HUBUNGAN POLIMORFISME GEN APOLIPOPROTEIN
A5-1131T>C dengan KADAR TRIGLISERIDA pada
SINDROMA METABOLIK
OLEH :
CHRISTINE VERAWATY SIBUEA
107008007
PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
HUBUNGAN POLIMORFISME GEN APOLIPOPROTEIN
A5-1131T>C dengan KADAR TRIGLISERIDA pada
SINDROMA METABOLIK
Diajukan untuk melengkapi persyaratan memperoleh gelar Magister Biomedik dalam Program Studi Magister Biomedik Fakultas Kedokteran Universitas
Sumatera Utara
OLEH :
CHRISTINE VERAWATY SIBUEA
107008007
PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
2015
Judul Tesis :HUBUNGAN POLIMORFISME GEN APOLIPOPROTEIN A5-1131T>C dengan KADAR
TRIGLISERIDA pada SINDROMA METABOLIK
Nama Mahasiswa : Christine Verawaty Sibuea
Nomor Pokok : 107008007
Program Studi : Ilmu Biomedik
Menyetujui,
Komisi Pembimbing
dr. Yahwardiah Siregar, Ph.D.
Ketua Anggota
dr. Mutiara Indah Sari, M. Kes.
Ketua Program Studi Biomedik, Dekan,
dr. Yahwardiah Siregar, Ph.D.
NIP : 195508071985032001 NIP : 195402201980111001
Prof. dr. Gontar A. Siregar, SpPD., KGEH.
Telah diuji pada
Tanggal : 9 Februari 2015
PANITIA PENGUJI TESIS
Ketua : Dr. Yahwardiah Siregar, PhD. Anggota : 1. dr. Mutiara Indah Sari, M. Kes.
2. dr. Henny Syahrini, M. Ked (PD), SpPD.
3. dr. Dewi Indah Sari Siregar, M. Ked (Clin-Path), SpPK.
ABSTRAK
Sindroma metabolik merupakan kumpulan kelainan metabolik dengan prevalensi yang tinggi pada beberapa populasi, dan sebagai faktor resiko terjadinya penyakit kardiovaskular dan stroke dengan mortalitas yang tinggi. Dislipidemia yang terjadi pada sindroma metabolik adalah peningkatan kadar trigliserida. Apolipoprotein A5 (ApoA5) mengatur kadar trigliserida dengan menurunkan produksi VLDL (Very Low Density Lipoprotein) dan meningkatkan aktifitas LPL (Lipoprotein Lipase). Polimorfisme apolipoprotein -1131T>C di area promotor dihubungkan dengan peningkatan kadar trigliserida pada sindroma metabolik. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui hubungan polimorfisme apolipoprotein A5 -1131T>C dengan kadar trigliserida pada sindroma metabolik.
Penelitian ini merupakan penelitian case control dengan 50 subjek penelitian, yaitu 25 subjek sindroma metabolik dan 25 subjek non sindroma metabolik. Polimorfisme ApoA5 -1131T>C diteliti pada gel agarosa 5% setelah dilakukan RFLP dengan enzim restriksi MseI. Data yang diperoleh dianalisa dengan menggunakan uji t - tidak berpasangan.
Hasil uji t - tidak berpasangan menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna dari polimorfisme ApoA5 -1131T>C pada kadar trigliserida sindroma metabolik dan non sindroma metabolik, baik genotif TT maupun genotif CC dengan p<0,05. Genotif TT lebih banyak ditemukan pada sindroma metabolik daripada non sindroma metabolik (72% vs 32%), genotif CC ditemukan lebih sedikit pada sindroma metabolik daripada non sindroma metabolik (28% vs 68%), dan tidak ditemukan heterozigot TC. Penelitian ini membuktikan bahwa polimorfisme ApoA5 -1131T>C tidak mempengaruhi kadar trigliserida pada sindroma metabolik. Peningkatan kadar trigliserida pada sindroma metabolik mungkin dipengaruhi oleh SNPs ApoA5 lainnya.
