Deteksi dan serotipe virus dengue dari serum penderita demam dengue di Medan dengan menggunakan Reverse Transkriptase PCR
R. Lia Kusumawati
Departemen Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara/ Instalasi Mikrobiologi Klinik Rumah Sakit Umum Pusat H. Adam Malik Medan
Email: liaiswara@yahoo.com
Abstract
Introduction: Detection of dengue virus infections is important for clinical management, surveillance and clinical trial assessments. Reverse transcriptase-PCR (RT-PCR) amplification of dengue viral RNA can offer a rapid, sensitive, and specific approach to the typing of dengue viruses. Early detection of dengue virus in patient serum allows the possibility of mounting a rapid response aimed at vector control in the affected areas. This study aimed to describe the frequency of serotypes 1, 2, 3 and 4 of dengue virus in serum samples obtained from patients clinically suspected of having dengue fever or dengue hemorrhagic fever in Medan.
Method: Reverse transcriptase-PCR (RT-PCR) used to determine the dengue virus serotype serum collected from human patients with dengue in acute phase.
Results: Of 100 serum samples from acute phase of DF/DHF patients as WHO 1997 clinical criteria, 74 (74%) were infected by Dengue serotype 2 (DEN-2), 2 (2%) were infected by DEN-1, and 24 (24 %) serum samples were negative by RT-PCRRT PCR. In this study, the mostly patients infected by dengue viral age were between 15-44 years old (64.48 %).
Conclusions: This assay is useful for typing the virus and providing important information to provide epidemiologic information for surveillance of circulating dengue viruses.
Keywords: Dengue infections, serotyping, RT-PCR
Pendahuluan
Infeksi oleh virus Dengue (DENV) merupakan masalah kesehatan yang serius di
banyak daerah tropis dan subtropis di dunia. Penyakit yang ditimbulkannya merupakan
hiperendemis di Asia Tenggara, dengan bentuk yang paling berbahaya berupa Demam
Berdarah Dengue (DBD) dan Sindrom Syok Dengue (SSD) yang biasanya bersifat fatal,
terutama pada anak-anak (Rohani et al., 1997).
Diperkirakan lebih kurang 100 juta kasus Demam Dengue (DD) dan 500 kasus DBD
terjadi tiap tahunnya di seluruh dunia dimana 90% dari kasus-kasus tersebut menyerang
anak-anak di bawah 15 tahun (Malavige et al., 2004). Proporsi kasus DBD berdasarkan
peggolongan umur di Indonesia tahun 1993-1997 tertinggi adalah pada usia sekolah di bawah
Di Indonesia, demam Dengue mulai ditemukan pada tahun 1968, cenderung semakin
menyebar luas sejalan dengan meningkatnya arus transportasi dan kepadatan penduduk.
Kasus DD dan DBD selalu berulang setiap tahun di banyak kawasan di Indonesia dimana
berdasarkan profil Indonesia tahun 2001 angka insiden 17,2 kasus per 100.000 penduduk tiap
tahunnya (Depkes RI, 2002).
Masalah terbesar pada kasus infeksi virus Dengue terkait dengan penatalaksanaan
yang membutuhkan diagnosis segera terhadap infeksi dini. Dalam kasus infeksi Dengue,
serotyping sangat penting karena infeksi sekunder oleh serotipe heterologus dapat
menimbulkan DBD dan SSD. Diagnosis laboratorium terutama menggunakan isolasi virus
dari serum pada infeksi fase akut, serodiagnosis, dan molecular assay terhadap RNA virus
(Guzman and Kouri, 1996).
Seluruh serotipe virus Dengue terdapat di Indonesia, DEN-3 merupakan serotipe
yang paling sering ditemui selama terjadinya KLB di banyak daerah, diikuti DEN-2, DEN-1
dan DEN-4 pada tahun 1993-1994. Dari hasil penelitian DEN-3 merupakan serotipe yang
paling dominan berhubungan dengan tingkat keparahan penyakit, diikuti DEN-2
(Suroso,1997). Data penelitian Litbangkes pada tahun 2007 menunjukkan bahwa serotipe
virus Dengue yang dijumpai dari serum pasien DBD di kota Medan pada tahun 2003-2005
adalah DEN-2, DEN-3 dan DEN-4 namun tidak menemukan adanya DEN-1.
