PENGARUH EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata Liin) TERHADAP PERTUMBUHAN SEL HEPAR BABY HAMSTER YANG DIINDUKSI DMBA (7,12-Dimetilbenz(α)antracene) SECARA
IN VITRO
SKRIPSI
Oleh:
KHAFID PRESTI MUSTIKA RINI NIM. 08620018
JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG
PENGARUH EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata Linn) TERHADAP PERTUMBUHAN SEL HEPAR BABY HAMSTER YANG DIINDUKSI DMBA (7,12-Dimeylbenz(α)antracene) SECARA
IN VITRO
SKRIPSI
Diajukan Kepada: Fakultas Sains dan Teknologi
Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang Untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan Dalam
Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si)
Oleh:
KHAFID PRESTI MUSTIKA RINI NIM.08620018
JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN)
MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG
Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona Muricata Linn) Terhadap Pertumbuhan Sel Hepar Baby Hamster Yang Diinduksi
DMBA (7,12-Dimetylbenz(α)Antracene) Secara In Vitro
SKRIPSI
Oleh:
Khafid Presti Mustika Rini NIM. 08620018 Telah disetujui oleh:
Dosen Pembimbing I Dosen Pembimbing II
Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah M,Si Mochammad Imamudin M.A NIP. 19731005 20012 2 003 NIP. 19740602 200901 1 010
Mengetahui
Ketua Jurusan Biologi
Dr.H.Eko Budi Minarno, M.Pd NIP. 19630114 199903 1 001
Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona Muricata Linn) Terhadap Pertumbuhan Sel Hepar Baby Hamster Yang Diinduksi
DMBA (7,12-Dimetylbenz(α)antracene) Secara In Vitro
SKRIPSI
Oleh:
KHAFID PRESTI MUSTIKA RINI NIM. 08620018
Telah Dipertahankan di Depan Dewan Penguji Skripsi Dan Dinyatakan Diterima Sebagai Salah Satu Persyaratan
Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si) Tanggal 30 Januari 2013
Susunan Dewan Penguji Tanda tangan 1. Penguji Utama: Kholifah Holil, M.Si
NIP. 19751106 2009122 002
( ) 2. Ketua : Dwi Suheriyanto, M.P
NIP.19740325 200312 1 001
( ) 3.Sekretaris : Dr. drh. Bayyinatul. M,M.Si
NIP. 19710919 200003 2 001
( ) 4.Anggota : M. Imamudin, M.A
NIP. 19740602 200901 1 010
( )
Mengetahui dan Mengesahkan, Ketua Jurusan Biologi
Dr.H.Eko Budi Minarno, M.Pd NIP. 19630114 199903 1 001
PERNYATAAN KEASLIAN TULISAN Saya yang bertanda tangan di bawah ini:
Nama : Khafid Presti Mustika Rini NIM : 08620018
Jurusan : Biologi
Fakultas : Sains dan Teknologi
Menyatakan dengan sebenarnya bahwa skripsi yang saya tulis ini
benar-benar merupakan hasil karya sendiri, bukan merupakan pengambil
alihan data, tulisan atau pikiran orang lain yang saya akui sebagai hasil
tulisan atau pikiran saya sendiri, kecuali dengan mencantumkan sumber
cuplikan pada daftar pustaka. Apabila penelitian ini terbukti terdapat
unsur-unsur penjiplakan, maka saya bersedia menerima sanksi atas perbuatan
tersebut.
Malang, 30 Januari 2013 Yang Membuat Pernyataan,
Khafid Presti Mustika Rini NIM. 08620018
KEMENTERIAN AGAMA RI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI Jl. Gajayana 50 Dinoyo Malang (0341) 551345 Fax. (0341) 572533
BUKTI KONSULTASI SKRIPSI Nama : Khafid Presti Mustika Rini NIM : 08620018
Fakultas/Jurusan : Sains dan Teknologi / Biologi
Judul Skripsi : Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata Linn) Terhadap Pertumbuhan Sel Hepar Baby Hamster Yang Diinduksi DMBA (7,12-Dimetylbenz(α)anthracene) Secara In Vitro
Pembimbing Biologi : Dr. Drh. Bayyinatul Muchtaromah, M. Si
No Tanggal Hal Yang Dikonsultasikan Tanda Tangan 1. 6 Februari 2012 Pengajuan judul penelitian 1.
