Saran - SIMPULAN DAN SARAN - Detoksifikasi Bungkil Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) dan Ev

V. SIMPULAN DAN SARAN

5.2. Saran

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk meningkatkan taraf BBJP dalam ransum sehingga dapat menjadi pakan ternak seutuhnya.

34 DAFTAR PUSTAKA

Aderibigbe, A. O., Johnson, C. O. L. E., Makkar, H. P. S. and Beckerm K. 1997. Chemical composition and effect of heat on organic matter and nitrogen degradability and some antinutritional components of Jatropha meal. Anim. Feed Sci. Technol. 67, 223-243. Afriyanti, M. 2008. Fermentabilitas Dan Kecernaan In Vitro Ransum yang Diberi Kursin Bungkil

Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Pada Ternak Sapi Dan Kerbau. [Skripsi]. Bogor: Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor.

Ahmed, W.A and Salimon, J. 2009. Phorbol Ester as a Toxic Constituents of Tropical Jatropha curcas Seed Oil. European Journal of Scientific Research. Vol.31 No.3 (2009), pp.429-436.

Aitken, A. 1986. The biochemical mechanism of action of phorbol esters. Di dalam: Evan, F.J. (Ed.), Naturally Occuring Phorbol Esters.

Alamsyah, A.N. 2006. Yang beracun, yang berfaedah. http://groups.yahoo.com/group/agromania [30 Mei 2010]

Anggorodi, R. 1984. Ilmu makanan ternak umum. PT Gramedia, Jakarta.

Aregheore, E. M., Makkar, H. P. S. and Becker, K., 1998. Assessment of lectin activity in a toxic and a non-toxic variety of Jatropha curcas using latex agglutination and haemagglutination methods and inactivation of lectin by heat treatments. J. Sci. Food Agric. 77, 349-352

Aregheore, E.M., Becker, K., Makkar, H.P.S. 2003. Detoxification of a toxic variety of Jatropha curcas using heat and chemical treatments, and preliminary nutritional evaluation with rats. S. Pac. J. Nat. Sci. 21, 50-56.

Arora, S.P. 1989. Pencernaan Mikroba pada Ruminansia. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta.

Blakely, J. and H. E. David. 1991. Ilmu Peternakan 4^thEd. Gajah Mada University, Yogyakarta. Chotimah, D. C. 2002. Kecernaan bahan kering, bahan organik dan protein kasar ransum yang

mengandung ampas teh pada kelinci persilangan lepas sapih. [Skripsi]. Bogor: Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor.

Church, D.C. 1979. Livestock Feed and Feeding. Printed by Durham and Doroney, Inc. 711 S.W. 14^th Avenue. Portland, Oregon 97205

Dasril, R. 2006. Pengaruh Pemberian Zeolit Dalam Ransum Terhadap Performans Mencit (Mus musculus) Lepas Sapih.[Skripsi]. Bogor: Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor. Endra, Y. 2006. Analisis Proksimat dan Komposisi Asam Amino Buah Pisang Batu (Musa

balbisiana Colla).[Skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor

Fajariah, N. 2007. Uji Biologis Bungkil Biji Jarak Pagar (Jatropha Curcas L.) Terdetoksifikasi Menggunakan Mencit (Mus musculus) Sebagai Hewan Coba.[Skripsi]. Bogor: Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor.

Farhanuddin. 2009. Pengaruh Pemberian Bungkil Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Terfermentasi Rhizopus oligosporus dalam Ransum Terhadap Performa Broiler. [Skripsi]. Bogor: Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor.

35

Gultom, C. 2008. Evaluasi in vitro Bungkil Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) produk detoksifikasi perlakuan kombinasi pemanasan dengan larutan basa. [Skripsi]. Bogor: Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor.

