DAFTAR PUSTAKA

OF FEMALE MICE INDUCED BY BENZO(α)PIREN

Adina, A.B. (2009). Efek Ekstrak Etanolik Kulit Jeruk Nipis [Citrus aurantifolia Cristm.) Swingle] Pada Sensitivitas Sel Kanker Payudara MCF-7 terhadap Doxorubicin. Skripsi. Yogyakarta: Fakultas Farmasi UGM.

Anonim. (2010). Potensi Daun Bangun-Bangun sebagai Laktagogum. Diakses

14 Desember 2013. Artikel.

Bhattacharjee, P. (2010). Phytochemical and Pharmacologycal Investigation of Different Parts Of Coleus amboinicus (Lour). Disertasi. Shimoga: National College of Pharmacy. Balaraj Urs Road, Shimoga.

Chandrappa, M.S., Harsha, R., Dinesha, R., dan Gowda, T. (2010). Antibacterial Activity Of Coleus aromaticus Leaves. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 2(3): 63-64. Conze, D., Weiss, L., Regen, P.S., Bhushan, A., Weaver, D., Johnson, P., dan

Rincon, M. (2001). Autocrine Production Of Interleukin 6 Causes Multidrug Resistance In Breast Cancer Cells. Cancer Research. 61: 8851-8854.

Denissenko, M.F., Pao, A., Tang, M., dan Pfeifer, G.P. (1996). Preferential formation of Benzo[a]pyrene Adducts at Lung Cancer Mutational Hotspots in P53. Science. 27(52): 430-442.

Depkes RI. (1979). Materia Medika Indonesia. Jilid III. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan. Hal. 134-135, 141.

Depkes RI. (1986). Sediaan Galenik. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal. 306.

Depkes RI. (1989). Materia Medika Indonesia. Jilid V. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan. Hal. 41-45.

Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal. 300-304, 306.

Depkes. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal. 1-11.

Diananda, R. (2009). Mengenal Seluk Beluk Kanker. Cetakan ketiga. Yogyakarta; Katahati. Halaman 15, 22, 29-30.

Dolinsky, C. (2002) . Breast Cancer: The Basic. Abramson Cancer Center of

The University of Pennsylvania.

Desember 2013.

Ellwood, J.C., dan Richardson, A. (1993). The Effectiveness of Breast Cancer Sccreening by Mammography in Younger Woman. Online J Curr Clin Trials. 32:68-74.

Farnsworth, N.R. (1966). Biological and Phytochemical Screening of Plant.

Journal of Pharmaceutical Sciences. 55(3): 262-263.

Gibbs, J.B. (2000). Mechanism-Based Target Identification and Drug Discovery in Cancer Research. Science. 287:1969-1973.

Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis

Tumbuhan. Edisi. 2 Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan Iwang

Soediro. Bandung: ITB. Hal. 102-103, 147-149, 234.

Harianto, N. (2009). Mengenal, Mencegah, Mengatasi Silent Killer Kanker. Semarang: Pustaka Widyamara. Halaman 1-2, 12-13.

Horn-Ross, P.L., John, E.M., Canchola, J.A., Stewart, S.L., dan Lee, M.M. (2003). Phytoestrogen Intake And Endometrial Cancer Risk. Journal of National Cancer Institute. 95(15): 1158-1164.

Imai, Y., Ishikawa, E., Asada, S., dan Sugimoto, Y. (2005). Estrogen-Mediated Post Transcriptional Down-Regulation of Breast Cancer Resistance Protein/ABCG2. Cancer Res. 65(2): 596-604.

Jaitun, S. (2010). Manfaat Daun Bangun-Bangun. Diakses 14 Mei 2013.

Artikel.

Jemal, A., Rebecca, S., Xu, J, dan Elisabeth, W. (2010). Cancer Statistics 2010.

CA Cancer J Clin. 60: 277-300.

Jenie, R.I., Meiyanto, dan E., Murwanti, R. (2006). Efek Antiangiogenik Ekstrak Etanolik Daun Sambung Nyawa (Gynura procumbens

(Lour.)Merr.) pada Membran Korio Alantois (CAM) Embrio Ayam.

