SENYAWA AKTIF ANTIOKSIDAN
Lampiran 5 Gambar-gambar selama proses ekstraks
Proses maserasi denganorbital shaker
Proses penyaringan hasil maserasi
Lampiran 6 Perhitungan persen inhibisi dan nilai IC50 • Persen inhibisi BHT: x 100 % BHT 2 ppm = (0,686-0,88)/0,88 x 100 % = 22,045 % BHT 4 ppm = (0,548-0,88)/0,88 x 100 % = 37,727 % BHT 6 ppm = (0,443-0,88)/0,88 x 100 % = 49,659 % BHT 8 ppm = (0,367-0,88)/0,88 x 100 % = 58,295 % • IC50BHT y = 12,068x + 11,761 50 = 12,068x + 11,761 38,329 = 12,068x x = 3,17 ppm IC50untuk BHT adalah 3,17 ppm • Persen inhibisi ekstrak daun
Ekstrak 2 ppm = (0,715-0,88)/0,88 x 100 % = 18,75 % Ekstrak 4 ppm = (0,708-0,88)/0,88 x 100 % = 19,5455 % Ekstrak 6 ppm = (0,702-0,88)/0,88 x 100 % = 20,2273 % Ekstrak 8 ppm = (0,691-0,88)/0,88 x 100 % = 21,4773 % • IC50Ekstrak daun
y = 0,8864x + 17,784 50 = 0,8864x + 17,784 67,784 = 0,8864x
x = 36,35 ppm
IC50untuk daun adalah 36,35 ppm • Persen inhibisi ekstrak kulit batang
Ekstrak 2 ppm = (0,811-0,88)/0,88 x 100 % = 7,8409 % Ekstrak 4 ppm = (0,799-0,88)/0,88 x 100 % = 9,2045 % Ekstrak 6 ppm = (0,792-0,88)/0,88 x 100 % = 10 % Ekstrak 8 ppm = (0,789-0,88)/0,88 x 100 % = 10,3409 % • IC50Ekstrak kulit batang
y = 0,8295x + 7,2727 50 = 0,8295x + 7,2727 42,73 = 0,8295x
x = 51,51 ppm
IC50untuk kulit batang adalah 51,51 ppm
(Absorbansi blanko-absorbansi sampel) Absorbansi blanko
SENYAWA AKTIF ANTIOKSIDAN
SILVIA HANDAYANI
DEPARTEMEN TEKNOLOGI HASIL PERAIRAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR
DAFTAR PUSTAKA
Afzal M, Masood R, Jan G, Majid A, Fiaz M, Shah AH, Alam J, Mehdi FS, Abbasi FM, Ahmad H, Islam M, Inamullah, Amin NU.2011. Efficacy of Avicennia marina (Forsk.) Vierh. leaves extracts againts some atmospheric fungi. African Journal of Biotechnology 10(52): 10790- 10794.
[AOAC] Association of Official Analytical Chemist. 2005. Official Method of Analysis of The Association of Official Analytical of Chemist. Arlington: The Association of Official Analytical Chemist, Inc.
Ansel. 1989.Pengatur Bentuk Sediaan Farmasi. Jakarta: UI Press.
Astawan M, Kasih AL. 2008. Khasiat Warna-warni Makanan. Jakarta: PT Gramedia
Bandaranayake WM. 1999. Economic, traditional and medicinal uses of mangroves.Australian Institut of Marine Science(28).
Bayu A. 2009. Hutan mangrove sebagai salah satu sumber produk alam laut. Oseana.Vol XXXIV No.2 (15-23).
Belitz HD, Grosch W, Schieberle P. 2009. Food Chemistry. Ed rev ke-4. Verlag: Springer.
Bengen DG. 2000. Sinopsis Ekosistem dan Sumberdaya Alam Pesisir. Bogor: Pusat Kajian Sumberdaya Pesisir dan Lautan–IPB.
Bengen DG. 2001. Pedoman Teknis Pengenalan dan Pengelolaan Ekosistem Mangrove.Bogor: Pusat Kajian Sumberdaya Pesisir dan Lautan–IPB. Cahyadi W. 2008.Bahan Tambahan Pangan. Jakarta: Bumi Aksara.
Cai W, Gu X, Tang J. 2010. Extraction, purification, and characterisation of the flavonoids from Opuntia milpa alta skin. Journal of Czech Food Science.28(2):108-116.