2. 8 Maret 2012 Pengajuanan Bab I 2.
3. 15 Maret 2012 Revisi Bab I 3.
4. 5 April 2012 Pengajuan Bab II 4.
5. 18 April 2012 Revisi Bab II 5.
6. 2 Mei 2012 Pengajuan Bab I, II, dan III 6. 7. 24 Mei 2012 Revisi Bab I, II, III 7.
8. 6 Juni 2012 Acc Bab I, II, III 8.
9. 22 Juni 2012 Seminar Proposal Skripsi 9.
10. 22 November 2013 Konsultasi Bab IV 10.
11. 31 Desember 2013 Revisi Bab IV 11.
12. 3 Januari 2013 Revisi Bab IV dan V 12.
13. 15 Januari 2013 Acc Skripsi 13.
Mengetahui,
Ketua Jurusan Biologi,
Dr.H. Eko Budi Minarno, M.Pd NIP. 19630114 199903 1 00
KEMENTERIAN AGAMA RI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI Jl. Gajayana 50 Dinoyo Malang (0341) 551345 Fax. (0341) 572533
BUKTI KONSULTASI SKRIPSI Nama : Khafid Presti Mustika Rini NIM : 08620018
Fakultas/Jurusan : Sains dan Teknologi / Biologi
Judul Skripsi : Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata Linn) Terhadap Pertumbuhan Sel Hepar Baby Hamster Yang Diinduksi DMBA(7,12 Dimetilbenz(α)antracene) Secara In-Vitro.
Pembimbing Agama : Mochammad Imamudin, M.A
No Tanggal Hal Yang Dikonsultasikan Tanda Tangan 1. 11 April 2012 Konsultasi Bab I dan II 1.
2. 20 April 2012 Revisi Bab I dan II 2.
3. 8 Juni 2012 Acc Bab I dan II 3.
4. 22 Juni 2012 Seminar Proposal Skripsi 4. 5. 4 Januari 2013 Revisi Bab I dan II 5.
6. 4 Januari 2013 Konsultasi Bab IV 6.
7. 16 Januari 2013 Revisi Bab IV 7.
8. 30 Januari 2013 Acc Bab I, II, IV 8.
Mengetahui,
Ketua Jurusan Biologi,
Dr.H. Eko Budi Minarno, M.Pd NIP. 19630114 199903 1 001
MOTTO
Ujian Dan Kebahagiaan Adalah Bentuk Kasih Sayang Tuhan
Sesungguhnya Tuhan Tidak Akan Pernah Memberi Ujian
Terhadap Makhluknya Kecuali Pada Yang Mampu
Menanggungnya
“Karena Sesungguhnya Sesudah Kesulitan Itu Ada Kemudahan Sesungguhnya Sesudah Kesulitan Itu Ada Kemudahan”
PERSEMBAHAN
Semua ilmu adalah milik Allah SWT. Kita sebagai manusia yang berakal hanya bisa berusaha, bersyukur dan bekerja keras. Allah SWT akan menilai setiap usaha kita dan tidak ada usaha yang sia-sia di mata Allah SWT. Semoga apa yang sudah kita raih dapat bermanfaat…..Amin.
Skripsiku ini aku persembahkan untuk orang-orang yang aku cintai: 1. Asmuni dan Kusmiati selaku bapak dan yang selalu memberikan yang
terbaik bagi anaknya
2. Keluarga besar saya yang sudah memberikan dukungan, termasuk Abi, semoga kita semua mendapat ridho Allah Subhanahuwata’ala...Amin. 3. Para dosen dan guru yang telah mendidik, membagi ilmu dengan penuh
kasih sayang mulai saya TK, MIN, MTsN, MAN hingga kuliyah di UIN Maulana Malik Ibrahim Malang, saya mengucapkan terima kasih.