Dalam penelitian ini dilakukan deteksi dan penentuan serotipe virus Dengue 1, 2, 3
dan 4 dari sampel serum penderita DD/DBD dengan menggunakan RT-PCR di kota Medan
untuk melihat apakah serotipe virus Dengue 2 dan 1 yang telah dijumpai pada nyamuk Aedes
aegypti sama dengan serotipe virus Dengue yang dijumpai pada serum penderita DD/DBD
sehingga dari hasil penelitian ini akan didapatkan informasi penyebaran serotipe virus
Dengue di kota Medan. Pada penelitian ini juga akan dilakukan analisis terhadap data
demografi penderita untuk melihat adanya kecenderungan terjadinya pergeseran proporsi
penderita DD/DBD yang beresiko terinfeksi virus Dengue dari kelompok umur di bawah 15
tahun kepada kelompok umur di atas 15 tahun.
Metode Penelitian
Penelitian dilakukan di Instalasi Mikrobiologi Klinik RSUP H. Adam Malik Medan
selama 10 bulan sejak bulan Maret sampai Desember 2009. Rancangan Penelitian ini
dilakukan secara deskriptif dengan pendekatan analitik, untuk deteksi dan penentuan serotipe
virus Dengue tipe 1, 2, 3, dan 4 dari serum penderita DD/DBD dengan menggunakan
Pada penelitian ini, digunakan 100 sampel yang diambil dari serum penderita demam
berdarah yang telah menyetujui informed concent, yang dirawat di tiga rumah sakit rujukan
untuk penderita demam berdarah di kota Medan yaitu RSUP H. Adam Malik, RSUP Pirngadi
dan RS Herna. Sampel serum diambil sebanyak 0,5 ml pada lima hari pertama demam dari
penderita DD/DBD yang telah ditegakkan diagnosis klinis infeksi virus Dengue dengan
menggunakan kriteria WHO 1997 (Singh et al., 2006). Kriteria WHO untuk menegakkan
diagnosis klinis yaitu dijumpainya demam tinggi dengan onset akut, manifestasi perdarahan,
uji tourniquet positif, petekia, ekimosis atau purpura dan manifestasi laboratorium dari
trombositopenia (≤100.000/mm3) serta meningkatnya hematokrit ≥20%. Data dari setiap
sampel dimasukkan ke dalam lembar chek list yang berisi informasi mengenai data demografi
pasien seperti nama, umur, jenis kelamin, alamat, dan pekerjaan, serta hasil pemeriksaan
laboratorium.
Sampel serum di simpan di dalam freezer -70°C atau dapat langsung dilakukan
ekstraksi RNA virus dengan menggunakan QIAamp®Viral RNA Mini Kit dari Qiagen. RNA
hasil ekstraksi kemudian dilakukan RT-PCR dengan menggunakan SuperScriptTMII one step
RT-PCR System dengan Platinum Taq DNA Polymerase (Invitrogen). Master mix dibuat
dengan mencampurkan 10 µl RT-PCR buffer, 2 µl RT-PCR enzyme mix, 1µl Primer Dengue
Universal (D1:TCA ATA TGC TGA AAC GCG CGA GAA ACCG), 1µl Primer
DEN-1(Ts1: CGT CTC AGT GAT CCG GGGG), 1 µl Primer DEN-2 (Ts2: CGC CAC AAG
GGC CAT GAA CAG), 1 µl Primer DEN-3 (Ts3: TAA CAT CAT CAT GAG ACA GAGC)
dan 1 µl Primer DEN-4 (D4: TGT TGT CTT AAA CAA GAG AGGTC) (Harris et al.,
1998). Produk RNA dipersiapkan dengan memanaskan tube pada 65ºC selama 5 menit
dengan menggunakan block heater, kemudian ditempatkan di dalam es selama
mempersiapkan master mix. Sebanyak 5 µl produk RNA ditambahkan ke dalam master mix;
sebagai kontrol positif digunakan RNA DEN-1, DEN-2, DEN-3 dan DEN-4 yang didapat
dari kolaborasi dengan institusi NAMRU di Indonesia. Setiap reaksi menggunakan master
mix, RNA sampel, kemudian ditambahkan RNase-free water hingga mencapai volume 50 µl
.
