FORMULASI SEDIAAN GEL DARI
EKSTRAK ETANOL BUAH BELIMBING WULUH
(Averrhoa bilimbi Linn.) DAN UJI AKTIVITASNYA
TERHADAP BEBERAPA BAKTERI PENYEBAB JERAWAT
SKRIPSI
OLEH:
RABIATUL HADAWIYAH M.
NIM 081501023
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
FORMULASI SEDIAAN GEL DARI
EKSTRAK ETANOL BUAH BELIMBING WULUH
(Averrhoa bilimbi Linn.) DAN UJI AKTIVITASNYA
TERHADAP BEBERAPA BAKTERI PENYEBAB JERAWAT
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
RABIATUL HADAWIYAH M.
NIM 081501023
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
FORMULASI SEDIAAN GEL DARI EKSTRAK ETANOL BUAH BELIMBING WULUH (Averrhoa bilimbi Linn.) DAN UJI AKTIVITASNYA
TERHADAP BEBERAPA BAKTERI PENYEBAB JERAWAT Oleh:
RABIATUL HADAWIYAH NIM 081501023
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Pada Tanggal: 23 Juli 2012
Pembimbing I, Panitia Penguji:
Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si., Apt., Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan nikmat, rahmat, karunia dan ridhoNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Formulasi Sediaan Gel Dari Ekstrak Etanol Buah Belimbing Wuluh
(Averrhoa bilimbi L.) Dan Uji Aktivitasnya Terhadap Beberapa Bakteri Penyebab Jerawat”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar
Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini, penulis juga mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku
Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan bantuan dan fasilitas selama pendidikan sekaligus sebagai Ketua penguji yang
telah memberikan saran, arahan, kritik dan masukan kepada penulis dalam penyelesaian skripsi ini. Ucapan terima kasih juga disampaikan kepada Ibu Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si., Apt., dan Ibu Dra. Erly Sitompul, M.Si., Apt., selaku
pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan dan nasehat selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Ucapan terima kasih juga
disampaikan kepada Bapak Drs, Suryanto, M.Si., Apt., dan Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan saran, arahan, kritik dan masukan kepada penulis dalam penyelesaian skripsi ini. Penulis juga
tidak lupa mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tulus kepada Ayahandaku Sulaiman Effendi Matondang dan Ibundaku tersayang Tuti Wildani
Penulis menyadari bahwa tulisan ini masih memiliki banyak kekurangan,
oleh karena itu dengan segala kerendahan hati penulis bersedia menerima kritik dan saran yang membangun pada skripsi ini. Akhirnya, penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan, Juli 2012 Penulis,
FORMULASI SEDIAAN GEL DARI EKSTRAK ETANOL BUAH BELIMBING WULUH (Averrhoa bilimbi Linn.) DAN UJI AKTIVITASNYA
TERHADAP BEBERAPA BAKTERI PENYEBAB JERAWAT ABSTRAK
Buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) secara tradisional telah digunakan sebagai antibakteri untuk penyakit alergi pada kulit seperti ruam pada wajah, bisul dan jerawat. Buah belimbing wuluh mengandung flavonoid dan tanin (senyawa antibakteri), yang diduga dapat berperan sebagai senyawa aktif anti jerawat. Ekstrak etanol buah belimbing wuluh diformulasi menjadi sediaan gel, sediaan gel dipilih karena bening, mudah mengering membentuk lapisan film yang mudah dicuci dan memberikan rasa dingin di kulit. Tujuan penelitian untuk mengetahui stabilitas formulasi sediaan gel ekstrak buah belimbing wuluh sebagai antijerawat.
Metode penelitian yang dilakukan meliputi: karakterisasi simplisia buah belimbing wuluh, pembuatan ekstrak etanol buah belimbing wuluh dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 80%, formulasi sediaan gel ekstrak etanol buah belimbing wuluh menggunakan basis gel HPMC 4000, evaluasi sediaan dan uji aktivitas antibakteri terhadap bakteri Propionibacterium acne dan
Staphylococcus epidermidis dengan metode difusi agar menggunakan pencadang kertas.
Berdasarkan hasil penelitian terhadap karakterisasi simplisia buah belimbing wuluh, diperoleh kadar air 8,63%; kadar sari yang larut dalam air 35,04%; kadar sari yang larut dalam etanol 31,83%; kadar abu total 5,04% dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,36%. Hasil evaluasi sediaan secara fisik stabil selama penyimpanan 35 hari pada suhu kamar, homogen, pH relatif stabil dan terdapat hasil negatif pada uji iritasi. Hasil uji aktivitas antibakteri sediaan gel yang efektif yaitu sediaan gel yang mengandung 20% ekstrak etanol buah
belimbing wuluh, memberikan diameter zona hambat rata-rata 15,00 mm terhadap bakteri Propionibacterium acne dan memberikan diameter zona hambat rata-rata 16,50 mm terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis. Dari hasil penelitian bahwa gel ektrak etanol buah belimbing wuluh dapat digunakan untuk mengobati jerawat.
THE GEL FORMULATION OF ETHANOL EXTRACT OF BILIMBI FRUITS (Averrhoa bilimbi Linn.) AND TEST ACTIVITIES
OF SOME BACTERIA CAUSE ACNE ABSTRACT
Bilimbi fruits (Averrhoa bilimbi Linn.) traditionally have been used as an antibacterial for diseases such as allergic skin rash on the face, boils and acne. bilimbi fruits contain flavonoid and tannin (antibacterial compounds), which supposedly can act as an active anti acne compound. Ethanol extract of bilimbi fruits was formulated into gel, gel was chosen because of clear, easy to dry forming film layer that easily washable and giving the cold on the skin. The purpose of this research was to know the stability of bilimbi fruits ethanol extract gel formulation as anti acne.
Research methods included: characterization simplicia of bilimbi fruits, preparation of bilimbi fruits ethanol extract by maceration using 80% ethanol solvent, gel formulation of bilimbi fruits ethanol extract using gel base HPMC 4000, evaluation of gel and antibacterial activity against Propionibacterium acne bacteria and Staphylococcus epidermidis by agar diffusion method using paper disc.
Based on the results of research on the characterization simplicia of bilimbi fruits water content of 8.63%; levels of water-soluble extract 35.04%; levels in ethanol-soluble extract 31.83%; total ash content 5.04% and acid insoluble ash content 0.36%. Evaluation results are physically stable dosage during 35 days storage at room temperature, homogen, pH was relative stable and there is a negative result in irritation test. The results of antibacterial activity test the most effective gel which gel containing 20% ethanol extract of bilimbi fruits give the diameter of inhibitory zone average of 15.00 mm against bacteria
Propionibacterium acne and give the diameter of inhibitory zone average of 16.50 mm against bacteria Staphylococcus epidermidis. These result suggested that ethanol fruits gel extract of bilimbi fruits can be used to treat acne.