4. Semua yang telah membantu penelitian skripsi saya, Ibu Bayyinatul Muchtaromah, Ibu Kholifah Holil, Bapak Muchammad Imamudin, serta seluruh laboran jurusan Biologi saya ucapkan terima kasih. Tidak lupa teman-teman seperjuangan Kuljar. Hewan (Anis, Rahma, dan Firda) mari kita lanjutkan perjuangan kita, semoga tercapai apa yang menjadi cita-cita kita,,,Amin.
5. Teman-teman Biologi angkatan 2008, Monik, Diana, Mbk. Aan, Fida dan yang tidak bisa saya sebutkan satu per satu, terima kasih atas segala dukungan, semangat, motifasi dan semoga kita bisa sukses selalu.
6. Teman-teman kos Melati ,makasih atas dukungan dan bantuan selama tinggal bersama.
7. Serta buat semuanya yang telah membantu menyesaikan skripsi ini mulai awal hingga akhir. Semoga Allah membalas amal baik kalian,,,,Amin.
KATA PENGANTAR Assalamualaikum Wr. Wb.
Syukur alhamdulillah penulis haturkan kehadirat Allah S.W.T yang
telah melimpahkan kasih sayang, rahmat dan hidayah-Nya, sehingga penulis
dapat menyelesaikan studi di Fakultas Sains dan Teknologi Universitas
Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang sekaligus menyelesaikan skripsi ini
dengan baik.
Selanjutnya penulis ucapkan terima kasih seiring do’a dan harapan jazakumullah ahsanal jaza’ kepada semua pihak yang telh membantu terselesaikannya skripsi ini. Ucapan terima kasih ini penulis sampaikan
kepada:
1. Prof. Dr. H. Imam Suprayogo selaku Rektor Universitas Islam Negeri
Maulana Malik Ibrahim Malang yang telah memberikan pengetahuan dan
pengalaman yang berharga.
2. Prof. Dr. Sutiman Bambang Sumitro, S. U.,D.Sc selaku Dekan Fakultas
Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim
Malang.
3. Dr. Eko Budi Minarno M.Pd selaku Ketua Jurusan Biologi Universitas
Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang.
4. Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah M, Si selaku Pembimbing Biologi
yang telah memberikan bimbingan kepada peneliti sampai dengan
5. Bapak Muchammad Imamudin, M.A selaku Pembimbing Agama yang
telah memberikan bimbingan kepada peneliti sehingga dapat
menyelesaikan skripsi ini.
6. Ibu Kholifah Holil M, Si selaku Pembimbing Pelaksana Penelitian,
berkat arahan beliau penelitian ini dapat terselesaikan dengan baik.
7. Ayah dan Ibu tercinta yang telah memberikan do’a dan dorongan, semangat belajar sehingga anakmu ini dapat menyelesaikan skripsi ini.
8. Segenap dosen dan pengelola laboratorium Biologi Universitas Islam
Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang.
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini masih
terdapat kekurangan dan penulis berharap semoga skripsi ini bisa
memberikan manfaat kepada para pembaca khususnya bagi penulis secara
pribadi. Amin Ya Rabbal Alamin.
Wassalamualaikum Wr. Wb.
