Affandi, R dan U.M. Tang. 2002. Fisiologi Hewan Air. Unri Press. Riau.
Anggoro, S. 1992. Efek osmotik berbagai tingkat salinitas media terhadap daya tetas telur dan vitalitas larva udang windu, Penaeus monodon F. Disertasi. Bogor: Pascasarjana IPB. 230 hlm.
Anonim. 2003. Usaha pertambakan udang vaname prosfektif. Forek@forek.or.id. 23 April 2003. 5 hlm.
Barton, B.S., R.E. Peter and C.R. Paulencu. 1980. Plasma cortisol levels of fingerIing rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) at rest and subjected to handling, confinement, transport, and stocking. Can. 1. Fish. Aquat. Sci., 37:805 - 811.
Boyd, C.E. 1982. Water Quality Management for Pond Fish Culture. Auburn University. Elsevier Science Publishing Company Inc. New York. 318 p. Boyd, C.E. 1991. Water Quality Management and Aeration in Shrimp Farming.
Pedoman Teknis dan Proyek Penelitian dan Pengembangan Perikanan. Jakarta.
Bray, W.A., A.L. Lawrence, Leung-Trujillo J.R. 1994. The effect of salinity on growth and survival of Penaeus vannamei, with observations on the interaction of IHHN virus and salinity. Aquaculture 122: 133-146.
Brett, J. 1987. Environmental factors affecting growth. In: W.H. Hoare, D.J. Randall, S.R. Brett. (Eds.), Fish Physiology, vol. 8. Academic Press. p 252- 259.
Brown, J.A. 1993. Endocrine Responses to Environmental Pollutants. p 277-291. In Rankin, J.c. and F.B. Jensen (eds.) Fish Ecophysiology. Chapman and Hall, London.
Budiardi, T. 1998. Evaluasi kualitas air, pengelolaan air dan produksi udang windu Penaeus monodon Fabr. pada budidaya intensif. Tesis. Program Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor.
Budiardi, T. 2007. Keterkaitan produksi dengan beban masukan bahan organik pada sistem budidaya intensif udang vaname (Litopenaeus vannamei Boone 1931). Ringkasan Disertasi : disampaikan pada sidang terbuka 19 November 2007. Sekolah Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor.
shrimp culture. Di dalam : Wyban, J.editor. Proceedings of the Special Session on Shrimp Farming. USA:World Aquaculture Society. Hlm 144- 156.
Cuzon, G., A. Lawrence, G. Gaxiol, C. Rosa and J. Guillaume. 2004. Nutrition of Litopenaeus vannamei reared in tanks or in ponds. Aquaculture 235:513-551.
Darwisito, S. 2006. Kinerja reproduki ikan nila (Oreochromis niloticus) yang mendapat tambahan minyak ikan dan vitamin E dalam pakan yang dipelihara pada salinitas media berbeda. Disertasi. Sekolah Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor.
Davis, D.A. and D. Gatlin III. 1991. Dietary mineral requirements of fish and shrimp. p 49-67. In Akiyama DM & Tan RKH. (Eds). Proceedings of the aquaculture feed processing and nutrition workshop. American Soybean Association. Singapore.
Davis, D.A., I.P. Saoud, W.J. McGraw, D.B. Rouse. 2002. Consideration for Litopenaeus vannamei reared in inland low salinity waters. p 73-90. In Cruz- Suarez IE, Rieque-Marie D, Tapia-Salazar M, Gaxiola-Cortes MG, Simoes N (Eds). Avances en nutricion acuicola VI memories del VI Simposium Internacional de Nutricion Acuicola 3 al 6 de September del 2002. Cancun, Quantana Roo.
Davis, D.A., T.M. Samocha, C.E. Boyd. 2004. Acclimating pacific white shrimp, Litopenaeus vannamei, to Inland, Low-Salinity Waters. SRAC Publication No. 2601. 8 p.
Davis, D.A., C.E. Boyd, D.B. Rouse, I.P. Saoud. 2005 Effects of potassium, magnesium and age on growth and survival of Litopenaeusvannamei post- larvae reared in inland low salinity well waters in West Alabama. Journal of the World Aquacultur Society 36(3): 416-419.
