Saran - Penetapan Kadar Fenolik Total dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Bunga Telang (Clito

BAB V KESIMPULAN

B. Saran

1. Perlu dilakukan optimasi suhu metode ekstraksi dengan sokletasi terhadap kandungan senyawa fenolik pada bunga telang.

2. Perlu dilakukan pengujian kandungan fenolik total dan aktivitas antioksidan menggunakan metode lain seperti metode perkolasi.

DAFTAR PUSTAKA

Adawiah, Sukandar D., Muawanah A., 2015. Aktivitas Antioksidan dan Kandungan Komponen Bioaktif Sari Buah Namnam. Jurnal Kimia VALENSI: Jurnal Penelitian dan Pengembangan Ilmu Kimia, 1(2), 130-136.

Adawiah., Sukandar, D., Muawanah. A., 2016. Aktivitas Antioksidan dan Kandungan Komponen Bioaktif Sari Buah Namnam, Jurnal Kimia Valensi: Jurnal Penelitian dan Pengembangan Ilmu Kimia, 1(2), 130-136.

Andriani, D., Murtisiwi, l., 2020. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol 70% Bunga Telang (Clitoria ternatea L) dari Daerah Sleman dengan Metode DPPH.

Jurnal Farmasi Indonesia, 17(1), 70-74.

Anggraito, Y. U., Susanti, R., Sri Iswari, R., Yuniastuti, A., Lisdiana., WH, N., Aini Habibah, N., et al. Harnina Bintari, S., dan Dafip, M., 2018. Metabolit Sekunder Dari Tanaman: Aplikasi Dan Produksi. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Semarang, Semarang, 26-28.

Apriani, S., Ferbina, D.Pratiwi., 2021. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Bunga Telang(Clitoria Ternatea L) Menggunakan Metode DPPH(2,2 Dipheny1 1-1 Pickrydrazyl).Jurnal Ilmiah Kohesi, 5(3), 83-89.

Arnanda, Q, P., Nuwarda, R,F., 2019. Review Article: Penggunaan Radiofarmaka Teknesium-99M Dari Senyawa Glutation Dan Senyawa Flavanoid Sebagai Deteksi Dini Radikal Bebas Pemicu Kanker. Farmaka 238, 17(2), 236-243.

Budiasih, K, S., 2017. Kajian Potensi Farmakologis Bunga (Clitoria ternatea). Jurdik Kimia FMIPA UNY, 201-206.

Blainski, A., Cristiny G., dan de Mello J., 2013, Application and Analysis of the Folin Ciocalteu Method for the Determination of The Total Phenolic Content from Limonium Brasiliense L., J. Mdpi Molecules., 18 (6855).

Cahayaningsi, E., Sandhi, P, E., Santoso, P., 2019. Skrinig Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Bunga Telang (Clitoria ternatea L.) Dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis. Jurnal Ilmiah Medicamento, 5(1), 51-57.

Candra, L, M M., Andayani, Y., Wirasisya, D, G., 2021. Pengaruh Metode Ekstraksi Terhadap Kandungan Fenolik Total Dan Flavonoid Total Pada Ekstrak Etanol Buncis (Phaseolus vulgaris L.). Jurnal Pijar MIPA, 16(3), 400.

Christalina, I.,Susanto, T. E., Ayucitra, A., Setiyadi., 2017. Aktivitas Antioksidan Dan Antibakteri Alami Ekstrak Fenolik Biji Pepaya. Jurusan Teknik Kimia, 18-25.

Dahlan, 2012, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan, Salemba Medika, Jakarta, hal.17.

Dephour, A. A., Ebrahimzadeh, M. A., Fazel, N. S., Mohamad, N. S., 2009.

Antioxidant Activity of Methanol Extract of Ferula Assafoetida and Its Essential Oil Composition. Grasas Aceites, 60(4), 405-412.

Dos Santos, S, X., Mazo, L.H., dan Cavalheiro, E.T., 2008, The Use Ogf a Graphite-Silicone Rubber Composite Electrode in The Determination of Rutin in Pharmaceutical Formulation, J. Braz, Chem, Soc., 19(8), 1603.

Dwimayasanti, R., 2018. Rumout Laut : Antioksidan Alami Penangkal Radikal Bebas.

Oseana,XLIII (2), 13 – 23.

Endang Christine Purba., 2020. Kembang Telang (Clitoria ternatea L.): Pemanfaatan dan Bioaktivitas. Jurnal EduMatSains, 4 (2), 111-124.

Fajriaty I., Harianto., Andres., Setyaningrum R., 2018. Skrining Fitokimia Dan Analisis Kromatografi Lapis Tipis Dari Ekstrak Etanol Daun Bintangur (Calophyllum soulattri Burm. F.). Jurnal Pendidikan dan Sains, 7(1), 58-64.

Fakhruzy.,Kasim, A., Asben, A., Anwar, A., Review: Optimalisasi Metode Maserasi Untuk Ekstraksi Tanin Rendemen. Menara Ilmu, XIV(02), 38-39.