Copriady J, Yasmi E, Hidayati . 2005. Isolasi dan karakterisasi senyawa kumarin dari kulit buah jeruk nipis(Citrus hystrixDC).Jurnal Biogenesis 2:13- 15.
Cui CB, Xu C, Gu QQ, Chu SD, Ji HH, Jing G. 2004. A new furostanol saponin from the water-extract of Dioscorea nipponica Mak., the raw material of the traditional Chinese herbal medicine wei ao xin. Chinese Chemical Letters15(10):1191-1194.
Erukainure OL, Oke OV, Ajiboye AJ, Okafor OY. 2011. Nutritional qualities and phytochemical constituents of Clerodendrum volubile, a tropical non- conventional vegetable. International Food Research Journal 18(4):1393-1399.
Harborne JB. 1967. Comparative Biochemistry of The Flavonoids. London: Academic Press Inc.
Harborne JB. 1984. Phytochemical methods. Ed ke-2. New York: Chapman and Hall.
Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia. Padmawinata K, Soediro I, penerjemah. Bandung: ITB. Terjemahan dari:Phytochemical Methods.
Herawati, Akhlus S. 2006. Kinerja BHT sebagai antioksidan minyak sawit pada perlindungan terhadap oksidasi oksigen singlet.Akta Kimindo2(1):1-8. Jacoeb AM, Purwaningsih S, Rinto. 2011. Anatomi komponen bioaktif dan
aktivitas antioksidan daun mangrove Api-api (Avicennia marina). Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia14(2): 143-152.
Kannan A, Hettiarachchy N, Narayan S. 2009. Colon and breast anti-cancer effects of peptide hydrolysates derived from rice bran. The Open Bioactive Coumpounds Journal2:17-20.
Ketaren S. 2008. Pengantar Teknologi Minyak dan Lemak Pangan. Jakarta: UI- Press.
Khunaifi M. 2010. Uji aktivitas antibakteri ekstral daun binahong (Anredera cordifolia (Ten.)Steenis) terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa.[skripsi]. Malang: Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.
Kumalaningsih S. 2006.Antioksidan Alami. Surabaya: Trubus Agrisarana.
Kumar B, Sandhar HK, Tiwari P, Salhan M, Sharma P. 2011a. A review of phytochemistry and pharmacology of flavonoids. International Pharmaceutica Sciencia (IPS)1(1):26-29.
Kumar JIN, Sajish PR, George B, Viyol S, Kumar RN. 2011b. Nutrient dynamic in an Avicennia marina (Forsk.) Vierh. mangrove forest in Vamleshwar, Near Narmada Estuary, West Coast of Gujarat, India. Global Journal of Enviromental ResearchVol 5(1): 32-38.
Kuncahyo I, Sunardi. 2007. Uji aktivitas antioksidan ekstrak belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi,L.) terhadap 1,1 diphenyl-2- pycrylhidrazil (DPPH). Makalah Seminar Nasional Teknologi.
Lenny S. 2006. Senyawa flavonoida, fenilpropanoida dan alkaloida. [makalah]. Medan: Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sumatera Utara.
Molyneux P. 2004. The use of stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioksidan activity. Songklanakarin Journal Science Technology26(2):211-219.
Mujeeb M, Siddique NA, Najmi AK, Akram M. 2010. Evaluation of antioxidant activity, quantitative estimation of phenols and flavonoids in different parts of Aegle marmelos. African Journal of Plant Science 4(1): 001- 005
Musthafa Z, Lawrence GS. 2000. Peran antioksidan dalam penghambatan aterosklerosis pada tikus wistar diabetes mellitus. Cermin Dunia Kedokteran127:32-33.
Nybakken JW. 1992. Biologi Laut Suatu Pendekatan Ekologis. Alih bahasa oleh M. Eidman, Koesoebiono, D.G. Bengen, M. Hutomo, S. Sukardjo. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama.
Oktariana EW. 2007. Uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol rimpang lengkuas merah (Alpinia galanga) dengan metode DPPH (1,1-difenil-2- pikrilhidrazil). [skripsi]. Semarang: Universitas Diponegoro.
Porto DD, Henriques AT, Fett-Neto AG. 2009. Bioactive alkaloids from South American Psychotria and related species. The Open Bioactive Compounds Journal2:29-36.
Pratt DE, Hudson BJF. 1990. Natural antioxidants not exploited comercially. Di dalam : B.J.F.Hudson, editor. Food Antioxidants. London: Elsevier Applied Science.
