Gambar 1. Ekstrak daun sukun

(1)

(2)

(3)

COOH CO CH₂ CH₂ COOH + CH3 CH.NH₂ COOH COOH CH.NH₂ CH2 CH2 COOH + CH3 CO COOH

Asam alfa ketoglutarat Alanin

Asam glutamat

Asam piruvat ALT

Gambar 3.Persamaam reaksi pembentukan asam piruvat dan asam glutamat dengan ALT sebagai katalisator (16)

COOH CO CH₃ + NO₂ NO₂ NH NH₂ NO₂ NO₂ NH N C CH₃ COOH + H2O Asam Piruvat 2,4-dinitrofenilhidrazin 1-piruvat-2,4-dinitrofenilhidrazin

Gambar 4. Reaksi pembentukan warna pada pengukuran ALT plasma secara kolorimetri (16)

(4)

COOH HC NH₂ CH₂ COOH + COOH C O CH₂ CH₂ COOH AST COOH C O CH₂ COOH + COOH HC NH₂ CH₂ CH₂ COOH Asam aspartat

Asam alfa ketoglutarat

oksaloasetat

Asam glutamat

Gambar 5. Reaksi pembentukan oksaloasetat dan asam glutamat dengan AST sebagai katalisator (16) COOH C O CH3 + NO2 NH NO2 NH2 NO2 NO2 NH N C CH3 COOH + H2O 2,4-dinitrofenilhidrazin 1-piruvat-2,4-dinitrofenilhidrazin Asam Piruvat COOH C O CH2 COOH COOH C O CH3 + COOH Asam Piruvat Oksaloasetat

Gambar 6. Reaksi pembentukan warna pada pengukuran AST plasma secara kolorimetri (16)

(5)

CH 3 C O C NOH CH 3 + H2O H+ CH ₃ C O C O CH 3 + NH 2OH D ia s e tilm o n o k s im D ia s e til H id r o k s ila m in NH 2 C O NH ₂ + CH ₃ C O C O CH 3 H+ p a n a s CH 3 C N C N CH 3 C O + 2 H2O U r e a D ia s e til D ia z in e

Gambar 7. Reaksi pembentukan warna pada pengukuran kadar urea plasma dengan metode fearon (22)

NH₂ NH₂ OH H₂N + C C N N O CH₃ NH OH H₂N NH₂ C

Asam Pikrat Kreatinin

Kompleks kreatinin pikrat NH₂ N N O NH₂ CH3 H H H

Gambar 8. Reaksi pembentukan kompleks kreatinin pikrat pada pengukuran kadar kreatinin dengan metode jaffe yang dimodifikasi (21)

(6)

Kurva Kalibrasi ALT

0

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

0

20

40

60

80

100 Nilai Aktivitas (U/I)

S

e

ra

pa

n (

A

)

r = 0.9987

Gambar 9. Kurva kalibrasi aktivitas ALT plasma

Keterangan: Persamaan yang didapatkan adalah y =4,90289.10-3+2,69993.10-3 x

Kurva Kalibrasi AST

0

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

0

20

40

60

80

100 Nilai Aktivitas (U/I)

S

e

ra

pa

n (

A

)

r = 0,9909

Gambar 10. Kurva kalibrasi aktivitas AST plasma

(7)

Kurva Kalibrasi Urea

0

0.2

0.4

0.6

0.8

0

20

40

60

80

100 Kadar Urea (mg/dI)

S

e

ra

pa

n (

A

)

r = 0,9990

Gambar 11. Kurva kalibrasi kadar urea plasma

Keterangan: Persamaan yang didapatkan adalah y = 0,0572 + 5,976.10-3x

26.07 27.85 23.81 23.56 23.81 26.96 23.44 24.41 22.07 24.52 0 5 10 15 20 25 30 Akt ivit as A L T rat a-rat a ( U /I) I II III IV V Kelompok Perlakuan 24 jam 14 hari

Gambar 12 . Diagram aktivitas ALT rata-rata plasma mencit jantan.

Keterangan: kelompok I = Kontrol normal CMC 1%; kelompok II = dosis I (2,08 gram ekstrak/kgbb); kelompok III = dosis II (4,17 gram ekstrak/kgbb); kelompok IV = dosis III (8,34 gram ekstrak/kgbb); kelompok V = dosis IV (16,67 gram ekstrak/kgbb)

(8)

24.15 25.78 20.56 22.04 20.67 22.44 22.11 22.81 _21.48 25.48 0 5 10 15 20 25 30 Akt ivi tas ALT rat a -r at a (U /I) I II III IV V Kelompok Perlakuan 24 jam 14 hari

Gambar 13. Diagram aktivitas ALT rata-rata plasma mencit betina.