Forestryana D., Arnida., 2020. Phytochemical Screenings And Thin Layer Chromatography Analysis Of Ethanol EXT. Jurnal Ilmiah Farmako Bahari, 11(2), 120.

Gupta , K, G., Chahal, J., Bhatia, M., 2010. Clitoria ternatea (L.): Old and new aspects.

journal of Pharmacy Research. 3(11),2610-2614.

Handito, D., Basuki, E., Saloko, S., Gita, D, L., Triani, E., 2022. Analisis Komposisi Bunga Telang (Clitoria Ternatea) Sebagai Aantioksidan Alami Pada Produk Pangan. Journal Prosiding Saintek. 4, 62.

Hayati, E. K., Halimah, N., 2010. Phytochemical Test and Brine Shrimp Lethality Test AgainstArtemia salina Leach of Anting-Anting (acalypha indica Linn.) Plant Extract. ALCHEMY, 1 (2), 55-103.

ITIS, 2022, Standart Report Page: Clitoria ternatae L., https://www.itis.gov/servlet/SingleRpt/SingleRpt?search_topic=TSN&sea rch_value=26543#null,diakses pada tanggal , 24 maret 2022.

Khadijah., Muchsin Jayali, A., Umar, U., Sasmita, L., 2017. Penentuan Total Fenolik Dan Atifitas Antioksidan Ekstrak Daun Samama (Anthocephalus macrophylus) Asal Ternate, Maluku Utara. Jurnal Kimia Mulawarman, 15(1), 15.

Koirewoa Y A., Fatimawali., Wiyono W I., 2012. Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Flavonoid Dalam Daun Beluntas (Pluchea Indica L.). Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 47-50.

Kun Sri Budiasih., 2017. Kajian Potensi Farmakologis Bunga Telang. Jurdik Kimia FMIPA UNY, 201-206.

Kurniawan, E, Y., 2014. Penetapan Kandungan Fenolik Total Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dengan Metode (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) Ekstrak Metanolik Akar Apu-Apu (Pistia stratiotes L.). Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

Lisa Angriani., 2019. The Potential Of Ekstract Butterfly Pea Flower (Clitoria Ternatea L.) As A Local Natural Dye For Various Food Industry. Journal Cancera.

2(1), 34.

Mariani, S., Rahman, N., Supriadi., 2018. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Buah (Citrullus lanatus). J. Akademika Kim, 7(2), 96-101.

Markham, K., et al., 1988. Techniques of Flavonoid Indentification, diterjemahkan oleh Padmawinata, K., Penerbit ITB, Bandung, hal. 15.

Markham, K.R., 1988, Techniques of Flavonoid Identification, diterjemahkan oleh Padmawinata, K., Penerbit ITB, Bandung, hal. 15.

Marliana, S. D., Suryanti, V., Suyono., 2005. Skrining Fitokimia dan Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam (sechium edule Jacq. Swartz.) dalam Ekstrak Etanol, Biofarmasi, 3 (1), 26-31.

Molyneux, P., 2004, The Use of The Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity, Songklanakarin J.Sci.Technol, 26 (2), 211-219.

Mukhriani., 2014. Ekstraksi, Pemisahan Senyawa Dan Indentifikasi Senyawa Aktif.

Jurnal Kesehatan, VII (2), 362-363.

Neelamma, G., Swamy, B, D., Dhamodaran, P., 2016. Perspektif Farmakognostik, Fitokimia dan Farmakologis Klitoria ternatea L. JCTP, 4(3): 159–165.

Nofita D., Nofita S., Mardiah H., 2020. Penentuan Fenolik Total dan Flavonoid Ekstrak Etanol Kulit Batang Matoa (Pometia pinnata J.R& G.Forst) secara Spektrofotometri. Chimica et Natura Acta, 8(1), 39.

Nunes, XP., et al., 2012, Biological Oxidation and Antioxidant Activity of Natural Products, University Federal Sao Fransisco, Brazil, pp. 1-20.

Paonganan A, O., Vifta R, L., 2022. Determination of Sun Protecting Factor (SPF) from Purified Extract of Telang Flowers (Clitoria Ternatea L.) as Natural Sunscreen. Indonesian Journal of Pharmacy and Natural Product. 5(2), 155.

Prasetyo, E., Kharomah, N. Z. W., Rahayu, T. P., 2021. Uji Aktivitas Antioksidan Menggunakan Metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) Terhadap Ekstrak Etanol Kulit Buah Durian (Durio zibethinnus L.) dari Desa Alasmalang Kabupaten Banyumas. Jurnal Pharmascience, 8(1),75-82.

Prasetyo, E., Kharomah, N. Z. W., Rahayu, T. P., Uji Aktivitas Antioksidan Menggunakan Metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) Terhadap Ekstrak Etanol Kulit Buah Durian (Durio zibethinnus L.) dari Desa Alasmalang Kabupaten Banyumas. Jurnal Pharmascience, 8(1): 77.