Haas, W., H., Sterk, and M. Mittelbach, 2002. “Novel 12-Deoxy-16-hydroxyphorbol Diesters Isolated from the Seed Oil of Jatropha curcas” J. Natural Product. 65: 1334-1440. Hadriyanah. 2008. Respon Konsumsi Dan Efisiensi Penggunaan Ransum Pada Mencit (Mus

musculus) Terhadap Pemberian Bungkil Biji Jarak Pagar (Jatropha Curcas L.) Yang Didetoksifikasi.[Skripsi]. Bogor: Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor. Hambali, E., A. Suryani,Dadang, Hariyadi, H. Hanafie, I.K. Reksowardjojo, M. Rivai, M. Ihsanur,

P. Suryadarma, S. Tjitrosemito, T.H. Soerawidjaja, T. Prawitasari, T. Prakoso dan W. Purnama. 2006. Jarak Pagar Tanaman Penghasil Biodiesel. Penerbit Penebar Swadaya, Jakarta.

Hasnam. 2007. Status perbaikan dan penyediaan bahan tanaman jarak pagar (Jatropha curcas L.). Prosiding Lokakarya II : Status Teknologi Tanaman Jarak Pagar, (Jatropha curcas L.), 7-16. Bogor, 29 November 2006. Pusat Penelitian dan Pengembangan Perkebunan. Heller, J. 1996. Physic nut. Jatropha curcas L. Promoting the conservation and use of

underutilized and neglected crops 1. Institute of Plant Generics and Crop Plant Research, Gatersleben/International Plant genetic Resources Institute, Rome.

Herman, R. 2003. Budidaya ternak ruminansia kecil. Fakultas Peternakan. Institut Pertanian Bogor. Bogor.

Hungate, R.E. 1996. The Rumen and its Microbes. New York: Academic press.

Juniastica. 2008. Fermentabilitas Ransum Ternak Ruminansia Besar yang Diberi Ekstrak Curcin

Bungkil Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas L.).[Skripsi]. Fakultas Peternakan. Institut Pertanian Bogor. Bogor.

Mahajati, R. 2008. Efektivitas bungkil biji jarak pagar (Jatropha curcas L.) yang difermentasi berbagai jenis kapang sebagai pakan mencit (Mus musculus).[Skripsi]. Bogor : Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor.

Makkar, H.P.S., A.O. Aderibigbe, and K.Becker. 1998. Comparative evaluation of non-toxic and toxic varieties of Jatropha curcas for chemical composition, digestibility, protein degradability and toxic factors. Food Chemistry. 62(2) : 207-215.

Makkar, H. P. S. and K. Becker. 1997. Potential of Jatropha curcas seed meal as a protein suplement to live stock feed, constraints to its utilization and possible strategies to overcome constraints. Symposium jatropha 97. Australian ministry of foreign affairs, Managua.

Makkar, H.P.S and K. Becker. 2009. Review Article : Jatropha curcas, a promising crop for the generation of biodiesel and value-added coproducts. Eur. J. Lipid Sci. Technol. 2009, 111, 773–787

McDonald, P.R., A. Edwards, J.F.D.Greenhalg and C.A. Morgan. 2002. Animal Nutrition 6^th Edition. LongmanScientific and Technical Co. Published in the United State with John Willey and Sons Inc., New York.

McNamara, J. P. 2006. Principles of Companion Animal Nutrition. Pearson education. Upper Saddle River, New Jersey.

Moriwaki , K., T. Shirosi and H. Yonekawa. 1994. Genetic in Wild Mice. Its Application to Biomedical Research. Tokyo: Japan societies press, Karger.

Mumpton, F.A. and P.H. Fishman 1977. The Application of Natural Zeolites in animal Science and aquaculture.J. Anim. Sci. 45 (5): 1188-1203.

36

Nanholy, P. C. 2010. Dosis Toksik Dari Ekstrak dan Residu Bungkil Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Menggunakan Pelarut Metanol pada Mencit (Mus musculus).[Skripsi]. Bogor : Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor.

Pambudi, A. N. 2008. Potensi Jarak Pagar Sebagai Tanaman Energi Di Indonesia.

http://www.chem-is-try.org. [13 Mei 2010]

Panda, R. 2007. Pengaruh Taraf Penambahan Zeolit Dalam Ransum Terhadap Performa Produksi sMencit (Mus musculus) Lepas Sapih Hasil Litter Size Pertama.[Skripsi]. Bogor : Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor.

Parakkasi, A. 1999. Ilmu Nutrisi Dan Makanan Ternak Ruminan. Universitas Indonesia Press, Jakarta.