Dersjant-Li, Wu., S., M.W.A. Verstegen, J.W. Schrama, J.A.J Verreth. 2001. The impact of changing dietary Na/K ratios on growth and nutrient utilisation in juvenile African catfish, Clarias gariepinus. Aquaculture 198:293–305. Deshimaru, O and Y. Yone. 1978. Requirement of prawn for dietary minerals.
Nippon Suisan Gakkaishi, 44: 907– 910.
Effendi, H. 2003. Telaah Kualitas Air bagi Pengelolaaan Sumberdaya dan Lingkungan Perairan. Jurusan MSP FPIK IPB. Bogor.
Effendie, M.I. 2002. Biologi Perikanan. Yogyakarta : Yayasan Pustaka Nusatama. 163 hlm.
55
Furriel, R.P.M., J.C. McNamara, F.A. Leone. 2000. Characterization of (Na+, K+)- ATPase in gill microsomes of the freshwater shrimp Macrobrachium olfersii. Comp. Biochem. Physiol. 126B : 303–315.
Gong, H., D.H. Jiang, D.V.C.C. Lightner, D. Brock. 2004. A dietary modification approach to improve the osmoregulatory capacity of Litopenaeus vannamei cultured in the Arizona desert. Aquac. Nutr.10:227–236.
Green, B.W. 2004. Production of Litopenaeus vanammei in low-salinity inland pond in Arkansas (Abstract). http://www.ars.usda.gov/research/publication/ publication.htm (1 Oktober 2007).
Haliman, R.W. dan D. Adijaya. 2005. Udang Vannamei. Penebar Swadaya. Jakarta.
Hana, G.C. 2007. Respon udang vanname (Litopenaeus vannamei) terhadap media bersalinitas rendah. Skripsi. Departemen Manajemen Sumberdaya Perairan. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan IPB. Bogor. 39 hlm.
Holliday, F.G.T. 1969. The Effect of Salinity on the Eggs and Larvae of Teleostei.
Huisman, E.A. 1976. Food Conversion efficiencies at maintenance and production level of carp, Cyprinus carpio and rainbow trout, Salmo gairdneri. Aquaculture 9:259-273.
Hukom, V. 2007. Pengaruh salinitas dan kesadahan terhadap tingkat kelangsungan hidup, tingkat konsumsi oksigen dan osmolaritas udang vaname (Litopenaeus vanammei). Skripsi. Departemen Budidaya Perairan. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan IPB. Bogor. 48 hlm.
Imsland, A.K., S. Gunnarsson, A. Foss, S.O. Stefansson. 2003. Gill Na+, K+- ATPase activity, plasma chloride and osmolality in juvenile turbot (Scophthalmus maximus) reared at different temperatures and salinities. Aquaculture 218:671-683.
Kinne, O. 1964. The effect of Temperature and Salinity on Marine and Brakhiswater Animals. II. Salinity and Temperature-Salinity Combination. Oceanography and Marine Biology Annual review 2.
Larvor, P. 1983. Minerals. p 281-315. In: Riis PM. (Eds). Dinamic Biochemistry of Animal Production..Elsevier. Amsterdam.
Liao, I.C. and H.J. Huang. 1975. Studies on the respiration jof economic prawns in Taiwan. I. Oxygen comsumption and lethal dissolved oxygen of egg up to young prawns of Penaeus monodon Fab. Jurn. Fish. Soc. Taiwan 4(1):33-50.
Liu, C.I. 1989. Shrimp disease, prevention and treatment. Di dalam: Akiyama D.M, editor.Proceeding of the Southeast Asia Shrimp Farm Management workshop. USA:Soybeans, America Soybean Association. hlm 64-74.
Lovell, R.T. 1988. Nutrition and feeding of fish. New York van Nostrand Reinhold. p 11-91.
