commit to user
PERBEDAAN KADAR CAFFEIC ACID PHENETHYL ESTER
PADA PROPOLIS DI PASARAN WILAYAH SURAKARTA
SKRIPSI
Untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran
Devina Noviani Pramono G.0009055
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET
commit to user
iv
ABSTRAK
Devina Noviani Pramono, G.0009055, 2012. Perbedaan Kadar Caffeic Acid Phenethyl Ester pada Propolis di Pasaran Wilayah Surakarta. Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Latar Belakang: Propolis memiliki banyak komponen biologis dan farmakologis yang memberikan berbagai manfaat seperti immunomodulator, antitumor, antiinflamasi dan antioksidan. Hal ini disebabkan karena propolis disusun oleh berbagai macam komposisi kimiawi dan salah satunya adalah Caffeic Acid Phenethyl Ester (CAPE). Kandungan dan komposisi kimia penyusun propolis dipengaruhi oleh banyak faktor di antaranya jenis tumbuhan, letak geografis, pelarut, jenis lebah, musim, serta iklim. Hal ini berakibat tidak semua merek propolis yang dijual memiliki komposisi dan kandungan kimia yang sama, begitu pula dengan propolis yang beredar di pasaran wilayah Surakarta. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan kadar CAPE pada propolis di pasaran wilayah Surakarta.
Metode Penelitian: Penelitian ini merupakan penelitian observasional analitik . Pengambilan sampel dilakukan dengan cara purposive sampling menggunakan 6 merek propolis yang dibagi menjadi 6 kelompok yakni P1, P2, P3, P4, P5, dan P6. Masing-masing kelompok dilakukan pengukuran sebanyak lima kali. Pengukuran kadar senyawa CAPE dilakukan menggunakan UV Vis spektrofotometer panjang gelombang 700 nm dengan metode Prussian Blue. Analisis data yang diperoleh dilakukan dengan menggunakan uji statistik one way
Anovamelalui program SPSS 17.00 for Windows program.
Hasil Penelitian: Rata-rata kadar CAPE pada sampel propolis adalah P1 =
commit to user
vi
PRAKATA
Segala puji syukur bagi Tuhan Yesus Kristus atas berkat dan kasih yang diberikanNya kepada penulis. Karena pertolonganNya, penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Perbedaan Kadar Caffeic Acid Phenethyl
Ester pada Propolis di Pasaran Wilayah Surakarta”. Penelitian tugas karya
akhir ini merupakan salah satu persyaratan dalam menyelesaikan Program Sarjana Pendidikan Dokter di Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. Pertolongan sejati adalah dari Tuhan, yang menjadikan langit dan bumi.
Penulis menyadari bahwa penelitian tugas karya akhir ini tidak akan berhasil tanpa adanya bantuan dari berbagai pihak, oleh karena itu dengan penuh rasa hormat ucapan terima kasih yang dalam saya berikan kepada :
1. Prof.Dr.Zainal Arifin Adnan,dr.,Sp.PD-KR-FINASIM selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.
2. Muthmainah, dr., M.Kes, selaku ketua tim skripsi beserta Enny N, SH., MH dan Mas Nardi selaku tim skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.
3. Diding Heri Prasetyo, dr., M.Si selaku Pembimbing Utama yang telah menyediakan waktu untuk membimbing hingga terselesainya skripsi ini. 4. Sri Hartati, Dra., Apt., SU selaku Pembimbing Pendamping yang telah
menyediakan waktu untuk membimbing hingga terselesainya skripsi ini. 5. R.P. Andri Putranto, dr., M.Si selaku Penguji Utama yang telah memberikan
banyak kritik dan saran dalam penyusunan skripsi ini.
6. Martini, Dra., M.Si selaku Penguji Pendamping yang telah memberikan banyak kritik dan saran dalam penyusunan skripsi ini.
7. Bapak, Ibu, kakak serta semua pihak yang secara langsung maupun tidak langsung membantu proses penelitian tugas karya akhir ini yang tidak mungkin penulis sebutkan satu persatu.
Meskipun tulisan ini masih belum sempurna, penulis berharap skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca. Saran, koreksi, dan tanggapan dari semua pihak sangat diharapkan.
