laporan metabolisme bakteri.docx

(1)

UJI METABOLISME BAKTERI UJI METABOLISME BAKTERI

LAPORAN PRAKTIKUM LAPORAN PRAKTIKUM

Untuk Memenuhi Matakuliah Mikrobiologi Untuk Memenuhi Matakuliah Mikrobiologi Ya

Yang dibina oleh ng dibina oleh Ibu Sitoresmi PrabaningtyasIbu Sitoresmi Prabaningtyas

oleh: Kelompok 1 / Offering  oleh: Kelompok 1 / Offering  In

Inttaan n PPeermrmatataasasarrii !!11""##$$""11%%##&&''%%(()) *o

*oddddy y OkOki i IbIbrarahihimm !1!1"#"#$"$"1%1%#%#%""""%)%) +i,matul Khoiriyyah

+i,matul Khoiriyyah !1"#$"1%#&'-"!1"#$"1%#&'-")) +

+iikkiitta a ..iikky y !!11""##$$""11%%##""0011%%)) +

+iissrriinna a eetti i ++223322M M !!11""##$$""11%%##%%--''11))

The Learning University The Learning University

UNIVERSITAS NEGERI MALANG UNIVERSITAS NEGERI MALANG

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

JURUSAN BIOLOGI JURUSAN BIOLOGI

FEBRUARI 2016 FEBRUARI 2016

(2)

32

32 TOPIK TOPIK : U4i Metabolisme akteri: U4i Metabolisme akteri 2

2 TANGGAL PRAKTIKUMTANGGAL PRAKTIKUM : Selasa5 1% 6ebruari '#1%: Selasa5 1% 6ebruari '#1% 72

72 TUJUANTUJUAN ::

1

122 UnUntutuk mk menenggu4u4i ki kememamamppuauan mn menengghihiddrorolilisisis as ammililumum '

'22 UnUntutuk mk menenggu4u4i kei kemmamamppuauan men mengnghihiddrorolilisisis prs prototeiein2n2 $

$22 UnUntutuk mk menenggu4u4i ki kememamamppuauan mn menengghihiddrorolilisisis ls lememak ak

D.

D. DaDasasar Tr Teeoror

alam kehidupa

alam kehidupan5 n5 mahlumahluk k hidup memerlukhidup memerlukan an energenergi i yang diperoleh dariyang diperoleh dari proses

proses metabolisme2 metabolisme2 Metabolisme Metabolisme ter4adi ter4adi pada pada semua semua mahluk mahluk hidup hidup termasuk termasuk kehidupan mikroba2 Metabolisma didefinisikan sebagai semua reaksi kimia yang kehidupan mikroba2 Metabolisma didefinisikan sebagai semua reaksi kimia yang ter4adi dalam sel hidup2 8ermasuk 4uga eksoenim yang tetap di anggap sebagai ter4adi dalam sel hidup2 8ermasuk 4uga eksoenim yang tetap di anggap sebagai metabolisma5 sebab meskupun reaksi kimia berlangsung di luar sel tetapi enim metabolisma5 sebab meskupun reaksi kimia berlangsung di luar sel tetapi enim disekresikan dari dalam sel2 Sintesis protoplasma dan penggunaan energi yang disekresikan dari dalam sel2 Sintesis protoplasma dan penggunaan energi yang disebu

disebut sebagai 3t sebagai 3nabolinabolisma2 sma2 OksidOksidasi substrat diiriasi substrat diiringi dengan terbngi dengan terbentukentuknyanya energi disebut dengan Katabolisma !rakuni5 '##1)

energi disebut dengan Katabolisma !rakuni5 '##1)

Kegiatan metabolisme meliputi proses perubahan yang dilakukan untuk Kegiatan metabolisme meliputi proses perubahan yang dilakukan untuk sederetan reaksi enim yang berurutan2 Se9ara singkat kegiatan proses ini disebut sederetan reaksi enim yang berurutan2 Se9ara singkat kegiatan proses ini disebut tan

tansfosformarmasi si atat2 2 asasil il kegkegiataiatan n ini ini akaakan n dihdihasilasilkan kan nutnutrien rien sedsederherhana ana sepsepertierti glukosa5 asam lemak berantai pan4ang atau senya;a<senya;a aromatik yang dapat glukosa5 asam lemak berantai pan4ang atau senya;a<senya;a aromatik yang dapat digunakan sebagai bahan untuk proses neosintetik bahan sel2 .eaksi kimia;i yang digunakan sebagai bahan untuk proses neosintetik bahan sel2 .eaksi kimia;i yang membebaskan energi melalui perombakan nutrient disebut reaksi disimilasi atau membebaskan energi melalui perombakan nutrient disebut reaksi disimilasi atau penguraian=

penguraian= 4adi 4adi merupakan merupakan kegiatan kegiatan katabolik katabolik sel2 sel2 Sedangkan Sedangkan reaksi reaksi kimia;ikimia;i yang menggunakan energi untuk sintesis dan fungsi<fungsi sel lainnya disebut yang menggunakan energi untuk sintesis dan fungsi<fungsi sel lainnya disebut reaksi asimilasi atau anabolik2 *adi5 reaksi disimilasi menghasilkan energi5 dan reaksi asimilasi atau anabolik2 *adi5 reaksi disimilasi menghasilkan energi5 dan reaksi asimilasi menggunakan energi2 Menurut arkuni !'##1) bila dalam suatu reaksi asimilasi menggunakan energi2 Menurut arkuni !'##1) bila dalam suatu reaksi menghasilkan energi maka disebut reaksi eksergonik5 dan apabila untuk reaksi menghasilkan energi maka disebut reaksi eksergonik5 dan apabila untuk dapat berlangsungnya suatu reaksi diperlukan energi5 reaksi ini disebut reaksi dapat berlangsungnya suatu reaksi diperlukan energi5 reaksi ini disebut reaksi endergonik2

endergonik2

ila sel merombak ikatan<ikatan kimia;i tertentu selama metabolisme5 ila sel merombak ikatan<ikatan kimia;i tertentu selama metabolisme5 energi yang dilepaskan men4adi tersedia untuk melangsungkan ker4a biologis2 energi yang dilepaskan men4adi tersedia untuk melangsungkan ker4a biologis2 Selama masa hidup sel5 ker4a ini bersifat ekstensif dan beragam2 Mikroorganisme Selama masa hidup sel5 ker4a ini bersifat ekstensif dan beragam2 Mikroorganisme

(3)

hetero

heterotrofik trofik nonfononfotosintosintesik tesik mempememperoleh roleh energenerginya inya dari dari oksidoksidasi asi !peng!pengusiranusiran ele9tron atau atom

ele9tron atau atom hydrogen) senya;a<senya;a anorganik !Peleer5 '##%)2hydrogen) senya;a<senya;a anorganik !Peleer5 '##%)2

>nim sangat di pengaruhi oleh beberapa hal yaitu5 konsentrasi enim5 >nim sangat di pengaruhi oleh beberapa hal yaitu5 konsentrasi enim5 kon

konsensentrastrasi i subsubstrastrat5 t5 p5 p5 suhsuhu5su5setietiap ap enienim m berberfunfungsi gsi optoptimaimal l padpada a p p dandan temperatur tertentu2 Suhu yang sangat rendah dapat menghentikan akti?itas enim temperatur tertentu2 Suhu yang sangat rendah dapat menghentikan akti?itas enim teta

tetapi pi tidtidak ak menmenghaghan9un9urkanrkannynya2 a2 3k3kti?ti?itaitas s enenim im diadiatur tur melmelalualui i ' ' 9ara 9ara yaiyaitu5tu5 pengendalian

pengendalian katalis katalis se9ara se9ara langsung langsung pengendalian pengendalian genetik2 genetik2 Proses Proses metabolismemetabolisme akan menghasilkan hasil metabolisme yang berfungsi menghasilkan sub satuan akan menghasilkan hasil metabolisme yang berfungsi menghasilkan sub satuan makromolekul dari hasil metabolisme yang bergun sebagai penyediaan tahap a;al makromolekul dari hasil metabolisme yang bergun sebagai penyediaan tahap a;al bagi

bagi komponen<komponen komponen<komponen sel sel menghasilkan menghasilkan dan dan menyediakan menyediakan energi energi yangyang dihasilkan dari 38P le;at 3P dengan fosfat2 >nergi ini sangat penting untuk dihasilkan dari 38P le;at 3P dengan fosfat2 >nergi ini sangat penting untuk kegiatan proses lain yang dalam prosesnya hanya bisa berlagsung kalau tersedia kegiatan proses lain yang dalam prosesnya hanya bisa berlagsung kalau tersedia energi !Peleer5 '##%)2

