Pemanfaatan Chitosan dan Trichoderma harzianum untuk Peningkatan Mutu Benih Pinus merkusii

PEMANFAATAN CEHTOSAIY DAN

Trichoderrrta

haniumm

UNTUK

PENINGKATAN

MUTU

BENIH

Pinus merkmii

PROGRAM PGSCASAR3rANA

TNS'I1'IUT PERTAMIAN B W Q R

RAHAYU WLANDINX. P d t m Chitom d m Trihoderma harzianum

wuk Peningkatm Mutu Benih Pinus merkarssid. DEbimbing oleh Dr. Xr. SUPRlYANTO dm Ir. I G.K, TAPA DARMA, MSc.

Di pasemian, bnih Pinus merksii sangat rentan terhmhp m g a n

Fusaritim sp. sehgai pmyehab penyakit lodoh, yang menyerang h g b &ar atau &d k g semi sehingga semai m j d i rebah, layu dm akhhya mi. Patagen ini, juga mayerang bnifr di p a e m a h setelah k i h ditanam hkgga s e m i h m w 7 minggu, se:@ga plinaungm terhadap h i h dm semai sangat

d i p l u k a n kfiususrrya

~~

m a d e tersebut. Perlindungm t e r W p benih dapat d W & m secara kimiawi yaitu dmgm m m fungisicla dm W e r i s i d a atau balun kimia b. Selain itu juga &pat d i h k i h n secara frayati, dsdnya dengan maggmahm cadawan antagonis.

Ddam p e h i a n ini &&&an plapisan bnih dengin mer~ggunakan

chitosan ymg

be&

dari

e b a k h l i t udmg dm lrersifkt nun toksik ser~zt mnggmikan cendawan antagonis y&u Trichodermu harziunurn, Bebrapa

perlakuan pefapisan knifx ( d e ~ m konsentrasi cbitasazx

dan

teknk i n k u h i ymg k r M ) d k h k a n wtuk rraexlgetahui p n g m h y a terhadap pningkatan vigor

k i h , p m u m b h m semi pinus dm p b m m p patogen ladoh,

Selmh perldum pehpisrtn benih tmyata &pat naeningkatkan kualita

knih (daya kkecmbah, kece- tun&&

dan

k e s f : r " ~ p d a tumbuh), k d t a s

semai (thggi dm

dan-1

d m

mnekan serangm patagen lodoh. B e r h k a n pengujb seclua in :nitro, chitusan d q m kowntmi 2% marnpu m-ht

prtumb- Fmarium sp. tringga 62%, sedimgkm

T.

harziaraztm dapat menghamht perturn- Fusarium sp. hingga 33%. Pada pngujian s e c m ex

vitro, pekpisan knih Bmgm

T.

kapzianztm tanpa diilcuti dengm i n i c u b i

W Y U WULANDINE. Utilization of CWosan and Trichoderma harzianurn to Enhance S d Qu&y of Pinus merkersir'. Under the direction of Dr. lr. SUPiZTYANTO

and

Ir. I G,K, TAPA DARMA, MSG.

Pinus merkzisii is m~~eptibfe to d a q i i - o f f disease in nursery due to soil-

b m e pathgenic h g i (Fusarium sp.), which attacks an root

and

stem of seedling

and causing death. The pat'troga attacks seeds in nufsery just &er seed sowing

until 7 week-old seedlings, so that there

is

a need to protect the 4 s and the seedlings from pathogenic attack during this period. Seed protection could

be

done either c M c d y , i-e. by application of fungicide, bactericide and other

chemicals, or biologically, i.e. using magonistic h g i .

In this research, seeds were coated using chitasan, which

is

a non-toxic

compound that was extracted from shrimp shell. Additionally, Trichoderma hamiurtm, an antagonistic fungus, were used also for coating. Six seed-coating

treatments (%om cambination of wing dfirent concentrations of chitom sand

djfferent incubation techniques) were tested to investigate their e&ts on seed

vigor e-, s d h g growth imgrovernent and damphg-~ffsuppression,

It is found

that all

tested treatments improved seed quality (gemhation,

speed of gerrnination and synchranizatian of emergence), seedling quality ( b i g h t

md biomass) and damping-off suppression. Based on in vitm test, chitosan 1%

inhibited F~l~~miurn sp. growth up to 62%, while

T.

hamianurn up to 33%. In ex

Dengm ini saya m e n y a h W w a tesis yang brju8ul Pemanhtan

Chitom

dan Trichoderma

harzianum untulc P&&t:m Mutu B e d Pinus

merkztsii, &I& knar mempakm hasi kmya d k i d m klm p e d

dipubbikm,

Semua s m k r data dan ~onnasi ymg d i g h tehh dinyatakan secwa

PEMANFAATAN CJEPXTOSAN DAN

Trt'chodexma

kaniaptum

UNTTIK PENINGUTAN

MUTU

BEND3

Rnm

xnexkmii

Tesis

sebagai dab satu syarat mtuk menpmleh gelar M~tgistm Sains pada

Judul Tesis : Pcrnanfnfaatan Chitasan dan I kichderma hurztanum Untuk Peningkatan Mutu Benik Pzntis merhxzi

Nama : Rahayu Wulandini

NRP : PI4500011

Program Studi : llmu Pengetahuan K e h u t a w

Dr. Ir. Supriyanto Ketua

Ir. I G.K. Tapa Darma. MSc Anggota

2 . Ketua Program Studi

Ilmu Penget ahuan Kehutanm

Penulis dil&irkm di Jakarta p d a tanggal 12 Desember 1974 sebagai putri

bungsu

dari

E3apak Dardjak Wirdxqutra dm Ibu hsiyatun Nurwulan.

Pmdidikan sarjaaxa ditempuh di J w w m M a f f a , Hutan, F d d t a s Kehutanan IPB, fdus p d a tzlhun 1997. Pada tahun 200Q pen& mendapt kernpatan wrtuk mlanjutkan ke program q i s t e r sains di Program Studi

I

h

Pengetahm Kehut- Program Pascmmjam IPB. Beasiswa pdidikm pascasarjm

dipemleh

dari

Xndflnesia Forest Seed Project.

Penulis bekerja di Direktorat Perbedm T~ixtaman Hutan, Dkektomt

J d d R e ~ Laban ~ idm Perhutanan SosS, Depmkemen Kchutanan

Puji syukux p d i s pranjatkan k e p h

AH&

SWT atas %gala k d a - N y a sehingga tesis ini &pat diselesaikm Tema y a q dipilih dakm penelitian y m g

dilafcdm sejak txtfan Mwet sampai dewm Agustus 2002 hi hhh peningkatan

mukr benih, d q a n judul P d t m Chitosan

dan

Trichoderma karzianum m u k P&gk&m Mum B e d Pilaus merhsii.