Purnobasuki H. 2004. Potensi Mangrove sebagai Tanaman Obat. Surabaya: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Airlangga
Rafi M, Arief Z. 2006. Metode cepat penentuan kadar flavonoid total dalam obat herbal secara spektrofotometri derivative ultraviolet. Ringkasan Hasil Penelitian Dosen Muda,Institut Pertanian Bogor.
Rita A, Tania SU, Heri H, Albana AM, Rini R. 2009. Produksi antioksidan dari daun simpur (Dillenia indica) menggunakan metode ekstraksi tekanan tinggi dengan sirkulasi pelarut. Di dalam: SNTKI2009. Prosiding Seminar Nasional Teknik Kimia Indonesia; Bandung, 19-20 Oktober 2009. Bandung: Perhimpunan Teknik Kimia Indonesia. hlm 1-8.
Rohman A, Riyanto S. 2005. Daya antioksidan ekstrak etanol daun kemuning (Murraya paniculata (L) Jack) secara in-vitro. Majalah Farmasi Indonesia16(3):136-140.
Rohman A, Riyanto S, Utari D. 2006. Aktivitas antioksidan, kandungan fenolik total dan kandungan flavonoid total ekstrak etil asetat buah mengkudu serta fraksi-fraksinya.Majalah Farmasi Indonesia17(3):136-142. Samsudin. 2008.Azadirachtin Metabolit Sekunder dari Tanaman Mimba sebagai
Bahan Insektisida Botani. Lembaga Pertanian Sehat.
Sastrohamidjojo H. 1996.Sintesis Bahan Alam. Yogyakarta: Gadjah mada
Schmidt G, Steinhart H. 2001. Impact of extraction solvents on steroid contents determined in beef.Journal of Food Chemistry76:83-88.
Siagian A. 2002. Bahan Tambahan Makanan. Medan: Universitas Sumatera Utara.
Silaban LW. 2009. Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri dari Kulit Buah Sentul (Sandoricum Koetjape (Burm. F.) Merr) Terhadap Beberapa Bakteri Secara In Vitro. [skripsi]. Medan: Fakultas Farmasi, Universitas Sumatera Utara
Silalahi J. 2006.Makanan Fungsional. Yogyakarta : Kanisius.
Simamora A. 2011. Flavonoid dalam apel dan aktivitas antioksidannya. [thesis]. Universitas Kristen Krida Wacana.
Voight R. 1994. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Yogyakarta: Gajah Mada Universitas press.
Waji RA, Sugrani A. 2009. Makalah kimia organik bahan alam: flavonoid (quercetin). [makalah]. Makasar: Program S2 Kimia, FMIPA, Universitas Hasanuddin.
Wibowo C, Kusmana C, Suryani A, Hartati Y, Oktadiyani P. 2009. Pemanfaatan pohon mangrove api-api (Avicennia spp.) sebagai bahan pangan dan obat. Prosiding Seminar Hasil-hasil Penelitian IPB.
Widyastuti N. 2010. Pengukuran aktivitas antioksidan dengan metode CUPRAC, DPPH, dan FRAP serta korelasinya dengan fenol dan flavonoid pada enam tanaman. [skripsi]. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor.
Wiesman Z, Chapagain BP. 2003. Laboratory evaluation of natural saponin as a bioactive agent against Aedes aegypti and Culex pipiens. Dengue Bulletin27:168-173.
Winarno FG. 2008.Kimia Pangan dan Gizi. Bogor: M-BRIO Press.
Yuhernita, Juniarti. 2011. Analisis senyawa metabolit sekunder dari ekstrak methanol daun surian yang berpotensi sebagai antioksidan. Makara Sains15(1).
Yunizal, Murtini JT, Dolaria N, Purdiwoto B, Abdulrokhim, Carkipan. 1998. Prosedur Analisis Kimiawi Ikan dan Produk Olahan Hasil-Hasil Perikanan. Jakarta: Pusat Penelitian dan Pengembangan Perikanan.
Yusuf S. 2010. Isolasi dan penentuan struktur molekul senyawa triterpenoid dari kulit batang kayu api-api betina (Avicennia Marina Nessh). Jurnal Penelitian Sains,13(2) (C) 13205.
Lampiran 1 Gambar sampel pohon api-api (Avicennia marina(Forks.)Vierh.)
