AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP
Klebsiella pneumoniae DAN Staphylococcus epidermidis
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat
Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh :
KOSWORO
K 100 080 019
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 27 Juni 2012 Peneliti
KATA PENGANTAR
Assalamuallaikum Warohmatullahi WabarokatuhAlhamdulillahirobbil’alamin, puji syukur penulis panjatkan hanya untuk-Mu ya Allah atas segala rahmat, nikmat, barokah, dan kekuatan yang tak terhingga untukku untuk terus melangkah. Sholawat dan salam semoga senantiasa tercurah kepada baginda tercinta Muhammad SAW hamba dan panutan terbaik segenap umat manusia, penyeru kebenaran dan pengingat manusia dari kelalaian.
Alhamdulillah, penulis telah dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP Klebsiella pneumoniae DAN Staphylococcus epidermidis”, disusun sebagai salah satu syarat mencapai Drajat sarjana Farmasi (S. Farm) Program Ilmu Studi Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta (UMS).
Penulis banyak mendapatkan bimbingan, dukungan dan bantuan dari berbagai pihak sehingga penyusunan skripsi ini dapat terselesaikan. Untuk itu penulis menyampaikan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt. selaku dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Bapak Andi Suhendi, S. Farm., Apt. selaku dosen pembimbing akademik. 3. Bapak Dr. Haryoto, M.Sc selaku dosen pembimbing utama dan Bapak Peni
Indrayudha, M.Biotech., Apt. selaku dosen pembimbing pendamping.
4. Bapak Dr. Muhtadi, M.Si selaku penguji I dan Ibu Ika Trisharyanti DK, M.Farm., Apt selaku penguji II.
5. Kedua orang tua penulis tercinta, Bapak Hartono dan Ibu Ngadiyem, serta adikku Aji Kuncoro.
6. Tim peneliti ekstrak etanol daun sirsak, Henggar Prasetyo, Septianingrum, dan Jayanti.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari kesempurnaan. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran membangun demi kesempurnaan skripsi ini.
Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca pada umumnya dan khususnya dapat bermanfaat bagi penulis sendiri. Wassalamualaikum Warohmatullahi Wabarokatuh
Surakarta, 27 Juni 2012.
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ……….. ... i
HALAMAN PENGESAHAN………... ... ii
HALAMAN DEKLARASI ………. .... iii
KATA PENGANTAR ……… .... iv
Latar Belakang masalah………...…. ... 1
Rumusan Masalah…….……….... ... 3
Tujuan Penelitian………... ... 3
Tinjauan Pustaka………... ... 4
Tanaman Sirsak..………... ... 4
Sistematika Tanaman Sirsak……….………... ... 4
Nama daerah…..………... 4
Kandungan kimia……….. ... 4
Khasiat tanaman ... 4
1. Metode Penyarian ... 5
2. Staphylococcus epidermidis ... 5
3. Klesiella pneumonia ... 6
4. Uji Aktivitas Antibakteri ... 7
5. Bioautografi ... 8
A. Landasan Teori ... 8
BAB II. METODE PENELITIAN….………... 10
A. Kategori Penelitian….………... 10
B. Variabel Penelitian….………... 10
C. Alat dan Bahan………...………...……….... 10
D. Tempat Penelitian ………. 11
E. Jalannya Penelitian………….………...………….... 11
1. Determinasi Tanaman…….………. 11
2. Pengumpulan Bahan………...………. 12
3. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirsak………..………... 12
4. Fraksinasi Ekstrak Etanol Daun Sirsak….……...………... 12
5. Sterilisasi Alat dan Bahan………... 13
6. Pembuatan Media……….……….….. 13
7. Pembuatan stok bakteri……..………. 13
8. Pembuatan Suspensi Bakteri……….…….. 13
9. Pewarnaan Bakteri dan Uji Biokimia Bakteri………..………. 14
10. Pembuatan Seri Konsentrasi Fraksi Semipolar………..…. 14
11. Pembuatan Kontrol……….. 14
12. Uji Antibakteri dengan Metode Dilusi Padat……….. 15