Penulis mengucapkan te- kasih kepada Bapak

Dr.

Ir. Supriyanto dm Bapak fr. i G.K Tapa Damns, MSc s e h b s e n pemtribihg yang tefEah b y &

memk&an pengetahm dan waktunya, serta Bapak Drs. S h n Taka Nuhmma,

MS s e l h dosen pnguji, Terima kasih diucagkm kep& Departemen Kehutwm

y a q teIah mem- kesempatan hagi pnulis untuk: mlmjutlrran studi dm kep& Indonesia Forest Seed Project ymg telah m b & m beasiswa

p e n d i d i i di Program P a s c e a n a IPB, S e b itu pnulis mngucapkan t e h kasih kepada Direktur SEAMEO BXOTROP ymg telah mmgijirrlran penulis untuk

mng@m fasilitas Labratorim SiRrikukur, beserta st& ymg m r n k t u

=lam petielitian Kepada Diyah P u r w h g , p u b menlgucapkm t h kasih am kehsamamya s e h mr*;a perk- Ungkapan twim kas& p n u k

s m p i k a n pula k q d a kedua orangtua, suami serta M a k - k M , atas =gala doa

dan duicungan yang dibakm,

DAFTAR JSI

...

DAFTAR

TABEL

Ki

...

DAFTAR LAMPIRAN Av

PENDAHULUAN

...

1

...

Lam Belak-ang 1

Tujuan Penelitian

...

4 Mipatesis

...

5

TIN JAUAN PUSTAKA

...

6

...

P e n a n g m Benih Pinus merhsii 6

Penyakit Lodoh

...

7

...*... ..***...

PmUuan Benih ,... 8

Pelryliszux Benih k n g a n Chitom

...

.

.

.

9

...

...is..

Pelagisan Be& D e q p Cenda wan. Antagonis

.

.

.

11 BAWAN DAN METODE

...

...d...+... I?

Tempt

dan

Waktu

. .

Pene lit

i

m

...

17 Metode Penel~trrtn

...,...

,.,.

...

$7

Penyedim

..

dan Perbanyakan Ixrokulum Cendawm

...

19

UJI

Anwonisme

in v i m

...*...***...*.*...*.*

20 Pengmh Chitasan T a W p P e wCendawan (uji in vitm)

...

21

...

Perbanyakan I a h l u m Cendawm Patogen -22

Perskpm Media Tanam

...*...

22

...

Pehpisan Be& Pims merkusii

... .

.

23

..

...

UJI Antagonisme ex vitro -27'

...

Pengamatan -27

...

WASXL PENELITIAN 29

Penyediaan dm P ~ ~Imkulum n yCendawm ~

...

29

...

Uji Antaganisme in vitro -33

...

P e n g d

..

Chitasan T e r W p Pertumbufian Cedawan (uji in vitro) 35

...

...

KESIMPULAM DAN S A M 66

...

Kesimpulan 66

...

Saran

...

.

.

.

.

.

.

.

.

.

66

...

2, Perturnbutran Trichoderms hrzianum pa& media PDA

d m

d i a MMN

...

.3 3

5 . Jumlah canidia Trichodrma harzimum seklum dan setelah

priming

...

16, Gejala mangan Woh pada kdi Pinus m e r h i i (a), pre-emergence

dumping-o$f(b)

dan

bdoh batang (c).

. .

.. .. . .

.

.

..

..

.. . .

.. ..

..

.

.

,

.

.

..

..

..

..

.

..

.. ..

..

. .

46

1 7, ;Tun&& benih yang tidak brkwambah pada setiap pexlairw pelapisan knih

...,

60

'18. Trickockrma harziatoum m e h d q i benih ymg berkecambaxx dari patogen

p y e b a b p y a k i t lodoh mMui zone perlindungan yang dikem-ya

Pa-* pertumbuh in vitro Fusarium sp. aleh T hamianurn pda media MEA

...

.

.

...

.

.

...

71

A d i s i s ragam p e n g a d chitosan tmhadap persentas p e e b a t a n tumbuh

Fwarium sp

...

.... ...

7 1

Anafisii ragam pmganrh plapisan knih t m b d q persentaw daya

hrkecambak

...

72

Pmganxh plapisan

benifr

terhdap persentase daya baksambah be&

...

74

...

Pengaruh pelapisan hnih t m M p berat k- total semi (q).

....

75

...

PENDANULUAN

Latar Behkang

Pembaqpman Hutan T- Industri (HTI) ditujukan uxltuk m m p r W

pradukt%tas M a n hutan, Saat

irri

Pinus merkusii (pinus) menduduki pwhgkat kedua sehgzti jenis ymg dtazlam

dalam

program HTI. Luas prmamm per t a b

diperlciralran mencapai 163,160

fia

d q a n kcbut- b i h sebanyak 6.22 1 kg.

Ke~ersediaan Ixdh diuir.wg oleh s u m k be1121 yang ada yaitu sehas 853 ha d e q n praduksi sebaxlyak 3.888 kg per tahun (-hut 200 1).

Keberhzrsh pernbaqwm BTX ditarkukm aleh bmhgai War, & satu dimtmya &d& ketersedh knifx yang tremtu didam jmhh y q cukup*

Mum bib mexrjadi War p m a t u k e k k i l a n pemmm secara ekonomis.

Pengunaan knih krmutu rendah &an menghasilkm tamma yang ti& seragam

d q m pememse

tumiwh

rexxrjah,

d m

dapat mmjadi w m k inokukrm bagi penyakit

yang tmbawa aleh hnih (I@ 2000). Qkh karma itu, pgguman h i h k m r r t u mjd p t i n g . Mutu bmih yang tinggi dicirilcan oleh : (1) thgkat k m w a h ymg

tinggi, (2) daya b r k m b a h yang tinggi, (3) vigor ymg ti%@, (4) bbns dari

p y a k i t yang terbawa

dan

( 5 ) k a s a l dari sumbf3r k d h yang dapat

c%ipext:anggungjawabEran.

Di pmamh, knih pinus sangat rentan t e r W p s m q p patogen lodoh. Patogen W h mngakthtkan twrgian akar atau pmgkal latang semai m b w u k

1 9971, x h g g a %lama @ode tersebut d i p r l h prliiwgm twlmdap knih dm sen-&

Perlindungm t e r M p

benih

dap& ditaLkan se@afa W w i dengan

nmam- fmgiskh dan W&ida atau bzahan kirnia

fain

yang m r q u mmkm

atau macegah perhim* patagen sejak dishpan h g g a kkwambh.