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
HALAMAN JUDUL ... ii
PENGESAHAN SKRIPSI ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... vii
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiv
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Perumusan Masalah ... 3
1.3 Hipotesis ... 3
1.4 Tujuan Penelitian ... 4
1.5 Manfaat Penelitian ... 4
BAB II Tinjauan Pustaka ... 5
2.1 Uraian Tumbuhan ... 5
2.1.1 Sistematika tumbuhan ... 5
2.1.2 Nama Daerah ... 5
2.1.3 Morfologi tumbuhan ... 6
2.1.4 Khasiat tumbuhan ... 6
2.2 Uraian Kulit ... 7
2.2.1 Struktur kulit... 7
2.2.2 Fungsi biologik kulit ... 8
2.2.3 Absorbsi obat melalui kulit ... 9
2.3 Uraian Jerawat ... 10
2.3.1 Penyebab terjadinya jerawat ... 10
2.3.2 Tahap terjadinya jerawat ... 11
2.3.3 Penanggulangan jerawat ... 12
2.4 Uji Aktivitas Antibakteri ... 13
2.5 Uraian Bakteri ... 14
2.5.1 Bakteri Propionibacterium acne ... 14
2.5.2 Bakteri Staphylococcus epidermidis ... 15
2.6 Simplisia ... 16
2.7 Ekstraksi ... 16
2.8 Uraian Gel ... 18
2.9 Preformulasi ... 19
2.9.1 Hidroksi propil metil selulosa ... 20
2.9.2 Propilen glikol ... 20
2.9.3 Metil paraben ... 21
2.9.4 Propil paraben ... 22
BAB III METODE PENELITIAN ... 23
3.1 Alat ... 23
3.2 Bahan ... 24
3.3.1 Pengumpulan sampel ... 24
3.3.2 Identifikasi sampel ... 25
3.3.3 Pengolahan sampel ... 25
3.4 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ... 25
3.4.1 Pemeriksaan makroskopik ... 25
3.4.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 26
3.4.3 Penetapan kadar air ... 26
3.4.4 Penetapan kadar sari larut dalam air ... 27
3.4.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol ... 27
3.4.6 Penetapan kadar abu total ... 28
3.4.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam ... 28
3.5 Skrining Fitokimia ... 28
3.5.1 Pemeriksaan alkaloid ... 29
3.5.2 Pemeriksaan glikosida ... 29
3.5.3 Pemeriksaan saponin ... 30
3.5.4 Pemeriksaan flavonoid ... 30
3.5.5 Pemeriksaan antrakinon ... 30
3.5.6 Pemeriksaan tanin ... 31`
3.5.7 Pemeriksaan steroid/triterpenoid ... 31
3.6 Pembuatan ekstrak ... 31
3.7 Pembuatan Media Untuk Bakteri Uji ... 32
3.7.1 Nutrient agar ... 32
3.7.2 Larutan Nutrient Broth (NB) ... 32
3.8 Pembuatan stok kultur bakteri … ... ... 33
3.8.1 Pembuatan stok kultur bakteri Propionibacterium acne …. 33
3.8.2 Pembuatan stok kultur bakteri Staphylococcus Epidermidis ………... 33
3.9 Penyiapan inokolum bakteri ... 34
3.9.1 Penyiapan inokolum bakteri Propionibacterium acne ... 34
3.9.2 Penyiapan inokolum bakteri Staphylococcus Epidermidis ………. 34
3.10 Sterilisasi alat dan bahan ... .... 34
3.11 Pembuatan larutan uji ekstrak etanol buah belimbing wuluh dengan berbagai konsentrasi ... . 35
3.12 Pengujian Aktivitas Antibakteri Terhadap Ekstrak ... 35
3.12.1 Bakteri Propionibacterium acne ... .... 35
3.12.2 Bakteri Staphylococcus epidermidis ... .... 35
3.13 Pembuatan Formula Sediaan ... ... 36
3.13.1 Pembuatan basis gel ... ... 36
3.13.2 Komposisi formula ... ... 37
3.13.2.1 Cara pembuatan sediaan ... ... 37
3.14 Evaluasi Formula ... .. . 38
3.14.1 Pemeriksaan stabilitas fisik sediaan ... ... 38
3.14.2 Pemeriksaan homogenitas sediaan ... 38
3.14.3 Penentuan pH sediaan ……… 39
3.14.4 Penentuan viskositas sediaan ... .... 39
3.14.5 Uji iritasi terhadap kulit sukarelawan ... .... 39
3.12.6.1 Bakteri Propionibacterium acne ... . 40
3.12.6.2 Bakteri Staphylococcus epidermidis ... 41
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 42
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 42
4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia ... . 42
4.3 Hasil Skrining Fitokimia ... 44
4.4 Hasil Ekstraksi serbuk buah belimbing wuluh ... 45
4.5 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol buah belimbing wuluh Terhadap Bakteri Propionibacterum acne dan Staphylococcus epidermidis Dengan Metode Difusi Agar ….. 45
4.6 Hasil Evaluasi Formula ... 47
4.6.1 Hasil pemeriksaan stabilitas fisik sediaan ... 47
4.6.2 Hasil pengamatan homogenitas sediaan ... 48
4.6.3 Hasil penentuan pH sediaan ... 49
4.6.4 Hasil penentuan viskositas sediaan ... .. 50
4.6.5 Hasil uji iritasi ... .. 50
4.6.6 Hasil uji mikrobiologi sediaan ... .. 51
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... . 54
5.1 Kesimpulan ... . 54
5.2 Saran ... 54
DAFTAR PUSTAKA ... 55
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4.1. Data karakterisasi serbuk simplisia buah belimbing wuluh ... 43
Tabel 4.2. Data hasil Skrinning Fitokimia …... 44
Tabel 4.3. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol buah belimbing wuluh terhadap bakteri Propionibacterium acne dan Staphylococcus epidermidis …... 46
Tabel 4.4. Data pengamatan perubahan bentuk, warna, dan bau sediaan ... 48
Tabel 4.5. Data pengamatan homogenitas sediaan ……….. 48
Tabel 4.6. Data pengukuran pH sediaan ………. … 49
Tabel 4.7. Data viskositas sediaan ... 50
Tabel 4.8. Data uji iritasi ... 51
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman Lampiran 1. Hasil identifikasi tumbuhan ... 58 Lampiran 2. Gambar tumbuhan belimbing wuluh (Averrhoa bilimbí Linn.)
dan buah belimbing wuluh segar ………. 59 Lampiran 3. Gambar simplisia belimbing wuluh (Averrhoa bilimbí Linn.) dan serbuk simplisia belimbing wuluh ……… 60
Lampiran 4. Gambar mikroskopik serbuk simplisia belimbing wuluh
(Averrhoa bilimbí Linn.) ……… 61
Lampiran 5. Gambar sediaan gel ekstrak etanol buah belimbing wuluh
dan basisi gel ……….. ... 62
Lampiran 6. Gambar hasil uji homogenitas ………. 63 Lampiran 7. Gambar hasil uji aktvitas ekstrak etanol buah belimbing
wuluh (Averrhoa bilimbí Linn.) Terhadap bakteri Propionibacterium acne Danbakteri Staphylococcus
epidermidis ……… ……….. 64
Lampiran 8. Gambar hasil uji aktvitas gel ekstrak etanol buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbí Linn.) Terhadap bakteri
Propionibacterium acne Danbakteri Staphylococcus
epidermidis ……… 68 Lampiran 9. Gambar hasil uji aktvitas basis gel dan pengawet
yang dipakai dalam formula Terhadap bakteri Propionibacterium acne Danbakteri Staphylococcus
epidermidis ……… 70
Lampiran 10. Perhitungan pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia ... 71 Lampiran 11. Gambar bagan pembuatan gel ekstrak etanol belimbing
wuluh (Averrhoa bilimbí Linn.) ……… 76 Lampiran 12. Gambar bagan pengujian aktivitas antibakteri ……….. 77
Lampiran 13. Tabel hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol
Lampiran 14. Tabel hasil uji aktivitas antibakteri gel ekstrak buah belimbing wuluh terhadap bakteri Propionibacterium
FORMULASI SEDIAAN GEL DARI EKSTRAK ETANOL BUAH BELIMBING WULUH (Averrhoa bilimbi Linn.) DAN UJI AKTIVITASNYA
TERHADAP BEBERAPA BAKTERI PENYEBAB JERAWAT ABSTRAK
Buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) secara tradisional telah digunakan sebagai antibakteri untuk penyakit alergi pada kulit seperti ruam pada wajah, bisul dan jerawat. Buah belimbing wuluh mengandung flavonoid dan tanin (senyawa antibakteri), yang diduga dapat berperan sebagai senyawa aktif anti jerawat. Ekstrak etanol buah belimbing wuluh diformulasi menjadi sediaan gel, sediaan gel dipilih karena bening, mudah mengering membentuk lapisan film yang mudah dicuci dan memberikan rasa dingin di kulit. Tujuan penelitian untuk mengetahui stabilitas formulasi sediaan gel ekstrak buah belimbing wuluh sebagai antijerawat.
Metode penelitian yang dilakukan meliputi: karakterisasi simplisia buah belimbing wuluh, pembuatan ekstrak etanol buah belimbing wuluh dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 80%, formulasi sediaan gel ekstrak etanol buah belimbing wuluh menggunakan basis gel HPMC 4000, evaluasi sediaan dan uji aktivitas antibakteri terhadap bakteri Propionibacterium acne dan
Staphylococcus epidermidis dengan metode difusi agar menggunakan pencadang kertas.
Berdasarkan hasil penelitian terhadap karakterisasi simplisia buah belimbing wuluh, diperoleh kadar air 8,63%; kadar sari yang larut dalam air 35,04%; kadar sari yang larut dalam etanol 31,83%; kadar abu total 5,04% dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,36%. Hasil evaluasi sediaan secara fisik stabil selama penyimpanan 35 hari pada suhu kamar, homogen, pH relatif stabil dan terdapat hasil negatif pada uji iritasi. Hasil uji aktivitas antibakteri sediaan gel yang efektif yaitu sediaan gel yang mengandung 20% ekstrak etanol buah
belimbing wuluh, memberikan diameter zona hambat rata-rata 15,00 mm terhadap bakteri Propionibacterium acne dan memberikan diameter zona hambat rata-rata 16,50 mm terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis. Dari hasil penelitian bahwa gel ektrak etanol buah belimbing wuluh dapat digunakan untuk mengobati jerawat.
