• Tidak ada hasil yang ditemukan

Isolation of some genes involved in the synthesis of nisin from Lactococcus lactis

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2025

Membagikan "Isolation of some genes involved in the synthesis of nisin from Lactococcus lactis"

Copied!
20
0
0

Teks penuh

(1)

هﺪﮑﺸﻧاد ي يزروﺎﺸﮐ ﯽﻌﯿﺒﻃ ﻊﺑﺎﻨﻣ و

ﯽﺷزﻮﻣآ هوﺮﮔ تﺎﺗﺎﺒﻧ حﻼﺻا و ﺖﻋارز

نﺎﯾﺎﭘ

ﻪﺟرد ﺖﻓﺎﯾرد ياﺮﺑ ﻪﻣﺎﻧ ﺪﺷرا ﯽﺳﺎﻨﺷرﺎﮐ ي

ﻪﺘﺷر رد ي

يزروﺎﺸﮐ ﯽﺳﺪﻨﻬﻣ ﺶﯾاﺮﮔ

يژﻮﻟﻮﻨﮑﺗﻮﯿﺑ

:ناﻮﻨﻋ

يزﺎﺳاﺪﺟ نژ زا ﯽﺧﺮﺑ

يﺎﻫ ﺰﺘﻨﺳ رد ﺮﯿﮔرد زا ﻦﯿﺴﯿﻧ

Lactococcus lactis

دﺎﺘﺳا

ﺎﻤﻨﻫار :

عراز ﺮﺻﺎﻧ

ﺪﯿﺗﺎﺳا

روﺎﺸﻣ :

ﯽﺋﻮﻠﭼﺎﭼآ ﯽﺤﺘﻓ ماﺮﻬﺑ

ﺎﯾﺮﮐز يﺮﻐﺻا لﻮﺳر

ﺮﮕﺸﻫوﮋﭘ :

نﻻﺎﺧ ﺖﺒﺤﻣ ﺎﺿر

نﺎﺘﺴﻣز 94

(2)

أ

نﻻﺎﺧ ﺖﺒﺤﻣ :ﻮﺠﺸﻧاد ﯽﮔداﻮﻧﺎﺧ مﺎﻧ

ﺎﺿر :مﺎﻧ

ناﻮﻨﻋ نﺎﯾﺎﭘ ﻪﻣﺎﻧ : يزﺎﺳاﺪﺟ زا ﯽﺧﺮﺑ

نژ زا ﻦﯿﺴﯿﻧ ﺰﺘﻨﺳ رد ﺮﯿﮔرد يﺎﻫ Lactococcus lactis

دﺎﺘﺳا ﺎﻤﻨﻫار : عراز ﺮﺻﺎﻧ

ﺪﯿﺗﺎﺳا وﺎﺸﻣ ﺎﯾﺮﮐز يﺮﻐﺻا لﻮﺳر ،ﯽﺋﻮﻠﭼﺎﭼآ ﯽﺤﺘﻓ ماﺮﻬﺑ

ﻊﻄﻘﻣ ﻠﯿﺼﺤﺗ :ﯽ ﺪﺷرا ﯽﺳﺎﻨﺷرﺎﮐ

ﻪﺘﺷر يزروﺎﺸﮐ ﯽﺳﺪﻨﻬﻣ :

ﺶﯾاﺮﮔ

: يژﻮﻟﻮﻨﮑﺗﻮﯿﺑ يزروﺎﺸﮐ

هﺎﮕﺸﻧاد : ﻖﻘﺤﻣ ﯽﻠﯿﺑدرا هﺪﮑﺸﻧاد يزروﺎﺸﮐ : ﯽﻌﯿﺒﻃ ﻊﺑﺎﻨﻣ و

ﺦﯾرﺎﺗ :عﺎﻓد /27 /11 94 داﺪﻌﺗ ﺤﻔﺻ :تﺎ

61 ﯽﻧاﺮﮕﻧ ،ﯽﯾاﺬﻏ ﻊﯾﺎﻨﺻ رد ﯽﯾﺎﯿﻤﯿﺷ داﻮﻣ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺶﯾاﺰﻓا ﺎﺑ هﺪﺷ ﺮﺘﺸﯿﺑ ﺰﯿﻧ نآ ﯽﻟﺎﻤﺘﺣا ضراﻮﻋ ﺎﺑ ﻪﻄﺑار رد ﺎﻫ

.ﺖﺳا

ﯽﻣ ﺮﺘﺸﯿﺑ زور ﺮﻫ ﯽﯾاﺬﻏ ﻊﯾﺎﻨﺻ رد ﯽﻌﯿﺒﻃ داﻮﻣ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﻪﺑ ﺶﯾاﺮﮔ ﻞﯿﻟد ﻦﯿﻤﻫ ﻪﺑ ﻪﺑ هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ ﯽﯾﺎﯿﻤﯿﺷ داﻮﻣ .دﻮﺷ

ﯽﻧاﺮﮕﻧ زا ﯽﮑﯾ هراﻮﻤﻫ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ ناﻮﻨﻋ ﯽﺘﻧآ .ﺖﺳا هدﻮﺑ ﯽﯾاﺬﻏ ﻊﯾﺎﻨﺻ رد ﯽﻠﺻا يﺎﻫ

ﮏﯿﺗﻮﯿﺑ ﺎﻫ ﺪﻨﻧﺎﻣ ﯽﯾ

ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ ﻪﮐ ،ﺎﻫ

ﻪﺘﺳد ﯿﻣﺪﺿ يﺎﻫﺪﯿﺘﭙﭘ زا يا ،ﺪﻨﺘﺴﻫ ﯽﺑوﺮﮑ

ﻦﯾﺰﮕﯾﺎﺟ زا ﯽﮑﯾ ﯽﻣ ﻪﻨﯿﻣز ﻦﯾا رد ﺐﺳﺎﻨﻣ يﺎﻫ

.ﺪﺷﺎﺑ ياﺮﺑ

يﺮﺘﮐﺎﺑ ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ ياراد ،ﻦﯿﺴﯿﻧ لﺎﺜﻣ ﯽﻣ هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﻫاﺬﻏ رد هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ و هدﻮﺑ ﯽﺸﮐ

دﻮﺷ . ﺎﺑ ﯽﻧژ ﺮﺘﺳﻼﮐ ﮏﯾ

لﺎﻌﻓ و ﺰﺘﻨﺳﻮﯿﺑ رد نژ ﻦﯾﺪﻨﭼ اﺮﺑ ار ﯽﺒﺳﺎﻨﻣ يﺎﻫرﺎﮑﻫار ﮏﯿﺘﻧژ ﯽﺳﺪﻨﻬﻣ .ﺪﻨﺘﺴﻫ ﺮﯿﮔرد ﻦﯿﺴﯿﻧ يزﺎﺳ

هوﺮﮔ ﻦﯾا ﺪﯿﻟﻮﺗ ي

ﯽﻣ ﻪﺋارا داﻮﻣ زا نژ زا ﯽﺧﺮﺑ ﻖﯿﻘﺤﺗ ﻦﯾا رد ﻦﯾاﺮﺑﺎﻨﺑ .ﺪﻨﮐ

يﺮﺘﮐﺎﺑ زا ﻦﯿﺴﯿﻧ ﺰﺘﻨﺳﻮﯿﺑ رد ﺮﯿﮔرد يﺎﻫ Lactococcus lactis

ﻪﻧﺎﺴﻤﻫ و يزﺎﺳاﺪﺟ نژ ﯽﻟاﻮﺗ رﻮﻈﻨﻣ ﻦﯾا ياﺮﺑ .ﺪﯾدﺮﮔ يزﺎﺳ

لﺎﻌﻓ و ﺰﺘﻨﺳ رد ﺮﯿﮔرد يﺎﻫ زا ﻦﯿﺴﯿﻧ يزﺎﺳ

هﺎﮕﯾﺎﭘ NCBI

ﺮﮔزﺎﻏآ ﺲﭙﺳ و ﺪﯾدﺮﮔ ﺖﻓﺎﯾرد مﺮﻧ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﺐﺳﺎﻨﻣ يﺎﻫ

راﺰﻓا Oligo 7 نآ ياﺮﺑ رﻮﻈﻨﻣ ﻪﺑ .ﺪﯾدﺮﮔ ﺰﺘﻨﺳ و ﯽﺣاﺮﻃ ﺎﻫ

ﻪﻧﺎﺴﻤﻫ رد ﻞﯿﻬﺴﺗ نژ ﻦﯾا يزﺎﺳ

ﯽﻧﺎﯿﺑ ﻞﻗﺎﻧ رد ﺎﻫ Pet28a

هﺎﮕﯾﺎﺟ ، يﺎﻬﺘﻧا ﻪﺑ ﺮﮔزﺎﻏآ ﻖﯾﺮﻃ زا ﺐﺳﺎﻨﻣ ﯽﺷﺮﺑ يﺎﻫ

تﻻﻮﺼﺤﻣ يزﺎﺳاﺪﺟ ياﺮﺑ .ﺪﯾدﺮﮔ ﻪﻓﺎﺿاPCR

يﺮﺘﮐﺎﺑ زا ﯽﻣﻮﻧژDNA Lactococcus lactis

شور يﺎﻫ ﯽﻔﻠﺘﺨﻣ

ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﯽﺳرﺮﺑ درﻮﻣ شور ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ ﺞﯾﺎﺘﻧ .

ﯽﮕﭼرﺎﭙﮑﯾ ﺮﻈﻧ زا ﻢﻫPVP ﺖﯿﻤﮐ و صﻮﻠﺧ ﺮﻈﻧ زا ﻢﻫ وDNA

ﻦﯿﯾﺎﭘ يﺎﻫﺪﻨﯾاﺮﻓ ياﺮﺑ و هدﻮﺑ بﻮﻠﻄﻣ هﺪﺷ جاﺮﺨﺘﺳاDNA ﺪﻨﻧﺎﻣ ﯽﺘﺳد

ﯽﻣ ﺐﺳﺎﻨﻣPCR ﺪﺷﺎﺑ

ﻪﯿﻬﺗ زا ﺪﻌﺑ . DNA

،ﺐﺳﺎﻨﻣ رﺎﻬﭼ ﻪﻌﻄﻗ :ﻞﻣﺎﺷ ﻦﯿﺴﯿﻧ ﯽﻧژ ﺮﺘﺳﻼﮐ زاDNA

nis A, B ، nis C nis P،

، nis T- P هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ

.ﺪﺷ ﺮﯿﺜﮑﺗPCR

نژ يﺎﻫ nis C و nis P ﻢﯾﺰﻧآ ﺎﺑ شﺮﺑ زا ﺪﻌﺑ ﯽﻧﺎﯿﺑ ﻞﻗﺎﻧ رد ،ﻪﻃﻮﺑﺮﻣ ﯽﺷﺮﺑ يﺎﻫ

Pet28a و ﺮﺗﻮﻣوﺮﭘ لﺮﺘﻨﮐ ﺖﺤﺗ

رﻮﺗﺎﻨﯿﻣﺮﺗ ﻦﯿﯿﺗوﺮﭘ ،ﻪﺠﯿﺘﻧرد .ﺪﯾدﺮﮔ ﻪﻧﺎﺴﻤﻫT7

يﺎﻫ nis C و nis P ﯽﻨﯾﺪﯿﺘﺴﯿﻫ ﯽﻠﭘ ﻪﻟﺎﺒﻧد ﺎﺑ مﺎﻏدا ترﻮﺻ ﻪﺑ (His tag)

ﯽﻣ نﺎﯿﺑ يﺮﺘﮐﺎﺑ ﻞﺧاد ﻪﺑ ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧ يﺎﻫرﻮﺘﮐو .ﺪﻧﻮﺷ ﯽﻠﮐﺎﯿﺸﯾﺮﺷا

ﻪﯾﻮﺳ يوﺎﺣ ﺖﺸﮐ ﻂﯿﺤﻣ يور و هﺪﺷ ﻞﻘﺘﻨﻣDH5α

ﯽﻧﻮﻠﮐ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ و ﺶﻨﯾﺰﮔ ﻦﯿﺴﯾﺎﻣﺎﻧﺎﮐ .ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﺪﯿﯾﺎﺗ درﻮﻣ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا يﺎﻫﺮﮔزﺎﻏآ ﺎﺑPCR

ﺪﯿﻠﮐ هژاو ﺎﻫ : ﻪﻧﺎﺴﻤﻫ ،ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ هﺮﯿﺠﻧز ﺶﻨﮐاو ،نژ يزﺎﺳ

ﻠﭘ يا ) زاﺮﻤﯿ

،(PCR ﮏﯿﺘﻧژ ﯽﺳﺪﻨﻬﻣ .