Malang, 30 Januari 2013
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR ... i
DAFTAR ISI ... iii
DAFTAR TABEL ... vi
DAFTAR GAMBAR ... vii
DAFTAR LAMPIRAN ... viii
ABSTRAK ... ix ABSTRACT ...x BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang ...1 1.1Rumusan Masalah ...4 1.2Tujuan ...5 1.3Hipotesis ...5 1.4Manfaat Penelitian ...6 1.5Batasan Masalah...6
BAB II KAJIAN PUSTAKA 2.1 Tinjauan Umum Sirsak (Annona muricata Linn) ...8
2.2 Kandungan Senyawa Daun Sirsak (Annona muricata Linn) ...10
2.3 Tinjauan Tentang Hepar ...12
2.4 Kajian Keislaman Tentang Penyakit Hepar ...14
2.5 Perkembangan Sel Hepar In Vitro...17
2.6 Konfluenitas Sel Hasil Kultur ...19
2.7 Sitotoksitas Sel Hasil Kultur ...20
2.8 Tinjauan Tentang Kanker ...21
2.9 Pertumbuhan Sel Kanker Secara In Vitro ...25
2.10 Kanker Hepar ...26
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Rancangan Penelitian. ...31
3.2 Variabel Penelitian ...31
3.3 Waktu dan Tempat ...32
3.4 Alat dan Bahan ...32
3.5 Preparasi Alat ...33
3.6 Preparasi Bahan ...33
3.6.1 Media DMEM ...33
3.6.2 Antibiotik ...34
3.6.3 Media Kultur, Media Maintenance, dan Media Washing ...34
3.6.4 Pembuatan Estrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata Linn) ...34
3.6.5 Isolasi Sel Hepar Baby Hamster...35
3.7 Pelaksanaan ...36
3.7.1 Pembagian Kelompok Sampel ...36
3.7.2 Pemberian Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata Linn) ...36
3.8 Perlakuan ...37
3.8.1 Perlakuan Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak ...37
3.8.2 Pengamatan Konfluen Sel Hepar Baby Hamster ...37
3.8.3 Perhitungan Sitotoksitas Sel Hepar Baby Hamster ...38
3.9 Analisis Data ...39
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata Linn) Terhadap Konfluenitas Sel Hepar Baby Hamster Yang Diindu ksi DMBA (7,12 Dimetylbenz (α) Anthracene)Terhadap Konfluen Sel Hati Yang Dikultur Secara In Vitro ...41
4.2 Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak Terhadap Viabilitas Kultur Sel Hepar Baby Hamster Yang Diinduksi DMBA (7,12Dimetylbenz(α) anthracene...44 4.3 Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata Linn)Terhadap
(7,12 Dimetylbenz (α)anthracene...47 BAB V PENUTUP 5.1 Kesimpulan. ...53 5.2 Saran ...53 DAFTAR PUSTAKA ...54 LAMPIRAN ...59
DAFTAR TABEL
4.1 Ringkasan One-way ANOVA Tentang Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona nuricata Linn) Terhadap Konfluenitas Sel
Hepar Baby Hamster ...41 4.2 Ringkasan Uji BNJ 5% Tentang Pengaruh Ekstrak Etanol Daun
Sirsak Terhadap Konfluen Sel Hepar Baby Hamster ...42 4.3 Ringkasan One-way ANOVA Tentang Pengaruh Ekstrak
Etanol
Daun Sirsak (Annona nuricata Linn) Terhadap Viabilitas Sel
Hepar Baby Hamster ...44 4.4 Ringkasan Uji BNJ 5% Tentang Pengaruh Ekstrak Etanol Daun
Sirsak Terhadap Viabilitas Sel Hepar Baby Hamster ...44 .
DAFTAR GAMBAR
No Judul Halaman
2.1 Gambar Buah Sirsak, Bunga Sirsak Dan Daun Sirsak ...9
2.2 Gambar Senyawa Acetogenin Secara Umum ...11
2.3 Senyawa 7,12 Dimetylbenz(α)anthracene ...27
2.4 Gugus Induk 7,12 Dimetylbenz(α)anthracene ...28
2.5 Mekanisme Karsinogenesis DMBA ...29
4.5 Kurva Analisis Probit Hubungan Antara Log Konsentrasi Dengan Persentase Kematian Sel Melalui Komputerisasi Biostat 2009 pro fesional 2009 ...48
DAFTAR LAMPIRAN
No Judul Halaman
1. Kerangka Konsep Penelitian ...61
2. Diagram Kegiatan Penelitian ...62
3. Diagram Pembuatan Media DMEM Stok 100 Ml ...63
4. Diagram Isolasi Fetus Hamster ...64
5. Diagram Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata Linn) ...65
6. Data Viabilitas dan Mortalitas Kultur Sel Setelah Pengamatan Jam ke-72 ...66
7.Analisis Statistik Tentang Pengaruh Ekstrak Daun Sirsak Dengan Konsentrasi Berbeda Terhadap Viabilitas Sel Hepar Baby Hamster Yang Diinduksi DMBA 0,1μg/mL selama 48 jam ...69
8. Analisis Statistik Tentang Pengaruh Ekstrak Daun Sirsak Dengan Konsentrasi Berbeda Terhadap Konfluenitas Sel Hepar Baby Hamster Yang Diinduksi DMBA 0,1μg/mL selama 48 jam ...71
9. Tabel Hasil Analisis Probit ...73
10. Gambar Sel Hepar Setelah Diinduksi DMBA 48Jam ...74
11.Gambar Hasil Pengamatan Sel Hasil Kultur Setelah Pengamatan Jam ke-72 Dengan Perbesaran 200x ...75
12. Gambar Bahan-Bahan Yang Digunakan ...76
13. Gambar Alat-Alat Yang Digunakan...77
ABSTRAK
Rini, Khafid Presti Mustika. 2013. Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annon muricata Linn) Terhadap Pertumbuhan Sel Hepar Baby Hamster Yang Diinduksi DMBA (7,12 Dimetylbenz (α) anthracene) Secara In Vitro.Skripsi Jurusan Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang. Pembimbing Biologi : Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah M, Si. Pembimbing Agama : Mochammad Imamudin, M.A.
