Kajian awal kesan ejen Mutasi Etil Metana Sulfonat (EMS) terhadap aktiviti antioksidan dalam kultur In Vitro pada Labisia Pumila Var. Pumila (Kacip Fatimah)

Teks penuh

(1)KAJIAN AWAL KESAN EJEN MUTASI ETIL METANA SULFONAT (EMS) TERHADAP AKTIVITI ANnOKSIDAN DALAM KULTUR in vitro PADA Labisia pumila var. pumila (KAOP FATIMAH). RIZENNOR BINn AU. DISERTASI INI DIKEMUKAKAN UNTUK MEMENUHI SEBAHAGIAN DARIPADA SYARAT MEMPEROLEHI DAZAH SARlANA MUDA SAINS DENGAN KEPUJIAN. PROGRAM BIOTEKNOLOGI FAKULTI SAINS DAN SUMBER ALAM UNIVERSm MALAYSIA SABAH. 2014.

(2) .-. PUMsb:~] UNIVERSITI MALAYSIA SABAH BORANG PENGESAHAN STAruS TESIS. SAYA:. ~r2t:.ij"tr~.g I Nt \ (HURUF BESAR). .... A~,. _-.. SESI PENGAllAN: 'lOll - :l..c>l't. Mengaku membenarlcan tesis ·(LPSMJSarjanalDolctcr Falsafah) ini disimpan di Perpustakaan Universiti Malaysia Sabah dengan. syam-. syarat Iccgunaan sepcrti berikut:1.. Tesis adalah hakmilik Univcrsiti Malaysia Sabah:. 2. 3.. Perpustalcaan Univcrsiti Malaysia Sabah dibenariWt membuat salinan Wltuic rujuan pengajian sahajL Perpustalcaan dillenamm membuat salinan ini sebagai bahan pertukaran antara institusi pengajian tinggi. Slla tandakan ( I ). 4.. I··. rem. '--_--'I. SULIT. '--_---'I. TERHAD. (Mengandungi maklumat yang berdarjah keselamatan atau kepentingan Malaysia sepCrti yang . termakrub di AKTA RAHSIA RASMI 1972) • (MenganGungi mBklumal TERHAD yang telah di!entukan oleh organisasilbadan di mana Penyelidikan dijalankan) .. '--_--'\l;DAK TERHAD Olsahkan oleh:. NURULAIN BINTllSMAll. ~. LIBRARIAN. (1'~R1Vm~\IU~ALAYSIA SABAH. ". !?A.. MIS'S \-tJ\F T I NI f (61 ,., ~f IbAW(. M1 .. ~. Tarikil: •. Catatan :-. / -;J ... ". NAMA PENYEUA. I. 2-0 \. Lf. Tanlch:. ·l.S /O"lrl. /'--t. \'-!-. • Potong yang tidak berlcenaan.. -Jika tcsis ini SUUT atau TERHAD. sila lampirkan sural daripada pihak berkuasalorganisasi berkenaan dengan menyalakan sekali scbIIb dci tempoh t~~ ini perlu dikc:laskan tc:bagai SUUT dan TERHAD. ~~is dimaksudkan sebagai tesis bag! Ijazah Doktor Falsafah dan Sal]ana Sccara penyelidilcan lItau disertai bagi pmgajian secara kcrja IcursllS dan lapor1ln Projek Sarjana Muda (LPSM). •• PERPUSTAKAAN UMS. 111111111111111111111111 *1000358166*.

(3) PENGAKUAN. Saya akui karya ini adalah hasil kerja saya sendiri kecuali nukilan dan ringkasan yang setiap satunya telah saya jelaskan sumbernya.. RIZENNOR BINTI ALI B511110010 26 JUN 2014.

(4) PENGESAHAN. DIPERAKUKAN OlEH. Tandatangan. 1. PENYEUA. OK HARTINIE BINTI MARBAWI. ii.

(5) PENGHARGAAN. Dengan nama Allah s.w.t yang Maha Pemurah lagi Maha Penyayang. Bersyukur saya ke had rat ilahi atas keizinan dan kekuatan yang diberikan olehNya, dapatlah saya menyiapkan projek tahun akhir ini di Universiti Malaysia Sabah.. Sekalung penghargaan disusuli ribuan terima kasih yang tidak terbalas ditujukan khas buat penyelia projek, Ok Hartinie binti Marbawie yang banyak memberi bimbingan, pembetulan atas kesilapan dan bantuan sepanjang projek ini dijalankan. Ucapan yang tidak terhingga ditujukan kepada pensyarah-pensyarah yang telah banyak mencurahkan ilmu terutamanya Dr. Jualang @Azlan bin Gansau dan Dr. Chong Kim Phin. Segala nasi hat dan ilmu yang mereka berikan akan saya manfaatkan sampai bila-bila. Jutaan terima kasih juga buat ibubapa dan keluarga yang tercinta yang sentiasa menghulurkan bantuan dari segi kewangan dan juga dorongan motivasi yang memblna. Tidak lupa juga ditujukan kepada rakan-rakan seperjuangan yang telah bersusah payah membantu dan memberikan kritikan-kritikan yang membina khasnya buat Norzakiah binti Zaid, Nickholas Jr. Keer, Jocelyn Joachim, Dzulyana binti Idhamsah, Asnah binti Palesangi, Adibah binti Jalaluddln dan Rima binti Rasid. Terima kasih juga kepada pembantu makmal dan kakitangan makmal SST serta ternan-ternan yang tertibat secara langsung atau secara tidak langsung.. Sekian.. RIZENNOR BINTI AU. BS11110010. iii.