(3)

ب

ﺐﻟﺎﻄﻣ ﺖﺳﺮﻬﻓ

:لوا ﻞﺼﻓ ﻪﺘﺷﺬﮔ تﺎﻘﯿﻘﺤﺗ ﺮﺑ يروﺮﻣ و ﻪﻣﺪﻘﻣ

1

-1 -1 ﻪﻣﺪﻘﻣ

2 -1 -2 هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ

3 -1 - 3 ﺘﭙﭘ ﯿ يﺎﻫﺪ ﻣ ﺪﺿ ﯿ ﺑوﺮﮑ ﯽ

4

-1 -3 - 1 ﺘﭙﭘ ﯿ يﺎﻫﺪ ﺘﻧآ ﯽ ﺑﯿ ﺗﻮ ﯿ ﮑ ﯽ

5 -1 -3 - 2 ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ ﺎﻫ

5 -1 -3 -2 - 1 ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ يﺮﺘﮐﺎﺑ يﺎﻫ

ﺖﺒﺜﻣ مﺮﮔ يﺎﻫ

6 -1 -3 -2 - 2 ﺮﺘﮐﺎﺑ ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ يﺎﻫ ﺮﺘﮐﺎﺑ ي يﺎﻫ ﻔﻨﻣ مﺮﮔ ﯽ ﮐﺮﺗ و ﯿ تﺎﺒ ﻪﺒﺷ ﺮﺘﮐﺎﺑ ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ

8 -1 -3 - 3 يﺎﻫدﺮﺑرﺎﮐ ﺘﻌﻨﺻ

ﯽ ﺘﭙﭘ ﯿ يﺎﻫﺪ ﻣ ﺪﺿ ﯿ ﺑوﺮﮑ ﯽ

10 -1 -4 ﻦﯿﺴﯿﻧ

12 -1 -4 -1 ﯿﻟﺎﻌﻓ ﻪﻨﻣاد ﻦﯿﺴﯿﻧ ﺖ

13 -1 -4 -2 ﻦﯿﺴﯿﻧ ﺮﺛا ﻢﺴﯿﻧﺎﮑﻣ

13

(4)

ت

-1 -4 -3 ﻦﯿﺴﯿﻧ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﯽﯾاﺬﻏ داﻮﻣ رد

14 -1 -4 -4 ﯽﮔﮋﯾو ﻦﯿﺴﯿﻧ ﯽﻟﻮﮑﻟﻮﻣ يﺎﻫ

16 -1 -4 -5 نژ ﻦﯿﺴﯿﻧ ﺰﺘﻨﺳ رد ﺮﯿﮔرد يﺎﻫ

17 -1 - 5 ﯽﺑوﺮﮑﯿﻣ ﺪﺿ يﺎﻫﺪﯿﺘﭙﭘ ﻪﯿﻬﺗ دﺮﺒﺸﯿﭘ رد يژﻮﻟﻮﻨﮑﺗﻮﯿﺑ ﺶﻘﻧ

18 -1 -5 - 1 يروﺎﻨﻓ ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧDNA

19 -1 -5 - 2 ﻪﯾﻮﺳ ﺖﺧﺎﺳ ﻟﻮﺗ يﺎﻫ

ﯿ ﺪ ﺪﻨﻨﮐ ه ي ﺪﻨﭼ ﻦﯾ ﺮﺘﮐﺎﺑ ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﮏﯿﺘﻧژ ﯽﺳﺪﻨﻬﻣ ﻖﯾﺮﻃ زا

22 -1 -5 - 3 يﺎﻬﺷور ﻦﯾﻮﻧ

،ﺪﯿﻟﻮﺗ ياﺮﺑ ﺺﻟﺎﺧ و يزﺎﺳاﺪﺟ

ﺮﺘﮐﺎﺑ يزﺎﺳ ﯾ

ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ رﻮﺘﮐآرﻮﯿﺑ رد

24 -1 -6 ﻤﺳﻼﭘ ﯿ ﺪ

25 -1 -6 -1 يﺮﺘﮐﺎﺑ رد ﺪﯿﻤﺳﻼﭘ ﺎﻫ

26 -1 -6 -2 ﻞﻗﺎﻧ ﺎﻫ

26 -1 -6 -3 ﻞﻗﺎﻧ ﺎﻫ ي ﯽﻧﺎﯿﺑ

27 -1 -6 -4 ﻞﻗﺎﻧ

ﺎﻫ ي ﯾ

رﺎﮐﻮ ﯾ ﺗﻮ ﯽ

رﺎﮐوﺮﭘ و

ﯾ ﺗﻮ ﯽ

27

-1 -6 -5 ﻞﻗﺎﻧ Pet28a+

29

(5)

ث

-1 -7 ﺶﻫوﮋﭘ فاﺪﻫا

29 :مود ﻞﺼﻓ ﺶﻫوﮋﭘ شور و داﻮﻣ

30 -2 -1 هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ يﺮﺘﮐﺎﺑ ﻪﯾﻮﺳ

31 -2 -2 ﯽﺣاﺮﻃ ﺮﮔزﺎﻏآ

31

-2 -3 ﺨﺘﺳا جاﺮ DNA

32

-2 -3 -1 شور PVP

32 -2 -3 -2 مﺮﻓوﺮﻠﮐ/ﻞﻨﻓ شور

34

-2 -3 -3 نﺪﻧﺎﺷﻮﺟ شور

35 -2 -4 ﺖﯿﻔﯿﮐ و ﺖﯿﻤﮐ ﯽﺳرﺮﺑ هﺪﺷ جاﺮﺨﺘﺳاDNA

36 -2 -5 نژ ﺮﯿﺜﮑﺗ ﺮﻈﻧ درﻮﻣ يﺎﻫ

36 -2 -6 ﺪﯿﻤﺳﻼﭘ جاﺮﺨﺘﺳا

38 -2 -7 نژ ﯽﻤﯾﺰﻧا شﺮﺑ ﺮﻈﻧ درﻮﻣ يﺎﻫ

و ﻞﻗﺎﻧ

39

-2 -8 ﺺﯿﻠﺨﺗ لژ زاDNA

40

(6)

ج

-2 -9 لﺎﺼﺗا

41 -2 -10 لﻮﻠﺳ ﻪﯿﻬﺗ ﯽﺘﺨﯾراﺮﺗ ﺪﻌﺘﺴﻣ يﺎﻫ

41 -2 -11 ﯽﺘﺨﯾراﺮﺗ لﻮﻠﺳ

ﺪﻌﺘﺴﻣ يﺎﻫ

42 -2 -12

ﯽﻧﻮﻠﮐ ﺶﻨﯾﺰﮔ

ﺐﯿﮐﺮﺗﻮﻧ يﺎﻫ

43 :مﻮﺳ ﻞﺼﻓ ﻪﺘﻓﺎﯾ و ﺞﯾﺎﺘﻧ

ﺶﻫوﮋﭘ يﺎﻫ

44 -3 -1 مﻮﻧژ ﯽﻟاﻮﺗ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ

45 -3 -3 شور ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ جاﺮﺨﺘﺳا ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ

DNA

46

-3 -4 ﻦﯿﺴﯿﻧ ﺰﺘﻨﺳ رد ﺮﯿﮔرد يﺎﻬﻧژ زا ﻪﻌﻄﻗ ﻦﯾﺪﻨﭼ ﺮﯿﺜﮑﺗ ﺎﺑ

PCR

48

-3 -5 ﻞﻗﺎﻧ و هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ يﺎﻬﻧژ شﺮﺑ

49 -3 -6 شﺮﺑ ﻞﻗﺎﻧ و ﺎﻬﻧژ ﺺﯿﻠﺨﺗ زرﺎﮔآ لژ زا ﻪﺘﻓﺎﯾ

52 -3 -7 لﺎﺼﺗا

52 -3 -8 ﯽﺘﺨﯾراﺮﺗ

52

(7)

ح

-3 -9 لﻮﻠﺳ ﺶﻨﯾﺰﮔ هﺪﺷ ﺖﺨﯾراﺮﺗ يﺎﻫ

54 ﻪﺠﯿﺘﻧ ﯽﻠﮐ يﺮﯿﮔ

56

تادﺎﻬﻨﺸﯿﭘ

56 ﺬﺧﺂﻣ و ﻊﺑﺎﻨﻣ ﺖﺳﺮﻬﻓ

57

لوﺪﺟ ﺖﺳﺮﻬﻓ ﺎﻫ

لوﺪﺟ ناﻮﻨﻋ و هرﺎﻤﺷ

ﻪﺤﻔﺻ

لوﺪﺟ -2

- 1 ﺰﯿﻟ ﺮﻓﺎﺑ تﺎﺒﯿﮐﺮﺗ

34 لوﺪﺟ -2

- 2 ﺸﺗ داﻮﻣ ﺶﻨﮐاو هﺪﻨﻫد ﻞﯿﮑ PCR

37

لوﺪﺟ -2

- 3 ﯽﯾﺎﻣد ﻪﺧﺮﭼ PCR

37

(8)

خ

لوﺪﺟ -2

- 4 ﯾﺰﻧآ شﺮﺑ ﺶﻨﮐاو هﺪﻨﻫد ﻞﯿﮑﺸﺗ داﻮﻣ ﯽﻤ

40 لوﺪﺟ -3 - 1 يﺮﺘﻣﻮﺘﻓﻮﺘﮑﭙﺳا ﺞﯾﺎﺘﻧ

47

(9)

د

ﻞﮑﺷ ﺖﺳﺮﻬﻓ ﺎﻫ

ﻞﮑﺷ ناﻮﻨﻋ و هرﺎﻤﺷ

ﻪﺤﻔﺻ

ﻞﮑﺷ -1 - 1 ﻞﻗﺎﻧ Pet28a

29

ﻞﮑﺷ -3 - 1 ﻦﯿﺴﯿﻧ ﯽﻧژ ﺮﺘﺳﻼﮐ

45

ﻞﮑﺷ -3 -2 ﺮﯾﻮﺼﺗ لﻮﺼﺤﻣ ﺮﯾﻮﺼﺗ و زرﺎﮔا لژ يور ﺮﺑ هﺪﺷ جاﺮﺨﺘﺳاDNA

زرﺎﮔا لژ يور ﺮﺑPCR

47 ﻞﮑﺷ -3 - 3 تﺎﻌﻄﻗ ﺗDNA ﺎﺑ هﺪﺷ ﺮﯿﺜﮑ PCR

49 ﻞﮑﺷ -3 ﻪﻌﻄﻗ :4 هدرﻮﺧ شﺮﺑ ﻞﻗﺎﻧ وC

51 ﻞﮑﺷ -3 ﻪﻌﻄﻗ :5 ،P ،A, B هدرﻮﺧ شﺮﺑ ﻞﻗﺎﻧ وT-P

51 ﻞﮑﺷ -3 تﺎﻌﻄﻗ :6 وDNA

ﻞﻗﺎﻧ ﺮﮐرﺎﻣ ﺎﺑ نآ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ و لژ زا هﺪﺷ جاﺮﺨﺘﺳا 25 Kb