THE GEL FORMULATION OF ETHANOL EXTRACT OF BILIMBI FRUITS (Averrhoa bilimbi Linn.) AND TEST ACTIVITIES
OF SOME BACTERIA CAUSE ACNE ABSTRACT
Bilimbi fruits (Averrhoa bilimbi Linn.) traditionally have been used as an antibacterial for diseases such as allergic skin rash on the face, boils and acne. bilimbi fruits contain flavonoid and tannin (antibacterial compounds), which supposedly can act as an active anti acne compound. Ethanol extract of bilimbi fruits was formulated into gel, gel was chosen because of clear, easy to dry forming film layer that easily washable and giving the cold on the skin. The purpose of this research was to know the stability of bilimbi fruits ethanol extract gel formulation as anti acne.
Research methods included: characterization simplicia of bilimbi fruits, preparation of bilimbi fruits ethanol extract by maceration using 80% ethanol solvent, gel formulation of bilimbi fruits ethanol extract using gel base HPMC 4000, evaluation of gel and antibacterial activity against Propionibacterium acne bacteria and Staphylococcus epidermidis by agar diffusion method using paper disc.
Based on the results of research on the characterization simplicia of bilimbi fruits water content of 8.63%; levels of water-soluble extract 35.04%; levels in ethanol-soluble extract 31.83%; total ash content 5.04% and acid insoluble ash content 0.36%. Evaluation results are physically stable dosage during 35 days storage at room temperature, homogen, pH was relative stable and there is a negative result in irritation test. The results of antibacterial activity test the most effective gel which gel containing 20% ethanol extract of bilimbi fruits give the diameter of inhibitory zone average of 15.00 mm against bacteria
Propionibacterium acne and give the diameter of inhibitory zone average of 16.50 mm against bacteria Staphylococcus epidermidis. These result suggested that ethanol fruits gel extract of bilimbi fruits can be used to treat acne.
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Gaya hidup kembali ke alam (back to nature) menjadi cukup popular saat
ini sehingga masyarakat kembali memanfaatkan berbagai bahan alam, termasuk pengobatan dengan tumbuhan obat. Sudah sejak zaman dahulu masyarakat
Indonesia mengenal dan menggunakan tanaman obatberkhasiat sebagai salah satu upaya untuk menanggulangi berbagai masalah kesehatan, jauh sebelum pelayanan kesehatan formal dan obat-obatan modern menyentuh lapisan masyarakat.
Penggunaan tanaman obat untuk penyembuhan suatu penyakit didasarkan pada pengalaman yang secara turun-temurun diwariskan oleh generasi terdahulu
kepada generasi berikutnya yang lebih dikenal sebagai obat tradisional. Saat ini pemilihan bahan-bahan alami untuk pengobatan didasarkan pada bukti penelitian, sehingga penggunaan bahan-bahan alami diharapkan dapat lebih tepat sasaran
dalam dunia pengobatan. Tanaman berkhasiat obat mempunyai nilai lebih ekonomis dan efek samping lebih kecil dibandingkan dengan obat-obat sintesis,
karena itu penggunaan tumbuhan obat dengan formulasi yang tepat sangat penting dan tentunya lebih aman dan efektif (Wasitaatmadja, 1997).
Di Indonesia tumbuhan buah belimbing wuluh sudah diketahui dengan
baik digunakan sebagai antibakteri untuk penyakit alergi pada kulit. Dalam pengobatan herbal telah dikembangkan untuk pengobatan topikal seperti ruam
dan tanin yang diketahui sebagai suatu senyawa aktif antibakteri (Gunawan dan
Mulyani, 2006).
Jerawat merupakan penyakit peradangan yang terjadi akibat penyumbatan pada pilosebasea yang ditandai dengan adanya komedo, papul, pastul dan bopeng
(scar) pada daerah wajah, leher, lengan atas, dada dan punggung. Peradangan dipicu oleh bakteri Propionibacterium acne, Staphylococcus epidermidis dan
Staphylococcus aureus (Wasitaatmadja, 1997).
Di pasaran sediaan anti jerawat telah banyak beredar dalam bentuk krim, lotion dan gel. Jenis sediaan yang banyak disukai adalah bentuk gel. Sediaan
dalam bentuk gel lebih banyak digunakan karena bening, mudah mengering membentuk lapisan film yang mudah dicuci dan memberikan rasa dingin di kulit.
Gel mempunyai aliran pseudoplastik dan aliran tiksotropik yaitu gel berbentuk padat apabila disimpan dan akan segera mencair bila dikocok. Sediaan gel mempunyai kadar air yang tinggi, sehingga dapat menghidrasi stratum
corneumdan mengurangi resiko timbulnya peradangan lebih lanjut akibat menumpuknya minyak pada pori-pori. Formulasi pada sediaan gel akan
mempengaruhi jumlah dan kecepatan zat aktif yang dapat diabsorbsi. Zat aktif dalam sediaan gel masuk ke dalam basis atau pembawa yang akan membawa obat untuk kontak dengan permukaan kulit. Bahan pembawa yang digunakan untuk
sediaan topikal akan memiliki pengaruh yang sangat besar terhadap absorbsi obat dan memiliki efek yang menguntungkan jika dipilih secara tepat (Lieberman,
Berdasarkan hal tersebut, peneliti ingin menguji aktivitas antimikroba dari
ekstrak etanol buah belimbing wuluh terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acne yang diformulasikan dalam sediaan gel.
1.2 Perumusan Masalah
1. Apakah ekstrak etanol belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Propionibacterium acne
dan Staphylococcus epidermidis?
2. Apakah ekstrak etanol buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) dapat diformulasi dalam bentuk sediaan gel?
3. Bagaimana aktivitas antibakteri sediaan gel dari ekstrak buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) terhadap bakteri penyebab jerawat?
1.3 Hipotesis
1. Ekstrak etanol buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Propionibacterium acne
dan Staphylococcus epidermidis.
2. Ekstrak etanol buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) dapat
diformulasi dalam bentuk sediaan gel.
3. Ekstrak etanol buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) mempunyai aktivitas sebagai antibakteri penyebab jerawat dalam bentuk
1.4 Tujuan Percobaan
1. Mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) terhadap bakteri Propionibacterium acne dan Staphylococcus epidermidis.
2. Memformulasi sediaan gel antijerawat yang mengandung ekstrak etanol buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.)
3. Mengetahui bagaimana aktivitas antibakteri sediaan gel dari ekstrak etanol buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) terhadap bakteri penyebab jerawat.
1.5 Manfaat Penelitian
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tumbuhan
Uraian tumbuhan meliputi, sistematika tumbuhan, nama daerah, morfologi
tumbuhan, khasiat tumbuhan dan kandungan kimia.
2.1.1 Sistematika Tumbuhan
Menurut Tjitrosoepomo (2000), sistematika tumbuhan buah belimbing wuluh diklasifikasikan sebagai berikut :
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta Sub-divisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledoneae Bangsa : Oxalidales Suku : Oxalidaceae
Genus : Averrhoa
Spesies : Averrhoa bilimbiLinn.
2.1.2 Nama Daerah
Nama daerah, Sumatera: Asom belimbing, balimbieng, balimbingan, balimbing ; Jawa: belimbing wuluh, calincing wulet, bhalingbhing bulu ; Bali:
bilimbi, sedangkan dalam bahasalatin disebut Averrhoa bilimbi (Gunawan dan
Mulyani, 2006).
2.1.3 Morfologi tumbuhan
Belimbing wuluh merupakan tanaman berbentuk pohon kecil, tinggi
mencapai 10 m dengan batang yang tidak begitu besar dan mempunyai garis tengah hanya sekitar 30 cm. Ditanam sebagai pohon buah, kadang tumbuh liar dan
ditemukan dari dataran rendah sampai 500 m. Daun majemuk menyirip ganjil dengan 21-45 pasang anak daun. Anak daun bertangkai pendek, bentuknya bulat
telur, ujung runcing, pangkal membundar, tepi rata, panjang 2-10 cm, lebar 1-3 cm,
warnanya hijau, permukaan bawah warnanya lebih muda. Ciri buah belimbing
wuluh yaitu buahnya berbentuk bulat lonjong bersegi hingga seperti torpedo, panjangnya 4-10 cm. Warna buah ketika muda hijau dengan sisa kelopak bunga menempel pada ujungnya. Apabila buah sudah masak, maka buah berwarna
kuning atau kuning pucat.Daging buahnya mengandung banyak air dan rasanya asam.Kulit buahnya berkilap dan tipis.Biji bentuknya bulat telur, gepeng
(Wijayakusuma dan Dalimartha, 2006).
2.1.4 Khasiat tumbuhan
Khasiat dari buah belimbingwuluh ini adalah sebagai obat batuk, gusi
berdarah, sariawan, jerawat, panu dan bisul (Gunawan dan Mulyani, 2006).
