B A B V P E M B A H A S A N
Dari hasil uji statistik diperlihatkan b a h w a p e m a p a r a n a s a p rokok, tanpa
\
pemberian a s a m askorbat atau teh hijau, s e l a m a 10 ataupun 20 hari t •
memberikan hasil skoring k e r u s a k a n y a n g s a m a . H a s i l ini menunjukkan bahwa t
t
pemajanan a s a p rokok s e l a m a 10 hari s u d a h m e n y e b a b k a n k e r u s a k a n paru p a d a tikus c o b a .
•<)•• J i k a kontrol d i b a n d i n g k a n d e n g a n kelompok tikus y a n g diberi a s a m askortDat 2 0 hari diikuti d e n g a n p a j a n a n a s a p rokok s e l a m a 10 hari ( A s R I O ) , tampak a d a n y a p e r b e d a a n y a n g b e r m a k n a , yaitu a d a n y a s e b u k a n s e l - s e l
r
r a d a n g , fibrosis, dan d i t e m u k a n n y a j u g a s e j u m l a h s e l datia p a d a kelompok tikus y a n g diberi a s a m askorbat 2 0 hari diikuti d e n g a n pajanan a s a p rokok s e l a m a 10 hari . ( A s R I O ) . Peri^andingan antara k e l o m p o k a s a m a s k o r b a t 2 0 hari diikuti
I'-d e n g a n pajanan a s a p rokok s e l a m a 10 hari ( A s R I O ) I'-d e n g a n kelompok tikus yang diberikan teh hijau 20 hari d a n a s a p rokok 10 hari ( T k R I O d a n T b R I O ) relatif tidak b e r t D e d a . H a s i l penilaian ini b e l u m m e n u n j u k k a n a d a n y a perbedaan potensi antioksidan a s a m a s k o r b a t d a n antioksidan y a n g teri<andung dalam teh hijau. K e m u n g k i n a n d i s e b a b k a n waktu penelitian yang singkat. Dari k e p u s t a k a a n diketahui antioksidan y a n g terdapat d a l a m teh hijau terdiri dari b e b e r a p a bentuk yakni epikatekin ( E C ) , epikatekin galat ( E C G ) , epigalokatekin ( E G C ) , d a n epigalokatekin galat ( E G C G ) . E G C G a d a l a h katekin yang memiliki
k e m a m p u a n a n t i o k s i d a n y a n g paling kuat, yakni sekitar 2 5 s a m p a i 100 kali lobih poten d i b a n d i n g k a n vitamin C dan e}^'^^-^^-^^
^ •
'i-, P e r b a n d i n g a n antara efek pemberian teh hijau d o s i s rendah (dosis E G C G ,270 mg/kgbb) jika d i b a n d i n g k a n d e n g a n teh hijau d o s i s tinggi (dosis E G C G 3 3 0 ;mg/kgbb) tidak m e m p e r l i h a t k a n a d a n y a p e r b e d a a n yang b e r m a k n a terhadap
h a m b a t a n k e r u s a k a n akibat pajanan a s a p rokok. B e b e r a p a penelitian y a n g
i.
,sudah d i l a k u k a n terlebih dahulu menunjukkan a d a n y a pengaruh p e r b e d a a n p e m b e r i a n d o s i s terhadap p e r c o b a a n . J u g a d i d a p a t k a n a d a n y a p e r b e d a a n kekuatan antara b e b e r a p a jenis antioksidan. E G C G memiliki potensi antioksidan
r
;-yang lebih kuat d i b a n d i n g k a n a s a m askorbat. B a h k a n dikatakan p e m b e r i a n dimer, yakni g a b u n g a n g o l o n g a n katekin y a n g s a t u d e n g a n y a n g lain, a k a n m e m b e r i k a n p o t e n s i antioksidan yang lebih kuat lagi. S e b a g i a n b e s a r dari penelitian tersebut dilakukan s e c a r a in vitro yakni terhadap sol hela, C L L - B ( l e u k e m i a limfosit B ) , s e l Sari<oma K a p o s i , d a n bakteri klamidia.''^-^^'.^°'^^ P e n e l i t i a n y a n g s u d a h dilakukan s e c a r a in vivo (tikus d a n manusia) a d a l a h untuk melihat efek fanmakologisnya.''-''^-^^ Penelitian y a n g dilakukan kali ini tidak
I'
j m e n d a p a t k a n p e r b e d a a n yang signifikan antara p e m b e r i a n dosis rendah d a n
9
1;
t d o s i s tinggi. H a l ini s a n g a t mungkin terjadi k a r e n a dilakukan s e c a r a in vivo, s e h i n g g a b a n y a k s e k a l i faktor yang m e m p e n g a r u h i ambilan antioksidan dari larutan teh hijau y a n g diberikan s e c a r a per oral. H a l lain y a n g mungkin m e m p e n g a r u h i h a s i l penelitian ini adalah waktu penelitian yang singkat. Peneliti j u g a m e r a s a k a n a d a n y a kekurangan d a l a m m e n y u s u n format skoring untuk
paru a k a n menimbulkan p e n e b a l a n dinding a l v e o l i , n a m u n peneliti m e n d a p a t kesulitan d a l a m ketersediaan instrumen untuk m e n g u k u r ketebalan dinding
}
alveoli.