52 ﻞﮑﺷ -3 - 7 ﯽﻨﻠﮐ زا ﻞﺻﺎﺣ يﺎﻫ ﯽﺘﺨﯾراﺮﺗ

53 ﻞﮑﺷ -1 - 8 ﯽﻨﻠﮐ ﻪﻌﻄﻗPCR

C

54 ﻞﮑﺷ -1 - 9 ﯽﻨﻠﮐ ﻪﻌﻄﻗPCR

P

55

(10)

:لوا ﻞﺼﻓ

تﺎﻘﯿﻘﺤﺗ ﺮﺑ يروﺮﻣ و ﻪﻣﺪﻘﻣ ﻪﺘﺷﺬﮔ

(11)

2

-1 -1 ﻪﻣﺪﻘﻣ ﻢﺴﯿﻧﺎﮔراوﺮﮑﯿﻣ ﺪﺷر ﺶﻨﮐاو ﺐﺟﻮﻣ اﺬﻏ رد ﺎﻫ

ﯽﻣ ﯽﻤﯾﺰﻧآ و ﯽﯾﺎﯿﻤﯿﺷ يﺎﻫ ﻪﺠﯿﺘﻧ رد ﻪﮐ دﻮﺷ

نآ

ﯽﻣ دﺎﺠﯾا نآ ﺖﻣﻼﺳ و ﯽﯾاﺬﻏ شزرا ،ﺖﻈﻠﻏ ،ﺖﻓﺎﺑ ،ﻢﻌﻃ ،ﮓﻧر رد ﯽﺗاﺮﯿﯿﻐﺗ .دﻮﺷ

ﮔدﻮﻟآ ﯽ ﻣ ﯿ ﺑوﺮﮑ ﯽ ﺖﻠﻋ

ﺻا ﻠ ﯽ اﺬﻏ داﻮﻣ دﺎﺴﻓ ﯽﯾ

ﺖﺳا . رﺮﺿ ﯽﻠﻣ دﺎﺼﺘﻗا ﻪﺑ و داﺮﻓا ﺖﻣﻼﺳ ﻪﺑ ﺎﻫاﺬﻏ رد ﻪﺘﺳاﻮﺧﺎﻧ ﯽﺑوﺮﮑﯿﻣ ﺪﺷر

ﯽﻣ .ﺪﻧز

،ﻦﯾاﺮﺑﺎﻨﺑ ﯽﯾاﺬﻏ لﻮﺼﺤﻣ ﮏﯾ رد ﻒﻠﺘﺨﻣ تاﺮﯿﯿﻐﺗ دﺎﺠﯾا رد ﺮﯿﺧﺄﺗ ﺎﯾ يﺮﯿﮔﻮﻠﺟ

يروﺮﺿ ﺖﺳا

)

Sahl & Bierbaum, 1998

( . هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ

، داﻮﻣ ي ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ ﯾ ﺶﻫﺎﮐ ،يﺮﯿﮔﻮﻠﺟ رﻮﻈﻨﻣ ﻪﺑ

ﺪﺷر ﺖﻈﻓﺎﺤﻣ ﺎ

بوﺮﮑﯿﻣ ﯽﻣ ﻪﻓﺎﺿا ﯽﯾاﺬﻏ داﻮﻣ ﻪﺑ ،ﯽﯾﺎﯿﻤﯿﺷ تاﺮﯿﯿﻐﺗ زا ﯽﺷﺎﻧ دﺎﺴﻓ ﺎﯾ و ﺎﻫ

دﻮﺷ )

Lück & Lipinski, 2002

( .

.ﺪﺷﺎﺑ ﯽﯾﺎﯿﻤﯿﺷ ﺎﯾ ﯽﻌﯿﺒﻃ ﺖﺳا ﻦﮑﻤﻣ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ ﻦﯾا و هﺎﯿﮔ ،بوﺮﮑﯿﻣ زا ﯽﻌﯿﺒﻃ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ

ﯽﻣ ﺄﺸﻨﻣ ناﻮﯿﺣ .ﺪﻧﺮﯿﮔ

ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻦﯾا زا يا ﺮﮑﯿﻣ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ

ﯽﺑو ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ ،ﺎﻫﺪﯿﺳا ﻞﻣﺎﺷ و ﻞﮑﻟا ،ﺎﻫ

يد ﺖﺳا ﻞﯿﺘﺳا )

Russell & Ayliffe, 1999

(.

ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ ﺎﻫ

ﻪﺘﺳد ﯽﺑوﺮﮑﯿﻣﺪﺿ يﺎﻫﺪﯿﺘﭙﭘ زا يا ﺪﻨﺘﺴﻫ

ﻪﮐ

ﻂﺳﻮﺗ يﺮﺘﮐﺎﺑ دﻮﺧ ﯽﻣ ﺪﯿﻟﻮﺗ ﺎﻫ

ﺪﻧﻮﺷ . نآ ﻪﻠﻤﺟ زا ﻪﮐ ﯽﻣ ﺎﻫ

ﻪﺑ ناﻮﺗ ﻦﯿﺴﯿﻧ دﺮﮐ هرﺎﺷا 1

ﻪﺑ ﻦﯿﺴﯿﻧ . ناﻮﻨﻋ

رد هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ ﯽﻣ هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﻫاﺬﻏ

.دﻮﺷ رد ﯽﻧﻻﻮﻃ تﺪﻣ ﻪﺑ ﯽﯾاﺬﻏ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ هدﺎﻣ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﻦﯿﺴﯿﻧ

هﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫرﻮﺸﮐ هزوﺮﻣا و

ﺖﻠﻋ ﻪﺑ ﺶﯾاﺮﮔ

فﺮﺼﻣ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ ﻪﺑ نﺎﮔﺪﻨﻨﮐ يﺎﻫ

،ﯽﺘﺴﯾز

ﺖﺳا ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺶﯾاﺰﻓا ﯽﯾاﺬﻏ ﻊﯾﺎﻨﺻ رد داﻮﻣ ﻦﯾا فﺮﺼﻣ )

Morgan et al, 1999

(.

زﺮﮔور ﻂﺳﻮﺗ رﺎﺑ ﻦﯿﻟوا ﻦﯿﺴﯿﻧ

لﺎﺳ رد ﺎﺳﺎﻨﺷ1928

ﺪﺷ ﯽﻓﺮﻌﻣ و ﯽﯾ )

Quoted from Harris et al, 1991

.(

و لﺎﺳ رد و اﺬﻏ نﺎﻣزﺎﺳ1969

وراد ﯽﯾاﺬﻏ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ هدﺎﻣ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ار ﻦﯿﺴﯿﻧ زا هدﺎﻔﺘﺳا ،ﯽﻧﺎﻬﺟ ﺖﺷاﺪﻬﺑ نﺎﻣزﺎﺳ و داﻮﻣ يﺎﺟ ﻪﺑ

دﺮﮐ ﺪﯿﯾﺎﺗ ﯽﯾﺎﯿﻤﯿﺷ ﺖﺳا ه

)

Davidson & Hrisson, 2002

( . و هزوﺮﻣا ﻦﯿﺴﯿﻧ ﻪﺑ

ﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ هدﺎﻣ ﮏﯾ ناﻮﻨﻋ ه

رد

1. Nisin

(12)

61

تﻻﻮﺼﺤﻣ رد ﺎﯿﻧد ﺮﺳاﺮﺳ ﻒﻠﺘﺨﻣ

ﯽﻣ هدﺎﻔﺘﺳا دﻮﺷ

. ﻧ ﯿ ﺴ ﯿ ﻦ ﻮـﺳ ﻂﺳﻮﺗ ﯾﻪ

يﺎـﻫ يﺮﺘﮐﺎﺑ سﻮﮐﻮﮐﻮﺘﮐﻻ

ﺘﮐﻻ ﯿ

1ﺲ ﻪﯾﻮﺳ ﺘﮐﻻ ﯿ ﺲ ﻟﻮﺗ ﯿ ﺪ ﻣ ﯽ دﻮﺷ )

Gross & Morell, 1971

(.

يزﺎﺳاﺪﺟ رﻮﻈﻨﻣ ﻪﺑ ﻖﯿﻘﺤﺗ ﻦﯾا ﻦﯾاﺮﺑﺎﻨﺑ

نژ .ﺖﺳا ﻪﺘﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧا ﻦﯿﺴﯿﻧ ﺰﺘﻨﺳﻮﯿﺑ رد ﺮﯿﮔرد يﺎﻫ

-1 -2 هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ

ﻧ داﻮﻣ هﺪﻧراﺪﻬﮕ

، ﻤﺷ داﻮﻣ ﯿﺎ ﯽﯾ ﺒﻃ ﯿﻌ ﯽ ﯾ ﺎ ﻋﻮﻨﺼﻣ ﯽ ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ داﻮﻣ ﺖﻇﺎﻔﺣ رﻮﻈﻨﻣ ﻪﺑ

اﺬﻏ ﯽﯾ ﺶﻫﺎﮐ و

دﺎﺴﻓ و ﺖﺳد زا ﻦﺘﻓر

ﮐ ﯿﻔ ﯿ ﺖ ﯾ ﺎ اﺬﻏ شزرا ﯽﯾ

ﺰﺠﺗ و ﯾﻪ ﻣ ﻂﺳﻮﺗ نآ ﯿ

ﻧﺎﮔراوﺮﮑ ﯿ

ﻢﺴ ﺎﻫ ﻣ هدﺎﻔﺘﺳا ﯽ

دﻮﺷ زا .

شور ﺎﻫ ي راﺪﻬﮕﻧ ي

، ﻣ ﯽ ناﻮﺗ ﺮﺘﮐﺎﺑ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﻪﺑ ي

ﺎﻫ ي ﺧ شﻮﺧ ﯿ

،ﻢ اﺮﺑ چرﺎﻗ و ﺎﻫﺮﻤﺨﻣ ي

ﮐ ﻪﻓﺎﺿا ندﺮ

وﯾ ﮔﮋ ﯽ ﺎﻫ ي ﻨﭘ ،لﺎﺜﻣ رد ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ) صﺎﺧ ﯿﺮ

و ﻆﻔﺣ .دﺮﮐ هرﺎﺷا ( ﯾﺎ

اﯾ دﺎﺠ ﺬﻐﺗ شزرا ﯾﻪ

ا ي

، و ﺮﻄﻋ ،ﺖﻓﺎﺑ

ﺴﺑ اﺬﻏ شزرا ﻆﻔﺣ رد ﻢﻌﻃ ﯿ

رﺎ لﻮﺒﻗ .ﺖﺳا ﻢﻬﻣ ﯾ

ﮏ ﮐارﻮﺧ هدﺎﻣ ﯽ

، ناﻮﻨﻌﺑ ﯾ ﮏ اﺬﻏ هدﺎﻣ ﯽﯾ ﻦﮑﻤﻣ ﺐﺳﺎﻨﻣ

ﮓﻨﻫﺮﻓ رد ﺖﺳا ﺎﻫ

ي ﺒﻌﺗ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﯿ

ﺎﻫﺮ ي ﺗوﺎﻔﺘﻣ ﯽ .ﺪﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷاد راﺪﻬﮕﻧ

ي اﺬﻏ داﻮﻣ ﯽﯾ

ﻣ ﺮﻃ زا ﻻﻮﻤﻌ ﯾ

ﮔﻮﻠﺟ ﯿﺮ ي ﺮﺘﮐﺎﺑ ﺪﺷر زا ي

،ﺎﻫ چرﺎﻗ ﺎﺳ و ﺎﻫ ﯾﺮ ﻣ ﯿ ﻧﺎﮔراوﺮﮑ ﯿ

ﻢﺴ

،ﺎﻫ ﻨﭽﻤﻫ ﯿ ﻦ ﺴﮐا ﯿ ﺳاﺪ ﯿ نﻮ ﺑﺮﭼ ﯽ ﺎﻫ ﺚﻋﺎﺑ ﻪﮐ

ﺷﺮﺗ ﯿ ﮔﺪ ﯽ ﯽﻣ ﻣ ترﻮﺻ ،ﺪﻧﻮﺷ ﯽ

ﺬﭘ ﯾ دﺮ . زا شور ﺎﻫ ي اﺮﺑ لواﺪﺘﻣ ي

راﺪﻬﮕﻧ ي اﺬﻏ ﯽﻣ ﻪﺑ ناﻮﺗ ،نﺪﻧﺎﮑﺸﺧ

ندﺮﮐ ﮏﺸﺧ ﺎﺑ

ﺮﺟ ﯾ نﺎ اﻮﻫ ي ﺮﻃ زا ندﺮﮐ ﮏﺸﺧ ،مﺮﮔ ﯾ

،دﺎﻤﺠﻧا ،دﺎﻤﺠﻧا ﺑ

ﻪﺘﺴ ﺪﻨﺑ ي ،ءﻼﺧ رد

وﺮﺴﻨﮐ يزﺎﺳ

، راﺪﻬﮕﻧ ي ﺎﻣ رد ﯾ

،تﺎﻌ ﺮﮐ ﯾ ﻟﺎﺘﺴ ﯿ ﺳاﺰ ﯿ

،نﻮ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ ندوﺰﻓا ﯾﺎ

ﺎﻫزﺎﮔ ي ﺑ ﯽ د ﺪﻨﻧﺎﻣ ﺮﺛا ي

ﺴﮐا ﯿ ﺪ ﻦﺑﺮﮐ دﺮﮐ هرﺎﺷا )

Lück & Lipinski, 2002

( .