Keterangan: kelompok I = Kontrol normal CMC 1%; kelompok II = dosis I (2,08 gram ekstrak/kgbb); kelompok III = dosis II (4,17 gram ekstrak/kgbb); kelompok IV = dosis III (8,34 gram ekstrak/kgbb); kelompok V = dosis IV (16,67 gram ekstrak/kgbb) 27.08 29.85 25.84 28.79 25.3 28.94 24.47 29.05 24.13 28.98 0 5 10 15 20 25 30 A kt ivi tas A S T r at a-ra ta (U/ I) I II III IV V Kelompok Perlakuan 24 jam 14 hari

Gambar 14. Diagram aktivitas AST rata-rata plasma mencit jantan

(9)

26.74 26.7426.4 27.65 26.78 26.1826.06 24.62 26.4 25.8 23 24 25 26 27 28 Akti vi tas AS T rata-ra ta (U/ I) I II III IV V Kelompok Perlakuan 24 jam 14 hari

Gambar 15. Diagram aktivitas AST rata-rata plasma mencit betina

Keterangan: kelompok I = Kontrol normal CMC 1%; kelompok II = dosis I (2,08 gram ekstrak/kgbb); kelompok III = dosis II (4,17 gram ekstrak/kgbb); kelompok IV = dosis III (8,34 gram ekstrak/kgbb); kelompok V = dosis IV (16,67 gram ekstrak/kgbb) 26.91 22.91 26 28.18 _27.5 23.07 31.77 29.56 31.77 30.93 0 5 10 15 20 25 30 35 K a d a r U rea R a ta-R ata (m g/ dl ) I II III IV V Kelompok Perlakuan 24 jam 14 hari

Gambar 16. Diagram kadar urea rata-rata plasma mencit jantan

(10)

25.04 26.38 24.82 28.18 22.13 26.3 22.13 25.77 25.07 27.21 0 5 10 15 20 25 30 Kad ar u rea rata -rata (m g/ dl ) I II III IV V Kelompok Perlakuan 24 jam 14 hari

Gambar 17. Diagram kadar urea rata-rata plasma mencit betina

Keterangan: kelompok I = Kontrol normal CMC 1%; kelompok II = dosis I (2,08 gram ekstrak/kgbb); kelompok III = dosis II (4,17 gram ekstrak/kgbb); kelompok IV = dosis III (8,34 gram ekstrak/kgbb); kelompok V = dosis IV (16,67 gram ekstrak/kgbb) 0.80 0.78 0.75 0.72 0.72 0.63 0.55 0.63 0.55 0.54 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 Kad ar kreat in in rat a -r at a (mg/ dl ) I II III IV V Kelompok Perlakuan 24 jam 14 hari

Gambar 18. Diagram kadar kreatinin rata-rata plasma mencit jantan

(11)

0.71 0.67 0.51 0.5 0.7 0.66 0.63 0.48 0.75 0.69 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 K a d a r kr eatin in r a ta-ra ta (m g/dl) I II III IV V Kelompok Perlakuan 24 jam 14 hari

Gambar 19. Diagram kadar kreatinin rata-rata plasma mencit betina Keterangan: kelompok I = Kontrol normal CMC 1%; kelompok II = dosis I (2,08 gram ekstrak/kgbb); kelompok III = dosis II (4,17 gram ekstrak/kgbb); kelompok IV = dosis III (8,34 gram ekstrak/kgbb); kelompok V = dosis IV (16,67 gram ekstrak/kgbb)

(12)

Tabel 3 Kelompok Perlakuan I II III IV V Diberi larutan CMC 1% Diberi bahan uji dosis 2,08

gram ekstrak/KgBB Diberi bahan uji dosis 4,17

gram ekstrak/KgBB Diberi bahan uji dosis 8,34

gram ekstrak/KgBB Diberi bahan uji dosis 16,67 gram ekstrak/KgBB 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 Perlakuan Jumlah mencit jantan Jumlah mencit betina Kelompok

(13)

Tabel 4

Serapan Larutan Standar ALT Plasma Dalam Berbagai Aktivitas Dalam Pembuatan Kurva Kalibrasi

No Tabung Serapan (A) Larutan Standar Piruvat (mL) Nilai Aktivitas (U/I) Larutan Dapar Substrat (mL) 1. 2. 3. 4. 5. 6. 0,00 0,10 0,20 0,30 0,50 0,40 0,70 0,60 0,50 1,00 0,90 0,80 0 14 32 51 69 92 0,000 0,049 0,095 0,256 0,188 0,138

(14)

Tabel 5

Tahap Pengukuran Kadar Alanin Transferase

Warna yang terbentuk diukur serapannya dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 505 nm. kemudian serapan yang diperoleh dimasukkan ke dalam persamaan regresi linier sehingga didapat nilai aktivitasnya.