2.1.5 Kandungan senyawa kimia
2.2 Uraian Kulit
Kulit merupakan “selimut” yang menutupi permukaan tubuh dan memiliki fungsi utama sebagai pelindung dari berbagai macam gangguan dan rangsangan luar. Fungsi perlindungan ini terjadi melalui sejumlah mekanisme biologis, seperti
pembentukan lapisan tanduk secara terus-menerus, respirasi, pengaturan suhu tubuh, produksi sebum dan keringat, pembentukan pigmen melanin untuk
melindungi kulit dari bahaya sinar ultraviolet matahari, sebagai peraba dan perasa, serta pertahanan terhadap tekanan dan infeksi dari luar (Tranggono dan Latifah, 2007).
2.2.1 Struktur kulit
Struktur kulit terdiri dari tiga lapisan utama, yaitu: Lapisan epidermis,
lapisan dermis dan lapisan hipodermis (Wasitaatmadja, 1997). 1. Lapisan epidermis
Epidermis merupakan bagian kulit paling luar yang palingmenarik untuk diperhatikan dalam perawatan kulit, karena kosmetikdipakai pada bagian
epidermis. Ketebalan epidermis berbeda-bedapada berbagai bagian tubuh, yang paling tebal berukuran 1 milimetermisalnya pada telapak tangan dan telapak kaki, yang paling tipisberukuran 0,1 milimeter terdapat pada kelopak mata, pipi, dahi
danperut. Sel-sel epidermis disebut keratinosit.Epidermis melekat eratpada dermis karena secara fungsional epidermis memperoleh zat-zatmakanan dan cairan antar
stratum spinosum (lapisan taju) dan stratum basalis (lapisan benih)
(Wasitaatmadja, 1997). 2. Lapisan dermis
Lapisan dermis ini jauh lebih tebal daripada epidermis dan tersusun atas
jaringan fibrosa dan jaringan ikat yang elastis. Lapisan ini terdiri atas: a. Pars papilaris, yaitu bagian yang menonjol ke dalam epidermis berisi ujung serabut
saraf dan pembuluh darah ; b. Pars retikularis, yaitu bagian bawah dermis yang berhubungan dengan lapisan hypodermis yang terdiri atas serabut kolagen. Serat-serat kolagen ini disebut juga jaringan penunjang, karena fungsinya dalam
membentuk jaringan-jaringan kulit yang menjaga kekeringan dan kelenturan kulit (Wasitaatmadja, 1997).
3. Lapisan hipodermis
Lapisan ini terutama mengandung jaringan lemak, pembuluhdarah dan limfe.Cabang-cabang dari pembuluh-pembuluh dan saraf-saraf menujulapisan
kulit jangat.Jaringan ikat bawah kulit berfungsi sebagaibantalan atau penyangga bagi organ-organ tubuh bagian dalam dan sebagai cadangan
makanan(Wasitaatmadja, 1997).
2.2.2 Fungsi biologik kulit 1. Proteksi
Serabut elastis yang terdapat pada dermis serta jaringan lemak subkutan berfungsi mencegah trauma mekanik langsung terhadap interior tubuh. Lapisan
berfungsi sebagai barrier terhadap racun dari luar. Mantel asam kulit dapat
mencegah pertumbuhan bakteri di kulit. 2. Thermoregulasi
Kulit mengatur temperatur tubuh melalui mekanisme dilatasi dan
konstriksi pembuluh kapiler dan melalui perspirasi, yang keduanya dipengaruhi saraf otonom. Pusat pengatur temperatur tubuh di hipotalamus. Pada saat
temperatur badan menurun terjadi vasokonstriksi, sedangkan pada saat temperatur badan meningkat terjadi vasodilatasi untuk meningkatkan pembuangan panas. 3. Persepsi sensoris
Kulit sangat sensitif terhadap rangsangan dari luar berupa tekanan, raba, suhu dan nyeri. Rangsangan dari luar diterima oleh reseptor-reseptor tersebut dan
diteruskan ke sistem saraf pusat selanjutnya diinterpretasi oleh korteks serebri. 4. Absorbsi
Beberapa bahan dapat diabsorbsi kulit masuk ke dalam tubuh melalui dua
jalur yaitu melalui epidermis dan melalui kelenjar sebasea dari folikel rambut (Tranggono dan Latifah, 2007).
2.2.3 Absorbsi obat melalui kulit
Tujuan umum pengunaan obat topikal pada terapi adalah untuk menghasilkan efek terapetik pada tempat-tempat spesifik di jaringan epidermis.
Daerah yang terkena, umumnya epidermis dan dermis, sedangkan sediaan topikal tertentu seperti pelembab dan antimikroba bekerja dipermukaan kulit saja
(Lachman, dkk., 1994).
(interselular), menembus sel-sel stratum korneum (transelular), melalui kelenjar
keringat, melalui kelenjar sebasea dan melalui dinding saluran folikel rambut.
2.3. Uraian Jerawat
Jerawat merupakan penyakit peradangan yang terjadi akibat penyumbatan pada pilosebasea yang ditandai dengan adanya komedo, papul, pastul dan bopeng (scar) pada daerah wajah, leher, lengan atas, dada dan punggung. Peradangan
dipicu oleh bakteri Propionibacterium acne, Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus aureus (Mitsui, 1997; Wasitaatmadja, 1997).
2.3.1 Penyebab terjadinya jerawat 1. Hormonal
Sekresi kelenjar sebaseus yang hiperaktif dipacu oleh pembentukan
hormon testoteron (androgen) yang berlebih, sehingga pada usia pubertas akan banyak timbul jerawat pada wajah, dada, punggung, sedangkan pada wanita selain hormon androgen, produksi lipida dari kelenjar sebaseus dipacu oleh hormon
luteinizing yang meningkat saat menjelang menstruasi (Mitsui, 1997). 2. Makanan
Menurut penelitian yang dilakukan oleh sebuah institusikecantikan kulit di Amerika Serikat (Academy of Dermatology) mengatakan bahwa jerawat tidak disebabkan oleh makanan. Tidak ada makanan yang secara signifikan dapat
menimbulkan jerawat, tetapi ternyata sebuah hasilstudi kasus yang terbaru, membuktikan hal yang bertolakbelakang. Para pakar peneliti di Colorado State
bahwa mengkonsumsi terlalu banyak gula dapat meningkatkan kadar insulin
dalam darah, dimana hal tersebut memicu produksi hormon androgen yang membuat kulit jadi berminyak dan kadar minyak yang tinggi dalam kulit merupakan pemicu paling besar terhadap timbulnya jerawat (Mitsui, 1997).
3. Kosmetik
Penggunaan kosmetika yang melekat pada kulit danmenutupi pori-pori,
jika tidak segera dibersihkan akan menyumbat saluran kelenjar palit dan menimbulkan jerawat yang disebut komedo. Kosmetik yang paling umum menjadi penyebab timbulnya jerawat yaitu kosmetik pelembab yanglangsung
menempel pada kulit.
4. Infeksi bakteri
Propionibacterium acnes (Corynebacterium acnes) dan Staphylococcus epidermidis biasanya ditemukan pada lesi-lesi akne. Berbagai strain Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis dapat menghidrolis
trigliserida menjadi asam lemak bebas dan gliserol, asam lemak bebas tersebut memungkinkan terjadinya lesi komedo (Mitsui, 1997).
2.3.2 Tahap terjadinya jerawat
Pada kulit yang semula dalam kondisi normal, sering kali terjadi
penumpukan kotoran dan sel kulit mati karena kurangnya perawatan dan pemeliharaan, khususnya padakulit yang memiliki tingkat reproduksi minyak yang tinggi. Akibatnya saluran kandung rambut (folikel) menjadi tersumbat. Sel
kulit mati dan kotoran yang menumpuk tersebut, kemudian terkena bakteri acne, maka timbulah jerawat. Jerawat yang tidak diobati akan mengalami
peradangan semakin parah, sel darah putih mulai naik ke permukaan kulit dalam
bentuk nanah (pus), jerawat tersebut disebut pastules. Jerawat radang terjadi akibat folikel yang ada di dalam dermis mengembang karena berisi lemak padat, kemudian pecah, menyebabkan serbuan sel darah putih ke area folikel sebasea,
sehingga terjadilah reaksi radang. Peradangan akan semakin parah jika kuman dari luar ikut masuk ke dalam jerawat akibat perlakuan yang salah seperti dipijat
dengan kuku atau benda lain yang tidaksteril. Jerawat radang mempunyai ciri berwarna merah, cepat membesar, berisi nanah dan terasa nyeri. Pastules yangtidak terawat, maka jaringan kolagen akan mengalami kerusakan sampai
pada lapisan dermis, sehingga kulit/wajah menjadi bopeng (Scar) (Mitsui, 1997).
