دزی یقودص دیهش یکشزپ مولع هاگشناد یشهوژپ یملع هلجم

(1)

نیزه یگزتس ىاربکوّ ٍ

ُربوش ،نشش ٍ تسيث ُرٍد جٌپ

، دادزه 1397 :شزیذپ خیربت

2 / 4 / 1397

هعلبطم مه ربمیت رثا یهبگشیبمزآ

لًىفسیب نبمز  هیمبتیي ي A

رب C

یتسیز ییبواًت ي

لًلس کیوشًئتسا سیبمت میشواسم یدبیىب یبه

ی سغم

غلبب تر ناًختسا

یًبجًزْه یًبويلس کله

*

یذٌثرد ِوطبف ،1

،2

تادبسبٌتآ یويظػ

3

یشٍّضپ ِلبقه

:ِهذقه

َٛٙفغیث

َبىیدار ذیِٛت كیزى ساA

داسآ یبٞ

، یصِٛٛفرٛٔ

، ٚ یتغیس ییب٘اٛت

َّٛع شیبٕت تر ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

(rMSCs)

تعلاثٛئتعا ٝث یٔ ُتخٔ ار

ذٙو

ٗیٔبتیٚ . یٛل ت٘اذیغوا یت٘آ هی C

َّٛع سا ٚ تعا ُثبمٔ رد بٞ

طزتعا ٛیتاذیغوا

یٔ تظفبحٔ

.ذٙو فذٞ

ٝؼِبئ ٗیا سا

ٓٞ ربٕیت زثا یعرزث

َٛٙفغیث ٖبٔس

ٗیٔبتیٚ ٚA

ٝثC

یت٘آ هی ٖاٛٙػ

ت٘اذیغوا یتغیس ییب٘اٛت زث

هی٘صٛئتعا شیبٕت ٚ

rMSCs

.دٛث

:یسرزث شٍر یثزدت ٝؼِبئ ٗیا رد

rMSCs

ٜٚزٌ ربٟچ ٝث

َٛٙفغیث ،َزتٙو (A

200

َٛٙفغیث ،)رلاٛٔٛ٘ب٘

(A

200 +)رلاٛٔٛ٘ب٘

ٗیٔبتیٚ

C

( 300

ٚ )رلاٛٔٚزىیٔ

ٗیٔبتیٚ

( C

300 )رلاٛٔٚزىیٔ

ٚ ذؽ ٓیغمت تذٔ یازث

21 ظپع .ذؽ ربٕیت ،هی٘صٛئتعا تؾو ویحٔ رد ،سٚر

یٍتغىؽ ٚ هیصِٛٛفرٛٔ تازییغت ،هی٘صٛئتعا شیبٕت ،یتغیس ییب٘اٛت

َّٛع رد DNA

ٜٚزٌ یبٞ

.تفزٌ رازل یثبیسرا درٛٔ فّتخٔ یبٞ

ٜداد بٞ

بث شیِب٘آ ػٚر یربٔآ

ظ٘بیراٚ

هی ٝفزى تغت ٚ

Tukey

ٗیٍ٘بیٔ تٚبفت ٚ ُیّحت ٚ ٝیشدت حيع رد بٞ

P<0.05

یٙؼٔ

رد راد زظ٘

.ذؽ ٝتفزٌ

:جیبتً

یٙؼٔ ؼٞبو

ٗیِبىِآ ٓیش٘آ تیِبؼف ،ی٘اٛختعا ظىیزتبٔ ٖذؽ ی٘ذؼٔ ٖاشیٔ ،بِّٟٛع یتغیس ییب٘اٛت رد یراد ٚ سبتبفغف

تظّغ

ُخاد ٓیغّو یِّٛع

(

P< 0/001

ٓٞ ٚ )

ُثبل ؼیاشفا ٗیٙچ

یٍتغىؽ رد یٟخٛت

َّٛع رد ،DNA

َٛٙفغیث ٜٚزٌ یبٞ

ٜٚزٌ ٝث تجغ٘A

ذؽ ٜذٞبؾٔ َزتٙو .

َٛٙفغیث ٜٚزٌ رد ،قٛف یبٞزتٔاربپ +A

ٗیٔبتیٚ

ٝث تجغ٘C

َزتٙو ٜٚزٌ

تٚبفت

یٙؼٔ

تؽاذ٘ یراد

(p> 0/05)

.

ِجيتً

:یزيگ ٗیٔبتیٚ ٝو داد ٖبؾ٘ ؼٞٚضپ ٗیا سا ُفبح حیبت٘

َٛٙفغیث ةّٛئب٘ تازثا تعا ردبل C

شیبٕت ٚ یتغیس ییب٘اٛت زث ارA

هی٘صٛئتعا

rMSCs

.ذٙو ٖازجخ

ُصاٍ

:یذيلک یبّ

َٛٙفغیث

ٗیٔبتیٚ ،A

َّٛع ،C

هی٘صٛئتعا شیبٕت ،تر ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

:عبجرا

ی٘بد٘زٟٔ ی٘بٕیّع هّٔ

، ،ٕٝىبف یذٙثرد تادبعبٙتآ یٕیظػ

. نّ ربويت زثا یّبگشیبهسآ ِؼلبطه لٌَفسيث ىبهس

ييهبتیٍ ٍA یتسیس ییبًاَت زثC

لَلس کيًصَئتسا شیبوت ٍ ويشًاشه یدبيٌث یبّ

ی غلبث تر ىاَختسا شغه .

یلٚذف ذیٟؽ یىؽشپ ّْٛػ ٜبٍؾ٘اد یؾٞٚضپ یّٕػ ّٝدٔ

دشی 1397 ؛ 26 ( 5 :)

62 - 450

1 - دبتسا

، يارتکد تفبب و

،یسبنش نینج هورگ

تسیز

،یسبنش كارا هبگشناد ناریا ،كارا ،

2 - سبنشربک دشرا تسیز

،يرونبج یسبنش یلولس

،ینیوکت- هورگ تسیز

،یسبنش هبگشناد كارا ناریا ،

3 - . وجشناد يرتکد تسیز

،يرونبج یسبنش یلولس

،ینیوکت- هورگ تسیز

،یسبنش هبگشناد كارا ناریا ،

(*

؛)لوئسم هدنسیون :نفلت

19181617198 یکینورتکلا تسپ ،

[email protected]:

، دک : یتسپ 8349 - 8 - 38156

[ Downloaded from jssu.ssu.ac.ir on 2024-05-22 ]

(2)

تبهذخ ٍ یکششپ مَلػ ُبگشًاد ِلجه دشی یقٍذص ذيْش یًبهرد ـ یتشاذْث

ٍ تسيث ُرٍد نشش

ُربوش ، جٌپ ، دادزه 1397

451

ِهذقه

َّٛع

ٕیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

ی ٗوبع سبغ٘ٛخزیغ َّٛع یػٛ٘ ،

تفبث زٍید سا یخزث ٚ ٖاٛختعا شغٔ رد تفبث ذٙ٘بٔ ،ٖذث یبٞ

ٗیا .ذ٘راد یتعلاثٚزجیف ٝجؽ یصِٛٛفرٛٔ ٝو ذٙتغٞ یثزچ

َّٛع بٞ

دٛخ ییب٘اٛت ٗتؽاد بث یٔ ،ییاسٛ٘

ٝث ذٙ٘اٛت

ٜدر یبٞ

.ذٙثبی شیبٕت هی٘صٚرذٙو ٚ هی٘صٛپیدآ ،هیتعلاثٛئتعا یِّٛع تٟخ شیبٕت

َّٛع راد ٝث ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

ٖآ سا ٜدبفتعا یازث ،تعلاثٛئتعا

ٖبٔرد ٝؼعٛت رد بٞ

ذیذخ یبٞ

یٔ یتبیح ربیغث تفبث یسبعسبث رد ار یٕٟٔ ؼم٘ ٚ ذؽبث

یٔ بفیا ٜذید ٝٔذف ٖاٛختعا ذٙو

( 1 )

.

ٜٚزٌ كزؼٔ رد ٜرإٛٞ ٖبغ٘ا ،ی٘ٛٙو یتؼٙف غٔاٛخ رد یٙیزوٚذ٘ا ةزخٔ ٝو دراد رازل ییبیٕیؽ تبجیوزت سا یٌرشث

ٜدٛث یٔ شیر ٖٚرد دذغ دزىّٕػ رد َلاتخا ثػبث ٚ ذ٘ٛؽ

( 2 .)

