5.1. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan, diperoleh kesimpulan sebagai berikut :
1. Semakin lama waktu hidrolisis isolat tepung kacang komak bebas lemak dengan menggunakan enzim bromelin, pankreatin dan pepsin kadar protein akan semakin rendah.
2. % DH tertinggi terdapat pada hisrolisat hasil hidrolisis menggunakan enzim pepsin pada waktu hidrolisis 24 jam sebesar 40,83%.
3. Hidrolisat hasil hidrolisis dengan enzim bromelin lebih banyak mengandung kalsium, hal ini diduga karena pengangaruh pH, sebab kalsium membutuhkan pH 6 agar dapat berada dalam keadaan terlarut, sehingga isolat protein hasil hidroisis menggunakan enzim pankreatin lebih memiliki potensi sebagai peptida pengikat kalsium dengan waktu hidrolisis 24 jam dengan kadar kalsium 2,75 mg/dl.
45 5.2 Saran
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, ada beberapa saran untuk penelitian selanjutnya yaitu sebagai berikut :
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai aplikasi enzim bromelin,pankreatin dan pepsin terhadap isolat protein tepung kacang komak.
2. Melakukan uji kadar kalsium isolat protein tepung kacang komak secara invivo.
46 DAFTAR PUSTAKA
Almatsier, Sunita, 2004. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.
Anita, Sri. 2009. Studi Sifat Fisiko-kimia, Sifat Fungsional Karbohidrat, dan aktivitas Antioksidan Tepung Kecambah Kacang Komak (Lab-lab purpureus (L.) sweet). Skripsi. Bogor: IPB.
Anonimus. 2010. Bromelin Monograph. Alternative Medicine Review Volume 15 Number 4.
Astuti, Yeti. 2009. Analisis Protein. Jakarta: Gramedia.
Baron, D.N. 1995. Kapita selekta “Patologi Klinik” (A short text book of chemical pathology) oleh D.N. Baron; alih bahasa, Petrus Andrianto, Johannes Gunawan. Ed. 4. Jakarta : EGC, 201 pp.
BD Biosciences. 2009. Hydrolysis to Hydrolysate. http://bdbiosciences.com [14 Februari 2011].
Bintang M. 2010. Biokimia Teknik Penelitian. Jakarta : Penerbit Erlangga
Bollag, D. M. dan S. J. Edelstein. 1991. Protein Methods. Willey-Liss Inc.
Newyork.
Damodaran S. 1996. Amino Acids, Peptides and Protein. Di dalam: Fennema OR, editor. Food Chemistry. Ed ke-3. New York: Marcel Dekker, Inc.
Girindra, Aisjah. 1993. Biokimia 1. Jakarta: Gramedia.
Gitelman, HJ.1967. An Improved Automated Procedure for The Determination of Calcium in Biological Specimens. Anal Biochem 18, 521-531.
Haflan, Yulius. 2008. http://www.wikimu.com/News/DisplayNews.aspx?id=6283.
Kacang Komak: Pengganti Kedelai? Diakses tanggal 16 0ktober 2011.
Pukul 16.35
Halliwel B, Aeschbach R., Lolinger J, Auroma O I. 1995. Toxicology. “J Food Chem” 33: 601. Diakses 10 Oktober 2011, pukul 08.38.
Hames, B. D. Rickwood. D. 1981. Gel Electrophoresis of Protein a Partical Approach. Oxford: IRL Press
47 Hartadi H. 1980. Komposisi bahan Makanan Indonesia: Data Ilmu Makanan
Untuk Indonesia. Yogyakarta. UGM
Hartoyo, Arif. 2008. Kacang Komak Alternatif Pengganti Kedelai. Radar Bogor, hlm. 9.
Hartoyo A, Dahrulsyah. 2003. Karakterisasi serta Aplikasi Globulin 7S dan 11S dari kacang komak (Lablab purpureus (L) Sweet). Laporan Penelitian Project Grant QUE. Program Studi Teknologi Pangan. IPB Bogor.
Haslaniza, H. 2010. The effect of enzyme concentration, temperature and incubation time on nitrogen content and degree of hydrolysis of protein precipitate from cockle (Anadara granosa) meat wash water. International Food Research journal 17 : 147-152
Hermanto, Sandra. 2008. Pengantar Biokimia I. Jakarta: UIN Jakarta.