Pmlindungan yang K i a ciapat d i U h secara byati yaitu deagan m e n g g d a n

agen byati mtuk meq&&an patogen hrih

d m

patogen pe@uni tanah,

&hya d e w m e q g m d m cendawm antagonis (Copeland dan McDonald 1985). Pengaddim hyati akhir-akhir hi nrendapat pbth bar d q a n maakin

mningbtnya perhatian mush tmhadap lhgkmgan &'bat madah ymg

ditimbdkm akh pggunaan bahan kimia, Tidak *perti pestisida sintetik yang

&gat m t w n u h mikroorgmkme dalam kkmm yang luas, perkhan

trerrih

secasa hay& mdiki target yang s a p i t yaltu h y a rnembu13u.h satu jenirr yang spesifk

selling@ lllemh- k e belrob@ tax&

dan

r e a n .

PmMuan brill Sebe1~1ll p- nxempakan bentuk dai peningkm mutu

b e d (Taylor ef al. X 998). Pehgkatan mutu benib diBeEmisitran sehagai

~~

paska p e n w.tuk menhgbtkm perkecmbahan bmih

dan

pertwnbufian semi a m

m j a d h W h sehgai a g a pembawa balm lain drht- untuk

perlindungan tmamm. D&ki ixai mencrrkup as& yaitu I ) p e r m 'tridrasi

@riming), 2 ) plapisan

be&

(seed coating) dan 3) pembersihm h i h d a i

kotoradkantaminan dan seleksi h k k m kriteria 6sik f seed condifioning).

Teknik pekpisan ken& teM dkm- mxsa k o d pada knih

antagonis Trichoderma karzianum dm agen peqikaz Pelgel, telah munjutrlran Mil.

y m g nyata d a b mmgendahn m g a n patogen bdoh (Taylor et al. 19941, Pada

benih maman kehutanan teknik hi helm banyak dizlpbikan dan xrrasih d d m &p pexcabazur (Thomen dan Schmidt 1999). Gurer (1998) pr?r~abnan

pelqisan

k d h

pinus d q a n mmggrmakan cendawm

T.

pseudobningii dm %en p n g b t chitosan-lignosuiphomte unhrk mngeradalikm penyakit loduh ymg dbbabkan oteh F w r i u m acuminatum.

Beberap mi menmjukkan bahwa chitom biapolimer yang k m s d dari

elat& kulit udang

d m

h i f a t non toksik, dikategofikrur setlagai green chemicad

(van dm Wolf 2002 a) ymg mmpu n m g b n h t pertam- kbmpa jenis cendawan patogen,

twmxiuk

p a t o p p q e b b penyakit ladah ( l d k m e et al.

1999; Reddy et ai. 1999; Seo ef 01. $992). Chi~asan yang d i a p h ~ k m melalui pelapim W, penyempxotm dam, pelapkn benih

dan

penam- kdafam

tanafi

ddqmrktur &pat mnghluksi ketah2anan hang terfiadap mmgm F. o x y s p u m ,

seperti yang dicoWan gada tanman tomt ( m u

d m

T h d u f t 1992, diacu

dalm La5rme er a!, 1999). Perlakuan pendahduan d q m chitosan juga

mnhgkatkm respon ketahnm semi t o m mMui pmghmhtan pertumb- patogen di jdngm a k a terlurtr

dm

mmgaktifb s e j d realcsi ptaham tenmsuk p e d m m stdtural, Chitom

~~

beperm b xbagai anti jamur

juga mmpxlcuat sistem akw

dan

&tang serta kpem S R : ~ @ pupuk yang dapat

meninmkarr ~ " k e c m b h m h ~ r n m ~ .

Trichodemu spp. $elah Ima d i k e d sbagai agen t>iokontxol yang

baik

kmna

penhgkatan pertumbuhm tanaman. Bebrapa penelit& telah dl&ukan dm

mnunjuXc.Jcan W w a Trichodma sp. mampu mmghnbat p r k u m b m patogen

penyetb penyakit lodoh Rhizoctunia sg. dm Fusa~iurn sp. p d a

d

pinus (Hemwan 1996)

dm

T, hnianupn srta T, pseudohningii mampu mnghmbat F, oxysporerm dan R solmi (A~kllliid 1997).

Sehubmgm dmgm hid

di

atas &a cfhakan pexh unkrk m e W 8 n peneWm tentang perMum pra tanam Zrexxifi P i m merkusii dm k m m & h

penerapaffnya t w W p lmih-benih tamman Irehutanan h b y a dab upaya medngkatb mum I d h xfiingga diharapkzm bib p g

ditanam

&pat tahan dari

penyakit Woh yang m n y m g d i h p awal prtumbihmya

dan

selastjutnya &pat

t e r n tumbuh dan k k e m h g menjadi bibit yang sehat. Bahan k h i a dan cendawan antagonis yang akan d i u j h d z h n pelitian ini adalah chitasan dan

T.

hurzianerm.

Tujuan Penelitian

Penelitiaxx

ini

tlertujuan ~ u m g u j i k e k k t i h s pehpisan

trenih

P i m

merkusii d q m mmggmmkan chitosan dan &wan aniagonis

T

harzianum &dam mnmngkath vigor be& p e r t u m t > h semai pinus

dan

m m e h m g a n patogen

Wipotsis

Hipotesis yary; diuji d a l m penelltian

ini

adaIah

pelapisan hnih Pinus merhsii dengm chitusazx

dim

T. harzianuna m e n h g k a h vigor knih

dan

pertumb- senmi

TTNJAUAN

PUSTAKA

Penarngolnan Benih Pirrm mrkmii

Pinus rnerhii mmpakm jenis asli p o b n hutan Indonesia detxgan s e h alaminya di Aceh, s e k h Danau Taba (Sumatera Utara) dm K c h i (Jamb$ Jerk

ini tehh d i k e m w m di Jawa di whyah kerja PT. Perhutmi. S u m k h i h pinw

kmda di Ctjambu dm Banjaran (dawa Barat), Batwaden dm Pazxinggm (Jaws

Tengah), Jemlxr dm Banyuwangi B m t (Jawa Timur) (Nwhmybi et a!, 2000).

Tin&& kernadam fisiologis benih pinus &am% dengm kulh kerncut ymg

hrwarna fiijau nta dengm skk bewcuna c o b t . -wan kmcut berdkmeter 2,0 -

2,8 cm

d m

panjmg 5 - 9 cm. Jumlah kdi per kerncut sf:W23 butir. B dpip&

h h t u k bulat telur yang p a n j w y a 6 - 7 mm

dan

pada tepi Iuar tmdapat sayag ksar yang mudah l e p . Berat per 1 .OW butis b i h (KA 9,70/a) adafah. 2Q,3 gr (BTP 2000) atau xkitar 50.000 butirkg.

Bemi pinus merupdcm b m i yang kaya lemak;. Setiap knih meqandmg

50% lemak ymg terdapat d d m endospama, Benh pinus d i m krwatak artodoks sampai saat

ixri

masih banyak ditemui kendala pen- viabibs s e l m proses pen- (Mirov 1 967, diacu

dafam

S i W 1 999).