Surakarta, 26 Juli 2012
commit to user
vii
DAFTAR ISI
PRAKATA ... vi
DAFTAR ISI ... vii
DAFTAR TABEL ... x
DAFTAR GAMBAR ... xi
DAFTAR LAMPIRAN ... xii
BAB I. PENDAHULUAN ... 1
A. Latar Belakang ... 1
B. Perumusan Masalah ... 3
C. Tujuan Penelitian ... 4
D. Manfaat Penelitian ... 4
BAB II. LANDASAN TEORI ... 5
A. Tinjauan Pustaka... ... 5
1. Propolis ... 5
a. Pengertian Umum... ... 5
b. Kegunaan... ... 6
c. Kandungan Kimia ... ... 7
d. Efek Samping ... ... 9
2. Caffeic Acid Phenethyl Ester ... ... 10
commit to user
A. Penentuan Konsentrasi Standar CAPE ... 20
B. Penentuan Konsentrasi CAPE pada Sampel Propolis ... 22
commit to user
ix
B. Saran ... 29
DAFTAR PUSTAKA ... 30
commit to user BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah
Seiring dengan perkembangan jaman, penggunaan obat herbal pun
makin marak di kalangan masyarakat. Obat herbal telah diterima secara luas
hampir diseluruh negara di dunia. Menurut WHO, negara- negara di Afrika,
Asia dan Amerika Latin menggunakan obat herbal sebagai pelengkap
pengobatan primer. Bahkan di Afrika, sebanyak 80% dari populasi telah
menggunakan obat herbal sebagai pengobatan primer (WHO, 2003). Faktor
pendorong terjadinya peningkatan penggunaan obat herbal di negara maju
adalah usia harapan hidup yang lebih panjang pada saat prevalensi penyakit
kronik meningkat dan adanya kegagalan penggunaan obat modern untuk
penyakit tertentu di antaranya kanker serta semakin luasnya akses informasi
mengenai obat herbal di seluruh dunia (Sukandar, 2006).
Salah satu contoh obat herbal yang makin banyak dikonsumsi
masyarakat adalah propolis. Propolis merupakan material yang digunakan
oleh lebah untuk membangun dan melindungi sarangnya, propolis merupakan
substansi seperti lem yang tersusun atas resin tanaman, minyak esensial,
balsam, bee waxes dan pollen ( Fokt et al., 2010). Propolis banyak digunakan
dan dijual di berbagai apotik sebagai obat untuk berbagai penyakit. Produk
commit to user
dalam sirup obat batuk, shampo, kondisioner, salep, lotion, lipstik, kosmetik
dan pasta gigi (Fokt et al., 2010).
Propolis memiliki banyak komponen biologis dan farmakologis yang
dapat memberikan banyak manfaat seperti immunomodulator, antitumor,
antiinflamasi, antioksidan, antibakterial, antiviral dan antiparasit (Sforcin et
al., 2000, 2001; Gekker et al., 2005; Orsi et al., 2005, 2006a,b). Sebagai
imunomodulator kandungan Caffeic Acid Phenethyl Ester (CAPE) propolis
terbukti dapat menstimulasi produksi antibodi (Fischer et al., 2007). Secara in
vitro propolis bekerja secara langsung melawan mikroorganisme dan secara
in vivo propolis dapat menstimulasi sistem imun, dan mengaktivasi
mekanisme pertahanan tubuh terhadap mikroorganisme.
Banyak penelitian dilakukan untuk menilai kandungan kimiawi dalam
propolis dan dapat disimpulkan bahwa komposisi kimiawi propolis sangat
beragam dan bergantung pada flora lokal dari daerah asal produksi propolis
(Marcucci, 1995; Bankova et al., 2000). Bagaimanapun juga untuk dapat
secara resmi digunakan sebagai salah satu bentuk pengobatan maka
diperlukan standarisasi kandungan kimiawi dari propolis yang dapat
menjamin kualitas, keamanaan dan kemanjuran dari propolis tersebut.
Dengan kepastian standardisasi akan memudahkan ilmuwan untuk
menghubungkan kandungan kimiawi propolis tertentu dengan aktivitas
biologis dari suatu penyakit sehingga membantu konsumen untuk dapat
commit to user
Melihat adanya kaitan penting antara standardisasi kandungan
kimiawi propolis dengan efektifitas kinerja propolis itu sendiri maka peneliti
memandang pentingnya dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai perbedaan
kadar kandungan CAPE pada propolis di pasaran Wilayah Surakarta. Selain
itu alasan lain mengapa penelitian ini perlu dilakukan adalah karena belum
adanya penelitian yang dilakukan untuk melihat seperti apakah perbedaan
kadar kandungan CAPE pada propolis di pasaran Wilayah Surakarta.
Diharapkan dengan adanya penelitian ini, dapat memberikan
sumbangsih pada ilmu pengetahuan dan kesehatan pada khususnya karena
melihat pada prospek propolis sebagai salah satu pilihan pengobatan herbal
yang berkualitas, dengan meninjau berbagai manfaat propolis yang dapat
diperoleh apabila kandungan kimiawi propolis sesuai dengan standarisasinya.