energi !Peleer5 '##%)2 akter

akteri i mempermemperoleh oleh energenergi i melalumelalui i proses Oksidasi<.edproses Oksidasi<.eduksi2 Oksidasiuksi2 Oksidasi ada

adalah lah proproses ses pelpelepasepasan an eleelektroktron n sedsedang ang redreduksuksi i adaadalah lah proproses ses penpenangangkapkapanan ele

elektktroron2 n2 IstIstililah ah okoksisidadasi si didigugunanakakan n didisinsini i ununtutuk k memen9n9akakup up semsemua ua prprososeses penghasilan

penghasilan energi energi yang yang ter4adi ter4adi dalam dalam se se !8a!8arigan5 rigan5 10(()2 10(()2 Karena Karena elektron elektron tidak tidak dapat berada dalam bentuk bebas5 maka setiap reaksi oksidasi selalu diiringi oleh dapat berada dalam bentuk bebas5 maka setiap reaksi oksidasi selalu diiringi oleh re

reakaksi si rereduduksksi2 i2 aasil sil dadari ri rereakaksi si okoksisidadasi si dadapapat t terterbebentntukuknynya a enenerergigi2 2 PaPadada umumnya reaksi oksidasi se9ara biologi dikatalisis oleh enim dehidrogenase2 umumnya reaksi oksidasi se9ara biologi dikatalisis oleh enim dehidrogenase2 >nim tersebut memtransfer elektron dan proton yang dibebaskan kepada aseptor >nim tersebut memtransfer elektron dan proton yang dibebaskan kepada aseptor elektron intermedier seperti +3

elektron intermedier seperti +3@@_{dan +3P}_{dan +3P}@@_{untuk dibentuk men4adi +3}_{untuk dibentuk men4adi +3} dan +3P2 6osforilasi oksidasi ter4adi pada saat elektron yang mengandung dan +3P2 6osforilasi oksidasi ter4adi pada saat elektron yang mengandung energi tinggi tersebut ditranfer ke dalam serangkain transpor elektron sampai energi tinggi tersebut ditranfer ke dalam serangkain transpor elektron sampai akhirnya ditangkap oleh oksigen atau oksidan anorganik lainnya sehingga oksigen akhirnya ditangkap oleh oksigen atau oksidan anorganik lainnya sehingga oksigen akan tereduksi men4adi 

akan tereduksi men4adi ''O !8arigan5 100()2O !8arigan5 100()2

.espirasi didefenisikan sebagai penggunaan serangkaian transfor elektron .espirasi didefenisikan sebagai penggunaan serangkaian transfor elektron untuk mentransfer elektron menu4u aseptor elektron terakhir2 >nergi diperoleh untuk mentransfer elektron menu4u aseptor elektron terakhir2 >nergi diperoleh melalui fosporilasi oksidatif tetapi dalam prosesnya bisa menggunakan oksigen melalui fosporilasi oksidatif tetapi dalam prosesnya bisa menggunakan oksigen sebagai aseptor elektron terakhir !respirasi aerob) atau senya;a anorganik lain sebagai aseptor elektron terakhir !respirasi aerob) atau senya;a anorganik lain !respirasi anaerob)2 Aetak perbedaan antara respirasi aerob dan anaerob adalah !respirasi anaerob)2 Aetak perbedaan antara respirasi aerob dan anaerob adalah

(4)

bah;a

bah;a pada pada respirasi respirasi anaerob anaerob yang yang berperan berperan sebagai sebagai aseptor aseptor elektron elektron terakahir terakahir adalah senya;a anorganik5 bukan oksigen !;id4osaputro5 '##&)2

adalah senya;a anorganik5 bukan oksigen !;id4osaputro5 '##&)2 Komp

Komponen onen hiduhidup yang esensiap yang esensial pada bakteri sama seperti protl pada bakteri sama seperti protoplasmoplasmaa dari semua organisme hidup2 Komponen tersebut terdiri dari karbon5 oksigen5 dari semua organisme hidup2 Komponen tersebut terdiri dari karbon5 oksigen5 hidrogen5 nitrogen5 sulfur dan fosfor dengan beberapa elemen yang 4umlahnya hidrogen5 nitrogen5 sulfur dan fosfor dengan beberapa elemen yang 4umlahnya lebih sedikit2 .ata<rata sebesar (#<(& B dari tubuh bakteri yang tumbuh mungkin lebih sedikit2 .ata<rata sebesar (#<(& B dari tubuh bakteri yang tumbuh mungkin terdiri dari air2 Protein5 karbohidrat5 lipid5 dan ada asam nukleat5 4uga semua terdiri dari air2 Protein5 karbohidrat5 lipid5 dan ada asam nukleat5 4uga semua subtansi yang penting

subtansi yang penting yang disebut enim yang disebut enim !Co!Colk5 10(")2lk5 10(")2

Perombakan lipid atau lemak dia;ali dengan pe9ahnya trigliseride oleh Perombakan lipid atau lemak dia;ali dengan pe9ahnya trigliseride oleh penambahan

penambahan air air sehingga sehingga terbentuk terbentuk gliserol gliserol dan dan asam asam lemak lemak dengan dengan bantuanbantuan enim<enim lipase2

enim<enim lipase2 3da lebih 3da lebih banyak hasil energbanyak hasil energi per gram lemak i per gram lemak daripada per daripada per gram karbohidrat2 +amun5 relatif hanya beberapa spesies mikroba yang efektif gram karbohidrat2 +amun5 relatif hanya beberapa spesies mikroba yang efektif dalam meromb

dalam merombak lipid5 baik ak lipid5 baik tipe yang sederhana mauputipe yang sederhana maupun n yang rumit5 antara lainyang rumit5 antara lain karena terbatasnya daya larut lipid !Pel9ar5 '##&)2

karena terbatasnya daya larut lipid !Pel9ar5 '##&)2 Untuk keperlua

Untuk keperluan n identidentifikasi dan ifikasi dan determdeterminasi suatu inasi suatu biakan murni biakan murni baktebakteri5ri5 sel

selaiain n didipepela4la4ari ari sifsifatat<si<sifafat t momorforfolologiginynya a peperlu rlu pupula la didipepelala4ar4ari i sisifatfat<si<sifafatt biokimianya

biokimianya dan dan fa9tor<faktor fa9tor<faktor yang yang mempengaruhi mempengaruhi pertumbuhannya2 pertumbuhannya2 3da3da beberapa

beberapa 9ara 9ara pengu4ian pengu4ian sifat sifat biokimia5 biokimia5 diantaranya diantaranya ialah ialah u4i u4i adanya adanya hidrolisishidrolisis amilum5 u4i adanya hidrolisis lemak5 dan u4i adanya hidrolisis protein2 !astuti5 amilum5 u4i adanya hidrolisis lemak5 dan u4i adanya hidrolisis protein2 !astuti5 '#1')2

(5)

E.

E. A!A!a" a" #a#a$ B$ Ba%a%a$a$ 3

3llaatt aahhaann

•

• *arum Inokulasi lurus*arum Inokulasi lurus •

• PipetPipet •

• 8abung reaksi8abung reaksi •

• 7a;an petri7a;an petri •

• In9ubator In9ubator •

• Delas ukur 1# mlDelas ukur 1# ml •

• Aampu spiritusAampu spiritus •

• eaker glass &## mleaker glass &## ml •

• .ak tabung reaksi.ak tabung reaksi

•

• iakan murni koloni 1iakan murni koloni 1 •

• iakan murni koloni 'iakan murni koloni ' •

• Medium amilum agar Medium amilum agar •

• Medium skim milk agar Medium skim milk agar •

• Medium +3 yang mengandung 1B lemaMedium +3 yang mengandung 1B lema men

mentegtega a atau minyaatau minyak k aitaitun un dan dan neuneutr tr red

red •

• Medium nutrient 9air Medium nutrient 9air •

• AisolAisol •

• Sabun 9u9iSabun 9u9i •

• AapAap •

• Aarutan iodiumAarutan iodium •

• 3l9ohol -#B3l9ohol -#B F

F.. LaLa$&$&'a'a% K% Kerer(a(a 1

122 PeemP mbbuuaattaan n MMeeddiiuumm ' koloni E ' 9a;an E % kelompok F '" 9a;an ' koloni E ' 9a;an E % kelompok F '" 9a;an

F '" 9a;an E 1# ml F '"# ml F $## ml F '" 9a;an E 1# ml F '"# ml F $## ml aGuades aGuades • • Medium +3FMedium +3F 300 300_ml_ml 1000