AspergiIIus sp., Rhizopus sp.

d m

Fusarium sp. mervpakan cendawan perm&

k i h pinus yang dominluL C m ~ g ~ cmdawm a d a m n hgisida Benlate h y a marry>u menelran smmgan Aspergillus sp. dm Fusarr'um ssp.

suhu -1 5 OC sew14 ha& dangka31 m g a n Aspergillus sp. dapt ditekm dengan

p e r k k m a h dapw strail (i!ami*bar

dan

Robi 19971,

Benih pinus kckdw air 5 - 8%, d i s i rnenggmdm wadah pWik dab

kaleng ymg kedap

udara

d WDry Cold Storage padzl sufiu 4 - 8 'C dan RH 40

-

60%. Dabm kondisi pnyhqamn hi viabilitas bbenhi dapltt dipertahankan simp6 2

(BTP 2000).

PerMuaxl pndahuluan bib d q m w a m e r b y a

dalaan

Hz02 1%

s e k 24 jam dapat menin&ath daya bmkecambah

Sampwi

85% (BTP 2000).

Pafaku~tn invigormi d q a n osrno-conditioning dmgan rxlenggudcan lanrta~a osmotik PEG 6000 p& tekanan -5 bar s e b 8

hari

dapat mnhgkatkm daya

IxrkecamW m j a d i 97% dan menywempakkan p e m m u h rdikula (Setyawan

1993). PerUwm invigorad dmgm mapi-conditioning dengan m q g g m b serbuk

gergmji s e h 2

M

pads suhu 20 "C efektif m e n i n & h viabilitrts bib hingga

30Ph fS* 1999).

Media tumbutr d yang b i k dagat kwpa campuran _pasir

d m

kompas (mi0 7 : 2 : 1)

dan

sthp 1 kg d i a diberi pup&

TSP

1 d o k d m , dan

Serangan patagen lodoh &pat terjadi p& tiga fbse

~~

inang seperti dijelasaztn dafam Achmd f 1993 p k u :

1, Serangm pada

bexriXx

yang

i.>aru

szlja d i t m

dan

klum berkecambah sehhgga

b e d

mwi

bus&. Gej&

ini

disebut brfofi l d h .

2, Serangm pada h n i h ymg s& krkemnbah tetapi b l u m sew m c u l di

atas permham tanah yang mrryehbkm ircslxnbah mati

dalarn

tan&. Eejala ini

disebut d q a n bdok

dalam tanah

(pre-emergence dumpip2g--ofl,

3. S e r q a n p d a knih ymg tekh k r k e a m h h dm telah

m

d

di atas

p r m u k m tanah, yang dkbut lodoh h a n g (post-emergence darnping-08 d m

fodoh tajuk (late damping-off).

Patagen lodoh banyak terjadi

di

p e r s e e pada mat setelah knih diarram hhgga semai berumur 7 mkggu (Achrzlad t 997). Periyakit aadah

&w

dkIla&m oleh kkap j e r k cendawan patogen p@uni tan& +i Pydhium spp,,

Phytopthora spp., Fusnrium spp. dan Rhizocfonia spp., juga d a p t d k ~ b l r a n aleh cendawan saprofit seperti Alternoria spp. p& kondisi y m g kuczlng menguntmgkan.

S e d pinus yang terserang penyakit tadoh ~ ~ f ~ g a h n i penggentingm padTi

&her a h , menyebabkm

d

ti& h a t lagi mnyaslgga pucuk akibatnya

semi mnjadi rebclh, lap

dm

a k b y a mti.

Pedakuan Ben&

Pdrasig dari. p h k u a n k d h

adafith

p m e q m k h g a i cara untuic

mningkatkm k u d h bet&, misalnya d e w cara :

-

%ik, m b h y a dengan pemamm, lrertujuan urrtulr membunuh patogen mg

terhwa h i h (seed borne pathogen)

-

kimiawi dan hayati, M u j u a n untuk m n g w g m g d bun& drtri patagen

ymg terbawa bib atau untuk mlindungi bmih

dari

s m q p patogen t&

tanah (soid borne pathogen) (van dm Wolf 2002 b).

Perlakuan b a h deqan teknik pefapkm, m e n j a d h bnih s e b a i %en

pembawa balm lain yang dibutuhh

urrtuk

nmhgkatkan perk^^ dm p e r l i n d q tmmmq m k h y a : X) pup&, 2) z ~ t t = a m tumbuh, 3) f'uqisida

d m

insektisich, 4) m e & tikus dm b u g , 5 ) mikrusimbian (darhiza, rhkmbia

d m

fhkia), 6 ) cendawm antagonis. B a b a n - b tersebut jarmg d i g d m pada bnih

yang sarna

d m

pztda w&u ymg mma (Schmidt 2000).

Pehpisorn kmih Dengan Chitman

Chitosan m p a k m pokdmida ymg b e r d dari b b t a n g perahan, tmtarxaa

udang, y a h polher

dan

glukosamin yang dMilasi. Chitom mmpakm

biopolima yang terdiri Bari satu m q a i empat

unit

IxmIang 2 &-2 bxy-Beta- D glukosa, k h t & spesif&

dan

mengazrdung Eungsi

amin

dal&m rant& karbnnya

d m bemuatan p s i t i brlaw~nan deqan pohkarida

alam

W y a , sehingga nmhbulkm s s t - s a t tertentu d&m fhhibilitasnya ymg mnyebabkan mofekul

temtxrt hrsifaf resisten t a W p stress m c : h i k ( J ~ a k i Pemlitian Perkma Laut

Mekmisme Chitusan dahm Meningbtkotn Pertahman Tanaman

Chitom berkemmpuan untuk rrmginduksi respon pertaharm tamma &dm

spektr~n ymg luas dm fl~enwjuXrkan sifat

~

~

antiUterid

d

d m

,

antivird

f Anonim 2002; Ldkmme 1999; M d y ef a!. 1999).

Chitasan maginduksi tmmmi mtuk mehgkatkaxx biosintesis ligin

d m

Ii-i dirading seI tanaman sehingga d i n d ' i sel tamman mmjadi 1eM b t

dm

mnghambat p""t"si cendawan psrtogen (Reddy et 01. 1999). Chitasan j u g

m y e b b pewMan &&logis padin tamman sf:hgga t a m m a tmhhdar dari cendawm patogen yang mas& mMui

a h

dan

dam

Tanaman yang & p a t h perhhm d q m chitosan mmunjxkkan b e h p a

p r u b biokhhwi, yaitu menhgkatnya produksi emhenzim hidrolisis ymg h i - F a t antifungal seperti chit-, cfrito-

dtux

bta- 1 , J - g l u w

baik

pa&

bunmupun pada aka (Cuero et a/. 1 992).