2.3.3 Penanggulangan jerawat
Usaha pengobatan jerawat menurut Wasitaatmadja (1997) dapat dilakukan dengan 3 cara:
1. Pengobatan topikal
Prinsip pengobatan topikal adalah mencegah pembentukan komedo (jerawat ringan), ditujukan untuk mengatasi menekan peradangan dan kolonisasi
bakteri, serta penyembuhan lesi jerawat dengan pemberian bahan iritan dan antibakteri topikal seperti; sulfur, resorsinol, asam salisilat, benzoil peroksida, asam azelat, tetrasiklin, eritromisin dan klindamisin.
2. Pengobatan sistemik
Pengobatan sistemik ditujukan untuk penderita jerawat sedang sampai
3. Bedah kulit
Bedah kulit ditujukan untuk memperbaiki jaringan parut yang terjadi akibat jerawat. Tindakan dapat dilaksanakan setelah jerawat sembuh baik dengan cara bedah listrik, bedah pisau, dermabrasi atau bedah laser.
2.4 Uji Aktivitas Antibakteri
Aktivitas potensi antibakteri dapat ditunjukkan pada kondisi yang sesuai
dengan efek daya hambatnya terhadap bakteri. Ada dua metode umum yang dapat digunakan yaitu Metode difusi dan Metode dilusi (Pratiwi, 2008).
Metode difusi untuk menentukan aktifitas agen antimikroba. Piringan yang
berisi agen antimikroba diletakkan pada media agar yang telah ditanami mikroorganisme yang akan berdifusi pada media agar tersebut. Area jernih
mengindikasikan adanya hambatan pertumbuhan mikroorganisme oleh agen antimikroba pada permukaan media agar.
Metode dilusi terdiri menjadi dua tahap. Tahap awal disebut metode dilusi
cair/broth dilution test. Metode ini mengukur MIC (minimum inhibitory concentration atau kadar hambat minimum, KHM) dan MBC (minimum
bactericidal concentration atau kadar bunuh minimum, KBM). Cara yang dilakukan adalah dengan membuat seri pengenceran agen antimikroba pada medium cair yang ditambahkan dengan mikroba uji. Larutan uji agen antimikroba
pada kadar terkecil yang terlihat jernih tanpa adanya pertumbuhan mikroba uji ditetapkan sebagai KHM. Larutan yang ditetapkan sebagai KHM tersebut
jernih setelah inkubasi ditetapkan sebagai KBM. Tahap selajutnya disebut metode
dilusi padat/solid dilution test. Metode ini serupa dengan metode dilusi cair namun menggunakan media padat (solid). Keuntungan metode ini adalah satu konsentrasi agen mikroba yang diuji dapat digunakan untuk menguji beberapa
mikroba uji (Pratiwi, 2008).
2.5 Uraian Bakteri
Nama bakteri berasal dari kata “bacterion” (bahasa Yunani) yang berarti tongkat atau batang. Sekarang nama itu dipakai untuk menyebut sekelompok mikroorganisme yang bersel satu, berbiak dengan pembelahan diri, serta demikian
kecilnya sehingga hanya tampak dengan mikroskop (Dwidjoseputro, 1988). Bakteri penyebab jerawat umumnya adalah Propionibacterium acne dan Staphylococcus epidermidis.
2.5.1 Bakteri Propionibacterium acne
Dalam penelitian ini salah satu bakteri yang digunakan adalah
Propionibacterium acne. Propionibacterium acne adalah organisme utama yang pada umumnya memberikontribusi terhadap terjadinya jerawat. Adapun
sistematika bakteri Propionibacterium acne menurut Irianto (2006)adalah sebagai berikut:
Divisi : Protophyta
Kelas : Schizomycetes Bangsa : Eubacteriales
Propionibacterium acnes adalah termasuk gram-positif berbentuk batang,
tidak berspora, tangkai anaerob ditemukan dalam spesimen-spesimen klinis, beberapa strain/jenis adalah aerotoleran, tetapi tetap menunjukkan pertumbuhan lebih baik sebagai anaerob. Bakteri ini mempunyai kemampuan untuk
menghasilkan asam propionat, sebagaimana ia mendapatkan namanya (Irianto, 2006).
2.5.2 Bakteri Staphylococcus epidermidis
Sistematika bakteri Staphylococcus epidermidis menurut Irianto (2006) adalah sebagai berikut:
Divisi : Protophyta Kelas : Schizomycetes
Bangsa : Eubacteriales Suku : Micrococaceae Marga : Staphylococcus
Jenis : Staphylococcus epidermidis
Stafilokokus merupakan sel gram positif berbentuk bulat biasanya tersusun
dalam bentuk kluster yang tidak teratur seperti anggur. Staphylococcus epidermidis membentuk koloni berupa abu-abu sampai putih, non patogen, koagulasi negatif, tidak memfermentasi manitol, dapat bersifat aerob dan anaerob
fakultatif. Staphylococcus epidermidis merupakan flora normal pada kulit. Infeksi stafilokokus lokal tampak sebagai jerawat dan infeksi folikel rambut atau abses
2.6 Simplisia
Simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dinyatakan lain, berupa
bahan alam yang telah dikeringkan. Simplisia dibedakan atas simplisia nabati, simplisia hewani dan simplisia mineral (Ditjen POM, 1979).
Simplisia tumbuhan obat merupakan bahan baku proses pembuatan
ekstrak, baik sebagai bahan obat atau sebagai produk. Ekstrak tumbuhan obat dapat berfungsi sebagai bahan baku obat tradisional atau sebagai produk yang dibuat dari simplisia (Ditjen POM, 1979).
2.7 Ekstraksi
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut
sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair. Dengan diketahui senyawa aktif yang dikandung simplisia akan mempermudah pemilihan pelarut dengan cara ekstraksi yang tepat (Ditjen POM, 1995).
Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif dari simplisia nabati atau hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang
tersisa diperlakukan sedemikian rupa hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Ditjen POM, 1995).
Ada beberapa metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut (Ditjen POM, 2000), yaitu:
a. Maserasi adalah proses penyarian simplisia dengan menggunakan pelarut
dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur kamar. b. Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru, yang umumnya
dilakukan pada temperatur ruangan. Prosesnya terdiri dari tahapan
pengembangan bahan, tahapan maserasi antara tahap perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak), terus menerus sampai diperoleh ekstrak
(perkolat) yang tidak meninggalkan sisa bila 500 mg perkolat terakhir diuapkan pada suhu + 50oC.
2. Cara Panas
a. Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan
dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga proses ekstraksi sempurna. b. Sokletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang
umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstrak kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik.
c. Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada temperatur yang lebih tinggi dari temperatur kamar, yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-50oC.
d. Infudasi adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 96-98oC selama 15-20 menit di penangas air dapat berupa bejana infus tercelup
dengan penangas air mendidih.
2.8Uraian Gel
Gel kadang-kadang disebut jeli, merupakan sistem semi padat terdiri dari suspensi yang dibuat dari partikel anorganik yang kecil atau molekul organik yang
besar, terpenetrasi oleh suatu cairan. gel yang mempunyai massa terdiri dari jaringan partikel kecil yang terpisah, gel digolongkan sebagai sistem dua fase (misalnya Gel Aluminium Hidroksida). Gel sistem dua fase, jika ukuran partikel
dari fase terdispersi relatif besar, massa gel kadang-kadang dinyatakan sebagai magma (misalnya Magma Bentonit). Gel maupun magma dapat berupa tiksotropik, membentuk semipadat jika dibiarkan dan menjadi cair pada
pengocokan. Sediaan harus dikocok dahulu sebelum digunakan untuk menjamin homogenitas, hal ini harus tertera pada etiket. Massa gel yang banyak
mengandung air disebut jelly. Gel fase tunggal terdiri dari makromolekul organik yang tersebar serba sama dalam suatu cairan sedemikian hingga tidak terlihat adanya ikatan antara molekul makro yang terdispersi dan cairan (Ditjen POM,
1995).
Dasar gel yang umum digunakan adalah gel hidrofobik dan gel hidrofilik. 1. Dasar gel hidrofobik
Dasar gel hidrofobik umumnya terdiri dari partikel-partikel anorganik, bila ditambahkan ke dalam fase pendispersi, hanya sedikit sekali interaksi antara
2. Dasar gel hidrofilik
Dasar gel hidrofilik umumnya terdiri dari molekul-molekul organik yang besar dan dapat dilarutkan atau disatukan dengan molekul dari fase pendispersi. Istilah hidrofilik berarti suka pada pelarut. Umumnya daya tarik menarik pada
pelarut dari bahan-bahan hidrofilik kebalikan dari tidak adanya daya tarik menarik dari bahan hidrofobik. Sistem koloid hidrofilik biasanya lebih mudah untuk dibuat
dan memiliki stabilitas yang lebih besar. Gel hidrofilik umummnya mengandung komponen bahan pengembang, air, humektan dan bahan pengawet (Ansel, 1989).
