ABSTRAK
ANALISIS CEMARAN MIKROBA Coliform dan Escherichia coli PADA DEPO AIR MINUM ISI ULANG DI KECAMATAN RAJABASA
MENGGUNAKAN SPEKTROFOTOMETER
Oleh
Novia Wiliana
ABSTRACT
ANALYSIS OF Coliform AND Escherichia coli MIKROBIAL IMPURITIES ON DEPO DRINKING WATER REFILL IN RJABASA DISTRICT USING
SPECTROPHOTOMETER
by
Novia Wiliana
ANALISIS CEMARAN MIKROBA Coliform dan Escherichia coli PADA DEPO AIR MINUM ISI ULANG DI KECAMATAN RAJABASA
MENGGUNAKAN SPEKTROFOTOMETER
Oleh Novia Wiliana
Skripsi
Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Mencapai Gelar SARJANA SAINS
Pada Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS LAMPUNG
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Tangerang pada tanggal 21 Maret 1990 sebagai anak pertama dari tiga bersaudara pasangan Bapak Wazir Wahab dan Ibu Alina Surya.
Penulis menyelesaikan Pendidikan Taman Kanak-kanak pada tahun 1996 di TK Swadarma, tahun 2002 menyelesaikan Sekolah Dasar di SD Negeri 6 Periuk Tangerang, tahun 2005 menyelesaikan Sekolah Lanjutan Tingkat Pertama di SLTP Negeri 15 Tangerang, menyelesaikan Sekolah Menengah Umum Negeri 6 Tangerang pada tahun 2008 dan terdaftar sebagai mahasiswa Universitas Lampung melalui jalur Seleksi Nasional Masuk Perguruan Tinggi Negeri (SNMPTN).
Moto
….”Sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan”. (Al Insyirah : 6)
Impian tidak akan terwujud dengan sendirinya. Kamu harus segera bangun dan berupaya mewujudkannya.
(Penulis)
Seberat apapun beban masalah yang kamu hadapi saat ini percayalah bahwa semua itu tak akan pernah melebihi batas
PERSEMBAHAN
Kupersembahkan karya sederhana ini kepada :
Ayahanda Wazir Wahab dan Ibunda Alina Surya tercinta dan tersayang,
adik-adikku tersayang
Rachmat Wilianto dan Selamat Wilianto
Segenap Keluarga besarku yang selalu mendoakan keberhasilanku,
Sahabat dan teman-temanku yang selalu berbagi kebahagiaan,
Guru-guru dan Dosen-dosen ku yang senantiasa membimbing dan membagi ilmunya untukku,
SANWACANA
Assalamualaikum Wr. Wb.
Segala puji dan syukur kupersembahkan bagi sang penggenggam langit dan bumi Gusti Allah SWT, karena ridho, karunia dan kebesaran-Nya penulis dapat
menyelesaikan skripsi ini. Lantunan shalawat serta salam tidak lupa penulis sanjungkan kepada Nabi Muhammad SAW sebagai suri tauladan bagi umatnya.
Skripsi dengan judul “Analisis Cemaran Mikroba Coliform dan Escherichia coli Pada Depo Air Minum Isi Ulang Menggunakan Spektrofotometer” adalah salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains pada Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Lampung.
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih sebear-besarnya dan penghargaan yang tulus kepada :
1. Bapak Dr. Eng. Suripto Dwi Yuwono, M.T. selaku Pembimbing Utama yang telah membimbing penulis dengan penuh kesabaran, memberikan banyak ilmu pengetahuan, saran, waktu dan arahan, selama penyusunan skripsi ini.
2. Bapak Heri Satria, M.Si. selaku pembimbing Kedua yang telah memberikan petunjuk, solusi, saran,ilmu, arahan, waktu serta nasehat dalam
3. Bapak Dr. Rinawati, M.Si. selaku Pembahas yang telah memberikan banyak ilmu pengetahuan, arahan, dan saran demi terselesainya skripsi ini. 4. Ibu Dra. Fifi Martasih, M.S (Alm) selaku pembimbing akademik atas
bimbingannya selama ini kepada penulis.
5. Bapak Dr.Eng.Suripto Dwi Yuwono,M.T selaku ketua jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Lampung. 6. Bapak Prof. Dr. Suharso, Ph.D selaku Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam Universitas Lampung.
7. Seluruh dosen dan staf administrasi di Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Lampung.
8. Kedua Orang Tuaku tercinta dan tersayang Bapakku Wazir Wahab dan Ibuku Alina Surya, atas kasih sayang yang tiada kira, dukungan, doa, senyuman, semangat dan keikhlasan yang selalu diberikan di sepanjang hidupku.
11. Sahabatku Ayu Aditya Sari, S.Si, Vivi Dwi Elianasari, S.Si, Adek
Purnawati, S.Si, Candra Saka Nusantari, Retno Nur Ramadhani, Idrus Sapto atas persahabatan, kebersamaan yang penuh canda, do’a, dukungan dan bantuannya selama ini.
12. Teman-teman seperjuangan angkatan 2008 : Ani Sulistriani, S. Si., Harnita Yuniar, S. Si., Shoffa Nur Fauziah, S. Si., Muhamad Ramdhan Nugraha, S. Si., Arif Rahman Hakim, Ahmad Ruzki, Muhammad Subari, TB Didi Supriyadi, S. Si., Eko Wijianto, Miftahudin Ramli, S. Si., Sundari Riawati, S. Si., Ni Putu Yuliastri, S. Si., Elianasari, S. Si., Miftasani, S. Si., Arif Ashari, S. Si., Rudi Jailani, S. Si., Mychel Dendiko Pratangga, S. Si., Retno Dwi Palupi, S. Si., Ricardo Simarmata, S. Si., Raffel Stevano, S. Si., Riki Fauzi, S. Si., Puji Mugianto, S. Si., Evi Rawati Sijabat, S. Si., Putri Febriani Puspita, S. Si., Eny Heriani Ria Napitupulu, S. Si., Siti Oktavia Rumapea, S. Si., Rizki Amalia, S. Si., Majid Rimbani, S. Si., Robbi Yansya terima kasih untuk kebersamaan dan keceriaan selama menjalankan perkuliahan, tetap semangat dan jangan menyerah, perjuangan kita masih panjang, sukses selalu untuk kita.
13. Teman 2009 Juwita, Kiki, Teta, Indah, Mardiyah, Sherly, Retno, Meta, Resca, Umam, Fadli, Gege, Delpiana, Rina, Mersi, Dwi, Bowo, Bibi dan semuanya terima kasih atas kerjasama dan persaudaraannya.
15. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang secara tulus memberikan bantuan moril dan materil kepada penulis.
