PEMERIKSAAN PROFIL LIPID

(1)

PEMERIKSAAN PROFIL LIPID

OLEH :

dr. Ida Ayu Putri Wirawati, Sp.PK

PROGRAM PENDIDIKAN DOKTER SPESIALIS PROGRAM STUDI PATOLOGI KLINIK

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS UDAYANA

2018

(2)

DAFTAR ISI

Halaman

DAFTAR ISI ... ii

DAFTAR TABEL ... iii

DAFTAR GAMBAR ... iii

I. PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Rumusan Masalah ... 3

1.3 Tujuan ... 3

II. PEMERIKSAAN PROFIL LIPID 2.1 Pemeriksaan Kolesterol ... 4

2.1.1 Defenisi Kolesterol ... 4

2.1.2 Metabolisme Kolesterol ... 6

2.1.3 Sintesis Kolesterol ... 6

2.1.4 Keaadaan Klinis ... 8

2.1.5 Metode dan Prinsip Pemeriksaan ... 8

2.1.6 Pengambilan dan Persiapan Sampel ... 9

2.1.7 Penyimpanan Sampel ... 9

2.1.8 Nilai Normal ... 9

2.1.9 Interferensi ... 10

2.2 Pemeriksaan Trigliserida ... 10

2.2.1 Defenisi Trigliserida ... 10

2.2.2 Metabolisme Trigliserida ... 11

2.2.3 Sintesis Trigliserida ... 12

2.3 Pemeriksaan Lipoprotein ... 15

2.3.1 Defenisi Lipoprotein ... 15

(3)

2.3.2 Metabolisme Lipoprotein ... 16

2.3.3 Sintesis Lipoprotein ... 18

DAFTAR PUSTAKA ... 24

(4)

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Lipid memiliki peran penting dalam hampir semua aspek kehidupan, termasuk (1) berfungsi sebagai hormon, (2) berfungsi sebagai sumber energi, (3) membantu pencernaan, dan (4) bertindak sebagai komponen struktural dalam membran sel. Selain itu, lipid dan lipoprotein, partikel yang mengangkut lipid dalam darah, sangat terlibat dalam perkembangannya aterosklerosis - kelainan umum yang terjadi saat lemak, kolesterol, dan zat lain terbentuk di dinding arteri dan membentuk struktur keras yang disebut plak. Ini adalah proses patogenik yang merupakan penyebab utama gangguan kardiovaskular umum (1) infark miokard, (2) penyakit serebrovaskular, dan (3) penyakit vaskular perifer. Lipid merupakan senyawa yang mengandung karbon dan hydrogen yang umumnya hidrofobik, tidak larut dalam air tetapi dalam pelarut organik. Lipid memegang peranan penting untuk berfungsinya sel dan sebagai sumber energi, juga sebagai pelindung badan, pembentukan sel, sintesis hormon steroid dan prekursor prostaglandin. Lipid mengandung karbon dan hidrogen yang umumnya hidrofobik: tidak larut dalam air, tetapi larut dalam pelarut organik.

Istilah lipid berlaku untuk kelas senyawa yang dapat larut dalam pelarut organik namun hampir tidak larut dalam air. Lipid terutama mengandung ikatan karbon-hidrogen nonpolar (C-H) dan sering menghasilkan asam lemak dan / atau

(5)

alkohol kompleks setelah hidrolisis. Beberapa lipid juga mengandung gugus bermuatan atau polar, yang membuat lipid ini amphipathic dengan afinitas untuk pelarut air dan organik, seperti lipid seperti fosfolipid, yang ditemukan pada antarmuka membran biologis yang berair.Fosfolipid adalah golongan lipid yang merupakan komponen utama dari semua membran sel, karena dapat membentuk lapisan ganda lipid. Kebanyakan fosfolipid mengandung digliserida, gugus fosfat, dan molekul organik sederhanaseperti kolin; Satu pengecualian untuk aturan ini adalah sphingomyelin, yang berasal dari sphingosine bukan gliserol. Secara keseluruhan lipid dibagi menjadi tiga kelompok besar lemak netral (triggliserida), lipid terkonjugasi (lipoprotein), dan sterol (kolesterol). Kolesterol merupakan komponen utama dari membran semua sel. Kolesterol adalah alkohol steroid dengan 27 atom karbon yang tersusun dalam sistem cincin sterane tetrasiklin, dengan sidechain C-H. Meskipun hal ini relatif hidrofobik, kolesterol mengandung gugus polar hidroksil (OH) pada cincin A-nya, demikian membuatnya amphipathic (yaitu, memiliki sifat hidrofilik dan lipofilik) dan memperhitungkan kemampuannya untuk menyisip kedalam membran sel.