َٛٙفغیث

A (BPA)

ٖاٚازف سا یىی ةزخٔ ٗیزت

یٙیزوٚذ٘ا یبٞ

هیتعلاپ ٚ یغوٛپا ٗیسر تلاٛقحٔ تخبع رد ٝو تعا یبٞ

یّپ یزيث ّٕٝخ سا تبٙثزو بٞ

یراذٍٟ٘ فزظ ،ٝچث ٝؾیؽ ،ةآ ی

اذغ یزيث ،یىؽشپ یبٞ ٜبٍتعد ،یترازح ذغبو ، ُثبل یىیتعلاپ یبٞ

یىٛل یّخاد ؼؽٛپ ،تفبیسبث ی٘ذیٔبؽآ ٚ ییاذغ داٛٔ یبٞ

( 3

،)

ٖاذ٘د داٛٔ

یسبع

( 4 تخبع ،)

Digital Video Disc (DVD)

ٚ

ةبجعا یسبث

ٖبودٛو یبٞ

( 5

َٛٙفغیث .دراد دزثربو ) ٚ بٔد ردA

PH

ٚ قاشث ،تعٛپ ٚ اٛٞ ،اذغ ،ةآ دراٚ ٚ داسآ تلاٛقحٔ ٗیا سا ،ؿبخ ٖاراذ٘بخ ٖٛخ

یٔ

ٚ اذغ فزقٔ كیزى سا ٝ٘اسٚر شی٘ ٖبغ٘ا .دٛؽ

ی٘ذیٔبؽآ غیث ٝث ٜدِٛآ یبٞ

َٛٙف

ٓٞ ٚ A

یٌدِٛآ ٗیٙچ

یبٞ

یتؼٙف یٔ رازل یيیحٔ تغیس ٜذٙیلاآ ٗیا كزؼٔ رد دزیٌ

( 3 .)

َٛٙفغیث زٍید ٗیممحٔ وعٛت ٝتفزٌ ترٛف تبؼِبئ كجى سا A

َبىیدار ذیِٛت ؼیاشفا كیزى یبٞ

ٓتغیع تبجیوزت ؼٞبو ٚ داسآ

یت٘آ ٚ ٛیتاذیغوا طزتعا یبمِا ثػبث ٖذث یت٘اذیغوا ییب٘اٛت ؼٞبو

یسٛتپٛپآ یِّٛع يزٔ ؼیاشفا ٚ شیبٕت ٚ یتغیس

یٔ

( دٛؽ 6 )

ت٘اذیغوا یت٘آ زٍید یٛع سا بث ٝو ذٙتغٞ یتبجیوزت بٞ

ِٛٛیشیف یبٞذٙیآزف رد توزؽ ،َّٛع ییبیٕیؽٛیث ٚ یىیص

َبىیدار ؼٙواٚ سا ٚ َبؼفزیغ ار داسآ یبٞ

ٖآ ییبیٕیؽ یبٞ

بٞ

یٔ یزیٌّٛخ ذٙٙو

( 7

ٗیٔبتیٚ .) )هیثرٛىعآ ذیعا( C

، هی

یت٘آ یٔ ةآ رد َّٛحٔ یٛل ت٘اذیغوا تظّغ رد ٝو ذؽبث

یبٞ

َّٛع سا ،یىیصِٛٛیشیف تیعآ ُثبمٔ رد بٞ

سا یؽب٘ یِّٛع یبٞ

یٔ تظفبحٔ ٛیتاذیغوا طزتعا ذٙو

( 8 سا بث ٗیٔبتیٚ ٗیا .)

ٜذؽ ٜذیغوا تؾٌزث ُثبل رٛى ٝث ٖٚزتىِا هی ٖداد تعد

ٚ

دزىّٕػ سا یداذؼت رد ٓغی٘بىٔ ٗیا یبٞ

تحت َّٛع یتظفبحٔ

یىیصِٛٛیشیف ویازؽ تیعآ سا تؼ٘بٕٔ ّٕٝخ سا

سا یؽب٘ DNA

یعاذیغوا

ٚ ٖٛ

ذیپیِ سا تظفبحٔ

سا یؽب٘ تیعآ ُثبمٔ رد بٞ

ٛیتاذیغوا زٞبظ

یٔ

دٛؽ ( 8،9 ) .

َٛٙفغیث یتیغیغوٛتٛتیع زثا ٝچزٌا

ٓٞ ٚ A

زثا ٗیٙچ

یت٘آ

ٗیٔبتیٚ یت٘اذیغوا

٘صٛئتعا شیبٕت ،یتغیس ییب٘اٛت زث C

هی

َّٛع ظیسٛتپٛپآ ٚ

َّٛع ّٕٝخ سا یفّتخٔ یبٞ

یدبیٙث یبٞ

( تعا ٝتفزٌ رازل یعرزث درٛٔ یجقػ 10،11

) دٛخٚ بث یِٚ ،

َّٛع دبیس ربیغث تیٕٞا

ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

ٚ

ٖآ ییب٘اٛت بٞ

َّٛع ٝث شیبٕت رد تبؼیبم ٓیٔزت ٚ ی٘اٛختعا یبٞ

ٓٞ زثا ٖٛٙوبت ،ی٘اٛختعا ٖبٔس

َٛٙفغیث

ٗیٔبتیٚ ٚA

شیبٕت زثC

َّٛع ٗیا هی٘صٛئتعا .تعا ٜذؾ٘ ػراشٌ بٞ

ٚ غٔاٛخ ٖذؽ یتؼٙف ٝث ٝخٛت بث ٗیازثبٙث دزثربو

ٜدزتغٌ

َٛٙفغیث ذیذٟت ٚ ییاذغ ٜزید٘س ٚ تؼٙف رد A

ٓٞ ٚ ٖبغ٘ا تٔلاع

َّٛع یلابث ُیغ٘بتپ ٗیٙچ

یدبیٙث یبٞ

شیبٕت رد ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ

ٜدر ٝث یبٞ

یِّٛع فّتخٔ

دزثربو ٚ بت ٓیذؽ ٖآزث ،یىؽشپ رد بٞ ٖآ

ٗیٔبتیٚ زثا ار C

ی ٖاٛٙػ ٝث یت٘آ ه

تازثا سا یزیٌّٛخ رد ت٘اذیغوا

َٛٙفغیث ةّٛئب٘

شیبٕت ٚ یتغیس ییب٘اٛت زث A

هی٘صٛئتعا

درٛٔ غِبث تر ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ َّٛع .ٓیٞد رازل ٝؼِبئ ٚ یعرزث یسرزث شٍر

لَلس تشک ٍ یسبساذج ىاَختسا شغه یبّ

ٗیا رد

ٝؼِبئ

یثزدت تر سا یبٞ

ز٘

داض٘

Wistar

ٗع بث

یجیزمت 50 یسار ٝغعٛٔ سا زظ٘ درٛٔ ٖاٛیح .ذؽ ٜدبفتعا سٚر

دراذ٘بتعا ویازؽ تحت نارا ٜبٍؾ٘اد تب٘اٛیح ٝ٘بخ رد ٚ ٝیٟت ( رٛ٘

12 ،یئبٙؽٚر تػبع 12

( بٔد ،)یىیربت تػبع

±3 27

ٝخرد

دازٌ یت٘بع )ةآ ٚ تّپ( ٝیذغت ٚ )

، .ذؽ یراذٍٟ٘

(3)

لٌَفسيثزثا ييهبتیٍ ٍA

تر ىاَختسا زغه یويشًاشه یدبيٌث یبْلَلسزثB

دشی یقٍذص ذيْش یًبهرد ـ یتشاذْث تبهذخ ٍ یکششپ مَلػ ُبگشًاد ِلجه ٍ تسيث ُرٍد

نشش ُربوش ، جٌپ ، دادزه 1397

452

ٚ ٖار یبٞ ٖاٛختعا ٚ ٜذؽ ػٟٛیث زتا ُیتا ید بث بٞ تر یسبغوبپ سا ظپ ٚ اذخ بٞ ٖآ یبپ قبع تفبث

ُقتٔ یذ٘ٛیپ یبٞ

ٖاٛختعا ٝث

، یٚبح ٖٛىِبف ِِٝٛ ٝث زتیِ یّیٔ حٙپ

تؾو ویحٔ

DMEM (Germany, Gibco, Dulbecco`s Modified Eagles

Medium)

ُٕػ یى ٖاٛختعا شغٔ ظپع ٚ ُمتٙٔ

Flashout

ُٔبو تؾو ویحٔ یٚبح ٖٛىِبف ِِٝٛ ُخاد ٝث ٚ جربخ (

15 %

FBS (DMEM+

ییٚر غیبٔ ،صٛیفیزت٘بع سا ظپ .ذؽ ٜداد َبمت٘ا

ٝث ٜسبت تؾو ویحٔ زتیِ یّیٔ هی ٖدزو ٝفبما سا ذؼث ٚ جربخ عر یٚبح تؾو ویحٔ .ذؽ ْبد٘ا صبتپیپ ُٕػ ،یِّٛع ةٛ