(6) ABSTRAK. li1bisia pumila var. pumila (Myrsinacea) dikenali sebagai Kadp Fatimah di Malaysia adalah herba yang sangat popular kerana mengandungi produk semulajadi yang digunakan untuk tujuan perubatan. Kajian awal ini dijalankan bagi mengkaji kesan rawatan ejen mutasi Etil Metana Sulfonat (EMS) pada aktiviti antioksidan sampel Labisia pumila var. pumila yang dikultur secara in vitro. Beberapa sampel L pumila (LPP 3, LPP 4, LPP 5 dan LPP 7) dipilih dan diekstrak untuk mendapatkan aktiviti antioksidan sampel kawalan walaubagaimanapun, hujung pucuk sampel dikekalkan untuk rawatan EMS. Sampel hujung pucuk L pumila ini dirawat menggunakan ejen mutasi EMS selama 60 minit dengan kepekatan 250mM dan dikultur ke dalam media MS dengan dua kali ganda vitamin selama 2 minggu. Aktiviti memerangkap radikal bebas ditentukan menggunakan asai DPPH. Dalam asai DPPH bagi sampel kawalan dan sampel yang dirawat, kepekatan ekstrak yang berbeza (3.125, 6.25, 12.5, 25, 50 dan 100 ~g/ml) disediakan menggunakan pencairan bersiri dan dicampurkan dengan larutan metanolik DPPH. Nilai ICso diperolehi daripada graf manakala graf pula diplot berdasarkan peratus aktiviti memerangkap radikal (%RSA) melawan 6 kepekatan ekstrak sampel yang berbeza dan dibandingkan dengan asid galik sebagai. piawai antioksidan. Keputusan kajian. menunjukkan sampel 5 mempunyai aktiviti memerangkap radikal bebas yang tertinggl dengan nitai ICso (44.112 ± 5.206), diikuti oleh sampel 7 (44.48771 ± 6.659) dan sampel 3 dengan nitai ICso (49.301 ± 3.688). Manakala, sampel 4 berupaya memerangkap radikal bebas yang terendah (52.883 ± 1.209). liga sa mpel menunjukkan peningkatan aktiviti antioksidan selepas rawatan ejen mutasi EMS, iaitu sampel LPP 5, LPP 7 dan LPP 4 mana kala 1 sampel menunjukkan penurunan aktiviti antioksidan selepas rawatan EMS iaitu sampel LPP 3. Secara kesimpulannya daripada kajian awal ini, ejen mutasi EMS didapati berpotensi dalam meningkatkan kandungan antioksidan semulajadi dalam sampel Labisia pumila var. pumila.. Iv.

(7) ABSTRACT. Labisia pumila var. pumila (Myrsinacea) locally known as Kacip Fatimah in Malaysia is a popular herb that contain of natural product that have been used in medicinal purpose. This research was conducted to study the effects Ethyl Methane Sulfonate (EMS) treatment to the antioxidant activity in Labisia pumila var. pumila in vitro culture. A few samples of L. pumila (LPP 3, LPP 4, LPP 5 dan LPP 7) were chosen and extracted to determine the antioxidant activity of control sample however, shoot tips explants were keep that will be used in EMS treatment These shoot tips of L. pumila were treated using EMS for 60 minutes with 250mM concentration and cultured into MS media with double vitamin for 2 weeks'. Free radical scavenging activity was determined using DPPH assay. In DPPH assay, different extraction concentration (3.125, 6.25, 12.5, 25, 50 dan 100 pg/m/) were prepared using serial dilution and mixed with DPPH methanolic solvent. The value of ICso was calculated based on plotted graph while graph was plotted according to the percentage of radical scavenging activity (%RSA) against 6 different extraction concentrations and compared to the galic acid as antioxidant standard. The results shows sample 5 was the highest of free radical scavenging activity with the ICso value (44.112::t 5.206), followed by sample 7 with ICso value (44.48771 :t 6.659) and sample 3 with ICso value (49.301 :t 3.688). However, the lowest of free radical scavenging activity was sample 4 with ICso value (52.883 ::t 1.209). Three samples shows the increasing of antioxidant activity after mutation agent treatment of EMS which were sample LPP 5, LPP 7 dan LPP 4 whereas, 1 sample shows the decreasing of antioxidant activity after treatment which was sample LPP 3. To condude this preliminary research, EMS treatment resulted to have a potential in enhanCing the natural antioxidant activity in Labisia puml'la var. pumila.. v.

(8) SENARAI KANDUNGAN. MUKASURAT. KANDUNGAN PENGAKUAN PENGESAHAN. ii. PENGHARGAAN. iii. ABSTRAK. iv. ABSTRACT. v. SENARAI KANDUNGAN. vi. SENARAI JADUAl. ix. SENARAI RAJAH. x. SENARAI FOTO. xl. SENARAI LAMPlRAN. xii. BAB 1. PENDAHULUAN. 1. BAB 2. ULASAN LITERATUR. 4. 2.1. Labisia pumila. 4. 2.1.1. Taksonomi Labisia pumila. 5. 2.1.2. Morfologi Labisia pumila. 6. 2.1.3. Kegunaan Labisia pumila. 8. 2.2 Kultur Tisu. 10. 2.2.1. 11. 2.2.2 2.3. 2.4. Kepentingan Kultur Tisu Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan Kultur Tisu. 12. Antioksidan. 13. 2.3.1. Radikal-radikal bebas. 14. 2.3.2. Kepentingan Antioksidan. 15. Kaedah Penentuan Ujian Aktiviti Antioksidan. 16. 2.4.1. Teori Ujian DPPH. 17. 2.4.2. Teori Ujian FRAP. 17 vi.

(9) 2.5. Mutasi. 18. 2.5.1. Jenis-jenis mutasi untuk penambahbaikkan tumbuhan. 19. 2.5.2. Ejen Mutasi pada tumbuhan. 20. 2.5.3. BAB 3. Jenis-jenis Mutasi yang bertaku terhadap tumbuhan. BAHAN DAN KAEDAH. 22. 23. 3.1. Carta A1ir Kajian. 23. 3.2. Sumber Eksplan. 24. 3.3. Penyediaan Media. 25. 3.4. 3.3.1. Penyediaan Stok Media MS. 25. 3.3.2. Penyediaan Media MS. 26. 3.3.3. Pengkulturan Eksplan. 27. 3.3.4. Penyediaan Ekstrak Tumbuhan. 27. Ujian Antioksidan 3.4.1. 3.5. 28. Ujian DPPH. 28. Rawatan Mutasi terhadap tumbuhan. 3.6. BAB 4. 29. 3.5.1 Penyediaan kultur eksplan untuk rawatan mutasi. 29. 3.5.2 Rawatan Ejen Mutasi menggunakan Etil Metan Sulfonat(EMS). 29. 3.5.3 Ujian Antioksidan selepas rawatan mutagen. 30. Pengumpulan Data dan Analisis Statistik. 31. KEPUTUSAN. 32. 4.1. Pengkulturan Sampel. 32. 4.2. Pengekstrakan Sampel. 35. 4.3. Rawatan Mutasi. 38. 4.4. Aktivitl Memerangkap Radikal OPPH. 39. 4.4.1 Aktiviti Memerangkap Radikal DPPH sebelum Rawatan. 40. Ejen Mutasi EMS 4.4.2 Aktiviti Memerangkap Radikal OPPH selepas Rawatan Ejen Mutasi EMS. vii. 42.

(10) PERBINCANGAN. 47. 5.1. Pengekstrakan Sampel. 47. 5.2. Pemilihan Hujung Pucuk dalam Rawatan Ejen Mutasi EMS. 49. 5.3. Rawatan Ejen Mutasi EMS terhadap Sampel. 50. 5.4. Aktiviti Memerangkap Radikal DPPH sebelum dan selepas. 51. BAS 5. Rawatan Ejen Mutasi EMS. BAB 6. KESIMPULAN. 59. RUJUKAN. 61. LAMPIRAN. 71. viii.