Chitosnn dapat nmhgkatkan produksi ammasam fenal ( M y ef al. 1999),

fititaaleh (Cuero et ui, 1992)

dan

m a m g m g a k u m h i jasmonic acid, yang

m p k m shyat mbkd ymg dipreap sebagai komponen

m

r

m

l

dim pengatwan

Mebnisme Chitman &lam Menghambat Pedumbuhan Cmdawan Patugen

Cfiitom mmyebabkan disorganki XI-sel cendawan wars cept =perti

meningkatnya vakuoXas*i p e b a h dinding sel, distorsi hifa dm agregasi sitoplasma (Li&mme ef a/. 1999). A k t i v h chitom

ini

brhubmgazr dengan perubahan

pemeabilitas m b r a n plasma (Leubrr dan StSssel 1986; b u s s et ai. 1989, diacu

didmi

~~

1999) $an p e m b k e d DNA wndawm patogen

(Hndwiger d m Luscfxlte 1931, diacu dalm Laihnme 19991,

PehpLm Bedla Dengout Cendawan Antagunb

PerMuan be& secm hayati &pat d i k h k m antara lain d e q m

mmdmth cmdawan antagonis. Perhkam benih dmgm cam pfapisan benih

d q m m g g u m k m

T.

hrziunum mxxmjuldran hasil yang npta da1m

mgendalikm m g a n patogen lodoh pala h i h tamman horeikuftura. Pada

p e r l a k : ~ id c e n h w antagonis &an lwxehdungi benih dm akar tamman

dari.

serangm patogen sehingga

~~

tan2lman mmjadi xmnhgkat (Taylor et al,

1 994).

Agar per- krilh seem hzlyati &pat berfxasil d q m h i k m k a haus disiapkan bioprofectmf yang berkuafitas thggi. Bioprotectanf y m g

&@an

lxarus

1) me- v h b h

dan

vigor thg& dahm arti p r o p p h y a harus m p u

kk-Lrah

dan

menmuhi tujuan yang diharaph, 2) t o b terhakp

PerWu2tn benih frrtyati

frants

mencakup komponen-komponen yang ~rr$uk.mg pertuml>uhan &oargmknx (Maude 1997). A& dm f&or yang me*ht pertumbulm miiaoorgmisme ymg dingidan tersebut pada knih

y&u k madmya kompetisi d w m flow m i h

drsn

karma bgkmgn yang

tidak

~~

%perti pH, nutrim 8an kelembaban,

L~~ hams dicip- wtuk d u f r u r y g pertun- ~ o o r ~ m e ymg dihginkzln tempi sekdigw ~ i prkmbhm m &oorgmkme ~

pesaiqgya (Taybr d m Harman 1 WU), yaitu rneliputi :

1 , B&m bagi mikrotra,

Chitin

d m

selulosa mmpu rrteni3lgkatkan &ti*

T.

hamaturn

dalam

mengeWkan R. solmi attnu

P*

uitimurn (Wannan et 02. 1981, d k u &lam Taylor

dan

Warrnm 199U).

2. Dmjstt K- (pH).

Trickoderma spp. &pat t d u h baik pada hgkwgrn h - p H rendah

mmntaazl W e r i bbih menyulcai pH ymg mndekati

netral,

Kdit be& yetng m n d i k i kenmsmm yang krvariasi akm meqmgaruhi a p b i bioprotectant. 3. Koloxxisasi

Keuntungan dari

~~

solid matric priming dmgm

~~

bioprotectant adafah miholm mgkolonisasi prmukaan bib selama masa

priming*

4. W&u

Efektifitas perlaxrum bnih wars hayati tmgazltung pada kewptatan

2 jam segera me&

be&

ditanzlm sementara spra Trichoderma spg. k k e c m b a h

setelah 14+benihditttnam.

5. P e n g d te@u lmsma bdhan toksik

lain

Ada

k k p

keuntungzm ymg d13#?r~leh

dari

m e d u k m perkdam hayati

dengm

tratban

tab& ( W i a pesisida). Pertama, M a n toksik: &pat

&imumIc;tn p m g d bun&

dzlri

kartrpetisi flora &Q terhadap bioprotectunf,

Kedua, pengaruix bioprofecdanf

dan

agen kirnia &pat k s & t aditif dm shw& unttrfr

melawan mu patogen atau patagen yang kompkh.

Teknik A p I i k i Pads Benih

Maude (1997) naenjelaskan trnhwa cmdawan &pat d i r t p l i h i h gada knih

d i 3 h l berrtik &b, S C ~ T Q ~ ~ h X l v m ~ e h l d a m ~ k S d e w d tekIl& s e d e r b Secara umum ~ o o r yang g diaplikasikan ~ dmgm teM-telmik

tersekt mmpu krtitfian dwan b i k x b a d a h ~ pyimpanan,

PerMmn Imh dmgm cara ke&g V i y a

~~

dengan mew-

sgom c d a w 8 n Sejumlah spora

ditarnbahlran

ke baih

=

sekhmmya telah d i k m m dmgan air atau wen ad& lain +i ~~bxyl-mthyI-ce11ufose 4 % atau gnrm arabic. Benih dm spora dicampur s e h i i a s e 1 d knih diE.muti ofeh

spara,

K e g q y h

semai

untuk muncut

ke

pemxukaan tanah

dapnt

diseirabkazr h n a

serangan patogen atau n x d & Esiolagis (Bemet et a]. 1992). Qleh sehb itu

Ken& ymg sefimgk& m w d add& bioprotectmt ti&

dalam

j d y a n g cuXnrp @a h i h ufftuiE metindmghya s e b proses p e k e . Bebrapa t e U y a q telah d i k ~ ~ a n dapt b p a solid matrix primirzg danfilrn c m f ing.

1. ,Wid Matrix Priming ( S W )

Pada tekniir. SMP yang dikemhgkm okh Taylor eb al. (1993

3

pa& bnih k&imun, bioprotectan~ b u k k a n ke

dalam

suspensi

cair

diikuti dengan

pem- partikel padat (wntohnya Agro-Lig). Sebjutnya

M

dkkubasi ~ ~ 4 h a r i ~ s u h u 2 U o C . P a d a s a a t ~ n i h a k a n d i t a n a m , ~ e l p a d a t y m g t>erleMm d ~ h m g . Pada saat priming ini jumlah prop@ Trichodem sp. (colony

forming unifs) manrpu nmhgkat mnjadi 10

M.

Ape-Lig m e ~ p m y d

pH

4,1 dm m n g d u n g mtrien inorgmik ymg thggi sehingga mnciptEak-an lingkmgrn yang i d 4 kt@ pertumtnrtran Trickoderma sp. T i e fhktor ymg d & u q perhghtan eff:kt#m hiopmltecdant mMui t e M SMF addah terjadi kolanisasi pada

g e m h knilr sehm

sm,

l k l g k q a f x

pH

d m

n* yang sesuai

untulc

perkembangan biurprotectan f

.