Majalah Farmasi Indonesia. 17(1): 50-55.

Kaliappan, N.D., dan Viswanathan, P.K. (2008). Pharmacognostical Studies on The Leaves of Plectranthus amboinicus (Lour) Spreng. Journal of Medical Research. 2(3): 182-184.

Kumalasari, L.O. (2006). Pemanfaatan Obat Tradisional Dengan Pertimbangan Manfaat Dan Keamanannya. Majalah Ilmu Kefarmasian. 3(1): 1-7. Kumar, V., Abas, A.K., dan Foustro, N. (2005). Pathology Basic of Disease.

New York: Elsevier Inc. Hal. 270-336.

Mann, P.C., Boormn, G.A., Lollini, L.O., McMartin, D.N., dan Goodman, D.G. (1996). Proliferative Lessions OF The Mammary Gland In Rats.

Guides for Toxicologic Pathology. 15-2: 1-11.

Mechetner, E., Kystoobayeva, A., Zonis, S., Kim, H., Stroup, R., Garcia, R., Parker, R.J., dan Fruehauf, J.P. (1998). Levels of Multidrug Resistance (MDR1) P-Glycoprotein Expression by Human Breast Cancer Correlate witth in vitro Resistance to Taxol and Doxorubicin. Clinical Cancer Research. 4: 389-398.

Nurse, P. (2000). A Long Twentieth Century of The Cell Cycle and Beyonda.

Cell. 100:71-76.

Opolski, A., Wietrzyk, J., dan Grynkiewicz, G. (2005). Phytoestrogens in Cancer Prevention and Therapy Mechanisms of Their Biological Activity. Anticancer Research. 25: 2357-2366.

Ososki, A.L., dan Kennely, E.J. (2003). Phytoestrogens: A Review of The Present State of Research. Phytotherapy Research. 17(2): 845-869.

Pandey, B.P. (2003). A Text Book of Botany Angiosperms Taxonomy, Anatomy,

Embryology (Including Tissue Culture And Economic Botany). New

Delhi: S.Chand & Company LTD. Hal. 349.

Pecorino, L. (2005). Molecular Biology of Cancer Mechanism Target, and Therapeutics. London: Oxford University Press. Hal. 20-81.

Pfeifer, G.P., Denissenko, M.F., Olivier, M., Tretyakova, N., Hecht, S.S., dan Hainaut, P. (2002). Tobacco Smoke Carcinogens, DNA Damage and

p53 Mutations in Smoking-Associated Cancers. Oncogene. 21(48): 7435-7451.

Rout, O.P., Rout, K.K., Acharya, R., dan Mishra, S.K., (2010). Preliminary Pharmacognostical and Phytochemical evaluation of Coleus aromaticus

Benth. leaf. International Journal of Pharma World Research. 1(4): 2-4.

Rout, O.P., Rout, K.K., Acharya, R., Mishra, S.K., dan Sahoo, R. (2012). Pathorchur (Coleus amboinicus): Medicinal Evidence for Its Phytochemistry and Pharmacology Properties. International Journal of Pharma World Research. 3(4): 651-667.

Ruddon, R.W. (2007). Cancer Biology. New York: Oxford University Press. Hal. 117-190.

Santosa, C.M., dan Hertiani, T. (2005). Kandungan Senyawa Kimia dan Efek Ekstrak Air Daun Bangun-bangun (Coleus amboinicus, L.) pada Aktivitas Fagositosis Netrofil Tikus Putih (Rattus norvegicus). Majalah Farmasi Indonesia. 16(3): 141–148.

Satish, B.S., Shanbhoge, R., Upadhya, D., Jagetia, G.C., Adiga, S.K., Kumar, P., Guruprasad, K., dan Gayathri, P. (2006). Antioxidant, Anticlastogenic and Radioprotective Effect Of Coleus aromaticus on Chinese Hamster Fibroblast Cells (V79) Exposed to Gamma Radiation. Mutagenesis. 21(4): 237-242.

