LAPORAN PRAKTIKUM METABOLISME
LAPORAN PRAKTIKUM METABOLISME
REAKSI HOPKINS-COLE
REAKSI HOPKINS-COLE
KELOMPOK 9 : KELOMPOK 9 : 1 1.. DDIIAAN N KKUURRVVAAYYAANNTTI II I ((112200330066550011!!"" 2 2.. DDEENNYYS S AARRLLIIAANNOOVVIITTAA ((11220033006655001199"" 3 3.. BBEELLLLA A ##IIDDDDIIIINNI I RR ((11220033006655002211"" .. EELLLLA A $$AAHHYYUUNNII ((11220033006655003399"" 5 5.. NNUURRUUL L ##AATTHHOONNAAHH ((11220033006655005500"" PEND. SAINS A 2012 PEND. SAINS A 2012UNIVERSI
UNIVERSITA
TAS NE
S NE%ERI S
%ERI SURABAY
URABAYA
A
#AKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PEN%ETAHUAN ALAM
#AKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PEN%ETAHUAN ALAM
PRODI PENDIDIKAN SAINS
PRODI PENDIDIKAN SAINS
201
201
A.
A. &''&'') P*+) P*+,,//// : Reaksi Hopkins-Cole : Reaksi Hopkins-Cole B.
B. TT'''/ P*+,'/ P*+,//// : : Menguji kandungan TryMenguji kandungan Tryptophan pada bahan ptophan pada bahan makananmakanan C.
Uji Hopkins-Cole digunakan untuk menunjukan inti indol asam aminotriptofan yang Uji Hopkins-Cole digunakan untuk menunjukan inti indol asam aminotriptofan yang ditandai dengan terbentuknya cincin berwarna ungu pada sampel percobaan !adi reaksi ditandai dengan terbentuknya cincin berwarna ungu pada sampel percobaan !adi reaksi Hopkins-Cole merupakan cara untuk menguji keberadaan "sam amino tryptofan pada Hopkins-Cole merupakan cara untuk menguji keberadaan "sam amino tryptofan pada bahan
bahan makanan makanan #ereaksi Hopkins #ereaksi Hopkins Cole mengandung asam glioksilat Cole mengandung asam glioksilat $Hg%&$Hg%&''( #rinsip uji( #rinsip uji
Hopkins-Cole adalah kondensasi inti indol dengan aldehid dimana jika terdapat asam kuat Hopkins-Cole adalah kondensasi inti indol dengan aldehid dimana jika terdapat asam kuat yang menyebabkan terbentuknya cincin ungu pada bidang batas Reaksi tersebut hanya yang menyebabkan terbentuknya cincin ungu pada bidang batas Reaksi tersebut hanya aka
akan n berberhashasil il jikjika a ada ada oksoksidaidator tor kuakuat) t) sepseperti erti senysenyawa awa HH**%&' %&' yayang ng digdigunaunakan kan padpadaa
percobaan ini +ungsi penambahan
percobaan ini +ungsi penambahan asam sulfat asam sulfat ini adalah sini adalah sebagai oksidator agar ebagai oksidator agar terbentuk terbentuk cincin ungu pada larutan sampel $#oedjiadi *,,(
cincin ungu pada larutan sampel $#oedjiadi *,,(
.ambar /0 Reaksi Hopkins-Cole $!oshy dan %araswat *,,*( .ambar /0 Reaksi Hopkins-Cole $!oshy dan %araswat *,,*(
.ambar /* .ugus asam amino Triptofan $1uwono Triwibowo *,,2( .ambar /* .ugus asam amino Triptofan $1uwono Triwibowo *,,2(
3arut
3arutan an proteprotein in yanyang g mengmengandunandung g tryptryptofan tofan direakdireaksikan sikan dengdengan an asam asam gliokglioksilat)silat) kemudian ditambahkan asam sulfat pekat sehingga membentuk larutan pekat berwarna kemudian ditambahkan asam sulfat pekat sehingga membentuk larutan pekat berwarna 4iolet
4iolet D.