2. Film Coafing

Pada tekdk

fiIm

coating ymg dikemhgkm ohh Taylor et ad, (1 991),

t d a p a t tiga k a q n e n p n h g yaitu suspensi pngkat, partikel padat dan

bioprotectant. S w p i pexrgkat ymg digmdm

adaXah

Pedgel, methyl

ce&hsc:

dan

Polyox. Bafaan patiket padat y a q paling efektii digmxhn yaiht Agro-Lig. Pads

ke benih yang

trerada

di

ddam

drum y q knputas, Seteah perbkuitn pelapisan, M d h k u b i pada k e f e m b h (W) t@i selama 4 kasj, pada suhu 25 'C.

Inlcubasi RH tinggi mnkgkatkan perkembangbiakm Trichuderma sp, menjadi

60 kdi.

K o m b i i i Irnin ymg dilakihmya

adatah

t e r n double-coating, Dalam

teknik ini s q m s i pmgikat y a q mngandung bioprofectunt d i i r o t k a n kegada

b e d , Pektpisan k&ua dWuka31 dengm mencampwkaxl partikd padat di dahm

Polyox. L a p h g& hi mun&inlran bioprotecbanf dilepas secara per&.

Bioprotectmt d1ehkkan paling dekat dengan. permukaaxl

h&

keanudian dikutl: dm- Xapisan pf:ngtmt b g h luar ymg m b w w knih

dan

bioprotectunt.

Pada h i h pinus, Gurer (1998) meUW percabam dengan teknik

chitasan-Egmsulpbnate flIm coubing. _{h g k & pertma yang d & h h add&}

d e w mkmtkan chitusan 3% ke

ddam

m m t 1%. Suspeflsi conidia

T.

pseudoku~ingij

~~

k&&m h t a n chitasan asetat

dan

k e m u d b dicampurkan d w n bnih.. Sefanjutnya tKnifi diceluph -k h t a n sadium

Kgnudphomte 5%,

M e h b m Antagonistik Trkhmhma hadmum

Mekmism dabm antagonism antar

jasad

re& digolungkarn dalam tiga me-, yaitu arrtibiosis, koqetisi

darr

mikopmitism (Baker dan Cook 1974, Hjeljurd

d m

Tronsmo 1 998).

Melcanisme antbiosis m e f i b a k &lit k u u n atau

enzim

elrstraseluler

DAN

METODE

Tempat d m W a h PeneIithn

Penelitian B W d m di Lahmtorium Silddtur SEAklEO-BIOTRQP Bogor pa& bdan Wet dewan Agustus 2002.

MeEode PeneIitistn

Penelitirtn, diawdi d e w uji pendahufuazl yimg bertujuan untrr2r. : 1)

m d a p a t h satu jenis c&wm patogerr penyebab penyakit lodoh yang

d

virufensi pa& b t , 2) peremajaan kembali isolat m d c e n h m antagonis T,

karzianum, 3) mwji kemampuan anteonism $ari T. harzianum tmMap

&wan prttogen secara in vvifro, 4) menguji pengad chitusan t e r W p pexeumhhm cermdawm patagen dm

T.

harzianarm secant in vitro, 5 ) rnment-

kommtrasi chitom ymg &an digwukm dalam pfapisan b e d ,

Apabila dari uji pembhuluafl yang dikkkan wars in viiro diperobh hasfi

chitusan dan

K

harzianum mafnpu mwkm pertumhhm c d a w a n patogen, maka

Uji Virulensi

+-I

I

r

Lar. Ctiiiaspm

wetat dan tar.

Sodium lignu-

sutphanate

*

I

Palapisan b n i h

1

I

(

1. Benih Uontrol (Air destiMa)

I I

a

3.Pelapisan dengan Chitusan 0 3 % 4,Pelapisan dengan Chitasan t % f

cO

Media PatQgen 5.Pelapisan dengan Cend. Antagonis

*

SMP

.I

Q*I

CCI 6.Pefapisan dengan Csnd. Antaganis +

t

I

B) f

a

k Stedfisasi

Uii PendabuIum

Penyediman dan Perbanyakan boldurn Cmdawm Cendawan Patogen

Cendawan patagen pnyebetb lodoh brad rfasi isolasi potongm pm&d

batang

d

pinus benunur 2 miqgu

d m

4 rninggu ymg terserang penyakit bdoh di persernaian Poq~pok Lad&, KPN Cianjur.

Potoqan &d batzrng dicuci d q a n

air

h i l a t a s t d k d hdistedkm

dmgm nxrerhn &dam larutan NaOCI 1% s e h 2 me&

cSan

d i b h la@ dengm air desthta st* sefnnjutnya dikerhgkm dengan mktakkamya dalam cawan petri

y q beralaskarx kertrrs swing steril.

Potoqm pm&d btmg kern* ditempatkan p&da naedia PDA'

dan

d i i b a s i pada suhu kame, Pa& hari ke-4 m q a k &-pa jmis cmdawm patagen tumbuh pa& mdia PDA, s b j u t n y a isolat-isaht tersebut: d i m d k a n .

Selanjutnya dakukm uji vkdexlsi uxatuk m e n a t d m jenis c e h w a n y q

paling kuat mayehbkm penyakit lodoh Ujji videmi d h h k m dmgm menanam

sen& hmmm 15 hmi pada d i a tanam di

dalam

plybag yang telrmfi diinokulasi dmgm masing-masing j d &wan patogen. Jmdah semai ymg d b x m pa&

setiap pertakuan s h y & 20

d

d e w dua kali pengulangan. Pengmtan

Cendawn htagunis

Iwht c e b w a n antagonis

T.

harzianecm diperoleh d u i Litbang Mikrobiologi

LIP1 Bogor dan d i h h k m pe-jaan b h t pads,

d

PDA u n e mempwofeh

isalat murni

T.

h i a m . Xsolat m u d

K

hamianurn selanjutnya diprbanyak pada media PDA atau M M ~ ? untuk diambl conidbya. Conidia i? harziamm

sehjutnya d i p m h n untuk puuaff p h p b benih.

Faktor-faaaor yang &gk&kan produktfitas coni8h dipelajari

dari

studi

pustaka. Untuk mengetahui b a n y h y a conidia ymg diproduksi mzlka -8

pexhitmgttn j m h h conidia per satu mg material

T.

harziamm dmgan mmg-

haemacytometer.

Uji a n t a g o h wara cendawan antagonis dmgan cendawan patoga &&&an dmgm cam nmmam patongan isobt

T.

harziumcm dm Fusurium sg.

yang b m m m 5

hari

d h n satu cawan Petri k m e r 9 cm y q M i medk

MEA'

a d .