Saunders, C.R., Das, S.K., Ramesh, A., Shockley, D.C., dan Shymali, M.S. (2006). Benzo(a)pyrene-induced Acute Neurotoxicity in The F-344 Rat Role of Oxidative Stress. Journal of Applied Toxicology. 26(5): 427-438.

Slotkin, T.A., dan Seidler, F.J, (2009). Benzo[a]pyrene Impairs Neurodifferentiation in PC12 Cells. Brain Research Bulletin. 80(2): 17-21.

Somasekhar, P., Anbu, J., Rao, G.C., Ayyanna, C., Kumar, N.S., dan Sivakumar, G. (2011) In Vivo And In Vitro Screening Of Anticancer Activity Of Plectranthus amboinicus. International Journal of Advances in Pharmacy and Biological Science. 1(3): 94-98.

Tsao, A.S., Kim, E.S., dan Hong, W.K. (2004). Chemoprevention of Cancer.

World Health Organization. (1992). Quality Control Methods for Medicinal

Plant Materials. WHO/ PHARM/ 92.559. Switzerland: Geneva. Hal.

25-28.

Zhou, J., Liu, M.., Aneja, R., Chandra, R., Lage, H., dan Joshi, H.C. (2006). Reversal of P-Glycoprotein Mediated Multidrug Resistance in Cancer Cells by The c-Jun-NH2-Terminal Kinase. Cancer Research. 66(1): 445-452.

Lampiran 1. Hasil identifikasi tumbuhan daun bangun-bangun (Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng)

Lampiran 2. Gambar tumbuhan daun bangun-bangun

Lampiran 3. Gambar simplisia dan serbuk simplisia daun bangun–bangun

(Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng)

a) Simplisia daun bangun-bangun (Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng)

b) Serbuk Simplisia daun bangun-bangun (Plectranthus amboinicus

(Lour.) Spreng)

Lampiran 4 Gambaran Mikroskopik simplisia daun bangun-bangun

Keterangan:

a. Kristal kalsium oksalat bentuk prisma b. Rambut penutup multiselluler

c. Rambut kelenjar bentuk glandular d. Pembuluh kayu berbentuk spiral e. Epidermis berbentuk persegi panjang

Lampiran 5. Bagan skrining fitokimia Dicuci Ditiriskan Dikeringkan Dihaluskan Daun bangun-bangun S i m p l i s i a Serbuk Simplisia Skrining Fitokimia Karakterisasi Serbuk Simplisia Pembuatan Ekstrak -Alkaloida -Flavonoida -Saponin -Tanin -Glikosida -Antrakuinon -Steroida/Triterpenoida

Lampiran 6. Bagan Kerja Pembuatan Ekstrak

Ditambahkan etanol 96%, biarkan selama 5 hari Disaring

Direndam kembali dengan etanol 96%

Dipekatkan dengan rotary evaporator

700 g serbuk

Simplisia daun Bangun-bangun

Maserat I Ampas

Maserat II Ampas

Maserat III Ampas

Ekstrak kental etanol (55,16 g)

Karakterisasi Ekstrak Skrining Ekstrak Uji Antikarsinogenesis

• kadar abu total

• kadar abu tidak larut dalam asam

Senyawa golongan: • Alkaloid • Glikosida • Flavonoid • Steroid

Lampiran 7. Bagan Kerja Uji Antikarsinogenesis

DDi

Ditimbang dan dilakukan penandaan pada masing-masing mencit

Dibagi ke dalam 5 kelompok

Dihitung volume benzopiren yang akan diberikan. Diinduksi selama 14 hari secara sub kutan di daerah sekitar mamae

mencit

Dilakukan penimbangan berat badan dan palpasi pada daerah

mammae mencit setiap hari

Diberikan suspensi ekstrak etanol daun bangun-bangun selama 14 hari dosis 250 mg/Kg bb, 500 mg/Kg bb, 750 mg/Kg bb secara per oral 21 Ekor Mencit Betina