Hal ini dapat membuat propolis menjadi salah satu alternatif pilihan
pengobatan herbal yang berkualitas, aman dan efektif dalam mengobati
berbagai macam penyakit. Semoga hasil penelitian ini dapat menjadi suatu
dasar pertimbangan untuk memilih propolis sebagai suatu bentuk pengobatan
herbal.
B. Perumusan Masalah
Berdasarkan uraian dalam latar belakang masalah tersebut di atas,
dapat dirumuskan masalah pada penelitian ini adalah sebagai berikut:
Bagaimanakah perbedaan kadar Caffeic Acid Phenetyl Ester (CAPE)
commit to user C. Tujuan Penelitian
Penelitian ini mempunyai tujuan sebagai berikut:
Untuk mengetahui perbedaan kadar Caffeic Acid Phenetyl Ester
(CAPE) pada propolis di pasaran Wilayah Surakarta.
D. Manfaat Penelitian
1. Manfaat Teoritis
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah yang lebih
mendalam mengenai perbedaan kadar Caffeic Acid Phenetyl Ester
(CAPE)pada propolis di pasaran Wilayah Surakarta.
2. Manfaat Aplikatif
Penelitian ini diharapkan dapat menjadi awal dari pengembangan
penelitian lebih lanjut mengenai perbedaan kadar Caffeic Acid Phenetyl
commit to user BAB II
LANDASAN TEORI
A. Tinjauan Pustaka
1. Propolis
a. Pengertian Umum
Kata propolis berasal dari bahasa Yunani, yaitu pro berarti
sebelum dan polis berarti kota. Sehingga propolis dapat diartikan
“sebelum masuk sarang lebah”, yang bermakna pelindung sarang
lebah dari faktor-faktor berbahaya yang terdapat di luar sarang (Farre
et al., 2004; Kolasec et al., 2004).
Propolis merupakan substansi resin yang berbentuk lengket
seperti lem sehingga disebut sebagai bee glue. Propolis dihasilkan
lebah dengan cara mengumpulkan resin dari berbagai macam
tumbuhan, kemudian resin ini dicampur dengan saliva yang
mengandung berbagai enzim yang ada pada lebah dan lilin yang
berada di dalam sarang lebah, sehingga menjadi resin yang berbeda
dengan asalnya. Karena sumbernya bermacam-macam, maka warna,
komposisi, dan khasiat propolis bisa bervariasi (Sabir, 2005;
Bankova et al., 2000).
Penggunaan propolis sebagai obat sebenarnya sudah
dilakukan sejak lama. Bangsa Mesir menggunakan propolis untuk
commit to user
cicatrizant oleh Bangsa Yunani dan Romawi. Bangsa Inca
memanfaatkan propolis sebagai agen antipiretik. Bahkan pada abad
ke-17 lembaga farmasi London mengesahkan propolis sebagai obat
resmi (Castaldo dan Capasso, 2002; Bankova, 2005; Sforcin, 2007).
b. Kegunaan
Kegunaan propolis bagi manusia antara lain adalah :
1) Membantu meningkatkan sistem kekebalan tubuh secara alami
karena propolis kaya akan bioflavonoid yang dapat membantu
meningkatkan produksi serta aktifitas sel-sel imun, antara lain
makrofag (Orsi et al., 2000).
2) Sebagai penetral racun karena berbagai kandungan dalam
propolis dapat membersihkan polutan dan racun di dalam tubuh,
sehingga metabolisme sel dapat berlangsung optimal. Beberapa
penelitian telah membuktikan bahwa propolis juga dapat
berfungsi sebagai antioksidan kuat, yang dapat mencegah
timbulnya senyawa-senyawa radikal bebas (Kumazawa et al.,
2004). Radikal bebas merupakan penyebab utama munculnya
sel-sel kanker atau menimbulkan berbagai gejala penyakit akibat
gangguan fisiologi sel tubuh.
3) Sebagai antivirus, antibakteri dan antifungal karena propolis
sangat efektif melawan bakteri, virus dan jamur yang berbahaya
bagi kesehatan tubuh seperti bakteri yang dapat menyebabkan
commit to user
dan jamur yang dapat menyebabkan infeksi pada kulit, dan
bahkan bakteri yang dapat menyebabkan diare (Stepanovic et
al., 2003).
4) Sebagai anti peradangan karena propolis mengandung senyawa
Caffeic Acid Phenetyl Ester (CAPE) (Borrelli et al., 2002).
5) Membantu melindungi jantung karena kemampuannya yang
dapat membantu menurunkan Low Density Lipoprotein (LDL)
dan trigliserida, serta meningkatkan High Density Liporotein
(HDL) (Fuliang et al., 2005).