Pratiwi, A. S. 2010. Respon Tikus Putih (Rattus novergicus) Yang Dikontaminasi Radikal Bebas Terhadap Pemberian Tepung Delima (Punica granatum L.) sebagai Sumber Antioksidan.[Skripsi]. Fakultas Peternakan. Institut Pertanian Bogor. Bogor.

Priyanto, U. 2007. Menghasilkan Biodiesel Jarak Pagar Berkualitas. Agromedia Pustaka, Jakarta. Putra, S. 2009. Detoksifikasi Bungkil Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) dengan Pelarut

Organik dan Gelombang Mikro.[Skripsi]. Bogor: Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor.

Rug, M., F. Sporer, M. Wink, S. Y. Liu, R. Henning and A. Ruppel. 2006. Molluscicidal of

Jatropha curcas against vector snails of the human parasites Schistosoma mansoni and S. Japonicum.

Schuler, L. 2006. Model animals and quantitative genetics. Makalah kuliah umum. Fakultas peternakan IPB, Bogor.

Smith, J. B. dan S. Mangkuwidjojo. 1988. Pemeliharaan, Pembiakan dan Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis. Jakarta: UI Press.

Soeharsono. 1978. Petunjuk Praktikum Biokimia. PAU Pangan dan Gizi, UGM Yogyakarta Soejono, M. dan K. A. Santoso. 1990. Pemanfaatan zeolit di bidang peternakan. Makalah seminar

Zeo Agroindustri. Panghegar, Bandung.

Sumartini, S. dan Kartasubrata J. 1992. Analisis Proksimat 1 dan 2. Kursus teknik kimia pangan, bandung 13-21 Januari 1992

Suparjo. 2008. Evaluasi pakan secara in vivo http://jajo66.files.wordpress.com [2 Agustus 2010] Sutardi, T. 1979. Ketahanan protein bahan makanan terhadap degradasi oleh mikroba rumen dan

manfaatnya bagi peningkatan produktivitas ternak. Proceeding seminar dan penunjang peternakan, Lembaga Penelitian Peternakan, Bogor.

Sutardi, T. 1980. Landasan Ilmu Nutrisi I. Fakultas Peternakan, IPB Bogor

Sutarti, M. dan M. Rachmawati. 1994. Zeolit. Pusat Dokumentasi dan Informasi Ilmiah. Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia, jakarta.

Storer, T.I., R. L. Usinger, R.C. Stebbins and J.W. Nybaken. 1979. General Zoology 6^th edition. McGraw Hill Book Company, New York.

Tanuwiria, U. H. 1994. Penggunaan zeolit dan arang batok dalam ransum terhadap prestasi produksi dan kondisi hati serta usus halus itik mojosari jantan.[Tesis]. Bogor: Program pascasarjana, IPB.

37

Tilley, J. M. A. and R. A. Terry. 1963. A two stage technique for the in-vitro digestion of forage crops. Journal of British Grassland Soc. 18: 104-111.

Trabi, M., G. M. Gubitz, W. Steiner and N. Foil. 1997. Fermentation of Jatropha curcas seeds and press cake with Rhyzopus oryzae. Dalam: Gubitz, G. M.,; Mittelbach 2002 M.; Biofuel and Industrial Product from Jatropha curcas. DBV-Verlag, Graz.

Wahju. 1997. Ilmu Nutrisi Unggas. Gajah Mada University Press, Yogyakarta.

Wardoyo, W. 2007. Pengaruh Taraf Penggunaan Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) dalam Ransum Terhadap Penampilan Reproduksi (Mus musculus).[Skripsi]. Bogor : Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor.

Winarno, F.G. 2008. Kimia Pangan dan Gizi. PT. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.

Wulandari, L. D. 2007. Detoksifikasi dan uji toksisitas akut limbah bungkil biji jarak pagar terhadap tikus putih.[Skripsi]. Fakultas matematika dan ilmu pengetahuan alam.

38

LAMPIRAN

39 Lampiran 1. Prosedur uji analisis proksimat

1. Kadar Air (SNI 01-2891-1992)

Sampel ditimbang dengan seksama sebanyak 1 – 2 gram pada sebuah botol timbang bertutup yang sudah diketahui bobotnya. Sampel dikeringkan dalam oven suhu 105°C selama 3 jam. Kemudian sampel didinginkan dalam desikator. Lalu sampel ditimbang. Pekerjaan diulangi hingga diperoleh bobot tetap.