تؾو یبٞ هعلاف ٝث ،َّٛع رد بٞ هعلاف ٚ ُمتٙٔ T25

ویازؽ بث رٛتبثٛى٘ا

CO2

5 تثٛىر ،%

88 یبٔد ٚ % 37

ٝخرد

َّٛع تؾو ویحٔ .ذؽ ٝثٛى٘ا دازٌ یت٘بع زٞ بٞ

3 ربث هی سٚر

َّٛع ٓوازت ٝو یٔبٍٙٞ ٚ ذؽ لیٛؼت ؼیث هعلاف فو رد بٞ

سا 80

َّٛع ،ذؽ ذفرد هٕو بث ٚ صبعبپ ُٕػ یى بٞ

Trypsin/EDTA

25 ٝث ٚ اذخ هعلاف فو سا ذفرد

هعلاف ؿّٛخ ٖذٔآ تعد ٝث یازث .ذؽ ُمتٙٔ ذیذخ یبٞ

95 - 90 بت ُلاذح ،ذفرد 3

رازىت صبعبپ ّٝحزٔ

ذیدزٌ

.

شیغٔ سا ٜذیؽ جازختیعا یبیٞ َّٛیع ٖدٛیث ٓییؾ٘اشٔ تبجثا :ٖاٛختعا یعرزث سا

شیبٕت ی٘صٛپیدآ ٚ هی٘صٛئتعا ه

َّٛیع ٚ بیٞ

َّٛع رد یحيع یبٞزوربٔ ٖبیث یٍٍ٘ٛچ ٜذیؽ جازختیعا یبٞ

،غِبث تر ٖاٛختعا شغٔ سا تیٟخ ،یِاٛیتٔ صبیعبپ ٝع یى سا ظپ

تبجثا

ٓیؾ٘اشٔ

ٖدٛث بٞ َّٛع صبیعبپ یبیٞ َّٛیع .ذؽ ٜدبفتعا

شیبٕت یعرزث رٛظٙٔ ٝث ْٛع

، تؾو تیّپ ٚد رد ذؽ ٜداد

ٚ ظیپ

جربخ تؾو ویحٔ ،تیّپ فو ٖذؽ زپ سا .ذیدزٌ

تییّپ هی ٝث

ویحٔ( هی٘صٛئتعا یشیبٕت ویحٔ

یٚبیحDMEM

15 ذیفرد

،یٚبٌ ْزع 10

،تبفیغف َٚزیغیٌّبتث رلاٛٔ یّیٔ

10 رلاٛٔٛ٘بی٘

ٚ ٖٚسبییتٔاشٌد 50

هیثرٛىییعآ زییتیِ یییّیٔ رد ْزییٌٚزىیٔ

3 -

وییحٔ( هیی٘صٛپیدآ یشیبیٕت وییحٔ زٍید تیّپ ٝث ٚ )تبفغف یٚبیییحDMEM

15 ،یٚبیییٌ ْزیییع ذیییفرد 1

رلاٛیییٔٚزىیٔ

،ٖٚسبتٔاشٌد 2

/ 0 ٚ ٗیعبتٔٚذٙیا رلاٛٔ یّیٔ

01 / 0 زث ْزٌ یّیٔ

زیٞ بیٞ َّٛیع تؾو ویحٔ ٚ ذؽ ٝفبما )ٗیِٛغ٘ا زتیِ یّیٔ

3

لیٛؼت ربث هی سٚر ذؽ

سا ذؼث . 21 ویعٛت هی٘صٛئتعا شیبٕت سٚر

شییٔآ ً٘ر وعٛت هی٘صٛپیدآ شیبٕت ٚ در ٗیراشیِآ یشیٔآ ً٘ر ی

ذؽ یثبیسرا در ُیٚا .

ٓٞ

ییعرزث رٛیظٙٔ ٝث ٗیٙچ حيیع

ٖبییث

یحيع یبٞزوربٔ

َّٛع

ْٛع صبعبپ سا ظپ ٜذؽ جازختعا یبٞ

،

ٝٙیغپیزت سا ذؼث

ٖذؽ

ٖدزو صٛیفیزت٘بع ٚ

،

ٝث بٞ َّٛع فرٚذٙپا

ُمتٙٔ

ٚ سا ظپ بیث ٛؾتغؽ تذیٔ ٝیثPBS

10 رٚد بیث ٝیمیلد

2000 صٛیفیزت٘بعrpm

ذیدزٌ

بیٞ َّٛیع یشیٔآ ً٘ر ٝٔادا رد .

بییییییث بییییییث ٝییییییٌٚض٘ٛو یبییییییٞ یدبییییییث یییییییت٘آ

PE,CD90,CD105,CD34,CD45(abcam,USA), CD73(Biolegend,USA)

تذییٔ ٝییث 30

َبییچخی رد ٝییمیلد

تفزٌ ترٛف ٜدبفتعا بث زظ٘ درٛٔ یبٞزوربٔ ٖبیث ٖاشیٔ ظپع .

یزتٔٛتیبیعّٛف سا

(FACSCalibur)

راشیفا ْزی٘ ٚ

FlowJo (ver

7.6.1

) .ذؽ شیِب٘آ

َّٛع تؾو سٚد رد بٞ

َٛٙفغیث فّتخٔ یبٞ

ٗیٔبتیٚ ٚ A C

ظىیزتبٔ ٖذؽ ی٘ذؼٔ ٖاشیٔ ٚ یتغیس ییب٘اٛت یعرزث ٚ :ی٘اٛختعا داذؼت

10⁴

× 1 بعبپ َّٛع

ٝ٘بخ زٞ رد ْٛع ص تیّپ ی

24

ٝ٘بخ سٚر هی تؽذٌ سا ظپ ٚ تؾو ییا

َّٛع ، رد بٞ

ٜٚزٌ

،َزتٙو یبٞ

200 ٚ 250 رلاٛٔٛ٘ب٘

َٛٙفغیث (A

Sigma-

Aldrich

، ) 200

َٛٙفغیث رلاٛٔٛ٘ب٘

ٗیٔبتیٚ + A

( C

200 ،

250 ، 300 ، 350 ٚ 400 ٚ )رلاٛٔٚزىیٔ

250 رلاٛٔٛ٘ب٘

َٛٙفغیث

ٗیٔبتیٚ + A

( C

200 ، 250 ، 300 ، 350 ٚ 400

هی٘صٛئتعا یشیبٕت ویحٔ رٛنح رد )رلاٛٔٚزىیٔ

تذٔ ٝث 21

سٚر .ذؽ ٜداد ربٕیت ربٕیت ٜرٚد ٖبیبپ رد

ت

َّٛع یتغیس ییب٘اٛ

بٞ

یدٙع ً٘ر تغت وعٛت ٝو ترٛف ٗیا ٝث ،ذؽ یثبیسرا MTT

َّٛحٔ ٚ ْزع ذلبف DMEM

MTT

ذیغوٛفِٛع ُیتٔ ید ٚ

(DMSO)

(

Sigma-Aldrich

ةذخ ٖاشیٔ ٚ ٝفبما َبیٚ زٞ ٝث )

ٜبٍتعد وعٛت َّٛحٔ

SCO diagnostic, ELAISA-reader

(Germany)

جٛٔ َٛى رد 450

داذؼت ٚ یزیٌ ٜساذ٘ا زتٔٛ٘ب٘

َّٛع دراذ٘بتعا یٙحٙٔ وعٛت ٜٚزٌ زٞ رد ٜذ٘س یبٞ

MTT

.ذؽ ـخؾٔ

ٖاشیٔ

ٖذؽ ی٘ذؼٔ

ظىیزتبٔ

ی٘اٛختعا ً٘ر وعٛت شی٘

یعرزث در ٗیراشیِآ یشیٔآ ذیدزٌ

َّٛع ٝو ترٛف ٗیا ٝث ، بٞ

ذیئذِبٔزف بث ٖذؽ ظىیف سا ظپ تذٔ ٝث(

15 )ٝمیلد رد ،

ؼٔ

ةآ بث ٛؾتغؽ سا ظپ ٚ ٝتفزٌ رازل در ٗیراشیِآ ً٘ر كز ٝث ییٚر َّٛحٔ ،َبیٚ زٞ ٝث هیتعاذیعا ٖدزو ٝفبما ٚ زيمٔ