6) Membantu mengatasi tukak lambung dengan cara mengurangi
kerusakan yang terjadi pada dinding lambung, mengurangi
derajat keasaman dan jumlah asam lambung yang diproduksi,
serta kemampuan propolis sebagai antimikroba dapat membantu
melawan aktifitas bakteri Helicobacter pylori, yaitu bakteri
penyebab tukak lambung (Kosalec et al., 2004).
c. Kandungan Kimia
Perlu diketahui bahwa komposisi kandungan senyawa yang
terdapat di dalam propolis sangat bervariasi tergantung wilayahnya.
Hali ini disebabkan lebah pekerja mengambil resin dari tumbuhan
yang tersedia di sekitar sarangnya, dan tumbuhan yang ada pada tiap
wilayah dapat sangat bervariasi tergantung pada kondisi geografis
dan ekosistem yang ada (Kosalec et al., 2004; Bankova et al., 1999).
commit to user
kimia pada propolis adalah waktu pengambilan propolis, iklim
daerah tumbuh propolis, dan jenis lebah (Fokt et al., 2010).
Bahan-bahan yang terkandung dalam propolis sangatlah
kompleks dan lebih dari 200 komponen telah teridentifikasi.
Penelitian yang ada mengenai komposisi kandungan yang terdapat
dalam propolis juga sangat bervariasi. Namun secara garis besar
hampir sama. Secara umum propolis mentah (raw propolis) terdiri
dari 50% resin yang sebagian besar terdiri dari fraksi polifenol, 30%
getah, 10% minyak esensial, 5% zat organik dan anorganik
(Bankova, 2000).
Jenis senyawa kimia yang terdapat pada propolis sangat
kompleks. Berdasarkan analisis dengan menggunakan metode Gas
Chromatography-Mass Spectometry (GC-MS) terhadap propolis
menunjukkan bahwa propolis mengandung berbagai macam
senyawa yaitu asam amino, asam alifatik dan esternya, asam
aromatik dan esternya, alkohol, aldehida, khalkon, dihidrokhalkon,
flavanon, flavon, hidrokarbon, keton dan terpenoid (Greenaway et
al., 1990). Hasil yang hampir sama juga diperoleh oleh Marcucci
(1995) yang menemukan senyawa alkohol, aldehida, asam alifatik
dan esternya, asam amino, asam aromatik dan esternya, flavanon,
keton dan glukosa dalam propolis.
Secara farmakologis, senyawa yang paling penting dalam
commit to user
aromatic. Flavonoid memiliki aktifitas biologis yang paling penting
dalam propolis. Sekurangnya sudah ada 38 macan flavonoid sudah
ditemukan di dalam proplis, antara lain galangin, kaempfrenol,
quercetin, pinocembrin, pinostrobin dan pinobaksin. Senyawa
phenolic terdiri atas cinnamyl alcohol, cinnamic acid, vanillin,
benzyl alcohol, benzoic acid, caffeic acid dan ferulic acid. Secara
keseluruhan, semua kelompok senyawa ini dilaporkan dapat
memiliki aktivitas sebagai antibakteri, antifungal, antivirus,
antiprotozoa, antioksidan, antiinflamasi, dan immunomodulator
(Kosalec et al., 2004).
d. Efek Samping
Menurut penelitian Kariim (2007), selama 2500 tahun
penggunaan propolis oleh berbagai masyarakat dari berbagai
kebudayaan tidak tercatat adanya efek negatif yang serius dari
propolis. Bahkan dokter-dokter di Rusia biasa memberikan 9 gram
propolis setiap harinya kepada pasien tanpa mengalami kendala.
Adapun efek ringan yang sering dirasakan oleh pasien adalah mulut
dan tenggorokan terasa kering setelah mengkonsumsi propolis dan
kulit yang terasa hangat setelah dioleskan propolis.
Menurut penelitian Burdock (1998), propolis terbukti tidak
menimbulkan efek toksik. Pada sebagian orang mungkin muncul
alergi terhadap propolis, tetapi jumlahnya jauh lebih sedikit daripada
commit to user
digunakan kepada orang yang mempunyai riwayat alergi terhadap
pollen (serbuk sari) (Menniti-Ippolito et al., 2008).
2. Caffeic Acid PhenethylEster
Gambar 2.1. Struktur Kimia CAPE (Hui et al., 2004).
Caffeic Acid Phenethyl Ester (CAPE) adalah salah satu komponen
aktif dalam ekstrak propolis yang berasal dari sarang lebah dan telah
diketahui memiliki beberapa manfaat seperti antimitogenik,
antikarsinogenik, antiinflamasi dan immunomodulator (Natarajan et al.,
1996). CAPE adalah struktur cenderung mirip flavonoid yang merupakan
senyawa utama dalam propolis, sebuah produk yang memiliki spektrum
luas yang telah digunakan sebagai obat rakyat. Grunberger et al (1998)
mendeskripsikan CAPE sebagai senyawa yang bertanggung jawab
terhadap sifat-sifat sitostatik propolis.