Tabung uji Tabung blanko Perlakuan

Heparin +0,5 mL larutan dapar substrat Heparin +0,5 mL larutan dapar substrat

inkubasi pada suhu 37ºC selama sepuluh menit

0,1 mL plasma inkubasi pada suhu 37ºC

selama 30 menit 0,5 mL reagen warna 0,5 mL reagen warna 0,1 mL plasma

Diamkan pada suhu kamar selama 20 menit

5,0 mL natrium hidroksida 0,4 N

diamkan pada suhu kamar selama 30 menit

(15)

Tabel 6

Aktivitas ALT Plasma Mencit Jantan

Kelompok I II III IV V 27,07 24,11 26,70 24,48 21,89 22,63 24,48 28,56 30,78 30,04 23,00 26,70 21,89 24,48 22,26 26,33 19,30 21,89 27,81 24,48 20,04 23,00 21,15 27,07 22,26 23,00 27,44 26,70 26,70 20,78 23,37 20,41 18,56 21,89 22,26 27,07 25,59 26,33 27,44 21,52 18,56 18,93 23,37 19,30 27,44 24,11 Aktivitas ALT Setelah 24 jam dari perlakuan (U/I) _22,63 24,48 24,48 17,44 rata-rata ± SD 26,07± 3,05 23,81± 2,64 23,81 ± 2,88 23,44 ± 3,03 22,07± 3,30 31,89 24,48 33,37 22,26 23,37 29,67 35,59 33,00 24,11 20,78 19,30 24,11 25,96 31,89 25,59 19,30 17,07 28,93 25,22 18,18 19,30 32,26 28,18 24,48 23,00 18,93 32,63 31,89 26,70 32,26 30,41 27,44 21,52 25,22 17,44 21,52 31,52 21,89 25,59 21,52 28,56 25,96 24,85 31,89 18,93 23,74 22,63 21,15 27,07 20,41 rata-rata ± SD 27,85± 5,41 23,56± 4,93 26,96 ± 5,37 24,41± 4,44 24,52± 3,99 Aktivitas ALT Setelah 14 hari dari perlakuan (U/I)

(16)

Tabel 7

Aktivitas ALT Plasma Mencit Betina

Kelompok I II III IV V 25,59 20,78 31,15 17,44 29,67 19,30 28,18 18,56 28,93 21,89 27,44 17,07 18,18 20,04 18,93 14,48 19,30 23,00 24,48 22,63 18,18 16,70 25,22 17,07 22,26 25,59 19,67 17,81 18,56 25,59 16,33 19,67 25,59 16,33 24,11 22,26 25,96 21,15 28,18 21,52 16,70 22,26 18,18 17,44 23,37 17,44 28,18 21,15 23,74 26,33 Aktivitas ALT Setelah 24 jam dari perlakuan (U/I) rata-rata ± SD 24,15 ± 5,13 20,56± 3,83 20,67 ± 3,65 22,11± 3,97 21,48 ± 4,00 20,41 25,96 28,18 31,89 20,78 32,26 23,00 24,48 27,81 23,00 25,96 27,44 18,93 27,07 20,41 17,07 23,74 18,93 16,70 24,11 20,04 18,56 28,93 28,18 15,22 19,30 20,41 20,78 25,22 27,81 24,11 18,93 29,67 26,70 18,93 17,81 22,63 23,00 25,59 20,78 25,59 31,52 30,04 24,11 22,63 18,93 22,63 23,74 26,70 28,93 rata-rata ± SD 25,78 ± 4,22 22,04 ± 4,11 22,44± 4,73 22,81± 3,81 25,48 ± 3,87 Aktivitas ALT Setelah 14 hari dari perlakuan (U/I)

(17)

Tabel 8

Serapan Larutan Standar AST Plasma Dalam Berbagai Aktivitas Dalam Pembuatan Kurva Kalibrasi

Larutan Standard Piruvat (mL) Larutan Dapar Substrat (mL) Nilai Aktivitas (U/I) Serapan (A) No Tabung 2. 3. 4. 5. 6. 1. 0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 1,00 0,75 0,80 0,95 0,90 0,85 95 0 9 21 36 60 0,178 0,248 0,032 0,076 0,124 0,000

(18)

Tabel 9

Tahap Pengukuran Kadar Aspartat Amino Transferase

Tabung uji Tabung blanko Perlakuan

Heparin +0,5 mL larutan dapar substrat 0,1 mL plasma 0,5 mL reagen warna 5,0 mL natrium hidroksida 0,4 N Heparin +0,5 mL larutan dapar substrat 0,5 mL reagen warna 0,1 mL plasma 5,0 mL natrium hidroksida 0,4 N

diamkan pada suhu kamar selama 30 menit

Diamkan pada suhu kamar selama 20 menit inkubasi pada suhu 37ºC

selama 60 menit inkubasi pada suhu 37ºC

selama sepuluh menit

Ukur serapan dari warna yang dibentukdengan spektrofotometer pada panjang gelombang 505 nm, kemudian serapan yang diperoleh dimasukkan ke dalam persamaan regresi linier sehingga didapat nilai aktivitasnya.