13. Uji Komatografi Lapis Tipis……… 15
14. Analisis Hasil………... 16
15. Pengujian Bioautografi……… 16
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN……….. 17
A. Determinasi Tanaman…….………. 17
B. Fraksinasi Ekstrak Etanol Daun Sirsak….…………..………... 17
C. Identifikasi Bakteri……….. 21
D. Uji Aktivitas Antibakteri………. 23
E. Analisis Kualitatif Fraksi polar………... 26
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ... 31
A. Kesimpulan ... 31
B. Saran ... 31
DAFTAR PUSTAKA ... 32
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Optimasi Fase Gerak ... 18
Gambar 2. Fraksinasi 1 ... 18
Gambar 3. Fraksinasi 2 ... 19
Gambar 4. Fraksinasi 3 ... 19
Gambar 5. Pengelompokkan fraksi ... 20
Gambar 6. Hasil Pengecatan Gram ... 21
Gambar 7. Hasil Uji Test Mannitol terhadap Klebsiella pneumoniae dan Staphylococcus epidermidis ... 22
Gambar 8. Hasil Uji Penanaman Bakteri Klebsiella pneumonia pada Media KIA, LIA, dan MIO ... 23
Gambar 9. Hasil Uji Antibakteri Fraksi Polar Ekstrak Etanol Daun Sirsak terhadap Staphylococcus epidermidis dan Klebsiella Pneumoniae 24 Gambar 10. Hasil Bercak Dideteksi dengan UV dan Berbagai Reaksi Semprot ... 27
Gambar 11. Struktur senyawa yang Terdapat dalam Tumbuhan Sirsak ... 28
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil Uji Aktivitas Fraksi Polar Ekstrak Etanol Daun Sirsak terhadap Staphylococcus epidermidis dan Klebsiella pneumoniae ... 24
Tabel 2. Hasil Analisis KLT Fraksi Polar Ekstrak Etanol Daun Sirsak
(Annona muricata) ... 27
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Determinasi ... 35
Lampiran 2. Surat Keterangan Bakteri Staphylococus epidermidis ... 37
Lampiran 3. Surat Keterangan Bakteri Klebsiella pneumoniae ... 38
Lampiran 4. Perhitungan Rendemen dan Konsentrasi Fraksi Polar Ekstrak Etanol Daun Sirsak ... 40
Lampiran 5. Perhitungan Harga Rf dan hRf pada Hasil Analisis KLT ... 42
Lampiran 6. Komposisi Media Bakteri ... 43
Lampiran 7. Kompisisi Cat Gram ... 44
Lampiran 8. Pembuatan Reagen ... 45
INTISARI
Tumbuhan sirsak (Annona muricata L.) merupakan salah satu tumbuhan yang digunakan sebagai obat tradisional. Annonaceae mengandung alkaloid, acetogenin, polifenol, terpen, dan senyawa aromatik. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui Kadar Hambat Minimum (KHM) fraksi polar ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap Klebsiella pneumonia dan Staphylococcus epidermidis serta senyawa yang yang bertanggung jawab terhadap aktivitas tersebut.
Daun sirsak diekstraksi dengan etanol 96% secara maserasi dan dilakukan fraksinasi dengan Kromatografi Cair Vakum (KCV). Fraksi diuji aktivitas antibakteri menggunakan metode dilusi padat. Seri konsentrasi fraksi polar yang digunakan adalah 2,5% b/v, 3% b/v, 3,5 b/v, 4% b/v, dan 4,5% b/v. Uji kandungan senyawa dilakukan dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT), fase diam silika, dan fase gerak heksan : etil asetat (3:7). Uji bioautografi dengan menempelkan lempeng KLT yang diinokulasi suspensi bakteri, senyawa antibakteri ditunjukkan zona jernih.
Hasil penelitian menunjukkan fraksi polar ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Klebsiella pneumonia dan Staphylococcus epidermidis dengan KHM berturut-turut sebesar 3% dan 3,5%. Golongan senyawa yang memiliki aktivitas antibakteri baik terhadap Klebsiella pneumonia maupun Staphylococcus epidermidis merupakan senyawa golongan flavonoid, polifenol, antron dan triterpenoid.
Kata kunci: Annona muricata L., antibakteri, fraksi polar, Klebsiella
pneumoniae, Staphylococcus epidermidis.