Purba, E, C., 2020. Kembang Telang (Clitoria ternatea L.): Pemanfaatan dan Bioaktivitas. Jurnal EduMatSains, 4(2), 111-124.

Puspitasari, L., Swastini, D. A., Arisanti, C. I. A., 2013. Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol 95% Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.) Jurnal Farmasi Udayana, 1-5.

Rachman, F. P. A. P., Goejantoro, R., dan Hayati, M. N., 2018. Penentuan Jumlah Replikasi Bootstrap Menggunakan Metode Pretest pada Independent Sampel T Test (Pendapatan Asli Daerah Kabupaten/Kota di Provinsi Kalimantan Timur dan Kalimantan Utara Tahun 2015). Jurnal Eksponensial, 9(1), 25-40.

Rahman A., Taufiqurrahman I., Edyson., 2017. Perbedaan Total Flavanoid Antara Metode Maserasi Dengan Sokletasi Ekstrak Daun Ramania (Bouea macrophylla Griff). Jurnal Kedokteran Gogo, 1(1), 25-26.

Ramla., Lisa P., Nurbaeti S T., 2019. Uji Kualitatif Senyawa Flavonoid Ekstrak Etil Asetat Daun Senggani (Melastoma malabathricum L.). Jurnal Mahasiswa Farmasi Fakultas Kedokteran UNTA, 4(1), 3.

Ridwanuloh D., Syarif F., 2019. Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Flavonoid Dari Batang Ciplukan (Physalis Angulata L.). Prodi Farmasi Fakultas Teknologi dan Ilmu Komputer Universitas Buana Perjuangan Karawang, 292-293.

Rollando., Eva, M., 2018. Penetapan Kandungan Fenolik Total Dan Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Air Ekstrak Metanol Kulit Batang Faloak (Sterculia Quadrifrida R.BR). Scientia, 8(1), 29 – 36.

Romadanu., Rachmawati S H., Lestari S D., 2014. Pengujian Aktivitas Antioks Idan Ekstrak Bunga Lotus (Nelumbo Nucifera). Jurnal FishtecH, 3(1), 4.

Romadanu., Rachmawati, H. S., Lestari, S. D., 2014. Pengujian Aktivitas Antioks Idan Ekstrak Bunga Lotus (Nelumbo nucifera). Fakultas Pertanian Universitas Sriwijaya, 3(1), 1-7.

Rosita, J. M., Taufiqurrahman, I., Edyson., 2017. Perbedaan Total Flavanoid Antara Metode Maserasi Dengan Sokletasi Pada Ekstrak Daun Binjai (Mangifera caesia). Dentin (Jur. Ked. Gigi), 1(1), 100 – 105.

Rumoro J D. ,Sudew S., Siamp J P. 2019. Analisis Total Fenolik Daun Gedi Hijau (Abelmoschus Manihot L.) Dengan Menggunakan Spektroskopi FTIR Dan Kemometrik. Pharmacon, 8(3), 762.

Saragih, D. E , Arsita, E. V., 2019. Kandungan fitokimia Zanthoxylum acanthopodium dan potensinya sebagai tanaman obat di wilayah Toba Samosir dan Tapanuli Utara, Sumatera Utara. Pros Sem Nas Masy Biodiv Indon, 5(1), 71-76.

Shabur, J, T., 2019. Fitokimia: Tinjauan Metabolit Sekunder dan Skrining Fitokimia.

Universita Islam Indonesia, Yogyakarta, 36-42.

Simanjuntak, E., Zulham., 2020. Superoksida Dismutase (SOD) Dan Radikal Bebas.

Jurnal Keperawatan dan Fisioterapi (JKF), 2(2), 124-127.

Sivaci, A.,Duman, S., 2014, Evaluation of Seasonal Antioxidant Activity and Total Phenolic Compounds in Stems and Leaves of Some Almond (Prunus amygdalus L.) Varieties, Biological Research, 47 (9), 1-5.

Suhendra, C.P., Widarta, I.W.R., and Wiadnyani, A.A.I.S., 2019. Pengaruh Konsentrasi Etanol Terhadap Aktivitas Antioksidan Ekstrak Rimpang Ilalang (Imperata Cylindrica (L) Beauv.) Pada Ekstraksi Menggunakan Gelombang Ultrasonik. Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan, Vol 8 (1), 27-35.

Tensiska., Nurhadi, B., Wulandari, E., Ratri, Y. A .L., 2020. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Dedak Hanjeli (Coix Lachryma-Jobi L.) Dengan Beberapa Jenis Pelarut. Jurnal Agroindustri, 10 (1), 1-11.

Usmadi., 2020. Pengujian Persyaratan Analisis (Uji Homogenitas dan Uji Normalitas). Inovasi Pendidikan, 7(1), 50-62.