Trigliserida adalah salah satu jenis lemak yang dibawa dalam aliran darah dan juga merupakan zat yang disimpan di dalam jaringan sebagai hasil dari konversi sebagian besar jenis lemak di dalam tubuh. Trigliserida merupakan hasil konversi kalori tidak terpakai dan disimpan untuk menyediakan cadangan energi bagi tubuh. Hal tersebut menyebabkan seseorang yang sering mengonsumsi kalori melebihi jumlah yang yang dibutuhkan oleh tubuhnya, akan beresiko memiliki kadar trigliserida tinggi.

(6)

Lipid disintesis di hati dan di usus diangkut di plasma pada kompleks makromolekul yang dikenal sebagai lipoprotein. Lipoprotein terdiri dari partikel non polar (trigliserida dan kolesterol ester), partikel polar (fosfolipid dan kolesterol bebas). Lipid juga mengandung satu atau lebih protein spesifik yang disebut apolipoprotein pada permukaan lipid. Kategori lipoprotein terdiri dari kilomikron, lipoprotein densitas sangat rendah (VLDL), lipoprotein densitas rendah (LDL), lipoprotein densitas tinggi (HDL), lipoprotein (a) yang disebut Lp (a).

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan uraian latarbelakang yang dikemukakan diatas dapat dirumuskan masalah sebagai berikut: “Bagaimana proses pemeriksaan profil lipid yang terdiri dari pemeriksaan kolesterol, pemeriksaan trigliserida dan pemeriksaan lipoprotein (HDL, LDL).”

1.3 Tujuan

Tujuan dari tutor ini untuk mengetahui secara terperinci mengenai pemeriksaan profil lipid yang terdiri dari pemeriksaan kolesterol, pemeriksaan trigliserida dan pemeriksaan lipoprotein (HDL, LDL).

(7)

BAB II

PEMERIKSAAN PROFIL LIPID

2.1 Pemeriksaan Kolesterol 2.1.1. Defenisi Kolesterol

Kolesterol adalah zat alamiah dengan sifat fisik serupa lemak dan berumus steroida (Tjay dan Rahardja, 2007). Kolesterol adalah komponen alamiah dari makanan dan bagian normal dari dari sel binatang seperti daging sapi, babi, kambing ayam, daging unggas, dan telur (Soeharto, 2004). Kolesterol adalah alkohol steroid tak jenuh yang mengandung empat cincin (A, B, C, dan D), dan memiliki ekor rantai sisi C-H tunggal yang mirip dengan asam lemak dalam sifat fisiknya.

Kolesterol ditemukan hampir secara eksklusif pada hewan dan merupakan komponen membran utama dari semua sel. Ini adalah alkohol steroid dengan 27 atom karbon yang tersusun dalam sistem cincin sterane tetrasiklin, dengan sidechain C-H (Gambar 23-1).

Gambar. Struktur Kolesterol, Bishop, dkk (2013)

(8)

Meskipun hal ini relatif hidrofobik, kolesterol memang mengandung gugus polar hidroksil (OH) pada cincin A-nya, demikian membuat amphipathic (yaitu, memiliki sifat hidrofilik dan lipofilik) dan memperhitungkan kemampuannya untuk menyisipkan ke dalam membran sel.