B A

(4)

453

ٚ ُمتٙٔ فرٚذٙپا

Mineral oil

بٞ فرٚذٙپا ٚ ذؽ ٝفبما ٖآ ٝث

تذٔ ٝث 10 یبٔد رد ٝمیلد 85

ٖآ سا ظپ ٚ دازٌ یت٘بع ٝخرد

تذٔ ٝث 5

یزت٘بع ،تفزٌ رازل خی یٚر زث ٝمیلد رٚد بث صٛیف

16000g

تذٔ ٝث 20 جازختعا سا ظپ ٚ تفزٌ ترٛف ٝمیلد

Mineral oil

ْٛی٘ٛٔآ ذیغوٚرذیٞ ،بٞ فرٚذٙپا ٖٚرد َّٛحٔ ٝث ،

ٝفبما

ٚ ٜبٍتعد وعٛت ٜذٔآ تعد ٝث َّٛحٔ ةذخ

ELAISA-

reader

زتٔٛ٘ب٘

تجث .ذؽ

زثؤه سٍد ةبختًا تغت سا ٜذٔآ تعد ٝث حیبت٘ ٝث ٝخٛت بث ،در ٗیراشیِآ ٚMTT

سٚد 200

َٛٙفغیث زثؤٔ سٚد ٖاٛٙػ ٝث رلاٛٔٛ٘ب٘

سا ٚ ةبخت٘ا ،A

سٚد رد ٝو ٗیا ٝث ٝخٛت بث یفزى 200

+ A

300

ٗیٔبتیٚ رلاٛٔٚزىیٔ

ٚ یتغیس ییب٘اٛت تغ٘اٛت ٗیٔبتیٚ ،C

ی٘اٛختعا ظىیزتبٔ ٖذؽ ی٘ذؼٔ ٖاشیٔ

َزتٙو ٜٚزٌ ذح بت ار

سٚد ،ذٞد دٛجٟث 300

سٚد ٖاٛٙػ ٝث شی٘ C

بث ٝؼِبئ ٚ ذیدزٌ ةبخت٘ا ،ٗیٔبتیٚ زثؤٔ

4 ٜٚزٌ

ُٔبؽ ،َزتٙو

200

،A

200

+ A

300

ٚ C

300

ٝٔادا C

.تفبی ٓیش٘آ تیِبؼف ٚ یِّٛع ُخاد ٓیغّو ٖاشیٔ یعرزث

:سبتبفغف ٗیِبىِآ ٖاشیٔ یزیٌ ٜساذ٘ا یازث ؼٞٚضپ ٗیا رد

ٓیغّو تیو سا ٓیغّو

ٖازیا(

-

ٚبو ٖبٔرد توزؽ )

ٚ ٜدبفتعا

َّٛع :ذؽ ْبد٘ا زیس ُحازٔ

داذؼت ٝث ْٛع صبعبپ یبٞ

10⁴

× 1

ٝ٘بخ زٞ رد تیّپ

24 تؾو ییا ٝ٘بخ

َّٛع ربٕیت ٚ رد بٞ

حٔ

ذؽ ْبد٘ا هی٘صٛئتعا وی .

سا ظپ 21

َّٛع سٚر

ٝيعاٚ ٝث بٞ

بث ٛؾتغؽ ی

PBS^-

فو سا

یبٔد رد ٚ ذیدزٌ ُمتٙٔ فرٚذٙپا ٝث ٚ ٜذؽ اذخ تیّپ 4

ٝخرد

سا ظپ .ذؽ ٜداد رازل دازٌ یت٘بع 24

ٚ بٞ ٕٝ٘ٛ٘ داذؼت ٝث تػبع

ٓٞ

ٕٝٞ ٝث ٚ ةبخت٘ا زفبث َّٛحٔ َبیٚ ،ذٞبؽ ٕٝ٘ٛ٘ ٗیٙچ

َبیٚ

بٞ

100 ٜٚلاػ دراذ٘بتعا َبیٚ ٝث ٚ اشٍ٘ر َّٛحٔ زتیِٚزىیٔ

،اشٍ٘ر َّٛحٔ زث 10

ٝث ٚ ٓیغّو دراذ٘بتعا َّٛحٔ زتیِٚزىیٔ

َبیٚ ٕٝٞ

،ذٞبؽ َبیٚ شخ ٝث بٞ

30 یِّٛع ٕٝ٘ٛ٘ زتیِٚزىیٔ

بث ٚ ذٞبؽ َبیٚ ُثبمٔ رد بٞ َبیٚ ةذخ ظپع .ذؽ ٝفبما جٛٔ َٛى رد زتٔٛتفٚزتىپعا ٜبٍتعد سا ٜدبفتعا

575 ٘ زتٔٛ٘ب

ٓیغّو تظّغ ٚ تئازل

ٜٚزٌ

بٞ

رٛوذٔ ی .ذیدزٌ ٝجعبحٔ

ٓیش٘آ تیِبؼف ٖاشیٔ یعرزث تٟخ سبتبفغف ٗیِبىِآ

تیو سا

ٖازیا(

-

ٖٛٔسآ طربپ توزؽ )

َّٛع .ذؽ ٜدبفتعا صبعبپ یبٞ

داذؼت ٝث ْٛع 10⁴

× 1 تیّپ ٝ٘بخ زٞ رد 24

تؾو ییا ٝ٘بخ ٚ

َّٛع ربٕیت سا ظپ .ذؽ ْبد٘ا ،رٛوذٔ یبٞ ٚزٌ رد بٞ

21 سٚر

َّٛع تؾو بث بِّٟٛع یٛؾتغؽ اذتثا ،هی٘صٛئتعا ویحٔ رد بٞ

PBS^-

َّٛع ظپع ٚ ذؽ ْبد٘ا ٝث ٚ اذخ هعلاف فو سا بٞ

،ؼیبٔسآ ِِٝٛ زٞ ٝث .ذ٘ذؽ شیزف ٚ ُمتٙٔ فرٚذٙپا 500

َّٛحٔ زتیِٚزىیٔ

زفبث - سا یقخؾٔ ٓدح ٚ ازتغثٛع

ٕٝ٘ٛ٘

ٚ

دٛع 02 / 0 ةذخ ظپع ٚ ذؽ ٝفبما ،َبٔز٘

ٜٚزٌ

بٞ

رٛوذٔ ی ،

یٙحٙٔ سا ٜدبفتعا بث ٚ تئازل زتٔٛ٘ب٘

.ذؽ ٝجعبحٔ ٓیش٘آ تیِبؼف ،دراذ٘بتعا تازییغت یعرزث

َّٛع هیصِٛٛفرٛٔ

:ٝتفبی شیبٕت یبٞ

21 ربٕیت سا ظپ سٚر

َّٛع تازییغت ،هی٘صٛئتعا ویحٔ رد بٞ

َّٛع یىیصِٛٛفرٛٔ

بث بٞ

ً٘ر سا ٜدبفتعا ٚ ذیادٛیآ ْٛیذیپٚزپ ،تغخٛٞ تٙعرّٛف یبٞ

َّٛع .ذؽ یعرزث ض٘رٚا ٗیذیزوآ بث ربث ٚد ،یشیٔآ ً٘ر سا ذؼث بٞ

PBS^-

ظٙعرّٛف حٛىعٚزىیٔ وعٛت یرادزث ظىػ ٚ ذؽ ٝتغؽ

َّٛع ٝتغٞ زيل .تفزٌ ترٛف وعٛت شی٘ ٝتفبی شیبٕت یبٞ

ْز٘

ذؽ یزیٌ ٜساذ٘ا هیتٛٔ یزیٛقت راشفا (

12 .)