ABSTRACT
Metabolic syndrome is a cluster metabolic disorder and has a high prevalence in many populations. It has been known as a risk of high mortality disease such as cardiovascular disease and stroke. Dyslipidemia in metabolic syndrome is the elevated of trigyceride levels. Apolipoprotein A5 (ApoA5) regulates triglyceride levels by inhibiting VLDL (Very Low Density Lipoprotein) production and enhancing LPL (Lipoprotein Lipase) activity. Polymorphism apolipoprotein A5 -1131T>C at the promotor area is associated with the elevated of triglyceride levels of metabolic syndrome. The aim of this studied was to perceive the association of polymorphism apolipoprotein A5-1131T>C with the triglyceride levels of metabolic syndrome.
This research was a case control experimental using 50 subjects, 25 metabolic syndrome and 25 non metabolic syndrome. Polymorphism apolipoproteinA5-1131T>C was identified at the 5% agarose gel after being RFLP by MseI restriction enzyme. Data was analized using t - independent test.
There was a significant difference of polymorphism apolipoprotein A5-1131T>C with the triglyceride levels of metabolic syndrome and non metabolic syndrome, either TT genotype or CC genotype (p<0,05). TT genotype was higher in metabolic syndrome than in non metabolic syndrome (72% vs 32%), CC genotype was lower in metabolic syndrome than in non metabolic syndrome (28% vs 68%), and no heterozygote TC finding. This research showed that polymorphism apolipoprotein A5-1131T>C did not influence the triglyceride levels of metabolic syndrome. The elevated of triglyceride levels of metabolic syndrome might be influenced by other SNPs ApoA5.
Key words : metabolic syndrome, ApoA5, ApoA5 -1131T>C, triglyceride, VLDL, LPL.
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala kasih dan rahmatNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan tesis ini dengan judul “Hubungan Polimorfisme Gen Apolipoprotein A5-1131T>C dengan Kadar Trigliserida pada Sindroma Metabolik”, sebagai salah satu syarat dalam menyelesaikan jenjang Pendidikan Magister pada Program Studi Ilmu Biomedik Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara. Proses penulisan tesis ini tidak lepas dari bimbingan, bantuan, dukungan dan doa dari berbagai pihak.
Pada kesempatan ini ucapan terima kasih yang sebesar-besarnya saya sampaikan dengan hormat kepada :
1. Prof. Dr. Syahril Pasaribu, DTMH, MSc (CTM), SpA(K), Rektor Universitas Sumatera Utara.
2. Prof. dr. Gontar A. Siregar, SpPD-KGEH., Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara.
3. Dr. Yahwardiah Siregar, PhD., Ketua Program Studi Biomedik, juga sekaligus sebagai Ketua Komisi Pembimbing yang senantiasa bersedia membimbing, memberikan masukan dan pemikiran dengan penuh kesabaran kepada penulis untuk menyelesaikan tesis ini.
4. dr. Mutiara Indah Sari, M. Kes., Sekretaris Program Studi Biomedik, juga sebagai Anggota Komisi Pembimbing, yang telah banyak memberikan bimbingan, masukan, motivasi dan dukungan kepada penulis untuk menyelesaikan tesis ini.
6. dr. Dewi Indah Sari Siregar, M. Ked (Clin-Path), SpPK., Dosen Pembanding yang juga turut meluangkan waktu memberikan masukan untuk perbaikan tesis ini.
7. Prof. Dr. Bistok Saing, SpA(K), Dekan FK Universitas HKBP Nommensen yang telah memberikan dukungan dan motivasi kepada penulis.
8. Kepada suami (Salem Aristo Limbong, ST), ibu mertua (Martha Simanjuntak) dan anak-anak saya (Ivanri Kristo Limbong, Rahel Clara Limbong, Daffin Evran Limbong), atas pengertian, perhatian, dukungan dan doa sehingga saya dapat menyelesaikan pendidikan ini.