ﯽﻣ هﺪﯿﻣﺎﻧ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ ﺐﻠﻏا ﯽﯾاﺬﻏ ﯽﺑوﺮﮑﯿﻣ ﺪﺿ داﻮﻣ رد ﺖﻟﺎﺧد ﺎﺑ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ .ﺪﻧﻮﺷ

،ﯽﻟﻮﻠﺳ يﺎﺸﻏ ﯽﮑﯿﺘﻧژ يﺎﻫرﺎﺘﺧﺎﺳ ﺎﯾ ﯽﻤﯾﺰﻧآ ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ

، ﯽﮔﺪﻧرادزﺎﺑ ﺮﺛا ﺮﺑ

ﺪﺷر ﻢﺴﯿﻧﺎﮔراوﺮﮑﯿﻣ ﺎﻫ

.ﺪﻧراد

و نژورﺪﯿﻫ ﺪﯿﺴﮐاﺮﭘ ،ﻒﯿﻌﺿ ﯽﻟآ يﺎﻫﺪﯿﺳا ﻞﻣﺎﺷ ﯽﯾﺎﯿﻤﯿﺷ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ ﻪﺗﻼﺷ

هﺪﻨﻨﮐ ﺎﻫ هدﻮﺑ )

Russell,

1991

و ﯽﻟ ﯽﻣ ﺄﺸﻨﻣ ناﻮﯿﺣ و هﺎﯿﮔ ،بوﺮﮑﯿﻣ زا ﯽﻌﯿﺒﻃ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ ﺪﺿ داﻮﻣ .ﺪﻧﺮﯿﮔ

ﯿﻣ زا ﻞﺻﺎﺣ ﯽﺑوﺮﮑ

2. Lactococcus lactis

(13)

ﻢﺴﯿﻧﺎﮔراوﺮﮑﯿﻣ ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ ،ﺎﻫﺪﯿﺳا ﻞﻣﺎﺷ ﺎﻫ

يد و ﻞﮑﻟا ،ﺎﻫ ﺖﺳا ﻞﯿﺘﺳا

)

Russell & Ayliffe, 1999

( .

ﻢﺴﯿﻧﺎﮔراوﺮﮑﯿﻣ ﺪﺷر زا يﺮﯿﮔﻮﻠﺟ ﺎﯾ و ندﺮﮐ يﺪﯿﺳا رﻮﻈﻨﻣ ﻪﺑ ﯽﻟآ يﺎﻫﺪﯿﺳا ﺎﻫ

، ﻪﺑ ﻢﯿﻘﺘﺴﻣ رﻮﻃ ﻪﺑ ﺎﯾ

زا ﯽﻀﻌﺑ ﯽﻣ ﻪﻓﺎﺿا ﺎﻫاﺬﻏ

زا ﯽﻀﻌﺑ ﻞﻤﻋ ﺎﺑ ﺎﯾ و ﺪﻧﻮﺷ هﺪﻧز تادﻮﺟﻮﻣ

ﻞﯿﺳﺎﺑﻮﺘﮐﻻ ﻞﺜﻣ ﯽﻣ ﺪﯿﻟﻮﺗ ﺎﻫ

.ﺪﻧﻮﺷ

ﻪﺑ ﺎﻫﺪﯿﺳا زا ﯽﻀﻌﺑ ﻪﺑ و ﺪﻨﺘﺴﻫ ﯽﺑوﺮﮑﯿﻣ ﺪﺷر ﺮﺛﺆﻣ هﺪﻨﻨﮐرﺎﻬﻣ ﮏﯿﺑرﻮﺳﺪﯿﺳا و ﮏﯿﯾوﺰﻨﺑﺪﯿﺳا صﻮﺼﺧ

ﯽﻣ ﻪﻓﺎﺿا هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﺎﻫاﺬﻏ زا ﯽﺧﺮﺑ .ﺪﻧﻮﺷ

ﭻﯿﻫ ﻪﮐ ﺎﺟ نآ زا هﺪﯾا ،ﺪﻨﺘﺴﻫ هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ نﻮﻨﮐا ﻪﮐ دﻮﺟﻮﻣ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ زا ﮏﯾ

ﯽﻤﻧ لآ ﻨﺷﺎﺑ و ﺪ

نآ ﯽﯾآرﺎﮐ هﺪﯾا هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ هدﺎﻣ ﮏﯾ ندﺮﮐ ﺺﺨﺸﻣ نﺎﮑﻣا ،ﺖﺳا ﺮﯿﻐﺘﻣ ﺎﻫ

هدﺎﻣ عﻮﻧ ﮏﯾ ياﺮﺑ ﯽﺘﺣ لآ

لﺎﺳ رد .دراﺪﻧ دﻮﺟو صﺎﺧ ﯽﯾاﺬﻏ فﺮﺼﻣ ﻪﺟﻮﺗ ﺖﻠﻋ ﻪﺑ ﺮﯿﺧا يﺎﻫ

ﺪﻨﯾاﺮﻓ ﻦﯾﺮﺘﻤﮐ ﻪﮐ ﯽﯾﺎﻫاﺬﻏ ﻪﺑ نﺎﮔﺪﻨﻨﮐ

ﺪﺷﺎﺑ هﺪﺸﻧ هدﺎﻔﺘﺳا نآ رد ﯽﯾﺎﯿﻤﯿﺷ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ داﻮﻣ زا و ﺪﺷﺎﺑ ﻪﺘﻓﺮﮔ ترﻮﺻ نآ يور داﻮﻣ زا هدﺎﻔﺘﺳا ،

ﺖﺳا ﻪﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﻪﺟﻮﺗ درﻮﻣ ﺶﯿﭘ زا ﺶﯿﺑ ﯽﮑﯾژﻮﻟﻮﯿﺑ هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ )

Morgan et al, 1999

(.

-1 -3 ﺘﭙﭘ ﯿ يﺎﻫﺪ ﻣ ﺪﺿ ﯿ ﺑوﺮﮑ

ﺮﺘﮐﺎﺑ ي ﺎﻫ ﺑ ﺤﻣ رد ﺎﻘﺑ رﻮﻈﻨﻣ ﻪ ﯿ

ﻂ ﺒﻃ ﯿﻌ ﯽ ﺎﺳ ﺎﺑ ﻊﺑﺎﻨﻣ ﺮﺳ ﺮﺑ ﺖﺑﺎﻗر و ﯾﺮ

ﻣ ﯿ ﻧﺎﮔراوﺮﮑ ﯿ

ﻢﺴ

،ﺎﻫ يﺮﺴﮑﯾ

ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ ﻣ ﺪﺿ ﯿ ﺑوﺮﮑ ﯽ ﻟﻮﺗ ﯿ ﺪ ﻣ ﯽ ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ ﻪﮐ ﺪﻨﻨﮐ رﺎﻬﻣ

ﯾﺎ نﺪﺷ ﻪﺘﺸﮐ ﻪﯾﻮﺳ

يﺎﻫ ﻗر ﯿ ﺐ ﻣ ﯽ ﺮﻈﻧ ﻪﺑ .ﺪﻧﻮﺷ

ﻣ ﯽ ﺮﺘﮐﺎﺑ مﺎﻤﺗ ﻪﮐ ﺪﺳر ي

ﺎﻫ ﻟﻮﺗ ناﻮﺗ ﯿﺪ ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ ﻣ ﺪﺿ ﯿ ﺑوﺮﮑ ﯽ ﺎﺑ ﺎﻬﻨﺗ ﺎﻣ و ﺪﻧراد ار ﯾﺪ

ﻪﻧﻮﮔ ﻫ يﺎ ﻟﻮﺗ ﯿﺪ ةﺪﻨﻨﮐ

ﺻﺎﺧ عﻮﻧ ﯽ

ا زا ﯾ ﻦ ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ اﺮﺷ و ﯾ ﻂ ﻟﻮﺗ ياﺮﺑ يﺮﺘﮐﺎﺑ ﺪﺷر ﯿ

ﺪ ﺎﻬﻧآ ار ﺎﺳﺎﻨﺷ ﯽﯾ ﻨﮐ ﯿ ﻢ ﺘﭙﭘ . ﯿ يﺎﻫﺪ ﺪﺿ

ﻣﯿ ﺑوﺮﮑ

1ﯽ رﺎﺼﺘﺧا ﻪﺑ ﻪﮐ هﺪﯿﻣﺎﻧ AMP

ﻣ ﯽ ﺎﻬﻨﺗ ،ﺪﻧﻮﺷ ﯾﮑ

ﯽ ا زا ﯾ ﻦ هوﺮﮔ ﮐﺮﺗ عﻮﻨﺘﻣ يﺎﻫ ﯿ

تﺎﺒ ﻣ ﺪﺿ ﯿ ﺑوﺮﮑ ﯽ

ا .ﺪﻨﺘﺴﻫ ﯾ ﻦ ﺌﺗوﺮﭘ ﻪﺒﺷ يﺎﻬﻟﻮﮑﻟﻮﻣ ﯿﻨ

ﯽ ﺎﺣ ﺐﻠﻏا يو

ﺳا ﯿ ﻣآﺪ ﯿ ﻪﻨ ﻐﺗ يﺎﻫ ﯿﯿ ﻞﮑﺷﺮ ﯾ ﻪﺘﻓﺎ هﺪﺷ حﻼﺻا و ﺪﻨﺘﺴﻫ يا

ﻠﭘ رد ﻪﮐ ﯽ ﺘﭙﭘ ﯿ يﺎﻫﺪ ر ﻂﺳﻮﺗ هﺪﺷ ﻪﺘﺧﺎﺳ ﯾ

موزﻮﺒ ﺎﻫ ﯾ ﺖﻓﺎ ﻤﻧ ﯽ ا .ﺪﻧﻮﺷ ﯾ ﻦ ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ ﻞﻣﺎﺷ ﺺﺨﺸﻣ رﻮﻃ ﻪﺑ

ود ﺮﺘﮐﺎﺑ هوﺮﮔ ﯾ

ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﺘﻧآ و ﯽ ﺑﯿ ﺗﻮ ﯿ يﺎﻬﮑ ﺘﭙﭘ ﯿ يﺪ ا سﺎﺳا ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ ﯾ