تهبک ىَهسآ یِّٛع ٖٛیغ٘بپعٛع هّٛخٔ تغت ٗیا ْبد٘ا یازث 4

ٜٚزٌ

ٚ ذؽ ٝتؽاذٌ سربٌآ وعٛت ٜذؽ ٜذیؽٛپ یبٞ ْلا یٚر زث رٛوذٔ

تذٔ ٝث بٞ ْلا ،یراذٌ ُٔلا سا ظپ 2

یبٔد رد ٝمیلد 4

ٝخرد

یت٘بع ُٔلا ٗتؽادزث سا ذؼث .ذؽ ٜداد رازل دازٌ

ْلا ،بٞ

ٝث بٞ

تذٔ

2 یٚبح ٜذٙٙو شیِ زفبث رد تػبع

Tris base

( 10 یّیٔ

،)رلاٛٔ

NaSLS

( 1 ،)ذفرد (EDTA

0.15 ٚ )رلاٛٔ

(NaCl

2.5

)رلاٛٔ

بث

pH=10

تذٔ ٝث بٞ ْلا ظپع .ذؽ ٜداد رازل 4

رد ٝمیلد

یٚبح سرٛفٚزتىِا زفبث

NaOH 300 mM, EDTA 1mM

بث

PH=13

سرٛفٚزتىِا ٚ ٜذؽ ٝثٛى٘ا 2

تذٔ ٝث تِٚ

15 .ذؽ ْبد٘ا ٝمیلد

یٚبح سبع یثٙخ َّٛحٔ سا ٜدبفتعا بث بٞ ْلا ظپع

Tris base 0.4

ٝوmM

بث ٖآPH

ٝثHCL

5 / 7 ٚ ذؽ ٜداد ٛؾتغؽ ،دٛث ٜذیعر

(5)

454

تذٔ ٝث تیبٟ٘ رد 5

هؾخ سا ظپ ٚ ٝتفزٌ رازل ُ٘بتا رد ٝمیلد

بث یشیٔآ ً٘ر ٚ اٛٞ كزؼٔ رد ٖذؽ ظىػ ،ذیبٔٚزث ْٛیذیتا

( تفزٌ ترٛف ظٙعرّٛف حٛىعٚزىیٔ سا ٜدبفتعا بث یرادزث 13

.)

یربهآ ليلحت ٍ ِیشجت

ٜداد یبٞ

بح راشفا ْز٘ سا ٜدبفتعا بث ُف

SPSS 16.0

ػٚر ٚ

یربٔآ

ANOVA One-Way

تغت ٚ

tukey

ٚ ُیّحت ٚ ٝیشدت

ٗیٍ٘بیٔ تٚبفت حيع رد بٞ

P<0/05

یٙؼٔ

.ذؽ ٝتفزٌ زظ٘ رد راد

یقلاخا تبظحلاه ٜبٍؾ٘اد وعٛت كیمحت ٗیا َاسٛپٚزپ نارا

تعا ٜذؽ ذییبت ٝیّو ٚ

یللاخا تبى٘

ربو َٛفا ٚ .تعا ٜذؽ تیبػر یٞبٍؾیبٔسآ تب٘اٛیح بث

جیبتً

ُذش جازختسا یبّ لَلس ىدَث یويشًاشه تيّبه تبجثا

ً٘ر تبؾیبٔسآ سا ُفبح حیبت٘

ٗیراشیِآ یشیٔآ ٚ در

ُیٚا

َّٛع ٝو داد ٖبؾ٘ در ٖاٛختعا شغٔ سا ٜذؽ جازختعا یبٞ

،غِبث تر ٚ هی٘صٛئتعا ویحٔ كزؼٔ رد یزیٌرازل سا ظپ

تذٔ ٝث هی٘صٛپیدآ 21

شیبٕت تیعٛپیدآ ٚ تعلاثٛئتعا ٝث ،سٚر

ُىؽ( ذ٘دٛث ٝتفبی 1

ٖبیث ٖاشیٔ یعرزث سا ُفبح حیبت٘ ٗیٙچٕٞ .)

َّٛع رد یحيع یبٞزوربٔ

ٝو داد ٖبؾ٘ ٜذؽ جازختعا یبٞ

،غِبث تر ٖاٛختعا شغٔ سا ٜذؽ جازختعا یبِّٟٛع بٞزوربٔ

ی

CD90, CD105,CD73

ار یبٞزوربٔ ٚ ٜدزو ٖبیث ٚCD45

CD34

ٜدزى٘ ٖبیث ار

ُىؽ( .ذ٘ا 2

ٖدٛث یٕیؾ٘اشٔ ٗیجٔ حیبت٘ ٗیا .)

َّٛع .ذؽبث یٔ ؼٞٚضپ ٗیا رد ٖاٛختعا شغٔ سا ٜذؽ جازختعا یبٞ

ُىؽ 1 a: ی ٜرٚد سا ظپ غِبث تر ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ َّٛع در ٗیراشیِآ یشیٔآ ً٘ر : 21

هی٘صٛئتعا شیبٕت ی ٜسٚر ییبٌٕٙرشث(

400X ).

:b یثزچ ٝث شیبٕت سا ظپ غِبث تر ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ َّٛع در ُیٚا یشیٔآ ً٘ر .

ُىؽ 2 : یعرزث حیبت٘

یزتٔٛتیعّٛف

َّٛع یبٞ

یدبیٙث یٕیؾ٘اشٔ

شغٔ

یبٞزوربٔ بث تر ٖاٛختعا CD90, CD105,CD73

CD45 ، CD34 ٍ

. یبِّٟٛع

شغٔ یٕیؾ٘اشٔ یدبیٙث تر ٖاٛختعا

غِبث یبٞزوربٔ

CD90, CD105,CD73 ار

یبٞزوربٔ ٚ ٜدزو ٖبیث ٍCD45

ٖبیث ارCD34 ذ٘ا ٜدزى٘

(6)

ُربوش ، جٌپ ، دادزه 1397

455

سکیزتبه ىذش یًذؼه ىاشيه ٍ یتسیس ییبًاَت یسرزث زثؤه سٍد ةبختًا ٍ یًاَختسا

ٝغیبمٔ سا یعرزث سا ُفبح حیبت٘

ٖاشیٔ ٚ یتغیس ییب٘اٛت

َّٛع رد ی٘اٛختعا ظىیزتبٔ ٖذؽ ی٘ذؼٔ

ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

فّتخٔ یبٞسٚد بث ٜذؽ ربٕیت ٖاٛختعا شغٔ

َٛٙفغیث ٚ A

ٗیٔبتیٚ

،C

سٚد ٝو ذؽ ـخؾٔ

200

A

یٙؼٔ ؼٞبو تخٛٔ

ٖذؽ ی٘ذؼٔ ٖاشیٔ ٚ یتغیس ییب٘اٛت راد

ظىیزتبٔ

َزتٙو ٜٚزٌ ٝث تجغ٘ ی٘اٛختعا ذیدزٌ

(P< 0/001)

.

سٚد 300 رلاٛٔٚزىیٔ

ٗیٔبتیٚ

ٓٞ ربٕیت رد C

بث ٖبٔس

200

ؼٞبو ٗیا تغ٘اٛتA

ٝث ٚ ٜدزو ٖازجخ ار بٞ

َزتٙو ٜٚزٌ حيع ذ٘بعزث

(P< 0/001)

. َٚذخ(

1 ُىؽ ٚ 3 .)

ٚ یتغیس ییب٘اٛت یعرزث سا ُفبح حیبت٘ ٝث ٝخٛت بث ٗیازثبٙث سٚد ،ی٘اٛختعا ظىیزتبٔ ٖذؽ ی٘ذؼٔ ٖاشیٔ

َٛٙفغیث ٚ A

300

تذٔ رد ،C

21 ٝث ،سٚر

ٜٚزٌ ربٟچ بث ٝؼِبئ ٚ ذیدزٌ ةبخت٘ا زثٛٔ یبٞسٚد ٖاٛٙػ

;

بث ربٕیت ،َزتٙو 200

،A

َٛٙفغیث + A

300

ٚ C

300 رلاٛٔٚزىیٔ

ٗیٔبتیٚ

.تفبی ٝٔاداC

َٚذخ 1

َّٛع ی٘اٛختعا ظىیزتبٔ ٖذؽ ی٘ذؼٔ ٖاشیٔ ٚ یتغیس ییب٘اٛت ٗیٍ٘بیٔ ٝغیبمٔ :

٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ ، تر

21 یبٞسٚد بث ربٕیت سا ظپ سٚر

َٛٙفغیث فّتخٔ

ٗیٔبتیٚ ٚA .C

زث یًاَختسا سکیزتبه ىذش یًذؼه ىاشيه )رلاَه یليه( در يیراشيلآ تظلغ تسح MTT

لَلس داذؼت

ُذًس یبّ

( 1000

ٍُزگ )×

بّ

451^/67^g^±13/503 16989^fg^±181/643

َزتٙو

33 /

208 ^b^±10/408 3

/

8942 ^b^±228/500 َٛٙفغیث

(A 200nM )

152^/33^a^±17/502 7493^a^±323/950

َٛٙفغیث (A

250 nM )

319^/67^d^±11/503 13624^d^±109/207

َٛٙفغیث (A

200nM ٗیٔبتیٚ + ) (C

200 µM )

381^/67^f^±12/583 15598^e^±521/087

َٛٙفغیث (A

250 µM )

33 /

460 ^g^±6/027 16852^fg^±49/166

َٛٙفغیث (A

300 µM )

507^/33^h^±7/505 17341^g^±63/976

َٛٙفغیث (A

350 µM )

00 /

604 ⁱ^±15/099 18502^h^±45/368

َٛٙفغیث (A

400 µM )

33 /

274 ^c^±13/576 12258^c^±342/702

َٛٙفغیث (A

250nM ٗیٔبتیٚ +) (C

200 µM )

50 /

344 ^de^±12/010 14105^e^±192/922

َٛٙفغیث (A

250 µM )

371^/33^ef^±10/016 16352^f^±230/352

َٛٙفغیث (A

300 µM )

00 /

458 ^g^±2/645 16858^fg^±127/052

َٛٙفغیث (A

350 µM )

00 /

600 ⁱ^±15/00 18151^h^±67/144

َٛٙفغیث (A

400 µM )

ُىؽ 3

َّٛع یشیٔآ ً٘ر :

ً٘ر بث تر ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

تغخٛٞ ٚ ذیادٛیآ ْٛیذیپٚزپ تٙعرّٛف یبٞ

(a-d) ( ییبٌٕٙرشث 200X

)،

ذٞد یٔ ٖبؾ٘ ار ٜدزٔ یبٞ َّٛع ً٘ر یترٛف یبٞ ٝتغٞ

.