1000_ml_ml E '# gram F % gram E '# gram F % gram

•

• Mediun SM3 FMediun SM3 F

300 300_ml_ml 1000

1000_ml_ml E 1## gram F $# gram susu skim E 1## gram F $# gram susu skim

•

• Medium +3A FMedium +3A F

300 300_ml_ml 1000

1000_ml_ml E 1# ml F $ ml minyak aitun E 1# ml F $ ml minyak aitun

•

• Medium 33 FMedium 33 F

300 300_ml_ml 1000

1000_ml_ml E ' gram F #5% gram amilum E ' gram F #5% gram amilum



(6)

i simpan medium dalam inkubator selama 1E'" 4am i simpan medium dalam inkubator selama 1E'" 4am itunggu hingga tekanan turun men4adi #

itunggu hingga tekanan turun men4adi # untuk meluruskan katup pengaman dan dibuka tutup otoklafuntuk meluruskan katup pengaman dan dibuka tutup otoklaf untuk mengeluarkan medium steril

untuk mengeluarkan medium steril i4aga skala 4arum pada 1& lbs H1& menit lalu

i4aga skala 4arum pada 1& lbs H1& menit lalu kompor dimatikankompor dimatikan inyalakan kompor5 hingg

inyalakan kompor5 hingga terdengar bunyi desisan dan a terdengar bunyi desisan dan katup segera ditutupkatup segera ditutup ibuka pengatur katup pengaman 5 agar udara yang ada di dalam autoklaf keluar ibuka pengatur katup pengaman 5 agar udara yang ada di dalam autoklaf keluar iputar serentak se9ara bersama<sama baut

iputar serentak se9ara bersama<sama baut<baut yang berla;anan letaknya agar tu<baut yang berla;anan letaknya agar tutup autoklaf tup autoklaf beradaberada pada posisi yang tepat

pada posisi yang tepat

Otoklaf ditutup dengan rapat5 dipastikan baut<baut yang ada dibagian atas tutup sudah terpasang Otoklaf ditutup dengan rapat5 dipastikan baut<baut yang ada dibagian atas tutup sudah terpasang

ipasang tubu

ipasang tubuh sterilisator h sterilisator 9o9ok 9o9ok dengan tempdengan tempatnya5 atnya5 yang terletak yang terletak pada tutuppada tutup

imasukkan pan9i dan media yang akan disterilisasi ke dalam pan9i yang disusun dengan rapi imasukkan pan9i dan media yang akan disterilisasi ke dalam pan9i yang disusun dengan rapi

Otoklaf diisi air hingga di atas

Otoklaf diisi air hingga di atas sedikit angsang H1 9msedikit angsang H1 9m imasukan ke dalam autoklaf untuk disterilisasi imasukan ke dalam autoklaf untuk disterilisasi imasukan kedalam tabung reaksi masing<masing sebanyak &

imasukan kedalam tabung reaksi masing<masing sebanyak & ml dan mulut tabung ml dan mulut tabung disumbat dengandisumbat dengan kapas

kapas

ipanaskan hingga homogen ipanaskan hingga homogen ipanaskan diatas hotplate yang diikuti

ipanaskan diatas hotplate yang diikuti oleh pengadukan dengan menggunakan magneti9 stireoleh pengadukan dengan menggunakan magneti9 stire imasukan $# gram susu skim5 % gram +35 aGuades

imasukan $# gram susu skim5 % gram +35 aGuades $## ml ke dalam gelas beaker &## ml$## ml ke dalam gelas beaker &## ml isiapkan $## ml aGuades

isiapkan $## ml aGuades

ahan yang digunakan ditimbang menggunakan nera9a analitik !$# gram susu

ahan yang digunakan ditimbang menggunakan nera9a analitik !$# gram susu skim5 % gram +skim5 % gram +3535 aGuades $## ml)

aGuades $## ml)



(7)

ipasang tubu

kapas

ipanaskan diatas hotplate yang diikuti oleh pengadukan dengan menggunakan magneti9 stireoleh pengadukan dengan menggunakan magneti9 stire imasukan $ ml minyak aitun5 % gram +35 aGuades $## ml

imasukan $ ml minyak aitun5 % gram +35 aGuades $## ml ke dalam gelas beaker &## mlke dalam gelas beaker &## ml isiapkan $## ml aGuades

ahan yang digunakan ditimbang menggunakan nera9a analitik !$ ml

ahan yang digunakan ditimbang menggunakan nera9a analitik !$ ml minyak aitun5 % gram +35minyak aitun5 % gram +35 aGuades $## ml)

aGuades $## ml)



(8)

ipasang tubu

kapas

ipanaskan diatas hotplate yang diikuti oleh pengadukan dengan menggunakan magneti9 stireoleh pengadukan dengan menggunakan magneti9 stire imasukan #5% gram susu skim5 % gram +35 aGuades

imasukan #5% gram susu skim5 % gram +35 aGuades $## ml ke dalam gelas beaker &## ml$## ml ke dalam gelas beaker &## ml isiapkan $## ml aGuades

ahan yang digunakan ditimbang menggunakan nera9a analitik !#5% gram amilum5 %

ahan yang digunakan ditimbang menggunakan nera9a analitik !#5% gram amilum5 % gram +35gram +35 aGuades $## ml)

(9)

larutan iodium dituangkan ke permukaan medium dan memperhatikan ;arna yang ter4adi di larutan iodium dituangkan ke permukaan medium dan memperhatikan ;arna yang ter4adi di

sekeliling goresan garis inokulasi2 agian 4ernih

sekeliling goresan garis inokulasi2 agian 4ernih di sekeliling koloni bakteri menun4ukkandi sekeliling koloni bakteri menun4ukkan adanya hidrolisis amilum oleh bakteri

adanya hidrolisis amilum oleh bakteri tersebut5 sedangkan bagian lainnya ber;arna birutersebut5 sedangkan bagian lainnya ber;arna biru kehitaman2

kehitaman2 di inkubasi pada suhu

$-di inkubasi pada suhu $-oo_{7 selama 'E'" 4am}_{7 selama 'E'" 4am}

di inokulasi dengan menggunakan 4arum inokulasi biakan murni bakteri

di inokulasi dengan menggunakan 4arum inokulasi biakan murni bakteri koloni 1koloni 1 pada pada setengah bagian medium 35 biakan murni bakteri

setengah bagian medium 35 biakan murni bakteri koloni 2koloni 2 pada setengah bagian medium 5 pada setengah bagian medium 5 Kemudian

Kemudian pada pada suhu suhu $-$-##_{7 selama ' E '" 4am2}_{7 selama ' E '" 4am2}

disediakan $ buah medium lempeng amilum agar5 berilah kode 3 dan 2 8iap medium dibagi disediakan $ buah medium lempeng amilum agar5 berilah kode 3 dan 2 8iap medium dibagi

atas ' bagian5 membuat garis tengah pada bagian dasar 9a;an petri2 atas ' bagian5 membuat garis tengah pada bagian dasar 9a;an petri2

di amati ;arna

di amati ;arna medium2 Koloni bakteri yang dapat menghidrolisis 9asein akan medium2 Koloni bakteri yang dapat menghidrolisis 9asein akan dikelilingidikelilingi oleh daerah yang 4ernih5 sedangkan bagian lainnya nampak tetap

oleh daerah yang 4ernih5 sedangkan bagian lainnya nampak tetap ber;arna putih susu2ber;arna putih susu2 di inkubasi pada suhu

$-di inkubasi pada suhu $-##_{7 selama ' E '" 4am}_{7 selama ' E '" 4am}

di inokulasi dengan menggunakan 4arum inokulasi biakan murni bakteri

di inokulasi dengan menggunakan 4arum inokulasi biakan murni bakteri koloni 1koloni 1 pada pada setengah bagian medium 35 biakan murni bakteri

setengah bagian medium 35 biakan murni bakteri koloni 2koloni 2 pada setengah bagian medium 2 pada setengah bagian medium 2 menginkubasik

menginkubasikan pada an pada suhu $-suhu $-##_{7 selama ' E '" 4am2}_{7 selama ' E '" 4am2} disediakan $ buah medium

disediakan $ buah medium lempenglempeng Skim Milk Agar Skim Milk Agar 5 diberi kode 3 dan 25 diberi kode 3 dan 2 2

2.. Ujji U i AAddaannyya a KKeemmaammppuuaan n MMeenngghhiiddrroolliissiis s AAmmiilluumm

3

(10)

diamati ;arna medium2 Koloni bakteri yang dapat menghidrolisis lemak akan menyebabkan diamati ;arna medium2 Koloni bakteri yang dapat menghidrolisis lemak akan menyebabkan penurunan p: medium5 sehingga terbentuk ;arna merah pada bagian ba;ah koloni bakteri2 penurunan p: medium5 sehingga terbentuk ;arna merah pada bagian ba;ah koloni bakteri2

*ika tidak ter4adi hidrolisis lemak5 maka medium tetap dalam p: mendekati netral dan *ika tidak ter4adi hidrolisis lemak5 maka medium tetap dalam p: mendekati netral dan

ber;arna kuning pada bagian ba;ah koloni bakteri ber;arna kuning pada bagian ba;ah koloni bakteri22

di inkubasikan pada suhu

$-di inkubasikan pada suhu $-##_{7 selama ' E '" 4am}_{7 selama ' E '" 4am} di inokulasi dengan menggunakan 4arum inokulasi biakan murni bakteri

di inokulasi dengan menggunakan 4arum inokulasi biakan murni bakteri koloni 1koloni 1_pada_pada setengah bagian medium 35 biakan murni bakteri

setengah bagian medium 35 biakan murni bakteri B.koloni 2 B.koloni 2_{pada setengah bagian medium 2}_{pada setengah bagian medium 2} di sediakan ' buah medium lempeng +3 yang mengandung 1B minyak /aitun dan indikator di sediakan ' buah medium lempeng +3 yang mengandung 1B minyak /aitun dan indikator

Neutral e Neutral ed d ₂₂ !