D. R/,// PR/,// P*+,//*+,// 0
0 .a.ambmbar ar RaRangngkakaiaiann
aa 0 m30 m3 bb formaldehid formaldehid 3arutan protein 3arutan protein encer encer 0 tetes 0 tetes larutan larutan millon millon
.ambar 0 3arutan " dari larutan protein .ambar 0 3arutan " dari larutan protein
encer encer
.ambar * 3arutan " dari larutan protein .ambar * 3arutan " dari larutan protein encer dicampuran 0 m3 formaldehid dan encer dicampuran 0 m3 formaldehid dan
0 tetes larutan millon 0 tetes larutan millon c
c
.ambar / 3arutan 5 dari larutan protein .ambar / 3arutan 5 dari larutan protein
pekat pekat
d d
.ambar ' 3arutan 5 dari larutan protein .ambar ' 3arutan 5 dari larutan protein pekat dicampuran 0 m3
pekat dicampuran 0 m3 formaldehid danformaldehid dan 0 tetes larutan millon
0 tetes larutan millon
*
* "l"lat at dadan n 5a5ahahann "lat:
"lat:
-- TTaabbuunng g rreeaakkssii -- ##iippeet t tteetteess -- RRaak k ttaabbuunngg * buah * buah ' buah ' buah 0 buah 0 buah 5ahan: 5ahan:
-- 33aarruuttaan n MMiilllloonn
-- 33araruuttan an ++oorrmmalalddeehhiidd -- 33aarruuttaan n HH**%&%&''
-- ##uuttiih h TTeelloor r 0, m3 0, m3 0, m3 0, m3 0, m3 0, m3 0, m3 0, m3 /
/ %if%ifat +at +isikisika daa dan %n %ifat ifat 6im6imia bia bahaahann
3arutan protein encer 3arutan protein encer
3arutan protein pekat 3arutan protein pekat
0 m3 0 m3 formaldehid formaldehid 3arutan protein 3arutan protein pekat pekat 0 tetes 0 tetes larutan larutan millon millon
0
0(( %i%ifafat +t +isisikikaa a
a ++oorrmmaallddeehhiid :d : cairan jernih $tidak berwarna() berbau menusuk) titik didih dancairan jernih $tidak berwarna() berbau menusuk) titik didih dan titik cair yaitu 78
titik cair yaitu 78ooC dan 902C dan 902ooCC
b
b HH**%&%&'' : :
-- "sam "sam sulsulfat fat mumurni rni berberupa upa caicairan ran benbening ing sepseperti erti minminyayak k -- HH**%&%&'' anhidratanhidrat adalah cairan yang sangat polaradalah cairan yang sangat polar
-- 6onstanta kesetimbangan6onstanta kesetimbangan autopirolisisnya adalalah autopirolisisnya adalalah 6
6 apap$*2 C(; <H$*2 C(; <H//%&%&''==><H%&><H%&''??> ; *) @ 0,> ; *) @ 0,?'?'
*
*(( %i%ifafat t 6i6immiaia a
a ++orormmalaldedehihid d ::
5erat jenis dan pH : 0,A grBcm
5erat jenis dan pH : 0,A grBcm// dan *A dan *A
olatilasi $*0
olatilasi $*0ooC( : 0,,C( : 0,,
6epadatan uap $0 atm(: 0,' 6epadatan uap $0 atm(: 0,' Tekanan Uap: 0/ D pada *, Tekanan Uap: 0/ D pada *,
b.
b. HH**%&%&''::
-- Reaksi hidrasiReaksi hidrasi asam sulfat sangatlahasam sulfat sangatlah eksotermik eksotermik
-- asaasam sm sululfat fat beberereakaksi dsi denengagan kn kebebananyayakakann basa basa) menghasilkan garam) menghasilkan garam sulfatsulfat -- "sa"sam m susulfalfat t bebereareaksksi i dedengngan keban kebananyyakaakan n lologagam m 4i4ia a reareaksksi i pepengnggagantntiaiann
tunggal) menghasilkan gas
tunggal) menghasilkan gas hidrogenhidrogen dan logam sulfatdan logam sulfat '
' 3a3angngkakah #h #erercocobabaanan
3angkah pertama membuat larutan " yaitu protein encer dan larutan 5 yaitu 3angkah pertama membuat larutan " yaitu protein encer dan larutan 5 yaitu protein
protein pekat pekat 3alu 3alu masing-masing masing-masing larutan larutan di di teteskan teteskan 0 0 m3 formaldehid m3 formaldehid dan dan 0 0 tetestetes larutan millon melalui dinding tabung 6emudian mengocok hingga terjadi * lapisan larutan millon melalui dinding tabung 6emudian mengocok hingga terjadi * lapisan 3an
3angkagkah h terterakhakhir ir adaadalah lah menmengamgamati ati perperubaubahan han warwarna na dan dan adaadanynya a endendapaapan n yayangng terjadi kemudian mencatat pada tabel pengamatan
terjadi kemudian mencatat pada tabel pengamatan E.
