ii
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN DAN BATANG TUMBUHAN
MANGROVE
Rhizophora stylos
DALAM MENGHAMBAT
PERTUMBUHAN BAKTERI
Aeromonas hydrophila
SECARA
IN-VITRO
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi sebagian syarat Mencapai Derajat Sarjana S-1
Disusun oleh : YUNITASARI 1201070053
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
vi
PERSEMBAHAN
Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT yang telah memberikan kenikmatan yang sungguh luar biasa dengan selesainya penulisan skripsi ini. Skripsi ini penulis persembahkan untuk:
1. Kedua orang tua mama dan abah yang selalu memberikan do’a dan kasih sayangnya.
vii MOTTO
Barang siapa mempermudah kesulitan orang lain, maka Allah akan
mempermudah urusannya di dunia dan akhirat
(H.R. Muslim)
viii
PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN DAN BATANG TUMBUHAN
MANGROVE
Rhizophora stylosa
DALAM MENGHAMBAT
PERTUMBUHAN BAKTERI
Aeromonas hydrophila
SECARA
IN-VITRO
ABSTRAK
Penelitian yang berjudul penggunaan ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove Rhizophora stylosa dalam menghambat pertumbuhan bakteri Aeromonas
hydrophila secara in-vitro telah dilaksanakan pada bulan Februari-September 2016 di
Labolatorium Mikrobiologi dan Labolatorium Biologi Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui penggunaan ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa dalam menghambat pertumbuhan bakteri A. hydrophila. Ekstraksi dilakukan dengan mengambil daun dan batang mangrove R. stylosa menggunakan pelarut non polar (n-heksana) dan pelarut polar (metanol). Rancangan penelitian yang digunakan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 3 faktor yaitu : bagian organ tumbuhan (daun dan batang), strain bakteri A. hydrophila (GPl-04, GL-01, GJ-01, GK-01, GL-02, GB-01) dan konsentrasi ekstrak (0%, 10%, 20%, dan 30%). Metode yang digunakan adalah eksperimen dengan 48 kali perlakuan dan 3 kali ulangan. Parameter yang diamati adalah diameter zona hambatan. Analisis data menggunakan analisis Nonparametrik (Kruskal-Wallis) dengan taraf kepercayaan 95%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak metanol daun R. stylosa yang paling efektif digunakan yaitu pada konsentrasi 30% dengan diameter zona hambat yang paling tinggi yaitu dengan rata-rata 1.73 mm pada strain GJ-01, sedangkan pada ekstrak metanol batang R. stylosa yang paling efektif digunakan pada konsentrasi 30% menghasilkan diameter zona hambat yang paling tinggi dengan rata-rata 1.6 mm pada strain GL-01. Hasil ekstrak n-heksan daun R. stylosa yang paling efektif digunakan yaitu pada konsentrasi 20% dengan diameter zona hambat yang tertinggi dengan rata-rata 1.16 mm pada strain GJ-01, sedangkan pada ekstrak n-heksan batang R. stylosa
yang paling efektif yaitu pada konsentrasi 10% dengan diameter zona hambat yang paling tinggi dengan rata-rata 1.08 mm pada strain GK-01.
ix
UCAPAN TERIMA KASIH
Assalamu’alaikum Wr.Wb.
Alhamdulilah, segala puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah menunjukan kuasanya dengan memberikan rahmat dan karuniaNya kepada pelulis, sehingga penulis dapat menyusun skripsi yang berjudul “PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN DAN BATANG TUMBUHAN MANGROVE Rhizophora
stylosa DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas
hydrophila SECARA IN-VITRO “ sebagai syarat untuk memperoleh gelar
kesarjanaan S1. Terimakasih dengan setulus-tulusnya penulis sampaikan kepada ibu Dini Siswani Mulia, S.,Pi. M.Si selaku pembimbing I dan Drs. Heri Maryanto, M.Si selaku pembimbing II yang telah memberikan arahan dan bimbingannya dalam penyusunan skripsi ini.