Kelompok I Kelompok II Kelompok III Kelompok IV Kelompok V

Kelompok II Kelompok III Kelompok IV Kelompok V

Dibunuh dengan cara cervical dislocation

Diambil tumor disekitar payudara

Dilakukan penimbangan berat badan dan palpasi pada daerah mammae

setiap hari

Dilakukan penimbangan berat badan dan palpasi pada daerah mammae

setiap hari Hasil

Hasil

Diberikan suspensi CMC 1 % selama 14 hari secara per oral

Dilakukan penimbangan berat badan dan palpasi pada daerah mammae

setiap hari

Dilakukan pewarnaan jaringan dengan H&E

Lampiran 8. Bagan Kerja Penyiapan Suspensi Ekstrak Etanol daun bangun-bangun (SEDBB)

a) SEDBB dosis 250mg/Kg bb

Ditaburkan ke dalam lumpang yang berisi 8ml air suling panas Didiamkan selama 15 menit Digerus hingga berbentuk gel, diencerkan dengan sedikit air Ditambahkan 625 mg ekstrak etanol daun bangun-bangun

Dituang ke dalam labu tentukur 25 ml Ditambah air suling sampai batas tanda

b) SEDBB dosis 500 mg/Kg bb

Ditaburkan ke dalam lumpang yang berisi 8ml air suling panas

Didiamkan selama 15 menit Digerus hingga berbentuk gel, diencerkan dengan sedikit air Ditambahkan 1250 mg ekstrak etanol daun bangun-bangun

Dituang ke dalam labu tentukur 25ml Ditambah air suling sampai batas tanda 250 mg CMC

Ekstrak Etanol daun bangun – bangun dosis

250 mg/kg bb

250 mg CMC

Ekstrak Etanol daun bangun – bangun dosis

c) EDBB dosis 750 mg/Kg bb

Ditaburkan ke dalam lumpang yang berisi 8ml air suling panas

Didiamkan selama 15 menit Digerus hingga berbentuk gel, diencerkan dengan sedikit air

Ditambahkan 1875 mg ekstrak etanol daun bangun-bangun

Dituang ke dalam labu tentukur 25 ml Ditambah air suling sampai batas tanda 250 mg CMC

Ekstrak Etanol daun bangun – bangun dosis

Lampiran 9. Bagan Kerja Penyiapan Larutan benzo(α)piren

Dilarutkan dalam 100 ml minyak zaitun Diaduk hingga seluruh benzo(α)piren

larut

100 mg benzo(α)piren

Lampiran 10. Bagan Kerja Penyiapan Larutan Penyangga Formalin 10%

Dilarutkan dalam air suling Ditambahkan 6,5g Na2HPO4 Diaduk hingga larut

Ditambahkan 100ml Formalin 37% Ditambahkan air suling hingga mencapai 1000 ml

4 g NaH₂PO₄

Lampiran 11. Perhitungan hasil penetapan kadar air Kadar air = 1. Sampel 1 Berat sampel = 5,011 g Volume air = 0,4 ml Kadar air = = 7,98 % 2. Sampel 2 Berat sampel = 5,081 g Volume air = 0,4 ml Kadar air = = 7,87 % 3. Sampel 3 Berat sampel = 5,009 g Volume air = 0,4 ml Kadar air = = 7,98%

Kadar air rata – rata =

Lampiran 12. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam air Kadar sari larut dalam air =