Mantel, L.H. and L.L. Farmer. 1983. Osmotic and ionic regulation. In:Mantel, L.H. (Ed.), The Biology of Crustacea, Volume 5, Internal Anatomy and Physiological Regulation. Academic Press, New York, USA. pp 54–162. Marzuqi, M., K. Sugama, Z.I. Azwar. 1997. Pengaruh askorbil fosfat magnesium
sebagai sumber vitamin C terhadap pematangan gonad udang windu (Penaeus monodon) asal tambak. Jurnal Penelitian Perikanan Indonesia. 3(3): 41-46.
Mazeaud, M.M. and F. Mazeaud. 1981. Adrenergic Responses to Stress in Fish. p 49-68. In Pickering, A.O (Ed.). Stress and Fish. Academic Press, London. McGraw, W.J., D.A. Davis, D. Teichert-Coddington, D.B. Rouse. 2002.
Acclimation of Litopenaeus vannamei postlarvae to low salinity: Influence of age, salinity endpoint, and rate of salinity reduction. Journal of the World Aquaculture Society. p 78-84.
McGraw, W.J. and J. Scarpa. 2003. Minimum environmental potassium for survival of Pasific white shrimp Litopenaeus vannamei (Bonne) in freshwater. Journal of Shellfish Research.Vol. 22(1):263-267.
McGraw, J.W. and J. Scarpa. 2004. Mortality of freshwater-acclimated Litopenaeus vannamei associated with acclimation rate, habituation period, and ionic challenge. Aquaculture 236:285–296.
Murtidjo, B.A. 1989. Tambak Air Payau, Budidaya Udang dan Bandeng. Kanisius. Yogyakarta.
Nybakken, J.M. 1988. Biologi Laut Suatu Pendekatan Ekologis. PT Gramedia. Jakarta.
Pequeux, A. 1995. Osmotic regulation in crustaceans. J. Crustac. Biol. 15:1–60. Piliang, W.G. 2005. Nutrisi Mineral. Edisi ke-5. Bogor: Pusat Antar Universitas,
IPB. 258 hlm.
Pilliang, W.G. dan S. Djojosoebagio. 2000. Nutrisi Vitamin Volume 1. Institut Pertanian Bogor. 255 hlm.
57
Poernomo, A. 2002. Perkembangan udang putih vannamei (Penaeus vannamei) di Jawa Timur. Disampaikan dalam Temu Bisnis Udang . Makassar, 19 Oktober 2002.
Rahardjo, M.F. 1980. Ichthyologi. Institut Pertanian Bogor. Fakultas Perikanan. Departemen Biologi Perairan. Bogor.
Riani, E. 1990. Mekanisme Osmoregulasi pada Udang. Karya Ilmiah. Jurusan Manajemen Sumberdaya Perairan. FPIK IPB. Bogor.
Roy, L.A, D.A. Davis, I.P. Saoud, R.P. Henry. 2007. Effects of varying levels of aqueous potassium and magnesium on survival, growth, and respiration of Litopenaeus vannamei reared in low salinity waters. Aquaculture 262:461- 469.
Saoud, I.P, D.A. Davis, D.B. Rouse. 2003. Suitability studies of inland well waters for Litopenaeus vannamei culture. Aquaculture 217:373-383.
Soewardi, K. 2006. Respon udang vanname (Litopenaeus vannamei) terhadap media air laut yang berbeda. Jurnal Ilmu-ilmu Perairan dan Perikanan Indonesia. Jilid 13 No 2:65-169.
Steel, R.G.D and J.H. Torrie. 1991. Principles and Procedures of Statistics. London: McGraw-Hill, Book Company, INC. 487 p.
Stickney, R.R. 1979. Principles of Warmwater Aquaculture. John Willey and Sons. NewYork
Subjakto, S. 2005. Petunjuk Teknis Pembenihan Udang Vannamei. Juknis. Balai Budidaya Air Payau Situbondo.
Sugama, K . 2002. Status budidaya udang introduksi Litopenaeus vannamei dan Litopenaeus stylirostris serta prospek pengembangannya dalam tambak air tawar. Disampaikan dalam Temu Bisnis Udang . Makassar, 19 Oktober 2002.