Reaksi RT dilakukan pada 51ºC selama 45 menit untuk menghasilkan cDNA,
kemudian amplifikasi dengan program PCR berikut: 92ºC selama 3 menit untuk initial
denaturation, 92ºC selama 30 detik untuk denaturation, 53ºC selama 30 detik untuk
elongasi/extension. Siklus ini diulangi sebanyak 40 kali sebelum final extension 72ºC
selama 5 menit. Produk PCR ini disimpan pada 4ºC sebelum digunakan untuk visualisasi
Elektroforesis
Gel dipersiapkan dengan menggunakan 50 ml 1X TAE buffer, 2% agarose gel dan
5µl SYBER safe-TM gel staining. Sebanyak 1µl amplikon hasil PCR yang telah dicampur
dengan 4µl 2x blue juice, dituangkan ke dalam sumur pada gel agarose. Elektroforesis
dijalankan dari kutub negatif ke positif dengan tegangan 80-100 V selama 40 menit. Gel
dilihat dengan iluminator UV (Vilber Lourmat), dan hasilnya difoto dengan kamera
polaroid. Virus DEN-1 akan terbaca dengan adanya pita DNA berukuran 482 bp DEN-2
berukuran 119 bp, DEN-3 berukuran 290 bp dan DEN-4 berukuran 398 bp (Harris et al.,
1998).
Analisis Data
Selain untuk melihat distribusi serotipe virus Dengue pada penderita DD/DBD di kota
Medan, analisis dilakukan terhadap data demografi penderita. Analisis data ditujukan untuk
mengetahui adanya pergeseran kelompok umur penderita. Data dikumpulkan untuk melihat
perbedaan proporsi kasus penderita DD/DBD pada kelompok umur <15 tahun dengan
kelompok umur ≥15 tahun.
Hasil Penelitian
Dalam penelitian ini telah dikumpulkan sebanyak seratus penderita akut DD/DBD
yang sesuai kriteria klinis WHO dari 3 rumah sakit di kota Medan, 23 penderita dari RS
Herna, 40 penderita dari RSUP H. Adam Malik, dan 37 penderita dari RS Dr Pirngadi.
Setiap responden yang dijadikan sampel diambil serum darahnya 0,5 ml dan
karakteristiknya dicatat yaitu nama, alamat, umur, jenis kelamin. Satu persatu serum
diekstraksi untuk mendapatkan RNA virus Dengue, setelah itu dilakukan RT-PCR
menggunakan Primer Dengue Universal, DEN-1, DEN-2, Primer DEN-3, DEN-4, kemudian
dilakukan elektroforesis dan gel imaging (visualisasi). Dikatakan hasil virus Dengue positif
jika terlihat pita DNA dengan ukuran hasil amplifikasi sebesar 482 bp (DEN-1), 389 bp
(DEN-4), 290 bp (DEN-3), dan/atau 119 bp (DEN-2). Sebagai pembanding digunakan
marker 100 bp DNA ladder. Gambar 1 menunjukkan hasil kontrol positif virus 1,
Gambar 1: Hasil RT-PCR kontrol (+)
Keterangan: 1. Kontrol (+) DEN-2 119 bp 4. Kontrol (+) DEN-1 482 bp 2. Kontrol (+) DEN-3 290 bp 5. Marker 100 bp DNA ladder 3. Kontrol (+) DEN-4 398 bp
Gambar 2 menunjukkan hasil RT-PCR penderita akut DD/DBD.