A n a l i s i s data menunjukkan a d a pengaruh positif dari p e m b e r i a n teh hijau pada tikus c o b a yang diberi pajanan a s a p rokok. P e m b e r i a n teh hijau m a u p u n a s a m askorbat s a m a - s a m a m e m i n i m a l k a n k e r u s a k a n p a d a paru akibat rokok yang ditandai d e n g a n b e r k u r a n g n y a i n f i l t r a s i s e l r a d a n g , g r a n u l o m a , p r o s e s f i b r o s i s , j u m l a h s e l d a t i a y a n g t e r j a d i d i b a n d i n g a n d e n g a n kelompok y a n g hanya diberi a s a p rokok s a j a , d a n k e r u s a k a n p a d a silia pun minimal.
K e n y a t a a n ini m e n y o k o n g teori yang telah d i u n g k a p k a n s e b e l u m n y a b a h w a teh hijau yang m e n g a n d u n g s e n y a w a polifenol katekin m e r e d a m terjadinya peradangan.^''*-^' ^^''^
S e l d a t i a y a n g s e m u l a d i a s u m s i k a n a k a n m e n i n g k a t j u m l a h n y a p a d a kelompok tikus c o b a y a n g diberi larutan teh hijau t e m y a t a j u m l a h n y a m a l a h rendah. H a l ini d i s e b a b k a n oleh p e n e k a n a n E G C G p a d a teh hijau terhadap produksi limfokin (y interferon y a n g dihasilkan limfosit akibat a d a n y a partikel a s a p rokok) y a n g s e m e s t i n y a a k a n mengaktivasi m a k r o f a g d a n sel m o n o n u k l e a r lain.^^-^^
Partikel dari a s a p rokok a k a n menginduksi s e i T naif y a n g belum berdiferensiasi menjadi s e l - s e l T y a n g memiliki fungsi spesifik, seperti s e l T C D S , sel T C D 4 , dan s e l ThO. S e l ThO kemudian a k a n berdiferensiasi menjadi s e l Th1 dan sel T h 2 yang fungsinya saling m e n g i m b a n g i satu s a m a lain.^'''^^
S e l T C D S atau disebut j u g a s e l T sitotoksik, berfungsi m e l i s i s k a n s e l target d e n g a n g r a n u l n y a serta kontak d e n g a n s e l target untuk m e n g i n d u k s i a p o p t o s i s . S e l T C D 4 m e n g h a s i l k a n sitokin T G F p y a n g a k a n mengaktivasi kerja sel radang neutrofil serta m e n g h a m b a t aktivasi m a k r o f a g . S e l T h i a k a n m e m p r o d u k s i interleukin 2 (IL 2) yang m e n s t i m u l a s i faktor pertumbuhan ( V E G F , P D G F , F G F , d a n Iain-Iain); interi'eron y (IFN y) y a n g a k a n m e n g a k t i v a s i kelas M H C (makrofag) d a n m e n g h a m b a t kerja s e l T h 2 ; interleukin 3 (IL 3) yang m e n g i n d u k s i h e m a t o p o i e s i s d a n merekrut s e l r a d a n g Iain untuk datang ke lokasi r a d a n g ; G M - C S F untuk m e n g i n d u k s i m y e l o p o i e s i s d a n bersifat kemotaktik terhadap s e l radang lain; serta T N F a y a n g berfungsi m e n g a k t i v a s i makrofag d a n
m e n g i n d u k s i n e o v a s k u l a r i s a s i . 24
D I F F E R E N T I A T I O N O F T H S U B S E T S
Gambar 5.1. Skema diferensiasi sel-sel T, maturasi sel-sel T menjadi bentuk yang lebih spesifik membutuhkan berbagai interleukin sebagai induktor (www.fedem.orq)
.c B e b e r a p a hasil penelitian y a n g m e n g g u n a k a n larutan teh hijau s e b e l u m
I