Hidayat, T. 2005. Pembuatan hidrolisat protein dari ikan selar kuning (Caranx leptolepis) dengan menggunakan enzim papain. Skripsi. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Institut Pertanian Bogor
Hoyle NT, Merritt JH. 1994. Quality of fish protein hydrolysate from herring (Clupea harengus). J Food Sci 59: 76-79. IFO 2006. Iranian Fisheries Organization. www.shilat.com.
Jung, Wong Kyu, dan Se Kwon Kim. 2007. Calcium Binding Peptide Derived from Pepsinolytic Hidrolysate of Hoki (Johnius belengerii) Frame. Eur Food Res Technol (2007) 224: 763-767 DOI 10.1007/ s00217-006-0371-4.
Juniarso E T, Safari A, dan Pamungkas, R A. 2007. Pemanfaatan Limbah Ikan Menjadi Ekstrak Kasar Protease Dari Isi Perut Ikan Lemuru (Sardinella Sp.) Untuk Proses Deproteinisasi Limbah Udang Secara Enzimatik Menjadi Kitosan, Universitas Jember.
Johnson AH, Peterson MS. 1974. Encyclopedia of Food Technology. Wesport Connecticut: The AVI Publ., Inc.
Kasno, A., Trustinah dan T. Adisarwanto. 1991. Kacang tunggak: tanaman yang mudah dibudidayakan, toleran terhadap kekeringan dan mempunyai prospek sebagai alternative pemenuh kebutuhan akan kacang-kacangan. Warta Penelitian dan Pengembangan Pertanian XIII (1):6- 7.
Kay, E.D. 1979. Food Legumes. Tropical Products Institute, London.
Lehninger, A. L. 1995. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta: Erlangga
48 Li B., Chen F., Wang X., Ji B., Wu Y. 2007. Isolation and identification of antioxidative peptides from porcine collagen hydrolysate by consecutive chromatography and electrospray ionization-mass spectrometry. Food Chem., 2007, 102, 1135–1143.
Liu K. 1997. Soybean : Chemistry, Technology, and utilazation. Newyork : Chapman & Hall International Thomson Publishing.
Majid, Fadzilah Adibah Abdul., Madihah A. Gani, Siti Zalita Talib, dan Khadijah Khairillah Hasym. 2008. Stability of Bromelain-Pholyphenol Complex in Pineaple Juice. Jurnal Teknologi, 49 (F) dis. 2008:27-28 Universiti Teknologi Malaysia.
Martoyuwono, T. 1984. The Utilization of Lablab Bean for Human Food. Thesis.
University of New South Wales, Kensington.
Maurer, H.R. 2001. Bromelain: Biochemistry, Pharmachology, and Medical Use.
CMSL, Cell. Mol. Life Sci. 58 (2001) 1234-1245 Verlag,Basel.
Nur, A.M. dan H. Adijuwana. 1989. Teknik Pemisahan dalam Analisis Biologi.
PAU-IPB, Bogor
Poedjiadi, Anna. 1994. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta: UI-Press.
Pomeranz, Y. Dan C. L. Meloan. 1994. Food Analysis : Theory and Practice. 3rd ed. Chapman and Hall ITP an International Thomson Publ. Co. Newyork.
Puspitasari, Irma M., Rini Hendriani, dan Sri Agung Fitri Kusuma. 2009.
Pencarian Bakteri Tanah Penghasil Enzim Protease Dari Gunung Gede Cianjur. Bandung: Unpad
Raharja S, Suryadarma P, dan Oktavia T. 2011. Hidrolisis Enzimatik minyak ikan untuk Produksi Asam Lemak Omega-3 Menggunakan Lipase dari Aspergillus Niger: J. Teknologi dan Industri Pangan, Vol. Xxii No. 1.
Rui Shen, Chia., Chao-Lin Liu, Hsiao-Ping Lee, dan Jeen-Kuan Chen. 2013. The Identification and Characterization of Chitotriosidase Activity in Pancreatin from Porcine Pancreas. Molecules 2013, 18, 2978-2987;
doi:10.3390/molecules18032978 Taiwan.
Rybicki, E. Dan M. Purves. 1996. SDS Polyacrilamide Gel Elektrophoresis (SDS-PAGE). Didalam : Molecular Biology Techniques Manual. 3rd ed. (Coyne, V. E., M. D. James, S. J. Reid dan E. P. Rybicki (Ed.)).
http://web.uct.ac.za/microbiology/sdspage.htm
49 Sambrook, J., Fritsch, E. F. & Maniatis, T. (1989). Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd edn. Cold Spring Harbor, NY: Cold Spring Harbor Laboratory.