ﻦ ﻪﻘﺒﻃ ﺎﭘ ﺮﺑ يﺪﻨﺑ ﯾﻪ

ﻧﺎﮑﻣ ﯿ ﻢﺴ ﺑﯿ ﺰﺘﻨﺳﻮ

3. Antimicrobial Peptides

(14)

.ﺖﺳﺎﻬﻧآ دﻮﺧ مﻮﺳ رﺎﺘﺧﺎﺳ سﺎﺳا ﺮﺑ ﺎﻫAMP

ﺰﯿﻧ ز ﻪﺑ ﯾﺮ هوﺮﮔ ﺎﻫ ﯽﯾ ﺘﭙﭘ ﺪﻨﻧﺎﻣ ﯿ يﺎﻫﺪ ﻄﺧ ﯽ

، ﺘﭙﭘ ﯿ يﺎﻫﺪ ياراد

ﭘرﺎﻣ ﯿ ﭻ ﺘﭙﭘ ،α

ﯿ يﺎﻫﺪ ياراد تﺎﺤﻔﺻ ﺘﭙﭘ وβ

ﯿ يﺎﻫﺪ ﺎﺑ ﻟاﻮﺗ ﯽ ﻨﻏ ﯽ زا ﯾ ﮏ عﻮﻧ ﺳا ﯿﺪ ﻣآ ﯿ ﻪﻨ يﺪﻨﺑ ﻪﻘﺒﻃ صﺎﺧ

ﻣ ﯽ ﺪﻧﻮﺷ ﻧﺎﮑﻣ . ﯿ ﻢﺴ ﻟﺎﻌﻓ ﯿ ﺖ ﻓ يﺎﻫﺪﺳ زا ﺎﻬﻧآ ﯿﺰ

ﯾﮑ ﯽ ﺎﺗ ندﻮﺑ يﺎﻬﺨﺳﺎﭘ اﯾ

ﻨﻤ ﯽ ﻟﻮﻠﺳ ﯽ ﻠﻋ ﯿﻪ ﻣ ﯿ وﺮﮑ ﻧﺎﮔرا ﯿ ﻢﺴ ﺎﻫ

ﻐﺘﻣ ﯿﺮ ﺖﺳا ﺑ نﻮﻨﮐﺎﺗ . ﯿ

ﺶ زا عﻮﻧ100 ﻒﻠﺘﺨﻣAMP

هﺮﻬﻣ رد ناراد ﺎﺳﺎﻨﺷ ﯽﯾ ﺑ .ﺖﺳا هﺪﺷ ﯿ

ﺮﺘﺸ اﯾ ﻦ ﺘﭙﭘ ﯿ ﺎﻫﺪ

ﺮﻈﻧ زا يرﺎﺘﺧﺎﺳ ﻪﺑﺎﺸﻣ

ﯾ ﺪﮑ ﯾ ﺮﮕ هدﻮﺑ و ﻮﮑﻟﻮﻣ نزو ﻟ

ﯽ ﺎﻬﻧآ

ًﻻﻮﻤﻌﻣ ﺑﯿ ﻦ ﺎﺗ1000 ﻣ نﻮﺘﻟاد 5000

ﯽ ﺪﺷﺎﺑ

) نارﺎﮑﻤﻫ و ﻦﯾرﻮﻣ .(2006

-1 -3 - 1 ﺘﭙﭘ ﯿ يﺎﻫﺪ ﺘﻧآ ﺑﯿ ﺗﻮ ﯿ

ﺘﭙﭘ ﯿ يﺎﻫﺪ ﺘﻧآ ﯽ ﺑﯿ ﺗﻮ ﯿ ﮑ ﯽ ﺳو ﻪﺑ ﯿ ﻪﻠ ر ﯾ موزﻮﺒ ﺎﻫ رد و هﺪﺸﻧ ﺰﺘﻨﺳ ضﻮﻋ

ﻃ ﯽ ﺶﻨﮐاو هدﺮﺸﻓ يﺎﻫ يزﺎﺳ

ﭘ و ﻪﻠﺣﺮﻣ ﻪﺑ ﻪﻠﺣﺮﻣ ﯿ

ﭽ ﯿ هﺪ ﺘﭙﭘ يﺎﻫزﺎﺘﺘﻨﺳ زا ﻪﮐ يا ﯿ

يﺪ ﻏ ﯿﺮ ر ﯾ ﻣوزﻮﺒ ﯽ ﺑ گرﺰﺑ ﻣ هﺮﻬ ﯽ ﮔﯿ ﺪﻧﺮ

، ﻣ ﻪﺘﺧﺎﺳ ﯽ -

ا .ﺪﻧﻮﺷ ﯾ ﻦ ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ ﺳا يوﺎﺣ ﺐﻠﻏا ﯿ

ﻣآﺪ ﯿ ﻪﻨ ﻏ يﺎﻫ ﯿﺮ ﺌﺗوﺮﭘ ﯿﻨ ﯽ ﺳا ﻞﻣﺎﺷ ﻪﮐ ﯿﺪ

ﻣآ ﯿ ﻪﻨ عﻮﻧ يﺎﻫ ﺳا ،D

ﯿ يﺎﻫﺪ

ﻫﯿ ﺴﮐورﺪ ﯽ و ﯾﺎ د ﯾ ﺮﮕ ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ ﻏ ﯿﺮ لﻮﻤﻌﻣ ﯽﻣ ﺪﻧﻮﺷ . داﻮﻣ ﻦﯾا ﺳو هدوﺪﺤﻣ

ﯿﻌ ﯽ ﻧﺎﮑﻣ زا ﯿ ﻢﺴ يﺎﻫ و يرﺎﻬﻣ

ﻣ نﺎﺸﻧ ار يدﺮﮑﻠﻤﻋ ﯽ

ﺪﻨﻫد )

Shetty et al, 2005

(.

-1 -3 - 2 ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ ﺎﻫ

ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ ﻪﺘﺳد ﺎﻫ

ر ﯽﺑوﺮﮑﯿﻣﺪﺿ يﺎﻫﺪﯿﺘﭙﭘ زا يا ﯾ

ﻣوزﻮﺒ ﯽ ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ ﻂﺳﻮﺗ

يﺮﺘﮐﺎﺑ ﺪﯿﻟﻮﺗ ﺎﻫ

ﯽﻣ ﺪﻧﻮﺷ ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ . ﺎﻫ

هوﺮﮔ ﻂﺳﻮﺗ يﺮﺘﮐﺎﺑ ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ

يﺮﺘﮐﺎﺑ صﻮﺼﺨﺑ ﺎﻫ ﺳا يﺎﻫ

ﯿﺪ ﺘﮐﻻ ﯿ ﮑ

1ﯽ ) ( LAB

ﻟﻮﺗ ﯿ ﺪ ﻣ ﯽ ﺪﻧﻮﺷ . ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ ﺎﻫ

يﺮﺘﮐﺎﺑ ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ ياراد ﯽﺸﮐ

هدﻮﺑ ﻨﻋ ﻪﺑ و رد هﺪﻧراﺪﻬﮕﻧ ناﻮ هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﻫاﺬﻏ

ﯽﻣ ﻮﺷ ﻧ ﺮﺘﮐﺎﺑ .ﺪ ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺻﺎﺧ ﺎﻫ ﯿ ﺖ ﮔﺪﻨﺸﮐ ﯽ و ﯾﺎ ﮔﺪﻨﻨﮐ ﺖﻌﻧﺎﻤﻣ ﯽ

ﺪﺷر زا ﻪﯾﻮﺳ يﺎﻫ دﺰﻧ ﯾ ﮏ ﺪﻟﻮﻣ ﻪﻧﻮﮔ ﻪﺑ

دﻮﺧ

، ﻮﺑ ﯾ هﮋ يﺮﺘﮐﺎﺑ ﺖﺒﺜﻣ مﺮﮔ يﺎﻫ ﻪﮐ

ﻋ ﻞﻣﺎ ﺑ و دﺎﺴﻓ ﯿ رﺎﻤ ﯾ اﺰ ﺖﺳا ﯽﯾ و

ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ ﺧﺮﺑ

ﯽ ﺮﺘﮐﺎﺑ زا ي يﺎﻫ مﺮﮔ

1. Lactic acid bacteria

(15)

ﻔﻨﻣ ﯽ ﺪﻧراد ار . ﺮﺘﮐﺎﺑ ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﺎﻬﻟﻮﮑﻟﻮﻣ ﯽﯾ

ﺎﺑ ﻫ يﺎﻬﺸﺨﺑ و ﺖﺒﺜﻣ رﺎﺑ ﯿ

بﻮﻓورﺪ .ﺪﻨﺘﺴﻫ

ﺮﺜﮐا ﺮﺘﮐﺎﺑ ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﺎﺑ

ﺻﺎﺧ ﯿ ﺖ ﺘﺳوﺪﺑآ ﯽ ﯾ ﺎ ﺮﮕﺑآ ﯾ يﺰ

، ﻟﻮﻠﺳ يﺎﺸﻏ ﯽ

ﻣ فﺪﻫ ار ﯽ

ﮔﯿ ﺪﻧﺮ . ﻟﺎﺣ رد ﯽ ﺧﺮﺑ ﻪﮐ ﯽ ﺑ ﺎﻬﻧآ زا ﯿ

ﺰﺘﻨﺳﻮ

ﻠﭘﯿ يﺎﻫﺮﻤ ز ﯾ ﺘﺴ ﯽ و ﯾﺎ ﻟﺎﻌﻓ ﯿ ﺖ ﺰﻧآ ﯾ ﻢ ﺎﻫ ﻧ ار ﯿﺰ ﻣ رﺎﻬﻣ ﯽ ﺪﻨﻨﮐ . ﺮﺘﮐﺎﺑ ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﻃ ﯽ ﺗﺎﺘﺳوﺮﺘﮑﻟا تﻼﻣﺎﻌﺗ ﯿ

ﮏ ﻪﺑ

ﻣ تﺎﻔﺴﻓ يﺎﻬﻫوﺮﮔ ﻔﻨﻣ رﺎﺑ ﻪﮐ ﺎﺸﻏ رد دﻮﺟﻮ

ﯽ ﺪﻧراد ا زا و هﺪﺷ ﻞﺼﺘﻣ ﯾ

ﻦ ﺮﻃ ﯾ ﻖ ﺘﺴﺨﻧ ﻪﺑ ﯿ ﻦ ﺎﺸﻏ ﺎﺑ لﺎﺼﺗا

ﻣ ﮏﻤﮐ ﯽ ﺪﻨﻨﮐ . ﺑ طﺎﺒﺗرا ﯿ ﻦ ﻫ يﺎﻬﺸﺨﺑ ﯿ

ورﺪ ﺮﺘﮐﺎﺑ بﻮﻓ ﯾ

ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﻫ يﺎﻬﺘﻤﺴﻗ و ﯿ

بﻮﻓورﺪ ﺎﺸﻏ

ا ﺚﻋﺎﺑ ﯾ دﺎﺠ

ﺎﺸﻏ رد ﺬﻓﺎﻨﻣ هﺪﺷ

ﺘﻧ رد و ﯿ ﻪﺠ ﺮﺟ ﯾ نﺎ ﺮﺳ ﯾ ﻊ ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ ﮏﭼﻮﮐ ﺳ ﯿ ﻤﺳﻼﭘﻮﺘ ﯽ ﺎﻬﻧ رد لﻮﻠﺳ زا جرﺎﺧ ﻪﺑ ﯾ

ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ ﻟﻮﻠﺳ گﺮﻣ

ﯽ ﻣ ﯽ .دﻮﺷ ﺮﺘﮐﺎﺑ ﺮﺜﮐا ﯾ

ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ يوﺎﺣ ﺎﺗ20

ﺳا60 ﯿ ﺪ ﻣآ ﯿ ﻪﻨ رﺎﭼد ﻪﮐ هدﻮﺑ تاﺮﯿﯿﻐﺗ

ﺲﭘ

زا و هﺪﺷ ﻪﻤﺟﺮﺗ ﯾﺎ

ﻐﺗ نوﺪﺑ ﯿﯿ ﺮ ﻗﺎﺑ ﯽ ﯽﻣ ﺪﻨﻧﺎﻣ . ﺮﺘﮐﺎﺑ ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ،تراﺮﺣ ﻞﺑﺎﻘﻣ رد ﺎﭘ pH

ﯿﯾ

،ﻦ لﻼﺣ يﺎﻫ ﻟآ ﯽ

ﻌﺿ ﯿ

،ﻒ و ﺎﻣﺮﺳ ﯾ

،ﺦ ﮏﻤﻧ ﺰﻧآ و ﺎﻫ ﯾ ﻢ ﺎﻫ موﺎﻘﻣ ﺘﻧ رد و هدﻮﺑ ﯿ

ﻪﺠ ﺳ رد دﺮﺑرﺎﮐ ﻞﺑﺎﻗ ﯿ

ﻢﺘﺴ يﺎﻫ ﺖﻇﺎﻔﺣ اﺬﻏ زا

ﻣ ﯽ ﺺﻟﺎﺧ و يزﺎﺳاﺪﺟ .ﺪﻨﺷﺎﺑ يزﺎﺳ

اﯾ ﻦ ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ ﻧﺎﮑﻣ ﺎﺗ ﺖﺳا يروﺮﺿ و مزﻻ ﯿ

ﻢﺴ ﻗد ﯿ ﻖ ﻟﺎﻌﻓ ﯿ ﺖ يرﺎﻬﻣ

ﺮﺘﮐﺎﺑ يور ﺮﺑ ﺎﻬﻧآ ي

يﺎﻫ ﺪﻨﻨﮐﺪﺳﺎﻓ ه

ي اﺬﻏ و ﺮﺘﮐﺎﺑ ي يﺎﻫ ﻞﻘﺘﻨﻣ دﻮﺷ ﺺﺨﺸﻣ ﺎﻫاﺬﻏ ﺎﺑ هﺪﻧﻮﺷ ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ .

-

ﻪﺑ ﯽﻠﮐ رﻮﻃ ﻪﺑ ﺎﻫ ﻪﺘﺳد گرﺰﺑ هوﺮﮔ 2

ﯽﻣ ياﺪﻨﺑ ﻋ ﻪﮐ ﺪﻧﻮﺷ

زا ﺪﻨﺗرﺎﺒ ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ (1

يﺮﺘﮐﺎﺑ يﺎﻫ مﺮﮔ يﺎﻫ

ﺖﺒﺜﻣ ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ (2 يﺮﺘﮐﺎﺑ يﺎﻫ

ﯽﻔﻨﻣ مﺮﮔ يﺎﻫ )

Cheikhyoussef et al, 2008

(.

-1 -3 -2 - 1 ﻦﯿﺳﻮﯾﺮﺘﮐﺎﺑ يﺮﺘﮐﺎﺑ يﺎﻫ

ﺖﺒﺜﻣ مﺮﮔ يﺎﻫ

ﻪﻧﻮﮔ ﺮﺘﮐﺎﺑ زا يدﺪﻌﺘﻣ يﺎﻫ ي

يﺎﻫ ﻪﺑ ﺖﺒﺜﻣ مﺮﮔ ﺮﻃﺎﺧ

ﺒﻃ رﻮﻀﺣ ﯿﻌ

ﯽ ﺴﺑ رد ﯿ يرﺎ ﻪﺑ ﺎﻫاﺬﻏ عاﻮﻧا زا

ناﻮﻨﻋ اﯾ ﻦﻤ رد ﯽﻣ ﻪﺘﺧﺎﻨﺷ ﯽﯾاﺬﻏ ﻊﯾﺎﻨﺻ ﺪﻧﻮﺷ

. ﺮﺘﮐﺎﺑ ي يﺎﻫ ﻋاﻮﻧا ﺖﺒﺜﻣ مﺮﮔ ﯽ

ﺮﺘﮐﺎﺑ زا ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﻟﻮﺗ ار ﯿﺪ

ﻣ ﯽ ﺑ تﺎﺼﺨﺸﻣ ﻪﮐ ﺪﻨﻨﮐ ﯿ

ﺮﺘﺸ ﺑ ﺮﻈﻧ زا ﺎﻬﻧآ ﯿ

ﺷﻮ ﯿﻤ ﯿﺎ ﯽﯾ و ﺘﻧژ ﯿ ﮑ ﯽ ﻌﺗ ﯿﯿ ﻦ ﺮﺘﮐﺎﺑ .ﺖﺳا هﺪﺷ ﯾ

ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ رﻮﻃ ﻪﺑ

ﻠﮐ ﯽ ﺖﺒﺴﻧ ﺪﻨﺘﺴﻫ سﺎﺴﺣ نﺎﺴﻧا هدور يﺎﻫزﺎﺌﺗوﺮﭘ ﻪﺑ .

ﻪﮐ اﯾ ﻦ و ﯾ ﮔﮋ ﯽ ﺎﺑ ﻊﺒﻨﻣ ﻪﺑ ار ﺎﻬﻧآ ا

ﺷزر ﯽ ياﺮﺑ

اﺬﻏ يراﺪﻬﮕﻧ ﺪﺒﺗ

ﯾ ﻞ ﻣ ﯽ ﺮﺘﮐﺎﺑ .ﺪﻨﮐ ﯾ

ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﯽﯾ يﺮﺘﮐﺎﺑ عﻮﻧ ود زا ﻪﮐ اﯾ

ﻦﻤ ﯾ ﻨﻌ ﯽ ﺳﺎﺑﻮﺘﮐﻻ ﯿ ﻞ ﺎﻫ ) و (LAB

(16)

ﭘوﺮﭘ ﯿ ﻧﻮ ﯽ ﺮﺘﮐﺎﺑ ي

1ﺎﻫ ﻪﺘﻓﺮﮔ هﺪﺷ ﺪﻧا

، ﺖﻌﻨﺻ رد ﺎﻬﻧآ هﻮﻘﻟﺎﺑ يﺎﻫدﺮﺑرﺎﮐ ﺮﻃﺎﺧ ﻪﺑ اﺬﻏ

ﯽﯾ هدﺮﺘﺴﮔ رﻮﻃ ﻪﺑ يا

هﺪﺷ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﺮﺘﮐﺎﺑ .ﺪﻧا

ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﯽﯾ ﺳﺎﺑﻮﺘﮐﻻ ﻂﺳﻮﺗ ﻪﮐ ﯿ

ﻞ ﺎﻫ ﻮﺗ ﻟﯿ ﺪ ﻣ ﯽ ﻧﺎﻤﺘﺧﺎﺳ تﺎﺼﺨﺸﻣ سﺎﺳا ﺮﺑ ﺪﻧﻮﺷ ﯽ

و

ﺑﯿ ﺷﻮ ﯿﻤ ﯿﺎ ﯽﯾ ﻪﺑ رﺎﻬﭼ ﺴﻘﺗ هوﺮﮔ ﯿ

ﻢ ﻣ يﺪﻨﺑ ﯽ ﺪﻧﻮﺷ ا ﻪﮐ ﯾ ﻦ ﺴﻘﺗ ﯿ ﻢ يﺪﻨﺑ ياﺮﺑ ﺮﺘﮐﺎﺑ ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﯽﯾ ﺮﺘﮐﺎﺑ زا ﻪﮐ ي

-

يﺎﻫ د ﯾ ﺮﮕ ﻪﺘﻓﺮﮔ هﺪﺷ ﺰﯿﻧ ﺪﻧا ﻣ ﯽ :دور رﺎﮐ ﻪﺑ ﺪﻧاﻮﺗ

-1 ﺘﻧﻻ ﯽ ﺑﯿ ﺗﻮ ﯿ ﮏ ﺎﻫ ﺘﭙﭘ : ﯿ يﺎﻫﺪ ﻠﻋ ﮏﭼﻮﮐ و لﺎﻌﻓ ﯿﻪ

ﺎﺸﻏ ﺳا يوﺎﺣ ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ ﯿ

ﺪ ﻣآ ﯿ ﻪﻨ ﻏ ﯿﺮ لﻮﻤﻌﻣ

ﺘﻧﻻ ﯿ ﻧﻮ ﯿ ﻦ ﺪﻨﺘﺴﻫ . و سﺎﺳا ﺮﺑ ﯾ

ﮔﮋ ﯿ يﺎﻬ ﻧﺎﻤﺘﺧﺎﺳ ﯽ و يﺪﻨﺑ ﻪﻘﺒﻃ هوﺮﮔ ﻪﺳ ﻪﺑ يدﺮﮑﻠﻤﻋ صاﻮﺧ

ﻣ ﯽ :ﺪﻧﻮﺷ ﻒﻟا ﺘﻧﻻ ( ﯽ ﺑﯿ ﺗﻮ ﯿ يﺎﻬﮑ ﺗﯿ ﭗ ﺘﻧﻻ ﻪﮐA

ﯽ ﺑﯿ ﺗﻮ ﯿ يﺎﻬﮑ ﻄﺧ ﯽ ﯾ ﺎ ﻧ ﻦﯿﺴﯿﻧ ﻪﺒﺷ ﯿﺰ

ﻣﺎﻧ ﯿ هﺪ ﻣ ﯽ -

ﺪﻧﻮﺷ ﺪﻨﻧﺎﻣ و ﻦﯿﺴﯿﻧ ﻄﺧ يرﺎﺘﺧﺎﺳ ﻪﮐ Pep5

ﯽ و ﻪﺘﺷاد دوﺪﺣ

ﺳا 34 ﯿ ﺪ ﻣآ ﯿ ﻪﻨ ﻟوا فﺪﻫ .ﺪﻧراد ﯿﻪ

ﻧآ يﺎﺸﻏ ﺎﻬ ﻟﻮﻠﺳ

ﯽ لﺎﺳ رد ﻦﯿﺴﯿﻧ .ﺖﺳا ﺎﺳﺎﻨﺷ 1928

ﯽﯾ ﺪﺷ و ﻟوا ﯿ ﻦ ﺮﺘﮐﺎﺑ ﯾ ﺳﻮ ﯿﻨ ﯽ ﺖﺳا ﻪﮐ

ﻨﺻ رد هدﺎﻔﺘﺳا ياﺮﺑ ﯾﺎ

اﺬﻏ ﻊ ﯽﯾ ﻘﻣ رد ﯿ سﺎ يرﺎﺠﺗ ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﺪﯿﯾﺎﺗ درﻮﻣ .

ب ﺘﻧﻻ ( ﯽ ﺑﯿ ﺗﻮ ﯿ ﮏ يﺎﻫ ﺗﯿ ﭗ ﺎﻣارود ﺪﻨﻧﺎﻣ B

ﯾ ﺴ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﻪﮐ يوﺎﺣ ﺳا 19

ﯿ ﺪ ﻣآ ﯿ ﻪﻨ ﻞﮑﺷ و هدﻮﺑ

.ﺪﻧراد يﻮﻘﻠﺣ اﯾ

ﻦ ﺗﯿ ﭗ ﯽﺘﻧﻻ زا ﮏﯿﺗﻮﯿﺑ ﺎﻫ

، ﻟﻮﻔﺴﻓ ﯿ ﺎﻫزﺎﭙ ﻣ رﺎﻬﻣ ار ﯽ ﺪﻨﻨﮐ .