(11) SENARAIlADUAL. Muka Surat. No.ladual. 2.1. Taksonomi lobisia pumila. 5. 2.2. Kaedah ujian antioksidan. 18. 2.3. Ejen Mutasi. 24. 3.1. Komponen Stok Media MS. 28. 3.2. Isipadu Stok Larutan MS. 29. 4.1. Hasil pengekstrakan sampel sebelum rawatan EMS. 34. 4.2. Hasil pengekstrakan sampel sebelum rawatan EMS. 35. 4.3. Nilal Ieso piawai asid galik dan sampel kawalan. 42. 4.4. Nilai ICso pada 4 sampel L. pumila. 43. ix.

(12) SENARAI RAJAH. No. Rajah. Muka Surat. 3.1. Carta Alir Kajian. 26. 4.1. Graf Piawai Asid Galik. 37. 4.2. Graf Sampel Kawalan. 38. 4.3. Graf Sampel3 (sebelum rawatan EMS). 38. 4.4. Graf Sampel 4 (sebelum rawatan EMS). 39. 4.5. Graf Sampel 5 (sebelum rawatan EMS). 39. 4.6. Graf Sampel 7(sebelum rawatan EMS). 40. 4.7. Graf Sampel 3 (selepas rawatan EMS). 40. 4.8. Graf Sampel4(selepas rawatan EMS). 41. 4.9. Graf Sampel 5 (selepas rawatan EMS). 41. 5.10 Graf Sampel 7 (selepas rawatan EMS). 42. x.

(13) SENARAI FOTO. Muka Surat. No. Foto. 2.1. Pokok Kacip Fatimah. 3. 2.2 Daun Kacip Fatimah 2.3 Bunga Kacip Fatimah 2.4 Pokok Kacip Fatimah 3.1 Sumber Eksplan L pumila 4.1 10 sampeJ L pumila 4.2 10 sampel L pumila selepas proses subkultur 4.3 Pengekstrakan sampel dan bacaan DPPH 4.4 SampeJ L. pumila selepas rawatan EMS. xi. 4 4 4 24 31 32 33 36.

(14) SENARAI LAMPIRAN. Senarai Lampiran. 1. Jadual bacaan serapan ujian DPPH dan graf i). Piawai Asid Galik. ii). Sampel Kawalan. iii). Sampel 3, 4, 5 dan 7 sebelum rawatan EMS. iv). Sampel 3, 4, 5 dan 7 selepas rawatan EMS. xii.

(15) BABl. PENDAHULUAN. liJbisia pumila atau dalam bahasa Latin dikenali sebagai liJbisia pothonia dan juga biasanya dikenali sebagai sebagai Kacip Fatimah, Selusuh Fatimah, Rumput Siri Fatimah, Akar Fatimah, Pokok Pinggang dan Belangkas Hutan di Malaysia (Nadia et aI., 2012). L. pumila daripada keluarga Myrsinacea adalah merupakan herba yang digunakan secara meluas di Asia limur Selatan untuk merawat pelbagai penyakit (Nadia et aI., 2012) disebabkan dri-ciri terapeutiknya (Mohd et aI., 2011). L pumila mempamerkan ari-ciri antioxldatif disebabkan oleh kehadiran kandungan fitokimia seperti sebatian flavonoid, asid askorbik, beta-karotena, antosianin dan. fenolik (Nadia et aI., 2012) yang. menyumbang kepada ciri-ciri sebagai anti-kanser, anti-kulat dan anti-radang selain daripada ari-dri pro-estrogenousnya (Hawa, 2013). Di Malaysia, tumbuhan herba ini adalah salah satu tumbuhan yang digunakan untuk perubatan tradisional yang sangat popular dan sangat baik untuk kesihatan wanlta (Sanusi et aI., 2012).. Pada hari ini, liJbisia pumila dikenal pasti sebagai salah satu daripada sepuluh herba penting yang perlu dikembangkan untuk tujuan komersial dibawah bidang Ekonoml Utama Negara (Hawa, 2013). liJbisia pumila adalah herba yang popular dan mendapat permintaan yang tinggi sama ada daripada industri farmaseutikal tempatan mahupun antarabangsa (Hawa, 2013). Farmaseutikal industri menggunakan sebatian fitokimia. yang. diasingkan. daripada. menghasilkan produk farmaseutikal.. bahan. tumbuhan. sebagai. sumber. untuk.

(16) L. punila adalah salah satu sumber bahan mentah berkualiti. kepada. fa rmaseutikal industri kerana mengandungi kandungan fitokimia seperti sebatian flavonoid dan fenolik (Hawa, 2013). Bagi memenuhi permintaan tinggl sebatian antioksidan dan fitokimia untuk keperJuan produk fa rmaseutikal , kajian saintifik diperJukan dalam usaha untuk meningkatkan kandungan antioksidan dan juga kandungan fitokimia dalam Labisia pumila.. Penggunaan ubat-ubatan herba semakin berkembang di negara-negara maju walaubagaimanapun, sebahagian besar tumbuhan spesies terutamanya tumbuhan perubatan. termasuk. L.. pumila. adalah. diancam. kepupusan. memandangkan. pengeksploitasian berlebihan ke atas tumbuhan ini (Sidhu, 2010). Tambahan lagi kadar pertumbuhan L pumila dalam habitat semulajadi juga adalah sangat rendah (Mohd Noh. et ai, 2002). Oleh ltu, kaedah in vitro adalah sangat penting untuk penghasilan bahan tanaman untuk mengimbangi tekanan ke atas populasi semulajadi tumbuhan. Kultur sel tumbuhan menyediakan peluang untuk memanipulasi dan meningkatkan pengeluaran produk semulajadi berbanding tumbuh-tumbuhan yang ditanam di hutan atau dipanggil. ex-vitro (Cseke et al, 2006). lisu kultur menunjukkan bahawa setiap tumbuhan yang dikultur mempunyai potensi untuk tumbuh semula dan membiak secara berganda sama ada melalui pucuk, akar, batang dan daun (Bonga et ai, 1992).. Kaedah kultur tisu juga dapat menjana perubahan mutasi pada tumbuhtumbuhan selain digunakan untuk regenerasi semula tumbuh-tumbuhan pada media tiruan. Jumlah variasi genetik yang datang dari kultur tisu didapati adalah seclerhana dan terkawal (lakshmanan, 2006). Mutasi teraruh mempunyai potensi yang besar dalam penambahbaikkan untuk genetik tanaman (Mahandjiev et ai, 2001). Kandungan antioksidan dan sebatian fitokimia dalam tumbuhan dapat ditingkatkan menggunakan kaedah rawatan mutasi dalam pada masa yang sama juga meningkatkan kualiti bahan mentah tumbuhan yang akan digunakan untuk penghasilan produk untuk pasaran komersial.. 2.