S.R, Andrew, Wiwiek S.W, dan A. Subagyo. 2006. Karakterisasi Biji dan Protein Koro Komak (Lablab purpureus (L.) Sweet) Sebagai Sumber Protein.
Jurnal Teknol. dan Industri Pangan Vo. XVII No. 2 Tahun 2006.
Subagio, A., S.R, Andrew, dan Wiwiek S.W,. 2006. Karakterisasi Biji dan Protein Koro Komak (Lablab purpureus (L.) Sweet) Sebagai Sumber Protein. Jurnal Teknol. dan Industri Pangan Vo. XVII No. 2 Tahun 2006.
Sudarmadji, S., Haryono, B., Suhardi. 1996. Analisis Bahan Makanan dan Pertanian. Penerbit Liberty: Yogyakarta.
Syahrizal, FSNA. 1991. Mikrobiologi kecap ikan yang dibuat secara enzimatis.
Skripsi. Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor.
Tanh, V. H. Dan Shibasaki, K. 1977. Beta-conglycinin from soybean protein. Di dalam : Utsumi, S. Y. Mtsumura dan T. Mori. 1977. Structure-Function Relationship of soy proteins. Food Protein and Their Application (Damodoran, S. Dan A. Paraf (Ed.)). Marcel Dekker Inc. Newyork.
Tanimoto, Hiroyuki., Masato Mori, Masao Motoki, Kunio Torii, Motoni Kadowaki, dan Tadashi Noguchi. 2001. Natto Mucilage Containing Poly-γ-glutamic Acid Increases Soluble Calsium in the Rat Small Intestine. JSBA Biosci, Biotechnol, Biochem., 65 (3), 516-521.
Vaclavik VA, Christian EW. 2008. Essential of Food Science. Ed ke-3. New York: Springer.
Widyaastuti E, Nurcholis M. 2012. Elektrophoresis. Food Analysis and Chemistry Practice. Food and Science Technology University of Brawijaya
Wilson, K. Dan J. Walker. 2000. Principles and technique of partical Biochemistry. Fifth ed. Cambridge University Press.
Winarno, F.G. 2004. Enzim Pangan. Gramedia: Jakarta.
Winarno, F. G., 1992. Kimia Pangan dan Gizi. Gramedia: Jakarta.
Winarno, F. G., 1992. Protein dan Peptida Bioaktif bagi Pengobatan dan Pangan.
http://groups.yahoo.com/group/mmaipb/message/4414. Diakses 28 September 2011, pukul 22.05.
50 Wiseman, Alan, 1986. Handbook of Enzyme Biotechnology, 2nd, John Wiley and son.
Newyork.
51
Lampiran 1. Tabel Standar BSA untuk uji Protein & Derajat Hidrolisis
Lampiran 2. Kurva standar BSA untuk uji Protein & Derajat Hidrolisis
y = 0.0038x + 0.2295 R² = 0.9957
0.000 0.500 1.000 1.500 2.000 2.500
0 100 200 300 400 500 600
Konsentrasi protein (mg/mi)
λ 450 λ 595
λ 595/λ450 Ulangan 1 Ulangan 2
Rata-rata Ulangan 1 Ulangan 2 Rata-rata
50 0,890 0,878 0,884 0,422 0,423 0,423 0,478
100 0,843 0,827 0,835 0,477 0,538 0,508 0,608
200 0,764 0,757 0,761 0,723 0,727 0,725 0,953
300 0,703 0,706 0,705 0,908 0,975 0,942 1,336
400 0,625 0,633 0,629 1,077 1,126 1,102 1,751
500 0,599 0,561 0,580 1,145 1,405 1,275 2,198
52
Lampiran 3. Rekaptulasi data uji kadar protein isolat protein tepung kacang komak hasil hidrolisis dengan berbagai enzim ( 5x pengenceran )
Waktu hidrolisis (jam )
λ 450 λ 595
λ 595/λ450 Ulangan 1 Ulangan 2 Rata-rata Ulangan 1 Ulangan 2 Rata-rata
Hidrolisat Bromelin
53
Lampiran 4. Grafik nilai kadar protein pada isolat protein tepung kacang komak hasil hidrolisis dengan enzimbromelin,pankreatin dan pepsin dengan variasi waktu hidrolisis.
Lampiran 5. nilai kadar protein pada isolat protein tepung kacang komak hasil hidrolisis dengan enzim bromelin,pankreatin dan pepsin dengan variasi waktu hidrolisis.