(7)

ُربوش ، جٌپ ، دادزه 1397

456

ُبگشًاد زتخد ىبیَجشًاد رد یقبچ عَيش ىازیا یبّ

ترٛف ٝث زیدبمٔ

Means±SD

ٗیٍ٘بیٔ ٚ تعا ذو بث یبٞ

فزح تٚبفت یاراد ٖٛتع ٚد رد تٚبفتٔ یبٞ

ٝث تجغ٘ راد یٙؼٔ

یٔ زٍیذىی ؽبث

ذ

(One-way ANOVA, tukey's test

P<0/001)

آ یشیٔآ ً٘ر ( در ٗیراشیِ

)e-h

( ییبٌٕٙرشث 400X

،) 21 سٚر

َٛٙفغیث بث ربٕیت سا ظپ (A

200 )رلاٛٔٛ٘ب٘

ٗیٔبتیٚ ٚ (C

300

)رلاٛٔٚزىیٔ

.هی٘صٛئتعا ویحٔ رد (

ٚa

( .َزتٙو ٜٚزٌ )e

ٍb

)f

ٜٚزٌ

َٛٙفغیث ( . A

ٍc

)g

ٜٚزٌ

َٛٙفغیث +A

ٗیٔبتیٚ

. C

( ٚd

)h

ٜٚزٌ

ٗیٔبتیٚ

. C

ييلبکلآ نیشًآ تيلبؼف ٍ یلَلس لخاد نيسلک ىاشيه یسرزث سبتبفسف یٙؼٔ ؼٞبو رد یراد

ٗیٍ٘بیٔ

ٚ یِّٛع ُخاد ٓیغّو حيع

ٖاشیٔ

َٛٙفغیث ٜٚزٌ رد سبتبفغف ٗیِبىِآ ٓیش٘آ تیِبؼف (A

200 ذؽ ٜذٞبؾٔ َزتٙو ٜٚزٌ ٝث تجغ٘ ،)رلاٛٔٛ٘ب٘

(P<0/001)

.

یٙؼٔ ؼیاشفا یراد

ٜٚزٌ رد ٜذؽ دبی یبٞزتٔاربپ حيع ٗیٍ٘بیٔ رد

َٛٙفغیث (A

200 ٗیٔبتیٚ + )رلاٛٔٛ٘ب٘

(C

300 رد )رلاٛٔٚزىیٔ

یراد یٙؼٔ ؼیاشفا .ذؽ ٜذٞبؾٔ َزتٙو ٜٚزٌ ذح حيع رد شی٘

یبٞزتٔاربپ

ٗیٔبتیٚ ٜٚزٌ رد رٛوذٔ

(C

300 رلاٛٔٚزىیٔ

تجغ٘ ،)

ذؽ ٜذٞبؾٔ َزتٙو ٜٚزٌ ٝث

(P<0/001)

َٚذخ( . 2 .)

لَلس کیصَلَفرَه تازييغت یسرزث بّ

ٝتغٞ زيل ٗیٍ٘بیٔ

َّٛع یبٞ

ٜٚزٌ

َٛٙفغیث ٝث تجغ٘ A

یٙؼٔ ؼٞبو َزتٙو ٜٚزٌ

راد

(P<0/001)

ٗیٔبتیٚ ٜٚزٌ رد ٚ ،C

یٙؼٔ ؼیاشفا یراد

(P<0/001 )

زییغت بٔا .داد ٖبؾ٘ ار

یٙؼٔ

َّٛع ٝتغٞ زيل ٗیٍ٘بیٔ رد یراد یبٞ

ٜٚزٌ

َٛٙفغیث +A

ٗیٔبتیٚ

تجغ٘ C

ذؾ٘ ٜذٞبؾٔ ،َزتٙو ٜٚزٌ ٝث

(p>0/05 )

َٚذخ(

2 .)

َٚذخ 2 ربٕیت زثا ٝغیبمٔ :

ٓٞ

َٛٙفغیث ٖبٔس

ٗیٔبتیٚ ٚA یبٞ ٜٚزٌ رد ٝتغٞ زيل ٚ سبتبفغف ٗیِبىِآ ٓیش٘آ تیِبؼف ،یِّٛع ُخاد ٓیغّو راذمٔ ٗیٍ٘بیٔ زثC

َّٛع فّتخٔ

َٛٙفغیث بث ٜذؽ ربٕیت غِبث تر ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

ٗیٔبتیٚ ٚA تذٔ ٝثC

21 .هی٘صٛئتعا ویحٔ رد سٚر لَلس ِتسّ زطق ييگًبيه

یبّ

ِتفبی شیبوت )زتهٍزکيه(تسلاثَئتسا ِث

نيسلک ىاشيه ( mg/dl )

نیشًآ تيلبؼف ىاشيه سبتبفسف ييلبکلآ

U/L بٍُّزگ

64 /

16 ^b^±1/891 41/33^b^±1/527 65/66^b^±2/081 َزتٙو

39 /

12 â^±1/347 22/66â^±2/081 33â^±1/732 )200nM(Aَٛٙفغیث

17 /

17 ^b^±2/203 44/33^b^±1/527 68/66^b^±2/516 )300 µM (Cٗیٔبتیٚ + )200nM(Aَٛٙفغیث 30

/

21 ^c^±1/499 58^c^±2/000 93/33^c^±3/511 )300 µM(Cٗیٔبتیٚ

ترٛف ٝث زیدبمٔ

means±SD

فزح ذو بث یبٞ ٗیٍ٘بیٔ ٚ تعا

یٔ راد یٙؼٔ تٚبفت یاراد تٚبفتٔ یبٞ

.ذؽبث

(One-way

ANOVA,, tukey's test, P<0/05)

َزتٙو ٜٚزٌ رد ض٘ارٚا ٗیذیزوآ یشیٔآ ً٘ر رد ٝتغٞ

ٓعلاپٛتیع ٚ ٝتؽاد رازل شوزٔ رد ٓعلاپٛتیع ٝث تجغ٘

ذٙچ ٚ ـیخؾت ُثبل یِّٛع ذئاٚس یاراد دٛث یٟخٚ

. ٜٚزٌ رد

َٛٙفغیث راذمٔ A

ٓعلاپٛتیع

ٝتفبی زییغت وٚزچ ٚ

ٜذی ،ذؽ

َّٛع ُىؽ بٞ

ُىؽ زییغت دزٌ ترٛف ٝث داد

ذئاٚس ترذ٘ ٝث ،

ٖآ رد یٕو یٕعلاپٛتیع ٝتغٞ تیؼلٛٔ ٚ ذؽ ٜذٞبؾٔ بٞ

ٝث تجغ٘

ٝو یِبح رد ،ذؽ ٓظٙٔب٘ ٓعلاپٛتیع ٜٚزٌ رد

َٛٙفغیث

ٗیٔبتیٚ + A

یٟخٛت ُثبل یىیصِٛٛفرٛٔ تازییغت C

ٜٚزٌ رد ٗیا زث ٜٚلاػ .ذؾ٘ ٜذٞبؾٔ َزتٙو ٝث تجغ٘

ٗیٔبتیٚ

شوزٔ رد ٚ ٓظٙٔ ربیغث بٞ َّٛع ٝتغٞ C

ٚ تؽاد رازل ٓعلاپٛتیع ٓعلاپٛتیع

َّٛع بٞ

ٜدزتغٌ شی٘

زت

ٚ یِّٛع ذئاٚس

ٖآ ذؽ زتٌرشث بٞ

ُىؽ(

4 .)