Bandar Lampung, Juni 2014 Penulis
i
DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR ISI ... i
DAFTAR TABEL ... iii
DAFTAR GAMBAR... iv
I. PENDAHULUAN ... 1
A. Latar Belakang ... 1
B. Tujuan Penelitian ... 4
C. Manfaat Penelitian ... 4
II. TINJAUAN PUSTAKA... 5
A. Air ... ... 5
1. Air Minum ... 6
2. Sumber Air Minum ... 7
a. Air Laut ... 7
b. Air Atmosfer ... 7
c. Air Permukaan ... 7
d. Air Tanah ... 8
e. Mata Air ... 8
3. Syarat Kualitas Air Minum ... 9
4. Air Minum Isi Ulang... 11
B. Bakteri .... ... 12
1. Bakteri Coliform ... 12
2. Bakteri Escherichia coli... 13
3. Bakteri Gram Negatif... 15
4. Morfologi Bakteri Escherichia coli dan Sifat-sifatnya ... 16
C. Pertumbuhan Mikroba ... 18
D. Fase Pertumbuhan Bakteri ... 20
E. Spektrofotometri ... 21
1. Spektrofotometri UV-Vis ... 22
2. Instrumentasi spektrofotometri UV-Vis ... 23
a. Sumber Cahaya ... 24
ii
c. Monokromator ... 25
d. Detektor ... 25
e. Rekorder ... 25
III. METODOLOGI PENELITIAN ... 26
A. Waktu dan Tempat ... 26
B. Alat dan Bahan... 26
C. Prosedur Penelitian ... 27
1. Persiapan awal ... 27
2. Teknik pengambilan sampel ... 28
3. Isolasi bakteri Coliform dan Escherichia coli menggunakan metode gores ... 30
3.1.Isolasi bakteri Coliform ... 30
a.Uji Pendugaan Coliform ... 30
b.Uji Penegasan Coliform ... 31
3.2. Isolasi bakteri Escherichia coli ... 31
a. Uji Pendugaan Escherichia coli ... 32
b. Uji penegasan Escherichia coli ... 32
4. Identifikasi Escherichia coli ... 33
4.1 Uji morfologi ... 33
4.2 Prosedur pewarnaan gram ... 33
5. Analisis Perhitungan Jumlah sel Bakteri Secara Spektrofotometer ... 34
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ... 36
A. Persiapan Sampel ... 37
B. Isolasi bakteri Coliform dan Escherichia coli menggunakan metode gores ... 37
C. Identifikasi Bakteri E.coli. ... 42
D. Analisis Perhitungan Jumlah sel Bakteri Secara Spektrofotometer ... 44
V. SIMPULAN DAN SARAN ... 59
A. Simpulan ... 59
B. Saran ... 60 DAFTAR PUSTAKA
iii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1. Koloni bakteri Eschericia coli ... 14
2. Kurva pertumbuhan bakteri... 21
3. Instrumentasi Spektofotometri UV-Vis ... 23
4. Hasil Uji pendugaan bakteri Coliform ... 38
5. Hasil Uji penegasan bakteri Coliform ... 39
6. Reaksi biokimia pembentukkan gas CO2 dalam tabung durham ... 40
7. Hasil uji pendugaan E. coli ... 41
8. Hasil Uji penegasan bakteri E. coli ... 42
9. Morfologi E. coli perbesaran 40x... 43
10. Kurva Standar McFarland ... 45
11. Kurva pertumbuhan Coliform Sampling depo A bulan pertama ... 46
12. Kurva pertumbuhan Coliform Sampling depo B bulan pertama ... 46
13. Kurva pertumbuhan Coliform Sampling depo C bulan pertama ... 47
14. Kurva pertumbuhan Coliform Sampling depo A bulan kedua ... 48
15. Kurva pertumbuhan Coliform Sampling depo B bulan kedua ... 48
16. Kurva pertumbuhan Coliform Sampling depo C bulan kedua ... 49
17. Kurva pertumbuhan Coliform Sampling depo A bulan ketiga ... 50
19. Kurva pertumbuhan Coliform Sampling depo C bulan ketiga ... 51
20. Kurva pertumbuhan E.coli Sampling depo A bulan pertama ... 52
21. Kurva pertumbuhan E.coli Sampling depo B bulan pertama ... 52
22. Kurva pertumbuhan E.coli Sampling depo C bulan pertama ... 53
23. Kurva pertumbuhan E.coli Sampling depo A bulan kedua ... 54
24. Kurva pertumbuhan E.coli Sampling depo B bulan kedua ... 54
25. Kurva pertumbuhan E.coli Sampling depo C bulan kedua ... 55
26. Kurva pertumbuhan E.coli Sampling depo A bulan ketiga ... 56
27. Kurva pertumbuhan E.coli Sampling depo B bulan ketiga ... 56
28. Kurva pertumbuhan E.coli Sampling depo C bulan ketiga ... 57
1
I. PENDAHULUAN
A.LATAR BELAKANG
Air minum merupakan kebutuhan manusia paling penting. Seperti diketahui, kadar air tubuh manusia mencapai 68% dan untuk tetap hidup air dalam tubuh tersebut harus dipertahankan. Kebutuhan air minum setiap orang bervariasi dari 2,1 liter hingga 2,8 liter perhari tergantung berat badan dan aktivitasnya. Namun, agar tetap sehat air minum harus memenuhi persyaratan fisika, kimia maupun bakteriologis (Suriawiria,1996).
Perkembangan pasar pada saat ini menunjukkan permintaan terhadap air minum dalam kemasan yang semakin meningkat dan menjadi peluang ekonomi yang baik. Disisi lain, jumlah sumber air minum yang memenuhi syarat untuk dikonsumsi semakin berkurang sebagai akibat tindakan manusia sendiri baik sengaja maupun tidak sengaja (Wulan, 2005).
Air minum isi ulang adalah air yang mengalami proses pemurnian baik secara penyinaran ultraviolet, ozonisasi ataupun keduanya melalui berbagai tahap filtrasi untuk mendapatkan air bersih yang digunakan untuk berbagai
2
tersebut maka semakin banyak bermunculan Depot Air Minum Isi Ulang yang menyediakan air siap minum. Selain murah, air minum isi ulang juga dapat dijumpai di berbagai tempat, tetapi kemungkinan besar di tumbuhi bakteri. Hal ini disebabkan karena tidak semua depot air minum isi ulang melakukan
pengolahan secara tepat dan benar, misalnya kualitas air baku yang digunakan, jenis peralatan yang digunakan, perawatan peralatan, penanganan air hasil pengolahan. Selain pengolahan air minum di Depo Air Minum Isi Ulang tidak seluruhnya dilakukan secara otomatis sehingga dapat mempengaruhi kualitas air yang dihasilkan, dengan demikian kualitas masih perlu dikaji dalam rangka penyajian kualitas airnya (Athena dkk, 2003).