Waktu inkubasi (jam) kadar protein terlarut (mg/ml)
Bromelin Pankreatin Pepsin
0 1673,78 2034,70 1606,02
2 1625,57 1995,61 885,48
4 1497,88 1989,09 852,91
8 1389,73 1921,34 720,01
18 1133,93 1805,38 523,26
24 1124,07 1226,86 485,47
0.00 500.00 1000.00 1500.00 2000.00 2500.00
0 5 10 15 20 25 30
kadar protein (mg/ml)
Waktu inkubasi (jam)
bromelin pankreatin pepsin
54
Lampiran 6. Rekapitulasi derajat hidrolisis isolat protein tepung kacang komak hasil hidrolisis dengan berbagai enzim Waktu hidrolisis (jam )
λ 450 λ 595
λ 595/λ450 Ulangan 1 Ulangan 2 Rata-rata Ulangan 1 Ulangan 2 Rata-rata
Hidrolisat Bromelin + TCA 10%
0 0,837 0,818 0,828 0,547 0,573 0,560 0,677
Hidrolisat Pankreatin + TCA 10 %
0 0,828 0,856 0,842 0,558 0,633 0,596 0,707
55
Lampiran 7. Grafik %DH pada isolat protein tepung kacang komak hasil hidrolisis dengan enzim bromelin,pankreatin dan pepsin dengan variasi waktu hidrolisis.
Lampiran 8. Nilai % DH isolat protein tepung kacang komak hasil hidrolisis dengan enzim bromelin,pankreatin dan pepsin dengan variasi waktu hidrolisis.
Waktu inkubasi (jam) Derajat Hidrolisis (%)
Bromelin Pankreatin Pepsin
0 6,97 6,12 10,25
2 7,44 6,56 19,27
4 8,71 6,78 21,01
8 10,14 6,99 26,80
18 10,45 7,23 41,32
24 12,67 10,95 40,83
0.00 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00
0 5 10 15 20 25 30
Derajat Hidrolisis (%)
Waktu inkubasi (jam)
bromelin pankreatin pepsin
56 Lampiran 9. Persiapan pereaksi untuk proses pewarnaan SDS-PAGE
a) akrilamid/bis 19:1 dan akrilamid
Dibuat dengan cara melarutkan sebanyak 7,4 gram akrilamid/bis dan 8 gram akrilamid dalam 50 mL akuades, disimpan dalam botol gelap pada suhu 4oC. Larutan stabil dalam jangka waktu 30 hari.
b) Tris HCl 1,5 M; pH 8,8
Dibuat dengan cara melarutkan 45,38 gram tris base dengan 100 mL akuades, kemudian pH diatur menjadi 8,8 dengan penambahan HCl 6N.
Larutan ditambahkan akuades hingga tanda tera pada labu ukur 250 mL, selanjutnya reagen disimpan pada suhu 4oC.
c) SDS 10% (w/v)
Reagen ini dibuat dengan cara melarutkan 2,5 gram SDS dalam 25 mL akuades.
d) APS 10%
Reagen ini dibuat dengan cara melarutkan 100 mg amonium persulfat dalam 1 mL akuades.
e) TEMED (Tetra Etil Metil Diamin)
Reagen ini sudah tersedia dalam bentuk larutan.
f) Tris HCl 0,5 M; pH 6,8
57 Reagen ini dibuat dengan cara melarutkan sebanyak 6 gram tris base dalam 60 mL akuades, kemudian pH diatur menjadi 6,8 dengan penambahan HCl 6N, ditambahkan akuades hingga tanda tera pada labu ukur 100 mL lalu disimpan pada suhu 4oC.
g) Larutan pewarna
Larutan ini dibuat dengan cara melarutkan 0,5 gram Coomassie Blue R 250, 50 mL asam asetat pekat, 200 mL methanol, dan akuades sehingga volume larutan menjadi 500 mL.
h) Larutan pencuci
Larutan ini dibuat dengan cara mencampurkan metanol, asam asetat pekat, dan akuades dengan perbandingan 4:1:5.
i) Bufer sampel (SDS Reducing Center) 5x
58 Reagen ini dibuat dengan cara mencampurkan bahan-bahan kimia berikut:
Tabel 6. Komposisi Reagen Bufer Sampel (SDS Reducing Center)
No Bahan Volume (mL)
1 Tris HCl 0,5 M pH 6,8 2,0
2 Gliserol 3,2
3 SDS 20% 1,6
4 Bromofenol Blue 1% 1,6
5 β-merkaptoetanol 0,8
6 Akuades 6,8
Bufer sampel disimpan pada suhu 4oC.