x x

100%

1. Kadar sari larut dalam air I

Berat cawan = 47,684 g

Berat cawan + berat sari = 47,976 g

Berat sampel = 5,001 g

Berat sari = 0,292 g

Kadar sari larut dalam air =

x x

100%

= 29,19% 2. Kadar sari larut dalam air II

Berat cawan = 43,201 g

Berat cawan + berat sari = 43,498 g

Berat sampel = 5,012 g

Berat sari = 0,297 g

Kadar sari larut dalam air =

x x

100%

= 29,61 % 3. Kadar sari larut dalam air III

Berat cawan = 46,523 g

Berat cawan + berat sari = 46,819 g

Berat sampel = 5,013 g

Berat sari = 0,296 g

= 29,52%

Kadar sari larut dalam air rata – rata =

Lampiran 13. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam etanol

1. Kadar

sari larut dalam etanol I

Berat Cawan = 47,764 g

Berat Cawan + Berat Sari = 47,846 g

Berat Sampel = 5,017 g

Berat sari = 0,082 g

Kadar sari larut dalam etanol 100%

= 8,17% 2. Kadar sari larut dalam etanol II

Berat Cawan = 43,250 g

Berat Cawan + Berat Sari = 43,331 g

Berat Sampel = 5,031 g

Berat sari = 0,081 g

Kadar sari larut dalam etanol 100%

= 8,05 %

3. Kadar sari larut dalam etanol III

Berat Cawan = 45,149 g

Berat Cawan + Berat Sari = 45,232 g

Berat Sampel = 5,022 g

Berat sari = 0.082 g

Kadar sari larut dalam etanol 100%

= 8,16%

Kadar sari larut dalam etanol rata-rata

= 8,12%

Lampiran 14. Perhitungan hasil penetapan kadar abu total

1. Sampel I

Berat simplisia = 2,0010 g

Berat abu = 0,0180 g

Kadar abu total 100%

= 0,89% 2. Sampel II

Berat simplisia = 2,0013 g

Berat abu = 0,0179 g

Kadar abu total 100%

= 0,89% 3. Sampel III

Berat simplisia = 2,0011 g

Berat abu = 0,0168 g

Kadar abu total 100%

= 0,84%

Kadar abu total rata-rata

= 0,87%

Lampiran 15. Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam

1. Sampel I

Berat simplisia = 2,0010 g

Berat abu = 0,0300 g

Kadar abu tidak larut asam 100%

= 1,49% 2. Sampel II

Berat simplisia = 2,0013 g

Berat abu = 0,0088 g

Kadar abu tidak larut asam 100%

= 0,44% 3. Sampel III

Berat simplisia = 2,0011 g

Berat abu = 0,0090 g

Kadar abu tidak larut asam 100%

= 0,45%

Kadar abu tidak larut asam rata-rata

= 0,44%

Lampiran 16. ContohPerhitungan dosis suspensi ekstrak etanol daun bangun-bangun a) Dosis 250 mg/kg bb 250 mg x 20 = 5000 mg = 5 g Larutan 1% BB = 0,2ml Konsentrasi ekstrak = 5 g/0,2 ml = 25 g/ml = 25000 mg/100 ml = 6250 mg/25 ml = 6,25 g/25 ml b) Dosis 500 mg/kg bb 500 mg x 20 = 10.000 mg = 10 g Larutan 1% BB = 0,2ml Konsentrasi ekstrak = 10 mg/0,2 ml = 50 g/ml = 50000 mg/100 ml =12500 mg/25 ml = 12,5 g/25 ml c) Dosis750 mg/kg bb 750 mg x 20 = 15.000 mg = 15 g Larutan 1% BB = 0,2ml Konsentrasi ekstrak = 5 mg/0,2 ml = 75 g/ml = 75000 mg/100 ml =18750 mg/25 ml=18,75 g/25 ml

Report ,00 ,00 5 5 ,000 ,000 3,40 2,00 5 5 ,548 1,225 2,40 ,40 5 5 ,548 ,548 2,80 ,20 5 5 ,447 ,447 2,60 ,40 5 5 ,548 ,548 2,24 ,60 25 25 1,268 ,957 Mean N Std. Deviation Mean N Std. Deviation Mean N Std. Deviation Mean N Std. Deviation Mean N Std. Deviation Mean N Std. Deviation kelompok kontrol benzopirene ekstrak 250 ekstrak 500 ekstrak 750 Total jumlah nodul sebelum pemberian ekstrak jumlah nodul setelah pemberian ekstrak Lampiran 19. Hasil analisa mean jumlah nodul dengan SPSS 17

Paired Samples Test 1,400 1,673 ,748 -,678 3,478 1,871 4 ,135 JumlahNodulSebelum -JumlahNodulSesudah Pair 1 Mean Std. Deviation Std. Error

Mean Lower Upper

95% Confidence Interval of the

Difference Paired Differences

t df Sig. (2-tailed)

Paired Samples Test

2,000 ,707 ,316 1,122 2,878 6,325 4 ,003 JumlahNodulSebelum -JumlahNodulSesudah Pair 1 Mean Std. Deviation Std. Error