Caffeic Acid Phenethyl Ester telah menunjukkan beberapa
aktivitas biologi dan farmakologi seperti antiinflamasi (Borreli et al.,
2002; Hu et al., 2005) antikarsinogenik, imunomudulator dan antioksidan
(Cicala et al., 2003). CAPE diketahui dapat menjadi inhibitor kuat bagi
lipooksigenase serta bagi xantine oksidase dan dari pembentukan
commit to user
sebagai antitumor karena CAPE dapat menginduksi apoptosis dan secara
selektif menghambat pertumbuhan sel-sel abnormal (Mou-tuan et al.,
1996).
3. UV Vis Spektrofotometri Prussian Blue
Spektrofotometri merupakan metode analisis kuantitatif yang
cukup kuat dibandingkan metode lainnya. Metode spektrofotometri
digunakan untuk menentukan kandungan kimiawi berdasarkan absorbsi
panjang gelombang dari warna yang dihasilkan zat yang diukur
berdasarkan reaksinya setelah penambahan zat lain.
Terdapat beberapa cara untuk menganalisis komposisi fenol
dalam propolis dengan metode spektrofotometrik di antaranya metode
Folin-Ciocalteau, metode Prussian Blue dan metode o-Phenanthroline.
Metode Folin-Ciocalteau merupakan metode yang paling stabil dari
ketiga metode tersebut dan direkomendasikan untuk menganalisis
propolis dengan konsentrasi fenol yang tinggi. Metode Prussian Blue
merupakan metode yang cepat dan paling sensitif untuk total fenol
namun metode ini tidak stabil. Sementara metode o-Phenanthroline
merupakan metode yang cukup sensitif dan stabil (Gonzales, 2003).
Pengukuran dengan metode Prussian blue dilakukan dengan cara
mengunakan ekstrak air maupun ekstrak etanol propolis sebanyak 5-400
ηm ditambah dengan reagen prussian blue yaitu 400 ηm 0,0008M
K4(Fe)CN6 dan 400 ηm 0.1M FeCl3 dalam larutan 0.1M HCl. Larutan
commit to user
akhirnya menjadi 10 ml. setelah tujuh menit absorbansi dilakukan pada
700 nm, pegukuran dinyatakan selesai apabila test strip FeCl3 berubah
warna menjadi hijau kebiruan.
B. Kerangka Pemikiran
Gambar 2.2. SkemaKerangka Pemikiran.
C. Hipotesis
Hipotesis penelitian ini adalah:
Ada perbedaan antara kadar Caffeic Acid Phenethyl Ester (CAPE)
pada propolis di pasaran Wilayah Surakarta.
Variasi kandungan senyawa kimia propolis Letak geografis,
jenis tumbuhan, waktu pengambilan,
iklim, jenis lebah
Variasi kadar kandungan senyawa kimia propolis
Propolis
Variasi kadar CAPE
commit to user BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian observasional analitik.
B. Lokasi Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Biokimia Fakultas
Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.
C. Subjek Penelitian
Subjek yang digunakan dalam penelitian ini adalah propolis yang
beredar di pasaran Wilayah Surakarta.
D. Teknik Sampling
Teknik sampling yang digunakan adalah purposive sampling. Sampel
dipilih berdasarkan ciri-ciri atas sifat tertentu yang berkaitan dengan
commit to user E. Identifikasi Variabel Penelitian
1. Variabel bebas : Propolis di pasaran Wilayah Surakarta
2. Variabel terikat : Kadar Caffeic Acid Phenethyl Ester
(CAPE).
3. Variabel luar : Letak geografis, jenis tumbuhan, waktu
pengambilan, iklim dan jenis lebah.
F. Definisi Operasional Variabel
1. Variabel Bebas
Propolis di pasaran Wilayah Surakarta adalah Propolis yang berada di
pasaran Wilayah Surakarta. Skala pengukuran variabel ini adalah
nominal.
2. Variabel Terikat
Kadar Caffeic Acid Phenethyl Ester (CAPE) adalah banyaknya CAPE
yang terdapat dalam propolis kemasan di pasaran Wilayah Surakarta.
Cara mengukurnya adalah dengan menggunakan metode UV Vis
Spektrofotometri Prussian Blue. Skala pengukuran variabel ini adalah
rasio.