Standar air minum di indonesia saat ini mengikuti standar WHO yang dalam beberapa hal disesuaikan dengan kondisi di indonesia. Pada tahun 2002, Departemen Kesehatan RI telah menetapkan kriteria kualitas air secara mikrobiologis, melalui Keputusan Menteri Kesehatan No. 907 tahun 2002 bahwa air minum tidak boleh mengandung bakteri Coliform dan Eschericia coli melebihi ambang batas yang telah ditentukan yaitu 0 koloni/100ml.
3
sumber air telah terkontaminasi oleh patogen atau tidak. Bakteri non patogen adalah bakteri yang terdapat ditubuh inang tetapi tidak menimbulkan gangguan yang signifikan.
Metode spektrofotometri merupakan metode untuk mengukur kerapatan optis dari suatu cairan misalnya suatu medium cair yang berisi suspensi bakteri. Kerapatan optis adalah nilai logaritmik yang digunakan untuk memplot pertumbuhan bakteri pada suatu grafik atau menggambarkan jumlah bakteri pada suatu kultur cair. Spektrofotometer dapat membaca kekeruhan kultur dengan melewatkan suatu berkas cahaya kemudian persentase cahaya yang melewatinya dihitung. Semakin keruh berarti cahaya yang diterima semakin sedikit. Adapun prinsip dari spektrofotometer yaitu untuk mengetahui jumlah absorban pada mikroorganisme dengan panjang gelombang tertentu.
4
B.TUJUAN PENELITIAN
Adapun tujuan dari penelitian ini adalah untuk :
1. Mengetahui keberadaan cemaran mikroba E. coli dan Coliform pada Depo Air Minum Isi Ulang di Kecamatan Rajabasa.
2. Mengetahui kualitas Depo Air Minum Isi Ulang di Kecamatan Rajabasa secara fisiologis dan mikrobiologis yang dikonsumsi masyarakat. 3. Mengetahui jumlah bakteri E. coli dan Coliiform menggunakan
spektrofotometer pada Depo Air Minum Isi Ulang di Kecamatan Rajabasa.
C.MANFAAT PENELITIAN
Adapun manfaat dari Penelitian ini yaitu
1. Memberikan informasi keberadaan cemaran mikroba E. coli dan Coliform yang terdapat pada Depo Air Minum Isi Ulang di Kecamatan Rajabasa. 2. Memberikan informasi keberadaan depo layak atau tidak sebagai penyedian
5
II. TINJAUAN PUSTAKA
A. AIR
Air merupakan bahan esensial yang diperlukan dalam kehidupan. Manusia dan makhluk-makhluk lain yang tidak hidup di dalam air senantiasa mencari tempat untuk tinggal yang dekat dengan air supaya mudah mengambil air untuk
keperluan hidupnya, maka desa atau kota zaman dulu tumbuh di sekitar sumber air, baik di tepi sungai, maupun di tepi danau. Sesudah peradaban manusia lebih maju, tempat tinggalnya tidak perlu dekat dengan sumber air, karena sumber air yang jauh, dapat didistribusikan melalui pipa (Prawiro, 1989).
6
cium dengan hidung sebagai salah satu tanda bahwa di dalam tubuh kita terdapat trilyunan molekul-molekul air tersisip dihampir semua organ tubuh terutama otak, darah, paru-paru, jantung, ginjal, otot dan hati, yang secara total bisa dikatakan lebih dari tujuh puluh persen bagian tubuh kita sebenarnya adalah air (Chandra, 2007).
Air yang banyak dipergunakan tidak selalu sesuai dengan syarat kesehatan, karena mengandung bibit penyakit ataupun zat-zat tertentu yang dapat menimbulkan masalah penyakit ataupun zat-zat tertentu yang dapat menimbulkan penyakit yang membahayakan kelangsungan hidup manusia (Azwar, 1996).
1. Air Minum
Air minum merupakan kebutuhan manusia paling penting. Seperti diketahui, kadar air tubuh manusia mencapai 68% dan untuk tetap hidup air dalam tubuh tersebut harus dipertahankan. Kebutuhan air minum setiap orang bervariasi dari 2,1 liter hingga 2,8 liter perhari tergantung berat badan dan aktivitasnya. Namun, agar tetap sehat air minum harus memenuhi persyaratan fisika, kimia maupun bakteriologis (Suriawiria,1996).
7
Air minum pun seharusnya tidak mengandung bakteri patogen dan segala makhluk yang membahayakan kesehatan manusia (Slamet,1994).
2. Sumber Air Minum
Sumber air minum merupakan salah satu komponen utama pada suatu sistem penyediaan air bersih, karena tanpa sumber air maka suatu sistem penyediaan air bersih tidak akan berfungsi (Sutrisno dkk, 2000). Macam – macam sumber air yang dapat dimanfaatkan sebagai air minum antara lain sebagai berikut : a. Air laut
Air laut merupakan air yang mempunyai sifat asin, karena mengandung garam NaCl dengan kadar sebesar 3% sehingga dengan kandungan tersebut, air laut tidak memenuhi syarat sebagai sumber air minum (Suyono, 1993). b. Air atmosfer
Air atmosfer merupakan air yang berasal dari air hujan. Air atmosfer ini dapat dijadikan sebagai air minum apabila penampungan air hujan tidak dilakukan pada waktu air hujan mulai turun, karena masih mengandung banyak kotoran. Selain itu, air hujan mempunyai sifat khusus terutama pada pipa penyalur maupun tempat penampung, karena dapat mempercepat terjadinya korosi (Suyono, 1993).
c. Air permukaan
Air permukaan adalah air yang berada di atas permukaan tanah seperti air sungai, air rawa, air irigasi, air danau, air laut dan sebagainya. Air
8
sumber air bersih dan air minum tetapi sangat mudah tercemar dan terkotori oleh bahan pencemar dan pengotor yang mengapung, melayang, mengendap dan melarut di air permukaan oleh sebab itu sebelum digunakan air
permukaan memerlukan pengolahan terlebih dahulu (Suyono, 1993). d. Air tanah
Air tanah banyak mengandung garam dan mineral yang terlarut dalam air pada lapisan-lapisan tanah. Secara praktis air tanah adalah air bebas polutan karena berada di bawah permukaan tanah. Tetapi tidak menutup
kemungkinan bahwa air tanah dapat tercemar oleh zat-zat yang mengganggu kesehatan. Bila ditinjau dari kedalaman air tanah maka air tanah dibedakan menjadi air tanah dangkal dan air tanah dalam. Air tanah dangkal
mempunyai kualitas lebih rendah dibanding kualitas air tanah dalam. Hal ini disebabkan air tanah dangkal lebih mudah mendapat kontaminasi dari luar dan fungsi tanah sebagai penyaring lebih sedikit (Gabriel, 2001).
e. Mata air
9
3. Syarat Kualitas Air Minum
Air minum adalah zat – zat yang tidak mempunyai warna, rasa, dan bau yang terdiri dari hidrogen dan oksigen dengan rumus kimia H2O (Linsley dan Franzini, 1989).