Verawati., Nofiandi, D., Petmawati., 2017. Pengaruh Metode Ekstraksi Terhadap Kadar Fenolat Total Dan Aktivitas Antioksidan Daun Salam (Syzygium polyanthum (Wight) Walp.). Jurnal Katalisator, 2(2), 53-60.

Verrmeris, W., Nicholson, R. L., 2008. Phenolic Compound Biochemistry Spinger, USA, 2-4.

Winarsi, H., 2007, Antioksidan Alami dan Radikal Bebas, Potensi dan Aplikasinya dalam Kesehatan, Kanisius, Yogyakarta, pp. 20-21.

LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat hasil determinasi tanaman

676

Lampiran 2. Gambar bunga telang dikebun obat Universitas Sanata Dharma Yogyakarta

Lampiran 3. Ekstrak etanol bunga telang

Lampiran 4. Foto hasil uji pendahuluan a. Uji Fenolik

b. Uji Antioksidan

Lampiran 5. Foto hasil uji KLT ekstrak

Lampiran 5. Perhitungan rendemen ekstrak etanol bunga telang

% Rendemen = Berat Ekstrak Total

𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑆𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙𝑥100%

= 162 ,4007 g

120 𝑔 𝑥100%

= 135,33%

Lampiran 7. Data perhitungan fase gerak KLT & Perhitungan Nilai Rf

Perhitungan Fase Gerak

Fase Gerak = n-butanol : asam asetat : air

= 3 : 1 : 1

N-butanol =³

5𝑥20 = 12 ml Asam asetat = ¹

5𝑥20 = 4 ml

Air = ¹

5𝑥20 = 4 ml

Perhitungan nilai Rf untuk uji kandungan fenolik total

Rf = 𝐽𝑎𝑟𝑎𝑘 𝑇𝑒𝑚𝑝𝑢ℎ 𝐵𝑒𝑟𝑐𝑎𝑘 𝐽𝑎𝑟𝑎𝑘 𝑇𝑒𝑚𝑝𝑢ℎ 𝐸𝑙𝑢𝑒𝑛

Jarak tempuh eluen = 13 cm Asam Galat =^{9,8 𝑐𝑚}

13 𝑐𝑚 = 0,7 Rutin = ^{6 𝑐𝑚}

13 𝑐𝑚 = 0,4 Sampel = ^{11,5 𝑐𝑚}

13 𝑐𝑚 = 0,8

Lampiran 6. Data penimbangan untuk penetapan kadar fenolik total Data penimbangan asam galat

Replikasi1 (g) Replikasi2 (g) Replikasi3 (g)

Berat kertas 0,4059 0,3967 0,4031

Berat kertas+asam galat

0,4159 0,4067 0,4131

Berat kertas+sisa 0,4060 0,3968 0,4031

Berat asam galat 0,0100 0,0100 0,0100

Data penimbangan natrium karbonat

Replikasi1 (g) Replikasi2 (g) Replikasi3 (g)

Beratkertas 0,4081 0,4099 0,4121

Berat kertas + natriumkarbonat

5,7081 5,7099 5,7121

Beratkertas+sisa 0,4081 0,4099 0,4124

Berat natrium karbonat

5,3000 5,3000 5,3000

Data penimbangan ekstrak etanol bunga telang

Lampiran 7. Data optimasi penetapan kandungan fenolik total Penentuan operating time (OT) rutin

Waktu (menit)

Absorbansi konsentrasi 10

µg/mL

Absorbansi konsentrasi 20

µg/mL

Absorbansi konsentrasi30

µg/mL

5 0.205 0.406 0.603

10 0.243 0.457 0.688

15 0.247 0.518 0.679

20 0.235 0.495 0.698

25 0.236 0.478 0.714

30 0.239 0.482 0.724

35 0.241 0.490 0.731

40 0.244 0.500 0.736

45 0.247 0.510 0.745

50 0.249 0.517 0.754

55 0.251 0.525 0.761

Replikasi1 (g) Replikasi2 (g) Replikasi3 (g)

Beratkacaarloji 11,2448 14,0723 13,6831

Beratkacaarloji+

ekstrak

11,4950 14,3232 13,9337

Beratkacaarloji+

sisa

11,2464 14,0753 13,6852

Beratekstrak 0,2500 0,2500 0,2500

60 0.253 0.531 0.768 OT yang didapatkan adalah 30 menit

Panjang λ Maksimum rutin Konsentrasi Asam Galat

µg/mL

λ maksimum (nm) λ maksimum (nm)

760.5 0.139

760.5 0.451

741.5 0.450

Spektrum λ maksimum asam galat konsentrasi 20 µg/mL replikasi 1

Spektrum λ maksimum asam galat konsentrasi 20 µg/mL replikasi 2

Spektrum λ maksimum asam galat konsentrasi 20 µg/mL replikasi 3

Lampiran 8. Data penetapan kandungan fenolik total Konsentrasi larutan stok asam galat