(19)

Tabel 10

Aktivitas AST Plasma Mencit Jantan

Kelompok I II III IV V 21,45 24,09 26,74 26,37 25,61 25,23 35,45 20,69 30,53 34,69 32,42 25,23 14,25 28,64 28,26 22,96 25,61 31,29 27,50 22,20 26,74 18,80 25,61 22,96 30,15 25,61 32,04 28,26 20,31 22,58 27,12 21,82 29,77 25,99 28,64 21,45 22,96 17,66 21,82 27,50 24,09 30,15 26,37 21,45 25,61 17,66 21,07 23,72 19,93 31,29 Aktivitas AST Setelah 24 jam dari perlakuan (U/I) rata-rata ± SD 27,08± 5,03 25,84 ± 5,22 25,30 ± 4,22 24,47 ± 3,88 24,13 ± 4,36 22,20 24,09 35,45 29,77 33,56 29,39 36,21 32,80 25,99 29,01 29,01 24,85 36,21 30,53 29,01 24,09 35,07 25,61 29,77 23,72 37,72 25,61 35,07 30,15 22,96 31,66 27,50 30,91 25,23 22,58 29,77 24,47 35,07 29,77 24,09 30,15 31,29 35,45 28,26 22,20 24,85 35,07 28,26 29,01 33,56 29,39 32,04 22,58 23,72 31,29 rata-rata ± SD 29,85± 4,73 28,79± 4,37 28,94± 5,06 29,05 ± 4,44 28,98± 4,20 Aktivitas AST Setelah 14 hari dari perlakuan (U/I)

(20)

Tabel 11

Aktivitas AST Plasma Mencit Betina

Kelompok I II III IV V 23,72 34,31 26,37 22,96 31,29 27,50 30,53 21,45 22,20 27,12 23,72 29,77 19,93 36,21 20,31 25,99 24,47 28,64 23,72 31,29 29,01 25,99 35,83 26,74 25,61 26,74 30,53 23,34 22,58 25,99 21,45 32,04 25,61 19,55 20,69 24,47 24,85 30,15 22,20 35,07 30,53 25,99 29,77 36,58 24,47 23,34 20,69 23,34 22,96 26,37 Aktivitas AST Setelah 24 jam dari perlakuan (U/I) rata-rata ± SD 26,74 ± 4,29 26,40± 5,09 26,78 ± _4,23 26,06 ± _4,99 26,40 ± _4,70 34,31 24,47 27,12 23,34 25,61 21,45 34,69 30,53 25,61 20,31 21,07 28,64 30,15 25,23 22,96 36,21 30,53 27,88 29,77 24,09 22,96 21,82 32,42 20,69 24,47 24,47 25,23 35,83 28,26 25,61 30,91 23,34 26,37 26,74 19,17 22,20 27,12 18,42 32,42 19,55 32,42 32,80 23,72 22,20 25,61 20,31 27,12 27,50 26,74 19,55 rata-rata ± SD 26,74 ± 4,97 27,65 ± 4,44 26,18 ± 4,75 24,62 ± 4,89 25,80 ± 4,53 Aktivitas AST Setelah 14 hari dari perlakuan (U/I)

(21)

Tabel 12

Serapan Larutan Standar Urea Dalam Berbagai Kadar Dalam Pembuatan Kurva Kalibrasi Kadar Urea (mg/dL) Serapan (A) No Tabung Tabel 6 1. 2. 3. 4. 5. 6. 10,008 20,016 30,024 40,032 50,040 60,048 0,115 0,296 0,357 0,415 0,179 0,237

(22)

Tabel 13

Kadar Urea Plasma Mencit Jantan

Kelompok I II III IV V 19,55 22,40 25,57 37,12 26,58 20,22 32,60 34,95 18,71 31,43 22,39 31,43 20,72 24,57 19,38 31,26 33,44 34,71 19,22 22,90 25,41 36,45 26,08 19,55 26,41 26,75 35,11 33,61 18,71 26,91 34,11 29,42 31,93 26,75 24,57 32,77 41,30 33,94 36,45 26,41 16,37 36,12 23,23 16,04 17,88 25,74 25,24 40,63 31,77 17,04 Kadar urea setelah 24 jam dari perlakuan (mg/dL) rata-rata ± SD 26,91± 6,75 26,00± 6,06 27,50 ± 6,00 31,77± 5,11 14,03 21,06 25,07 24,73 7,84 15,20 30,43 24,07 37,12 29,59 39,13 26,91 29,76 27,08 14,36 20,72 27,58 25,07 39,96 31,26 26,91 26,75 20,72 21,39 14,15 14,03 21,73 30,59 24,23 30,25 27,25 32,94 37,78 21,22 13,36 25,41 30,26 49,17 25,07 33,10 32,60 35,61 27,25 23,57 23,40 17,04 37,62 33,44 38,96 39,79 rata-rata ± SD 22,91± 8,70 28,18± 7,67 23,07± 5,86 29,56± _9,73 30,93 ± _7,72 Kadar urea setelah 14 hari dari perlakuan (mg/dL) 31,77± 5,11

(23)