Keuntungan sediaan gel :
Beberapa keuntungan sediaan gel (Voigt, 1994) adalah sebagai berikut: - Memiliki kemampuan penyebarannya baik pada kulit
- Memberikan efek dingin, yang dijelaskan melalui penguapan lambat dari kulit - Kemudahan pencuciannya dengan air yang baik
- Jumlah air yang banyak dalam gel akan menghidrasi stratum corneum
sehingga terjadi perubahan permeabilitas stratum corneum menjadi lebih permeabel terhadap zat aktif yang dapat meningkatkan berpenetrasi
zat aktif.
2.9 Preformulasi
Bahan-bahan yang digunakan dalam formula gel ekstrak etanol buah
2.9.1 Hidroksi propil metil selulose (HPMC)
HPMC merupakan turunan dari metil selulosa yang memiliki ciri-ciri serbuk atau butiran putih, tidak memiliki bau dan rasa. Sangat sukar larut dalam eter, etanol atau aseton. Dapat mudah larut dalam air panas dan akan segera menggumpal dan
membentuk koloid. Mampu menjaga penguapan air sehingga secara luas banyak digunakan dalam aplikasi produk kosmetik dan aplikasi lainnya (Rowe, dkk.,
2005).
Gambar 1. Rumus Bangun HPMC (Rowe, dkk., 2005)
HPMC melarut sangat lambat dan sulit, metode yang disarankan sebagai berikut:
Air panas disediakan terlebih dahulu, ditambahkan air panas sebanyak satu
per tiga atau dua per tiga kali dari jumlah HPMC, sebab HPMC mudah larut dalam
air panas dan HPMC di sebar merata pada permukaan air panas. Tambahkan sisa air
dingin, aduk dan dinginkan campuran, kemudian ditambahkan pelarut organik seperti
etanol, propilen glikol atau minyak sebagai peningkat kelarutan, lalu tambahkan air
dapat menyebabkan HPMC benar-benar larut, lalu ditambahkan pelarut organik
seperti etanol, propilen glikol atau minyak sebagai peningkat kelarutan, lalu
ditambahkan air dapat menyebabkan HPMC benar-benar larut.
2.9.2. Propilen glikol
Propilen glikol banyak digunakan sebagai pelarut dan pembawa dalam
tidak stabil atau tidak dapat larut dalam air. Propilen gilkol adalah cairan bening,
tidak berwarna, kental dan hampir tidak berbau. Memiliki rasa manis sedikit tajam menyerupai gliserol. Dalam kondisi biasa, propilen glikol stabil dalam wadah yang tertutup baik dan juga merupakan suatu zat kimia yang stabil bila dicampur
dengan gliserin, air atau alcohol (Rowe, dkk., 2005).
Gambar 2. Rumus Bangun Propilen glikol (Rowe, dkk., 2005)
2.9.3 Metil paraben
Metil paraben memiliki ciri-ciri serbuk hablur halus, berwarna putih,
hampir tidak berbau dan tidak mempunyai rasa kemudian agak membakar diikuti rasa tebal (Depkes, 1979; Rowe, dkk., 2005) .
Gambar 3. Rumus Bangun Metil Paraben (Rowe., dkk, 2005).
Metil paraben banyak digunakan sebagai pengawet dan antimikroba dalam kosmetik, produk makanan dan formulasi farmasi dan digunakan baik sendiri atau
dalam kombinasi dengan paraben lain atau dengan antimikroba lain. Pada kosmetik, metil paraben adalah pengawet antimikroba yang paling sering digunakan. Jenis paraben lainnya efektif pada kisaran pH yang luas dan memiliki
antimikroba dengan panjangnya rantai alkil, namun dapat menurunkan kelarutan
terhadap air, sehingga paraben sering dicampur dengan bahan tambahan yang berfungsi meningkatkan kelarutan. Kemampuan pengawet metil paraben ditingkatkan dengan penambahan propilen glikol (Rowe., dkk, 2005).
2.9.4 Propil paraben
Propil paraben merupakan serbuk kristalin putih, tidak berbau dan tidak
berasa serta berfungsi sebagai pengawet. Konsentrasi propil paraben yang digunakan pada sediaan topikal adalah 0,01-0,6%. Propil paraben efektif sebagai pengawet pada rentang pH 4-8, peningkatan pH dapat menyebabkan penurunan
aktivitas antimikrobanya. Propil paraben sangat larut dalam aseton dan etanol, larut dalam 250 bagian gliserin dan sukar larut di dalam air. Larutan propil
paraben dalam air dengan pH 3-6, stabil dalam penyimpanan selama 4 tahun pada suhu kamar, sedangkan pada pH lebih dari 8 akan cepat terhidrolisis (Rowe., dkk, 2005).
BAB III
METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Fitokimia, Laboratorium Mikrobiologi dan Laboratorium Farmasetika Dasar Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara, Medan.
Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimental
parametrik.Identifikasi tumbuhan dan karakterisasi simplisia dilakukan sebelum pembuatan ekstrak etanol buah belimbing wuluh, kemudian dilanjutkan dengan pembuatan ekstrak etanol buah belimbing wuluh secara maserasi, pembuatan
sediaan gel dari ekstrak etanol buah belimbing wuluh, evaluasi stabilitas sediaannya dan pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol buah belimbing
wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) dan sediaan gel ekstrak etanol buah belimbing wuluh terhadap bakteri Propionibacterium acne dan Staphylococcus epidermidis dengan metode difusi agar menggunakan pencadang kertas.
3.1 Alat
Alat-alat yang digunakan adalah: spektrofotometer Visibel (Dynamica Halo
Vis-10),laminar airflow cabinet (Astec HLF 1200 L),oven (Gallenkamp), autoklaf (Fison), inkubator (Memmert), lemari pendingin (Toshiba), neraca kasar (Ohanus), neraca analitik (Mettler AE 200), mikroskop, pH meter (Trans
Instrumen), viskometer bola jatuh (Haake 597 Gerbruder Berlin), stopwatch, rotary evaporator(Haake D), freeze dryer (Modulio), blender, alat maserasi, alat
pencadang kertas, cawan petri, kapas steril, jangka sorong, mortir, stamfer, spatula
dan peralatan gelas di laboratorium.
3.2 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah serbuk simplisia buah
belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.), etanol 80%, air suling, larutan kloralhidrat, toluen, HPMC 4000, propilenglikol, metil paraben, propil paraben,
bakteri uji: Propionibacterium acne (ATCC 6919), Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228), media nutrient agar (NA), media nutrient brooth (NB). Bahan kimia yang digunakan berkualitas pro analisa, kecuali dinyatakan lain: alfa naftol,
asam klorida pekat, asam asetat anhidrida, asam asetat glasial, asam nitrat pekat, asam sulfat pekat, benzen, besi (III) klorida, bismut (III) nitrat, etanol, etilasetat,
n-heksan, iodium, isopropanol, kalium iodida, kloralhidrat, kloroform, metanol, natrium hidroksida, natrium klorida, natrium sulfat anhidrat, raksa (II) klorida, serbuk magnesium, serbuk zinkum, timbal (II) asetat dan toluena.
3.3 Penyiapan Sampel
3.3.1 Pengumpulan sampel
Pengambilan bahan dilakukan secara purposif yaitu tanpa membandingkan dengan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Bahan yang diambil adalah buah belimbing wuluh yang masih segar, bewarna hijau kekuningan dan ukuran
buahnya (± 6 cm). Sampel yang digunakan adalah buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) yang diperoleh dari Desa Glugur Rimbun, Kecamatan
3.3.2 Identifikasi sampel
Identifikasi sampel dilakukan di Herbarium Medanese (MEDA), Universitas Sumatera Utara.
3.3.3 Pengolahan sampel
Buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi Linn.) yang telah dikumpulkan sebanyak 10 kg dicuci bersih dengan air mengalir, ditiriskan kemudian dipotong
secara melintang. Buah ini dikeringkan di lemari pengering pada suhu 40-600C hingga kering, dimana jika simplisia tersebut sudah kering bila diremas akan hancur, simplisia ditimbang sebagai berat kering, kemudian simplisia diserbuk
menggunakan blender, disimpan dalam wadah plastik yang tertutup rapat dan terlindung dari panas dan sinar matahari.Serbuk simplisia yang diperoleh
sebanyak 600 g.