j) Buffer Elektroda (Running Buffer) pH 8,3
Reagen ini dibuat dengan cara mencampurkan 30,3 gram tris base, 144 gram glisin, dan 10 gram SDS. Bahan-bahan tersebut dilarutkan dengan akuades dan ditera sampai voleme 1000 mL, kemudian larutan disimpan pada suhu 4oC. Sebelum digunakan larutan didiamkan terlebih dahulu pada suhu ruang.
59 Lampiran 10. Proses pewarnaan perak ( silver staining )
a. Fiksasi
Reagen yang digunakan dalam tahap ini dibuat dengan cara mencampurkan 25 ml etanol, 6 ml asam asetat, 25 µl formaldehid 37 %, dan ditera hingga mencapai volume 50 ml dengan akuades. Gel direndam dalam larutan ini selama 1 jam.
b. Wash
Reagen yang digunakan pada tahap ini iyalah 50% etanol. Gel direndam dengan larutan ini selama 20 menit dan dilakukan sebanyak tiga kali.
c. pretreatment
Reagen yang digunakan pada tahap ini dibuat dengan cara melarutkan 0,016 gram sodium tiosulfat pentahidrat dalam akuades hingga tanda tera pada labu ukur 50 ml. Gel direndam selama 1 menit.
d.Rinse
Pada tahap ini gel direndam dalam akuades selama 20 detik dan dilakukan sebanyak tiga kali.
e. Impregnated
Reagen yang digunakan pada tahap ini dibuat dengan cara melarutkan 0,1 gram perak nitrat (AgNO3) dan 37,5 µl formaldehid 37 % dalam akuades sampai volume mencapai 50 ml. Gel direndam dalam reagen ini selama 20 menit.
60 f. Rinse
Pada tahap ini gel direndam dalam akuades selama 20 detik dan dilakukan sebanyak tiga kali.
g. Develop
Reagen yang digunakan pada tahap ini, dibuat dengan cara melarutkan 6 gram natrium karbonat ( Na2CO3), 200 µl pretreatment solution, dan 50 µl formaldehid dalam akuades hingga volume mencapai 100 ml. Gel direndam dalam reagen ini dengan sangat hati-hati, ketika band protein pada gel maka proses perendaman dihentikan.
h. Stop
Reagen ini dibuat dengan cara mencampurkan 25 ml etanol, 6 ml asama asetat dan akuades sampai volume mencapai 50 ml. Setelah band protein muncul, gel harus segera direndam dengan reagen ini selama 10 menit.
i. Wash
Reagen yang digunakan pada tahap ini iyalah 50% etanol. Gel direndam dengan larutan ini selama 20 menit. Kemudian gel dapat disimpan dalam bentuk kering maupun basah.
61 Lampiran 11. Tabel standar untul uji SDS-PAGE (Bromelin)
No x y Rf BM (Dalton) Log BM
1 0,2 5,8 0,0345 250000 5,3979
2 0,3 5,8 0,0517 150000 5,1761
3 0,4 5,8 0,0690 100000 5,0000
4 0,8 5,8 0,1379 75000 4,8751
5 1,3 5,8 0,2241 50000 4,6990
6 1,9 5,8 0,3276 37000 4,5682
7 2,7 5,8 0,4655 25000 4,3979
8 3,1 5,8 0,5345 20000 4,3010
9 4 5,8 0,6897 15000 4,1761
10 4,8 5,8 0,8276 10000 4,0000
Lampiran 12. Kurva standar nilai Rf terhadap log BM (Bromelin)
y = -1.5423x + 5.1777 R² = 0.9228
0.0000 1.0000 2.0000 3.0000 4.0000 5.0000 6.0000
0.0000 0.2000 0.4000 0.6000 0.8000 1.0000
Log BM
Rf
62 Lampiran 13. Berat Molekul Dari isolat protein tepung kacang komak tanpa perlakuan
Lampiran 14. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim bromelin (0 jam)
No X y Rf Log BM BM (Dalton) kDa
Lampiran 15. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim bromelin (2 jam)
No X y Rf Log BM BM (Dalton) kDa
63 Lampiran 16. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim bromelin (4 jam)
No X y Rf Log BM BM (Dalton) kDa
1 2,1 6,4 0,3281 4,6710 46884,7117 47
2 2,2 6,4 0,3438 4,6469 44354,4808 44
3 3,8 6,4 0,5938 4,2614 18257,3399 18