Gambar 2: Hasil RT-PCR beberapa sampel penderita akut DD/DBD
Keterangan: 1. Marker DNA 100 bp, 2. kontrol negatif, 3-4. kontrol positif DEN-1 (482 bp), 5-6. sampel (positif DEN-1), 7. kontrol positif DEN-2 (119 bp), 8-14. sampel (positif DEN-2.
Dari seratus sampel serum didapatkan adanya hasil positif virus Dengue serotipe
2 dan Dengue serotipe 1 yang ditandai dengan dijumpainya pita DNA dengan ukuran hasil
amplifikasi sebesar 119 bp (DEN-2) dan 482 bp (DEN-1) sedangkan untuk virus Dengue
serotipe 3 dan 4 yang ditandai dengan pita DNA dengan ukuran hasil amplifikasi sebesar
bp (Marker 100 bp)
500 bp
400 bp
300 bp
200 bp
100 bp
Marker DNA
DEN-1 (482 bp)
290 bp (DEN-3) dan 389 bp (DEN-4), tidak dijumpai dari hasil deteksi dengan teknik
RT-PCR dalam penelitian ini.
Hasil PCR dari 100 serum penderita akut DD/DBD yang telah dikumpulkan
ternyata dijumpai adanya 76 serum penderita yang positif mengandung virus DEN yang
terdiri dari 74 serum penderita yang mengandung virus DEN-2 dan 2 serum penderita
mengandung virus DEN-1.
Tabel 1 menunjukkan hasil RT-PCR dari serum 100 penderita akut DD/DBD
dengan gejala klinis sesuai kriteria klinis WHO, setelah diperiksa maka yang disebabkan
oleh DEN-2 sebanyak 74 orang (74%) dan yang disebabkan DEN-1 sebanyak 2 orang (2%)
dan penderita yang tidak mengandung virus DEN atau negatif adalah sebanyak 24 orang
(24%).
Tabel 1. Distribusi serotipe virus Dengue dari hasil RT-PCR serum 100 penderita akut DD/DBD.
Penderita virus Dengue
Jumlah (orang) Persentase (%)
DEN-1(+) 2 2
DEN-2(+) 74 74
DEN-3(+) - 0
DEN-4(+) - 0
DEN (-) 24 24
Total 100 100
Distribusi hasil RT-PCR penderita akut DD/DBD berdasarkan karakteristik umur dan jenis kelamin.
Tabel 2 menunjukkan hasil RT-PCR dari DEN-2 dan DEN-1 positif pada 76 serum
penderita akut DD/DBD berdasarkan karakteristik umur. Sebanyak 74 serum penderita akut
DD/DBD mengandung virus Dengue serotipe 2 pada usia kurang dari 5 tahun sebanyak 3
orang (3,9 %), umur 5-9 tahun sebanyak 10 orang (13,2 %), umur 15-44 tahun sebanyak 48
orang (63,16 %) dan umur lebih dari 45 tahun sebanyak 3 orang (3,9 %). Sebanyak 2 orang
mengandung virus Dengue serotipe-1, pada kelompok usia 5-9 tahun sebanyak 1 (1,32%)
Tabel 2. Distribusi hasil RT-PCR DEN-2 dan DEN-1 positif pada 76 serum penderita akut DD/DBD berdasarkan karakteristik umur.
Umur DEN-2(+) DEN-1(+) Total (tahun) n % n % n %
< 5 3 (3,9) - (-) 3 (3,9) 5-9 10 (13,2) 1 (1,32) 11 (14,52) 10-14 10 (13,2) - (-) 10 (13,2) 15-44 48 (63,16) 1 (1,32) 49 (64,48) >45 3 (3,9) - (-) 3 (3,9)
74 (97,36) 2 (2,64) 76 (100)
Keterangan: n= jumlah penderita, %= persentase
Hasil RT-PCR DEN-2 dan DEN-1 positif pada 76 serum penderita akut DD/DBD
berdasarkan karakteristik jenis kelamin ditemukan pada laki-laki sebanyak 36 orang (47,37
%) dan pada wanita sebanyak 40 orang (52,63%) seperti yang terlihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Distribusi hasil RT-PCR DEN-2 dan DEN-1 positif pada 76 serum penderita akut DD/DBD berdasarkan karakteristik jenis kelamin.