ini m e n y a t a k a n b a h w a larutan teh hijau tampak menginhibisi faktor-faktor pertumbuhan yang d i s e k r e s i k a n makrofag aktif, seperti P D G F , V E G F , d a n m e n g i n d u k s i apoptosis."'^'"''' S e l T h 2 juga a k a n m e n g h a s i l k a n interleukin 4 (IL 4) yang menginhibisi aktivitas makrofag, d i m a n a aktivasi makrofag akan m e n g e l u a r k a n faktor-faktor p e r t u m b u h a n ; interieukin 5 (IL 5) y a n g menginduksi p e r t u m b u h a n d a n diferensiasi eosinofil; serta G S M - C S F d a n IL 3.^"
G r a n u l o m a y a n g terbentuk s e l a m a 10 hari p e r t a m a pajanan a s a p rokok, terjadi k a r e n a sel-sel T (sel T h i dan sel Th2) b e r u s a h a membatasi aktivitas partikel a s a p rokok y a n g masuk.^^'^^ K e d u a jenis s e l T ini mengeluarican IL 3 y a n g a k a n merekmt s e l r a d a n g ' lain - t e m i a s u k makrofag - untuk datang ke lokasi r a d a n g . S e l T h i juga memproduksi IFN y yang akan mengaktivasi
m a k r o f a g , s e h i n g g a makrofag m e n g e l u a r k a n faktor-faktor pertumbuhan. S e l a i n itu I F N y j u g a menginduksi makrofag untuk b e n j b a h m e n j a d i s e l epiteloid y a n g lebih b e s a r . S e l - s e l epiteloid a k a n b e r g a b u n g menjadi s e l r a k s a s a . kumpulan s e l - s e l r a k s a s a ini a k a n memt>€ntuk g r a n u l o m a . W a l a u p u n a d a s e l T h 2 yang m e n y e i m b a n g i kerja s e l Thi untuk membatasi pembentukan granuloma dan
m e n g h a m b a t aktivitas s e l epiteloid. n a m u n sinyal aktivasi lebih banyak dihasilkan o l e h s e l Thi.^'"^^
S e l T h 2 menon-aktifkan s e b a g i a n makrofag d a n menjadi makrofag
senescent, yakni makrofag y a n g kehilangan k e m a m p u a n n y a untuk m e n c e m a
partikel y a n g d i m a k a n n y a . Kerja s e l T h 2 m e n c e g a h p e n g e l u a r a n radikal b e b a s y a n g a k a n m e n y e b a b k a n k e r u s a k a n jaringan paru. M a k r o f a g s e n e s c e n t akan
didegradasi oleh s e l T h 1 , s e l T C D 4 , atau diinduksi a p o p t o s i s n y a oleh sel T
Gambar 5.2. Proses apoptosis terjadi karena perbaikan sel tidak terjadi sebagaimana mestinya, sehingga sel akan diprogram untuk menghancurkan dirinya. Sel T CDS memiliki kemampuan untuk menginduksi apoptosis sel rusak (www.qhr.nlm.nih.pov)
P r o s e s eliminasi tidak b i s a b e r i a n g s u n g lengkap akibat pajanan a s a p rokok terns m e n e m s , s e h i n g g a m a s i h terbentuk g r a n u l o m a . P a d a p e m b e r i a n teh hijau setelah 10 hari periakuan d e n g a n a s a p rokok, E G C G y a n g teri<andung d a l a m teh hijau a k a n m e n g h a m b a t IFN y dan faktor-faktor pertumbuhan ( F G F , V E G F , dan P D G F ) . H a m b a t a n E G C G terhadap i F N y m e n y e b a b k a n h a m b a t a n proliferasi kelas M H C d a n h a m b a t a n terhadap s e l T h 2 . H a m b a t a n terhadap s e l Th2 tidak m e n y e b a b k a n aktivitas makrofag terhambat, tetapi m e n g h a m b a t
)ses myelopoiesis d a n d a t a n g n y a s e l m o n o n u k l e a r lain ke lokasi radang jialui hambatan sinyal kemotaktik.^^'^^'^^