2.1.2. Metabolisme Kolesterol

Diet rata-rata orang Barat mengandung sekitar 300 sampai 450 mg kolesterol per hari, yang sebagian besar berasal dari produk hewani dan produk susu, namun hanya 30% sampai 60% yang diserap. Sebelum diserap, kolesterol pertama kali dilarutkan melalui sebuah proses yang disebut emulsifikasi, yang melibatkan pembentukan misel campuran yang mengandung (1) kolesterol yang tidak teresterifikasi, (2) asam lemak, (3) monogliserida, (4) fosfolipid, dan (5) asam empedu terkonjugasi. Asam empedu, dengan bertindak sebagai deterjen, adalah faktor paling penting dalam pembentukan mikelle. Sebagian besar penyerapan kolesterol terjadi di tengah jejunum dan ileum terminal usus kecil dan dimediasi oleh protein enterosit, NPC1L1 (NiemannPick C1- like 1). Begitu kolesterol memasuki sel mukosa usus, dikemas dengan trigliserida, fosfolipid, dan protein besar yang disebut apolipoprotein (apo) B-48 menjadi partikel lipoprotein besar yang disebut chylomicrons.

Chylomicrons disekresikan ke dalam getah bening dan akhirnya

(9)

memasuki sirkulasi, di mana mereka mengantarkan lipid makanan yang diserap ke hati dan jaringan perifer.

2.1.3. Sintesis Kolesterol

Sintesis kolesterol dari dalam tubuh sekitar 80% dan merupakan produksi dari asetil koenzim A (asetil Ko-A). Asetil Ko-A merupakan prekursor untuk sintesis kolesterol yang dapat dibentuk dari glukosa, asam lemak, dan asam amino. Di dalam hati, dua molekul Co-A lainnya membentuk hidroksi metil glutanil Co-A (HMG Co-A). Reduksi HMG Co-A menghasilkan mevalonat. Reaksi yang dikatalisasi oleh HMG Co-A reduktase ini adalah reaksi penentu kecepatan pembentuk kolesterol mevalonat menghasilkan isoprene yang akhirnya saling bergabung membentuk skualen. Siklisasi skualen menghasilkan system cincin steroid dan sejumlah reaksi selanjutnya menghasilkan kolesterol (Murray dkk, 2007).

Gambar. Sintesis Kolesterol (Sheriff, 2004)

(10)

2.1.4. Keadaan Klinis

Kolesterol meningkat : hipotiroidisme, sindrom nefrotik, diabetes, alkoholisme, dan penyakit hati, berhubungan dengan penyakit jantung koroner

Kolesterol menurun: hipertiroidisme, malnutrisi, luka bakar yang berat

2.1.5. Metode dan Prinsip Pemeriksaan Standar WHO/IFCC

Metode: Kolorimetrik enzimatik (cholesterol oxidase method/CHOD PAP).

Prinsip: Kolesterol ester dipecah oleh kerja dari kolesterol esterase menghasilkan kolesterolbebas dan asam lemak. Kolesterol oksidase kemudian mengatalisis oksidase kolesterol menjadi kolest-4-en-3-on dan hodrogen peroksida. Dengan adanya peroksidase, hidrogen peroksida yang terbentuk mempengaruhi penggabungan oksidatif fenol dan 4-aminofenazon membentuk suatu zat warna kuinon-imin yang berwarna merah.

Gambar. Metode Enzim Koleterol, Bishop, dkk (2013)

(11)

Intensitas warna dari zat warna yang terbentuk proporsional secara langsung dengan konsentrasi kolesterol. Ini ditentukan dengan mengukur peningkatan absorbansi. Panjang gelombang 505 nm (Cobas,2013).

2.1.6. Pengambilan dan Persiapan Sampel

Sampel yang diuji: serum dan plasma. Plasma: plasma Li-heparin dan K2-EDTA.

Jangan gunakan sitrat, oksalat atau fluorida.

Sampel puasa dan non puasa dapat digunakan.