Jenis Kelamin DEN-2(+) DEN-1(+) Total n % n % n %
Laki-laki 34 (44,74) 2 (2,63) 36 (47,37) Wanita 40 (52,63) - (-) 40 (52,63)
Jumlah 74 (97,37) 2 (2,63) 76 (100)
Keterangan: n= jumlah penderita, %= persentase
Pembahasan
Sampai saat ini penyakit DD/DBD masih menjadi masalah kesehatan masyarakat
Indonesia dan dunia. Pada penelitian ini dikumpulkan serum dari seratus orang penderita akut
DD/DBD yang memenuhi kriteria klinis WHO dari 3 rumah sakit di kota Medan, 23
penderita RS Herna, 40 dari RS Adam Malik, 37 dari RS DR Pirngadi. Ketiga rumah sakit ini
mewakili kondisi penderita akut DD/DBD di kota Medan. Setiap penderita diambil 0,5 ml
serum, satu persatu serum diekstraksi untuk mendapatkan RNA virus Dengue, setelah itu
dilakukan RT-PCR (menggunakan Primer Dengue Universal, 1, 2, Primer
DEN-3, dan DEN-4), kemudian dielektrophoresis dan gel imaging (visualisasi). Hasil virus Dengue
serotipe dikatakan positif jika terlihat pita DNA dengan ukuran hasil amplifikasi sebesar 482
bp (Dengue-1), 389 bp (Dengue-4), 290 bp (Dengue-3), dan 119 bp (Dengue-2). Sebagai
pembanding digunakan Marker 100 bp DNA ladder.
Dalam penelitian ini telah dilakukan pemeriksaan terhadap 100 orang penderita akut
DD/DBD yang memenuhi kriteria klinis WHO dengan pemeriksaan gold standard
RT-PCR, didapatkan hasil 76 serum (76%) yang mengandung virus Dengue yang terdiri dari 74
(74%) serum positif virus DEN-2 dan 2 (2%) serum positif virus DEN-1.
Laporan WHO bahwa seluruh wilayah tropis di dunia ini telah menjadi endemis
dengan ke empat serotipe virus secara bersama-sama di wilayah Amerika, Asia Pasifik dan
Afrika. Serotipe virus yang bersirkulasi di Bangkok, Thailand ternyata berbeda-beda dalam
kurun waktu yang berbeda. DEN-1 predominan pada tahun 1990-1992, DEN 2 pada tahun
1973-1986 dan 1988-1989, DEN-3 pada 1987 dan 1995-1999, DEN-4 pada tahun
1993-1994 (Nisalak, et al., 2003).
Seluruh serotipe virus Dengue terdapat di Indonesia, DEN-3 merupakan serotipe
yang paling sering ditemui selama terjadinya KLB di banyak daerah, diikuti DEN-2
(Suroso, 1999). Dalam penelitian ini dapat dilihat bahwa hasil RT-PCR dari serum 100
penderita akut DD/DBD dengan gejala klinis sesuai kriteria klinis WHO, setelah diperiksa
maka yang disebabkan oleh 2 sebanyak 74 orang (74,0%) dan yang disebabkan
DEN-1 sebanyak 2 orang (2,0%) , sedangkan serum penderita yang tidak mengandung virus DEN
atau negatif adalah sebanyak 24 orang (24%).