(17) Rawatan mutasi dilakukan di dalam kultur tisu bagi memastikan pertumbuhan kultur tisu adalah optimum disebabkan persekitaran kultur in vitro adalah terkawal. Kultur tisu dapat menghasilkan tumbuhan yang sihat, bebas penyakit, seragam dalam hasil bentuk dan hasil pengeluaran tumbuhan (Razdan, 2003) yang diperlukan semasa rawatan mutasi. Dalam kajian ini, kandungan antioksidan sebelum dan selepas rawatan mutasi terhadap LDbisia pumila var. pumila diuji menggunakan teknologi tisu kultur. Walaubagaimanapun, setakat inl masih belum terdapat hasil kajian yang ditulis berkaitan mutasi pada L. pumila dapat meningkatkan kandungan antioksidan pada tumbuhan ini. Justeru itu, kajian ini dilakukan. dalam usaha untuk meningkatkan kandungan dan. sumber. ini. antioksidan. tumbuhan. bagi. memenuhi. permintaan. pasaran. serta. memaksimakan lagi kualiti L. pumila sebagai tumbuhan perubatan. Objektif kajian yang ingin dicapai adalah;. 1. Untuk mengkaji kesan ejen mutasi EMS ke atas kandungan antioksidan dalam kultur in vitro LDbisia pumila var. pumila.. 3.

(18) BAB2. ULASAN UTERATUR. 1.1. Lilbisia pumila. Kacip Fatimah atau nama saintifiknya ldbisia pumlla kebiasaannya boleh ditemul di hutan semulajadi tropika (Md Ariff et al, 2013). Tumbuhan ini dikenalpasti di Malaysia hadir dalam 4 varieti yang berbeza namun hanya tiga sahaja yang popular digunakan oleh penduduk tempatan iaitu ldbisia pumi/a var. pumlla, ldbisia pumila var. a/ala dan. ldbisia pumi/a var. lanceolata (Stone, 1988). Ketiga-tiga jenis ubisia pumi/a ini boleh dibezakan melalui dri-ciri fizikal dan biologikalnya (Wiart et aI., 2006).. Tumbuhan ini banyak didapati di kawasan tanah pamah dan berbukit pada ketinggian 150 m di Semenanjung Malaysia, Sumatra, Jawa dan Borneo (FRIM, 1997). Labisia pumlla ialah sejenis tumbuhan yang hidup subur di tempat teduh. Pancaran cahaya matahari di kawasan terbuka atau separa teduh boleh mendatangkan bahaya semasa penubuhan dan pertumbuhannya. Ia adalah sejenis herba yang agak lambat membesar (Jabatan Perhutanan Negerl Terengganu).. Pada kebiasaanya, L pumi/a boleh dibiakkan secara biji benih di tapak semaian di bawah kelembapan yang tinggl dan teduh (Jabatan Perhutanan Negeri Terengganu). Terdapat pelbagai kaedah untuk pembiakan tumbuhan inl termasuldah melalui biji benih, keratan batang, daun dan pada bahagian petiol. Namun begitu, pembiakan spesies daripada biji benih adalah sangat rendah berbanding keratan (Rozihawati et al, 2005).. 4.

(19) Segmen kultur seperti batang, akar, daun atau sel menyediakan sistem regeneras\ untuk menghasilkan tumbuhan baru selain daripada mengkaji pembezaan dan motfogenesis tumbuhan (Ikamayasari, 2011).. 2.1.1 Taksonomi Labisia pumila Labisia pumila atau dikenali sebaga\ Kacip Fatimah berasal daripada family Myrsinaceae. Jadual 2.1 di bawah menunjukkan ringkasan taksonomi pokok Labisia pumila (Jabatan Perhutanan Negeri Terengganu, 2011).. Jadual 2.1 Taksonomi Labisia pumila Domain. Eukaryot. Kingdom. Plantae. Subkingdom. Viridaeplantae. Subfilum. Euphyllophyrtina. Kelas. Radiotopses. Infrafilum. Magnoliopsida. Subkelas. Dilleniidae. Superorder. Primulanae. Order. Myrsinales. Famili. Myrsinaceae. Genus. labisia. Spesifik. pumila. Nama botani. Labisia pumi/a. 5.

(20) 2.1.2. Morfologi Labisia pumila. Labisia pumila mempunyal akar utama yang keras dan berkayu. Herba inl mempunyai. akar utama yang ditumbuhi akar-akar rerambut halus disekitarnya. Batang tumbuhan ini selalunya pad a ketinggian 2 hingga 12 em seperti tidak kelihatan dan ditumbuhi oleh daun-daun yang menutupi batangnya. (Foto 2.1) L. pumila mempunyai daun antara 4 hingga 12 helai yang berbentuk bujur, panjang sekitar 5 hingga 35 em, lebarnya ialah 2 hingga 8 em dan berwarna hijau eerah (Nurha'tati et aI., 1993). Namun terdapat juga sesetengah spesies yang berdaun hijau gelap dan berwarna merah hati kerana dipengaruhl oleh jumlah dedahan matahari yang rendah akibat terlindung oleh silara pokok besar yang padat (Foto 2.2) (FRIM, 1997). Ia juga mempunyai beberapa daun yang tumbuh dan mengarah ke atas. Daun Ini mempunyai sedikit bau dan rasa (Jabatan Biologl UPSI, 2011).. Labisia pumila adalah herba keeil dan renek. Herba Inl juga mempunyai bunga. yang sangat keeil, biasanya berwarna putih atau merah jambu. (Foto 2.3) Bunga ini mempunyai jarak 6-30 em yang terdlrl darlpada sepal, kelopak dan stamen. (Foto 2.4(a» Ia juga mempunyai buah kira-kira 5 em diameter dan sarna ada berwarna merah terang mahupun ungu. (Foto 2.4(b» Ia boleh didapati di Malaysia, Thailand dan Indochina (Jabatan BiolO9I UPSI, 2011).. 6.

(21) Bar:. 1 em. Foto 2.1 Pokok Kacip Fatimah atau nama saintifiknya Labisia pumila var. pumila yang menunjukkan daunnya yang berbentuk bujur dan mempunyai akar yang keras dan berkayu (Salim, 2011).. Bar:. 1 em. Foto 2.2 Daun Kacip Fatimah yang berwarna hijau gelap dan sebahagian berwarna merah hati (Sumber: http://greentropicals.wordpress.com/2012/09/09/kacipfatimah-female-plantl). 7.