!.. Ujji U i aaddaannyya a KKeemmaammppuuaan n MMeenngghhiiddrroolliissiis s ""eemmaak k

G.

G. HasHas! ! Pe$Pe$&a)&a)a"a"a$a$

S

Sppeessiiees s aakktteerrii KKeemmaammppuuaan n MMeenngghhiiddrroolliissiiss 3

3mmiilluumm pprrootteeiinn lleemmaak k K Koolloonnii 11 @@@@ << << K Koolloonnii '' << << << Keterangan: Keterangan: @@

@@@@ F keF kemamampmpuauan men mengnghihidrdrololisisis tis tininggggii @@

@@ F F kkememamampupuan an mmenengghihidrdrololisisis is sesedadanngg @

@ F F kkeemmaammppuuaan n mmeenngghhiiddrroolliissiis s rreennddaahh <

(11)

H.

H. A$A$a!a!sss s DaDa"a"a

Pada praktikum kali ini dilakukan pengamatan mengenai respirasi pada Pada praktikum kali ini dilakukan pengamatan mengenai respirasi pada bakteri2

bakteri2 Medium Medium yang yang digunakan digunakan adalah adalah medium medium SM3 SM3 $# $# gram gram susu susu skim5 skim5 %% gram +3 dan $## ml aGuades yang di9ampur dan dipanaskan hingga mendidih2 gram +3 dan $## ml aGuades yang di9ampur dan dipanaskan hingga mendidih2 Medium +3A $ ml minyak aitun5 % gram +3 dan $## ml aGuades

Medium +3A $ ml minyak aitun5 % gram +3 dan $## ml aGuades yang di9ampur yang di9ampur dan dipanaskan hingga mendidih2 Medium 33 #5% gram amilum5 % gram +3 dan dan dipanaskan hingga mendidih2 Medium 33 #5% gram amilum5 % gram +3 dan $## ml aGuades y

$## ml aGuades yang di9ampur dan dipanaskan ang di9ampur dan dipanaskan hingga mendidih2 hingga mendidih2 Medium yangMedium yang telah dibuat dimasukkan dalam tabung sebanyak 1# ml ke dalam 9a;an petri lalu telah dibuat dimasukkan dalam tabung sebanyak 1# ml ke dalam 9a;an petri lalu disterilkan menggunakan otoklaf dan disimpan selama '" 4am2 7ara sterilisasi disterilkan menggunakan otoklaf dan disimpan selama '" 4am2 7ara sterilisasi dengan otoklaf antara lain mengisi air hingga di atas sedikit angsang H1 9m lalu dengan otoklaf antara lain mengisi air hingga di atas sedikit angsang H1 9m lalu memasu

memasukkan pan9i kkan pan9i dan memasukkan media dan memasukkan media yang akan yang akan disteridisterilisasi ke lisasi ke dalamndalamnyaya y

yanang g ddisisuususun n ddenenggan an rarappi5 i5 tutububuh h ststererililisisatatoor r ddipipasasanang g 9o9o9o9ok k dedenngagann tempatnya5

tempatnya5 yang terletak pada tutup2 Otoyang terletak pada tutup2 Otoklaf ditutup dengan rapat5 klaf ditutup dengan rapat5 pastikan baut<pastikan baut< baut

baut yang yang ada ada dibagian dibagian atas atas tutup tutup sudah sudah terpasang2 memutar terpasang2 memutar serentak serentak se9arase9ara bersama<sama

bersama<sama baut<baut yang baut<baut yang berla;anan berla;anan letaknya agar letaknya agar tutup autoklaf tutup autoklaf ini beradaini berada pada

pada posisi posisi yang yang tepat5 tepat5 kemudian kemudian pengatur pengatur katup katup pengaman pengaman dibuka5 dibuka5 agar agar udaraudara yan

yang g ada ada di di daldalam am autautokloklaf af kelkeluaruar2 2 SaaSaat t sumsumber ber pempemanaanas s !ap!api) i) dardari i komkompor por dinyalakan5 dan sudah keluar uap banyak hingga terdengar bunyi desisan5 katup dinyalakan5 dan sudah keluar uap banyak hingga terdengar bunyi desisan5 katup segera ditutup2 Skala 4arum di4aga pada 1& lbs H1& menit lalu kompor dimatikan2 segera ditutup2 Skala 4arum di4aga pada 1& lbs H1& menit lalu kompor dimatikan2 8unggu hingga tekanan turun men4adi # untuk membuka atau meluruskan katup 8unggu hingga tekanan turun men4adi # untuk membuka atau meluruskan katup pengaman dan membuka tutup

pengaman dan membuka tutup otoklaf untuk mengeluarkan medium steril2otoklaf untuk mengeluarkan medium steril2

Sesuai dengan tabel hasil pengamatan5 koloni 1 mempunyai kemampuan Sesuai dengan tabel hasil pengamatan5 koloni 1 mempunyai kemampuan men

menghighidrodrolislisis is amiamilum lum sedsedang ang karkarena ena setesetelah lah di9di9ampampurkurkan an dendengan gan larularutantan iodium5 di sekeliling bakteri akan ber;arna transparan !bening)2 Koloni 1 tidak iodium5 di sekeliling bakteri akan ber;arna transparan !bening)2 Koloni 1 tidak mempunyai kemampuan menghidrolisis protein dengan melihat adanya lapisan mempunyai kemampuan menghidrolisis protein dengan melihat adanya lapisan transp

transparan !4ernih) yang tebal di aran !4ernih) yang tebal di sekitar baktersekitar bakteri i yang berada di mediumyang berada di medium skim mik skim mik

aga

agar2 r2 PadPada a penpengamgamatan atan penpenghighidrodrolisilisisan san lemalemak5 k5 kolkoloni oni 1 1 tidtidak ak memmempunpunyayaii kemampuan menghidro

kemampuan menghidrolisis5 hal ini diklisis5 hal ini dikarenakan tidak adanya arenakan tidak adanya 9orak merah di 9orak merah di sisisisi pinggir

pinggir bakteri2 bakteri2 Kemudian Kemudian pada pada medium medium kontrol kontrol tidak tidak ada ada perubahan2 perubahan2 asilasil pengamatan

pengamatan pada pada koloni koloni ' ' tidak tidak mempunyai mempunyai kemampuan kemampuan dalam dalam menghidrolisismenghidrolisis amilum5 protein maupun lemak

(12)

apat disimpulkan sementara dari hasil pengamatan yang sudah dianalisis apat disimpulkan sementara dari hasil pengamatan yang sudah dianalisis di

di ataatas5 s5 yanyang g memmempunpunyayai i kemkemampampuan uan sedsedang ang daladalam m menmenghighidrodrolislisis is amiamilumlum ad

adalaalah h kokololoni ni 12 12 KeKemumudidian an yayang ng titidadak k memmempupunynyai ai kekemamampmpuauan n dadalamlam menghidrolisis lemak dan protein adalah koloni 1 dan koloni '2 ata di atas menghidrolisis lemak dan protein adalah koloni 1 dan koloni '2 ata di atas men

menun4un4ukkukkan an bahbah;a ;a adaadanynya a perpersamasamaan an tintingkagkat t kemkemampampuan uan menmenghighidrodrolisilisiss protein dan lemak 3

protein dan lemak 3ntara koloni 1 dan koloni '2ntara koloni 1 dan koloni '2

II.. PPee))**aa%%aassaa$$

Pa

Pada da prprakaktitikukum m kakali li inini5 i5 kikita ta memengnggugunanakakan n titiga ga memedidiumum5 5 yyaiaitutu 33!3milum agar)5 +3A !+utrient 3gar Aemak)5 dan SM3 !Skim Milk 3gar)2 33!3milum agar)5 +3A !+utrient 3gar Aemak)5 dan SM3 !Skim Milk 3gar)2 Masing 

Masing  masinmasing g dari medium tersebut mengandudari medium tersebut mengandung bahan dasar ng bahan dasar bagi bakteribagi bakteri untuk melakukan metabolisme2 isini digunakan dua bakteri yaitu bakteri koloni untuk melakukan metabolisme2 isini digunakan dua bakteri yaitu bakteri koloni 1 dan bakteri koloni '

1 dan bakteri koloni '..