Peta penyebaran serotipe virus Dengue menurut laporan Departemen Kesehatan
tahun 2007, dari hasil penelitiannya yang dilakukan oleh badan Litbang Jakarta dan TDC
(Tropical Disease Centre) Universitas Airlangga Surabaya yang bekerja sama dengan
Namru II (US Navax) pada tahun 2003-2005, di Sumatera Utara ditemukan ketiga jenis
virus Dengue yaitu DEN-2, DEN-3, DEN-4 dan yang paling banyak adalah DEN-2, dan
dari hasil penelitian ini pun didapatkan bahwa sampai saat ini DEN-2 (74,0%) paling
banyak menyebabkan DD/DBD di Sumatera Utara masih belum bergeser dan diikuti oleh
DEN-1 (2,0%) namun tidak dijumpai adanya DEN-3 dan DEN-4.
Hasil penelitian sebelumnya oleh peneliti yang belum dipublikasi, telah dilakukan
menunjukkan bahwa predominasi penyebaran serotipe virus Dengue juga didominasi oleh
DEN serotipe 2 yang diikuti oleh DEN serotipe 1, dan tidak dijumpai infeksi virus
DEN-serotipe 3 maupun DEN-DEN-serotipe 4 sama seperti dalam penelitian ini yang menggunakan
sampel serum penderita akut DD/DBD.
Kasus-kasus penderita akut DD/DBD di kota Medan tidak separah jika
dibandingkan kasus-kasus di Jakarta yang penyebabnya lebih banyak adalah DEN-3 dan
DEN-2. Ini disebabkan karena infeksi oleh DEN-3 menunjukkan gejala klinis yang lebih
parah dibandingkan infeksi oleh virus DEN-2.
Hasil penelitian ini menunjukan bahwa infeksi virus Dengue serotipe 2 yang paling
banyak menyebabkan DD/DBD di kota Medan, yaitu 74% yang diikuti oleh adanya infeksi
oleh virus tipe lain yaitu virus Dengue serotipe 1 sebanyak 2%, maka kewaspadaan
terhadap penyakit DD/DBD di kota Medan harus ditingkatkan di kemudian hari. Menurut
teori Halstead tentang secondary infection menyatakan bahwa infeksi sekunder oleh virus
Dengue serotipe lain akan memperparah penyakit DD/DBD, dan dari hasil penelitian yang
dilakukan oleh Setyabudy dari Universitas Airlangga menunjukkan bahwa kota-kota besar
seperti Jakarta, Surabaya, Medan, Makasar dan Menado dimana mobilitas penduduk tinggi,
lebih sering dijumpai adanya infeksi sekunder virus Dengue (Jong JB, 2004). Dengan
kewaspadaan ini dapat memperkuat Early Warning Outbreak Recognition System (EWORS)
dalam masalah DD/DBD.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa umur penderita akut DD/DBD yang
disebabkan oleh virus Dengue serotipe 2 dan serotipe 1 yang terbanyak adalah antara 15-44
tahun yaitu 49 orang (64,48%). Penderita akut DD/DBD wanita lebih banyak positif
mengandung virus Dengue serotipe 2 dari pada laki-laki, yaitu sebanyak 40 orang (52,63%)
pada wanita dibandingkan 34 orang (44,74%) pada laki-laki. Sedangkan penderita akut
DD/DBD akibat infeksi oleh virus Dengue 1 dijumpai 2 orang (2,63%) pada laki-laki dan
tidak dijumpai pada wanita. Kelompok umur yang paling banyak positif terinfeksi terinfeksi
oleh virus DEN-2 dan DEN-1 adalah pada kelompok usia 15-44 tahun yaitu sebanyak 49
orang (64,48%) yang terdiri dari infeksi oleh DEN-2 sebanyak 48 orang (63,16%) dan
infeksi oleh virus DEN-1 sebanyak 1 orang (1,32%).
Hal ini menjadi acuan baru untuk kota Medan karena sejak awal, data epidemi pada
setiap negara untuk infeksi DD/DBD menunjukkan bahwa infeksi virus Dengue ini
umumnya lebih banyak menyerang anak-anak dan 90% kasus dilaporkan berumur kurang
kecenderungan adanya pergeseran infeksi mulai banyak terjadi peningkatan pada
kasus-kasus dewasa selama kejadian luar biasa.