Ciri- ciri air yang terpolusi sangat bervariasi, tergantung dari jenis air dan polutannya atau komponen yang mengakibatkan polusi (Pitojo dan Purwantoyo, 2003).
Pemanfaatan air dalam kehidupan harus memenuhi persyaratan baik kualitas dan kuantitas yang erat hubungannya dengan kesehatan. Air yang memenuhi persyaratan kuantitas apabila air tersebut mencukupi semua kebutuhan keluarga baik sebagai air minum maupun untuk keperluan rumah tangga lainnya. Sedangkan air yang memenuhi persyaratan kualitas air minum menurut Peraturan Menteri Kesehatan RI No. 907/Menkes/SKI/VII/2002, secara garis besar dapat digolongkan menjadi dua jenis parameter
10
Tabel 1. Persyaratan Kualitas Air Minum menurut Peraturan Menteri Kesehatan RI No. 907/Menkes/SKI/VII/2002 (Sumber : Menkes, 2002)
No Jenis Parameter Satuan Kadar
maksimum 1 Parameter yang berhubungan
langsung dengan kesehatan a.Parameter Mikrobiologi
1) E.Coli Jumlah per 100
ml sampel
0 2) Total Bakteri Koliform Jumlah per100 ml
sampel
0 b.Kimia an-organik
1) Arsen mg/l 0,01
2) Florida mg/l 1,5
3) Total Kromium mg/l 0,05
4) Kadmium mg/l 0,003
5) Nitrit , (Sebagai NO2-) mg/l 3 6) Nitrat , (Sebagai NO3-) mg/l 50
7) Sianida mg/l 0,07
8) Selenium mg/l 0,01
2 Parameter yang tidak langsung berhubungan dengan kesehatan
a.Parameter Fisik
1) Bau TCU Tidak berbau
2) Warna mg/l 15
3) Total zat padat terlarut (TDS) NTU 500
4) Kekeruhan 5
5) Rasa 0C Tidak berasa
6) Suhu Suhu udara ± 3
b.Parameter Kimiawi
1) Alumunium mg/l 0,2
2) Besi mg/l 0,3
3) Kesadahan mg/l 500
4) Khlorida mg/l 250
5) Mangan mg/l 0,4
6) pH 6,5-8,5
7) Seng mg/l 3
8) Sulfat mg/l 250
9) Tembaga mg/l 2
11
4. Air Minum Isi Ulang (AMIU)
Air minum isi ulang menjadi salah satu pilihan dalam memenuhi kebutuhan hidup masyarakat, karena selain lebih praktis dan tidak perlu memasaknya terlebih dahulu sehingga air minum ini juga dianggap lebih higienis.
Tingginya minat masyarakat dalam mengkonsumsi air minum dalam kemasan dan mahalnya harga air minum dalam kemasan yang diproduksi industri besar mendorong banyaknya depot AMIU di berbagai tempat terutama di kota besar. Hal tersebut antara lain dari segi harganya AMIU lebih murah yaitu 1/3 dari harga air minum dalam kemasan yang diproduksi resmi industri besar, akan tetapi beberapa masyarakat masih ragu akan hal kualitas dari depot AMIU (Kacaribu, 2008).
12
B.Bakteri
Bakteri termasuk ke dalam mikroorganisme uniseluler. Bakteri tersebar luas di alam, di dalam tanah, di dalam air, dalam tubuh hewan, manusia, tumbuhan dan merupakan simbiosis dari organisme lain. Bakteri rata-rata mengandung 40-70% protein, 13-34% asam nukleat, 10-30% lipid (Suhartono, 1989).
Bakteri pada umumnya tidak berklorofil, ada beberapa yang fotosintetik dan produksi aseksualnya secara pembelahan dan bakteri mempunyai ukuran sel kecil (mikro), dimana setiap selnya hanya dapat dilihat dengan bantuan mikroskop. Bakteri pada umumnya mempunyai ukuran sel 0,5-1,0 μm kali 2,0-5,0 μm, dan terdiri dari tiga bentuk dasar yaitu bentuk bulat atau kokus, bentuk batang atau bacillus, bentuk spiral (Dwidjoseputro,1990).
1. Bakteri Coliform
Bakteri coliform total merupakan semua jenis bakteri aerobik, anaerobik fakultatif, dan rod-shape (bakteri batang) yang dapat memfermentasi laktosa dan menghasilkan gas dalam waktu 48 jam pada suhu 37ºC. (Suriawiria, 1996).
Bakteri Coliform dibagi menjadi dua golongan :
13
2) Coliform non fekal, seperti aerobacter dan Klebsiella yang bukan berasal dari kotoran manusia tetapi biasanya berasal dari hewan atau tanaman yang telah mati (Dwee, 2010).
2. Bakteri Escherichia coli
E. coli adalah kuman oportunis yang banyak ditemukan di dalam usus besar manusia sebagai flora normal. Bakteri ini bersifat unik karena dapat
menyebabkan infeksi primer pada usus, misalnya diare pada anak, seperti juga kemampuannya menimbulkan infeksi pada jaringan tubuh lain di luar usus. Escherichia coli terdiri dari 2 spesies yaitu : E. coli dan E. hermanis (Zuhri, 2009).
Berikut ini klasifikasi dari bakteri E. coli. Devisi : Protophyta
Klas : Schizomycetes Ordo : Eubacteriales Familia : Enterobacteriaceae Genus : Escherichia
14
[image:31.612.251.389.138.250.2]Gambar yang menunjukkan koloni E. coli berwarna hijau metalik disajikan dalam Gambar 2.
Gambar 2. Koloni bakteri E. coli (Pelczar dan Chan, 2006)
Bakteri E. coli berbentuk basil, bergerak dengan flagel peritrik, bersifat gram negatif, mampu menguraikan glukosa dan menghasilkan gas (Dwidjoseputro, 1990). Bakteri E. coli dalam keadaan normal menghuni saluran pencernaan manusia dan hewan berdarah panas, tidak membentuk spora, aerob dan anaerob fakultatif yang memfermentasi laktosa dan mampu menghasilkan asam dan gas dalam waktu 48 jam pada suhu 35 °C (Pelczar dan Chan, 2006). E. coli juga mempunyai sifat motil tak berspora, berbentuk menyerupai tongkat dengan ukuran 0,5-1,0 x 4,0 µm, tersusun tunggal atau berpasangan dan rantai, bentuk koloni putih kelabu gelap rata dengan sisi tepi yang teratur, dalam kaldu turbiditasnya sama dan memproduksi sedimen tebal, pada media biasa diameternya beberapa millimeter. Tergolong bakteri aerob dan anaerob pada suhu 40 °C, mati pada pemanasan 60 °C selama 30 menit, pada umumnya tidak resisten terhadap desinfektan dan pada keadaan yang kering, ada dalam
15
tumbuh menempel pada media sintetik yang berisi NaCl dan glukosa ditambah vitamin (Kelly, 1951).