Tabel 14

Kadar Urea Plasma Mencit Betina

Kelompok I II III IV V 26,24 32,60 15,37 23,73 22,23 20,72 30,26 28,25 20,39 30,59 24,07 37,96 23,73 25,91 17,21 18,38 24,74 25,91 18,21 32,10 22,73 24,40 12,19 23,23 17,71 26,75 23,90 26,58 26,91 16,87 16,20 28,59 19,89 16,54 15,20 24,07 25,91 33,77 24,40 16,70 16,37 24,90 15,20 24,24 22,23 29,76 33,94 38,29 22,73 23,06 Kadar urea setelah 24 jam dari perlakuan (mg/dL) rata-rata ± SD 25,04 ± 5,48 24,82± 6,44 22,13 ± 4,94 22,13 ± 6,23 33,94 24,57 30,93 25,91 23,90 23,73 20,89 23,57 33,94 22,39 17,21 16,87 29,29 36,45 21,39 24,07 22,56 24,24 33,44 37,45 19,72 21,72 30,43 23,23 18,55 24,24 29,26 30,43 33,27 35,94 19,55 22,06 28,92 25,41 21,56 24,07 29,76 26,58 25,07 34,77 26,58 22,23 28,43 23,23 21,22 22,73 21,56 31,77 35,28 39,12 rata-rata ± SD 26,38 ± 4,78 28,18± 7,67 26,30 ± 7,50 25,77 ± 4,49 27,21 ± 6,31 Kadar urea setelah 14 hari dari perlakuan (mg/dL) 25,07 ± 7,20

(24)

Tabel 15

Kadar Kreatinin Plasma Mencit Jantan Kelompok I II III IV V Kadar kreatinin setelah 24 jam dari perlakuan (mg/dL) 1,12 0,59 1,24 0,59 0,47 1,12 0,41 0,71 0,77 1,41 0,41 0,83 1,18 0,94 1,36 0,77 0,94 0,53 0,59 0,65 1,06 0,77 0,41 0,41 0,71 0,65 0,41 0,65 0,77 0,94 0,53 0,41 0,53 0,94 0,71 0,59 0,71 0,71 0,41 0,47 0,35 0,29 0,41 0,59 0,47 0,41 0,41 0,41 0,41 0,47 rata-rata ± SD 0,80 ± 0,36 0,75 ± 0,27 0,72 ± 0,28 0,55 ± 0,19 0,55 ± 0,23 0,53 0,53 0,47 1,18 0,65 0,41 0,41 1,18 1,47 0,83 0,65 0,71 0,41 0,65 1,24 0,47 0,83 1,00 1,12 0,35 0,41 1,00 0,83 0,71 0,41 0,35 0,53 0,94 0,24 0,83 0,12 0,35 1,00 1,18 0,35 0,29 0,41 0,41 1,18 0,35 0,47 0,51 0,41 0,29 0,71 0,83 0,77 0,35 1,12 0,59 rata-rata ± SD 0,78 ± 0,37 0,72 ± 0,32 0,63± 0,26 0,63± 0,33 0,54± 0,32 Kadar kreatinin setelah 14 hari dari perlakuan (mg/dL)

(25)

Tabel 16

Kadar Kreatinin Plasma Mencit Betina Kelompok I II III IV V 0,77 0,94 0,59 0,77 0,29 0,83 0,41 1,24 0,47 0,77 0,83 0,65 0,83 0,41 0,59 0,18 0,29 0,53 0,41 0,35 0,59 0,53 0,94 0,41 0,29 1,18 0,47 0,65 1,12 0,83 1,06 0,65 0,77 0,29 0,24 0,53 1,00 0,83 0,47 0,47 1,06 0,47 0,53 0,83 0,41 0,41 0,77 1,47 0,88 0,65 Kadar kreatinin setelah 24 jam dari perlakuan (mg/dL) rata-rata ± SD 0,71± 0,28 0,51± 0,22 0,70± 0,30 0,63± 0,28 0,24 0,35 1,24 0,59 0,53 0,41 0,65 0,88 1,00 0,77 0,35 0,53 0,53 0,29 0,35 0,29 0,88 0,53 0,59 0,65 0,47 0,82 0,59 0,53 0,35 0,65 0,77 0,59 1,12 0,71 0,59 0,41 0,41 0,47 0,24 0,35 0,53 0,59 0,65 0,53 1,06 0,47 0,59 0,53 0,35 0,41 0,88 0,88 1,00 0,71 rata-rata ± SD 0,67± 0,31 0,50± 0,18 0,66± 0,21 0,48± 0,13 0,69± 0,25 Kadar kreatinin setelah 14 hari dari perlakuan (mg/dL) 0,75± 0,33

(26)

Lampiran 1 Penetapan Dosis

Ekstrak daun sukun dari fraksi etil asetat mengandung flavonoid sebanyak 30%, dimana usual dose dari flavonoid yang digunakan pada hewan coba tikus adalah 50 mg/kgbb. Usual dose untuk mencit diperoleh dengan mengalikan usual dose tikus dengan berat badan mencit

Penentuan dosis terbesar dilakukan dengan uji pendahuluan untuk mengetahui dosis terbesar yang dapat disondekan kepada mencit, dosis terbesar yang dapat disondekan kepada mencit adalah 5 gram flavonoid/kgbb atau 16,67 gram ekstrak/kgbb.

Dosis untuk 20 gram mencit adalah = 16,67 gram ekstrak/kgbb x 0,02kgbb = 0,333 gram ekstrak

Dari dosis tersebut kemudian dilakukan pengenceran dua kali lipatnya. Pengujian nilai LD50 menggunakan dosis berturut-turut 2,08; 4,17; 8,34 dan16,67 gram ekstrak/kgbb.