(22) Bar:. 1 em. Foto 2.3 Bunga Kacip Fatimah yang bersaiz kecil dan berwarna putih (Salim, 2011).. Bar: Foto 2.4. 1 em Dari kiri, bunga Kacip Fatimah yang terdiri daripada sepal, kelopak dan stamen. Dari kanan, buah Kacip Fatimah yang berwarna merah setelah masak. (Sumber:http://www.asianplant.net/Primulaceae/Labisia_pumila.htm). 8.

(23) 2.1.3. Kegunaan Tradisional Labisia pumila. Kacip Fatimah atau Labisia pumi/a sangat popular dikalangan penduduk tempatan kerana khasiatnya yang sangat baik untuk kesihatan dan boleh digunakan dalam perubatan. Pada masa kini juga, minuman suplemen yang berkhasit yang mengandungi. L. pumi/a telah diperkenalkan ke pasaran Malaysia dan menjadi popular (Jamia, 2006). Tumbuhan herba ini digunakan sebagal ubat tradisional oleh wanita terutamanya di kalangan masyarakat Melayu demi beberapa tl!~,J2n seperti merawat sakit puan seperti membetulkan pusingan haid, mengurangkan kesakitan ketika haid (Burkill, 1966), merangsang pelepasan hormon yang boleh melancarkan darah semasa haid dan mengurangkan gejala menopaus di kalangan wanita (Zaizuhana et aI., 2006).. Oalam tradisi Melayu, air rebusan daripada akar atau seluruh tumbuhan Labisia pumila juga kerap diberikan kepada wanita yang mengandung diantara satu dan dua. bulan sebelum melahirkan kerana dipercayal dapat mempercepatkan kelahiran (Jamia et aI., 2003). Herba Ini juga menggalakkan kesihatan fungsi seksual dan mengecutkan. saluran kelahiran selepas bersalin (Burkill, 1966). Selain mengecutkan saluran kelahiran, Kacip Fatimah juga digunakan untuk mengembalikan semula tenaga selepas bersalin (Zaizuhana et aI., 2006). Oi samping itu, ia juga membantu kaum wanita untuk menyuburkan buah dada, mengetatkan otot fara) (Jamia et aI., 2006), mengekalkan serta meningkatkan stamina (Runi, 2000), untuk mengekalkan kecergasan wanita, mengekalkan bentuk langsing tubuh, membantu dalam mengurangkan gejala-gejala berkaitan dengan ketidakseimbangan hormon dan juga dapat meningkatkan nafsu wanita (Wan et aI., 2000).. Tambahan lagi, la juga digunakan oleh wanita melayu sebagai perubatan untuk merawat disentrl, dysmenorrhoea, gonorea dan sakit sendi (Zaizuhana et aI., 2006). L. pumila juga digunakan untuk merawat cirit-birit, buasir, kembung perut dengan. mernbantu mengusir dan menghalang pembentukan gas (Burkill, 1966). Herba Ini juga dapat melegakan sakit perut bayi dengan menyapukan daun Kacip Fatimah dengan mencampurkan. minyak. kelapa. pada. perut. Terengganu). 9. bayi. (Jabatan. Perhutanan. Negeri.

(24) Menurut kajlan Chua et al. (2012), eks~rvl: Labisia pumia dapat melindungi sel kulit mati daripada fotopenuaan yang disebabkan oleh sinaran UVB.. Ia juga boleh. menambahkan pengeluaran jenis 1 pro-kolagen seterusnya berpotensi besar dalam produk kosmetik sebagai salah satu bahan awet muda. Menurut kajian Pandey et al. (2010), ekstrak L. pumila mengandungl aktivitl sel Th1 dimana memainkan peranan penting sebagai agen terapeutik dalam sistem imuniti tubuh.. 2.2. Kultur Tisu. Kultur tisu tumbuhan secara meluas merujuk kepada penananam in vitro bagl semua bahagian tumbuhan, sama ada sel tunggal, tisu atau organ di bawah keadaan aseptik (Thorpe, 1981). Tumbuhan kultur tisu ialah sains mengenal pertumbuhan sel tumbuhan, t1su atau organ-organ yang diasingkan daripada induk tumbuhan pada media tiruan (Ikamayasari, 2011) di bawah persekitaran yang terkawal (Razdan, 2003). Kultur tisu tumbuhan adalah satu teknik untuk menghasilkan anak pokok yang lengkap secara in. vitro (Bonga et aI., 1992).. Tisu kultur juga merupakan satu teknik penanaman dalam persekitaran yang steril dimana segala nutrlsi dan hormon dibekalkan kepada tumbuhan secukupnya di dalam makmal. Pencahayaan, kelembapan dan suhu dipersekitaran in vitro juga adalah terkawal (Razdan, 2003), Ini dapat memastikan pertumbuhan L. pumila yang optimum dan menyebabkan penghasilan kandungan antioksidan dan fitokimia dalam kultur tisu juga adalah lebih tinggl berbanding yang tumbuh liar.. Kultur tisu juga telah dieksploitasl untuk mewujudkan kepelbagaian genetik untuk memperbaikl tumbuh-tumbuhan tanaman dan juga untuk meningkatkan keadaan kesihatan tumbuhan yang ditanam (Brown et al., 2011). Perkembangan kultur tisu tumbuhan adalah berkait rapat dengan peningkatan dalam teknik protoplast, sel, tisu dan kultur organ diikuti dengan kejayaan yang dicapal dalam regenerasi keseluruhan. 10.