E. coli tumbuh pada suhu antara 10-40 oC dengan suhu optimum 37 oC. pH optimum untuk pertumbuhannya adalah pada 7,0-7,5, pH minimumnya adalah 4,0 dan maksimumnya adalah 9,0. Sel E. coli mempunyai ukuran panjang 2,0-6,0 µm dan lebar 1,1-1,5 µm, tersusun tunggal, berpasangan dengan flagella peritrik. Salah satu faktor yang mempengaruhi sifat patogenik E. coli adalah kemampuan untuk melakukan adesi pada sel-sel hewan dan manusia.
Kemampuan untuk melakukan adesi ini diduga disebabkan oleh adanya fibria atau pili yang dapat menyebabkan adesi dan kolonisasi strain ETEC pada hewan dan manusia terdiri dari beberapa tipe antigenik (Supardi dan Sukamto, 1999).
3. Bakteri Gram Negatif
Bakteri gram negatif adalah bakteri yang tidak mempertahankan zat warna kristal violet sewaktu proses pewarnaan gram sehingga akan berwarna merah bila diamati dengan mikroskop. Disisi lain, bakteri gram positif akan berwarna ungu (Madigan et al., 2006). Perbedaan keduanya didasarkan pada perbedaan struktur dinding sel yang berbeda dan dapat dinyatakan oleh prosedur
16
Prosedur ini ditemukan pada tahun 1884 oleh ilmuwan Denmark bernama Christian Gram dan merupakan prosedur penting dalam klasifikasi bakteri (Singleton and Sainsbury, 2006). Bakteri gram positif seperti Staphylococcus aureus (bakteri patogen yang umum pada manusia) hanya mempunyai
membran plasma tunggal yang dikelilingi dinding sel tebal berupa peptidoglikan. Sekitar 90% dari dinding sel tersebut tersusun atas
peptidoglikan sedangkan sisanya berupa molekul lain bernama asam teikhoat. Disisi lain, bakteri gram negatif (seperti E. coli) memiliki sistem membran ganda dimana membran plasmanya diselimuti oleh membran luar permeabel. Bakteri ini mempunyai dinding sel tebal berupa peptidoglikan, yang terletak di antara membran dalam dan membran luarnya.
Banyak spesies bakteri gram negatif yang bersifat patogen, yang berarti mereka berbahaya bagi organisme inang. Sifat patogen ini umumnya berkaitan dengan komponen tertentu pada dinding sel gram negatif, terutama lapisan
lipopolisakarida atau endotoksin (Prescott et al., 2002).
4. Morfologi Bakteri Escherichia coli dan Sifat - sifatnya
17
spora, aerob dan anaerob fakultatif yang memfermentasi laktosa dan mampu menghasilkan asam dan gas dalam waktu 48 jam pada suhu 35⁰C. (Pelczar dan Chan, 2006). E. coli juga mempunyai sifat motil tak berspora coccobacili pendek, berbentuk menyerupai tongkat dengan ukuran 0,5 – 1,0 X 4,0 μm, tersusun tunggal atau berpasangan dan rantai, bentuk koloni putih kelabu gelap rata dengan sisi tepi yang teratur. Tergolong bakteri aerob dan anaerob pada suhu 40⁰C, mati pada pemanasan 60⁰C selama 30 menit (Ruth, 2009).
E. coli adalah indikator untuk menentukan air telah terkontaminasi tinja karena bakteri ini hanya dan selalu terdapat dalam tinja. Adanya E. coli dalam air minum menunjukkan pencemaran oleh tinja manusia atau hewan berdarah panas. Jika dalam sample air terdapat E. coli, berpeluang terkandung bakteri patogen. Selain E. coli, strain patogen yang lain dapat menginfeksi manusia, terdiri dari : Enterotoxigenic E. coli (ETEC), Enterohaemorrhagic E. coli (EHEC), Enteropathogenic E. coli (EPEC), dan Enteroinvasive E. coli (EIEC). Sebanyak 500 E. coli/100 ml air minum, berpeluang menimbulkan
18
C. Pertumbuhan Mikroba.
Pertumbuhan pada mikroorganisme diartikan sebagai penambahan jumlah atau total massa sel yang melebihi inokulum asalnya. Sistem reproduksi bakteri adalah dengan cara pembelahan biner melintang, satu sel membelah diri menjadi 2 sel anakan yang identik dan terpisah. Selang waktu yang dibutuhkan bagi sel untuk membelah diri menjadi dua kali lipat disebut sebagai waktu generasi. Waktu generasi pada setiap bakteri tidak sama, ada yang hanya memerlukan 20 menit bahkan ada yang memerlukan sampai berjam-jam atau berhari-hari (Sumarsih, 2003).
Dalam pertumbuhannya setiap makhluk hidup membutuhkan nutrisi yang mencukupi serta kondisi lingkungan yang mendukung demi proses pertumbuhan tersebut, termasuk juga bakteri. Pertumbuhan bakteri pada umumnya akan dipengaruhi oleh faktor lingkungan (Krisno, 2011).
Mikroba sama dengan makhluk hidup lainnya, memerlukan suplai nutrisi sebagai sumber energi dan pertumbuhan selnya. Unsur-unsur dasar tersebut adalah : karbon, nitrogen, hidrogen, oksigen, sulfur, fosfor, zat besi dan sejumlah kecil logam lainnya. Ketiadaan atau kekurangan sumber nutrisi ini dapat mempengaruhi pertumbuhan mikroba hingga pada akhirnya dapat menyebabkan kematian. Kondisi tidak bersih dan higenis pada lingkungan adalah kondisi yang
19
menciptakan lingkungan bersih dan higinis adalah untuk mengurangi sumber nutrisi bagi mikroba agar pertumbuhannya terkendali (Dwiyana dan Gobel, 2010).
Adapun faktor yang mempengaruhi pertumbuhan mikroba sebagai berikut : a. Suhu merupakan salah satu faktor lingkungan yang berpengaruh terhadap
pertumbuhan mikroba. Setiap mikroba mempunyai suhu optimum tertentu untuk pertumbuhannya (Schlegel, 1994).
b. Mikroba mempunyai kebutuhan oksigen yang berbeda untuk pertumbuhannya (Krisno, 2011).
c. Waktu generasi adalah waktu yang diperlukan oleh mikroorganisme untuk meningkatkan jumlah sel menjadi dua kali lipat jumlah semula. Kurva pertumbuhan mikroorganisme terdiri atas empat fase yaitu fase penyesuaian, fase eksponensial atau fase logaritmik, fase stasioner dan fase kematian. Pada fase eksponensial terjadi peningkatan jumlah sel dan digunakan untuk untuk menentukan waktu generasi (Yudhabuntara, 2003).