Kar

Karaktakteriserisasi asi dan dan klaklasifisifikasi kasi sebsebagiagian an besbesar ar mikmikrobrobia ia sepseperti erti bakbakteriteri berdasarkan pada reaksi

berdasarkan pada reaksi enimatik ataupun biokimia2 Mikroba dapat enimatik ataupun biokimia2 Mikroba dapat tumbuh padatumbuh pada beberapa

beberapa tipe tipe media5 media5 memproduksi tipe memproduksi tipe metabolit metabolit tertentu tertentu yang yang dideteksi dideteksi dengandengan interak

interaksi si mikromikrobia bia dengadengan n reagen test reagen test yang menghayang menghasilkan ;arna reagen2 silkan ;arna reagen2 .eaksi.eaksi<< reak

reaksi si daldalam am sel sel akaakan n teriteridendentiftifikaikasi si dendengan gan melmelakuakukan kan penpengugu4ian4ian<pe<pengungu4ian4ian te

tertrtenentutu2 2 SeSel l akakan an memembmbererikikan an rerespspon on sesesusuai ai dedengngan an kekemamammpupuan an yayangng dim

dimiliilikinykinya5 a5 mismisalnalnya ya menmenghaghasilksilkan an enenim im katakatalaselase5 5 enenim im gelgelatinatinase ase atauatau kem

kemampampuan uan untuntuk uk menmenghighidrodrolislisis is lemlemak ak !Pe!Pel9al9ar r 10(10(%)2 %)2 UntUntuk uk memmempelapela4ari4ari karakteristik biokimia suatu biakan murni bakteri maka dapat digunakan suatu u4i karakteristik biokimia suatu biakan murni bakteri maka dapat digunakan suatu u4i biokimia yaitu u4i hidrolisis amilum5 u4i hidrolisis protein dan u

biokimia yaitu u4i hidrolisis amilum5 u4i hidrolisis protein dan u4i hidrolisis lemak24i hidrolisis lemak2

1

122 UU44iiiid drroolliissiiss33mmiilluumm

Mikroorganisme yang bersifat amilolitik dapat meme9ah pati !amilum) Mikroorganisme yang bersifat amilolitik dapat meme9ah pati !amilum) yang terdapat dalam makanan men4adi senya;a yang lebih sederhana5 terutama yang terdapat dalam makanan men4adi senya;a yang lebih sederhana5 terutama da

dalam lam bebentntuk uk glglukukosaosa2 2 .e.eakaksi si hihidrdrololisiisis s papati ti memenynyebebababkakan n pepen9n9airairan an papatiti sehingga menyebabkan perubahan pada 9ita rasa makanan

sehingga menyebabkan perubahan pada 9ita rasa makanan 3milu

3milum m merupmerupakan karbohidraakan karbohidrat t yang masuk yang masuk dalam 4enis dalam 4enis polisapolisakaridakarida22 Polisa

Polisakarida karida merupmerupakan akan makromakromolekumolekul5 l5 polimpolimer er dengdengan an beberabeberapa pa monomonosakaridsakaridaa yang

(13)

sebagai materi simpanan atau 9adangan yang nantinya ketika diperlukan akan sebagai materi simpanan atau 9adangan yang nantinya ketika diperlukan akan dihidrolisis untuk menyediakan gula bagi sel2 Kemampuan untuk memanfaatkan dihidrolisis untuk menyediakan gula bagi sel2 Kemampuan untuk memanfaatkan gula atau unsur yang berhubungan dengan konfigurasi yang berbeda dari glukosa gula atau unsur yang berhubungan dengan konfigurasi yang berbeda dari glukosa mer

merupaupakan kan hashasil il kemkemampampuan uan orgorganianisme sme untuntuk uk menmengubgubah ah subsubstrastrat t menmen4adi4adi perantara<perantara sebagai 4alur untuk fermentasi glukosa !Sukarminah5 '#1#) perantara<perantara sebagai 4alur untuk fermentasi glukosa !Sukarminah5 '#1#)

3milu

3milum m merupmerupakan karbohidraakan karbohidrat t yang masuk yang masuk dalam 4enis dalam 4enis polisapolisakaridakarida22 Polisa

Polisakarida karida merupamerupakan kan makromakromolekmolekul5 ul5 polimpolimer er dengadengan n beberbeberapaapa mono

monosakaridsakarida a yang yang dihudihubungbungkan kan dengdengan an ikatan ikatan glikoglikosidik2 sidik2 eberaeberapapa polisakarida

polisakarida berfungsi berfungsi sebagai sebagai materi materi simpanan simpanan atau atau 9adangan 9adangan yang yang nantinyanantinya ketika diperlukan akan dihidrolisis untuk menyediakan gula bagi sel ketika diperlukan akan dihidrolisis untuk menyediakan gula bagi sel !7amp

!7ampbell5 bell5 '##''##')2 3milum )2 3milum tidak tidak dapat langsung dapat langsung digudigunakannakan5 5 karenkarena a memilimemilikiki ukuran molekul y

ukuran molekul yang terlalu besar5 ang terlalu besar5 sehingga bakteri harus mengsehingga bakteri harus menghidrolisis amilumhidrolisis amilum terl

terlebiebih h dahdahulu ulu menmen4ad4adi i molmolekuekul l sedesederharhana na dan dan masmasuk uk ke ke daldalam am sel2 sel2 UntUntuk uk menghidrolisis

menghidrolisis amilum amilum dibutuhkan dibutuhkan enim enim amilase2 amilase2 3milase5 3milase5 yaitu yaitu enimenim yang

yang menguraikan menguraikan amilum amilum men4adi men4adi maltosa maltosa !suatu !suatu disakarida)5 disakarida)5 reaksinyareaksinya adalah sebagai berikut:

adalah sebagai berikut:

Kemampuan untuk menghidrolisis amilum men4adi glukosa5 maltosa5 dan Kemampuan untuk menghidrolisis amilum men4adi glukosa5 maltosa5 dan de

dekstkstririn n kakarerena na memempmpununyayai i enenim im amamilailase2 se2 3m3mililum um titidadak k dadapapat t lalangngsusungng digunakan5 sehingga bakteri harus menghidrolisis amilum terlebih dahulu men4adi digunakan5 sehingga bakteri harus menghidrolisis amilum terlebih dahulu men4adi molekul sederhana dan masuk ke dalam sel !Sukarminah5 '#1#)

molekul sederhana dan masuk ke dalam sel !Sukarminah5 '#1#) 6u

6ungngsi si u4u4i i popositsitif if hihidrdrololisiisis s amamiluilum m papada da babaktekteri ri diditatandndai ai dedengnganan tampaknya area 4ernih di sekitar pertumbuhan bakteri yang digoreskan2 3danya tampaknya area 4ernih di sekitar pertumbuhan bakteri yang digoreskan2 3danya dae

daerah rah 4ern4ernih ih terstersebuebut t disdisebaebabkabkan n ekseksoenoenim im dan dan orgorganianisme sme menmenghighidrodrolisilisiss amilum dalam medium agar2 6ungi atau bakteri memproduksi J<amilase sehingga amilum dalam medium agar2 6ungi atau bakteri memproduksi J<amilase sehingga mampu menguraikan amilum dengan eksoenim amilolitik tersebut amat luas mampu menguraikan amilum dengan eksoenim amilolitik tersebut amat luas an

antatara ra mimikrkroooorgrgananisismeme5 5 didianantatararanynya a babaktktererii Ba#illus Ba#illus ma#erans$ ma#erans$ Ba#illusBa#illus polime%a$

polime%a$dandan Ba#illus su&tilis Ba#illus su&tilis !Sukarminah5 '#1#)!Sukarminah5 '#1#)

Indikator yang digunakan pada u4i amilolitik ini adalah yodium2 Yodium Indikator yang digunakan pada u4i amilolitik ini adalah yodium2 Yodium 1B diteteskan tepat di atas koloni2 8u4uan penetasan larutan yodium 1B diberikan 1B diteteskan tepat di atas koloni2 8u4uan penetasan larutan yodium 1B diberikan