Takeuchi, T. 1988. Laboratory work chemical evaluation of dietary nutrient. p 179-232. In T. Watanabe, ed. Fish nutrition and mariculture. Kanagawa Fisheries Training Centre; Japan International Cooperation Agency. Tokyo. Tantulo, U and R. Fotedar. 2006. Comparison of growth, osmoregulatory
capacity, ionic regulation and organosiomatic indices of lack tiger prawn (Penaeus monodon Fabricus, 1798) juveniles reared in potassium fortified inland saline water and ocean water at different salinities. Aquaculture 258:594-605.
USDA. 2006. Shrimp Nutrition Information. USDA National Nutrient Database for Standard Reference. Nutrition and Diet Data. http://www.personalhealthzone.com/ Shrimp Nutrition Information.htm (25 Januari 2008).
Venero, J.A., D.A. Davis, DB. Rouse. 2007. Variable feed allowance with constant protein input for the pacific white shrimp Litopenaeus vannamei reared under semi-intensive conditions in tanks and ponds. Aquaculture 269:490-503.
Vernberg, W.B. and F.J. Vernberg. 1972. Environmental Physiology of Marine Animal. Springer-Verlag. New York.
Wedemeyer, G.A. and W.T. Yasutake. 1977. Clinical Methods for the Assessment of the Effects of Environmental Stress on Fish Health. Technical Paper of the US. Fish and Wildlife Service. Washington. 18 p.
Wedemeyer, G.A. and D.J. Mc Leay. 1981. Methods for Determining the Tolerance of Fishes to Environmental Stressors. In A.D. Pickering (ed.). Stress and Fish. p 247-275.
Wickins, J.F. and D.O.C. Lee. 2002. Crustacean farming, ranching and culture. Blackwell Science.Oxford. 446 p.
Widigdo, B. 2002. Udang Vanname, Rostris dan Windu. Mana yang (lebih) prospektif ?.. Jakarta .5 hlm.
Widigdo, B dan K. Soewardi. 1999. Standard Operation Procedure (SOP) Budidaya Udang Windu di Proyek Pandu TIR Karawang. Kerjasama PPTIR Karawang dengan FPIK IPB. Bogor.
Woodward, J.J. 1982. Plasma catecholamines in resting rainbow trout Oncorhynchus mykiss, by high pressure liquid chromotgraphy. 1. Fish Biol. 21 :429-432.
Wootton, R. J. 1995. Ecology of Teleost Fishes. Chapman and Hall. New York. Wyban, J.A. and J.N. Sweeney. 1991. Intensif shrimp production technology. The
oceanic institut shrimp manual. Honolulu: The Oceanic Institute. 158 p. Zhu, C., S. Dong, F. Wang, H. Zhang . 2006. Effects of seawater potassium
concentration on the dietary potassium requirement of Litopenaeus vannamei Aquaculture 258:543–550.
Zonneveld, N., E.A. Huisman, J.H. Boon. 1991. Prinsip-prinsip Budidaya Ikan. PT Gramedia Pustaka Utama. Jakarta. 311 hlm.