(27)

Lampiran 2 Pembuatan Larutan Uji

Pembuatan larutan uji dilakukan dengan menimbang ekstrak daun sukun sebanyak 3,33 gram kemudian disuspensikan dengan larutan CMC 1%. Larutan CMC dibuat dengan menimbang 100 mg CMC yang kemudian dikembangkan dan disuspensikan menggunakan 10 mL aquadest.

Pembuatan larutan uji dibuat dari penimbangan bahan untuk dosis tertinggi yaitu 16,67 gram ekstrak/kgbb (dosis 4). Dosis 2,08 gram ekstrak/kgbb (dosis 1), dosis 4,17 gram ekstrak/kgbb (dosis 2), dosis 8,34 gram ekstrak/kgbb (dosis 3) dibuat dengan cara mengencerkannya dari dosis 4.

Setiap mencit dengan berat badan 20 gram diberikan jamu pelangsing sebanyak 0,5 mL. larutan uji dosis 4 dibuat dengan konsentrasi 66,6% (66,6 gram ekstrak disuspensikan dalam 100 mL larutan CMC 1%). Dosis 3 dibuat dengan pengenceran dosis 4 (konsentrasi 33,3%). Dosis 2 dibuat dengan pengenceran dosis 3 (konsentrasi 16.65%). Dosis 1 dibuat dengan pengenceran dosis 2 (konsentrasi 8,325%).

(28)

Lampiran 3 Perolehan Regresi Linier

Cara memperoleh regresi linier dari persamaan garis y=a+bx

a dan b adalah bilangan garis normal yang dapat dihitung dengan rumusan sebagai berikut:

a =

( )

(

) (

)(

)

(

₂

) (

)

2 2

∑

− − X X N XY X X Y b =

(

) (

)( )

(

₂

) (

)

2

∑

− − X X N Y X XY N

Derajat kelinieran atau disebut jugakoefisien korelasi dapat dihitung dengan rumus: r =

(

) (

)( )

(

) (

)

{

₂ 2

}

{

(

₂

) ( )

2

}

∑

− − − Y Y N X X N Y X XY N

Jika r = 1 maka korelasi antara X dan Y sempurna sehingga semua titik pada diagram antara X dan Y terletak pada satu garis lurus.

(29)

Lampiran 4

Perhitungan Aktivitas ALT Plasma

Persamaan garis yang diperoleh dari kurva kalibrasi: y = 4,902 . 10-3_{+ 2,69993 . 10}-3._.x

r = 0,9987

Contoh

Serapan yang diperoleh = y = 0, 080

Maka Aktivitas ALT = x

= 0,080 – 0,004902

0,00269993

(30)

Lampiran 5

Perhitungan Aktivitas AST Plasma

Persamaam garis yang diperoleh dari kurva kalibrasi: y = 0,014 + 2,594. 10-3_x

r = 0,9909

Contoh:

Serapan yang diperoleh = y = 0, 022 Maka aktivitas AST = x

= 0,075 – 0,014

2,594.10-3 = 23,5158 (U/I)

(31)

Lampiran 6

Perhitungan kadar urea plasma

Persamaan garis yang diperoleh dari kurva kalibrasi: y = 0,0572 + 5,976.10-3_x

r = 0,999

Contoh:

Serapan yang diperoleh = y = 0,149 Maka kadar urea = x

= 0,149 – 0,0572

5,976.10-3

(32)

Lampiran 7

Perhitungan kadar kreatinin plasma

Rumus perhitungan kadar kreatinin plasma

At =90 (sampel) – At = 30 (sampel) x C At = 90 (standard) – At = 30 (standard) Dari pengukuran didapatkan

At = 90 (standard) : 0,022 At = 30 (standard) : 0,005 C = 1.002 mg/dL Contoh: At = 90 (sampel) : 0,063 At = 30 (sampel) : 0,045 ∆t sample 0,018

Maka kadar kreatinin

= 0,018 x 1.002

0,022 -0,005

(33)

Lampiran 8

Uji ANAVA Terhadap Aktivitas ALT Plasma Mencit Jantan Setelah 24 Jam dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data aktivitas ALT plasma mencit jantan setelah 24 jam dari pemberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data aktivitas ALT plasma mencit jantan antar kelompok

tidak berbeda secara bermakna

Ha = data aktivitas ALT plasma mencit jantan antar kelompok berbeda secara bermakna

Statistik uji : uji F

α : 0,05

Daerah kritis : Ho ditolak jika signifikansi <α

Hasil : nilai signifikansi kelima kelompok = 0,072 >α

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data aktivitas ALT plasma mencit jantan antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

Aktivitas ALT mencit jantan

df _Rata-rata F Sig. Kuadrat Jumlah kuadrat Antar kelompok Dalam Kelompok Total 82,676 401,859 484,535 4 45 49 20,669 8,930 2,315 0,072

(34)

Lampiran 9

Uji ANAVA Terhadap Aktivitas ALT Plasma Mencit Jantan Setelah 14 hari dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data aktivitas ALT plasma mencit jantan setelah 14 hari dari pemberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data aktivitas ALT plasma mencit jantan antar kelompok

Ha = data aktivitas ALT plasma mencit jantan antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data aktivitas ALT plasma mencit jantan antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

