• Tidak ada hasil yang ditemukan

PCR Protocols A GUIDE TO METHODS AND APPLICATIONS | Suhardi.Universitas Mulawarman.Kalimantan Timur.Indonesia

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2017

Membagikan "PCR Protocols A GUIDE TO METHODS AND APPLICATIONS | Suhardi.Universitas Mulawarman.Kalimantan Timur.Indonesia"

Copied!
481
0
0

Teks penuh

Loading

Gambar

Figure 1. v i s u a l i z e do fcyclesc a t e dA m p l i f i c a t i o n  o f / 3 ­ g l o b i n  f r a g m e n t s  r a n g i n g  f r o m  150  t o 2951  b p . S a m p l e s   100 fx� c o n t a i n i n g  s t a n d a r d  b u f f e r ,  200 ixM  e a c h  d N T P ,  a n d 250 nM  e a c h  p r i m e r ,  100 n g  o f  h u m a n  g e n o m i c  D N A , a n d 2.5  u n i t s  o f  Taq  p o l y m e r a s e  w e r e  s u b j e c t e d  t o 30   o f  a m p l i f i c a t i o n .  Each  s a m p l e  (2 /xl) w a s  r e s o l v e d  o n  a  1.6%  a g a r o s e  g e l a n d   b y e t h i d i u m  b r o m i d e  f l u o r e s c e n c e .  T h e  l e n g t h s  o f t h e p r o d u c t s  a r e  i n d i ­  at t h e t o p o f  e a c h  l a n e .  T h e  m a r k e r s  are  BstEll­digested p h a g e  X  (500 ng)  a n d H a e l l l ­ d i g e s t e d  <£x174­RF  (250  n g ) . 
Figure  2 S e q u e n c i n g  o f  s i n g l e ­ s t r a n d e d  t e m p l a t e s  p r o d u c e d  f r o m  a  X  gt11 p l a q u e s a m p l e .  A n  8 5 0 ­ b p  i n s e r t  w a s  a s y m m e t r i c a l l y  a m p l i f i e d  w i t h  N e w E n g l a n d B i o L a b s p r i m e r s  # 1 2 1 8  a n d  # 1 2 2 2 ,  t h e  r e a c t i o n s  w e r e  p u r i f i e d  b y  s p i n  d i a l y s i s ,  a n d  t h e  s a m e p r i m e r s  w e r e  s u b s e q u e n t l y  u s e d  in  D N A  s e q u e n c i n g  r e a c t i o n s  w i t h  A m p l i T a q D N A p o l y m e r a s e  ( P e r k i n ­ E l m e r  C e t u s ) .  PCRs  c o n t a i n e d  (A)  50  p m o l  p r i m e r  1218  :  1  p m o l p r i m e r  1222,  (B)  50  p m o l  p r i m e r  1222  :  1  p m o l  p r i m e r  1218. 
Figure  2 b a n c eH P L C  p u r i f i c a t i o n  o f  b i o t i n y l a t e d  o l i g o n u c l e o t i d e s .  Vertical  scale  is  a b s o r ­  at 260 n m . R e t e n t i o n  t i m e s  s h o w n  are i n  m i n u t e s .  T h e  d a s h e d  l i n e  s h o w s  t h e p e r c e n t a g e  o f  b u f f e r  B in t h e e l u t i o n  s o l v e n t .  Details  are g i v e n  i n t h e  t e x t . 
Figure 4 t h e  p e r c e n t a g es o r b a n c eH P L C  p u r i f i c a t i o n  o f  S ­ t r i t y l m e r c a p t o  o l i g o n u c l e o t i d e s .  Vertical  scale  is  a b ­  at 260  n m .  R e t e n t i o n  t i m e s  s h o w n  are  in  m i n u t e s .  T h e  d a s h e d  l i n e  s h o w s   o f  b u f f e r  B i n t h e e l u t i o n  s o l v e n t .  Details  are g i v e n  i n t h e  t e x t . 
+7

Referensi

Dokumen terkait

Efficient transformation of these cotyledons by using Agrobacterium tumefaciens strain C 58 carrying neomycin phosphotransferase II ( npt II) and ß-glucuronidase ( GUS ; uid A), or

[r]

Kebi- jakan pangkas subsidi untuk usaha produktif kecil-kecilan dan kebijakan perlindungan dan bantuan pemasaran bagi usaha kecil dengan alasan persai- ngan bebas

[r]

[r]

Meski telah disetujui menjadi undang- undang, banyak kalangan yang menyayangkan UU Pemilu 2009 itu, seperti pasal 309 huruf d tentang electoral threshold, yang substansinya

[r]

[r]