(Sampel daun)
Lampiran 2 Perhitungan analisis proksimat dan rendemen ekstrak a) Kadar air (berat basah)
Daun :
Kulit Batang:
b) Kadar abu (berat kering) Daun :
Kulit Batang:
c) Kadar protein (berat kering) Daun :
Kulit Batang :
d) Kadar lemak (berat kering) Daun :
Kulit batang :
• Perhitungan rendemen ekstrak
% Rendemen ekstrak = Hasil ekstrak x 100 %
Berat awal sampel
% Rendemen ekstrak daun = 4,3812 gram x 100 % = 17,525 % 25 gram
% Rendemen ekstrak kulit batang = 3,0163 gram x 100 % = 12,065 % 25 gram
% Kadar air U1 = x 100 % = 55,4 % % Kadar air U2 = x 100 % = 54,6 % % Kadar air total = U1+U2 = 55,0 %
2,77 gram 5 gram 2,73 gram 5 gram % Kadar abu = x 100 % = 14,91 % % Kadar abu = x 100 % = 9,6 % 4,59 (100-69,2) 4,32 (100-55) % Kadar protein = x 100 % = 11,04 % % Kadar protein = x 100 % = 6,4 % 3,4 (100-69,2) 2,9 (100-55) % Kadar lemak = x 100 % = 2,21 % % Kadar lemak = x 100 % = 1,55 % 0,68 (100-69,2) 0,7 (100-55) % Kadar air U1 = x 100 % = 69,4 % % Kadar air U2 = x 100 % = 69,0 % % Kadar air total = U1+U2 = 69,2 %
3,45 gram 5 gram 3,47 gram
Lampiran 3 Gambar hasil uji fitokimia daun dan kulit batang pohon api-api (Avicennia marina), serta perubahan warna pada reaksi
peredeman DPPH
(Sampel Daun api-api) (Sampel Kulit batang api-api)
(Ekstrak daun + DPPH) (Ekstrak kulit batang + DPPH) (Ekstrak daun + DPPH) (Ekstrak kulit batang + DPPH)
Lampiran 4 Perhitungan pembuatan larutan stok dan pengencerannya a. DPPH 0,001 M dalam 20 ml (Mr = 493,32 g/mol)
Konsentrasi = 0,001 M =
Berat DPPH = 0,0079 gram
Sebanyak 0,0079 mg kristal DPPH dilarutkan dalam metanol p.a hingga 20 ml. b. Standar BHT 8 ppm sebanyak 50 ml
Stok BHT 8 ppm = (8 mg/L) x (1 L/1000 ml) = 0,008/20 = 0,0004 mg Sebanyak 0,4 gram kristal BHT dilarutkan dalam metanol p.a hingga 50 ml.
• BHT 2 ppm = V1 x M1 = V2 x M2
= 20 ml x 2 ppm = V2 x 8 ppm
= 5 ml dilarutkan dalam metanol p.a hingga 20 ml • BHT 4 ppm = V1 x M1 = V2 x M2
= 20 ml x 4 ppm = V2 x 8 ppm
= 10 ml dilarutkan dalam metanol p.a hingga 20 ml • BHT 6 ppm = V1 x M1 = V2 x M2
= 20 ml x 6 ppm = V2 x 8 ppm
= 15 ml dilarutkan dalam metanol p.a hingga 20 ml • BHT 8 ppm = V1 x M1 = V2 x M2
= 20 ml x 8 ppm = V2 x 8 ppm
= 20 ml dilarutkan dalam metanol p.a hingga 20 ml c. Larutan ekstrak 800 ppm sebanyak 50 ml
Stok ekstrak 800 ppm = (800 mg/L) = (0,8 gram/1000 ml) = 0,004 gram/50 ml
Ekstrak sebanyak 0,004 gram dilarutkan dalam metanol p.a hingga 50 ml. • Ekstrak 200 ppm = V1 x M1 = V2 x M2
= 20 ml x 200 ppm = V2 x 800 ppm
= 5 ml dilarutkan dalam metanol p.a hingga 20 ml • Ekstrak 400 ppm = V1 x M1 = V2 x M2
= 20 ml x 400 ppm = V2 x 800 ppm
= 10 ml dilarutkan dalam metanol p.a hingga 20 ml • Ekstrak 600 ppm = V1 x M1 = V2 x M2
= 20 ml x 600 ppm = V2 x 800 ppm
= 15 ml dilarutkan dalam metanol p.a hingga 20 ml • Ekstrak 800 ppm = V1 x M1 = V2 x M2
= 20 ml x 800 ppm = V2 x 800 ppm
= 20 ml dilarutkan dalam metanol p.a hingga 20 ml
Berat DPPH 1000
Mr ml volume
Berat DPPH 1000
Lampiran 5 Gambar-gambar selama proses ekstraksi