Kelompok resiko tinggi penderita akut DD/DBD meliputi anak berumur 5-9 tahun,
akan tetapi Filipina dan Malaysia baru-baru ini melaporkan banyak kasus berumur di atas
15 tahun. Walaupun Thailand, Myanmar, Indonesia, dan Vietnam tetap melaporkan banyak
kasus di bawah 15 tahun. Kasus DBD yang berumur lebih dari 15 tahun banyak dijumpai di
Amerika daripada di Asia (Kebijakan pemberantasan DBD, 1993).
Laporan Dinas Kesehatan Propinsi Jawa Timur, 2001 menyebutkan bahwa pada
tahun 1996-2000 proporsi kasus DD/DBD terbanyak adalah pada kelompok umur 4-5
tahun, namun setelah tahun 2000 proporsi kasus pada kelompok umur 15-44 tahun
meningkat.
Semakin maju transportasi dan arus travelling yang tinggi merupakan salah satu
faktor penyebab terjadinya pergeseran umur penderita dari anak-anak ke dewasa muda,
karena orang dewasa lebih banyak melakukan travelling dibandingkan pada anak-anak
terutama perjalanan ke daerah endemis (Wider-Smith et. al., 2005).
Kecenderungan bergesernya umur penderita DD/DBD dari umur anak-anak (5-9)
tahun ke umur dewasa muda yaitu lebih dari 15 tahun, maka kewaspadaan menghadapi
kasus-kasus DD/DBD dewasa harus ditingkatkan, karena penelitian-penelitian terhadap
kasus dewasa secara klinis sampai saat ini masih sedikit, belum mempunyai cukup
data-data yang mendalam tentang penyakit DD/DBD penderita dewasa. Derajat keparahan kasus
DD/DBD juga tergantung pada daya imunitas penderita, sistim imunitas remaja muda dan
orang dewasa lebih baik dari pada anak-anak maka tingkat keparahan pada penderita
DD/DBD dewasa akan lebih berat dibandingkan anak-anak. Sebagian dari penderita dewasa
muda/dewasa pada daerah endemis sudah pernah menderita DD/DBD pada usia anak-anak
sehingga kasus DD/DBD dewasa muda merupakan infeksi sekunder/tersier yang menurut
teori Halstead penderita DD/DBD sekunder oleh serotipe lain akan lebih berat
dibandingkan kasus primer.
Dari hasil penelitian ini terlihat bahwa infeksi virus Dengue yang positif lebih
banyak terjadi pada penderita DD/DBD dengan jenis kelamin wanita dari pada laki-laki,
yaitu sebanyak 40 orang (52,63%) pada wanita dibanding laki-laki 36 orang (47,37%).