Perhitungan:

Kadar air = w1 – w2 x 100% w1

w1 = bobot sampel awal, dalam gram

w2 = bobot sampel akhir setelah dikeringkan, dalam gram 2. Kadar Abu (SNI 01-2891-1992)

Sampel ditimbang dengan seksama sebanyak 2 – 3 gram contoh ke dalam sebuah cawan porselen (atau platina) yang telah diketahui bobotnya. Untuk contoh cairan, sampel diuapkan di atas penangas air sampai kering. Kemudian diarangkan di atas nyala pembakar, lalu abukan dalam tanur listrik pada suhu maksimum 550°C sampai pengabuan sempurna (sekali-kali pintu tanur dibuka seedikit, agar oksigen bisa masuk). Lalu dinginkan dalam eksikator, kemudian timbang hingga diperoleh bobot tetap.

Perhitungan:

Kadar Abu = W1 – W2 x 100%

W = bobot contoh sebelum diabukan (gram)

W1 = bobot contoh + cawan sesudah diabukan (gram) W2 = bobot cawan kosong (gram)

3. Kadar Lemak (SNI 01-2891-1992),

Sampel ditimbang dengan seksama sebanyak 1 – 2 gram, lalu dimasukkan ke dalam selongsong kertas yang dialasi dengan kapas. Selongsong kertas berisi contoh disumbat dengan kapas, dikeringkan dalam oven pada suhu tidak lebih dari 80°C selama lebih kurang satu jam, kemudian dimasukkan ke dalam alat Soxhlet yang telah dihubungkan dengan labu lemak berisi batu didih yang telah dihubungkan dengan labu lemak berisi batu didih yang telah dikeringkan dan telah diketahui bobotnya. Ekstrak dengan heksana atau pelarut lemak lainnya selama lebih kurang 6 jam. Sulingkan heksana dan keringkan ekstrak lemak dalam oven pengering pada suhu 105°C. Dinginkan dan timbang. Pengeringan diulangi hingga tercapai bobot tetap.

% Lemak = W2 – W1 x 100% W Keterangan : W = bobot contoh (gram)

W1 = bobot labu lemak kosong(gram) W2 = bobot labu lemak dan ekstrak (gram)

40

4. Kadar Serat (SNI 01-2891-1992)

Sebanyak 1 gram sampel dimasukkan ke dalam labu erlenmeyer 300 mL kemudian tambahkan 100 mL H2SO4 0.325 N. Bahan selanjutnya dimasukkan ke dalam otoklaf pada suhu 105⁰C selama 15 menit. Bahan didinginkan, kemudian ditambahkan 50 mL NaOH 1.25N,dimasukkan ke dalam otoklaf pada suhu 105⁰C selama 15 menit. Bahan disaring dengan menggunakan kertas saring yang telah dikeringkan. Setelah iyu, kertas dicuci dengan campuran air panas dan 25 mL aseton atau alkohol. Residu beserta kertas saring dikeringkan dalam oven pada suhu 110⁰C selama 1-2 jam.

Kadar serat (%) = (a-b) x N H2SO4 X 1000 w

Keterangan : a = bobot residu dalam kertas saring yang telah dikeringkan (g) b = bobot kertas saring kosong (g)

w = bobot sampel (g)

5. Kadar Protein (SNI 01-2891-1992)

Pada pengujian kadar protein bungkil biji jarak ini digunakan metode kjeldhal yang dibagi menjadi tiga tahap yaitu:

a) Destruksi

Sampel ditambahkan H2SO4 pekat, sebelum sampel didekstruksi tambahkan campuran selen sebagai katalisator. Selen membantu proses oksidasi dan meningkatkan titik didih H2SO4 sehingga proses ini dapat dipercepat. Proses destruksi dilakukan hingga larutan kehijau-hijaun setelah dipanaskan.

b) Destilasi

Sampel yang telah didekstruksi dibiarkan dingin lalu diencerkan ke labu ukur 100 ml, pipet 5 ml dan masukkan ke labu kjeldhal serta tambahkan beberapa tetes indicator PP, 5 ml NaOH 30%.

c) Titrasi

Destilat dititrasi oleh HCl 0,01 N, titik akhir titrasi ditandai dengan perubahan warna biru menjdi merah muda.