(25) RUJUKAN Adamu, A. K. and A1iyu, H. 2007. Morphological Effects of Sodium Azide on Tamato. (Lycopersicon esculentum MI1/). Science WoridJoumal, 2(4): 9-12. Akin-Idowu, P. E., Ibitoye, D. O. and Ademoyegun, O. T. 2009. Tissue Culture as a Plant Production Technique for Horticultural Crops. African Joumal of Biotechnology , Vol. 8 (16): pp. 3782-3788. Ali, B.T., Amin, B.T. and Behzad, S. 2012. Ethyl Methane Sulphonate (EMS) Induced Mutagenesis in Malaysian Rice (cv. MR219) for lethal Dose Determination.. American Joumal of Plant Sciences, 3: 1661-1665. A1sabri, S. G., Abdulmottaleb, E. Z., Nouri, B. E. and Salah, B. M. 2012. Study of Eight Plants for Antioxidant Activities.. Medidnal. Joumal of Chemical and. Pharmaceutical Research. 4(8): 4028-4031. Aqil,. F., Ahmed, I. and Mehmood, Z. 2006. Antioxidant and Free Radical Scavenging Properties of Twelve Traditional used Indian Medidnal Plants. Turk Joumal. Biology, 30: In-183. Arai,. Y., Watanabe, S., Kimira, M., Shimoi, K., Mochizuki, R. and Kinae, N. 2000. Dietary intakes of Ravonols, Aavones and Isoflavones by Japanese women and the inverse correlation between quercetin intake and plasma LOl cholesterol concentration. Journal of Nutrition, 130: 2243-2250.. Argolo, A. C. C., Santa, A., Pietsch, M. and Coelho, l. C. B. 2004. Antioxidant Activity of leaf extract from Bauhinia mondora. Biosource Technology, 95: 229-233.. Aruna, J., Prakash,. M. and Sunil, K. B. 2010. Studies on Effect of Physical and Chemical. Mutagens. on. Seedling Characters in Brinjal. (Solanum melongena L.).. International Joumal ofCUrrent Research, Vol.3. pp.038-041. Behera, M., Panigrahl, J., Mishra, R. R. and Rath, S. P. 2012. Analysis of EMS induced in. vitro mutants of Asteracantha longifolia L. Nees using RAPD markers. Indian. JoumalofBiotechnology, Vol 11. pp 39-47. 61.

(26) Bhat, T. A., Khan, A. H. and Parveen, S. 2005. Comparative analysis of meiotic abnormalities induced by gamma rays, EMS and MMS in l-1cia taba L 1. Indian. Botanical society, 84: 45-58. Bidabadl, S. 5., Meon, 5., Zakarla, W., Subramaniam, S. and Maziah, M. 2012. Induced Mutations for Enhancing Variability of Banana (Musa spp.) shoot tip cultures using Ethyl Methane Sulphonate (EMS). Australian Journal of Crop Science.. 6(3): 391-401. Bonga, J. M. & Aderkas, P. V. 1992. Forestry Sciences: In l-1tro Culture of Trees. Kluwer Academic Publishers, Dordrecht. Bourgaud, F., Gravot, A., Milesi, S. and Gontier, E. 2001. Production of Plant Secondary Metabolites: a Historical Perspective. Plant Science, 161: 839-851.. Brown, D. C. W. dan Thorpe T. A. 2011. Crop Improvement through Tissue Culture. World Journal of Microbiology & Biotechnology, 11 :409-415. BuOOIl, I. H. 1966. A Dictionary of The economic Products of The Malay Peninsula Vol II. Kuala lumpur: Ministry Of Agriculture and Co-operatives. Olikelu, M., Rownak, A., Souleymane, B. and Shri, M. J. 2010. Induced MutagenesiS in Plants Using Physical and Chemical Agents. Plant Cell CUlture: Essential Methods. John Wiley & Sons. Ltd. Chikelu, M. 2013. Induced Mutations Unleash the Potentials of Plant Genetic Resources for Food and Agriculture. Journal ofAgronomy, 3:200-231. Oloi, H. K., Kim, D. H., Kim, J. W., Ngadiran, 5., Sarmidi, M. R. and Park, C. S. 2010.. Labisia pumila Extracts Protects Skin Cells from Photoaging caused by UVB Irradiation. Journal of Bioscience and Bioengineering. 109: 291-296. Olorage, P., Kadam, D. A., Kadam, A.S., Ghule, Y. A. and Aparadh, V. T. 2013. Free Radical Scavenging (OPPH) and Ferric Reducing Ability (FRAP) of Some Gymnosperm species. International Journal of Research in Botany, ISSN 2319-. 7854. 62.

(27) O1ua, L S., lee, S. Y., Norhanisah, A. and Mohamad, R. S. 2012. Review on Labisia. pumila (Kadp Fatimah): Bioactive Phytochemicals and Skin Collagen synthesis promoting herb. Fttoterapi. Ooi. 10: 1016. Chua, LS., Norliza, A.L, lee, S.Y., lee, C.T., Mohamad, R.S. and Ramlan, A.Z. 2011. Ravonoids and Phenolics Acids from Labisia pumila (Kadp Fatimah). Food. Chemistry. 127 :1186-1192. Cseke, L J., Kirakosyan, A., Kaufman, P. B., Warner, S.L., Duke, J. A. and Briefman, H.. L 2006. Natural Products from Plants. 2nd edition. (Eds.). New York: CRC Press,. pp 37-238. Devasagayam, P. A., Tilak, J. C., Boloor, K. K., Sane, K. S., Ghaskadbi, S. S. and Lele, R. D. 2004. Free Radicals and Antioxidants in human health: Current status and future prospects. J. Ass"oc. Phys.Ind. 52: 794-804. Djeridane, A., Yousfi, M., Nadjemi, B., Boutassouna, D., Stocker, P. and Vidal, N. 2006. Antioxidant activity of some Algerian medidnal plants extracts containing phenolic compounds. Food Chem. 97: 654-660. Du, W., Avena-Bustillos, R. J., Breksa III, A. P. and McHugh, T. H. 2012. Effect of UV-B light and different cutting styles on antioxidant enhancement of commercial fresh-cut carrot products. Food Chemistry. 134: 1862-1869. Fazal, H. and Michael, P.F. 2013. O1emically Induced Mutants of Brassica oleracea var.. Botrytis Maintained Stable Resistance to Drought and Salt Stress after Regeneration and Micropropagation. American Journal of Plant Sciences.. 4:498-507. Fresquet, F., Pourageaud, F., Leblais, V., Brandes, R. P., Savineau, J. P. and Marthan, R.. 2006. Britain Journal Pharmacology. 148: 714-1'13. FRIM. 1997. Spesies Tumbuhan Ubatan: labisia pumila. Kuala Lumpur: FRIM.. 63.