Kata kunci : Ekstrak Daun Sirsak, Sel Hepar, Baby Hamster, DMBA Uji Sitotoksitas
Kanker hepar merupakan salah satu penyakit yang mematikan. Pengobatan penyakit ini memerlukan biaya yang tinggi dan memberikan efek samping bagi tubuh, sehingga pemanfaatan tanaman obat menjadi salah satu pilihaan efektif dalam upaya pengobatan kanker. Ekstrak daun sirsak (Annona muricata Linn) memiliki senyawa yang disebut acetogenin yang diduga kuat sebagai anti kanker pada penelitian-penelitian sebelumnya. Ekstrak daun sirsak ini mampu meredam proliferasi sel berlebih dengan cara menghambat produksi energi berlebih pada mitokondria. Salah satu karsinogen yang dapat menyebabkan sel kanker adalah DMBA (7,12 Dimetylbenz (α) Anthracene). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun sirsak terhadap kultur primer sel hepar baby hamster yang diinduksi DMBA.
Jenis penelitian yang dilakukan adalah penelitian eksperimental menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 7 perlakuan yaitu kontrol negatif, kontrol positif, perlakuan ekstrak daun sirsak konsentrasi 10 μg/mL, 20 μg/mL, 40 μg/mL, 80 μg/mL, dan 160 μg/mL terhadap sel hepar yang telah diinduksi DMBA 0,1 μg/mL selama 48 jam. Sampel dalam penelitian ini adalah sel hepar baby hamster umur 2 hari yang dikultur dalam medium DMEM 10% FBS + DMBA 0,1 μg/mL bagi kontrol positif serta perlakuan, kemudian diinkubasi dalam inkubator CO2 5% suhu 37oC
selama 48 jam. Selanjutnya sampel diberi ekstrak daun sirsak dengan konsentrasi berbeda pada perlakuan selama 24 jam. Setelah selesai pemberian ekstrak daun sirsak selama 24 jam, sel hepar baby hamster diamati konfluenitas, viabilitas dan efek sitotoksitas ekstrak daun sirsak terhadap sel.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daun sirsak (Annona muricata Linn) berpengaruh terhadap konfluenitas, viabilitas dan sitotoksitas sel hepar baby hamster yang diinduksi DMBA 0,1 μg/mL selama 48 jam. Hasil analisis probit menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun sirsak memiliki nilai LC50 22,3818 μg/mL sehingga termasuk
ABSTRACT
Rini, Khafid Presti Mustika. 2013.The Effect of Leaf Extract Soursop Against Primary Cell CulturesHamsterBaby Liver DMBA-induced (7.12 Dimetylbenz (α) anthracene) In In Vitro.Thesis Department of Biology, Faculty of Science and Technology, State Islamic University (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang. Biology Supervisor: Dr. drh. BayyinatulMuchtaromah M, Si. Supervisor Religion: MuchammadImamudin, M.A.