Kadar protein kasar = (b-a) x N x 0.014x 6.25 x 100% w

Keterangan : a = volume H2SO4 untuk titrasi blanko (mL) b = volume H2SO4 untuk titrasi contoh (mL) N = normalitas H2SO4

41 Lampiran 2. Prosedur pembuatan ekstrak phorbol ester

1. Ekstraksi Phorbol Ester dari bungkil jarak (Modifikasi metode Makkar.et.al:1997)

1) Sebanyak 2-5 g bungkil jarak yang telah digiling dimasukkan ke dalam tabung sentrifuse volume 50 ml, ditambah 15 ml methanol (100%) kemudian disonikasi pada 240W selama 3 menit pada suhu dingin dilanjutkan dengan sentrifugasi pada 3000 rpm selama 8 menit pada suhu ruang.

2) Supernatan dipisahkan dan proses ekstraksi diulang dua kali. Supernatan yang dihasilkan digabungkan dan siap dikeringkan.

3) Pelarut metanol dihilangkan menggunakan rotary evaporator pada tekanan vakum dan suhu tidak lebih dari 40^oC.

4) Segera setelah pemisahan pelarut, 2 ml metanol ditambahkan ke dalam labu yang berisi residu kering, labu disonikasi selama 3-4 menit dan cairan dipindahkan ke dalam tabung. Sebanyak 2 ml dan 1 ml metanol dipipet kembali dan ditambahkan ke dalam labu, labu disonikasi kembali dan cairan digabungkan dalam tabung hingga diperoleh 5 ml cairan. 5) Cairan metanol disentrifuse pada 10.000 rpm selama 10 menit.

6) Supernatan yang dihasilkan dilewatkan dalam 0,2 µm teflon atau nylon filter dan didiinjeksi (20 µm) ke dalam HPLC

Kuantifikasi Phorbol Ester dari bungkil jarak Metode Ahmed and Salimon, 2009)

Instrument HPLC dan sistem pelarut yang dapat digunakan untuk kuantifikasi phorbol ester yaitu:

Instrument : HPLC yang digunakan adalah HPLC-Shimadzu dengan Evaporator Light Scattering (ELS) detector dan auto injeksi. Packed C18 Column 5µm X120Å 4.6x250 mm(Germany). Kondisi kerja yang digunakan adalah :

- Suhu 35^oC.

- Mobile phase menggunakan acetone : acetonitril (20:80) - Flow rate 1 ml/min selama 30 menit.

42 Lampiran 3. Prosedur analisis uji in vitro

1. Pengukuran KCBK dan KCBO

• Tabung fermentor yang telah di isi dengan 0.5 gr sampel, di tambahkan 40 ml larutan MC Dougall.

• Tabung di masukan ke dalam shaker bath dengan suhu 39^oC, kemudian diisi cairan rumen 10 ml,tabung di kocok dengan di aliri CO2 selama 30 detik, cek pH ( 6,5 – 6,9 ) dan kemudian di tutup dengan karet berfentilasi, dan di fermentasi selama 48 jam.

• Setelah 48 jam, buka tutup karet tabung fermentor, teteskan 2 -3 tetes HgCl2 untuk membunuh mikroba.

• Masukan tabung fermentor ke dalam centrifuge, lakukan centrifuge dengan kecepatan 4.000rpm selama 10 menit. Substrat akan terpisah menjadi endapan di bagian bawah dan supernatant yang bening berada di bagian atas.

• Supernatan dibuang dan endapan hasil sentrifuge pada kecepatan 4.000 rpm selama 15 menit di tambahkan 50ml larutan pepsin-HCl 0.2%. Campuran ini lalu di inkubasi kembali selama 48 jam tanpa tutup karet.

• Sisa pencernaan di saring dengan kertas saring whatman no 41 ( yang sudah diketahui bobotnya ) dengan bantuan pompa vacum. Endapan yang ada di kertas saring di masukan ke dalam cawan porselen, setelah itu dimasukkan ke dalam oven 105⁰C selama 24 jam.