Sentrifugasi sampel sebelum melakukan pengujian. (Cobas, 2013)

2.1.7. Penyimpanan Sampel 7 hari pada 15 – 25⁰c 7 hari pada 2 – 8⁰c

3 bulan pada -15 – (-25⁰c) (Cobas, 2013)

2.1.8. Nilai Normal

Nilai normal kolesterol total, kolesterol LDL, kolesterol HDL, dan trigliserid menurut National Cholesterol Education Program Adult Panel III (NCEP ATP III) tahun 2001

(12)

2.1.9. Interferensi

Ikterik: bila kadar bilirubin terkonjugasi 16 mg/dL, bilirubin tidak terkonjugasi 14 mg/dL.

Hemolisis bila konsentrasi hemoglobin 700 mg/dL.

Lipemi berhubungan dengan trigliserida.

Intosikasi asetaminofen menyebabkan hasil rendah palsu.

2.2 Pemeriksaan Trigliserida 2.2.1. Defenisi Trigliserida

Trigliserida adalah ester dari gliserol alkohol trihidrat dengan 3 rantai panjang asam lemak. Trigliserida mengandung tiga molekul asam lemak yang terikat pada satu molekul gliserol dengan ikatan ester di salah satu dari tiga posisi ikatan stereokimia yang berbeda.

(13)

Gambar. Rumus Kimia Trigliserid (Bishop, dkk, 2013)

2.2.2. Metabolisme Trigliserida

Trigliserid disintesis dari gliserol 3 fosfat dan asil-KoA. Pada jaringan adiposa, enzim gliserol kinase tidak dapat digunakan, sehingga gliserol tidak dapat menghasilkan gliserol 3-fosfat, sehingga harus dipasok oleh glukosa melalui proses glikolisis. Trigliserid akan terhidrolisis menjadi asam lemak bebas dan gliserol oleh lipase peka hormon. Gliserol yang dihasilkan tidak dapat digunakan, sehingga masuk ke dalam darah dan diserap serta digunakan di dalam jaringan. Asam lemak bebas yang terbentuk tadi bisa diubah lagi menjadi asil-KoA dengan bantuan asil- KoA sintetase di jaringan adiposa. Asil-KoA ini nantinya bisa di reesterifikasi lagi dengan gliserol 3-fosfat sehingga menghasilkan trigliserid (Murray dkk, 2009).

(14)

Gambar. Metabolisme trigliserid di jaringan adiposa (Murray dkk, 2009).

2.2.3. Sintesis Trigliserida

Trigliserid atau triasilgliserol mulanya dibentuk dari gliserol 3- fosfat yang berikatan dengan asil Ko-A membentuk fosfatidat (1,2- diasilgliserol fosfat). Fosfatidat dibantu fosfatidat fosfohidrolase menjadi 1,2 diasilgliserol. Dengan bantuan diasilgliserol asiltransferase (DGAT) akan diubah menjadi triasilgliserol (Murray dkk, 2009).

Gambar. Gambaran singkat biosintesis trigliserid (Murray dkk, 2009)

(15)

2.2.4. Keadaan Klinis

Peningkatan TG : risiko tinggi aterosklerosis

Terjadi peningkatan bisa karena keturunan, DM, nefrosis, obstruksi bilier, penyakit metabolik

2.2.5. Metode dan Prinsip Pemeriksaan

Gambar. Metode Enzim Trigliserida (Bishop, dkk, 2013)

2.2.6. Pengambilan dan Persiapan Sampel

Sampel yang diuji: serum dan plasma. Plasma: plasma Li-heparin dan K₂-EDTA.

Jangan gunakan sitrat, oksalat atau fluorida.

Puasa selama 10-12 jam sebelum darah diambil.

2.2.7. Penyimpanan Sampel 10 hari pada suhu 4⁰C 3 bulan pada suhu -20⁰c

(16)

2.2.8. Nilai Normal

Nilai normal kolesterol total, kolesterol LDL, kolesterol HDL, dan trigliserid menurut National Cholesterol Education Program Adult Panel III (NCEP ATP III) tahun 2001.

2.2.9. Interferensi

Ikterik: bila konsentrasi bilirubin 86 µmol/L atau 5 mg/dL.

Hemolisis bila konsentrasi hemoglobin 373 µmol/L atau 600 mg/dL.

Intosikasi asetaminofen menyebabkan hasil rendah palsu.