Keywords: Cytotoxicity Test, Soursop Leaf Extract, Cell Hepar, Baby Hamster, DMBA.
Liver cancer is one of a deadly disease. The Techniques Treatment of the disease is often using high cost and give side effects for the body. So the use of medicinal plants to be one effective option in the treatment of cancer. Extract of leaves of the soursop (Annonamuricata Linn) has a compound called acetogenin strongly suspected as anti cancer in previous studies.Soursop leaves extract are able to reduce excess cell proliferation by inhibiting the production of excess energy in the mitochondria. One of carcinogen that can cause cancer cells are DMBA (7.12 Dimetylbenz (α) Anthracene). This study aims to determine the effect of soursop leaves extract to cultured primary liver cells DMBA-induced hamster baby.
Type of research is experimental research using completely randomized design with 7 treatments that negative controls, positive controls, soursop leaves extract treatments concentration of 10 μg/mL, 20 μg/mL, 40 μg/mL, 80 μg/mL, and 160 μg/mL. For primary liver cell cultures that had been induced DMBA 0.1 μg/mL for 48 hours. The samples in this study were aged hamster fetal liver cells were cultured 2 days in 10% FBS DMEM medium DMBA + 0,1 μg/mL for the positive control and treatments, then incubated in 5% CO2 incubator at 37°C for 48
hours.Further samples were soursop leaves extract treatments with different concentrations for 24 hours. After completion of soursop leaf extract for 24 hours, primary cultures fetal hamster liver cells observed confluenity, viability and cytotoxicitysoursop leaves extract to the cells.
The results showed that the leaves extract ethanol of soursop (AnnonamuricataLinn) influence on confluenity, viability and cytotoxicity liver cells DMBA-induced hamster 0.1μg/mL for 48 hours. The results showed using probit analysis, that soursop leaves extract had LC50 values