3. Variabel luar
a. Letak geografis
Letak geografis mempengaruhi perbedaan bahan-bahan dasar dalam
commit to user
b. Jenis tumbuhan
Jenis tumbuhan yang berbeda dapat mempengaruhi komposisi
penyusun propolis.
c. Waktu pengambilan
Waktu pengambilan propolis yang berbeda juga dapat
mempengaruhi hasil akhir produk propolis.
d. Iklim
Iklim mempengaruhi perbedaan jenis tumbuhan yang merupakan
bahan dasar propolis. Iklim yang beragam berarti jenis tumbuhan
juga beragam sehingga menghasilkan komposisi penyusun propolis
yang beragam pula.
e. Jenis lebah
Jenis lebah mempengaruhi komposisi saliva dan enzim penyusun
propolis, sehingga secara tidak langsung juga mempengaruhi
commit to user G. Rancangan Penelitian
Rancangan penelitian yang digunakan adalah observasional analitik.
Gambar 3.1. Skema Rancangan Penelitian.
Keterangan:
N :Propolis di pasaran Wilayah Surakarta
commit to user
C5 : Kadar CAPE propolis 5
C6 : Kadar CAPE propolis 6
R1 : Rata-rata kadar CAPE propolis 1
R2 : Rata-rata kadar CAPE propolis 2
R3 : Rata-rata kadar CAPE propolis 3
R4 : Rata-rata kadar CAPE propolis 4
R5 : Rata-rata kadar CAPE propolis 5
R6 : Rata-rata kadar CAPE propolis 6
H. Instrumen Penelitian
1. Alat
a) labu takar 10 mL, 100 mL, 250 mL; b) erlenmeyer tutup 100 mL, 250
mL; c) gelas beaker 250 mL; d) pipet tetes; e) pipet mikro 0-10, 10-100,
100-1000 µ L; f) botol timbang; g) satu set spektrofotometer; h) kertas
saring; i) kain lap; j) sabun cuci; k) sikat tabung.
2. Bahan
a) CAPE (1.10-3 s.d 2,98.10-3M); b) asam asetat; c) etanol 80%; d)
aquabidest; e) HCl 0,1 M; f) K3Fe(CN)6 0,0008M/0,1M HCl; g) FeCl3
0,1M/0,1M HCl; h) sampel propolis (propolis 1, propolis 2, propolis 3,
commit to user I. Cara Kerja
1. Menentukan standar CAPE (284,31).
2. Membagi sampel propolis menjadi enam kelompok yaitu: propolis 1
(P1), propolis 2 (P2), propolis 3 (P3), propolis 4 (P6), propolis 5 (P5) dan
propolis 6 (P6).
3. Masing-masing propolis diambil 10 µL lalu diencerkan dengan etanol
80% menjadi 10 mL. Selanjutnya larutan diambil 100 µL dan
ditambahkan 400 µL K3Fe(CN)6 0,0008M/0,1M HCl dan 400 µ L FeCl3
0,1M/0,1M HCl setelah itu dikocok dan tunggu selama 7 menit
kemudian diamati absorbansi warna pada UV Vis spektrofotometer
dengan panjang gelombang 700 nm.
4. Ulangi langkah ke 3 sebanyak lima kali untuk tiap sampel propolis.
5. Nilai rata-rata kadar CAPE tiap sampel propolis kemudian dihitung
dengan menggunakan persamaan regresi linear yang diperoleh dari kurva
kalibrasi CAPE standar.
6. Kadar CAPE antara propolis 1 (P1), propolis 2 (P2), propolis 3 (P3),
propolis 4 (P6), propolis 5 (P5) dan propolis 6 (P6) kemudian
commit to user J. Teknik Analisis Data
Data yang diperoleh akan diuji menggunakan uji statistik One-Way
Analysis of Variance (ANOVA). Jika terdapat perbedaan yang bermakna,
maka dilanjutkan dengan uji Post Hoc Multiple Comparisons. Derajat
kemaknaan yang digunakan adalah p < 0,001. Jika ternyata data yang
diperoleh tidak memenuhi syarat uji statistik parametrik One-Way ANOVA,
maka akan digunakan uji statistik non parametrik yaitu Kruskal Wallis
(Dahlan, 2007). Untuk memudahkan analisis data tersebut digunakan
program komputer Statistical Product and Service Solution (SPSS) 17.0 for
commit to user BAB IV
HASIL PENELITIAN
A. Penentuan Konsentrasi Standar CAPE
Penelitian mengenai perbedaan kadar CAPE pada propolis di pasaran
Wilayah Surakarta ini dilakukan pada bulan Mei 2012. Penelitian ini
dilakukan dengan menggunakan 6 sampel propolis yang beredar di berbagai
Wilayah di Surakarta. Untuk dapat menentukan kadar CAPE pada sampel
propolis, maka dilakukan penentuan kadar konsentrasi CAPE standar terlebih
dahulu.