Replikasi1

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{1𝑜𝑚𝑔}

10 𝑚𝐿= 1𝑚𝑔/𝑚𝐿=1000µg/mL

Replikasi2

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{1𝑜𝑚𝑔}

10 𝑚𝐿= 1𝑚𝑔/𝑚𝐿=1000µg/mL Replikasi3

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{1𝑜𝑚𝑔}

10 𝑚𝐿= 1𝑚𝑔/𝑚𝐿=1000µg/mL Konsentrasi larutan intermediet C1×V1=C2×V2

1000 µg/mL ×2,5 mL =C2×25 mL C2=100µg/mL

Konsentrasi seri larutan asam galat

Contoh perhitungan konsentrasi seri larutan asam galat replikasi1:

Seri1

C1×V1=C2×V2

100 µg/mL × 1 mL = C2 × 10 mL C2=10 µg/mL

Seri2

C1×V1=C2×V2

100 µg/mL × 1,5 mL = C2 × 10 mL C2=15 µg/mL

Seri3

C1×V1=C2×V2

100 µg/mL × 2 mL = C2 × 10 mL C2=20 µg/mL

Seri4

C1×V1=C2×V2

100 µg/mL × 2,5 mL = C2 × 10 mL C2=25 µg/mL

Seri5

C1×V1=C2×V2

100 µg/mL × 3 mL = C2 × 10 mL C2=30 µg/mL

Perhitungan konsentrasi seri larutan asam galat:

Kurva baku asam galat:

Replikasi Konsentrasi (µg/mL)

Absorbansi Persamaan regresi linear

10 0,233

y=0,022x+ 0,022 r =0,9837

15 0,304

20 0,420

Replikasi C1(µg/mL) V1(mL) C2(µg/mL) V2(mL)

100 1 10 10

100 2 15 10

100 3 20 10

100 4 25 10

100 5 30 10

100 1 10 10

100 2 15 10

100 3 20 10

100 4 25 10

100 5 30 10

100 1 10 10

100 2 15 10

100 3 20 10

100 4 25 10

100 5 30 10

25 0,507

30 0,700

10 0,303

y=0,0025x+ 0,046 r = 0,9898

15 0,428

20 0,505

25 0,708

30 0,788

10 0,229

y=0,028x+ 0,083 r = 0,9790

15 0,364

20 0,438

25 0,589

30 0,834

Konsentrasi natrium karbonat

Konsentrasi larutan natrium karbonat 1 M Molaritas

=1 M ×0,05 L

=0,05 mol

Massa yang ditimbang = mol ×Mr natrium karbonat

=0,05 mol ×106 mol/g

=5,3 g Replikasi 1

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{5,3000 𝑔}

50 𝑚𝐿 = 0,106𝑔/𝑚𝐿=106000 µg/mL Replikasi 2

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{5,3000 𝑔}

50 𝑚𝐿 = 0,106𝑔/𝑚𝐿=106000 µg/mL Replikasi 3

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{5,3000 𝑔}

50 𝑚𝐿 = 0,106𝑔/𝑚𝐿=106000 µg/mL

Persamaan regresi linear yang digunakan adalah y=0,0025x+ 0,046

Penetapan kandungan fenolik total larutan uji Konsentrasi ekstrak etanol bunga telang Konsentrasi stok

Replikasi1

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{250 𝑚𝑔}

10 𝑚𝐿 = 25𝑚𝑔/𝑚𝐿=25000 µg/mL Replikasi2

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{250 𝑚𝑔}

10 𝑚𝐿 = 25𝑚𝑔/𝑚𝐿=25000 µg/mL Replikasi3

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{250 𝑚𝑔}

10 𝑚𝐿 = 25𝑚𝑔/𝑚𝐿=25000 µg/mL Konsentrasi larutan intermediet

Replikasi 1 C1×V1=C2×V2

25,000 µg/mL ×3,6 mL =C2×10 mL C2=9000µg/mL

Replikasi 2 C1×V1=C2×V2

25,000 µg/mL ×3,6 mL =C2×10 mL C2=9000µg/mL

Replikasi 3 C1×V1=C2×V2

25,000 µg/mL ×3,6 mL =C2×10 mL C2=9000µg/mL

Konsentrasi larutan seri Replikasi 1

C1×V1=C2×V2

9000 µg/mL ×2,5 mL =C2×10 mL C2 = 2250 µg/mL

Replikasi 2

C1×V1=C2×V2

9000 µg/mL ×2,5 mL =C2×10 mL C2 = 2250 µg/mL

Replikasi 3 C1×V1=C2×V2

9000 µg/mL ×2,5 mL =C2×10 mL C2 = 2250 µg/mL

Absorbansi ekstrak etanol bunga telang

Replikasi Absorbansi

1 0,384

2 0,304

3 0,353

Konsentrasi ekstrak etanol bunga telang Replikasi 1

Persamaan regresi linear Y = 0,0025x+ 0,046 0,384 =0,0025x+ 0,046 x = 135,2 µg/mL Replikasi 2