20
D.Fase Pertumbuhan Bakteri
Suatu mikroorganisme mempunyai siklus pertumbuhan tertentu tergantung produk yang akan dihasilkan. Fase pertumbuhan bakteri dapat dibagi menjadi 4 fase, yaitu fase lag, fase logaritma (eksponensial), fase stasioner dan fase kematian. Fase lag merupakan fase penyesuaian bakteri dengan lingkungan yang baru. Lama fase lag pada bakteri sangat bervariasi, tergantung pada komposisi media, pH, suhu, aerasi, jumlah sel pada inokulum awal dan sifat fisiologis mikroorganisme pada media sebelumnya. Ketika sel telah menyesuaikan diri dengan lingkungan yang baru maka sel mulai membelah hingga mencapai populasi yang maksimum. Fase ini disebut fase logaritma atau fase eksponensial (Dwidjoseputro, 1990).
Fase eksponensial ditandai dengan terjadinya periode pertumbuhan yang cepat. Variasi derajat pertumbuhan bakteri pada fase eksponensial ini sangat dipengaruhi oleh sifat genetik yang diturunkannya. Selain itu, derajat pertumbuhan juga
dipengaruhi oleh kadar nutrien dalam media, suhu inkubasi, kondisi pH dan aerasi. Ketika derajat pertumbuhan bakteri telah menghasilkan populasi yang maksimum, maka akan terjadi keseimbangan antara jumlah sel yang mati dan jumlah sel yang hidup (Dwidjoseputro, 1990).
Fase stasioner terjadi pada saat laju pertumbuhan bakteri sama dengan laju kematiannya, sehingga jumlah bakteri keseluruhan akan tetap. Jumlah
21
[image:38.612.178.443.250.389.2]Hal ini disebabkan oleh kadar nutrisi yang berkurang dan terjadi akumulasi produk toksik sehingga mengganggu pembelahan sel. Fase stasioner ini dilanjutkan dengan fase kematian yang ditandai dengan peningkatan laju kematian yang melampaui laju pertumbuhan, sehingga secara keseluruhan terjadi penurunan populasi bakteri dan kecepatan pembelahannya menjadi nol (Volk dan Wheeler, 1993).
Gambar 3. Kurva Pertumbuhan Bakteri, menunjukkan empat fase pertumbuhan: a=fase lag; b=fase eksponensial; c=fase stasioner dan d=fase kematian (Sumber : Volk dan Wheeler, 1993).
E. Spektrofotometri
22
atau absorbansi dari suatu cuplikan sebagai fungsi panjang gelombang dari konsentrasi (Khopkar, 2002).
1. Spektrofotometri UV-Vis
Spektrofotometri UV-Vis merupakan pengukuran energi cahaya oleh suatu sistem kimia pada panjang gelombang tertentu. Sinar ultraviolet (UV) mempunyai panjang gelombang 200-400 nm, dan sinar tampak (Visible) mempunyai panjang gelombang 400-750 nm. Pengukuran spektrofotometri menggunakan alat spektrofotometer yang melibatkan energi elektronik yang cukup besar pada molekul yang di analisis, sehingga spektrofotometer UV-Vis lebih banyak dipakai untuk analisis kuantitatif dibandingkan kualitatif.
23
Hukum Lamber-Beer menyatakan hubungan lineritas antara absorban dengan konsentrasi larutan analit dan berbanding terbalik dengna transmitan. Adapun persamaan hukum Lambert beer:
A = - log T = ε.b.c Dimana :
A = Absorbansi T = Transmitan
ε = absorvitas molar (Lcm-1 . mol-1) c = konsentrasi zat (M)
b = panjang sel (cm)
(Day dan Underwood, 1986).
[image:40.612.129.512.440.599.2]2. Instrumentasi Spektrofotometri UV-VIS
24
Spektroskopi UV-VIS memiliki instrumentasi yang terdiri dari lima komponen utama, yaitu ;
1. Sumber cahaya
Sumber cahaya dalam alat ini mempunyai dua fungsi yaitu untuk memberikan energi pada daerah panjang gelombang sesuai keinginan pengukuran dan mempertahankan intensitas sinar yang konstan selama pengukuran. Dalam alat ini digunakan 2 kombinasi sinar yaitu sinar tampak dan sinar ultara violet, sinar tampak digunakan lampu wolfram 320-2200 nm dan sinar ultra violet digunakan lampu hidrogen atau deuterium 190-380 nm (Harjadi W, 1993).
2. Kuvet
Kuvet (sel ) Adalah tempat disimpannya larutan sampel yang akan diukur serapannya, kuvet ini diletakkan pada jalan cahaya dari monokromator. Adapun syarat khusus yang harus dipenuhi , yaitu :
a. Tidak berwarna (agar dapat mentransmisikan semua cahaya) b. Permukaannya sejajar
c. Inert (tidak bereaksi terhadap bahan kimia) d. Tidak rapuh
e. Tidak menyerap cahaya
25
3. Monokromator
Monokromator adalah alat yang akan memecah cahaya polikromatis menjadi cahaya tunggal (monokromatis) dengan komponen panjang gelombang tertentu (Harjadi W, 1993).
4. Detektor
Detektor berfungsi sebagai menangkap sinar yang diteruskan oleh larutan. Sinar akan kemudian diubah menjadi sinyal listrik oleh amplifier dan dalam rekorder akan ditampilkan dalam bentuk angka pada komputer (Harjadi W, 1993).
5. Rekorder
26
III. METODOLOGI PENELITIAN
A. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan Agustus 2013 sampai Febuari 2014 dengan tahapan kegiatan, yaitu pengambilan sampel, isolasi dan identifikasi bakteri Coliform dan Escherichia coli, serta analisis perhitungan jumlah bakteri menggunakan Spektrofotometer UV-Vis dilakukan di Laboratorium Biomassa, Universitas Lampung.
B. Alat dan Bahan
27
Bahan utama yang digunakan pada penelitian ini adalah air dari 3 depo air minum kemasan isi ulang di sekitar Kecamatan Rajabasa dari 3 Kelurahan yaitu Kelurahan Rajabasa Pramuka, Kelurahan Kampung Baru, dan Kelurahan Gedong Meneng. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi bakteri
Escherichia coli murni lisensi ATCC (American Type Culture Collection) Remel Culti-Loop di bawah naungan Remel Inc USA, Brilliant Green Lactosa Bile (BGLB), Eosin Methylen Blue (EMB), Lauryl Tryptose Broth (LTB), Escherichia coli (Ec) Broth, BaCl2 1 %, H2SO4 1 %,air salin, alkohol 70%, spritus, larutan kristal violet, larutan iodin, etanol 95%, larutan safranin, akuades, akuabidest, plastik wrab, alumunium foil, kertas label, kapas, dan tissue.