9. Kepada teman-teman seangkatan 2010 yang banyak memberikan dorongan dan motivasi.
10. Kepada rekan kerja dan pegawai di FK Universitas HKBP Nommensen yang telah memberikan dukungan, doa dan semangat.
Penulis berharap, semoga proses pendidikan yang dijalani penulis dapat memberikan manfaat baik bagi penulis sendiri dan bagi orang lain. Penulis berterima kasih atas masukan, saran dan kritikan dari semua pihak guna perbaikan dari penelitian ini.
Medan, 9 Februari 2015 Penulis
(Christine Verawaty Sibuea)
RIWAYAT HIDUP
Nama : dr. Christine Verawaty Sibuea Jenis kelamin : Perempuan
Tempat/ tanggal lahir : Medan / 15 Januari 1979
Agama : Kristen ProtestanAlamat : Jl. Lizadri Putra Komp. Setia Budi Vista Blok F No.9
No. HP : 081375640804 / 08116178678
Pendidikan :
Tahun 1985 – 1991 : SD Methodist 6 Medan Tahun 1991 - 1994 : SMP Negeri 6 Medan Tahun 1994 - 1997 : SMU Negeri 11 Medan Tahun 1997 - 2003 : Fakultas Kedokteran USU
Tahun 2010 – sekarang : Program Magister Ilmu Biomedik FK USU
Pekerjaan :
2004 - 2008 : Dokter Jaga RS St. Elisabeth Medan
DAFTAR ISI
Halaman
Abstrak ... i
Abstract ... ii
Kata Pengantar ... iii
Riwayat Hidup ... v
Daftar Isi ... vi
Daftar Tabel ... viii
Daftar Gambar ... ix
Daftar Lampiran ... x
Daftar Singkatan ... xi
Bab I Pendahuluan ... 1
2.1.1 Defenisi sindroma metabolik ... 8
2.1.2 Kriteria diagnosa sindroma metabolik ... 9
2.2 Dislipidemia ... 11
2.2.1 Defenisi dislipidemia ... 11
2.2.2 Patofisiologi dislipidemia ... 11
2.2.3 Metabolisme asam lemak bebas (Free fatty acid) ... 14
2.3 Lipoprotein ... 15
2.4 Apolipoprotein ... 17
2.4.1 Golongan apolipoprotein... 17
2.4.2 Metabolisme apolipoprotein ... 18
2.4.3 Apolipoprotein A5 ... 27
2.4.4 Mekanisme kerja apolipoprotein A5 mengatur trigliserida ... 29
2.4.5 Polimorfisme apolipoprotein A5 ... 32
2.5 Kerangka Teori ... 34
Bab III Metode Penelitian ... 35
3.1 Jenis Penelitian ... 35
3.2 Populasi dan Sampel ... 35
3.2.1 Populasi ... 35
3.2.2 Sampel Penelitian ... 35
3.2.2.1 Kriteria Inklusi dan Eksklusi ... 35
3.2.3 Besar Sampel ... 36
3.3 Variabel Penelitian ... 37
3.4 Defenisi Operasional ... 37
3.5 Kerangka Konsep ... 39
3.6 Prosedur Penelitian ... 40
3.6.1 Alat dan Bahan Penelitian ... 40
3.6.2 Cara Kerja ... 42
3.7 Alur Penelitian ... 46
3.8 Analisa Data ... 46
Bab IV Hasil dan Pembahasan ... 47
4.1 Hasil ... 47
4.1.1 Subjek Penelitian ... 47
4.1.2 Polimorfisme Apolipoprotein A5-1131T>C pada Sindroma Metabolik dan Non Sindroma Metabolik ... 49
4.1.3 Hubungan Polimorfisme Apolipoprotein A5-1131T>C dengan Kadar Trigliserida pada Sindroma Metabolik dan Non Sindroma Metabolik ... 51
4.1.4 Hardy-Weinberq Equilibrium ... 52
4.2 Pembahasan ... 54
Bab V Kesimpulan dan Saran ... 61
5.1 Kesimpulan ... 61
5.2 Saran ... 62
Daftar Pustaka ... 63
DAFTAR TABEL