Potoqm isoh murni d i l e t d h n khwanan

arah

&ngm jar& 5 cm Jar& kedua isolat ke tepi cawm Petri masing-masing 2 cm Uji antagonism ini dilakukan

d d m 3 kali u h g a n . Pmgamatan

&akukan

setiap hwi Persentaw pengtmhtan

2 ~ a ~ o l h ~ k a i ~ i n ~ ~ ( M M N ) : ~ o ~ P D A 12gr~~lctoAgw, 3 g r n % t l t ~ 0 . 5 g r ~ & ~ , SOml Iar. 50ml far.

Urn4,

5 O m l far. (NN4hWU4, 1 ml h. F C I , 3 ml h. MgW4.m0

3 ~ & W t ~ ~ ~ ~ ) : 1 g r P e p t o n e , 2 0 g ~ 2 U g r & g r d a n I O O O m l a i r 2 0 g r ~ t ~

r l - r2

Persenease p n g h m h m

(%I

= - x

IOU

%

r 1 Ketermgan :

rl = jzui-jari koloni Fusmium sp. yang m u j u ke ujung cawan Petri

rz = jari-jar; koloni Fwmium sp. yang m u j u

ke

koloni

T.

harzianuna

Pengaruh Chitosour Terhstdap Pertumbuhan Cendslwarn (uji ifl * o )

Chitasan (Siarn Bionet Limited) d i s i a p h

kedafam b u k

lamtan chitosan

axtat. Chltosan dengm komxntrasi ydtu Ph, 0,5%, I%, 1,S%, 2%, 2,5% dm 3% fwlv) dhwtkm d q m asam asetat 1% (v/v). Lmtan tersebut kemudiztn dkntrikgasi masing-masing ~ I a m a 15 menit,

Pengamtm gertmhhm cendawan

~~

pada cawan-cawan Petri y a q

krisi me& PDA yang ditmkhkm d e w Iwrutan cliitasafl aWat d q a n k b a g a i

kammtmi (9:l v/v). P& 3 b d cawan Petri per kommtmsi chitusan d i t m

patongan @is i7 hamimm dan Fusarium sp. (0 6 m). PaBa ethp cawan Petri

ditanam 1 ptang cmdawan. Cawan Petri dihhbttsi psnda suhu kmm (26°C -

28'C).

P d u h a n cmdawan (diameter koloni minus diameter potangan cendawan) diukur hari s e b 7

I&.