Aktivitas ALT mencit jantan

_Jumlah df F Sig. kuadrat Rata-rata Kuadrat

Antar kelompok Dalam Kelompok Total 136,018 1061,783 1197,801 4 45 49 34,005 23,595 1,441 0,236

(35)

Lampiran 10

Uji ANAVA Terhadap Aktivitas ALT Plasma Mencit Betina Setelah 24 Jam dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data aktivitas ALT plasma mencit betina setelah 24 jam dari pemberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data aktivitas ALT plasma mencit betina antar kelompok

Ha = data aktivitas ALT plasma mencit betina antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Hasil : nilai signifikansi kelima kelompokm = 0,380 >α

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data aktivitas ALT plasma mencit betina antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

Aktivitas ALT mencit betina

Antar kelompok Dalam Kelompok Total 85,453 775,445 860,898 4 45 49 21,363 17,232 1,240 0,380

(36)

Lampiran 11

Uji ANAVA Terhadap Aktivitas ALT Plasma Mencit Betina Setelah 14 Hari dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data aktivitas ALT plasma mencit betina setelah 14 hari dari pemberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data aktivitas ALT plasma mencit betina antar kelompok

Ha = data aktivitas ALT plasma mencit betina antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data aktivitas ALT plasma mencit betina antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

Aktivitas ALT mencit betina

df F Sig. Antar kelompok Dalam Kelompok Total 126,163 779,739 905,902 4 45 49 31,541 17,328 1,820 Jumlah

kuadrat Rata-rata Kuadrat

(37)

Lampiran 12

Uji ANAVA Terhadap Aktivitas AST Plasma Mencit Jantan Setelah 24 Jam dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data aktivitas AST plasma mencit jantan setelah 24 jam dari pemberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data aktivitas AST plasma mencit jantan antar kelompok

Ha = data aktivitas AST plasma mencit jantan antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data aktivitas AST plasma mencit jantan antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

Aktivitas AST mencit jantan

Jumlah df F Sig. kuadrat Rata-rata Kuadrat Antar kelompok Dalam Kelompok Total 54,967 939,959 994,926 4 45 49 13,742 20,888 0,658 0,624

(38)

Lampiran 13

Uji ANAVA Terhadap Aktivitas AST Plasma Mencit Jantan Setelah 14 Hari dari Pemberian Ekstrak

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data aktivitas AST plasma mencit jantan setelah 14 haridari pemberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data aktivitas AST plasma mencit jantan antar kelompok

Ha = data aktivitas AST plasma mencit jantan antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Hasil : nilai signifikansi kelima kelompok = 0.987 > α

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data aktivitas AST plasma mencit jantan antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

Aktivitas AST mencit jantan

Jumlah df F Sig. kuadrat Rata-rata Kuadrat Antar kelompok Dalam Kelompok Total 6.937 940.761 947.734 4 45 49 1.743 20.906 0.083 0.987

(39)

Lampiran 14

Uji ANAVA Terhadap Aktivitas AST Plasma Mencit Betina Setelah 24 Jam dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data aktivitas AST plasma mencit betina setelah 24 jam dari pemberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data aktivitas AST plasma mencit betina antar kelompok

Ha = data aktivitas AST plasma mencit betina antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Daerah kritis : Ho ditolak jika signifikansi = 0,997 < α Hasil : nilai signifikansi kelima kelompok >α

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data aktivitas AST plasma mencit betina antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

Aktivitas AST mencit betina

df Rata-rata F Sig. Kuadrat Jumlah kuadrat Antar kelompok Dalam Kelompok Total 3.467 983.005 986.471 4 45 49 0.867 21.845 0.040 0.997

(40)

Lampiran 15

Uji ANAVA Terhadap Aktivitas AST Plasma Mencit Betina Setelah 14 Hari dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data aktivitas AST plasma mencit betina setelah 24 jam dari pemberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data aktivitas AST plasma mencit betina antar kelompok

Ha = data aktivitas AST plasma mencit betina antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Daerah kritis : Ho ditolak jika signifikansi = 0,689 < α Hasil : nilai signifikansi kelima kelompok >α

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data aktivitas AST plasma mencit betina antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

Aktivitas AST mencit betina

df Rata-rata F Sig. Kuadrat Jumlah kuadrat Antar kelompok Dalam Kelompok Total 50.497 1004.134 1054.631 4 45 49 12.626 22.314 0.566 0,689

(41)

Lampiran 16

Uji ANAVA Terhadap Kadar Urea Plasma Mencit Jantan Setelah 24 Jam dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data kadar urea plasma mencit jantan setelah 24 jam dari pemberian ekstrak

Hipotesa : Ho = data kadar urea plasma mencit jantan antar kelompok tidak berbeda secara bermakna

Ha = data kadar urea plasma mencit jantan antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Hasil : nilai signifikansi kelima kelompok = 0.210 >α

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data kadar urea plasma mencit jantan antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

kadar urea mencit jantan

df F Sig. Antar kelompok Dalam Kelompok Total 269,875 1986.785 2256.660 4 45 49 67.469 44.151 1.528 Jumlah

(42)