Makrofag yang s u d a h terkumpul p a d a lokasi r a d a n g akibat partikel a s a p cok akan m e n s e k r e s i k a n faktor pertumbuhan. S e k r e s i makrofag a k a n ;modifikasi dirinya menjadi s e l epiteloid dan a k a n b e r g a b u n g d e n g a n s e l iteloid lain untuk menjadi s e l d a t i a . D e n g a n terhambatnya faktor pertumbuhan th E G C G d a l a m teh hijau, m a k a aktivitas makrofag untuk bermodifikasi jnjadi s e l r a k s a s a terhambat. H a l ini y a n g m e n e r a n g k a n efek 'reversibel' p a d a ingan paru tikus y a n g diberikan larutan teh hijau p a d a 10 hari k e d u a , setelah jngalami k e r u s a k a n p a d a 10 hari p e r t a m a . P e m b e r i a n teh hijau m e n y e b a b k a n antitas s e l datia b e r k u r a n g , tetapi partikel a s a p rokok tetap a k a n diingesti o l e h akrofag aktif dan t>eberapa s e l r a d a n g lain seperti neutrofil. H a l ini s a n g a t mguntungkan.karena p e m b e n t u k a n g r a n u l o m a m e n y e b a b k a n ruang paru y a n g ;ktif menjadi berkurang. G r a n u l o m a y a n g aktif j u g a b e r p o t e n s i m e n g h a s i l k a n Jikal b e b a s y a n g a k a n m e n c e m a jaringan paru sendiri, s e h i n g g a terjadi rusakan anatomis paru. S e c a r a u m u m , pemberian larutan teh hijau tidak a k a n ?ngalami depresi s u m s u m tulang d a n p e n e k a n a n d a y a tahan tubuh k a r e n a 5CG tidak melakukan h a m b a t a n y a n g berarti pada p r o s e s h e m a t o p o i e s i s d a n /elopoiesis.^"^"^
F i b r o s i s luas tampak terjadi p a d a jaringan paru y a n g h a n y a diberi a s a p (ok baik 10 hari m a u p u n 2 0 hari ( A R 1 0 dan R20). F i b r o s i s juga terjadi p a d a lompok yang diberi rokok s a j a teriebih dahulu s e l a m a 10 hari pertama dan anjutkan d e n g a n p e m b e r i a n antioksidan. Fibrosis p a d a k e l o m p o k yang juga
diberi antioksidan lebih ringan secara bermakna dibanding fibrosis yang terjadi pada kelompok asap rokok saja. Hal inl bisa terjadi karena penekanan radikal bebas terhadap enzim a1-antitripsin tidak terjadi.^'"'^^
Pulmonary Fibrosis
LynipKocrt*
Gambar 5.3. Pada penelitian ini tampak adanya pengaruii fibrosis datang dari sel limfosit dan makrofag yang terakffvasi, serta melalui pelepasan faktor-faktor pertumbuhan oleh sel epitel parenkim. Hamtyatan katekin terhadap proses fibrosis adalah melalui inhibisi kerja ylFN, FGF,
VEGF, dan PDGF (wvrw.ahr.nlm.nih.aov)
Fibrosis nampak pada semua kelompok periakuan, namun lebih ringan terjadinya pada kelompok yang menerima antioksidan (larutan teh hijau ataupun asam askorbat). Walaupun larutan teh hijau diberikan teriebih dahulu 10 hari sebelum mendapat paparan asap rokok, namun baik E G C G dalam teh hijau ataupun asam askorbat adalah senyawa yang larut dalam air dan tidak dideposit oleh tubuh, EGCG mencapai waktu puncaknya 24 jam setelah pemberian per
oral dan akan menurun sesudah itu. E G C G ditemukan pada urin setelah 24-48
I
jam dalam bentuk utuh maupun terkonjugasi.^
\ Fibrosis pada kelompok yang diberi rokok teriebih dahulu (R20Tk, R20Tb, dan R20As) juga minimal dibandingkan dengan kelompok AR10. Selain karena tidak ada yang menekan kerja enzim a1-antitripsin yang menjaga keutuhan jaringan ikat pam, hambatan E G C G terhadap faktor pertumbuhan yang bersifat kemotaktik terhadap sel-sel fibroblast menyebabkan pembentukan jaringan fibrosis dihambat.