Analisis kandungan CAPE pada masing-masing sampel propolis yang
digunakan dalam penelitian ini dilakukan dengan menggunakan larutan
standar CAPE dengan konsentrasi 0.0, 2.5, 5.0, 7.5, 10.0, 12.5 µL/ml. Untuk
melakukan analisis CAPE, terlebih dahulu dilakukan pengukuran nilai
absorbansi pada larutan standar yang akan digunakan sebagai pembanding
dalam penelitian. Pengukuran absorbansi dilakukan dengan menggunakan
UV Vis spektrofotometer dengan panjang gelombang 700 nm (Tabel 1).
Warna yang dihasilkan dari larutan standar CAPE adalah hijau kebiruan. Dari
hasil pengukuran nilai absorbansi CAPE standar maka didapatkan nilai
commit to user
Tabel 4.1. Pengukuran Absorbansi Larutan Standar CAPE pada UV Vis Spektrofotometer Panjang Gelombang 700 nm.
Konsentrasi (µ g/ml) Absorbansi
0
Gambar 4.1. Kurva Kalibrasi CAPE Standar dalam Reagen Prussian Blue
pada UV Vis Spektrofotometer Panjang Gelombang 700 nm.
Berdasarkan Gambar 5 dapat dilihat bahwa kurva kalibrasi dengan
persamaan regresi untuk absorbansi CAPE sebesar y = 0,019x – 0,0073.
Larutan standar senyawa CAPE diperoleh hubungan yang linier antara nilai
commit to user
absorbansi dengan nilai konsentrasi pada pengukuran yang ditunjukkan
dengan niai koefisien korelasi sebesar 0,996. Nilai (R) yang mendekati 1
menunjukkan bahwa persamaan regresi tersebut adalah linier.
B. Penentuan Konsentrasi CAPE Pada Sampel Propolis
Persamaan kurva kalibrasi CAPE standar dapat digunakan sebagai
pembanding untuk menentukan kadar senyawa CAPE pada ekstrak sampel.
Pada penelitian ini kadar kandungan CAPE total ditentukan berdasarkan
metode UV Vis spektrofotometri prussian blue, dimana setelah ekstrak
sampel direaksikan dengan K3Fe(CN)6 dan FeCl3 kemudian diencerkan
dengan etanol 80% didapatkan larutan ekstrak sampel bewarna kuning.
Setelah didiamkan selama 7 menit kemudian diukur absorbansi larutan pada
spektrofotometer UV dengan panjang gelombang 700 nm. Dari hasil
pengukuran maka didapatkan rata-rata konsentrasi senyawa CAPE pada
sampel propolis di pasaran Wilayah Surakarta sebagai berikut:
Tabel 4.2. Rata-Rata Konsentrasi CAPE pada Sampel Propolis.
Propolis Rata-rata konsentrasi CAPE (µg/ml)
commit to user C. Uji Normalitas
Setelah diketahui konsentrasi CAPE pada sampel propolis, maka
dilakukan uji normalitas untuk mengetahui distribusi sampel yang digunakan.
Dari hasil uji normalitas maka didapatkan hasil sebagai berikut:
Tabel 4.3. Hasil Uji Normalitas Sampel Propolis.
Produk
Uji normalitas yang digunakan adalah uji Shapiro-Wilk dimana
didapatkan nilai p > 0,05. Dari uji normalitas ini, maka disimpulkan bahwa
distribusi sampel propolis yang digunakan dalam penelitian ini adalah
normal.
D. Uji Varians Data
Setelah dilakukan uji normalitas, maka juga perlu dilakukan uji
varians data untuk menilai varian data pada penelitian ini apakah sudah sama
ataukah belum. Dari hasil uji varian data maka didapatkan hasil sebagai
commit to user
Tabel 4.4. Hasil Uji Varians Data Sampel Propolis.
Levene Statistic df1 df2 Sig.
2.023 5 24 0.112
Hasil uji varians data menunjukkan bahwa nilai p > 0,05 sehingga
dapat disimpulkan bahwa varian data dalam penelitian adalah sama.
E. Analisis Data One-Way Anova
Setelah diketahui bahwa distribusi sampel propolis dalam penelitian
ini normal dan varians datanya sama, maka dapat dilanjutkan analisis data
dengan menggunakan One-Way Anova. Analisis data One-Way Anova maka
didapatkan hasil:
Tabel 4.5. Hasil Analisis One-Way Anova Sampel Propolis.