Lampiran 17

Uji ANAVA Terhadap Kadar Urea Plasma Mencit Jantan Setelah 14 Hari dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data kadar urea plasma mencit jantan setelah 14 hari dari pemberian ekstrak

Hipotesa : Ho = data kadar urea plasma mencit jantan antar kelompok tidak berbeda secara bermakna

Ha = data kadar urea plasma mencit jantan antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Hasil : nilai signifikansi kelima kelompok = 0.091 >α

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data kadar urea plasma mencit jantan antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

kadar urea mencit jantan

df F Sig. 554,520 2908,258 3462,778 4 45 49 138.630 64.628 2.145 Jumlah

0.091 Antar kelompok

Dalam Kelompok Total

(43)

Lampiran 18

Uji ANAVA Terhadap Kadar Urea Plasma Mencit Betina Setelah 24 Jam dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data kadar urea plasma mencit betina setelah 24 jam dari pemberian ekstrak.

Hipotesa : Ho = data kadar urea plasma mencit betina antar kelompok tidak berbeda secara bermakna

Ha = data kadar urea plasma mencit betina antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Daerah kritis : Ho ditolak jika signifikansi <α Hasil : nilai signifikansi = 0,626 >α

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data kadar urea plasma mencit betina antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

kadar urea mencit betina

Antar kelompok Dalam Kelompok Total 97.853 1679.459 1777.312 4 45 49 24.463 37.321 0.655 0.626

(44)

Lampiran 19

Uji ANAVA Terhadap Kadar Urea Plasma Mencit Betina Setelah 14 Hari dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data kadar urea plasma mencit betina setelah 14 hari dari pemberian ekstrak.

Hipotesa : Ho = data kadar urea plasma mencit betina antar kelompok tidak berbeda secara bermakna

Ha = data kadar urea plasma mencit betina antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Daerah kritis : Ho ditolak jika signifikansi <α Hasil : nilai signifikansi = 0,988 >α

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data kadar urea plasma mencit betina antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

kadar urea mencit betina

Antar kelompok Dalam Kelompok Total 11 204 1572.315 1583.519 4 45 49 2.801 34.940 0,080 0,988

(45)

Lampiran 20

Uji ANAVA Terhadap Kadar Kreatinin Plasma Mencit Jantan Setelah 24 Jam dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data kadar kreatinin plasma mencit jantan setelah 24 jam dari pemberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data kadar kreatinin plasma mencit jantan antar

kelompok tidak berbeda secara bermakna

Ha = data kadar kreatinin plasma mencit jantan antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data kadar kreatinin plasma mencit jantan antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna]

ANAVA

kadar kreatinin mencit jantan

df F Sig. Antar kelompok Dalam Kelompok 0,526 3.289 4 45 0,132 0,073 1,800 Jumlah kuadrat Rata-rata Kuadrat 0,145

(46)

Lampiran 21

Uji ANAVA Terhadap Kadar Kreatinin Plasma Mencit Jantan Setelah 14 Hari dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data kadar kreatinin plasma mencit jantan setelah 14 hari dari emberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data kadar kreatinin plasma mencit jantan antar

Ha = data kadar kreatinin plasma mencit jantan antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data kadar kreatinin plasma mencit jantan antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

kadar kreatinin mencit jantan

_Jumlah df F Sig. kuadrat Rata-rata Kuadrat Antar kelompok Dalam Kelompok Total 0.328 4.731 5.059 4 45 49 0,082 0,105 0.780 0,544

(47)

Lampiran 22

Uji ANAVA Terhadap Kadar Kreatinin Plasma Mencit Betina Setelah 24 Jam dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data kadar kreatinin plasma mencit betina setelah 24 jam dari pemberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data kadar kreatinin plasma mencit betina antar

Ha = data kadar kreatinin plasma mencit betina antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Kesimpulan : Ho diterima sehingga data kadar kreatinin plasma mencit betina antar kelompok perlakuan tidak berbeda secara bermakna

ANAVA

kadar kreatinin mencit betina

Jumlah df F Sig. kuadrat Rata-rata Kuadrat Antar kelompok Dalam Kelompok 0,361 3,653 4 45 0,090 0,081 1,111 0,363

(48)

Lampiran 23

Uji ANAVA Terhadap Kadar Kreatinin Plasma Mencit Betina Setelah 14 Hari dari Perlakuan

(SPSS 15.0)

Tujuan : Mengetahui ada tidaknya perbedaan data kadar kreatinin plasma mencit betina setelah 14 hari dari pemberian ekstrak. Hipotesa : Ho = data kadar kreatinin plasma mencit betina antar

Ha = data kadar kreatinin plasma mencit betina antar kelompok berbeda secara bermakna

α : 0,05

Kesimpulan : Ha diterima sehingga data kadar kreatinin plasma mencit betina antar kelompok perlakuan berbeda secara bermakna

ANAVA

kadar kreatinin mencit betina

Jumlah df F Sig. kuadrat Rata-rata Kuadrat Antar kelompok Dalam Kelompok Total 0,407 2,308 2,715 4 45 49 0,102 0,051 1.984 0,113