(14)

untuk membuktikkan apakah bakteri yang tumbuh pada media adalah bakteri untuk membuktikkan apakah bakteri yang tumbuh pada media adalah bakteri ami

amilollolitiitik2 k2 PatPati i yayang ng tidtidak ak terterhidhidrolirolisis sis akaakan n memmembenbentuk tuk ;ar;arna na birbiru u dendengangan yodium yang menun4ukkan tidak terdapatnya enim amilase yang dihasilkan oleh yodium yang menun4ukkan tidak terdapatnya enim amilase yang dihasilkan oleh bakteri

bakteri selain selain bakteri bakteri amilolitik2 amilolitik2 Pati Pati yang yang terhidrolisis terhidrolisis di di sekeliling sekeliling koloni koloni akanakan terlihat areal bening5 sebagai akibat akti?itas enim amilase2 arna 4ernih tersebut terlihat areal bening5 sebagai akibat akti?itas enim amilase2 arna 4ernih tersebut mengindikasikan bah;a pati atau amilum sudah terhidrolisis oleh eksoenim pada mengindikasikan bah;a pati atau amilum sudah terhidrolisis oleh eksoenim pada bakteri2

bakteri2 Menurut Menurut 6ardia 6ardia !100') ;arna !100') ;arna 4ernih 4ernih atau atau bening pada bening pada sekeliling sekeliling bakteribakteri setelah ditambahkan iodium disebabkan karena amilum tidak dapat bereaksi lama setelah ditambahkan iodium disebabkan karena amilum tidak dapat bereaksi lama de

dengngan an ioiodidiumum2 2 33rereal al beber;r;ararna na 9o9oklklat at kekememerarahahan n di di sesekekelilililing ng kokololonini menun4ukkan hidrolisis sebagian terhadap pati2

menun4ukkan hidrolisis sebagian terhadap pati2

ari data dihasilkan bah;a pada u4i hidrolisis amilum ini hanya bakteri ari data dihasilkan bah;a pada u4i hidrolisis amilum ini hanya bakteri kol

koloni oni 1 1 yanyang g mammampu pu melmelakuakukan kan hidhidrolrolisiisis s amiamilum lum yayang ng ditditandandai ai dendengangan terben

terbentuknytuknya a ;arna 4ernih ;arna 4ernih disekidisekitar tar bakteri yang bakteri yang diinodiinokulasikulasikan kan setelah mediumsetelah medium diberikan larutan iodium2 arna 4ernih atau bening pada sekeliling bakteri setelah diberikan larutan iodium2 arna 4ernih atau bening pada sekeliling bakteri setelah ditambahkan iodium disebabkan karena amilum tidak dapat bereaksi lama dengan ditambahkan iodium disebabkan karena amilum tidak dapat bereaksi lama dengan iodiu

iodium2 m2 Pada bakteri koloni 1 Pada bakteri koloni 1 yang diamati5 mampu menghidroyang diamati5 mampu menghidrolisis amilum5 hallisis amilum5 hal ini menun4ukkan bah;a bakteri tersebut menghasilkan enim J<amilase2 Aarutan ini menun4ukkan bah;a bakteri tersebut menghasilkan enim J<amilase2 Aarutan iod

iodium ium disdisini ini berberfunfungsi gsi sebasebagai gai indindikaikator tor adaadanya nya amilamilum5 um5 bilbila a medmedium ium yanyangg men

mengangandundung g patpati i ataatau u amiamilum lum dibdiberi eri iodiodium ium makmaka a akaakan n namnampak pak ;ar;arna na birbiru2u2 +amun

+amun 4ika 4ika pati pati atau atau amilum amilum tersebut tersebut telah telah terhidrolisis terhidrolisis maka maka ;arnanya ;arnanya akanakan 4ernih

4ernih atau atau bening2 bening2 aarna rna 4ernih 4ernih tersebut tersebut mengindikasikan mengindikasikan bah;a bah;a pati pati atauatau amilum sudah terhidrolisis oleh eksoenim pada bakter

amilum sudah terhidrolisis oleh eksoenim pada bakter i selain itu i selain itu koloni 1 mampukoloni 1 mampu untuk menghidrolisis amilum men4adi glukosa5 maltosa dan deEtrin2 Sedangkan untuk menghidrolisis amilum men4adi glukosa5 maltosa dan deEtrin2 Sedangkan pada

pada bakteri bakteri ' ' hasilnya hasilnya negatif negatif yang yang menun4ukkan menun4ukkan tidak tidak adanya adanya ;arna ;arna beningbening !transp

!transparan) yang aran) yang berarti bakteri koloni berarti bakteri koloni tidak mempunytidak mempunyai ai enim amilase yangenim amilase yang memiliki kemampuan untuk menghidrolisis amilum men4adi glukosa5 maltosa dan memiliki kemampuan untuk menghidrolisis amilum men4adi glukosa5 maltosa dan deEtrin2 al ini dikarenakan 4uga dipengaruhi oleh banyak sedikitnya bakteri yang deEtrin2 al ini dikarenakan 4uga dipengaruhi oleh banyak sedikitnya bakteri yang diinokulasikan pada medium5 semakin sedikit bekteri yang diinokulasikan dapat diinokulasikan pada medium5 semakin sedikit bekteri yang diinokulasikan dapat mengakibatkan hasil bentukan 4ernih ini 4uga semakin ke9il !adioetomo5 100#)2 mengakibatkan hasil bentukan 4ernih ini 4uga semakin ke9il !adioetomo5 100#)2

'

(15)

Proses metabolisme dibedakan men4adi dua 4enis5 yaitu anabolisme dan Proses metabolisme dibedakan men4adi dua 4enis5 yaitu anabolisme dan ka

katabtabololismisme2 e2 33nanabobolilismsme e !b!bioiosisintntesiesis) s) yayaitu itu rereakaksi si bibiokokimiimia a yayang ng memerarakikitt mol

molekuekul<ml<molekolekul ul sedsederherhana ana menmen4adi 4adi molmolekuekul<ml<molekolekul ul yanyang g leblebih ih komkomplepleks2ks2 Misalnya pembentukkan protein dari asam amino2 Se9ara umum5 proses anabolik Misalnya pembentukkan protein dari asam amino2 Se9ara umum5 proses anabolik me

membmbututuhuhkakan n enenerergigi2 2 SeSedadangngkakan n kakatatabobolilismsme e yayaitu itu rereakaksi si bibiokokimimia ia yayangng mem

meme9ah e9ah atau atau menmengurguraikaikan an molmolekuekul<ml<molekolekul ul komkomplepleks ks menmen4ad4adi i momoleklekul<ul< mo

moleklekul ul yayang ng lelebibih h sedsedererhahanana2 2 PrPrososes es kakatatabobolik lik memeleplepasaskakan n enenerergi gi yayangng dibutuhkan oleh sel

dibutuhkan oleh sel !a!aluyo5 '##")2luyo5 '##")2 Me

Menunururut t CCoolk lk L L hheeeeleler r !1!10(0(()()5 5 babaktktereri i sasangngat at memengngagagumumkakann kel

kelu;eu;esansannya nya daladalam m keakeaneknekaragaragamaaman n senysenya;a a;a yanyang g dapdapat at diudiuraikraikan= an= padpadaa ke

kenynyataataanannynya5 a5 susubsbstatansnsi i bibiolologogi i inini i titidadak k dadapapat t didipepe9ah9ahkakan n ololeh eh bebebeberarapapa organisme2 i antara senya;a organik umum yang dapat dipe9ahkan oleh bakteri organisme2 i antara senya;a organik umum yang dapat dipe9ahkan oleh bakteri adalah protein5 asam nukleat5 dan lemak2 Peme9ahan senya;a<senya;a tersebut adalah protein5 asam nukleat5 dan lemak2 Peme9ahan senya;a<senya;a tersebut tak luput dari peranan enim yang dihasilkan oleh bakteri2 >nim itu disebut tak luput dari peranan enim yang dihasilkan oleh bakteri2 >nim itu disebut hid

hidrolrolase ase karkarena ena enenim im ini ini menmenghighidrodrolisilisis s molmolekuekul<ml<moleolekul kul besbesar ar menmen4ad4adii komponen<komponen ke9il yang dapat digunakan2 Pada bakteri enim<enim ini komponen<komponen ke9il yang dapat digunakan2 Pada bakteri enim<enim ini disekresi sel ke lingkungan luarnya= 4adi senya;a besar yang tak larut dapat disekresi sel ke lingkungan luarnya= 4adi senya;a besar yang tak larut dapat dipe9ah men4adi molekul yang larut sehingga dapat memasuki sel bakteri dan dipe9ah men4adi molekul yang larut sehingga dapat memasuki sel bakteri dan men4adi bahan makanan2