ج ﺘﻧﻻ ( ﯽ ﺑﯿ ﺗﻮ ﯿ يﺎﻬﮑ ﺗﯿ ﭗ ﺳﺎﺳﺮﻣ ﺪﻨﻧﺎﻣ C

ﯿ ﺪﯾ ﻦ و ﻪﮐ ﯾ ﮔﮋ ﯽ يﺎﻫ ﺑ ﺎﻣ يرﺎﺘﺧﺎﺳ ﯿ

ﻦ ﺗﯿ ﭗ و B A

ﺑ و ﺪﻧراد ﯿ

ﺰﺘﻨﺳﻮ د ﯾ هراﻮ ﻟﻮﻠﺳ ﯽ ﺮﺘﮐﺎﺑ ﯾﺎ ﯽﯾ رﺎﻬﻣ ار ﻣ ﯽ ﺪﻨﻨﮐ )

Shetty et al, 2005

(.

-2 ﺘﭙﭘ ﯿ يﺎﻫﺪ نوﺪﺑ تراﺮﺣ ﻪﺑ موﺎﻘﻣ ﮏﭼﻮﮐ ﺘﻧﻻ

ﯿ ﻧﻮ ﯿ ﻦ ﻠﻋ لﺎﻌﻓ و ﯿﻪ

ﺎﺸﻏ ﯾا : ياراد هوﺮﮔ ﻦ ﻫ

ﯿ ﭻ عﻮﻧ

ﺳا ﯿﺪ ﻣآ ﯿ ﻪﻨ حﻼﺻا هﺪﺷ ﻧﯿ ﺪﻨﺘﺴ ﺴﻘﺗ هوﺮﮔ ﻪﺳ ﻪﺑ دﻮﺧ و ﯿ

ﻢ ﻣ يﺪﻨﺑ ﯽ ﺪﻧﻮﺷ )

Shetty et al, 2005

(.

-3 ﺌﺗوﺮﭘ ﯿ يﺎﻬﻨ ﺎﭘﺎﻧ گرﺰﺑ ﯾ

راﺪ ) تراﺮﺣ ﺮﺑاﺮﺑ رد نزو

ﻟﻮﮑﻟﻮﻣ ﯽ ﺑﯿ ﺶ زا ﮐ30 ﯿ ﻮﻠ (نﻮﺘﻟاد هوﺮﮔ ﻦﯾا :

ﻦﯿﺴﯿﺘﮐﻻ ﻞﻣﺎﺷ ﻦﯿﺴﯿﺗﻮﻠﻫ ،A

ﻦﯿﺴﻨﯿﺋزﺎﮐ ،J

ﻦﯿﺳﻮﻠﯿﻓوﺪﯿﺳا ،80 ﺳا وA

ﻦﯿﺳﻮﻠﯿﻓوﺪﯿ ﯽﻣ B

.ﺪﺷﺎﺑ

1. propionibacterium

(17)

اﯾ ﻦ ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ ﺳﺎﺴﺣ ﺮﻃﺎﺧ ﻪﺑ ﯿ

ﺖ ياﺮﺑ تراﺮﺣ ﻪﺑ ﺎﻬﻧآ يراﺪﻬﮕﻧ

ﻧ ﺐﺳﺎﻨﻣ اﺬﻏ ﯿ

ﺪﻨﺘﺴ )

Shetty et al,

(.2005

-4 ﺮﺘﮐﺎﺑ ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ يﺎﻫ ﭘﯿ ﭽ ﯿ هﺪ : ﺘﭙﭘ ﯿ يﺎﻫﺪ ﻣ ﺪﺿ ﯿ ﺑوﺮﮑ ﯽ يوﺎﺣ ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ هوﺮﮔ

ﻟ يﺎﻫ ﯿﭙﯿ يﺪ ﯾﺎ

ﻫﻮﺑﺮﮐ ﯿ ﺗارﺪ ﯽ نآ عاﻮﻧا زا .ﺪﻨﺘﺴﻫ ﺎﻫ

ﻣ ﯽ ﻪﺑ ناﻮﺗ ﺲﻧﺎﻧﻮﮐﻮﺌﻟ و

ﺳﻮﺘﮐﻻ ﻦﯿ هرﺎﺷا27 دﺮﮐ )

Shetty et

al, 2005

(.

-1 -3 -2 - 2 ﺮﺘﮐﺎﺑ ﺳﻮ ﯿ يﺎﻫ ﺮﺘﮐﺎﺑ ي يﺎﻫ ﻔﻨﻣ مﺮﮔ ﮐﺮﺗ و ﯿ تﺎﺒ ﻪﺒﺷ ﺮﺘﮐﺎﺑ ﺳﻮ ﯿ

ا ﺎﺑ ﯾ ﻪﮑﻨ ﺮﺘﮐﺎﺑ هژاو ﯾ

ﺳﻮ ﯿ ﻦ ياﺮﺑ ًﻻﻮﻤﻌﻣ يﺮﺘﮐﺎﺑAMP

ﺖﺒﺜﻣ مﺮﮔ يﺎﻫ ر ﻂﺳﻮﺗ ﻪﮐ

ﯾ موزﻮﺒ ﺎﻫ هﺪﺷ ﺰﺘﻨﺳ

رﺎﮐ ﻪﺑ ﯽﻣ هدﺮﺑ ﯽﻟو دﻮﺷ اﯾ

ﻦ هژاو هزوﺮﻣا ياﺮﺑ ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ ﻪﺑﺎﺸﻣ ﻂﺳﻮﺗ ﻪﮐ يﺮﺘﮐﺎﺑ

يﺎﻫ ﯽﻔﻨﻣ مﺮﮔ ﻟﻮﺗ

ﯿ ﺪ ﻣ ﯽ -

ﻧ دﻮﺷ ﯿﺰ هدﺎﻔﺘﺳا ﻣ ﯽ ﺮﺘﮐﺎﺑ عﻮﻨﺗ .دﻮﺷ ﯾ

ﺳﻮ ﯿ ﻦ يﺎﻫ ﻪﺑﺎﺸﻣ ﯽﻔﻨﻣ مﺮﮔ ﺮﺘﮐﺎﺑ

ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ يﺎﻫ و هدﻮﺑ ﺖﺒﺜﻣ مﺮﮔ

ﻟﻮﮐ ﯿ ﺴ ﯿ ﻦ ﻣ و ﺎﻫ ﯿ ﺳوﺮﮑ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﺮﺘﻬﺑ ﯾ ﻦ لﺎﺜﻣ هﺪﺷ ﻪﺘﺧﺎﻨﺷ يﺎﻫ ا ﻪﮐ ﺎﺠﻧآ زا .ﺪﻧا

ﯾ ﻦ ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ ﻂﺳﻮﺗ يﺮﺘﮐﺎﺑ يﺎﻫ

ﯽﻔﻨﻣ مﺮﮔ ﻟﻮﺗ

ﯿﺪ ﻣ رﻮﻃ ﻪﺑ ﻪﮐ هﺪﺷ لﻮﻤﻌ

ﺎﺑ ﮔدﻮﻟآ ﯽ يﺎﻫ ﻌﻓد ﯽ ﻘﺘﺴﻣ رﻮﻃ ﻪﺑ ،ﺪﻨﺘﺴﻫ طﺎﺒﺗرا رد ﯿ

ﻢ ياﺮﺑ

ﻧ هدﺎﻔﺘﺳا ﻞﺑﺎﻗ اﺬﻏ يراﺪﻬﮕﻧ ﯿ

ﺪﻨﺘﺴ ا ﺎﺑ . ﯾ ﻦ لﺎﺣ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﻣز رد

ﯿﻨ ﮥ ﻟﺎﻌﻓ ﯿ

،ﺖ ،ﺰﺘﻨﺳ تاﺮﯿﯿﻐﺗ ﺲﭘ

زا ﻪﻤﺟﺮﺗ و

ﻧﺎﮑﻣ ﯿ ﻢﺴ يﺎﻫ ﻈﻨﺗ ﯿﻤ ﯽ ﭘﯿ ﻪﺘﺳﻮ ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ ﺎﻬﻧآ ﮐﺮﺗ

ﯿ تﺎﺒ رد ﻪﺑﺎﺸﻣ

يﺮﺘﮐﺎﺑ يﺎﻫ ﺑ ﺖﺒﺜﻣ مﺮﮔ ﯿ

ﺮﺘﺸ ﺮﺳ و ﯾ ﻊ ﺮﺗ

ترﻮﺻ ﻪﺘﻓﺮﮔ ﻣ ﻪﮐ ﯽ لﺪﻣ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﺑﻮﺧ يﺎﻫ

ﯽ ياﺮﺑ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﺴﺑ ﯿ يرﺎ ﺮﺘﮐﺎﺑ زا ﯾ ﺳﻮ ﯿ ﻦ يﺎﻫ زا ﻞﺻﺎﺣ

يﺮﺘﮐﺎﺑ يﺎﻫ ﺖﺒﺜﻣ مﺮﮔ .ﺪﻧور رﺎﮐ ﻪﺑ ﺎﻫ

ياﺮﺑ لﺎﺜﻣ ﻣ ﯿ ﺳوﺮﮑ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﻪﺑﺎﺸﻣ يرﺎﺘﺧﺎﺳ ﺮﻈﻧ زا ﻪﮐ ﺘﻧﻻ

ﯽ ﺑﯿ ﺗﻮ ﯿ ﮏ ﺎﻫ

ﺎﻣزآ رد ﺎﻬﻧآ فﻼﺧ ﺮﺑ ،ﺪﻨﺘﺴﻫ ﯾ

هﺎﮕﺸ ﺰﺘﻨﺳ هﺪﺷ .ﺪﻧا

( 1

ﻣﯿ ﺳوﺮﮑ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﺘﭙﭘ : ﯿ يﺎﻫﺪ ﺪﺿ ﻣﯿ ﺑوﺮﮑ ﯽ هﺪﺷ ﻪﺘﺧﺎﺳ ﻂﺳﻮﺗ

ر ﯾ موزﻮﺒ ﺎﻫ ﻟﻮﮑﻟﻮﻣ نزو ﻪﮐ هدﻮﺑ ﯽ

ﺎﭘ ﯿﯾ ﻦ

و ﻪﺘﺷاد

ًاﺮﺜﮐا ﺮﺘﮐﺎﺑوﺮﺘﻧا ةداﻮﻧﺎﺧ ﻂﺳﻮﺗ ﯾ

ﻪﺳﺎ ﻟﻮﺗ ﯿ ﺪ ﻣ ﯽ ا .ﺪﻧﻮﺷ ﯾ ﻦ ﮐﺮﺗ ﯿ تﺎﺒ ﺘﻧﻻ ﺪﻨﻧﺎﻣ ﯽ

ﺑﯿ ﺗﻮ ﯿ ﮏ ﺎﻫ

رﺎﭼد تاﺮﯿﯿﻐﺗ ﺲﭘ

زا ﻪﻤﺟﺮﺗ يا ﯽﻌﯿﺳو ﻣ ﯽ ﻟﻮﮑﻟﻮﻣ نزو .ﺪﻧﻮﺷ ﯽ

ﺎﻬﻧآ

ًﻻﻮﻤﻌﻣ زا ﺮﺘﻤﮐ 5

(18)

