
ٖٛخ
، 25
ّٓیفٛیث یذیسٛٙف قیخـس ؾیبٔصآ سد ٝیاذخ
، صا شظ٘
دٛث زجثٔ ّٓیفٛیث ذیِٛس بٔا ؛
ٝؼیبمٔ سد بث
شضبح ؾٞٚظد حیبش٘
اس یدبیص رٚبفس داد ٖبـ٘
یٔ ٝو ث ذ٘اٛس
ٝ رٚبفشٔ ُیِد دٛث
ٖ
غجٙٔ
ضی٘ ٚ ذؿبث ٕٝ٘ٛ٘ یبیفاشغخ (
8 .) ٝؼِبغٔ سد ٚ Gad
ٖاسبىٕٞ
َبػ سد 2009
صا ٝو ذؿ ٜداد ٖبـ٘
18 ٝیاذخ
عٛوٛوّٛیفبشػا عٛئسٚا
ٜذؿاذخ
ٖبؼ٘ا یساسدا یبٞذ٘ٛػ صا ،
15 ( ٝیاذخ 83 ّٓیفٛیث ُیىـس )%
ذ٘داد داذؼس ٗیا صا ٚ 53
ذكسد
،یٛل ّٓیفٛیث 23
ٚ ظػٛشٔ ّٓیفٛیث ذكسد 7
یث ذكسد ّٓیفٛ
ُیىـس ٘ ذ٘داذ . ٝؼِبغٔ حیبش٘
حیبش٘ ٝثبـٔ ضی٘ ٖاسبىٕٞ ٚGad
،شضبح ؾٞٚظد
ٝیاذخ یلابث سبیؼث ییب٘اٛس شٍ٘بیث یبٞ
عٛوٛوّٛیفبشػا عٛئسٚا
ّٓیفٛیث ذیِٛس سد
ٔ ی ذؿبث ( 3 ).
شضبح ٝؼِبغٔ سد یٔبٕس
ٛػ ی
ٝ بٞ
ّٛٔ ی
ّٓیفٛیث ذِ
، شٞ یاساد
ٖط ٚد ٚ icaA
خشث ٝشفبی ٗیا .ذ٘دٛث icaD
فلا یخشث
ؽساضٌ
بٞ
سد ٝو زػا بدٚسا ٚ بیػآ صا
ٖآ بٞ
ٖبیٔ ُٔبو قبجغ٘ا
ّٓیفٛیث ُیىـس
ٝث ؽٚس بٞ
ّٕو ی خیبسٛ٘ط ٚ یفیو ٚ ی
٘آ
ٟ ب
زػا ٜذـ٘ زفبی (
2 ، 9 ) ؛ ؽساضٌ صا یخشث سد بٔا بٞ
،
ٚد شٞ
ٖط
ٚ icaA
ٖبیٔ سد icaD
100 ذكسد
ٛػ ی
ٝ بٞ
ّٛٔ ی ّٓیفٛیث ذِ
تهواقه یوگلا تنآ
ي ب ي تو ي ك رد نليفويب ذيلوت و ي اي
هلوز اه ی سوئروا سوکوکوليفاتسا .... و
س ي ان اشه ي خ ينيها ثزهويک و ي
ؽساضٌ
ٜذؿ ذ٘ا ( 3 ، 10 .) ی
ٝشفب بٞ
شضبح ؾٞٚظد ی ؤٔ
ّی ذ
زیٕٞا
ٖط بٞ
ی ٚ icaA
سد ّٓیفٛیث ُیىـس سد icaD
عٛوٛوّٛیفبشػا عٛئسٚا
ی شث كجغٙٔ ٝو زػا
ٝشفب بٞ
ی
ربؼِبغٔ
ٖاسبىٕٞ ٚ Gad
ٚ
Arciola
ٖاسبىٕٞ ٚ زػا
( 3 ،
6 ).