Pa&

h;ari ke-7 d i h g pemntase p n g b m h a n

p e r t u m h h . Persatwe peqghmbm add& p q p q a n

~~~

eendawan

Penditb Utama

Perbmyakan InakuIum Cendawm Pat-

P e r b y d m inoWum cmdawan patagen d i h k h n pada d i a camguran

pair, fi&ncuran tnji jagwg

dan

air

(96:4:20 gf/g~/ml). Media s e h y a k 100 gr tersebut

~~

ke dalam botol k a a kemudian disterikarr didam oeokhf (1 21 'C, 1 atm)

~~

1 jam, P& masing-masing media yang

srarfah

steriX tersebut,

Persimtpan Media Tmam

M e tanam yang digmidm addah c q u r a n top soil dan pasir (1:1) yang tefah distedkan. lnofculasi cendawarr patogerr d i idewnmcmpuckan 3,5

gr media ptugen ymg telair dkhpkasl dengal 200 gr media t2wm

cfafam

g e h

p a & , k~~ &am- 15 ml

air

Seed. Wad& tanam sebjutnya &utug

dengm plastik, dan didiamkan s e b 4

M.

Setelah 4 dilakukm pemmmm

Pehpism mihE~irt ~&II!FE~'

Bnih pinus b r a d dari Swder Be4nih Banjaran di Jawa Brrrat, dimen pada

Man Oktabr 2001, dan tebh dishpan d W DCS selama 8

tatlan.

1.

B

d

Kantd(Aird&ta)

Be& direndam didam air destilata selama 24 jam. B d yang tenggehm

(tKnih

bemas) distedkm permhamya dengm merendam ddfm larutan NaOCl

0,5% s e b 1 menit mtuk m q m o f e h

b d h

yang aseptik. h n i h sehjutnya

dibilws k h p k d i dmgm air destilata s t d kcmudim M h diirerhgmginkan

dmgan mletdckannya dzlXam wadttkr, yang tefah d&i kwtm saring stwil.

4. P e b p i w Ben& d e n w Chitwan 1%

Chitom diskqkarx d e q m kommtmi 1% (w/v). Chitom dihekarr dengan

asam metat 1% (vlv). Larum tersebut kemudh disentrifugwi masing-masing

5. Pekpim JBenitr dengatn

T.

hrxrziQPrurn -t- Pertmrha Solid M d r k Priming

( S W I

benih (Img = I ,8 x lo6 conidia). Selanjutmya benih dicekrpkm ke

dalam

b t a n

sodium Egnosuiphomte 5%, setelah

itu

M

dikering-BT~ ( modi&mi G w r

t 9981, Larutan sodium lipsulptronate 5% (w/v) d i

wb@

hpisan pgm,

dibM dm- m h t w a

dalam air

destihta sterif.

Untuk mengetahui pertumbuhan T. hanianum, satu butir benih yang baru saja dilapisi direndam

dalam

1

ml air

st&

untuk

d W m g jumlah w d h y a , demikian

pula dengan benih yang telah diinkubas'~ Penghhngan ini diutang sebanyak 3

kali.

6. Pelapisan Benih den-

I:

hmzimrum

+

pedakam inkubasi pada RH tin@$

Benih berms clan aseptik

dimasuWcan

ke dalam

larutan

chitom asetat 1% y w

telah ditambahkan conidia

T.

h i a n u r n

berunnrr

7 hari dengan konsentrasi 10 mglgr benih. Sehjutnya benih dicelupkan ke dalam

larutan

sodium lignosulpbnate 5%,

setelah

itu

benih dikeringanghkau

Gambar 2. Pelapisan benih dengan Trichoderma hanianum yang diikuti dengan inkubasi pada kelembaban tin& (a)

dm

pelapisan benih dengan teknik

Per- hkubasi d d d d a n de- cara meqinkubasi

benitt

di atas

air

dingin s e b 4

bari

pada s d w kanm dahm kondisi gehp (Taylor et ad. 1993)

seperti p& Gambar 2,

Untuk mngetahui p e r t u m b h

T.

karzianum, satu butir b i h yang

baru

saja dikpisi &rendam

dafam

1 ml air steril a u k , d- jmd& conidbya, demilcian pula d q a n b a i h yang teM diinkubi. Penghituqan

ixli

d i u w sebanyak 3 Mi.

tX:&

Sehjutnya be& d i c e h p k ke d a b fmtan sodium Iignawlphonate 5%,

Rancangan Acak Lmgkap (Mattjik dan Swnertajaya 2000),

Be&

umum model

i = 1,2,3,4,5,6,7

j = 1,2,3

Y ij = nihi t o w yang -ti pada perkhan p c : h p i i Waf ke-i dim ulangan

ke-j

sidik ragam, ddilnrrjutkan dmgm uji ni.fai t@ dengan Uji Jar& Beqanda Duncan.

Uji Antagonisme ex v&m

Ben% ymg telah dihpisi Bitanam pada xnedi tanam yang telalx diinokulasi d q m d w a n patagen. Wad& tanam & e m p a t h di rl.slam nunah kaca

Penyiraman d k h k m wtiap sore hari Manmmggunakan rnir

h

Pengmmtan

Pengmtan B W W terfradap tolok ukur sehagai krikut :

2 . Daya B&xmbah

(DB)

Daya b e r k knih ~ ~difritunlg b e r k k a n persentaw jumhh total be& yang M m m b a h pada hmi ke-7

d m

hari ke-2 1 (ISTA 1 999).

JumlahKNpadzlharike-7-1-JWKNpadaMke-21

DB (%)

-

x IWh

per etnaal. ( 3 e t d = 24 jam) dm dimulai pada

h

i

ke-1

sampai

dengan

fiari ke-21

dengm ~ m u s s e a i k k u t :

4. Tinggi Semai

T k g i s e d (cm) diukur pada saat smai kmur 28 hari.

5. Biomassa

Biomass% diulrur kdasarkm j d a h totid berat kmhg smai p d a akhir

p e n g m m . Pengeringan dilakukm dengan metode oven 70

C

'

48 jam.

6. Serangm Penyakit Lodoh

Serangarx penyakit ladah dhhmg lmdasarkan pmentase jumM totd

c

h

i

benitr dm semi yang terserang penyakit lodoh dengan m u s sebagai krikut :

Jumfah hnitx

dan

s e d yang terserang lodoh

Sermgan Lodoh (%)

-

_{x 100%}

HASIL

PENELITIAN

Uii Pendahulllsn

Penyediaan dan Perbanyakan Znolollm Cendawan

Cendawan Patogen

Berdamkan has'd pernumian diperoleh dua jenis cendawan patogen penyebab

penyakit lodoh, yaitu Fusarium sp. dan F. oxysporum. Adapun k a d k r h k isolat

Fwarium sp. yang ditumbuhkan pada media PDA dan inkubasi pada suhu kamar,

yaitu d i i e r koloni yang berumur 3 hari sebesar 2,3 cm, miselia berwama putih

dan

b a g i i dasamya berwarna ungu,

hifa

bemku~an lebar 2 p, microconidia berukuran

panjang 7 pn clan macroconidia

berukuran

panjang 12 p.m. Medii PDA (iika cawan

petrinya dibalik) berwarna coklat tua keunguaa (Gambar 3).

(a) (b)

to)

Ihakteristik isolat l? ogaporum yang ditumbuhkan pada media

dan

inkubasi

pada sulm kamat, yaitu dkmeter koloni yang bemmur 3 hari sebesar 3,3 em, miselia

berwarna putih dan bagian dasamya berwama merah muda,

hifa

berukuran lebar 3

~ T Q microconidia berukmm panjang 7 p, macroconidia berukuran panjang 12-14

jmdan W o s p o r a berukuran diameter 7 pm, Pada hifa terdapat false head yang menempel pada phialid

yang

@k, dkt ini llletumjukkan W e r i s t i k I?

oxysporm (Burgess et al. 1988). Media FDA (jika cawan pethya dibalil) k m a r n a coklat muda (Gambar 4).

Gambar4. Fzmrim oxyspoonrm :

(a)

koloni pada media PDA; (b) hih, (c)

mimonidia

dan

macroconidia.

H a d uji virulensi memmjukkan bahwa Fmmium sp. menrpakan jenis yang paling kuat menyebabkan penyakit lodoh pada semai p b (Tabel 1) sebingga jenis

ini digunakan untuk p e n e b seIrm@tnya. Pe-

isolat

Fusmium sp.

Tabel 1. Persentase s e w a n penyakit lodoh (%) yang disebabkan oleh Fusarium sp. dm Fusarium oxysporum.

Fusmium sp. 30

F. oxysponun 15

C.V. = 13.61%

Cendawan Antagonis

Kamkteristik T. harziunznn yang dhmbuhkan pada media PDA dan dijnkubasi

pada suhu kamar, yaitu diameter koloni yang

benrmur

3 hari sebesar 5,4 an, miselia

berwatna putih dan tipis, hifa beruiolran lebar 5 p n clan conidia berbentuk bulat

berwana kuning dan hijau d e w diameter 4 p. Media PDA (jika cawan petrinya

(a) (b) ( 4

Hasil uji pendahullusn menunjukkan conidi I: hanianum lebih banyak

diproduksi pada media MMN d i m k a n pada media PDA (Gambar 6) sehingga

untuk pelapisan benih pada tahap peneliti selanjutnya

I:

hanianum diperbaqak pada media MMN.

Gambar 6. Trichoderma harzianum b e m u r 7 hari : (a) pada media PDA, (b) pada media MMN

Pada media MMN, isolat yang berumur 7 hari memproduksi conidia berwama

hijau tua sebQnyak 1,8 x 106/mg cendawan, sedangkan isolat pada media PDA

memproduksi conidia berwarna kuning sebanyak 1,5 x 1o6/mg cendawan Media

MMN merupakan media yaug kaya nutrisi sehingga conidia dapat diproduksi dalam

jumlah yang banyak. Perbedaan pertumbuhan

T.

hmzianum pada mdia PDA dan

Tak12. Pertumbuha Trichoderma hrzianum pa$a d i a PDA

dan

media MMN

r

-

0,55 cm r = f,43 cm r = 2,5 cm

k l i u m b e r w m putih

d m

tipis, wnidia hrwarraa

r = 3,6 cm

miseEum kwm put& dm tipis, canidkt h a r n a

hijau

r = 4,2 crn

miselirun lmwarna putih

d m

tipis, coxnidia bmwarna Ejau tua

r = 4 , 2 c m

dsefium kmama put&

dan

tipis, conk%

b w a r n a

hijau tua

Wji htagoobme in vitm

Mas2 perrgujian antagonism secara in vifro men,unjddm W w a T harzianum menghmbat p e r t u m b h Fusarium sp. hingga 33% ( L a m p h 1).

P A

hari ke-5,

c m Pada daerah pertemuan miselia kedua jenis cendawan ini terdapat sedikit warna

kuning kecoklatan (Gambar 7).

Gambar 7. Uji antagonisme in v i m antara Trichodenna hmzirmtlm (Th), dengan

Fusarium sp. ( F )