Penyusunan skripsi ini terwujud atas dukungan dan bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, pada kesempatan kali ini penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1. Bapak Drs. Pudiyono, M.Hum, selaku dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Bapak Drs. Arief Husin, M.Si, selaku Kepala Program Studi Pendidikan Biologi. 3. Dewan penguji skripsi Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan
x
4. Seluruh dosen Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah membimbing dan memberikan ilmunya kepada penulis selama perkuliahan.
5. Kepada kedua Orang tua Mama Sri harti dan Abah Danusi yang selalu
memberikan kasih sayang dan Do’a yang tak pernah putus.
6. Adik-adik ku Nurjanah dan Tito yang selalu memberikan motivasi.
7. Kepada Irfan Rifa’i seseorang yang istimewa yang selalu menyemangati dan menjadikan saya lebih baik lagi.
8. Sahabat-sahabat Kos (Indah, Tata, Isma dan Lina) yang selama ini menyemangati dalam penulisan skripsi ini.
9. Seluruh teman-teman Pendidikan Biologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto angkatan 2012 yang selalu memotivasi dan memberikan masukan dalam perbaikan penulisan sekripsi.
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini masih terdapat banyak kekurangan bahkan jauh dari sempurna. Demikian, semoga dengan terselesaikannya skripsi ini berguna bagi para pembaca pada umumnya dan khususnya bagi penulis serta Program Studi Pendidikan Biologi.
Wassalamu’alaikum wr.wb.
Purwokerto, 13 Januari 2017
xi DAFTAR ISI
Halaman
UCAPAN TERIMA KASIH ... ix
DAFTAR ISI ... xi
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 6
2.1 Tumbuhan mangrove Rhizophorastylosa ... 6
2.1.1 Klasifikasi Rhizophora stylosa ... 6
2.1.2 Deskripsi Rhizophora stylosa ... 6
2.1.3 Kandungan fitokimia R. stylosa ... 8
2.2 Bakteri Aeromonas hydrophila ... 9
2.2.1 Klasifikasi Aeromonas hydrophila ... 9
2.2.2 Deskripsi bakteri A. hydrophila ... 9
2.2.3 Strain bakteri A. hydrophila ... 10
BAB III METODE PENELITIAN... 12
3.1 Waktu dan tempat penelitian ... 12
3.2 Alat yang digunakan dalam penelitian ... 12
3.2.1 Alat pengumpulan dan pembuatan simplisia daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa ... 12
xii
3.2.3 Alat uji antibakteri... 12
3.2.4 Alat uji fitokimia ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa menggunakan uji warna pada plat KLT ... 13
3.3 Bahan yang digunakan dalam penelitian ... 13
3.3.1 Bakteri Aeromonas hydrophila ... 13
3.3.2 Daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa ... 13
3.3.3 Media yang digunakan ... 13
3.3.4 Bahan untuk uji fitokimia ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa menggunakan uji warna pada plat KLT ... 13
3.3.5 Pelarut yang digunakan dalam pembuatan ekstrak dan pembuatan konsentrasi ekstrak tumbuhan mangrove R. Stylosa ... 14
3.4 Rancangan penelitian ... 14
3.5 Cara kerja ... 14
3.5.1 Pengumpulan dan pembuatan simplisia daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa ... 14
3.5.2 Pembuatan ekstrak daun dan batang tumbuhan mangroveR. stylosa ...15
3.5.3 Uji fitokimia menggunakan uji warna pada plat KLT terhadap ekstrak tumbuhan mangrove R. stylosa ... 15
3.5.4 Sterilisasi peralatan dan medium tumbuh ... 17
3.5.5 Pembuatan media tumbuh bakteri A. hydrophila ... 17