Halaman Tabel 2.1 Kriteria Diagnosa dan Defenisi Sindroma Metabolik ... 10 Tabel 2.2 Komposisi Lipid Lipoprotein ... 16 Tabel 2.3 Apolipoprotein, Berat Molekul, Lipoprotein dan Fungsinya ... 18 Tabel 4.1 Kadar Trigliserida Sindroma Metabolik dan Non Sindroma Metabolik .. 47 Tabel 4.2 Polimorfisme Apolipoprotein A5-1131T>C pada Sindroma Metabolik
dan Non Sindroma Metabolik ... 50 Tabel 4.3 Polimorfisme Apolipoprotein A5-1131T>C pada Hipertrigliseridemia dan Normotrigliseridemia ... 51 Tabel 4.4 Hubungan Polimorfisme Apolipoprotein A5-1131T>C dengan Kadar
Trigliserida pada Sindroma Metabolik dan Non Sindroma Metabolik ... 52 Tabel 4.5 Frekuensi Genotif dan Alel Apolipoprotein A5-1131T>C pada Sindroma Metabolik dan Non Sindroma Metabolik ... 53
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1. Resistensi Insulin dan Dislipidemia ... 12
Gambar 2.2. Ukuran, Densitas, dan Komposisi Lipoprotein ... 15
Gambar 2.3. Metabolisme Kilomikron dan VLDL ... 20
Gambar 2.4. Pengambilan Ulang dan Degradasi LDL dalam Sel ... 23
Gambar 2.5. Metabolisme HDL dan Kolesterol ... 24
Gambar 2.6. Lipoprotein dan Pengangkutan Lipid ... 27
Gambar 2.7. Peranan ApoA5 dalam Pengaturan Trigliserida ... 31
Gambar 2.8. Kerangka Teori ... 34
Gambar 3.1. Kerangka Konsep ... 39
Gambar 3.2. Alur Penelitian ... 46
DAFTAR LAMPIRAN
No. Judul Halaman
1. Data Subjek Penelitian ... 73
2. Konsentrasi dan Absorbansi Subjek Penelitian ... 75
3. Uji Normalitas Karakteristik Subjek Penelitian ... 77
4. Uji t – tidak berpasangan Karakteristik pada Sindroma Metabolik dan Non Sindroma Metabolik (data terdistribusi normal) ... 78
5. Uji t – tidak berpasangan Kadar Trigliserida Sindroma Metabolik dan Non Sindroma Metabolik ... 79
6. Hardy Weinberg Equilibrium Kadar Trigliserida Sindroma Metabolik dan Non Sindroma Metabolik ... 81
7. Surat Ethical Clearance ... 83
8. Surat Keterangan Laboratorium ... 84
9. Alat dan bahan yang Digunakan selama Penelitian ... 85
10. Foto Kegiatan Selama Penelitian ... 87
11. Hasil PCR dan RFLP ... 88
DAFTAR SINGKATAN
Apo Apolipoprotein
ACAT Acyl-CoA Cholesterol Acyltransferase BMI Body Mass Index
CETP Cholesteryl Ester Transfer Protein
CM Chylomicron
CURL Compartment for Uncoupling of Receptors and Ligand DNA Deoxyribose-Nucleic Acid
GWAS Genome-Wide Association Studies HWE Hardy Weinberg Equilibrium HDL High Density Lipoprotein HSPGs Heparin Sulfate Proteoglycan IDL Intermediate Density Lipoprotein KGD Kadar Gula darah
LCAT Lecythin Cholesterol Acyltransferase LDL Low Density Lipoprotein
LE Linkage Equlibrium LPL Lipoprotein Lipase LXR Liver Receptor Ligands
NCEP ATP III National Cholesterol Education Program Expert Panel on Detection, Evaluation and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults Treatment Panel III
PCAT Phosphatidyl Cholin PCR Polymerase Chain Reaction
PPRE Peroxisome Proliferator Response Element RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism
ROR-V Retinoic Acid Receptor –Related Orphan Receptor-α SNPs Single Nucleotide Polymorphism
SR-B1 Scavenger Receptor class B type 1 VLDL Very Low Density Lipoprotein