E. H/H/44) P*) P*//////
Eari praktikum yang telah kami lakukan di dapat data hasil pengamatan sebagai berikut Eari praktikum yang telah kami lakukan di dapat data hasil pengamatan sebagai berikut
N N BB//77// PP**++))//88''// P*///P*/// S S****))'' SS**44''//77 0 0 •
• #rotein cair #rotein cair • • +ormaldehid+ormaldehid • • MilonMilon • • HH**%&%&'' Eicampur Eicampur lalu lalu dikocok dikocok •
• Farna putihFarna putih bening bening • • 5ening5ening • • 5ening5ening • • 5ening5ening o o Terbentuk *Terbentuk * lapisan dan ada lapisan dan ada lingkaran warna lingkaran warna ungu
ungu *
* •• #rotein pekat#rotein pekat • • +ormaldehid+ormaldehid • • MilonMilon • • HH**%&%&'' Eicampur Eicampur lalu lalu dikocok dikocok • • FarnanyaFarnanya kuning kuning bening bening • • 5ening5ening • • 5ening5ening o o Terbentuk *Terbentuk * lapisan 3apisan lapisan 3apisan pertama pertama berwarna berwarna bening bening
• • 5ening5ening kekuningan dan kekuningan dan lapisan kedua lapisan kedua seperti endapan seperti endapan berwarna berwarna orange orange keunguan keunguan # #.. AA//))444 4 DD////
#ada tabel dapat dilihat bahwa pada percobaan 0 dengan menggunakan bahan #ada tabel dapat dilihat bahwa pada percobaan 0 dengan menggunakan bahan uji
uji berberupa upa proprotein $putih tein $putih teltelur( ur( yanyang g teltelah ah diediencencerkarkan) n) kemkemudiudian an di di camcampur pur dendengangan reagen serta H
reagen serta H**%&%&'' EarEari i perpercobcobaan aan ini ini dipdiperoeroleh leh perperubaubahan han padpada a keakeadaadaan n sebsebeluelumm
perlakuan
perlakuan dan dan sesudah sesudah perlakuan perlakuan %emua %emua bahan bahan yang yang digunakan digunakan awalnya awalnya berwarnaberwarna beningB
beningB putih putih bening bening 6emudian 6emudian setelah setelah diperlakukan diperlakukan dengan dengan dicampur dicampur dan dan dikocok dikocok muncul * lapisan serta adanya cincin atau lingkaran ungu
muncul * lapisan serta adanya cincin atau lingkaran ungu
%edangkan pada percobaan *) bahan yang digunakan adalah sampel protein %edangkan pada percobaan *) bahan yang digunakan adalah sampel protein $putih telur( pekat) kemudian dicampur dengan reagen dan H
$putih telur( pekat) kemudian dicampur dengan reagen dan H**%&%&'' Eari percobaan *Eari percobaan *
dipero
diperoleh hasil leh hasil perubperubahan yang berbeda dari ahan yang berbeda dari percobpercobaan 0 aan 0 #ada percobaan * #ada percobaan * perubperubahanahan yang terjadi adalah setelah perlakuan) terbentuk pula * lapisan Gamun tidak terbentuk yang terjadi adalah setelah perlakuan) terbentuk pula * lapisan Gamun tidak terbentuk cincin ungu 3apisan pertamaB
cincin ungu 3apisan pertamaB atas atas berwaberwarna rna beninbening g kekunkekuninganingan) ) sedangsedangkan kan lapisalapisann kedua berbentu
kedua berbentuk k seperti endapan berwarna putih dibagian bawah seperti endapan berwarna putih dibagian bawah dan orange dan orange keunkeunguanguan dibagian atas
%
%.. DD4488''44
Tryptofan merupakan satu dari *, asam amino penyusun protein yang bersifat Tryptofan merupakan satu dari *, asam amino penyusun protein yang bersifat esensial bagi manusia 5entuk yang umum pada mamalia adalah) seperti asam amino esensial bagi manusia 5entuk yang umum pada mamalia adalah) seperti asam amino lainnya) 3-triptofan Meskipun demikian E-triptofan ditemukan pula di alam .ugus lainnya) 3-triptofan Meskipun demikian E-triptofan ditemukan pula di alam .ugus fungsional yang dimiliki triptofan) indol) tidak dimiliki asam-asam amino dasar lainnya fungsional yang dimiliki triptofan) indol) tidak dimiliki asam-asam amino dasar lainnya Tryptofan bisa ditemukan pada telur) terutama bagian putih telur
Tryptofan bisa ditemukan pada telur) terutama bagian putih telur Ea
Eari ri dadata ta dadapapat t didikeketatahuhui i babahwhwa a ujuji i prprototeiein n HoHopkpkinins s CoCole le yayang ng pepertartamama meng
menggunakgunakan an bahan protein cair) formaldehibahan protein cair) formaldehid) d) milon dan milon dan HH**%&%&'' 6etika semua bahan 6etika semua bahan
te