Persamaan regresi linear y = 0,0025x+ 0,046 0,304 =0,0025x+ 0,046 x = 103,2 µg/mL Replikasi 3

Persamaan regresi linear y = 0,0025x+ 0,046 0,353 =0,0025x+ 0,046 x =122,8 µg/mL

4. Kandungan fenolik total ekstrak etanol bunga telang Kandungan fenolik total= konsentrasi ekstrak etanol𝑥^{𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒}

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

Replikasi1

Kandungan fenolik total = 0,1352 mg/mL ^{𝟎,𝟓 𝒎𝑳}

𝟎,𝟐𝟓𝟎𝟎 𝒈

=0,270mg ekivalen asam galat per gram ekstrak Replikasi 2

Kandungan fenolik total = 0, 1032 mg/mL ^{𝟎,𝟓 𝒎𝑳}

𝟎,𝟐𝟓𝟎𝟎 𝒈

=0,206 mg ekivalen asam galat per gram ekstrak Replikasi 3

Kandungan fenolik total = 0,1228 mg/mL ^{𝟎,𝟓 𝒎𝑳}

𝟎,𝟐𝟓𝟎𝟎 𝒈

=0,245 mg ekivalen asam galat per gram ekstrak

Replikasi x(µg/mL)

Volume(

mL)

Massa(g) Kandungan

fenoliktotal x± SD %CV

1 2250 0,5 0,2500 0,270 0,2403

±0,0322 13,3999

2 2250 0,5 0,2500 0,206

3 2250 0,5 0,2500 0,245

Lampiran 9. Data penimbangan untuk pengujian aktivitas antioksidan

Penimbangan DPPH

Penimbangan rutin

Penimbangan ekstrak etanol bunga telang hasil sokletasi

Lampiran 10. Data perhitungan konsentrasi DPPH, larutan pembanding dan larutan uji

Replikasi1 (g) Replikasi2 (g) Replikasi3 (g)

Berat kertas 0,4000 0,4042 0,4013

Berat kertas + DPPH

0,4050 0,4092 0,4063

Berat kertas+sisa 0,4000 0,4042 0,4015

Berat DPPH 0,0050 0,0050 0,0050

Replikasi1 (g) Replikasi2 (g) Replikasi3 (g)

Berat kertas 0,4021 0,4019 0,4025

Berat kertas+rutin 0,4071 0,4069 0,4075

Berat kertas+sisa 0,4023 0,4020 0,4025

Berat rutin 0,0050 0,0050 0,0050

Replikasi1 (g) Replikasi2 (g) Replikasi3 (g)

Berat kaca arloji 14,0902 14,3790 14,1203

Berat kaca arloji+

ekstrak

14,3402 14,6290 14,3703

Berat kaca arloji+

sisa

14,0924 14,3801 14,1211

Berat ekstrak 0,2500 0,2500 0,2500

Konsentrasi DPPH

Konsentrasi stok Replikasi 1

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{5 𝑚𝑔}

50 𝑚𝐿= 0,1𝑚𝑔/𝑚𝐿=100µg/mL

Replikasi2

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{5 𝑚𝑔}

50 𝑚𝐿= 0,1𝑚𝑔/𝑚𝐿=100µg/mL Replikasi3

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{5 𝑚𝑔}

50 𝑚𝐿= 0,1𝑚𝑔/𝑚𝐿=100µg/mL

Konsentrasi DPPH yang digunakan Replikasi 1

C1×V1=C2×V2

100 µg/mL ×10 mL =C2×25 mL C2=40µg/mL

Replikasi 2 C1×V1=C2×V2

100 µg/mL ×10 mL =C2×25 mL C2=40µg/mL

Replikasi 3 C1×V1=C2×V2

100 µg/mL ×10 mL =C2×25 mL C2=40µg/mL

Konsentrasi rutin

1. Konsentrasi stok rutin Replikasi 1

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{5 𝑚𝑔}

50 𝑚𝐿= 0,1𝑚𝑔/𝑚𝐿=100µg/mL

Replikasi 2

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{5 𝑚𝑔}

50 𝑚𝐿= 0,1𝑚𝑔/𝑚𝐿=100µg/mL Replikasi 3

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{5 𝑚𝑔}

50 𝑚𝐿= 0,1𝑚𝑔/𝑚𝐿=100µg/mL Konsentrasi seri larutan rutin

Contoh perhitungan konsentrasi seri larutan rutin replikasi 1 Seri1

C1×V1=C2×V2

100 µg/mL × 3 mL = C2 × 10 mL C2=30 µg/mL

Seri2

C1×V1=C2×V2

100 µg/mL × 4 mL = C2 × 10 mL C2=40 µg/mL

Seri3

C1×V1=C2×V2

100 µg/mL × 5 mL = C2 × 10 mL C2=50 µg/mL

Seri4

C1×V1=C2×V2

100 µg/mL × 6 mL = C2 × 10 mL C2=60 µg/mL

Seri7

C1×V1=C2×V2

100 µg/mL × 7 mL = C2 × 10 mL C2=70 µg/mL

Perhitungan konsentrasi seri larutan rutin:

Replikasi C1(µg/mL) V1(mL) C2(µg/mL) V2(mL)

100 3 30 10

100 4 40 10

100 5 50 10

100 6 60 10

100 7 70 10

100 3 30 10

100 4 40 10

100 5 50 10

100 6 60 10

100 7 70 10

100 3 30 10

100 4 40 10

100 5 50 10

100 6 60 10

100 7 70 10

Konsentrasi ekstrak etanol bunga telang Konsentrasi larutan stok

Replikasi 1

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{250 𝑚𝑔}

10 𝑚𝐿 = 25𝑚𝑔/𝑚𝐿=25000µg/mL Replikasi 2

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{250 𝑚𝑔}

10 𝑚𝐿 = 25𝑚𝑔/𝑚𝐿=25000µg/mL Replikasi 3

𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒=^{250 𝑚𝑔}

10 𝑚𝐿 = 25𝑚𝑔/𝑚𝐿=25000µg/mL Konsentrasi intermediet

Replikasi 1 C1×V1=C2×V2

25000 µg/mL ×2 mL =C2×10mL C2 = 5000 µg/mL

Replikasi 2 C1×V1=C2×V2

25000 µg/mL ×2 mL =C2×10mL C2 = 5000 µg/mL

Replikasi 3 C1×V1=C2×V2

25000 µg/mL ×2 mL =C2×10mL C2 = 5000 µg/mL

Konsentrasi larutan seri

Contoh perhitungan konsentrasi larutan seri replikasi 1

Seri1

C1×V1=C2×V2

5000 µg/mL ×0,6 mL =C2×10 mL C2 = 300 µg/mL

Seri2

C1×V1=C2×V2

5000 µg/mL ×1 mL =C2×10 mL C2 = 500 µg/mL

Seri3

C1×V1=C2×V2

5000 µg/mL ×1,4 mL =C2×10 mL C2 = 700 µg/mL

Seri4

C1×V1=C2×V2

5000 µg/mL ×1,8 mL =C2×10 mL C2 = 900 µg/mL

Seri5

C1×V1=C2×V2

5000 µg/mL ×2,2 mL =C2×10 mL C2 = 1100 µg/mL

Perhitungan konsentrasi seri larutan ekstrak etanol bunga telang:

Replikasi C1(µg/mL) V1(mL) C2(µg/mL) V2(mL)

5000 0,6 300 10

5000 1 500 10

5000 1,4 700 10

5000 1,8 900 10

5000 2,2 1100 10

5000 0,6 300 10

5000 1 500 10

5000 1,4 700 10

5000 1,8 900 10

5000 2,2 1100 10

5000 0,6 300 10

5000 1 500 10

5000 1,4 700 10

5000 1,8 900 10

5000 2,2 1100 10

Optimasi metode uji aktivitas antioksidan Penentuan operating time (OT) asam galat

Waktu (menit)

Absorbansi konsentrasi 30µg/mL

Absorbansi konsentrasi 50µg/mL

Absorbansi konsentrasi 70µg/mL

5 0,490 0,595 0,748

10 0,423 0,560 0,709

15 0,386 0,550 0,688

20 0,360 0,541 0,676

25 0,344 0,531 0,668

30 0,333 0,524 0,663

35 0,326 0,518 0,656

40 0,320 0,510 0,651

45 0,316 0,504 0,649

50 0,313 0,499 0,648

55 0,310 0,495 0,642

60 0,304 0,492 0,636

OT yang didapatkan adalah 30menit Penentuan λ maksimum

Konsentrasi rutin (µg/mL) Absorbansi λmaksimum (nm)

1,867 516

1,644 516

1,546 517

Spektrum λ maksimum asam galat konsentrasi 20 µg/mL replikasi 1

Spektrum λ maksimum asam galat konsentrasi 20 µg/mL replikasi 2

Spektrum λ maksimum asam galat konsentrasi 20 µg/mL replikasi 3 Lampiran 11. Uji aktivitas antioksidan menggunakan radikal DPPH

%IC = 𝑨𝒃𝒔𝒐𝒓𝒃𝒂𝒏𝒔𝒊 𝒍𝒂𝒓𝒖𝒕𝒂𝒏 𝒌𝒐𝒏𝒕𝒓𝒐𝒍−𝑨𝒃𝒔𝒐𝒓𝒃𝒂𝒏𝒔𝒊 𝒔𝒂𝒎𝒑𝒆𝒍

𝑨𝒃𝒔𝒐𝒓𝒃𝒂𝒏𝒔𝒊 𝒍𝒂𝒓𝒖𝒕𝒂𝒏 𝒌𝒐𝒏𝒕𝒓𝒐𝒍 𝒙 100%

Rutin

Replikasi Konsentrasi(

µg/mL)

Absorbansi Control

DPPH

Absorbansi Larutan pembanding

%IC Persamaan regresi linear

1 .