صخلملا ْٚير , يخسزب ليخسٍ عيفح . 2013 . زيثأح ثاصيخخسٍ قارٗأ فصر٘س ( ِيى جنيرٍ٘ تطشق ) ذض يخىا تفاقثىا ايلاخ اٖببسي ذبنىا تيىٗلأا ةداَىا تْطزسَىا هافطلاا يف زخسٍاٖىا زبخخَىا يف . تحٗزطأ ةرادإ لىاٍ اّلاٍ٘ تيٍلاسلإا تىٗذىا تعٍاخ ،ايخ٘ىْ٘نخىاٗ ً٘يعىا تييم ،ايخ٘ى٘يبى حّلااٍ ٌيٕازبإ . ايخ٘ى٘يبىا فزشَىا : زيخسخاَىا تٍراخٍٖ تْيبىا . فزشَىا ِيذىا : ذَحٍ ًاٍا ِيذىا , زيخسخاٍ . . كاخفىا ضزَىا اذٕ ٍِ ذحاٗ ٕ٘ ذبنىا ُاطزس . ًذخخسح اٍ ابىاغٗ ضزَىا اذٕ ٍِ جلاعىا تينيّانيَىا ثاحابْىا ًاذخخسا ُإف يىاخىابٗ ،ٌسديىٗ تيبّادىا راثلآا تيىاعىا تفينخىا ًذخخسح اٍ بىاغٗ تيىاعىا تفينخىا ُاطزسىا جلاع يف تىاعف رايخىا اذحاٗ ُ٘نيى تيبطىا . فصر٘س ٍِ قارٗلأا جازخخسا ( تطشق ِيى جنيرٍ٘ ) تقباسىا ثاسارذىا يف ُاطزسيى ةداضَىا ة٘قب ٔبخشي اَم ِيْيغ٘خس اعىا َٚسي بمزٍٗ . جاخّا عٍْ هلاخ ٍِ ةذئاشىا ايلاخىا راشخّا ٍِ ذحىا ٚيع ةرداق زيغ قارٗأ فصر٘س جازخخسا ايرذّ٘م٘خيَىا يف ةذئاشىا تقاطىا . تْطزسٍ ةداٍ اْيسزخّا حْب ويخيَيد . ُاطزسىا ببسح ُأ ِنَي فقثٍ تيىٗلأا ذبنىا ايلاخ فصر٘س قارٗأ جازخخسا ٚيع زثأ ذيذحح ٚىإ فذٖح تسارذىا ٓذٕ ايلاخىا هافطىا ثاذعٍ زخسٍاٖىا ِع تَخاْىا تْطزسَىا ةداَىا . ها تيئا٘شعىا وٍام ٌيَصخىا ًاذخخساب تيبيزدح تسارد ٕ٘ ثحبىا ٍِ عّ٘ ( هءر ) عٍ 7 ٕ٘ جلاعىا صيخخسَىا شيمازح تدىاعٍٗ ،تيباديإ تبقازٍٗ ،تيبيسىا ةزطيسىا 10 ًازغٗزنيٍ / ،وٍ 20 ًازغٗزنيٍ / ، وٍ 40 ًازغٗزنيٍ / وٍ , 80 ًازغٗزنيٍ / ٗ ،وٍ 160 ًازغٗزنيٍ / وٍ . ايلاخٗ تْطزسَىا ةداَىا وعفب ٌح يخىا فقثٍ تيىٗلأا ذبنىا 0,1 ًازغٗزنيٍ / ةذَى وٍ 48 ايلاخٗ تعاس ٌٕراَعأ ذٗازخح هافطا ثاذعٍ ذبنىا ايلاخ تسارذىا ٓذٕ يف ثاْيعىا تعارس ٌح ةد٘صزَىا تسذنخٍ زخسٍاٖىا ِيب 2 ظس٘خَىا يف ًايأ 10 ٪ + ًازغٗزنيٍ / تْطزسَىا ةداَىا وٍ يف جْضح ٌث ،جلاعىاٗ تيباديإ تبقازَى 5 ٪ يّاث ذيسمأ ُ٘بزنىا تخرد تْضاح ° 37 ةذَى 48 تعاس . ةذَى تفيخخٍ ثاشيمزح عٍ وٍاعح فصر٘سىا تقرٗ ثافطخقٍ ذيشٍ ثاْيع جّامٗ 24 تعاس . ةذَى فصر٘سىا قارٗأ جازخخسا ٍِ ءاٖخّلاا ذْع 24 ذبنىا ايلاخى يسيئزىا ثافاقثىا عحلا ،اٍ٘ي يخيّ٘ى٘فّ٘م زخسٍاٖىا هافطا ثاذعٍ , ٚخيسيسعخيس جازخخسا فصر٘سىا تقرٗ راثلآاٗ ٙٗذدىا , ٚىإ ايلاخىا . فصر٘سىا قارٗأ جازخخسا ُأ حئاخْىا ثزٖظأٗ ( ِيى جنيرٍ٘ تطشق ) ٚيع زيثأح زيبم يخيّ٘ى٘فّ٘م , ةداَىا ٌخاْىا زخسٍاٖىا ذبنىا هافطا ثاذعٍ ايلاخىا ٍِ ثافاقثىا تسَسىا تيىٗلأا ٙٗذدىاٗ تْطزسَىا 0,1 ًازغٗزنيٍ / ةذَى وٍ 48 تعاس . يخىا ،تيىاَخحلاا وييحح ًاذخخساب حئاخْىا ثزٖظأٗ ٚسىا قارٗأ جازخخسا فصر٘س ُام . ٌيقىا 22،3818 ًازغٗزنيٍ / وٍ . وخقح ُأ ِنَي فصر٘سىا قارٗأ جازخخسا شيمزح ُأ حئاخْىا ثزٖظأ 50 فقثٍ تيىٗلأا ذبنىا ايلاخ ٪ زخسٍاٖىا هافطلاا اٖببسي يخىا تْطزسَىا ةداَىا . قارٗأ جازخخسا ُأ ثزٖظأٗ ٌيقىا فصر٘سىا ( ِيى جنيرٍ٘ تطشق ) ثاّ٘نَىا يٕ ُاطزسيى ةداضَىا تيَخحَىا اَم . DMEM FBS LC50 LC50