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Between
Groups
154.927 5 30.985 4023.527 0.000
Within
Groups
0.185 24 0.008
Total 155.111 29
Analisis data One-Way Anova menunjukkan bahwa nilai p < 0,001
yang menandakan bahwa terdapat perbedaan bermakna pada paling tidak dua
commit to user
F. Uji Post Hoc
Dari analisis data menggunakan One-Way Anova, maka diketahui
terdapat perbedaan bermakna pada kelompok data dalam pengukuran kadar
CAPE sampel propolis. Untuk mengetahui pada kelompok mana sajakah
terdapat perbedaan yang bermakna tersebut maka perlu dilakukan uji Post
Hoc (Lampiran 8). Setelah dilakukan uji Post Hoc didapatkan nilai p < 0,05
dan interval kepercayaan 95% tidak tercakup angka 0. Hasil uji Post Hoc ini
menunjukkan bahwa terdapat perbedaan kadar CAPE yang bermakna di
commit to user BAB V
PEMBAHASAN
Penelitian mengenai perbedaan kadar CAPE pada propolis di pasaran
Wilayah Surakarta ini, dilakukan dengan menggunakan 6 sampel propolis yang
beredar di berbagai Wilayah Surakarta. Hasil dari penelitian ini adalah bahwa
didapatkan perbedaan kadar CAPE yang bermakna pada semua kelompok sampel
propolis yang digunakan. Berdasarkan penelitian ini dapat disimpulkan bahwa
terdapat perbedaan kadar CAPE pada propolis di pasaran Wilayah Surakarta.
Perbedaan kadar CAPE pada propolis di pasaran Wilayah Surakarta ini
disebabkan karena adanya perbedaan dalam hal letak geografis, jenis tumbuhan,
waktu pengambilan, iklim dan jenis lebah yang terlibat dalam proses produksi
propolis. Perbedaan letak geografis pada sampel propolis yang digunakan,
ditunjukkan dari asal sampel propolis itu sendiri. Dalam penelitian ini, sampel
propolis yang digunakan berasal dari Indonesia, Inggris, New Zealand, Australia
dan Brazil. Letak Geografis dapat mempengaruhi komposisi bahan-bahan dasar
penyusun propolis seperti jenis tumbuhan dan jenis lebah. Bahan-bahan penyusun
propolis terdiri dari resin berbagai tumbuhan sehingga jenis tumbuhan yang
berbeda juga dapat mempengaruhi komposisi propolis. Jenis lebah mempengaruhi
komposisi saliva dan enzim penyusun propolis, sehingga secara tidak langsung
juga mempengaruhi komposisi penyusun propolis. Letak Geografis yang berbeda
juga mempengaruhi iklim daerah produksi propolis. Iklim yang beragam berarti
commit to user
propolis yang beragam pula. Waktu pengambilan propolis yang berbeda juga
dapat mempengaruhi hasil akhir produk propolis.
Penelitian ini sesuai dengan penelitian Bankova (2005) yang menyatakan
bahwa propolis tersusun atas berbagai macam senyawa kimiawi yang beragam
dan bergantung pada flora lokal tempat dimana propolis diproduksi. Sehingga,
secara tidak langsung letak geografis juga mempengaruhi komposisi penyusun
propolis. Juga dalam penelitian ini dipaparkan bahwa diperlukan adanya
standarisasi senyawa penyusun propolis sehingga dapat dilakukan kontrol kualitas
produksi propolis.
Dengan adanya penelitian mengenai perbedaan kadar CAPE pada propolis
di pasaran Wilayah Surakarta ini, dapat memberikan gambaran pada masyarakat
mengenai begitu kompleksnya propolis ditinjau dari segi bahan penyusun dan
komponen kimiawinya. Selain itu masyarakat juga dapat mengetahui bahwa
keberagaman bahan penyusun propolis dapat mempengaruhi komposisi kimia
penyusun propolis dimana dengan adanya perbedaan komposisi senyawa kimia
pada propolis, maka akan memberikan hasil akhir produk propolis yang beragam
pula. Oleh karena itu, penelitian ini dapat dijadikan sebagai bahan pertimbangan
bagi masyarakat dalam memilih produk propolis sehingga dapat diperoleh
manfaat yang maksimal dari propolis.
Penelitian ini masih memiliki berbagai kekurangan antara lain populasi
penelitian yang sempit. Selain itu kurang banyaknya sampel penelitian yang
commit to user
begitu banyaknya zat aktif penyusun propolis maka kekurangan lain dari
commit to user
29
BAB VI
SIMPULAN DAN SARAN
A. Simpulan
Terdapat perbedaan yang bermakna dari kadar CAPE pada propolis di
Pasaran Wilayah Surakarta.
B. Saran
1. Bagi penelitian selanjutnya diharapkan dapat dilakukan dalam populasi
yang lebih luas dan jumlah sampel yang lebih banyak.
2. Diharapkan dilakukan pengukuran perbedaan dari kadar senyawa