Obat: Ca-Dobesilate, L-alpha metildopa, levodopa, Fenilbutazon.

Asam aksorbat 2 mg/dL menyebabkan hasil redah palsu.

(17)

2.3 Pemeriksaan Lipoprotein 2.3.1. Defenisi Lipoprotein

Lipoprotein merupakan gabungan antara lipid dengan protein.

Lipoprotein merupakan transporter dalam aliran bagi kolesterol dan trigliserida yang membentuk kompleks bersama apoprotein (fosfolipid dan protein).

Gambar. Struktur Lipoprotein, (Bishop, dkk, 2013)

Ada 4 klas mayor dari lipoprotein plasma yang masing-masing tersusun atas beberapa jenis lipid, yaitu:

1) Kilomikron

Kilomikron berfungsi sebagai alat transportasi trigliserid dari usus ke jaringan lain, kecuali ginjal.

2) VLDL (very low - density lypoproteins)

VLDL mengikat trigliserid di dalam hati dan mengangkutnya menuju jaringan lemak.

3) LDL (low - density lypoproteins)

LDL berperan mengangkut kolesterol ke jaringan perifer.

(18)

4) HDL (high - density lypoproteins)

HDL mengikat kolesterol plasma dan mengangkut kolesterol ke hati.

Gambar. Perbandingan komposisi penyusun 4 klas besar lipoprotein, Murray 2003

Karakteristik lipoprotein menurut Bishop, dkk,2013 sebagai berikut :

2.3.2. Metabolisme Lipoprotein

Metabolisme lipoprotein dibagi atas tiga jalur (Adam, 2009) :

2.3.2.1. Jalur Metabolisme Eksogen Hasil akhir dari pencernaan lemak yang berupa trigliserid dan kolesterol yang berada di usus halus akan diserap ke dalam eritrosit mukosa usus halus. Trigliserid

(19)

akan diserap sebagai Free Fatty Acid (FFA) sedangkan kolestrol sebagai kolesterol. Dalam usus halus FFA akan diubah kembali menjadi trigliserid dan kolesterol akan teresterifikasi menjadi kolesterol ester, kemudian keduanya bersama fosfolipid dan apolipoprotein akan membentuk kilomikron. Kemudian kilomikron akan masuk ke saluran limfe dan masuk ke dalam aliran darah. Di dalam pembuluh darah, trigliserid dalam kilomikron mengalami hidrolisi dibantu oleh enzim lipoprotein lipase (LPL) menjadi FFA yang akan disimpan sebagai trigliserid kembali di jaringan lemak. Kilomikron yang sudah kehilangan sebagina besar trigliserid dinamakan kilomikron remnant. Kilomikron rremnant yang mengandung kolesterol ester akan dibawa ke hati.

2.3.2.2. Jalur Metabolisme Endogen Trigliserid dan kolesterol yang telah disintesis di hati dan disekresi ke dalam sirkulasi sebagai VLDL yang kemudian akan mengalami hidrolisis dengan bantuan enzim LPL menjadi IDL. IDL juga akan mengalami hidrolisis menjadi LDL. Sebagian dari VLDL, IDL dan LDL akan mengangkut kolesterol ester kembali ke hati. Sebagian dari kolesterol yang ada di LDL akan dibawa ke hati dan jaringan steroidogenik yang mempunyai reseptor untuk LDL. Sebagian lagi dari LDL akan mengalami oksidasi dan ditangkap reseptor scavenger-A di makrofag dan akan menjadi sel busa.

(20)

2.3.2.3. Jalur Reverse Cholesterol Transport HDL nascent di lepaskan sebagai partikel kecil yang miskin kolestrol yang nantinya akan mengambil kolestrtol dari makrofag, HDL nascent berubah menjadi HDL dewasa bulat. Setelah mengambil kolesterol bebas dari makrofag, kolesterol bebas akan diesterifikasi menjadi kolesterol ester dibantu enzim lecithin cholesterol acyltransferase (LCAT). Sebagian kolesterol ester yang dibaawa HDL menuju ke hati dan ditangkap oleh reseptor scavenger B type I dan sebagian lagi akan dipertukarkan dengan trigliserid dari VLDL dan IDL yang dibantu cholesteeerol ester transfer protein.