30 0,213 59,2734 y= 0,348x +

7273

40 0,210 59,8470

0,523

0,205 60,8030 r= 0,8506

60 0,262 49,9043

70 0,278 46,8451

0,530

0,235 55,6603 y= 0,113x + 54,18 r= 0,7403

40 0,207 60,9433

50 0,212 60

60 0,203 61,6981

70 0,207 60,9433

0,533

0,251 52,9080 y= 0,0099x + 54,09 r= 0,4272

40 0,204 61,7260

50 0,203 61,9136

60 0,213 60,0375

70 0,220 58,7242

Contoh perhitungan %IC replikasi 1 Konsentrasi 30 µg/mL

%IC =0,523 −0,213

0,523 𝑥100%

= 59,2734%

Konsentrasi 40 µg/mL

%IC =0,523 −0,210

0,523 𝑥100%

=59,8470%

Konsentrasi 50 µg/mL

%IC =0,523 −0,205

0,523 𝑥100%

=60,8030%

Konsentrasi 60 µg/mL

%IC =0,523 −0,262

0,523 𝑥100%

=49,9043%

Konsentrasi 70 µg/mL

%IC =0,523 −0,278

0,523 𝑥100%

=46,8451%

Ekstrak etanol bunga telang

Replikasi Konsentrasi(

µg/mL)

Absorbansi Control

DPPH

Absorbansi Larutan pembanding

%IC Persamaan regresi linear

300

0,523

0,322 38,4321

y= 0,018x + 33,02 r= 0,9976

500 0,303 42,0650

700 0,280 46,4627

900 0,261 50,0956

1100 0,246 52,9636

300

0,530

0,326 38,4905

y= 0,022x + 32,11 r= 0,9987

500 0,297 43,9622

700 0,275 48,1132

900 0,253 52,2641

1100 0,228 56,9811

300

0,533

0,320 39,9624

y= 0,017x + 34,86 r= 0,9786

500 0,296 44,4652

700 0,281 46,7166

900 0,273 48,7804

1100 0,239 55,1594

Contoh perhitungan %IC ekstrak etanol bunga telang hasil sokletasi replikasi1

Konsentrasi 300 µg/mL

%IC =0,523 −0,322

0,523 𝑥100%

=38,4321%

Konsentrasi 500 µg/mL

%IC =0,523 −0,303

0,523 𝑥100%

=42,0950%

Konsentrasi 700 µg/mL

%IC =0,523 −0,280

0,523 𝑥100%

=46,4627%

Konsentrasi 900 µg/mL

%IC =0,523 −0,261

0,523 𝑥100%

=50,0956%

Konsentrasi 1100 µg/mL

%IC =0,523 −0,246

0,523 𝑥100%

=52,9636%

Perhitungan nilai IC50 rutin dan ekstrak etanol bunga telang Rutin

Replikasi Persamaan regresi linear y IC50 x(nilai IC50) µg/mL

1 y= 0,348x + 72,73 50 65,3160

2 y =0,113x + 54,18 50 36,9911

3 y =0,0099x + 54,09 50 93,3722

Perhitungan nilai IC50 rutin:

Replikasi1

y= 0,348x + 72,73 50=0, 348x + 72,73 x =65,3160

Replikasi2

y = 0,113x + 54,18 50=0,113x + 54,18 x = 36,9911

Replikasi3

Replikasi IC50 SD x x± SD %CV

1 65,3160

28,1906 65,2264

65,2264

43,2196%

2 36,9911 ±

3 93,3722 28,1906

y = 0,0099x + 54,09 50=0,0099x + 54,09 x = 93,3722

Ekstrak etanol bunga telang hasil sokletasi

Replikasi Persamaan regresi linear y IC50 X (nilai IC50) µg/mL

1 y =0,018x + 33,02 50 943,3333

2 y =0,022x + 32,11 50 813,1818

3 y =0,017x + 34,86 50 890,5882

Replikasi IC50 SD x x± SD %CV

1 943,3333

65,4639 882,3677

882,3677

7,4191%

2 813,1818 ±

3 890,5882 65,4639

Perhitungan IC50 ekstrak hasil sokletasi : y =0,018x + 33,02

50 =0,018x + 33,02 x = 943,3333 Replikasi2

y = 0,022x + 32,11 50=0,022x + 32,11 x = 813,1818 Replikasi3

y = y =0,017x + 34,86 50=y =0,017x + 34,86 x = 890,5882

Lampiran 12. Data uji statistik dengan aplikasi IBM SPSS Statistic 25 Uji Normalitas

Uji Homogenesis

Uji T-test

Dalam dokumen Penetapan Kadar Fenolik Total dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Bunga Telang (Clitoria ternatea L) dengan metode DPPH (Halaman 63-99)