telalah h didicacampmpur ur teterbrbenentutuk k * * lalapipisasan n dadan n adada a lilingngkakararan n beberwrwararna na unungugu HaHal l ininii me
menununjunjukkkkan an babahwhwa a prprototeiein n cacair ir inini i popositsitif if memengnganandudung ng trtripiptotofanfan TrTripiptotofan fan ininii mengandung gugus indol yang akan berkondensasi dengan aldehid bila ada asam kuat mengandung gugus indol yang akan berkondensasi dengan aldehid bila ada asam kuat y
yaiaitu tu HH**%&%&'' sehinsehingga terbegga terbentuk cinntuk cincin berwarcin berwarna ungu dina ungu dibagiabagian atas Ealam han atas Ealam hal inil ini
sebagai H
sebagai H**%&%&''oksidator kuatoksidator kuat
Eengan reaksi : Eengan reaksi :
6edua menggunakan bahan protein pekat) formaldehid) milon dan H
6edua menggunakan bahan protein pekat) formaldehid) milon dan H**%&%&''
6eti
6etika ka semsemua ua bahbahan an teltelah ah dicdicampampur ur terbterbententuk uk * * laplapisanisan 3ap3apisan isan perpertamtama a berberwarwarnana bening
bening kekuningan kekuningan dan dan lapisan lapisan kedua kedua seperti seperti endapan endapan berwarna berwarna orange orange keunguan keunguan HalHal ini menunju
ini menunjukkan bahwa protkkan bahwa protein pekat ini negatif ein pekat ini negatif mengmengandunandung triptofan Cincin warnag triptofan Cincin warna ungu akan terbentuk jika triptofan mengandung gugus indol yang akan berkondensasi ungu akan terbentuk jika triptofan mengandung gugus indol yang akan berkondensasi den
triptofan sehingga tidak terbentuk cincin warna ungu pada bagian atas "dapun endapan triptofan sehingga tidak terbentuk cincin warna ungu pada bagian atas "dapun endapan putih
putih ini ini akibat akibat penambahan penambahan milon milon "pabila "pabila milon milon ditambahkan ditambahkan pada pada senyawa senyawa proteinprotein yang mengandung
yang mengandung asam amino dengan asam amino dengan rantai samping gugus fenolik akan rantai samping gugus fenolik akan menghasilkanmenghasilkan endapan warna putih yang akan berubah menjadi merah jika dipanaskan %edangkan endapan warna putih yang akan berubah menjadi merah jika dipanaskan %edangkan warna kuning berasal dari warna protein pekatnya yang mengakibatkan lapisan kedua warna kuning berasal dari warna protein pekatnya yang mengakibatkan lapisan kedua seperti endapan berwarna putih kekuningan atau orange
seperti endapan berwarna putih kekuningan atau orange H
H.. K*K*44')')//
Uji triptofan pada
Uji triptofan pada proteprotein in dapat dilakukadapat dilakukan n dengadengan n mencammencampurkan proteinpurkan protein dengan reagen Hopkins cole) diantaranya berbahan formaldehid) milon) dan penambahan dengan reagen Hopkins cole) diantaranya berbahan formaldehid) milon) dan penambahan H
H**%&%&'' sebagai oksidator kuat Uji triptofan dikatakan positif jika terbentuk cincin ungu sebagai oksidator kuat Uji triptofan dikatakan positif jika terbentuk cincin ungu
pada campuran Reaksi yang terjadi pada uji triptofan ini adalah pada campuran Reaksi yang terjadi pada uji triptofan ini adalah
LAMPIRAN LAMPIRAN
5ahan-bahan yang digunakan yaitu H
#ada protein cair terbentuk dua lapisan #ada protein cair terbentuk dua lapisan
dengan lingkar ungu pudar dengan lingkar ungu pudar
#ada protein pekat terbentuk dua #ada protein pekat terbentuk dua
lapisan yaitu adanya endapan lapisan yaitu adanya endapan
#erbedaan yang terlihat antara menggunakan protein cair
DA#TAR PUSTAKA DA#TAR PUSTAKA #oedjadi) "na dan Ti
#oedjadi) "na dan Titin %upriyanti 077' Easar-dasar 5iokimia !atin %upriyanti 077' Easar-dasar 5iokimia !akarta: Uni4ersitaskarta: Uni4ersitas ndonesia
ndonesia Firahadikusum
Firahadikusuma) Muhamad *,,0 a) Muhamad *,,0 5iokimia: #rotein) InJim 5iokimia: #rotein) InJim dan "sam Gukleat 5andung:dan "sam Gukleat 5andung: #enerbit T5
#enerbit T5 %
%aarrii))RRiissnna a ddkkkk**,,,,7733aappoorraan n ##rraakkttiikkuum m 55iiookkiim m ##rrootteeiinn http://www.
http://www.scribd.com/doscribd.com/doc/75367880/6214c/75367880/62148145-Laporan-Pra8145-Laporan-Praktikum-iokim- ktikum-iokim- Prot!