Proses maserasi denganorbital shaker
Proses penyaringan hasil maserasi
Lampiran 6 Perhitungan persen inhibisi dan nilai IC50 • Persen inhibisi BHT: x 100 % BHT 2 ppm = (0,686-0,88)/0,88 x 100 % = 22,045 % BHT 4 ppm = (0,548-0,88)/0,88 x 100 % = 37,727 % BHT 6 ppm = (0,443-0,88)/0,88 x 100 % = 49,659 % BHT 8 ppm = (0,367-0,88)/0,88 x 100 % = 58,295 % • IC50BHT y = 12,068x + 11,761 50 = 12,068x + 11,761 38,329 = 12,068x x = 3,17 ppm IC50untuk BHT adalah 3,17 ppm • Persen inhibisi ekstrak daun
Ekstrak 2 ppm = (0,715-0,88)/0,88 x 100 % = 18,75 % Ekstrak 4 ppm = (0,708-0,88)/0,88 x 100 % = 19,5455 % Ekstrak 6 ppm = (0,702-0,88)/0,88 x 100 % = 20,2273 % Ekstrak 8 ppm = (0,691-0,88)/0,88 x 100 % = 21,4773 % • IC50Ekstrak daun
y = 0,8864x + 17,784 50 = 0,8864x + 17,784 67,784 = 0,8864x
x = 36,35 ppm
IC50untuk daun adalah 36,35 ppm • Persen inhibisi ekstrak kulit batang
Ekstrak 2 ppm = (0,811-0,88)/0,88 x 100 % = 7,8409 % Ekstrak 4 ppm = (0,799-0,88)/0,88 x 100 % = 9,2045 % Ekstrak 6 ppm = (0,792-0,88)/0,88 x 100 % = 10 % Ekstrak 8 ppm = (0,789-0,88)/0,88 x 100 % = 10,3409 % • IC50Ekstrak kulit batang
y = 0,8295x + 7,2727 50 = 0,8295x + 7,2727 42,73 = 0,8295x
x = 51,51 ppm
IC50untuk kulit batang adalah 51,51 ppm
(Absorbansi blanko-absorbansi sampel) Absorbansi blanko
SILVIA HANDAYANI. C34080083. Kandungan Flavonoid Kulit Batang dan Daun Pohon Api-api (Avicennia marina (Forks.)Vierh.) sebagai Senyawa Aktif Antioksidan. Dibimbing oleh NURJANAH dan RUDDY SUWANDI.
Api-api merupakan tumbuhan yang banyak dimanfaatkan oleh masyarakat untuk makanan maupun obat-obatan, tanaman ini diambil dari Pantai Ekowisata Mangrove, Pantai Kapuk, Muara Karang, Jakarta Utara. Tujuan dilakukannya penelitian ini adalah untuk menentukan komponen bioaktif, kadar flavonoid total, dan aktivitas antioksidan daun dan kulit batang pohon api-api. Pengujian yang dilakukan meliputi ekstraksi komponen bioaktif, analisis proksimat, uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH, uji kadar flavonoid total dan uji fitokimia.
Bobot kering daun pohon api-api mengandung air 69,2 %, abu 14,91 %, protein 11,04 %, dan lemak 2,21 %. Bobot kering kulit batang pohon api-api mengandung air 55 %, abu 9,6 %, protein 6,4 %, dan lemak 1,55 %. Ekstrak kasar daun mengandung senyawa bioaktif alkaloid, steroid/triterpenoid, flavonoid, dan tanin. Ekstrak kasar kulit batang mengandung steroid/triterpenoid, flavonoid, fenol hidrokuinon, dan tanin. Kadar flavonoid total daun 1,18 % dan kulit batang 0,67 %. Nilai IC50ekstrak daun pohon api-api sebesar 36,35 ppm dan ekstrak kulit batang pohon api-api sebesar 51,51 ppm. Adanya kandungan flavonoid yang tinggi pada daun api-api serta nilai IC50yang rendah, menunjukkan bahwa daun api-api memiliki aktivitas antioksidan yang cukup kuat bila dibandingkan dengan kulit batang api-api. Hal tersebut membuktikan bahwa daun api-api dapat digunakan sebagai antioksidan dan menjadi antioksidan pengganti BHT, karena sama-sama memiliki aktivitas antioksidan yang kuat (<50 ppm).