• Setelah 24 jam, cawan porselen+kertas saring+residu dikeluarkan, dimasukkan kedalam eksikator dan ditimbang untuk mengetahui kadar bahan keringnya.

• Selanjutnya bahan dalam cawan di pijarkan atau di abukan dalam tanur listrik selama 6 jam pada suhu 450 – 600^oC, kemudian ditimbang untuk mengetahui kadar bahan organiknya.

• Sebagai blanko di pakai residu asal fermentasi tanpa bahan pakan.

% KCBK= BK asal – (BK residu – BK blanko) x 100% BK asal

% KCBO= BK asal – (BO residu – BO blanko) x 100% BO asal

Keterangan : KCBK : kecernaan bahan kering

KCBO : kecernaan bahan organik BK : bahan kering

BO : bahan organik

2. Pengukuran konsentrasi NH3 ( Metoda mikrodifusi Conway )

• Bibir cawan Conway dan tutupnya di olesi dengan vaselin,

• Supernatan yang berasal dari proses fermentasi di ambil 1.0 ml kemudian di tempatkan pada salah satu ujung alur cawan Conway,

• Larutan Na2CO3 jenuh sebanyak 1.0 ml di tempatkan pada salah satu ujung cawan Conway bersebelahan dengan supernatant ( tidak boleh campur ),

• Larutan asam borat berindikator sebanyak 1.0 ml di tempatkan dalam cawan kecil yang terletak di tengah cawan Conway,

43

• Cawan conway yang sudah di olesi vaselin di tutup rapat hingga kedap udara, larutan Na2CO3 di campur dengan supernatant hingga merata dengan cara menggoyang – goyangkan dan memiringkan cawan tersebut,

• Setelah itu di biarkan selama 24 jam dalam suhu kamar,

• Setelah 24 jam suhu kamar di buka, asam borat berindikator di titrasi dengan H2SO4 0.005 N sampai terjadi perubahan warna dari biru menjadi merah.

Konsentrasi amonia (mM)= ml H2SO4 x N H2SO4 X 1000

Berat pakan x BK Pakan

Ketengan : BK : bahan kering

3. Pengukuran Konsentrasi VFA ( Steam Destilation Method )

• Isi presscooker dengan aquadest sampai tanda MAX,

• Kemudian pastikan air dari kran mengalir yang berfungsi sebagai pendingin,

• Nyalakan kompor gas, sehingga aquadest yang ada dalam panic presscooker tersebut mendidih dan menghasilkan uap yang akan masuk ke tabung-tabung destilasi, dimana hal ini menandakan bahwa kita bias memulai analisis VFA,

• Supernatan yang sama dengan analisa NH3 di ambil sebanyak 5 ml, kemudian di masukan kedalam tabung destilasi,

• Tempatkan Erlenmeyer yang berisi 5 ml NaOH 0.5 N dibawah selang tampungan.

• 1 ml H2SO4 15% di tambahkan ke tabung destilasi yang sudah ada larutan sampel, kemudian segera tutup penutup kacanya,

• Bilas dengan aquadest secukupnya,

• Uap air panas akan mendesak VFA dan akan terkondensasi dalam pendingin,

• Air yang terbentuk di tampung labu Erlenmeyer yang berisi 5 ml NaOH 0,5N sampai mencapai 300 ml,

• Indikator PP ( Phenol Pthalin ) di tambah sebanyak 2 – 3 tetes dan di titrasi dengan HCl 0,5N sampai warna titrat berubah dari merah menjadi tidak berwarna (bening).

• Catatan : HCl 0,5 N sebagai titrant harus distandarisasi sehingga didapat konsentrasi dengan 4 digit dibelakang koma.

Konsentrasi VFA (mM)= (a-b) x N H2SO4 X 1000 Berat pakan x BK Pakan

Keterangan : a = volume titran blanko (mL) b = volume titran contoh (mL)

44

Lampiran 4. Analisis statistika uji keragaman ANOVA uji lanjut Duncan pada kadar air

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable:Kadar.Air

Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Model 585.785^a 8 73.223 79.664 .000 Anprok 585.785 8 73.223 79.664 .000

Error 7.353 8 .919

Total 593.138 16 a. R Squared = ,988 (Adjusted R Squared = ,975)

Kadar.Air

Uji Lanjut Duncan

Perlakuan N Subset 1 2 3 C 2 2.4700 B 2 3.2900 MB 2 3.4550 MD 2 3.7300 MC 2 6.6950 MA 2 6.9250 A 2 8.1500 8.1500 K 2 9.5350 Sig. .251 .184 .187

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on observed means.