Lampiran 17. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim bromelin (8 jam)
No X y Rf Log BM BM (Dalton) kDa
Lampiran 18. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim bromelin (18 jam)
Lampiran 19. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim bromelin (24 jam)
64 Lampiran 20. Tabel standar untul uji SDS-PAGE (Pankreatin)
No X y Rf BM (Dalton) Log BM
1 0,3 6,3 0,0476 250000 5,3979
2 0,5 6,3 0,0794 150000 5,1761
3 0,8 6,3 0,1270 100000 5,0000
4 1,1 6,3 0,1746 75000 4,8751
5 1,8 6,3 0,2857 50000 4,6990
6 2,4 6,3 0,3810 37000 4,5682
7 3,3 6,3 0,5238 25000 4,3979
8 3,9 6,3 0,6190 20000 4,3010
9 4,9 6,3 0,7778 15000 4,1761
10 5,7 6,3 0,9048 10000 4,0000
Lampiran 21. Kurva standar nilai Rf terhadap log BM (Pankreatin)
y = -1.4488x + 5.2272 R² = 0.9371
0.0000 1.0000 2.0000 3.0000 4.0000 5.0000 6.0000
0.0000 0.2000 0.4000 0.6000 0.8000 1.0000
Log BM
Rf
65 Lampiran 22. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pankreatin (0 jam)
Lampiran 23. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pankreatin (2 jam)
Lampiran 24. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pankreatin (4 jam)
66 Lampiran 25. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pankreatin (8 jam)
Lampiran 26. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pankreatin (18 jam)
Lampiran 27. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pankreatin (24 jam)
67 Lampiran 28. Tabel standar untul uji SDS-PAGE (Pepsin)
No x y Rf BM (Dalton) Log BM
1 0,6 6,4 0,0938 250000 5,3979
2 0,9 6,4 0,1406 150000 5,1761
3 1,1 6,4 0,1719 100000 5,0000
4 1,4 6,4 0,2188 75000 4,8751
5 2,1 6,4 0,3281 50000 4,6990
6 2,6 6,4 0,4063 37000 4,5682
7 3,5 6,4 0,5469 25000 4,3979
8 4 6,4 0,6250 20000 4,3010
9 4,9 6,4 0,7656 15000 4,1761
10 5,8 6,4 0,9063 10000 4,0000
Lampiran 29. Kurva standar nilai Rf terhadap log BM (Pepsin)
y = -1.565x + 5.3169 R² = 0.9389
0.0000 1.0000 2.0000 3.0000 4.0000 5.0000 6.0000
0.0000 0.2000 0.4000 0.6000 0.8000 1.0000
Log BM
Rf
68 Lampiran 30. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pepsin (0 jam)
No X Y Rf Log BM BM (Dalton) kDa
Lampiran 31. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pepsin (2 jam)
No X Y Rf Log BM BM (Dalton) kDa
Lampiran 32. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pepsin (4 jam)
No X Y Rf Log BM BM (Dalton) kDa
69 Lampiran 33. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pepsin (8 jam)
No X Y Rf Log BM
Lampiran 34. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pepsin (18 jam)
No X Y Rf Log BM
Lampiran 35. Berat Molekul Dari Hidrolisat dengan enzim Pepsin (24 jam)
No X Y Rf Log BM
Lampiran 36. Tabel standar kalsium untuk uji kalsium
Konsentrasi Klasium (mg/dl) abs1 abs2 rata-rata
1 0,024 0,026 0,025
2,5 0,100 0,088 0,094
7,5 0,271 0,257 0,264
10 0,346 0,354 0,350
12,5 0,413 0,419 0,416
70 Lampiran 37. Kurva standar kalsium
Lampiran 38. Kadar kalsium terlarut dalam larutan isolat protein hasil hidrolisis dengan enzim Bromelin.
Lampiran 39. Kadar kalsium terlarut dalam larutan isolat protein hasil hidrolisis dengan enzim Pankreatin.
71 Lampiran 40. Kadar kalsium terlarut dalam larutan isolat protein hasil hidrolisis dengan enzim Pankreatin.
Lampiran 41. Kurva kadar kalsium terlarut dalam isolat protein hasil hidrolisis dengan enzim bromelin, pankreatin dan pepsin