59
Lampiran 1. Prosedur pengukuran osmolaritas media dan cairan tubuh pascalarva udang vaname (SOP Osmometer Automatic Roebling Type 13) 1. Sambungkan kabel ke sumber listrik kemudian tekan tombol main power
(terletak di bagian depan). Alat akan melakukan prosedur pemanasan selama 15-30 menit (untuk tunggu suhu turun/dingin)
2. Kalibrasi :
a. Siapkan microtube 1,5 ml dan masukkan 100 µl akuades secara hati- hati (agar tidak menimbulkan ruang kosong/bubble di bawah akuades) b. Cuci/bilas sensor dengan tisu yang telah dibasahi dengan akuades, lalu
keringkan
c. Pasangkan microtube ke alat osmometer, tekan dan biarkan
d. Setelah display menunjukkan angka -70, jarum akan terangkat dan menusuk ke microtube 1 kali (jika jarum terangkat dan menusuk sebanyak 3 kali, artinya alat belum siap digunakan)
e. Setelah menusuk microtube, display akan memperlihatkan angka 0 mosm, lalu langsung tekan θ dan keluarkan microtube untuk ganti dengan standar
f. Cuci/bilas kembali sensor dengan kertas tisu yang telah dibasahi dengan akuades, lalu keringkan
g. Siapkan microtube 1,5 ml baru dan masukkan 100 µl standar/osmotor 300 mosm secara hati-hati
h. Pasangkan microtube berisi larutan standar ke alat osmometer, tekan dan biarkan
i. Setelah display memperlihatkan angka 300 mosm, tekan CAL dan keluarkan microtube
j. Cuci/bilas kembali sensor dengan kertas tisu yang dibasahi dengan akuades, lalu keringkan
3. Sampel :
a. Siapkan cairan sampel dan masukkan ± 100 µl dalam microtube, kemudian masukkan ke sensor
b. Turunkan handle sampel, tunggu sampai pengukuran selesai dan lampu resultnya menyala disertai dengan bunyi “bip”
c. Angkat handle
d. Bilas sensor menggunakan kertas tisu yang telah dibasahi dengan akuades 4. Setelah selesai melakukan pengukuran :
a. Bersihkan sensor menggunakan kertas tisu yang dibasahi dengan akuades b. Pada saat tidak digunakan sensor harus ditutup dengan tabung eppendorf
kosong (handle dalam posisi turun) c. Matikan main power : off
Lampiran 2. Metode pengambilan hemolim pascalarva udang vaname
1. Masukkan pascalarva udang vaname yang akan diambil plasmanya ke dalam wadah penggerus lalu tambahkan larutan antikoagulan 3,8% (3,8 gram Na-sitrat dalam 100 ml akuades) dengan perbandingaan 1 : 3 (1 gram pascalarva udang vaname : 3 ml larutan antikoagulan)
2. Hasil gerusan dimasukkan ke dalam tabung eppendorf 1,5 ml kemudian disentrifuse dengan kecepatan 3000 rpm selama 5 menit.
3. Dengan menggunakan syringe 1 ml ambil cairan plasma (terletak pada bagian atas) lalu masukkan ke tabung eppendorf yang lainnya untuk dianalisis lebih lanjut.
Lampiran 3. Prosedur analisis kadar glukosa darah menggunakan KIT Glucose GOD FS dari DiaSys International
1. Mempersiapkan larutan blanko, standar dan sampel hemolim pascalarva udang vaname dengan menambahkan akuades atau reagen sesuai prosedur berikut ini :
Blanko Sampel atau standar
Sampel atau standar Aquades Reagen - 10 µl 1000 µl 10 µl - 1000 µl
2. Homogenkan dengan bantuan vortex. Selanjutnya diinkubasi selama 20 menit pada suhu 20-250C, atau selama 10 menit pada suhu 370C
3. Baca absorbansi dalam 60 menit dan dibandingkan dengan blanko. Panjang gelombang yang digunakan 546 nm.
4. Penghitungan kadar glukosa : * Dengan standar atau kalibrator :
Glukosa [mg/dl] = ΔA Sampel x konsentrasi Std/Cal [mg/dl] ΔA Std/Cal
konsentrasi Std/Cal [mg/dl] = 100 mg /dl ( 5,55 mmol/l ) * Konversi faktor :
61
Lampiran 4. Prosedur pengoperasian spektrofotomer untuk analisis kadar glukosa darah (SOP CAMSPEC SERI 2001)
1. Hubungkan alat spektrofotometer dengan arus listrik.
2. Nyalakan spektrofotometer dengan menekan power switch (IO) di bagian belakang spektrofotometer. Biarkan 15 menit untuk pemanasan.
3. Pilih jenis pengukuran, % transmitansi, % absorbansi, konsentrasi atau faktor dengan menekan tombol (MODE) yang diikuti dengan munculnya tanda lampu merah di samping jenis pengukuran yang dipilih.
4. Pilih /atur panjang gelombang dengan tombol (WAVELENGTH)
5. Isi kuvet bersih dengan larutan blanko minimal sebanyak 3/4 dari volume kuvet. Bersihkan/lap kuvet dengan tisue untuk menghilangkan sidik jari dan tetesan larutan.