The error term is Mean Square(Error) = ,919.

Lampiran 5. Analisis statistika uji keragaman ANOVA uji lanjut Duncan pada kadar lemak

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable:kadar.lemak

Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Model 2891.415^a 8 361.427 279.941 .000 DETOKSIFIKASI 2891.415 8 361.427 279.941 .000

Error 10.329 8 1.291

Total 2901.743 16 a. R Squared = ,996 (Adjusted R Squared = ,993)

45

kadar.lemak

Uji Lanjut Duncan

Detoksifikasi N Subset 1 2 3 MB 2 2.4600 B 2 2.6500 MA 2 3.6550 MC 2 4.4700 A 2 12.4000 C 2 13.8200 K 2 22.6300 MD 2 23.2900 Sig. .135 .247 .577

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on observed means.

The error term is Mean Square(Error) = 1,291.

Lampiran 6. Analisis statistika uji keragaman ANOVA uji lanjut Duncan pada kadar serat

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable:kadar.serat

Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Model 28928.826^a 8 3616.103 224.449 .000 detoksifikasi 28928.826 8 3616.103 224.449 .000 Error 128.888 8 16.111

Total 29057.714 16 a. R Squared = ,996 (Adjusted R Squared = ,991)

46

kadar.serat

Uji Lanjut Duncan

Detoksifikasi N Subset 1 2 3 C 2 34.93 MD 2 38.38 38.38 K 2 39.12 39.12 \ MB 2 40.67 40.67 B 2 45.11 45.11 45.11 MA 2 45.19 45.19 45.19 A 2 48.48 48.48 MC 2 56.96 Sig. .057 .119 .057

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on observed means.

The error term is Mean Square(Error) = 16,111.

Lampiran 7. Analisis statistika uji keragaman ANOVA uji lanjut Duncan pada kadar protein

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable:PROTEIN

Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Model 7498.191^a 8 937.274 527.188 .000 DETOKSIFIKASI 7498.191 8 937.274 527.188 .000

Error 14.223 8 1.778

Total 7512.414 16 a. R Squared = ,998 (Adjusted R Squared = ,996)

47

PROTEIN

Uji Lanjut Duncan

Detoksifikasi N Subset 1 2 3 4 5 MC 2 4.02 A 2 20.97 MD 2 20.73 20.73 C 2 21.07 21.07 B 2 24.86 24.86 K 2 25.28 MB 2 25.87 MA 2 30.57 Sig. 1.000 .380 .056 .208 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

Based on observed means.

48

Lampiran 8. Analisis statistika uji keragaman ANOVA terhadap kandungan phorbol ester

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable:phorbol ester

Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Model 1.279E6^a 8 159862.748 3.248E3 .000 detoksifikasi 1278901.983 8 159862.748 3.248E3 .000 Error 393.694 8 49.212

Total 1279295.678 16 a. R Squared = 1,000 (Adjusted R Squared = ,999)

phorbol ester

Uji Lanjut Duncan

Detoksifikasi N Subset 1 2 3 4 C 2 .0000 MB 2 .7850 B ₂ _1.0350 MC 2 1.1450 MA ₂ _18.9100 A 2 18.9850 MD 2 73.9200 K 2 7.9578E2 Sig. .881 .992 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on observed means.