C.Prosedur Penelitian 1. Persiapan Awal
28
2. Teknik Pengambilan Sampel
Sampel yang berupa air diambil dari 3 depo air minum kemasan isi ulang di sekitar Kecamatan Rajabasa dari 3 Kelurahan yaitu Kelurahan Kampung Baru, Kelurahan Gedong Meneng, dan Kelurahan Rajabasa Pramuka. Galon
dibersihkan dengan alat pembersih galon yang telah disediakan pada depo tersebut. Kemudian diletakkan galon yang sudah bersih tersebut di tempat sinar UV bertujuan untuk mematikan mikroba di dalam galon tersebut. Lalu galon di isi air depo tersebut hingga penuh. Selanjutnya air dari depo tersebut dibawa ke laboratorium untuk di analisis. Teknik sampling yang kedua dari 2 depo
29
Kecamatan Rajabasa
Kelurahan Kampung Baru
Kelurahan Gedong Meneng
Kelurahan Rajabasa Pramuka
A1
A2
A3
B1
B2
B3
C1
C2
30
3. Isolasi bakteri Coliform dan Escherichia Coli menggunakan metode cawan gores.
3.1 Isolasi bakteri Coliform
a. Uji Pendugaan Coliform (Presumptive coliform)
Sebanyak 1,75 g LTB dilarutkan dalam 50 mL akuades dan dihomogenkan menggunakan magnetic stirer, kemudian disterilisasi dengan autoclave selama 15 menit pada suhu 121 C . Setelah tahap pembuatan media LTB dilakukan, selanjutnya disiapkan pengenceran 10-1 dengan cara
31
b. Uji Penegasan Coliform (Confirmed Total Coliform)
Media Brilliant green Lactose Bile (BGLB) merupakan media selektif untuk bakteri gram negatif. Sebanyak 2 gram BGLB dilarutkan dalam 50 mL akuades, panaskan dalam hot plate hingga larut dan homogen,
kemudian media ini disterilisasi dengan autoclave. Selanjutnya media BGLB dimasukan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham. Kemudian diambil sebanyak 1 ose dari tabung yang berisi media Lauryl Tryptose Broth yang positif. Lalu diinkubasi selama 48 jam pada suhu 37oC. Selanjutnya dilakukan cara yang sama untuk kontrol positif dan kontrol negatif namun untuk kontrol positif dan negatif cukup
menggunakan 1 tabung saja. Adanya bakteri Coliform ditandai dengan terbentuknya gas di dalam tabung durham dan media tersebut menjadi keruh.
3.2 Isolasi bakteri Escherichia coli a. Uji Pendugaan E. coli
32
kontrol negatif tabung saja. Tabung positif ditandai dengan kekeruhan dan gas dalam tabung durham.
b. Uji Penegasan E. coli
Sebanyak 1,875 gram L-EMB dilarutkan dalam 50 mL akuades, panaskan dalam hot plate hingga larut dan homogen, kemudian media ini disterilisasi dengan autoclave. Selanjutnya media L-EMB dimasukan ke dalam cawan petri dan di dinginkan. Kemudian diambil sebanyak 1 ose dari tabung yang berisi media EC Broth yang positif dan digoreskan (streak ) ke dalam media L-EMB. Lalu diinkubasi selama 48 jam pada suhu 37 oC. Hasil uji positif untuk E.coli ditandai dengan terbentuknya koloni hitam atau hijau metalik pada bagian tengah media.
33
4. Identifikasi E. coli
4.1 Uji Morfologi
Uji morfologi dengan cara melihat makroskopik dan mikroskopik dari setiap koloni E. coli. Uji morfologi secara makroskopik dilakukan tanpa
menggunakan alat atau secara langsung untuk mengamati warna koloni, ukuran, bentuk, margin, dan permukan sel mikroba tersebut. Sedangkan uji morfologi secara mikroskopik dilakukan dengan cara pewarnaan gram.
4.2 Pewarnaan gram
Pewarnaan gram ini bertujuan untuk membedakan kelompok bakteri gram positif dan negatif. Kultur bakteri dari media L-EMB dioleskan setipis mungkin pada object glass dan diberi setetes air steril untuk membantu menyebarkan bakteri secara merata pada object glass. Setelah itu olesan bakteri dibiarkan mengering dan difiksasi di atas api bunsen sampai olesan bakteri benar-benar kering, lalu ditutup dengan cover glass. Kemudian ditambahkan kristal violet, dibiarkan selama 1 menit, dan dicuci dengan air mengalir. Lalu ditambahkan larutan iodin, dibiarkan terendam selama 1 menit, dan dicuci kembali dengan air mengalir. Selanjutnya dilakukan
dekolorisasi (penghilangan warna) dengan menggunakan alkohol 95 % hingga seluruh warna biru menghilang (kira-kira 30 detik), lalu dicuci kembali
34
diamati di bawah mikroskop cahaya dengan menggunakan lensa okuler 40x dan lensa obyektif 100x. Jika penampakan sel berwarna ungu, maka bakteri bersifat gram positif, tetapi jika berwarna merah bersifat gram negatif.
5. Pembuatan Larutan Baku McFarland 0.5 (Andrews, 2008)
Larutan baku McFarland terdiri atas dua komponen, yaitu larutan BaCl2 1 % dan H2SO4 1 %. Sebanyak 0,5 mL larutan BaCl2 1 % dicampurkan dengan 99,5 mL larutan H2SO4 1 % dan dikocok hingga homogen. Kekeruhan larutan diukur pada panjang gelombang 600 nm dengan menggunakan akuades sebagai blankonya. Nilai absorban larutan baku harus berada di kisaran 0,08 sampai dengan 0,13. Larutan baku McFarland 0,5 ekuivalen dengan suspensi sel bakteri dengan konsentrasi 1,5 × 106 CFU/mL.
6. Analisis perhitungan jumlah sel bakteri secara Spektrofotometer
Hasil pengamatan laboratorium yang diperoleh dalam dua kategori yaitu hasil pengamatan yang bersifat kualitatif dan kuantitatif. Nilai pengamatan kualitatif akan disajikan dalam bentuk gambar sedangkan analisis kuantitatif dilakukan dengan menggunakan metode spektrofotometer. Sebanyak 0,8 gram Nutrient Broth dilarutkan dalam 100 mL akuades, panaskan dalam hot plate hingga larut dan homogen, kemudian media ini disterilisasi dengan autoclave. Atur pH media pada pH 7,0 dengan menggunakan larutan buffer. Setelah tahap pembuatan media Nutrient Broth dilakukan selanjutnya analisis cemaran mikroba secara
35
59
V. SIMPULAN DAN SARAN
A. Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, dapat ditarik simpulan sebagai berikut :
1. Hasil analisis kualitatif menunjukan bahwa 3 depo di kecamatan rajabasa mengandung bakteri Coliform dan Escherichia coli.