6. Buka penutup tempat mengukur sampel. Tempatkan kuvet berisi blanko pada kotak tempat menyimpan sampel, lalu tutup kembali.
7. Zero set/adjust 0.000 A atau 100% T dengan Tombol (0A / 100%T).
8. Bilas kuvet kedua dengan sedikit larutan standar/sampel yang akan diuji, lalu bersihkan/lap dengan tisue (jangan bersihkan/lap bagian dalam kuvet). Isi kuvet dengan standar/sampel sebanyak 3/4 volume kuvet lalu bersihkan/lap dengan tisue.
9. Tempatkan beberapa kuvet berisi larutan standar/sampel di kotak menyimpan sampel. Untuk membaca 0A/100%T posisikan sampel/standar di depan lensa/lampu di samping kotak tempat menyimpan sampel, dengan menarik/mendorong tombol hitam di bagian luar depan tempat menyimpan sampel.
10.Setiap mengganti isi kuvet dengan larutan yang berbeda bilas terlebih dahulu dengan akuades beberapa kali. Selanjutnya ikuti petunjuk no 8 dan 9.
11.Jika ingin mengukur larutan sampel yang sama pada panjang gelombang yang berbeda ulangi langkah 3 sampai 9.
12.Untuk setiap larutan sampel baru yang akan diukur, ulangi langkah 3 sampai 10.
13.Setelah selesai pengukuran, matikan alat dengan menekan tombol power switch (IO). Putuskan hubungan dengan stok kontak/arus listrik.
Lampiran 5. Prosedur pengukuran tingkat konsumsi oksigen pascalarva udang vaname
1. Siapkan stoples plastik volume 200 ml yang pada bagian penutupnya dibuat lubang tempat masuknya selang aerasi dan probe DO-meter.
2. Masukkan air 200 ml dan 10 ekor pascalarva yang telah dipuasakan selama 1 hari sesuai perlakuan percobaan pada stoples, lalu ditutup rapat dan diaerasi hingga mencapai oksigen jenuh.
3. Catat kandungan oksigen awal (tercapai pada saat nilai yang tertera pada DO-meter tidak berubah lagi).
4. Setelah 1 jam, catat nilai yang tertera pada DO-meter.
5. Selanjutnya ambil dan timbang 10 ekor pascalarva udang vaname yang telah dimasukkan ke dalam stoples tersebut.
Lampiran 6. Prosedur preparasi sampel air dan pengukuran kandungan mineral air dengan metode spektrofotomer serapan atom (AAS) (SOP Shimadzu AA-680)
A. Preparasi sampel air :
1. Disiapkan tabung reaksi sebanyak sampel yang ada
2. Dipipet 0,1 ml dari sampel air, kemudian ditambahkan 0,05 ml larutan lantan klorida dan akuades sebanyak 4,9 ml, lalu divortex
3. Dibaca pada alat AAS, jika absorbansi nya terlalu tinggi (lebih tinggi dari standar) maka kembali ke larutan poin 2, diambil 0,5 ml dan dimasukkan ke tabung reaksi lalu ditambah akuades sebanyak 4,5 ml dan divortex 4. Dibaca kembali pada alat AAS dengan perbandingan standar yang sudah
ada.