49

Lampiran 9. Hasil Kromatogram HPLC

Gambar 11. Kromatogram phorbol ester BBJP perlakuan transesterifikasi dengan pencucian air (A)

Gambar 12. Kromatogram phorbol ester BBJP perlakuan transesterifikasi dengan pencucian heksan (B)

50

Gambar 13. Kromatogram phorbol ester BBJP perlakuan transesterifikasi dengan pencucian metanol (C)

51

Gambar 15. Kromatogram phorbol ester bungkil jarak perlakuan maserasi heksan-metanol + autoklaf (MB)

52

53

Lampiran 10. Hasil analisis statistik dengan ANOVA untuk NH3

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable:NH3

Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Model 8956.273^a 7 1279.468 542.162 .000 detoksifikasi 8956.273 7 1279.468 542.162 .000

Error 16.520 7 2.360

Total 8972.792 14 a. R Squared = ,998 (Adjusted R Squared = ,996)

NH3

Uji Lanjut Duncan

Detoksifikasi N Subset 1 2 3 4 MC 2 17.2500 MD 2 20.6150 20.6150 A 2 23.1900 23.1900 MB 2 26.0900 26.0900 B 2 28.7500 C 2 29.1250 MA 2 29.3650 Sig. .065 .138 .101 .084

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on observed means.

The error term is Mean Square(Error) = 2,360.

Lampiran 11. Hasil analisis statistik dengan ANOVA untuk VFA

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable:VFA

Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Model 60646.000^a 7 8663.714 30.816 .000 DETOKSIFIKASI 60646.000 7 8663.714 30.816 .000 Error 1968.000 7 281.143

Total 62614.000 14 a. R Squared = ,969 (Adjusted R Squared = ,937)

54

VFA

Uji Lanjut Duncan

Detoksifikasi N Subset 1 2 3 A 2 38.5000 MD 2 49.5000 49.5000 MC 2 50.5000 50.5000 50.5000 MA 2 57.5000 57.5000 57.5000 MB 2 67.0000 67.0000 67.0000 B 2 86.0000 86.0000 C 2 93.0000 Sig. .155 .081 .050

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on observed means.

The error term is Mean Square(Error) = 281,143.

Lampiran 12. Hasil analisis statistik dengan ANOVA untuk KCBK

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable:KCBK

Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Model 18837.442^a 7 2691.063 46.522 .000 DETOKSIFIKASI 18837.442 7 2691.063 46.522 .000 Error 404.912 7 57.845

Total 19242.354 14 a. R Squared = ,979 (Adjusted R Squared = ,958)

55

KCBK

Uji Lanjut Duncan

Detoksifikasi N Subset 1 2 MC 2 17.3050 A 2 29.6050 29.6050 MB 2 35.4400 35.4400 B 2 39.4800 MA 2 39.6450 C 2 42.7950 MD 2 45.0000 Sig. .056 .101

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on observed means.

The error term is Mean Square(Error) = 57,845.

Lampiran 13. Hasil analisis statistik dengan ANOVA untuk KCBO

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable:KCBO

Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Model 20149.079^a 7 2878.440 83.037 .000 Detoksifikasi 20149.079 7 2878.440 83.037 .000 Error 242.652 7 34.665

Total 20391.731 14 a. R Squared = ,988 (Adjusted R Squared = ,976)

56

KCBO

Uji Lanjut Duncan

Detoksifikasi N Subset 1 2 MC 2 21.0750 A 2 31.5750 31.5750 MB 2 36.5650 MA 2 38.6450 B 2 39.7000 C 2 45.5250 MD 2 46.4150 Sig. .118 .052

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on observed means.

The error term is Mean Square(Error) = 34,665.

Lampiran 14. Kadar proksimat standar pakan untuk beberapa hewan ternak

parameter

SNI 3148.3:2009 SNI 3148.5:2009 SNI 3148.1:2009 SNI 3148.2:2009 ayam petelur (%)

ayam ras pedaging

(%) sapi perah dara (%)

sapi potong induk (%) air maks 14 maks 14 maks 14 maks 14 abu maks 35 maks 5 maks 10 maks 12 Lemak maks 5 3,0-8,0 maks 7 maks 6 Protein min 30 min 36 min 15 min 6 serat maks 8 maks 8 maks 30 maks 35

Lampiran 15. ANOVA Konsumsi Segar Ransum

SK db JK KT Fhit F0.05 F0.01

Perlakuan 4 793.72 198.43 8.15* 2.87 4.43

Error 20 486.89 24.34

Dalam dokumen Detoksifikasi Bungkil Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) dan Evaluasinya Secara in vitro dan in vivo terhadap Mencit (Mus musculus) (Halaman 46-140)