Menurut laporan Dinas Kesehatan Propinsi Jawa Timur ( 2001), penderita DD/DBD pernah
ditemukan perbedaan yang nyata antara laki-laki dan wanita. Wanita lebih banyak tinggal
di rumah dibanding laki-laki sehingga kesempatan untuk digigit nyamuk Aedes aegypti
Hasil penelitian didapatkan bahwa dari hasil RT-PCR dari serum 100 penderita akut
DD/DBD dengan gejala klinis sesuai kriteria klinis WHO di 3 rumah sakit di kota Medan
setelah diperiksa dengan RT-PCR, dijumpai infeksi oleh virus DEN-2 sebanyak 74 orang
(74,0%) dan yang disebabkan DEN-1 sebanyak 2 orang (2,0%) dan penderita yang tidak
mengandung virus DEN atau negatif adalah sebanyak 24 orang (24%). Dari segi umur
didapatkan adanya kecenderungan pergeseran umur dari kelompok anak kepada kelompok
umur dewasa muda/dewasa yaitu kelompok umur yang paling banyak positif terinfeksi
terinfeksi oleh virus DEN-2 dan DEN-1 adalah pada kelompok usia 15-44 tahun yaitu
sebanyak 49 orang (64,48%) yang terdiri dari infeksi oleh DEN-2 sebanyak 48 orang
(63,16%) dan infeksi oleh virus DEN-1 sebanyak 1 orang (1,32%). Pada penelitian ini
terlihat juga bahwa infeksi virus Dengue yang positif lebih banyak terjadi pada penderita
DD/DBD dengan jenis kelamin wanita dari pada laki-laki, yaitu sebanyak 40 orang
(52,63%) pada wanita dibanding laki-laki 36 orang (47,37%). Dengan dijumpainya infeksi
virus Dengue yaitu serotipe DEN-2 dan DEN-1 dari 100 serum penderita akut DD/DBD
dengan gejala klinis sesuai kriteria klinis WHO di 3 rumah sakit di kota Medan maka
diharapkan akan meningkatkan kewaspadaan terhadap penyakit DD/DBD dan dapat
memperkuat Early Warning Outbreak Recognition System (EWORS) dalam masalah
DD/DBD karena menurut teori Halstead tentang secondary infection yang menyatakan
bahwa infeksi sekunder oleh virus Dengue serotipe lain akan memperparah penyakit
DD/DBD. Kecenderungan bergesernya umur penderita DD/DBD dari umur anak-anak (5-9)
tahun ke umur dewasa muda yaitu lebih dari 15 tahun, maka kewaspadaan menghadapi
kasus-kasus DD/DBD dewasa harus ditingkatkan.
DAFTAR PUSTAKA
Rohani, A., Zamree, I., Joseph ,R.T.,Lee, H.L., 2008. Persistency of transovarial dengue virus In Aedes aegypti (LINN.). Southeast Asian J Trop Med Public Health. Sep.
39(5): 813-6.
Malavige, G.N., Fernando, S., Fernando, and D.J., Senevirante, S.L. 2004. Dengue viral infection, Postgraduate Medical Journal 80: 588-601
Depkes RI. 2010. Profil Kesehatan Indonesia 2002. Jakarta.
Guzman, M.G., Kouri, G., 1996. Advances in dengue diagnosis. Clin Diagn Lab Immunol, 3: 621-7. 20052005
Singh K, Lale A, Eong Ooi E, Chiu LL, Chow VT, Tambyah P, Koay ES. 2006. Aprospective clinical study on the use of reverse transcription-polymerase chain reaction for the early diagnosis of Dengue fever. J Mol Diagn. Nov;8(5):613-6.
Harris E, Roberts TG, Smith L, Selle J, Kramer LD, Valle S, Sandoval E, Balmaseda A. 1998. Typing of dengue viruses in clinical specimens and mosquitoes by single-tube multiplex reverse transcriptase PCR.J Clin Microbiol. Sep;36(9):2634-9.
Nisalak A, Endy TP, Nimmannitya S, Kalayanarooj S, Thisayakorn U, Scott RM,Burke DS, Hoke CH, Innis BL, Vaughn DW., 2003. Serotype-specific dengue virus circulation and dengue disease in Bangkok, Thailand from 1973 to 1999. Am J Trop Med Hyg. Feb;68(2):191-202.
Depkes RI., 2007. Profil Kesehatan Indonesia 2005. Jakarta.
Jong J.B., Pohan HT, Zulkarnain I, Tambunan KL, Panggabean MM, Setiabudy RD, Suhendro, Nelwan RH. 2004. The correlation between coagulation test and albumin with antithrombin III in Dengue hemorrhagic fever.Acta Med Indones. Apr-Jun;36(2):57-61.
Depkes RI., 1993. Pokok-pokok kegiatan dan pengelolaan pemberantasan sarang nyamuk (PSN-DBD). Jakarta.
Dinas Kesehatan Jawa Timur., 2010. Profil Dinas kesehatan Jawa Timur 2010. Surabaya.