(28) Galati, G. and 0' Brien, P. J. 2004. Potential Toxicity of Ravonoids and other Dietary Phenolics: Significance for their Chemoproventive and Anticancer Properties. Free Radical Biology Medical. 32: 4-28. GreenTropical: Kadp Fatimah in http://greentropicals.wordpress.com/2012/09/09/kacipfatimah-female-plantJ. Retrieved 18 December 2013. Gulcin, I. 2005. The Antioxidant and Radical Scavenging Activities of Black Pepper Seeds. International Journal of Food Science Nutrition. 56: 491-499. Gulcin, I.,. Sa4 I.. G., Beydemir, S., 8master, M. &. Kulfrevioglu, O. I. 2004. Comparison. of antioxidant activity of dove (Eugenia caryophylata Thunb) buds and lavender (lavandula stoechs L). Food Chem. 87: 393-400. Harborne, J. B. 1998. Phytochemical Methods a Guide to Modem Techniques of Plant Analysis. London, New York: Chapman and Hall. Hawa, Z. E. 2013. Efficacy of Kacip Fatimah is not a myth, says award-winning UPM researcher. UPM News Portal. 25 Jun. 2013. Hras, A. R., Hadolin, M., Knez, Z. and Bauman, D. 2000. Comparison of Antioxidative and. Synergistic Effects of Rosemary Extracts with. alpha-tocopherol,. ascorbylpalmitate and Citric Acid in SUnflower Oil. Food Chemistry. 71: 229-. 233. lkamayasari, M. S. 2011. Plant Tissue Culture and Biotechnology. Artide of Melaka Biotechnology Corporation. Melaka, Malaysia. lonela, D. M., Elena, C. dan Gogu, G. 2011. The activity of some oxidoreductases In Hordeum Vulgare L. Plants Treated with Ethyl Methane Sulfonate and. Rosmarinus Offidnalis L. Hydro- Alcoholic Extracts. Biology Molecular Genetics. Jabatan Perhutanan Negeri Terengganu. 2011. Herba Ubatan Negeri Terengganu Edisi. m. Terengganu: Image Precision Press Sdn. Bhd. 64.

(29) lain, S. M. 2010. In vitro Mutagenesis in Banana (Musa spp.) Improvement.. International Joumal of Plant Research. 879: 605-614. lamia, A. J., Houghton, J. P. and Milligan, R. S. 2003. The Oestrogenic and cytotoxic effects of the extracts of Labisia pumila var. alat;} in vitro. Joumal SiJins. Kesihatan. Vol 1. pp: 53-60. lamia, A. l. 2006. Malay Traditional Medicine: An Overview of Scientific and Technological Progress. Tech Monitor (Special Feature: Traditional Medidne: S&T Advancement). pp: 37-49. ligna, P., Darshana, l. and Sumitra, C. 2005. Efficacy of Aqueous and Methanol Extracts of Some Medidnal Plants for Potential Antibacterial Action. Turk. J. Biol 29:. 203-210. Karimi, E. and laafar, H. Z. 2011. HPLC and GC-MS Determination of Bioactive Compounds in Microwave obtained extracts of three varieties of Labisia. pumila 8enth. Molecules, 16: 6791-6805. Karimi, E., Ehsan, 0., Hendra and R., laafar, H. Z. E. 2010. Evaluation of Crocus Sativus. L Stigma Phenolics and Aavonoid Compounds and its Antioxidant Activity. Joumal of Molecules, 15:6244-6256. Karlsson, l. 1997. Antioxidant & Exercise. United States: Human Kinetics. Kawashima, K., Itoh, H. and Chibata, 1. 1979. Synergistic ternary antioxidant compositions comprising tocopherol, partially hydrolyzate of gelatine and organic add. Agrc. Bio. O1em, 43(4): 827-831 Khataml, F. and Ghanati, F. 2011. Effects of UV irradiation on cell viability, anthocyanin and flavonoid contents of callus-cultured Malva neglecta cells. International Conference on Ufe Sdence and Technology IPCBEE. Vol. 3. Koornneef, M. 2002. Cassical Mutagenesis in Higher Plants. Molecular Plant Biology/. Gilmartin, P.M. and Bowler, C Oxford University Press. Netherlands. Vol.1.. 65.

(30) -lilbisia pumi/a (Blume)'· in htlp://www.asianplant.net/Primulaceae/lilbisia-pumI1a.htrn.. Retrieved 18 December 2013. Laxani, S. 2008. Chemical Mutagens on Tetraploid Wheat Department of Genetics and Plant Breeding. College of Agriculture, Dharwad University of Agriculture. Sciences. Dharwad.. U, Y., Guo, C., Yang, 1., Wei, 1., Xu, 1. & Cheng, S. 2006. Evaluation of Antioxidant Properties of Pomegranate peel extract Comparison with Pomegranate pulp. extract. Food Chem. 96: 254-260. Mansor, H., Mohd, A. S., Ahmad, S. and Mahmood, M. 2012. Total antioxidant, polyphenol, phenolic acid and flavonoid content in Rcus deltoidea varieties. Medidnal Plants Research. 6(33): 4776-4784.. Martin, A. J. P., Pippa, J. M., Carlos, B. and Katie, T. 2009. Mutation Discovery for Ovp Improvement Joumal of Experimental Botany. Vol, 60. pp. 2817-2825.. Marxen, K., Vanselow, K. H. and Andreas, R. 2007. Determination of DPPH Radical Oxidation caused by Methanolic Extracts of Some Micro algal species by Unear Regression Analysis of Spectrophotometric Measurements.. Sensors.. 7: 2080-2095. Mashitah, M. Y. 2011. Comparative Evaluation of Total Phenolics and Free Radical Scavenging Activity of aqueous extracts of labisia pumila var. alato from Malaysia and Indonesia International Conference on Biotechnology and. Food Science. 2: 4-8. Md Aliff, F. F., Hashim, S. S., Haja, M. dan Osman, M. 2013. An assessment of genetic relationship among superior accessions of labisia pumila analyzed by amplified fragment length polymorphism (AFLP) markers. Open ScI Reposit Agric.. Mohd, H. I. and Hawa, Z. E. J. 2013. Reduced Photoinhibition under Low Irradiance enhanced KF (LpBenth) Secondary Met, Phenyls Alanine Lyase and Antioxidant activity. Molecular Science. 13 (5): 5290-5306. 66.