Mean Lower Upper

95% Confidence Interval of the

Difference Paired Differences

t df Sig. (2-tailed)

Paired Samples Test

2,600 ,548 ,245 1,920 3,280 10,614 4 ,000 JumlahNodulSebelum -JumlahNodulSesudah Pair 1 Mean Std. Deviation Std. Error

Mean Lower Upper

95% Confidence Interval of the

Difference Paired Differences

t df Sig. (2-tailed)

Paired Samples Test

2,200 ,837 ,374 1,161 3,239 5,880 4 ,004 JumlahNodulSebelum -JumlahNodulSesudah Pair 1 Mean Std. Deviation Std. Error

Mean Lower Upper

95% Confidence Interval of the

Difference Paired Differences

t df Sig. (2-tailed)

Lampiran 20. Hasil analisa pair sample t-test jumlah nodul dengan SPSS 17

Hasil analisa pair sample t-test jumlah nodul kelompok kontrol negatif

Hasil analisa pair sample t-test jumlah nodul kelompok ekstrak 250 mg/kg BB

Hasil analisa pair sample t-test jumlah nodul kelompok ekstrak 500 mg/kg BB

Multiple Comparisons Dependent V ariable: jumlah nodul setelah pemberian ekstrak Tukey HSD -2,000* ,429 ,001 -3,28 -,72 -,400 ,429 ,881 -1,68 ,88 -,200 ,429 ,990 -1,48 1,08 -,400 ,429 ,881 -1,68 ,88 2,000* ,429 ,001 ,72 3,28 1,600* ,429 ,010 ,32 2,88 1,800* ,429 ,004 ,52 3,08 1,600* ,429 ,010 ,32 2,88 ,400 ,429 ,881 -,88 1,68 -1,600* ,429 ,010 -2,88 -,32 ,200 ,429 ,990 -1,08 1,48 ,000 ,429 1,000 -1,28 1,28 ,200 ,429 ,990 -1,08 1,48 -1,800* ,429 ,004 -3,08 -,52 -,200 ,429 ,990 -1,48 1,08 -,200 ,429 ,990 -1,48 1,08 ,400 ,429 ,881 -,88 1,68 -1,600* ,429 ,010 -2,88 -,32 ,000 ,429 1,000 -1,28 1,28 ,200 ,429 ,990 -1,08 1,48 (J) kelompok benzopirene ekstrak 250 ekstrak 500 ekstrak 750 kontrol ekstrak 250 ekstrak 500 ekstrak 750 kontrol benzopirene ekstrak 500 ekstrak 750 kontrol benzopirene ekstrak 250 ekstrak 750 kontrol benzopirene ekstrak 250 ekstrak 500 (I) kelompok kontrol benzopirene ekstrak 250 ekstrak 500 ekstrak 750 Mean Difference

(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound

95% Confidence Interval

The mean difference is significant at the .05 level. *.

Descriptives

jumlah nodul setelah pemberian ekstrak

5 ,00 ,000 ,000 ,00 ,00 0 0 5 2,00 1,225 ,548 ,48 3,52 0 3 5 ,40 ,548 ,245 -,28 1,08 0 1 5 ,20 ,447 ,200 -,36 ,76 0 1 5 ,40 ,548 ,245 -,28 1,08 0 1 25 ,60 ,957 ,191 ,20 1,00 0 3 kontrol benzopirene ekstrak 250 ekstrak 500 ekstrak 750 Total N Mean Std.

Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound

95% Confidence Interval for Mean

Minimum Maximum

Lampiran 21. Hasil uji one way ANOVA jumlah nodul dengan SPSS 17

a) Tabel deskriptif uji one way ANOVA jumlah nodul setelah pemberian ekstrak

b) Tabel uji one way ANOVA jumlah nodul setelah pemberian ekstrak dan dilanjutkan dengan uji Tukey

Dalam dokumen Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Bangun-Bangun (Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng) Terhadap Penghambatan Karsinogenesis Mammae Mencit Betina Yang Diinduksi Benzo(α)piren (Halaman 82-109)