B. SOP AAS dengan Shimadzu AA-680 :
1. Hubungkan alat dengan listrik dan nyalakan stabilizer 2. Gas asetilen dibuka selanjutnya kompresor dinyalakan
Tekan tombol ON
Tutup semua kran udara yang ada di kompresor
(Ada 3 kran, 1 dibawah alat kompresor,1 di tempat berwarna biru muda, dan 1 kran bawah pada alat sebelah kompresor)
63
3. POWER UTAMA pada alat dihidupkan, tunggu sampai inisialisasi lampu katoda selesai, ditandai dengan munculnya ”SHIMADZU AA-680 READY” pada printer
4. Tekan MODE, lalu tekan angka 2, ENTER
5. Tekan SIGNAL PROC, lalu tekan angka 3, ENTER
6. Untuk memilih lampu,misalnya kalsium : tekan #HC LAMP, tekan angka 1, ENTER
7. Tekan ELEM, tekan angka 9,ENTER
8. Tekan START, tunggu sampai keluar ”ANALYTICAL LINE SEARCH” pada print out
9. Matikan START, ditunggu sampai 15 menit 10.Tahap pengukuran sampel
Matikan LEAK CHK
Hidupkan IGNITE, ditekan sampai api pada pembakaran hidup
Tekan START
Masukan selang pengisap sampel pada aquadest untuk menolkan alat (BLANKO)
Tekan ”MEASURE”, selama nyala pada MEASURE belum hilang, selang jangan diangkat
Setelah nyala pada MEASURE hilang, selang diangkat dan dicelupkan pada larutan standar
Demikian seterusnya sampai pengukuran pada sampel juga dilakukan hal yang sama
11.Pengulangan injek larutan standar dilakukan setelah pengecekan ± 12 sampel 12.Setelah semua sampel diukur, tekan EXTINGUISH
Pada tahap ini, bila akan ganti lampu katoda (untuk analisis mineral yang lain),dilakukan lagi tahap no.8-10
13.Apabila selesai analisis, tutup gas asetilen 14.Tekan EXTINGUISH
15.Kompresor di ”OFF” kan, dibuka semua kran yang awalnya ditutup, dibiarkan sampai tekanan turun pada angka 0
16.POWER UTAMA dimatikan 17.Stabilizer di OFF kan
Lampiran 7. Prosedur analisis proksimat pakan dan tubuh pascalarva udang vaname
A. Prosedur analisis kadar protein kasar (metode semi mikro Kjeldahl; Takeuchi 1988)
1. Sebanyak 0,5-1,0 gram sampel ditimbang dan dimasukan ke dalam labu Kjedahl no. 1, kemudian salah satu labu (no. 2) digunakan sebagai blanko. 2. Ke dalam labu no. 1 ditambahkan 3 gram katalis (K2SO4 + CuSO4.5H2O)
dengan rasio 9 : 1 (w/w), dan 10 ml H2SO4 pekat).
3. Labu no. 2 dipanaskan 3-4 jam sampai cairan dalam labu berwama hijau, setelah itu pemanasan diperpanjang 30 menit lagi.
4. Larutan didinginkan lalu ditambahkan air destilata 30 ml. Selanjutnya larutan no. 2 dimasukan ke labu takar, tambahkan larutan destilata sampai volume larutan menjadi 100 ml.
5. Dilakukan proses destilasi untuk membebaskan kembali NH3 yang berasal
dari proses destruksi pada no. 4.
6. Labu erlenmeyer diisi 10 ml H2SO4 0,05 N dan ditambahkan 2-3 tetes
indikator (methyl red/methylen blue), dipersiapkan sebagai penampung NH3 yang dibebaskan dari labu no. 4.
7. Labu destilasi diisi 5 ml larutan no. 4, lalu ditambah larutan natrium hidroksida 30%.
8. Pemanasan dengan uap terhadap labu destilasi (no. 7) dilakukan minimum 10 menit, setelah kondensasi uap terlihat pada kondensor.
9. Larutan dalam labu erlenmeyer dititrasi dengan 0,05 N larutan natrium hidroksida.
10.Dengan metode ini diperoleh kadar nitrogen total yang dihitung dengan rumus :
0,0007* x (Vb – Vs) x F x 6,25** x 20
Kadar protein (%) = x 100 S
Keterangan :
65
Vb : ml titer NaOH untuk blanko
F : faktor koreksi dari 0,05 N larutan NaOH S : bobot sampel (g)
* : 1 ml NaOH = 0,0007 g nitrogen ** : faktor nitrogen
B. Prosedur analisis kadar lemak kasar (metode ether Soxhlet; Takeuchi, 1988) 1. Labu ekstraksi dipanaskan pada suhu 110°C selama 1 jam. Kemudian
didinginkan selama 30 menit dalam eksikator. Panaskan kembali selama 30 menit, lalu dinginkan, kemudian ditimbang. Proses tersebut diulang sampai tidak ada perbedaan bobot labu lebih dari 0,3 mg. Bobot labu ekstraksi ditimbang (A).