3.4 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia
Pemeriksaan karakteristik simplisia meliputi pemeriksaan makroskopik,
mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari yang larut air, penetapan kadar sari yang larut dalam etanol, penetapan kadar abu total dan penetapan kadar
abu yang tidak larut dalam asam.
3.4.1 Pemeriksaan makroskopik
Pemeriksaan makroskopik dilakukan pada buah belimbing wuluh
3.4.2 Pemeriksaan mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia buah belimbing wuluh. Sedikit serbuk simplisia ditaburkan di atas kaca objek yang telah ditetesi dengan larutan kloralhidrat dan ditutup dengan kaca penutup,
kemudian diamati di bawah mikroskop.
3.4.3 Penetapan kadar air
Penetapan kadar air dilakukan terhadap serbuk simplisia buah belimbing wuluh untuk mengetahui kadar air yang terkandung dalam buah belimbing wuluh. Sebelum serbuk simplisia dimasukkan ke dalam labu, toluen terlebih dahulu
dijenuhkan dengan cara sebanyak 200 ml toluen dan 2 ml air suling dimasukkan ke dalam labu alas bulat, dipasang alat penampung dan pendingin, kemudian
didestilasi selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml, lalu ke dalam labu tersebut dimasukkan 5 g serbuk simplisia yang telah
ditimbang seksama, labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluen mendidih, kecepatan tetesan diatur 2 tetes untuk tiap detik sampai sebagian besar
air terdestilasi, lalu kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik. Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, selanjutnya tabung penerima dibiarkan
mendingin pada suhu kamar. Setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai
3.4.4 Penetapan kadar sari larut dalam air
Penetapan kadar sari larut dalam air dilakukan terhadap serbuk simplisia buah belimbing wuluh untuk mengetahui kadar senyawa-senyawa larut dalam air yang terdapat pada serbuk simplisia buah belimbing wuluh.
Sebanyak 5 g serbuk yang telah dikeringkan di udara, dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling sampai 1
liter) dalam labu bersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, kemudian disaring. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata, yang
telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah
dikeringkan di udara (Ditjen POM, 1995).
3.4.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
Penetapan kadar sari larut dalam etanol dilakukan terhadap serbuk
simplisia buah belimbing wuluh untuk mengetahui kadar senyawa-senyawa larut dalam pelarut etanol yang terdapat pada serbuk simplisia buah belimbing wuluh.
Sebanyak 5 g serbuk yang telah dikeringkan di udara, dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 95% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, lalu disaring cepat
untuk menghindari penguapan etanol. Sejumlah20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata, yang telah dipanaskan dan
sari yang larut dalam etanol 95% dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan
di udara (Ditjen POM, 1995).
3.4.6 Penetapan kadar abu total
Sebanyak 2 g serbuk yang telah digerus dan ditimbang seksama
dimasukkan dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pemijaran dilakukan
pada suhu 600oC selama 3 jam kemudian didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Ditjen POM, 1995).
3.4.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam
Senyawa-senyawa mineral hasil pemijaran yang telah diperoleh dalam
penetapan kadar abu dididihkan dalam 25 ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring dipijarkan sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu
yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang dikeringkan di udara (Ditjen POM, 1995).
3.5 Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia serbuk simplisia buah belimbung wuluh meliputi: pemeriksaan senyawa alkaloid, glikosida, saponin, flavonoid, antrakinon, tanin
3.5.1 Pemeriksaan Alkaloid
Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia ditimbang, kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring. Filtrat dipakai untuk tes alkaloid.
Diambil 3 tabung reaksi, lalu ke dalam masing-masing tabung reaksi dimasukkan 0,5 ml filtrat. Pada tabung:
a.Ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat
b.Ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff
c. Ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer
Alkaloid disebut positif jika terjadi endapan atau kekeruhan pada paling sedikit 2 tabung reaksi dari percobaan diatas (Ditjen POM, 1989).
3.5.2 Pemeriksaan Glikosida
Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 3 g kemudian disari dengan 30 ml campuran 7 bagian volume etanol 96% dan 3bagian volum air suling ditambah
dengan 10 ml asam klorida 2N.Direfluks selama 30 menit, lalu didinginkan dan disaring.Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II)
asetat 0,4M, lalu dikocok selama 5 menit dan disaring.Filtrat disari dengan 20 ml campuran 3 bagian kloroform dan 2 isopropanol dilakukan berulang sebanyak tiga kali. Kumpulan sari air diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 500C.Sisanya
dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan sisa digunakan untuk percobaan berikut, yaitu 0,1 ml larutan percobaan dimasukkan ke dalam tabung reaksi, diuapkan di
kemudian secara perlahan ditambahkan 2 ml asam sulfat pekat.Glikosida positif
jika terbentuk cincin ungu (Ditjen POM, 1979).
3.5.3 Pemeriksaan Saponin
Sebanyak 0,5 g sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan
ditambahkan 10 ml air suling panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik, timbul busa yang mantap tidak kurang dari 10 menit setinggi
1-10 cm. Ditambahkan 1 tetes larutan asam klorida 2N, bila buih tidak hilang menunjukkan adanya saponin (Ditjen POM, 1979).
3.5.4 Pemeriksaan Flavonoid
Sebanyak 10 g sebuk simplisia kemudian ditambahkan 100 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, filtrat yang
diperoleh kemudian diambil 5 ml lalu di tambahkan 0,1 g serbuk Mg dan 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika terjadi warna merah, kuning, jingga pada lapisan amil
alkohol (Farnsworth, 1966).
3.5.5 Pemeriksaan Antrakinon
Sebanyak 0,2 g serbuk simplisia ditambahkan 5 ml asam sulfat 2N, dipanaskan sebentar, dinginkan. Tambahkan 10 ml benzena, kocok, diamkan.Pisahkan lapisan benzen, saring, filtrat berwarna kuning, menunjukkan
adanya antrakinon.Kocok lapisan benzena dengan 1-2 ml natrium hidroksida 2N, diamkan; lapisan air berwarna merah dan lapisan benzena tidak berwarna
3.5.6 Pemeriksaan Tanin
Sebanyak 0,5 g sampel disari dengan 10 ml air suling, disaring lalu filtratnya diencerkan dengan air suling sampai tidak berwarna. Filtrat yang diperoleh, diambil 2 ml larutan lalu ditambahkan 1 sampai 2 tetes pereaksi besi
(III) klorida.Terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Ditjen POM, 1979).
3.5.7 Pemeriksaan Steroid/triterpenoid
Sebanyak 1 g sampel dimaserasi dengan n-heksan selama 2 jam, lalu disaring.Filtrat diuapkan dalam cawan penguap, pada sisa ditambahkan 2 tetes
asam asetat anhidrida dan 1 tetes asam sulfat pekat.Timbul warna biru atau hijau menunjukkan adanya steroid dan timbul warna merah, pink atau ungu
menunjukkan adanya triterpenoid (Farnsworth, 1966).
3.6 Pembuatan Ekstrak
Serbuk simplisia diekstraksi dengan cara maserasi dengan menggunakan pelarut
etanol 80%. Cara kerja:
Sebanyak 600 g serbuk simplisia dimasukkan ke dalam wadah gelas
berwarna gelap lalu dimaserasi dengan 750 ml pelarut etanol 80% selama 5 hari terlindung dari cahaya matahari sambil sering diaduk, kemudian diserkai, diperas, lalu ampas ditambahkan cairan penyari secukupnya sehingga diperoleh seluruh
maserat sebanyak 1000 ml, kemudian didiamkan selama 2 hari dan dienap tuangkan. Maserat diuapkan dengan bantuan alat penguap rotary evaporator pada
3.7 Pembuatan Media Untuk Bakteri Uji 3.7.1 Nutrient agar
Komposisi: Bacto beef extract 3,0 g
Bacto peptone 5,0 g
Bacto agar 15,0 g
Air suling ad 1 L
Cara pembuatan:
Sebanyak 23 gram serbuk Nutrient Agar (NA) dilarutkan dalam air suling steril sedikit demi sedikit kemudian volumenya dicukupkan hingga 1 L dengan
bantuan pemanasan sampai semua bahan larut sempurna, kemudian disterilkan di autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit (Difco Laboratories, 1977).
3.7.2 Nutrient Broth (NB)
Komposisi: Bacto Beef Extract 3,0 g
Bacto Peptone 5,0 g
Air suling ad 1 L
Cara pembuatan:
Sebanyak 8 gram serbuk Nutrient Broth (NB) dilarutkan dalam air suling steril sedikit demi sedikit kemudian volumenya dicukupkan hingga 1 L dengan bantuan pemanasan sampai semua bahan larut sempurna, kemudian disterilkan di
3.7.3 Pembuatan agar miring
Ke dalam tabung reaksi yang steril dimasukkan 3 ml media nutrient agar steril, didiamkan pada temperatur kamar sampai sediaan membeku pada posisi miring membentuk sudut 45oC, kemudian disimpan dalam lemari pendingin pada
suhu 5oC.