3.5.6 Purifikasi isolat bakteri A. hydrophila ... 18
3.5.7 Penentuan jumlah bakteri uji A. hydrophila menggunakan metode total plate count (TPC) ... 19
3.5.8 Pembuatan konsentrasi ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa ... 19
3.5.9 Uji daya hambat ekstrak daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa terhadap bakteri A. hydrophila strain GPl-04, GB-01, GL-01, GL-02, GJ-01, dan GK-01 ... 20
3.5.10 Parameter yang diamati ... 23
xiii
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 25
4.1 Ekstraksi tumbuhan mangrove Rhizophora stylosa ... 25
4.1.1 Ekstraksi n-heksan daun dan batang tumbuhan mangroveR. stylosa ...27
4.1.2 Ekstraksi metanol daun dan batang tumbuhan mangroveR. stylosa ...29
4.2 Uji fitokimia menggunakan uji warna pada plat KLT... 31
4.2.1 Uji fitokimia kandungan ekstrak metanol daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa ... 32
4.2.2 Uji fitokimia kandungan ekstrak n-heksan daun dan batang tumbuhan mangrove R. stylosa ... 35
4.3 Purifikasi bakteri A. hydrophila strain GB-01, GJ-01, GK-01, GL-01, GL-02, dan GPl-04 ... 38
4.4 Perhitungan jumlah koloni bakteri A. hydrophila strain GB-01, GJ-01, GK-01, GL-01, GL-02, dan GPl-04 ... 38
4.5 Uji daya hambat ekstrak R. stylosa terhadap pertumbuhan bakteri A. hydrophila strain GB-01, GJ-01, GK-01, GL-01, GL-02, dan GPl-04 ... 40
4.5.1 Uji daya hambat ekstrak metanol daun dan batang R. stylosa ... 40
4.5.2 Uji daya hambat ekstrak n-heksan daun dan batang R. stylosa... 45
BAB V SIMPULAN DAN SARAN ... 49
5.1 Simpulan ... 49
5.2 Saran ... 50
DAFTAR PUSTAKA ... 51
xiv
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4. 1 Bahan pembuatan ekstrak mangrove Rhizophora stylosa ... 25
Tabel 4. 2 Bahan pembuatan ekstrak metanol daun dan batang R. stylosa ... 29
Tabel 4. 3 Hasil uji KLT ekstrak daun dan batang metanol R. stylosa ... 32
Tabel 4. 4 Hasil uji KLT ekstrak batang dan daun n- heksan R. stylosa ... 36
Tabel 4. 5 Hasil perhitungan jumlah koloni bakteri A. hydrophila strain GB-01, GJ- 01, GK-01, GL-01, GL-02, dan GPl-04 ... 39
Tabel 4. 6 Hasil uji daya hambat ekstrak metanol daun dan batang R. stylosa ... 41
xv
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2. 1 Tumbuhan mangrove Rhizophora stylosa ... 8
Gambar 4. 1 Bahan pembuatan ekstrak dan hasilnya ... 26
Gambar 4. 2 Hasil ekstrak n-heksan daun dan batang R. stylosa ... 29
Gambar 4. 3 Hasil ekstrak metanol daun dan batang R. stylosa ... 31
Gambar 4. 4 Hasil uji fitokimia plat KLT ekstrak metanol batang dan daun R. stylosa....35
Gambar 4. 5 Hasil uji KLT ekstrak n-heksan batang dan daun R. stylosa...37
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman Lampiran 1 Hasil perhitungan randemen ekstrak daun dan batang tumbuhan
mangroveR.stylosa...57 Lampiran 2 Hasil Penghitungan koloni bakteri Aeromonas hydrophila TPC...59 Lampiran 3 Gambar Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila Strain GL-01, GJ-01,
GK-01, GB-01, GL-02, dan GPl-04 ...61 Lampiran 4 Data hasil zona hambat metanol dan n-heksan ... 63 Lampiran 5 Hasil Analisis SPSS Non-Parametrik Ekstrak Tumbuhan Mangrove
Rizhophora stylosa terhadap bakteri Aeromonas hydrophila strain
GB-01, GK-GB-01, GJ-GB-01, GL-GB-01, GL-02, dan GPl-04Hasil foto zona hambat metanol...71 Lampiran 6 Hasil zona hambat ekstrak metanol daun dan batang tumbuhan