Gambar. Metabolisme Lipoprotein, Bishop, dkk (2013) 2.3.3. Sintesis Lipoprotein

Gambar. Ilustrasi peran masing-masing dari 4 klas besar lipoprotein, Murray, dkk, 2003

(21)

2.3.4. Keadaan Klinis

Pentingnya klinis lipid terutama dikaitkan dengan kontribusinya terhadap penyakit jantung koroner (PJK). Sejumlah penelitian telah membuktikan bahwa ketika kadar kolesterol total dan kolesterol LDL (LDL-C) tinggi, kejadian dan prevalensi PJK juga tinggi. Berbeda dengan LDL-C, peningkatan konsentrasi kolesterol HDL (HDL-C) telah terbukti melindungi CHD baik pada penelitian epidemiologi maupun uji klinis.

Gambar. Faktor Resiko PJK (Bishop, dkk, 2013)

(22)

2.3.5. Metode dan Prinsip Pemeriksaan Pemeriksaan HDL:

Gambar. Metode Pemeriksaan HDL (Cobas, 2017)

Pemeriksaan LDL:

1. Cara tidak langsung:

Formula Friedewald Beta quantification 2. Cara langsung:

Enzimatik Kolorimetri Formula Friedewald

LDL = [Total Kolesterol] – [HDL Kolesterol] – [Trigliserida] /5

(23)

Gambar. Metode Pemeriksaan LDL (Cobas, 2017)

2.3.6. Pengambilan dan Persiapan Sampel Pemeriksaan HDL:

Serum : SST, PLAIN

Plasma: Li-heparin atau K2-EDTA Sampel fasting dan non fasting Pemeriksaan LDL:

Serum : SST, PLAIN

Plasma : Li-heparin, K2∕K3-EDTA plasma Sampel fasting dan non-fasting dapat dipakai

2.3.7. Penyimpanan Sampel

HDL: Stabilitas: 7 hari pada suhu 2-8⁰ C dan 30 hari pada suhu -70⁰ C LDL: Stabilitas : 7 hari pada suhu 2-8⁰ C dan 1 tahun pada suhu -70⁰ C

(24)

2.3.8. Nilai Normal

Nilai normal kolesterol total, kolesterol LDL, kolesterol HDL, dan trigliserid menurut National Cholesterol Education Program Adult Panel III (NCEP ATP III) tahun 2001.

2.3.9. Interferensi HDL:

Gangguan fungsi hati  gangguan metabolisme lipid  negatif bias pada HDL

Hemolisis, Ikterus,Lipemia tidak berpengaruh

Peningkatan asam lemak bebas dan protein terdenaturasi, peningkatan imunoglobulin  peningkatan palsu.

(25)

LDL:

Ikterus, hemolisis dan lipemia tidak berpengaruh secara signifikan Fungsi hati abnormal menyebabkan bias negatif hasil LDL

(26)

DAFTAR PUSTAKA

Anonimous. 2017. COBAS. Vol 11.0 English.

Bishop M. L, dkk. 2013. Clinical Chemistry: Principles, Techniques, and Correlations. USA.

Biol Res Nurs. Low-Density Lipoprotein Cholesterol, Apolipoprotein B, and Risk of Coronary Heart Disease: From Familial Hyperlipidemia to Genomics.

2013;15:292-308

Carl A. B., dan David E. B. 2015. Tietz Fundamentals Of Clinical Chemistry And Molecular Diagnostics, Seventh Edition. USA

Guyton AC, Hall JE, 1996, Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, Edisi IX, Penerjemah: Setiawan I, Tengadi LMAKA, Santoso A, Jakarta: EGC

Murray RK, Granner DK, Mayes PA, Rodwell VW, 2003, Biokimia Harper, Edisi XXV, Penerjemah Hartono Andry, Jakarta: EGC

Steven M. Haffner, David G, Orloff,Michael A. Proschan, D.J. Sanford Schwartz, Christopher T. Sempos.Third Report of the Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III).2001: 1-27 2.