(31) Mohd, H. I. and Hawa Z. E. l. 2011. The Relationship of Nitrogen and C/N Ratio with Secondary Metabolites levels and Antioxidant Activities in Three Varieties of Malaysian Kacip Fatimah. Joumal of Molecules. 16: 5514-5526. Mohd Noh, H. l., Mohd lelani, B. & Mohd Akhir, A. H. 2002. Prestosi Pertumbuhan. Empat Variati Kadp Fatimah dl Ladang Semaian. Sungka~. Perak. Proceeding. of Seminar on Medidnal Plants, FRIM, Kepong: 25. Motilal, B., Jogeswar, P., Ramya, R.M. and Shiba, P.R. 2012. Analysis of EMS induced in. vitro mutants of Asteracantha longifolia (L.) Nees using RAPD markers. /ndian Journal of Biotechnology. Vol 11. pp. 39-47. Nadia M. E., Nazrun A. 5., Norazlina M., Isa N. M., Norliza M. and Nirwana S. I. 2012. Review Artide: The Anti-Inflammatory, Phytoestrogenic and Antioxidative Role of labisia pumila in Prevention of Postmenopausal OsteoporOSis.. Advances in PharmacologiCilI Sciences. Vol 2. Nagananda, G. 5., Rajath, 5., Agarwal, D., Ruby Mathew, K. and Sundara Rajan, S.. 2013. Induced Mutation in callus Cell Unes of Daucus Cilrota L. Asian Journal of Plant Sciences, 12(1): 46-50. Narasimhan,S., Shobana, R. & Sathya, T. N. 2006. Antioxidants-Natural rejuvenators that heal. Detoxify and provide nourishment. In: Rakesh, K. S. & Rajesh, A.. (Eds.), Herbal Drugs: a Twenty Rrst Century Prospective, lP Brothers MediCilI Publishers, New Delhi, pp 548-587. Nilesh, P., Nimbalkar, M., Pai, 5., Kolar, F. & Dixit, G. 2010. RP-HPLC Analysis of 6Gingerol and Assesment of Antioxidant Activities in EMS Treated Ginger.. Journal of Phytology. 2(3): 2075-6240. Nor Baizurah, M. H. 2013. Ujian Atokimia dan Antioksidan daripada in vitro Kultur LEbisia. pumila yare pumila. Disertasl Sarjana Sains. Universiti Malaysia Sabah. Nunex, P. X., Silva, S. F., Guedes, R. J. and Almeida, S. 2012. Biological Oxidations and Antioxidant Activity of Natural Products, Phytochemicals as Nutraceuticals: Global Approaches to Their Role in Nutrition and Health.. 67.

(32) Nurtlayati, I., MuzJifah, A. M. and Zhari, I. 1993. Phannacognosical Characterization of L. pothonia. Proceedings of the International Conference on the use of T. medidne and other Natural Product in Health Care. Penang: Trends in T. Medicine Research. USM. Malaysia. Pandey, A., Bani, S., Sangwan, P. and Koul, S. 2010. Selective Th1 Upregulation by Ethyl Acetate fraction of LDbisia pumila. Journal of Eth nopharmacology. 132: 309-315. Pham-Huy, L A., He, H. and Pham-Huy, C. 2008. Free Radicals, Antioxidants in Disease and Health. Intemational Joumal of Biomedical Science, 4 (2): 89-96. Pisoschi, A. M. and Negulescu, G.P. 2011. Methods for Total Antioxidant Activity Determination: A Review. Biochemistry & Analytical Biochemistry. 1:106. Poumorad, B., Hosseinimehr, S. J. &. Shahabimajid, N. 2006. Antioxidant Activity, Phenol and Aavonoid Contents of some Selected Iranian Medicinal Plants. African Journal Biotechnology. 5: 1142-1145. Raaman, N. 2006. Phytochemical Techniques. New India Publishing Agency. Pitam Pura, New Delhi. pp. 197-221. Razdan, M. K. 2003. Introduction to Plant Tissue Culture. 2nd edition. Science Publishers, Inc. USA. pp. 36-37. ROzihawati, Z., Aminah, H. &. Besek Intan Zafina Basok. 2005. Rooting ability of LDbisia pumila (Kadp Fatimah) cuttings. Project Evaluation Meeting. n 2005 FRIM.. Kepong. Runi, S. P. 2000. Studies on Medidnal Plant in Sarawak. In Chang (Eds.), Towards Bridging Sdence and Herbal Indusby Forest Research Institute of Malaysia (FRIM), Kuala Lumpur. pp. 112-119. MyTreesData. 2011. Guide to Diversity. Jabatan Biologi, Fakulti Sains dan Matematik, UPSI. htt+J:/lwww.mytreesdata.lnfo/v2/2011-08-2Q-19-17-58/eplant!viewsubmission/347.html. 68.

(33) Sanusi R. A. M., AB Shukor N. A. and Sulaiman M. R. 2013. Anti-inflammatory Effects of Labisia pumila (blume) F. ViII-Naves. Journal of Aqueous Extract Sains Malaysiana.42(10): 1511-1516. Shahidi, F. and Wanasundara, P. K. 1992. Phenolic Antioxidants. Critical Reviews in Food Science and Nutrition. 32: 67-103. Sharifi-Sirchi, G.R., Baghizadeh, A., Golestani, M. and Saffari, V.R. 2012. The effects of chemical. and physical mutagens on morphological and cytological. characters of barley (Iranian. ev. Nosrat). African Joumal of Biotechnology,. Vol.ll. 16: 3842-3848. Stone, B. C. 1988. Notes on the Genus Labisia Lindl (Myrsinaceae). Malayan Nature Joumal 42: 43-51. Talebi, A. B. dan Shahrokhifar, B. 2012. Ethyl Methane Sulphonate (EMS) Induced Mutagenesis in Malaysian Rice (cv. MR21!lJ for Lethal Dose Determination. American Journal of Plant Sciences. 3: 1661-1665. Thorpe, T. A. 1978. Plant Tissue Culture: Methods and Applications in Agriculture. AcademiCS Press Inc. pp. 1-2. Tim CUshnie, T. P. and Lamb, A. J. 2005. Antimicrobial activity of Flavonoids. International Journal ofAntimicrobial Agents. 26: 343-356. Van., Den-Bulk, R. W., Loffer, H. J. M., Undhout, W. H. and Koomneef, M. 1990. Somadonal variation in tomato: effects of explants source and a comparison. with chemical mutagenesiS. Theoretical Applied Genetics. 80: 817-825. Wiart, C. &. Pharm, D. 2006. Medicinal Plants of Asia and the Paofie New York. CRe Press Taylor &. Francis Group, pp 53. Wojdyloa, A., Oszmianski, J. &. Czemerys, R. 2007. Antioxidant activity and phenolic compounds in 32 selected herbs. Food Chemist7y105: 940-949.. 69.

(34) Yamamoto, Y. & Gaynor, R. B. 2001. Therapeutic Potential of Inhibition of the NF-jB pathway in the Treatment of Inflammation and cancer. 717e Joumal of Oinical Investigation. 107: 135-142. Yuan, H.Y., Zhang, Z. 1993. Effect of tree radicals and temperature on sister chromatid exchanges in Hordeum vulgare l. Acta Botanica Sinica. 35: 20-26. Yung, L S. 2002. Kajian atas beberapa sampel the sebagai agen antioksida. Program Kimia Industri Sekolah Sains dan Teknologi. Universiti Malaysia Sabah. Zaizuhana, S., Puteri, J. N. M. B., Noral, Y., Muhammad, H., Rohana, A. B., and Zakiah, I. 2006. The in vivo rodent micronudeus assay of Kadp Fatimah (Labisia pumila) extract. Trop Biomed. 23: 214-219. Zhang, Q. and Ye, M. 2008. Chemical Analysis of the Chinese Herbal Medicine Gan-cao (licorice). Joumal of Chromatography A. 1216: 1954-1969.. 70.

(35)