2. Sebanyak 1-2 sampel dimasukkan ke dalam tabung filter, lalu dipanaskan pada suhu 100°C selama 2-3 jam.
3. Tempatkan tabung filter pada no. 2 ke dalam ekstraksi dari alat Soxhlet. Kemudian disambungkan kondensor labu ekstraksi pada no. 1 yang telah diisi 100 ml petroleum ether.
4. Panaskan ether pada labu ekstraksi dengan menggunakan water bath, pada suhu 70°C selama 16 jam.
5. Panaskan labu ekstraksi pada suhu 100°C, kemudian timbang (B). 6. Persentase lemak kasar dihitung dengan menggunakan rumus : B – A
Kadar lemak (%) = x 100 Bobot sampel C. Prosedur analisis kadar abu (Takeuchi, 1988)
1. Cawan porselen dipanaskan pada suhu 600°C selama 1 jam dengan menggunakan muffle furnace, kemudian dibiarkan pada suhu muffle furnace turun sampai 110°C, lalu cawan porselin dikeluarkan dan disimpan dalam eksikator selama 30 menit, lalu ditimbang (A).
2. Masukkan sampel lalu timbang (B), penimbangan sampai 4 desimal. 3. Panaskan dalam muffle furnace pada suhu 600°C, sampai bahan berwarna
putih.
4. Cawan porselen dikeluarkan lalu didinginkan dalam eksikator selama 30 menit, lalu ditimbang (C).
5. Persentase kadar abu ditentukan dengan rumus : C – A
Kadar abu (%) = x 100 B – A
D. Prosedur analisis kadar air (Takeuchi, 1988)
1. Cawan porselen dipanaskan pada suhu 105-110°C selama 1 jam, didinginkan dalam eksikator 10 menit dan ditimbang (X1).
2. Bahan seberat A gram dimasukkan ke dalam cawan X1.
3. Cawan yang sudah berisi bahan dimasukkan ke dalam oven pada suhu 105-110°C selama 3 jam, selanjutnya didinginkan dalam eksikator dan ditimbang.
4. Prosedur no. 3 diulang kembali, jika tidak ada perubahan bobot maka pengukuran selesai (X2).
5. Persentase kadar air dihitung dengan rumus: X1 – X2
Kadar air (%) = x 100 A
E. Prosedur analisis kadar serat kasar (Takeuchi, 1988)
1. Bahan (A gram) dimasukkan ke dalam erlenmeyer 350 ml, ditambahkan dengan 50 ml H2S04 0,3 N, kemudian dipanaskan di atas hot plate selama
30 menit.
2. Tambahkan 25 ml NaOH 1,5 N, kemudian dipanaskan kembali selama 30 menit.
3. Panaskan kertas saring Whatman (Ø : 10 cm) dalam oven, dieksikator selama 10 menit, kemudian ditimbang (X1). Pasang kertas saring pada
corong Buchner yang dihubungkan dengan vacum pump.
67
Lakukan pembilasan berturut-turut menggunakan 50 ml air panas, 50 ml H2S04 0,3 N, 50 ml air panas dan 25 ml aseton.
5. Panaskan cawan porselen pada suhu 105-110°C selama 1 jam dan didinginkan dalam eksikator.
6. Masukkan kertas saring dari corong Buchner ke dalam cawan, panaskan pada suhu 105°C, tempatkan pada eksikator dan ditimbang (X2).
7. Dengan metode ini diperoleh kadar serat kasar dengan rumus : X1 – X2
Kadar serat kasar (%) = x 100 A
F. Prosedur analisis kadar karbohidrat (Takeuchi, 1988)
1. Kadar karbohidrat total ditentukan dengan metode carbohydrate by difference yaitu : 100% - (kadar air + abu + protein + lemak).
2. Kadar karbohidrat N-free menunjukkan besarnya kandungan karbohidrat yang dapat dicerna dari suatu bahan pangan, yang ditentukan dengan cara : 100% - (kadar air + abu + protein + lemak + serat kasar).
Lampiran 8. Sintasan pascalarva udang vaname setelah melalui masa aklimatisasi