تهبک ىَهسآ

ٖٛٔسآ سا ُفبح حیبت٘

داد ٖبؾ٘ تٔبو ،َزتٙو ٜٚزٌ رد ٝو

ٝتغٞ

َّٛع ذلبف بٞ

ِٝبج٘د

ٜذٙٞد ٖبؾ٘ ٗیا ٚ دٛث ْذػ

یٍتغىؽ

َّٛع داذؼت .تعا DNA

راد ِٝبج٘د یبٞ

ٜٚزٌ رد

َٛٙفغیث ٝ٘بؾ٘ ٝو تفبی ؼیاشفا َزتٙو ٜٚزٌ ٝث تجغ٘ A

یٍتغىؽ سا یزتؾیث داذؼت ردDNA

دٛث ٜٚزٌ ٗیا یبٞ َّٛع .

َٛٙفغیث ٜٚزٌ رد ٝو یِبح رد + A

ٗیٔبتیٚ

َّٛع داذؼت C

یبٞ

(8)

یقٍذص ذيْش یًبهرد ـ یتشاذْث تبهذخ ٍ یکششپ مَلػ ُبگشًاد ِلجه دشی

ُربوش ، جٌپ ، دادزه 1397

457

َٛٙفغیث ٜٚزٌ ٝث تجغ٘ راد ِٝبج٘د ٜٚزٌ رد ٚ تفبی ؼٞبو A

ٗیٔبتیٚ

َّٛع داذؼت شی٘C

زتٙو ٜٚزٌ ٝث تجغ٘ راد ِٝبج٘د یبٞ

َ

ٗیٔبتیٚ یربٟٔ زثا ٜذٙٞد ٖبؾ٘ ٝو تفبی ؼٞبو ٚ تیعآ زثC

یٍتغىؽ دٛث یِّٛع ٜٚزٌ ٗیا ردDNA

ُىؽ(

4 .)

ُىؽ 4 : ض٘ارٚا ٗیذیزوآ تٙعرّٛف یشیٔآ ً٘ر (a-d)

ٚ تٔبو تغت (e-h)

َّٛع رد ی ٜرٚد سا ظپ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

21 ربٕیت ٜسٚر َٛٙفغیث بث (A

200

ٗیٔبتیٚ ٚ )رلاٛٔٛ٘ب٘

(C 300 هی٘صٛئتعا ویحٔ رد )رلاٛٔٚزىیٔ

a(.

e ٍ ) .َزتٙو ٜٚزٌ

b( f ٍ )

َٛٙفغیث ٜٚزٌ

( . A ٍc )g َٛٙفغیث ٜٚزٌ

ٗیٔبتیٚ +A ( . C

ٍd )h

ٗیٔبتیٚ ٜٚزٌ

. C

ثحث

َٛٙفغیث زمبح ٝؼِبئ رد ٚ یتغیس ییب٘اٛت ؼٞبو تخٛٔA

یٍتغىؽ ٚ تیعآ ٖاشیٔ ؼیاشفا

َّٛع رد DNA

یدبیٙث یبٞ

ٝتفبی ٗیا ٝو ذؽ غِبث تر ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ

یبتعار رد بٞ

ٝؼِبئ سا ُفبح حیبت٘

Suzuki

ٚ

Ishido

َبع رد 2010 زث

َّٛع یٚر یٔ یجقػ یدبیٙث یبٞ

( ذؽبث 14

َٛٙفغیث .) زثا بث A

ٝتؽر یٞذ٘بٔسبع ،ٗیِٛثٛت زث

َّٛع رد ار نٚد یبٞ

تیزخت

یٔ

غ٘بٔ ،یسبفبتٔ نٚد ُیىؾت زث یربٟٔ زثا َبٕػا بث ٚ ذٙو

َّٛع رد یِّٛع ٓیغمت یٔ بٞ

( دٛؽ 15 تغیس ٜذٙیلاآ ٗیا .)

ٍیع زیغٔ زث زثا بث یيیحٔ

یِبٙ

(MAPK Mitogen-activated

Protein Kinase

ٖٛیعلایرٛفغف ؼیاشفا ،)

)JNK (c-Jun N-

terminal Kinase

( 16

ٗیئتٚزپ ٖبیث ؼیاشفا ،) بث وجتزٔ یبٞ

تیعآ یٙؼی DNA

، P53 P-chk2

، ٚ ATM

ؼیاشفا ،H2AX

ذیِٛت ( ROS

6 ،)

ٓیش٘آ ربٟٔ

ربٟٔ ،یغفٙت ٜزید٘س یبٞ

یت٘آ ٓتغیع رد بٞساذیغوا یت٘اذیغوا یت٘آ

( 17 ؼٞبو ،)

ٗیئتٚزپ هیتٛتپٛپآ یت٘آ یبٞ

Bcl-2

ٚ

PRDX4

( 18 ؼیاشفا ،)

هیتٛتپٛپآٚزپ ٖص ٖبیث (Bax

11 ْٚسٛئتٚزپ ؼٞبو ،) ٚ 26S

ٗیئتٚزپ ؼیاشفا

C-myc

( 19 دبدیا ُٔبػ هی ٖاٛٙػ ٝث )

یٔ ُٕػ یِّٛع طزتعا بٞذیپیِ ٖٛیعاذیغوازپ كیزى سا ٚ ذٙو

طزتعا یبمِا ٚ سٛتپٛپآ ؼیاشفا ثػبث ،ٛیتاذیغوا

ظی ( 11 ) رد ٚ

ٝدیت٘

یٍتغىؽ ٚ تیعآ دبدیا ٚ یتغیس ییب٘اٛت ؼٞبو

DNA

َّٛع رد

َٛٙفغیث بث ٜذؽ ربٕیت یبٞ

یٔA

.دٛؽ

ٖبٙچ َٛٙفغیث ٜٚزٌ رد ذؽ ٜذید ٝچ ٖذؽ ی٘ذؼٔ ٖاشیٔA

ٖاشیٔ ٚ یِّٛع ُخاد ٓیغّو ٖاشیٔ ،ی٘اٛختعا ظىیزتبٔ

)هی٘صٛئتعا شیبٕت یبٞ ـخبؽ( سبتبفغف ٗیِبىِآ ٓیش٘آ تیِبؼف یٙؼٔ رٛى ٝث

َٛٙفغیث .تفبی ؼٞبو یراد

ؼیاشفا كیزى سا A

ٖص ٖبیث یِبٍٙیع زیغٔ ٜذٙٙوربٟٔ یبٞ

Wnt-β-catenin

ثػبث ،

ؼٞبو ،یِبٍٙیع زیغٔ ٗیا ربٟٔ

َبمت٘ا

β-catenin

ٖٚرد ٝث

( ٝتغٞ

11 ٖبیث ؼٞبو ،)

Runx2

ٚ

Osterix

ٗیزت ٟٓٔ(

رٛتوبف زیغٔ تیِبؼف ؼٞبو ٚ )هی٘صٛئتعا یغیٛ٘ٚر یبٞ

یِبٍٙیع یٔ MAPK

شیبٕت ربٟٔ ثػبث ترٛف ٗیا ٝث ٚ دٛؽ

َّٛع رد هی٘صٛئتعا یٔ ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

دٛؽ

( 20

َٛٙفغیث ٗیا زث ٜٚلاػ .) ٝجؽ تیوزت هی ٖاٛٙػ ٝث A

زث ٖصٚزتعا ٝث هٛثزٔ یبٞ ٜبٍیبخ ٖدزو َبغؽا بث ی٘صٚزتعا

(9)

458

ُبگشًاد زتخد ىبیَجشًاد رد یقبچ عَيش ىازیا یبّ

ٜذ٘زیٌ یٚر ذیِٛت رد ٖٛٔرٛٞ ٗیا ؼم٘ یبفیا سا غ٘بٔ ،ؼیبٞ

یغّو حؽزت ٚ ٓیغّو یٔ ٗی٘ٛت

ٓٞ ٚ دٛؽ یربٟٔ زثا بث ٗیٙچ

َب٘بو كیزى سا ٓیغّو ٖبیزخ زث ؼٞبو ثػبث ،یٕیغّو یبٞ

ّٛع ُخاد ٓیغّو ٖاشیٔ

یٔ یِ

ٖآ سا ٗیازثبٙث .دٛؽ ییبخ

ٝو

ٚ تعا یرٚزم تیتبپآ یغوٚرذیٞ ُیىؾت یازث شی٘ ٓیغّو ُیىؾت ار ی٘اٛختعا َّٛع ی٘ذؼٔ ؼخث تیتبپآ یغوٚرذیٞ

یٔ

َٛٙفغیث ،ذٞد یغّو حؽزت زث یربٟٔ زثا بث A

ٚ ٗی٘ٛت

هی٘صٛئتعا شیبٕت ربٟٔ ثػبث ،یِّٛع ُخاد ٓیغّو ؼٞبو

َّٛع یٔ بٞ

( دٛؽ 21 .)