3.8 Pembuatan stok kultur
3.8.1 Pembuatan stok kultur bakteri Propionibacterium acne
Cara kerja:
Satu koloni bakteri Propionibacterium acne diambil dengan jarum ose
steril, lalu diinokulasikan pada permukaan media nutrient agar miring dengan cara menggores, kemudian diinkubasikan pada suhu 35 ± 2oC selama 24 jam
(Ditjen POM, 1995).
3.8.2 Pembuatan stok kultur bakteri Staphylococcus epidermidis
Cara kerja:
Satu koloni bakteri Staphylococcus epidermidis diambil dengan jarum ose steril, lalu diinokulasikan pada permukaan media nutrient agar miring dengan
3.9 Pembuatan inokulum bakteri
3.9.1 Pembuatan inokulum bakteri Propionibacterium acne
Cara kerja:
Koloni bakteri Propionibacterium acne diambil dari stok kultur dengan menggunakan jarum ose steril, kemudian disuspensikan ke dalam 10 ml larutan Nutrient Broth (NB) steril lalu diinkubasikan pada suhu 35 ± 2oC sampai didapat
kekeruhan dengan transmitan 25% menggunakan alat spektrofotometer visible panjang gelombang 580 nm (Ditjen POM, 1995).
3.9.2 Pembuatan inokulum bakteri Staphylococcus epidermidis
Cara kerja:
Koloni bakteri Staphylococcus epidermidis diambil dari stok kultur
diambil menggunakan jarum ose steril, kemudian disuspensikan ke dalam 10 ml larutan Nutrient Broth (NB) steril lalu diinkubasikan pada suhu 35 ± 2oC sampai didapat kekeruhan dengan transmitan 25% menggunakan alat spektrofotometer
visible panjang gelombang 580 nm (Ditjen POM, 1995).
3.10 Sterilisasi Alat Dan Bahan
Alat-alat dan bahan-bahan untuk pemeriksaan mikrobiologi harus
disterilkan terlebih dahulu sebelum dipakai. Alat-alat gelas disterilkan didalam oven pada suhu 170oC selama 1 jam. Media disterilkan di autoklaf pada suhu
121oC selama 15 menit. Jarum ose dan pinset dengan lampu bunsen (Lay, 1994).
3.11 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol Buah Belimbing Wuluh dengan Berbagai Konsentrasi
Sebanyak 5 g ekstrak etanol buah belimbing wuluh ditimbang, lalu ditambahkan etanol 96% hingga volume total 10 ml dan diaduk hingga larut dan didapat konsentrasi 500 mg/ml, kemudian dibuat pengenceran dengan konsentrasi
400, 300, 200, 100, 75, 50 dan 25 mg/ml.
3.12 Pengujian Aktivitas Antibakteri Terhadap Ekstrak
Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan terhadap ekstrak etanol buah belimbing wuluh dengan berbagai konsentrasi. Pengujian ini dilakukan dengan metode difusi agar menggunakan pencadang kertas.
3.12.1 Bakteri Propionibacterium acne
Sebanyak 0,1 ml inokulum dimasukkan ke dalam cawan petri steril,
setelah itu dituang media nutrient agar sebanyak 20 ml dengan suhu 45-50oC, selanjutnya cawan digoyang di atas permukaan meja agar media dan suspensi bakteri tercampur rata. Pada media yang telah padat diletakkan beberapa
pencadang kertas, dipipet 0,1 ml larutan uji ekstrak etanol buah belimbing wuluh dengan berbagai konsentrasi, kemudian diinkubasi dalam inkubator pada suhu 35
± 2oC selama18-24 jam, lalu diukur diameter daerah hambatan (zona jernih) pertumbuhan di sekitar pencadang dengan menggunakan jangka sorong.
3.12.2 Bakteri Staphylococcus epidermidis
Sebanyak 0,1 ml inokulum dimasukkan ke dalam cawan petri steril, setelah itu dituang media nutrient agar sebanyak 20 ml dengan suhu 45-50oC,
bakteri tercampur rata. Pada media yang telah padat diletakkan beberapa
pencadang kertas, dipipet 0,1 ml larutan uji ekstrak etanol buah belimbing wuluh dengan berbagai konsentrasi, kemudian diinkubasi dalam inkubator pada suhu 35 ± 2oC selama18-24 jam, lalu diukur diameter daerah hambatan (zona jernih)
pertumbuhan di sekitar pencadang dengan menggunakan jangka sorong.
3.13 Pembuatan Formula Sediaan 3.13.1 Pembuatan basis gel
Formula dasar gel:
Hidroksipropilmetilselulosa (HPMC) 4000 3,0 g
Propilen glikol 15 g
Metil paraben 0,18 g
Propil paraben 0,05 g
Air suling 81,77 g (ad 100 g)
Cara pembuatan: Air suling sebanyak 20 kali berat HPMC dipanaskan
hingga mendidih, kemudian diangkat dan HPMC dikembangkan di dalamnya selama 15 menit, setelah kembang ditambahkan metil paraben dan propil paraben
3.13.2 Komposisi formula
1 Ekstrak etanol buah belimbing wuluh
3.13.2.1 Cara pembuatan sediaan a. Formula I
Cara pembuatan: ke dalam lumpang dimasukkan 1 g ekstrak etanol buah belimbing wuluh ditambahkan 9 g basis gel sambil gerus sampai homogen. b. Formula II
Cara pembuatan: ke dalam lumpang dimasukkan 2 g ekstrak etanol buah belimbing wuluh ditambahkan 8 g basis gel sambil gerus sampai homogen.
c. Formula III
3.14 Evaluasi Formula
Evaluasi formula meliputi evaluasi fisik dan biologi. Evaluasi fisik meliputi pemeriksaan stabilitas sediaan, pemeriksaan homogenitas, penentuan pH dan viskositas serta uji iritasi pada kulit. Evaluasi biologi meliputi penentuan
aktivitas antibakteri sediaan gel ekstrak etanol buah belimbing wuluh terhadap Propionibacterium acne dan Staphylococcus epidermidis dengan metode difusi
agar menggunakan pencadang kertas.
3.14.1 Pemeriksaan stabilitas fisik sediaan
Pemeriksaan stabilitas sediaan meliputi bentuk, warna dan bau yang
diamati secara visual (Ditjen POM, 1995).
Sediaan dinyatakan stabil apabila warna, bau dan penampilan tidak
berubah secara visual selama penyimpanan dan juga secara visual tidak ditumbuhi jamur. Pengamatan dilakukan pada suhu kamar pada hari ke 0, 7, 14, 21, 28 dan hari ke 35.
3.14.2 Pemeriksaan homogenitas sediaan
Cara: sejumlah tertentu sediaan dioleskan pada dua keping kaca atau
bahan transparan lain yang cocok, sediaan harus menunjukkan susunan yang homogen dan tidak terlihat adanya butiran kasar (Ditjen POM, 1985).
Pengamatan dilakukan pada suhu kamar pada hari ke 0, 7, 14, 21, 28 dan
3.14.3 Penentuan pH sediaan
Penentuan pH sediaan dilakukan dengan mengunakan pH meter.
Cara: alat terlebih dahulu dikalibrasi dengan menggunakan larutan dapar standar pH netral (pH 7,01) dan larutan dapar pH asam (pH 4,01) hingga alat
menunjukkan harga pH tersebut, elektroda dicuci dengan air suling, lalu dikeringkan dengan kertas tissue. Sampel dibuat dalam konsentrasi 1% yaitu
ditimbang 1 gram sediaan dan dilarutkan dalam 100 ml air suling, kemudian elektroda dicelupkan dalam larutan tersebut, sampai alat menunjukkan harga pH yang konstan. Angka yang ditunjukkan pH meter merupakan harga pH sediaan
(Rawlins, 2003).
Pengamatan dilakukan pada suhu kamar pada hari ke 0, 7, 14, 21, 28 dan
hari ke 35.
3.14.4 Penentuan viskositas sediaan
Penentuan viskositas sediaan menggunakan viskometer bola jatuh.
Cara: sediaan dan bola dimasukkan ke dalam tabung gelas dalam. Tabung dan jaket kemudian dibalik, dengan demikian posisi bola berada di puncak tabung
gelas dalam. Waktu yang dibutuhkan bola untuk jatuh di antara dua tanda diukur dengan teliti. Dihitung nilai viskositasnya (Moechtar, 1989).
3.14.5 Uji iritasi terhadap kulit sukarelawan