men4adi bahan makanan2 al

alam am prapraktiktikum kum penpengu4gu4ian ian metametabolbolismisme e bakbakterteri5 i5 untuntuk uk menmengetgetahuahuii adanya hidrolisis protein maka digunakanlah medium berupa Skim Milk 3gar adanya hidrolisis protein maka digunakanlah medium berupa Skim Milk 3gar !SM3)2 SM3 !Skim Milk 3gar) merupakan medium yang terbuat susu skim yang !SM3)2 SM3 !Skim Milk 3gar) merupakan medium yang terbuat susu skim yang di9ampur dengan agar dan aGuades5 yang mana susu skim tersebut terkandung di9ampur dengan agar dan aGuades5 yang mana susu skim tersebut terkandung kasein yang nantinya akan terhidrolisis men4adi peptida dan asam amino2 akteri kasein yang nantinya akan terhidrolisis men4adi peptida dan asam amino2 akteri mampu mengahsilkan hidrolisis protein karena di dalam tubuh bakteri dihasilkan mampu mengahsilkan hidrolisis protein karena di dalam tubuh bakteri dihasilkan koenim yang mampu menghidrolisis kasein dengan adanya enim protease2

koenim yang mampu menghidrolisis kasein dengan adanya enim protease2 Men

Menuruurut t adadioeioetomtomo o !10!100$)0$)5 5 yanyang g menymenyatakatakanbanbah;ah;a a u4i u4i popositisitif f dardarii pengu4ian

pengu4ian hidrolisis hidrolisis protein protein ditandai ditandai dengan dengan tampaknya tampaknya area area 4ernih 4ernih di di sekitar sekitar pertumbuhan

pertumbuhan organisme organisme yang yang digoreskan2 digoreskan2 Senada Senada dengan dengan pernyataan pernyataan tersebut5tersebut5 as

astuttuti i !'#!'#1&)1&)5 5 menmenyatyatakaakan n bahbah;a ;a kolkoloni oni bakbakteri teri yayang ng dapdapat at menmenghighidrodrolisilisiss protein

protein akan akan dikelilingi dikelilingi oleh oleh daerah daerah yang yang 4ernih5 4ernih5 sedangkan sedangkan bagian bagian lainnya lainnya akanakan nampak tetap ber;arna putih susu2

(16)

+amun5

+amun5 berdasarkan berdasarkan hasil hasil akhir akhir yang yang kita kita peroleh peroleh dalam dalam pengu4ian pengu4ian iniini bertolak

bertolak belakang belakang dengan dengan teori teori yang yang disebutkan disebutkan diatas2 diatas2 asil asil akhir akhir dari dari u4iu4i hidrolisis protein5 baik dari Koloni I maupun Koloni II5 tidak terdapat ;arna hidrolisis protein5 baik dari Koloni I maupun Koloni II5 tidak terdapat ;arna 4ernih

4ernih yang yang mengelilingi mengelilingi bagian bagian koloni koloni bakteri2 bakteri2 Seharusnya Seharusnya setiap setiap bakteri bakteri dapatdapat mel

melakuakukan kan hidhidrolrolisiisis s proproteintein2 2 KetKetidakidak9o99o9okaokan n hasihasil l akhakhir ir ini ini munmungkigkin n dapdapatat diseba

disebabkan oleh bkan oleh perlakperlakuan penggoresauan penggoresan n terhadaterhadap p mediumedium m yang relatif yang relatif dalam2dalam2 Seharusnya perlakuan penggoresan medium ini dilakukan dengan goresan yang Seharusnya perlakuan penggoresan medium ini dilakukan dengan goresan yang tipis2

tipis2

Menurut aluyo !'##")5 4ika protein dihidrolisis oleh bakteri akan tampak Menurut aluyo !'##")5 4ika protein dihidrolisis oleh bakteri akan tampak ona 4ernih di sekitar tumbuh koloni2 *ika tidak mampu dihidrolisis maka medium ona 4ernih di sekitar tumbuh koloni2 *ika tidak mampu dihidrolisis maka medium tetap ber;arna putih >nim protease merupakan enim penghidrolisis protein5 tetap ber;arna putih >nim protease merupakan enim penghidrolisis protein5 yaitu enim yang memutus ikatan peptida pada rantai protein sehingga dihasilkan yaitu enim yang memutus ikatan peptida pada rantai protein sehingga dihasilkan asam amino atau peptida berantai pendek2 *adi5 adanya hasil ber;arna 4ernih pada asam amino atau peptida berantai pendek2 *adi5 adanya hasil ber;arna 4ernih pada koloni bakteri menun4ukkan bah;a bakteri dapat menghidrolisis protein yang ada koloni bakteri menun4ukkan bah;a bakteri dapat menghidrolisis protein yang ada pada medium2

pada medium2 Prote

Protein adalah in adalah molekmolekul yang ul yang sangat besar tersusun dari sangat besar tersusun dari asam amino yangasam amino yang dikaitkan dengan ikatan peptida2 Penguraian protein men4adi asam amino<asam dikaitkan dengan ikatan peptida2 Penguraian protein men4adi asam amino<asam amino dilakukan dengan menggunakan enim protease yang dapat menghidrolisis amino dilakukan dengan menggunakan enim protease yang dapat menghidrolisis ikatan peptida hingga dapat melepas masing<masing asam amino sehingga asam ikatan peptida hingga dapat melepas masing<masing asam amino sehingga asam amino dapat diserap

amino dapat diserap ke dalam sel ke dalam sel !C!Coolk L heeler5 10(()2Menurut alGis !'##$)5lk L heeler5 10(()2Menurut alGis !'##$)5 protein merupakan

protein merupakan senya;a yang senya;a yang disusun oleh disusun oleh asam aasam amino yang mino yang memiliki ikatanmemiliki ikatan peptide5

peptide5 sedangkan sedangkan lemak lemak merupakan merupakan merupakan merupakan suatu suatu kelompok kelompok biomolekulbiomolekul yan

yang g memmemiliiliki ki 9ir9iri i khkhusuusus s daldalam am kelkelaruarutantannya nya dan dan berberperperan an penpentinting g daldalamam struktur dan metabolisme sel2 Untuk melakukan hidrolisis protein5 bakteri dapat struktur dan metabolisme sel2 Untuk melakukan hidrolisis protein5 bakteri dapat mensekresikan enim protease yang dapat menghidrolisis ikatan peptide sehingga mensekresikan enim protease yang dapat menghidrolisis ikatan peptide sehingga dapat melepas masing<masing asam aminonya2

dapat melepas masing<masing asam aminonya2

$

$22 UU44iiiid drroolliissiiss AAeemmaakk Kemamp

Kemampuan menghidrouan menghidrolisis lisis lemak ini lemak ini ditun4ditun4ukkan dengan intensitasukkan dengan intensitas terben

terbentuknytuknya a ;arna mera;arna merah pada bakteri yh pada bakteri yang diinoang diinokulasikulasikan2 asil ini dakan2 asil ini dapatpat dip

dipengengaruaruhi hi oleoleh h bebbeberaperapa a fakfaktor tor yaiyaitu tu kemkemungungkinkinan an perperbedbedaan aan kemkemampampuanuan menghidrolisis lemak adalah 4umlah sel bakteri dari tiap 4enis yang diinokulasikan menghidrolisis lemak adalah 4umlah sel bakteri dari tiap 4enis yang diinokulasikan

(17)

pada

pada medium medium tidak tidak sama5 sama5 sehingga sehingga metabolisme metabolisme yang yang diperlukan diperlukan 4uga 4uga berbeda2berbeda2 Semakin banyak bateri yang diinokulasikan berarti semakin besar metabolisme Semakin banyak bateri yang diinokulasikan berarti semakin besar metabolisme yan

yang g terter4adi 4adi di di daldalam am medmedium ium sehsehingingga ga hidhidrolirolisis sis lemlemak ak 4ug4uga a semsemakiakin n besbesar ar karena untuk memenuhi kebutuhan hidup bakkteri dan sebal

karena untuk memenuhi kebutuhan hidup bakkteri dan sebal iknya !Pel9ar5 10(%)2iknya !Pel9ar5 10(%)2 Kemampuan bakteri untuk