ٗیٔبتیٚ ٝو داد ٖبؾ٘ زمبح ٝؼِبئ حیبت٘

ةزخٔ زثا C

َٛٙفغیث

ٓٞ ٚ یتغیس ییب٘اٛت ٚ زیثىت زث A

تیعآ ٖاشیٔ ٗیٙچ

یٍتغىؽ ٚ

َّٛع رد ار DNA

شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

یٔ یثٙخ تر ٖاٛختعا

ٙو

ٝتفبی ٗیا ٝو ذ یبتعار رد شی٘ بٞ

حیبت٘

ٝؼِبئ سا ُفبح َبع رد ٖاربىٕٞ ٚ Guo

2015 یٚر زث

َّٛع ( ًع ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

22 ٚ )

ٓٞ

ٗیٙچ

Urbun

َبع رد ٖاربىٕٞ ٚ 2012

َّٛع یٚر زث یبٞ

یٔ تعلاثٛئتعا ( ذؽبث

23

ٗیٔبتیٚ .) ربٟٔ كیزى سا C

َبىیدار یىیصِٛٛیث یبٞذٙیآزف وعٛت ٜذؽ ذیِٛت داسآ یبٞ

ٖبیث ؼٞبو بث ٚ ٜداد ؼٞبو ار ٛیتاذیغوا طزتعا فّتخٔ

C-

ٛٔ myc

تیعآ ٚ یٍتغىؽ ؼٞبو تخ یٔ DNA

( دٛؽ 24 .)

ٗیٔبتیٚ

ٓٞ C

ٗیٙچ

ٖبیث ؼیاشفا ،سازّٔٛت تیِبؼف ؼیاشفا بث

ٖص یبٞ

ٚ hTR

،)َّٛع یزیپ ٜذٙٙوربٟٔ یبٞ ٖص( TRF2

ٖبیث ؼیاشفا ٚ بؾغ ُیغ٘بتپ ؼیاشفا ٚklf4

Jhdm1a/b

ٖص(

یبٞ

( )یِّٛع زیثىت رد زثؤٔ

25 زیغٔ هیزحت ٚ )

ERK1/2

(

Extracellular signal–regulated kinases

( ) 26 ثػبث )

َّٛع ٖذؽ زیپ تػزع ؼٞبو ٖاشیٔ ٚ زیثىت ترذل ؼیاشفا ٚ بٞ

یٔ بٞ ٖآ یتغیس ییب٘اٛت .دٛؽ

ٓٞ

ٝؼِبئ رد ٗیٙچ

ٗیٔبتیٚ ٝو ذؽ ٜداد ٖبؾ٘ زمبح ردC

َٛٙفغیث ٜٚزٌ

ٗیٔبتیٚ + A

،C

یٙؼٔ ؼیاشفا تخٛٔ

راد

ـخبؽ

هی٘صٛئتعا یشیبٕت یبٞ

َٛٙفغیث ٜٚزٌ ٝث تجغ٘

A

.ذؽ

ٝتفبی ٗیا شی٘

ٝؼِبئ سا ُفبح حیبت٘ یبتعار رد

Ciceri

ٚ

َبع رد ؼ٘اربىٕٞ

2011 یٚ زثا ٖٛٔازیپ ٗیٔبت

شیبٕت زث C

َّٛع هی٘صٛئتعا یلٚزػ فبف ٝچیٞبٔ یبٞ

دٛث ( 27 طبعا زث .)

ٗیٔبتیٚ ،ٗیممحٔ وعٛت ٝتفزٌ ترٛف تبؼِبئ

شفا بث C

ؼیا

ٕٝخزت عٛ٘ ٖصلاوٚزپ mRNA

ٚ ٖصلاو شتٙع ٚ I

( ٖبىیٌّٛٙیٔآسٛىیٌّ

28 زیغٔ ٖدزو َبؼف ثػبث ،) ٝث ٚMAPK

یغیٛ٘ٚر رٛتوبف ٖذؽ َبؼف ٖآ َبج٘د

Cbfa1/Runx2

( 29 ٚ )

ٖبیث ٖاشیٔ ؼیاشفا

Osterix

ٓیش٘آ تیِبؼف هیزحت كیزى سا

( سلایغوٚرذیٞ ٗیِٚزپ 30

شیبٕت ؼیاشفا ثػبث ٝدیت٘ رد ٚ ٜذؽ )

َّٛع هی٘صٛئتعا یٔ بٞ

.ددزٌ

ٝؼِبئ رد

َٛٙفغیث زمبح یىیصِٛٛفرٛٔ تازییغت تخٛٔ A

َّٛع رد ٗیا ٝو ذیدزٌ ٖاٛختعا شغٔ ٓیؾ٘اشٔ یدبیٙث یبٞ

ٛتیع ذئاٚس ٖداد تعد سا :سا ذٙتربجػ تازییغت ٚ ٜدزؾف ،یٕعلاپ

ٚ یٌذیوٚزچ ،ٝتغٞ زيل ٖذؽ هچٛو ،ٝتغٞ ٖذؽ ٓوازتٔ

تیؼلٛٔ سا ٝتغٞ ٖذؽ جربخ ٚ َّٛع یبؾغ ٖذؽ ٝتغخزث زیبع وعٛت ٝتفزٌ ترٛف تبؼِبئ ٝث ٝخٛت بث ٝو یشوزٔ

َّٛع رد یىیصِٛٛفرٛٔ تازییغت ٗیا ٗیممحٔ

بث كجيٙٔ بٞ

تپٛپآ عٛ٘ سا یِّٛع يزٔ ٖبٔس رد ٝو تعا یتازییغت ترٛف ظیسٛ

یٔ

َٛٙفغیث .دزیٌ

سبپعبو ٖبیث كیزى ساA

- 3 ؼیاشفا ،َبؼف

Bax

ؼٞبو ٚ

Bcl-2

( 25 تیِبؼف ؼیاشفا ،)

TNF-α

ٚ

P38 MAPK

( 31

ٝتغٞ رٛتوبف ربٟٔ ،) هیتٛتپٛپآ یت٘آ ییا

kappaB (NF-

(KB)

32 راذمٔ ؼیاشفا ٚ ) (ROS

33 ظیسٛتپٛپآ یبمِا ثػبث )

َّٛع رد یٔ بٞ

.دٛؽ

ٗیتوا شی٘

ٟٓٔ سا یىی

ٗیئتٚزپ ٗیزت تعا یِّٛع تّىعا یبٞ

ٝو ٚ دراد یٕٟٔ ؼم٘ َّٛع یؼیجى یصِٛٛفرٛٔ ظفح رد رد

یٕعلاپٛتیع یبؾغ زیس یٙیتوا ٝمّح هی ُىؽ ٝث یؼیجى تِبح دراد رازل بٔا . ربٕیت زثا زث

َٛٙفغیث بث

ٝمّح ،A

یٙیتوا یبٞ

،ٜذؽ ٜشیزٕیّپد ٚ ٝتفبی٘ ػزتغٌ یثٛخ ٝث

ٝدیت٘ رد

ٛف ٝث تر

هی ٜدٛت ٓظٙٔب٘

یٔ رد ٝىٙیا ٝث ٝخٛت بث ٗیازثبٙث .ذیآ

یّفا ٓغی٘بىٔ ،ٗیتوا ٗیئتٚزپ ٖٛیعاشیزٕیّپد ٚ ٖٛیعاشیزٕیّپ رد یىیصِٛٛفرٛٔ تازییغت ٗیا تعا َّٛع یصِٛٛفرٛٔ َزتٙو رد

َّٛع

َٛٙفغیث بث ٜذؽ ربٕیت یبٞ

یٔ ترٛف A

ٝث ٝو ،دزیٌ

ٛتپٛپآ یٔ َّٛع ظیس ( ذٔبد٘ا

13

ٝؼِبئ .) زمبح

ٝو داد ٖبؾ٘

ٗیٔبتیٚ

ٗیا سا C

َّٛع یىیصِٛٛفرٛٔ تازییغت ٌٝ٘ٛ

یزیٌّٛخ بٞ