هجیتن يریگ عٛئسٚا عٛوٛوّٛیفبشػا ،
ّٕٝخصا ششوبث ی بٞ
ٝو زػا یی
سد ؾخث بٞ
ی زجلاشٔ
بٞ
یث ٜظیٚ ی
ٝث ٖبشػسبٕ
ذیِٛس ُیِد
ّیٕٞا صا ّٓیفٛیث ز
ٚی
ٜظ ا سٛخشث ی زػا ساد
. ؾیاضفا ٝث ٝخٛس بث
زٔٚبمٔ
ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى یلابث ییب٘اٛس ضی٘ ٚ یششوبث ٗیا سد ی ٖآ
ّٓیفٛیث ُیىـس سد
، یششوبث ٗیا ٔ
ی ذ٘اٛس ؾیاذید سد
ز٘ٛفػ ٚ ٗٔضٔ یبٞ
ٕٞ
ٙچ ی
ٗ دبدیا
ٛػ ی
ٝ بٞ
ی ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى ی زیٕٞا ٝ٘بٌذٙچ
ٚی
ٜظ ا یا ؽششؼٌ .ذؿبث ٝشؿاد ی
ِٝٚض بٞ
ی
ششوبث یب یی
ِٛس ی ذ ث ٜذٙٙو ی فٛ
ی
ّٓ
بث زٔٚبمٔ
بٞ
ی ش٘آ ی ث ی سٛ
ی ى ی
ٓیدٛث ٖآ ذٞبؿ ؾٞٚظد ٗیا سد ٝو ٝ٘بٌذٙچ
،
ٔ ی ذ٘اٛس
ٝث
ٖاٛٙػ
ّذخ شغخ ث ی
ٚ ٜذؿ ةٛؼحٔ ٖاسبٕیث یاش دساٛٔ ؾیاضفا ثػبث
يشٔ
ٚ ٔ ی ش سد ثی
ٖبشػسبٕ
بٞ
.ددشٌ
رکشت و ریدقت ذث ی
ٗ ػٚ
ی
ّٝ
ا
ٔبٕس ص ی ث ٖبٙوسبو ی
ٖبشػسبٕ
یبٞ
ٕخ ْبٔا یٙ
ی
،
شؿ ی شؼ ی جع ضوشٔ ٚ ی
غٕخ سد اس بٔ ٝو َبفعا سٚآ
ی
ٕٛ٘
ٝ٘
بٞ
ی
ؾٞٚظد ٗیا شضبح
ی سب ی
ٙچٕٞ ٚ ذ٘ذ٘بػس ی
ٗ صا ٚ ٖبٙوسبو
بٔصآ ُٙػشد ی
ٜبٍـ محس ی سبم ی دبٌسبػبد
، ذمس ی ش
ٔ شىـس ٚ ی
ددشٌ
.
:عبانم
1-Vázquez-Sánchez D, Rodríguez-López P. Biofilm Formation of Staphylococcus aureus. In: Fetsch A.
Staphylococcus aureus. London(United Kingdom): Elsevier – Academic Press; 2018. pp: 87-103.
2- Petrelli D, Repetto A, D’Ercole S, Rombini S, Ripa S, Prenna M, et al. Analysis of meticillin-susceptible and meticillin-resistant biofilm-forming Staphylococcus aureus from catheter infections isolated in a large Italian hospital. J Med Microbiol. 2008;57(3):364–72.
3- Gad GF, El-Feky MA, El-Rehewy MS, Hassan MA, Abolella H, El-Baky RM. Detection of icaA, icaD genes and biofilm production by Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis isolated from urinary tract catheterized patients. J Infect Dev Ctries. 2009;3(5):342–51.
4- de Silva GD, Kantzanou M, Justice A, Massey RC, Wilkinson AR, Day NP, et al. The ica Operon and Biofilm Production in Coagulase-Negative Staphylococci Associated with Carriage and Disease in a Neonatal Intensive Care Unit. J Clin Microbiol. 2002 18;40(2):382–8.
5- CLSI. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing. 27th ed. CLSI supplement M100. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2017.
6- Arciola CR, Baldassarri L, Montanaro L. Presence of icaA and icaD Genes and Slime Production in a Collection of Staphylococcal Strains from Catheter-Associated Infections. J Clin Microbiol. 2001;39(6):2151–6.
7- Namvar AE, Asghari B, Ezzatifar F, Azizi GR. Detection of the intercellular adhesion gene cluster (ica) in clinical Staphylococcus aureus isolates. GMS Hyg Infect Control. 2013; 8(1): Doc03.
8- Iorio NLP, Lopes AP da CN, Schuenck RP, Barcellos AG, Olendzki AN, Lopez GL, et al. A combination of methods to evaluate biofilm production may help to determine the clinical relevance of Staphylococcus in blood cultures.
Microbiol Immunol. 2011; 55(1): 28–33.
9- Croes S, Deurenberg RH, Boumans ML, Beisser PS, Neef C, Stobberingh EE. Staphylococcus aureus biofilm formation at the physiologic glucose concentration depends on the S. aureus lineage. BMC Microbiol. 2009; 9: 229.
10- Mirzaee M, Peerayeh SN, Ghasemian AM. Detection of icaABCD genes and biofilm formation in clinical isolates of methicillin resistant Staphylococcus aureus. Iran J Pathol. 2014; 9(4): 257–62. [Persian]