Kemampuan bakteri untuk menghidrolisismenghidrolisis lemak dikarenalemak dikarenakan pada kan pada tubuhtubuh bakteri

bakteri dihasilkan dihasilkan enim enim lipase2 lipase2 >nim >nim lipase lipase ini ini termasuk termasuk golongan golongan ester ester yaituyaitu este

esteraserase2 2 imimana ana enenim im ini ini memmemiliiliki ki kemkemampampuan uan menmenghighidrodrolislisis is lemlemak ak dandan mem

meme9ahe9ahkan men4adkan men4adi i $ $ molmolekuekul l asam lemak asam lemak dan 1 dan 1 molmolekuekul l gligliseroserol2 l2 AemAemak ak mer

merupaupakan kan 9am9ampurpuran an trigtriglesleseriderida a yanyang g terdterdiri iri atas atas 1 1 molmolekuekul l gligliseroserol l yanyangg berikatan

berikatan dengan $ dengan $ molekul asmolekul asam am lemak2 lemak2 Aemak Aemak memiliki memiliki sifat sifat antara antara lain: lain: tidak tidak larut dalam air5 bila dipanaskan akan ter4adi perubahan pada titik 9air5 titik asap larut dalam air5 bila dipanaskan akan ter4adi perubahan pada titik 9air5 titik asap dan titik nyala5 serta plastis dan bentuknya mudah berubah<ubah bila mendapat dan titik nyala5 serta plastis dan bentuknya mudah berubah<ubah bila mendapat tekanan5 bisa mengalami ketengikan5 dan reaksi dengan alkali akan membentuk tekanan5 bisa mengalami ketengikan5 dan reaksi dengan alkali akan membentuk sabun dan gliserol !Pel9

sabun dan gliserol !Pel9ar5 10(%)2ar5 10(%)2 Pada u4i

Pada u4i hidrohidrolisis lemak lisis lemak ini menggunaini menggunakan medium kan medium lemak atau lemak atau +utri+utrienen 3gar Aemak !+3A)2 ari data dihasilkan bah;

3gar Aemak !+3A)2 ari data dihasilkan bah;a bakteri koloni 1 a bakteri koloni 1 dan koloni 'dan koloni ' tidak mem

tidak memiliki kemamiliki kemampuan puan dalam mendalam menghidrghidrolisis lemaolisis lemak 2 al ini disebabkank 2 al ini disebabkan bakteri

bakteri koloni koloni 1 1 dan' dan' tidak tidak menghasilkan menghasilkan enim enim lipase lipase sehingga sehingga tidak tidak mampumampu mengubah lemak men4adi asam lemak dan gliserol

mengubah lemak men4adi asam lemak dan gliserol

Selain dapat menghidrolisis lemak5 protein dan amilum ternyata bakteri Selain dapat menghidrolisis lemak5 protein dan amilum ternyata bakteri 4uga dapat

4uga dapat menghidrolisis gelatin2 menghidrolisis gelatin2 Pada Pada u4i hidrolisis u4i hidrolisis gelatin gelatin yang telah yang telah diu4i olehdiu4i oleh beberapa

beberapa ahli ahli bakteri bakteri dapat dapat menghidrolisis menghidrolisis gelatin2 gelatin2 Delatin Delatin tetap tetap ber;u4ud ber;u4ud 9air 9air setelah berada pada suhu rendah5 sedangkan pada tabung reaksi yang hanya berisi setelah berada pada suhu rendah5 sedangkan pada tabung reaksi yang hanya berisi gelatin tanpa ditetesi bakteri5 mengalami perubahan ;u4ud men4adi padat dalam gelatin tanpa ditetesi bakteri5 mengalami perubahan ;u4ud men4adi padat dalam suhu rendah2 al tersebut menun4ukan bah;a bakteri yang diteteskan tersebut suhu rendah2 al tersebut menun4ukan bah;a bakteri yang diteteskan tersebut ma

mampmpu u memengnghihidrdrololisisis is gegelalatitin n sesehihingngga ga gegelalatitin n memen4n4adadi i tetetatap p 9ai9air r keketitikaka dit

ditempempatkatkan an padpada a suhsuhu u renrendahdah2 2 akakteri teri tertersebusebut t dapdapat at menmenghighidrodrolislisis is gelgelatinatin ka

karerena na babaktktereri i tetersrsebebut ut mmememililikiki i ekeksosoeneniim m prprototeoeolilititik k yyanang g didisesebubutt gelatinisme2 al ini menun4ukan bah;a gelatin adalah protein yang diperoleh dari gelatinisme2 al ini menun4ukan bah;a gelatin adalah protein yang diperoleh dari h

haassiil l hhiiddrroolliissa a kkoollaaggeenn5 5 yyaaiittu u ssuuaattu u kkoommppoonneen n 44aarriinnggaann pengikat pada tendon manusia dan

(18)

berbentuk

berbentuk padat padat sedangkan sedangkan diatas diatas suhu suhu '&'&oo₇_{7 ge}_gela_latin_{tin ak}_akan_{an be}_berb_rben_entu_tuk_{k 9ai}_9air_r !;id4osaputro5 '##&)2

!;id4osaputro5 '##&)2

J

J.. KKeess)+)+,,!!aa$$

12

12 Pada aPada akteri kokteri koloni 1 loni 1 dapat mdapat melakukelakukan hidan hidrolisis arolisis amilum dmilum dengan kengan kemampuemampuanan sedang sedangkan pada koloni ' tidak mampu melakukan hidrolisis amilum sedang sedangkan pada koloni ' tidak mampu melakukan hidrolisis amilum '2

'2 PaPada da babaktktereri i kokololoni 1 ni 1 dadan n kokololoni ni ' ' tidtidak mempak mempununyayai i kekemamampmpuauan n ununtutuk k melakukan hidrolisis protein

melakukan hidrolisis protein $2

$2 PaPada da babaktktereri i kokololoni 1 ni 1 dadan n kokololoni ni ' ' tidtidak mempak mempununyayai i kekemamampmpuauan n ununtutuk k melakukan hidrolisis lemak

melakukan hidrolisis lemak

Da-"ar R,(,'a$ Da-"ar R,(,'a$

a

alGlGisis5 5 dkdkk2 '##$k2 '##$22 Biokimia Biokimia2 2 MalMalangang: : irirektektoraorat t *en*enderderal al PenPendiddidikaikan n 8i8inggnggii Proyek Peningkatan Mana4emen Pendidikan 8inggi epartemen Pendidikan Proyek Peningkatan Mana4emen Pendidikan 8inggi epartemen Pendidikan +asional

(19)

a

arkrkununi2 i2 '#'##1#122 Mikro&iologi '&akteriologi$ Mikro&iologi '&akteriologi$ (irologi$ (irologi$ dan dan mikologimikologi)2 )2 MalMalangang:: Uni?ersitas +egeri Malang2

Uni?ersitas +egeri Malang2 ;id4osaputro5  2 '##&2

;id4osaputro5  2 '##&2 )asar*dasar mikro )asar*dasar mikro&iologi&iologi2 2 *akarta : *akarta : 4ambatan4ambatan 6ardia5 S2 100'2 Mikrobiologi Pangan I2 Dramedia Pustaka Utama : *akarta2 6ardia5 S2 100'2 Mikrobiologi Pangan I2 Dramedia Pustaka Utama : *akarta2 adioetomo5.2S2100#2

adioetomo5.2S2100#2 +eknik dan Prosedur )asar "a&oratorium Mikro&iologi.+eknik dan Prosedur )asar "a&oratorium Mikro&iologi. *akarta: Dramedia2

*akarta: Dramedia2 astuti5 Sri Utami2'#1'2

astuti5 Sri Utami2'#1'2 Petunjuk Praktikum Mikro& Petunjuk Praktikum Mikro&iologiiologi2 Malang: UMM Press2 Malang: UMM Press Pelear5 Mi9hael *2 10(%2

Pelear5 Mi9hael *2 10(%2 )asar*)asar Mikro )asar*)asar Mikro&iologi&iologi2 *akarta: UI<Press22 *akarta: UI<Press2 Su

Sukakarmrminainah h >2>25 5 SuSumamantnti5 i5 22M2 M2 dadan n aaninidadah5h5I2 I2 '#'#1#1#22 Mikro&iologi Mikro&iologi PanganPangan22 andung: Uni?ersitas Pad4a4aran

andung: Uni?ersitas Pad4a4aran 8arigan5 *eneng2 10((

8arigan5 *eneng2 10((. Pengantar Mikro&iologi. Pengantar Mikro&iologi2 *akarta: epdikbud irektorat2 *akarta: epdikbud irektorat *enderal Pendidikan 8inggi Proyek Pengembangan Aembaga Pendidikan *enderal Pendidikan 8inggi Proyek Pengembangan Aembaga Pendidikan 8ingkat Kependidikan2

8ingkat Kependidikan2 C

Coolk5 lk5 eesley 325 sley 325 dan dan heelheeler5 Margaret er5 Margaret 62 10("262 10("2 Mikro&iologi Mikro&iologi dasar dasar 2 *akarta:2 *akarta: >rlangga2

>rlangga2 

aaluluyyo5 o5 AA2 2 ''###"#"22 Mikro&iologi Mikro&iologi UmumUmum2 2 MalMalangang: : UniUni?er?ersitasitas s MuhMuhamaamadiydiyahah Malang2

Malang2

K.

(20)

Hidrolisis Hidrolisis Hidrolisis amilum Hidrolisis amilum Hidrolisis protein Hidrolisis protein