2. Kualitas 3 depo air minum kemasan isi ulang tergolong tidak baik dikarenakan banyak terdapat jumlah bakteri Coliform dan E. coli yang tidak sesuai dengan persyaratan kualitas air minum menurut Peraturan Menteri Kesehatan RI No.492/Menkes/PER/IV/2010.
60
B.Saran
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, pada penelitian selanjutnya perlu disarankan untuk :
1. Menggunakan metode selain analisis Spektrofotometer UV-Vis untuk mendapatkan jumlah koloni bakteri yang hidup.
61
DAFTAR PUSTAKA
Agustian.2009.Pertumbuhan Bakteri.
http://educorolla2.blogspot.com/2009/03/pertumbuhan-bakteri.html (diakses pada tanggal 10 maret 2013).
Andrews, J. M. 2008. BSAC standardized disc susceptibility testing method (version 7). Jurnal Antimicrob Chemother.56:60-76.
Azwar, Asrul. 1996. Pengantar Ilmu Kesehatan Lingkungan. Mutiara Sumber Widya. Jakarta.
Chandra, B. 2007. Pengantar Kesehatan Lingkungan. EGC. Jakarta.
Cooper, G.M. and R. E. Hausman. 2007. An overview of cells and cell research. In The cell: A molecular Approach (4th Edition). Washington D.C. ASM Press, pp 3-42.
Day, Jr, R. A., and A. L. Underwood. 1986. Analisis Kimia Kuantitatif. Erlangga. Jakarta
Departmen Kesahatan RI. 2002. Syarat- syarat dan Pengawasan Kualitas Air Minum. PerMenkes RI No. 907/MenKes/SK/VII/2002. Departemen Kesehatan. Jakarta. Dwee, P. 2010. Bakteri Coliform Fekal.
http://www.bangkoyoy.com/2010/10/bakteri-coliform-fekal-coliform/, diakses pada tanggal 7 Maret 2013. Dwidjoseputro. 1990. Dasar-dasar Mikrobiologi. Djambatan. Jakarta.
Dwiyana, D., dan Risco, B. Gobel, 2010, Penuntun Praktikum Mikrobiologi Umum. Jurusan Biologi Universitas Hasanuddin, Makassar.
62
Kacaribu, K. 2008. Kandungan Kadar Seng (Zn) dan Besi (Fe) Dalam Air Minum Dari Depot Air Minum Isi Ulang Air Pegunungan Sibolangit di Kota Medan. Tesis. FMIPA USU. Medan.
Kelly. 1951. Microbiology 2nd Edition. Appleeton Century-Crofts. New York. p 379-380
Khopkar, S. M. 2002. Konsep Dasar Kimia Analitik. UI-Press. Jakarta. Krisno, agus, 2011, Pertumbuhan Mikroba.
http://www.aguskrisno.blog.wordpress.com, (diakses pada tanggal 10 maret 2013).
Linsley, R. K dan Franzini, J. 1989. Teknik Sumber Daya Air. Terjemahan Djoko Sasongko. Erlangga. Jakarta.
Madigan M. T., J. M. Martinko and T. D. Brock. 2006. Brock Biology of Microorgnisms. Pearson Prentice Hall. New Jersey.
Pelczar, M.J. dan E.C.S. Chan. 2006. Dasar-Dasar Mikrobiologi Jilid 2. Jakarta. UI Press.
Prawiro, H.1989. Ekologi Lingkungan Pencemaran. Satyawacana. Semarang. Prescott, L.M. 2002. Prescott-Harley-Klein: Microbiology 5th Edition. USA: The
McGrawth-Hill Companies.
Pitojo, S. dan E. Purwantoyo. 2003. Deteksi Pencemar Air Minum. Ungaran. Aneka Ilmu.
Purnomohadi, A. 2011. Potensi Antibakteri dan Analisis EmulsifikasiBiosurfaktan dari Isolat Bakteri Lokal. Skripsi. Institut Pertanian Bogor. Bogor
Ruth, M. 2009. Escherichia coli Dalam Kehidupan Manusia. Journal BioTrends Vol 4(1), pp 12.
Sastrohamidjojo Hardjono .1985. Kromatografi. Liberty Yogyakarta. Yogyakarta. Schlegel, H.G. dan K. Schmidt. 1994. Mikrobiologi Umum. Yogyakarta. Gajah Mada
University Press.
63
Slamet, J. S. 1994. Kesehatan Lingkungan. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta.
Suhartono, M.T. 1989. Enzim dan Bioteknologi. PAU Bioteknologi IPB. Bogor.
Supardi dan Sukamto. 1999. Mikrobiologi : Pengolahan dan Keamanan Pangan. Jakarta.
Suriawiria, U. 1996. Mikrobiologi Air dan Dasar-Dasar Pengolahan Air Buangan Secara Biologis. Penerbit Alumni. Bandung.
Sutrisno, C. Totok dan Suciastuti, Eni. 2000. Teknologi Penyedian Air Bersih. Rineka Cipta. Jakarta.
Sumarsih, Sri, 2003, Mikrobiologi Dasar, Jurusan Ilmu Tanah Fakultas Pertanian Upn Veteran. Yogyakarta.
Suyono, 1993. Pengolahan Sumber Daya Air. Fakultas Geografi Universitas Gajah Mada.Yogyakarta.
Volk, W.A. dan M.F. Wheeler. 1993. Mikrobiologi Dasar, Jilid 1, Edisi kelima. Alih bahasa oleh Soenarto Adisoemarto, Ph.D. Erlangga. Jakarta.
Yudhabuntara, doddi, 2003, Mikrobiologi.
www.geocities.com/kesmavetugm/pengendalia.doc, (diakses pada tanggal 10 maret 2013).
Yulianti, ON. 2009. Kajian Aktivitas Dan Antimikroba Ekstrak Biji, Kulit Buah, Batang, Dan Daun Tanaman Jarak Pagar. Skripsi. Fakultas Teknologi Pertanian IPB. Bogor.
W. Harjadi. 1993. Ilmu Kimia Analitik Dasar. PT.Gramedia Pustaka Utama. Bogor. Wirahadikusumah, M. 1985.Biokimia Metabolisme Energi, Karbohidrat, Dan Lipid.
ITB. Bandung, pp 45.