.ﺖﺳا نﻮﺘﻟادﻮﻠﯿﮐ ﻦﯿﺳوﺮﮑﯿﻣ

ﻫ ﺎ ﺎﻘﻣ رد ﯾ ﻪﺴ ﻟﻮﮐ ﺎﺑ ﯿ ﺴ ﯿ ﻦ ﺎﻫ

، ﺳﺎﺴﺣ ﯿ ﺖ ﺎﻫزﺎﺌﺗوﺮﭘ ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ يﺮﺘﻤﮐ

ا .ﺪﻧراد ﯾ ﻦ ﻪﻠﺌﺴﻣ ﺎﺷ ﯾﺪ هﺎﺗﻮﮐ لﻮﻃ ﺮﻃﺎﺧ ﻪﺑ و ﺮﺗ

تاﺮﯿﯿﻐﺗ ﺳا

ﯿﺪ ﻣآ ﯿ ﻪﻨ يﺎﻫ نآ ﻣ .ﺪﺷﺎﺑ ﺎﻫ ﯿ

ﺳوﺮﮑ ﯿ ﻦ -

ﺎﻫ ﻂﺳﻮﺗ دراﻮﻣ ﺮﺜﮐا رد ﻤﺳﻼﭘ

ﯿ ﺎﻫﺪ ﻣ ﺪﮐ ﯽ نژ .ﺪﻧﻮﺷ ﻪﮐ يرﺎﺘﺧﺎﺳ يﺎﻫ

ﻣ ﯿ ﺳوﺮﮑ ﯿ ﻦ يﺎﻫ وC7 C51

ﻣ ﺪﮐ ار ﯽ ﺪﻨﻨﮐ

، ماﺪﮐ ﺮﻫ زﺎﺑ ﺖﻔﺟ 21

هﺎﺗﻮﮐ ًﻻﺎﻤﺘﺣا ﻪﮐ ﺪﻧراد لﻮﻃ ﺮﺗ

ﯾ ﻦ ﻟاﻮﺗ ﯽ ﻪﮐ هﺪﻨﻨﮐﺪﮐ

،ﺖﺳا هﺪﺷ ﻪﺘﺧﺎﻨﺷ نﻮﻨﮐﺎﺗ ار

ﻣ .ﺪﻧراد ﯿ ﺳوﺮﮑ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﺮﺑ سﺎﺳا ا ﻊﻃﺎﻘﺗ يﻮﮕﻟا ﯾ

ﻨﻤ ﯽ ﻪﺑ هوﺮﮔ 7

ﺴﻘﺗ ﯿ ﻢ ﻣ يﺪﻨﺑ ﯽ ﺪﻧﻮﺷ ﻣ ،ًاﺮﻫﺎﻇ . ﯿ

ﺳوﺮﮑ ﯿ ﻦ يﺎﻫ ﻞﺧاد ﯾ ﮏ ﻧﺎﮑﻣ ،هوﺮﮔ ﯿ

ﻢﺴ يرﺎﻬﻣ .ﺪﻧراد ﻪﺑﺎﺸﻣ

اﯾ ﻦ ﻧﺎﮑﻣ ﯿ ﻢﺴ ﺎﻫ رﺎﻬﻣ ﻞﻣﺎﺷ ﺰﻧآ

ﯾ ﻢ يﺎﻫ ﻟﻮﺑﺎﺘﻣ ﯿ

،ﮏ يزﺎﺳﺪﻨﻧﺎﻤﻫ

،ﻪﻤﺟﺮﺗ ،DNA

لﺎﻘﺘﻧا ﺳا ﯿ ﺪ ﻣآ ﯿ

،ﻪﻨ

ﺑﯿ ﻮ ﺰﺘﻨﺳ ﺴﻘﺗ ،DNA

ﯿ ﻢ ﻟﻮﻠﺳ ﯽ و ﮑﺸﺗ ﯿ ﻞ ﻟﻮﻠﺳ يﺎﺸﻏ ﯽ

.ﺖﺳا ﻦﯿﺳوﺮﮑﯿﻣ ﻣ J25

ﯽ ﺰﺘﻨﺳ ﺪﻧاﻮﺗ

ATP

رد ار ﻣ ﯿ يرﺪﻨﮐﻮﺘ ﻮﻘﺗ ﺎﺑ

ﯾ ﺖ ﺮﺨﺗ ﯾ ﺐ ﺪﻨﮐ رﺎﻬﻣ ،ATP

)

Niklison et al, 2004

(.

فﺬﺣ ﻔﻨﻣ رﺎﺑ ﯽ هوﺮﮔ

ﺴﮐﻮﺑﺮﮐ ﯿﻠ ﯽ ﻦﯿﻣﺎﺗﻮﻠﮔ ﺎﺟ ﺎﺑ

ﯾ ﺰﮕ ﯾﻨ ﯽ نآ ﺎﺑ -L

ﻦﯿﺴﯾﻼﮔ ﻦﯿﺳوﺮﮑﯿﻣ رد

j25

ﺴﮐﻮﺑﺮﮐ و ﯿ

ﻪﻠ ندﺮﮐ

هوﺮﮔ اﯾ ﻤﯿ لوزاﺪ ﻫ ﯿ ﺘﺴ ﯿ ﺪﯾ ﻦ ﺻﺎﺧ ﯿ ﺖ ﻣ ﺪﺿ ﯿ ﺑوﺮﮑ ﯽ ﺒﻃ عﻮﻧ ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ ار ﻦﯿﺳوﺮﮑﯿﻣ ﯿﻌ

ﯽ نآ ﻠﻋ ﯿﻪ

ﯽﻠﮐ ﺎﯿﺸﯾﺮﺷا و

ﻼﻧﻮﻤﻟﺎﺳ ﻬﺟﻮﺗ ﻞﺑﺎﻗ رﻮﻃ ﻪﺑ

ﯽ ﻣ ﺶﻫﺎﮐ ﯽ ا .ﺪﻫد ﯾ ﻦ ود ﺎﺟ ﯾ هﺎﮕ ﺒﻄﻗ ﯽ ﻪﺑ رادرﺎﺑ و

و ناﻮﻨﻋ ﯾ ﮔﮋ ﯽ يﺎﻫ ﻧﺎﻤﺘﺧﺎﺳ ﯽ يروﺮﺿ ﻣ دﺮﮑﻠﻤﻋ ياﺮﺑ

ﯿ وﺮﮑ ﺳ ﯿ ﻦ ﻣ بﺎﺴﺣ ﻪﺑ ﯽ

آﯾ ﺪﻨ )

Bellomio et

al, 2003

(.

ﻦﯿﺳوﺮﮑﯿﻣ

j25

ﻮﻧور ﯾ ﺴ ﯽ ﺮﺘﮐﺎﺑ رد ي ﺎﻫ رﺎﻬﻣ ﺎﺑ ار ﻠﭘﯿ RNA

زاﺮﻤ ﻠﺣﺮﻣ رد ﮥ ﺖﺷادﺮﺑ

NTP

ﺎ لﺎﺼﺗا ﻪﺑNTP

ﻠﭘﯿRNA

زاﺮﻤ ﻣ رﺎﻬﻣ ﯽ ﻦﯿﺳوﺮﮑﯿﻣ .ﺪﻨﮐ ﻪﺑ لﺎﺼﺗا ﺎﺑ j25

لﺎﻧﺎﮐ ﻠﭘﯿRNA

زاﺮﻤ

ﺮﺨﺗ و ﯾ ﺐ اﯾ ﻦ ﻮﻧور ،لﺎﻧﺎﮐ ﯾ

ﺴ ﯽ ار رﺎﻬﻣ ﻣ ﯽ ﺪﻨﻨﮐ )

Mukhopadhyay et al, 2004

(.

ﻦﯿﺳوﺮﮑﯿﻣ ود j55

لﻮﻠﺳ ﻞﺧاد رد ﻞﻘﺘﺴﻣ فﺪﻫ دراد

زا ﺪﻨﺗرﺎﺒﻋ ﻪﮐ :

ﻠﭘﯿRNA

زاﺮﻤ ﺠﻧز و ﯿ ةﺮ ﺴﻔﻨﺗ ﯽ ا . ﯾ ﻦ ﺘﭙﭘ ﯿ ﺪ ﻟﻮﺗ ﯿ ﺪ

ﺴﮐا ﯿ نﮋ يﺎﻫ ﺶﻨﮐاو ﺬﭘ ﯾﺮ ﺮﺤﺗ لﻮﻠﺳ رد ار ﯾ

ﮏ ﻪﮐ هدﺮﮐ ﺐﺟﻮﻣ

ﺳآ ﯿ ﺐ ﺠﻧز ﻪﺑ ﯿ ةﺮ ﺴﻔﻨﺗ ﯽ ﻣ ﯽ دﻮﺷ

)

Bellomio et al, 2007

(.

ﻣ ﯿ ﺳوﺮﮑ ﯿ ﻦ ﺎﻫ ﺧﺮﺑ سﺎﺳا ﺮﺑ ﯽ

و ﯾ ﮔﮋ ﯽ ﺎﻫ هوﺮﮔ ود ﻪﺑ ﺴﻘﺗ

ﯿ ﻢ ﻣ ﯽ :ﺪﻧﻮﺷ

سﻼﮐ I

لﻮﮑﻟﻮﻣ ﻪﮐ ﮑﭼﻮﮐ يﺎﻫ

ﯽ نزو) هدﻮﺑ ﻟﻮﮑﻟﻮﻣ

ﯽ زا ﺮﺘﻤﮐ ﻪﻤﺟﺮﺗ زا ﺲﭘ ،(نﻮﺘﻟادﻮﻠﯿﮐ 5

رﺎﭼد تاﺮﯿﯿﻐﺗ ز ﯾ يدﺎ ﻟﻮﻠﺳ ﻞﺧاد فاﺪﻫا و هﺪﺷ ﯽ

ﺻﺎﺼﺘﺧا ﯽ ﺪﻧراد سﻼﮐ . ﻣII

ﯿ ﺳوﺮﮑ ﯿ ﻦ ﺎﻫ

:ﻪﮐ

(19)

Family name: Mohabbat Khalan Name: Reza Title of Thesis: Isolation of some genes involved in the synthesis of nisin from

Lactococcus lactis

Superviso: Nasser zare

Advisors: Bahram Fathi Achachlouei, Rasool Asghari Zakaria Graduate Degree: M.Sc.

Major: Agricultural Specialty: Biotechnology

University: Mohaghegh Ardabili Faculty: Agriculture and Natural Resources Graduation date: 16/02/2016 Number of pages: 61

Abstract:

The increased use of chemical preservatives in the food industries and concerns about their potential detrimental effects led to a growing tendency to natural materials in food industry. Chemical materials used as preservatives in food industries always has been one of the main concerns. Antibiotics such as bacteriocins, a class of antimicrobial peptides, which produced in bacteria is one of the suitable alternatives in this field. For example, nisin has antibacterial activity has been used as a preservative in foods. The biosynthesis and activation of nisin is under control a gene cluster with several genes. Genetic engineering provids appropriate strategies for the production of this group of materials.In this study, some of the genes involved in the biosynthesis and activation of nisin was isolated from Lactococcus lactis bacteria. For this, the sequence of genes involved in the biosynthesis and activation of nisin was obtained from NCBI database and then gene specific primers were designed using Oligo 7 software. In order to facilitate cloning of this genes into Pet28a expression vector, restriction enzyme sites were added to the end of the PCR product by adding this sequences in the 5’ end of primes. Different methods were examined for extraction of genomic DNA from Lactococcus lactis. The results indicated that the purity, integrity and quantity of the DNA extracted using PVP method is desirable for downstream processes such as PCR. Four DNA fragment from nisin gene cluster including nis A, B, nis C, nis P and nis T-P were amplified by PCR using specific primers.

The PCR products for nis C and nis P genes were digested with restriction enzymes and cloned in the Pet28a expression vector under the control of T7 promoter and terminator and his tag. The result is expression of nis C and P proteins with a poly-His tag fused to its terminus. Recombinant vectors were transformed to DH5-alpha strain of E. coli, recombinant colonies selected on medium supplemented with kanamycin and verified by colony PCR with specific primers.

Keywords: Bacteriocin, Gene cloning, Polymerase chain reaction (PCR), Genetic engineering

(20)

University of Mohaghegh Ardabili

Faculty of Agricultural and Natural Resources

Department of Agriculture and plant breeding

Thesis submitted in partial fulfilment of the requirements for the degree of M.Sc. in Agricultural biotechnology

Title:

Isolation of some genes involved in the synthesis of nisin from Lactococcus lactis

Supervisor:

Nasser Zare (Ph.D)

Advisor(s):

Bahram Fathi Achachlouei (Ph.D) Rasool Asghari Zakaria (Ph.D)

By:

Reza Mohabbat Khalan Janury – 2016

Referensi

Dokumen terkait