45
46
47
Lampiran 3. Gambar helai daun kelapa sawit dan simplisia daun kelapa sawit
Helai daun kelapa sawit
48
Lampiran 4. Gambar kandang mencit yang dilengkapi tempat makan dan minum
49
Lampiran 6. Bagan alur penelitian
Dimasukkan ke dalam bejana
Ditambah pelarut 9 liter etanol 80% (75 bagian)
Dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sesekali di aduk
Disaring, diperas
Dicuci dengan pelarut etanol 80% hingga cahaya selama 2 hari Dienap tuangkan
Digabung
Dipekatkan dengan alat rotary evaporator 40-50oC Dikeringkan dengan alat freeze dryer -40oC
50
Lampiran 7. Bagan pengerjaan uji toksisitas subkronik pada mencit 30 ekor mencit
pengamatan selama 28 hari pengamatan selama 42 hari
Pengamatan:
a. Perilaku fisik
b. Jumlah kematian hewan c. Konsumsi makanan dan
konsumsi minuman d. Berat badan
e. Berat organ relatif f. Makropatologi hati g. Kadar ALT
h. Gambaran histopatologi hati
51
Lampiran 8. Perhitungan volume pemberian EEDKS dosis 500, 1000, dan 2000 mg/kg BB
- Dosis suspensi EEDKS yang akan dibuat adalah 500 mg/kg BB, 1000 mg/kg BB, 2000 mg/kg BB.
Artinya dosis 500 mg, 1000 mg, 2000 mg itu diberikan untuk hewan dengan berat
badan 1 Kg. Karena = 1
100 x1 kg = = 1
100 x1000 g = 10 ml. Maka tiap dosis
dilarutkan dalam 10,0 ml suspensi Na-CMC - Cara pembuatan suspensi ekstrak EEDKS:
Timbang 500 mg, 1000 mg, 2000 mg ekstrak EEDKS masing-masing dilarutkan dalam 10 ml suspensi Na-CMC.
- Volume suspensi EEDKS yang diberikan pada mencit = 1
100 xBB
Berat mencit : 30 g.
Maka suspensi yang diberikan = 1
52
Lampiran 9. Perhitungan hasil karakterisasi serbuk simplisia dan ekstrak etanol daun kelapasawit
1. Penetapan kadar air
No
Berat sampel Volume air (ml) Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak
1 5,0000 g 5,0000 g 0,4 0,2
Kadar air ekstrak
53
Lampiran 9. (Lanjutan)
2. Penetapan kadar sari larut air
No
Berat sampel Berat sari
Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak
1 5,0153 g 5,0000 g 0,1230 g 0,2000 g
2 5,0260 g 5,0200 g 0,1450 g 0,1890 g
3 5,0243 g 5,0020 g 0,1386 g 0,1998 g
Kadar sari simplisia
Kadar sari larut dalam air = 0,1230 g 5,0153gx
100
20
x 100 % = 12,26 %
Kadar sari larut dalam air =0,1450 g 5,0260 g x
% Kadar sari larut dalam air rata-rata=12,26 % + 14,42 %+ 13,79 %
3 = 13,49 %
Kadar sari ekstrak
Kadar sari larut dalam air = 0,2000 g
% Kadar sari larut dalam air rata-rata=20,00 % + 18,82 %+ 19,90 %
3 = 19,57 %
% kadar sari yang larut dalam air =berat sari air berat sampelx
100
54
Lampiran 9. (Lanjutan)
3. Penetapan kadar sari larut etanol
No
Berat sampel Berat sari
Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak
1 5,0030 g 5,0210 g 0,1650 g 0,5000 g
2 5,0035 g 5,0052 g 0,1710 g 0,4001 g
3 5,0050 g 5,0130 g 0,1740 g 0,4200 g
Kadar sari simplisia
Kadar sari larut dalam etanol = 0,1650 g 5,0030 g x
100
20x100 % = 16,49 %
Kadar sari larut dalam etanol =0,1710 g 5,0035 gx
100
20x100 % = 17,08 %
Kadar sari larut dalam etanol = 0,1740 g 5,0050 g x
100
20x100 % = 17,38 %
% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata= 16,49% + 17,08%+ 17,38%
3 = 16,98%
Kadar sari ekstrak
Kadar sari larut dalam etanol = 0,5000 g 5,0210 g x
100
20x100 % = 49,79 %
Kadar sari larut dalam etanol =0,4001 g 5,0052 gx
100
20x100 % = 39,96 %
Kadar sari larut dalam etanol = 0,4200 g 5,0130 g x
100
20x100 % = 41,89 %
% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata= 49,79% + 39,96%+ 41,89%
3 = 43,88%
% kadar sari yang larut dalam etanol =berat sari air berat sampelx
100
55
Lampiran 9. (Lanjutan) 4. Penetapan kadar abu total
No
Berat sampel Berat sari
Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak
1 2,0002 g 2,0005 g 0,0748 g 0,0450 g
2 2,0004 g 2,0003 g 0,0751 g 0,0500 g
3 2,0006 g 2,0002 g 0,0758 g 0,0515 g
Kadar abu total simplisia
% Kadar abutotal =0,0748
2,0002x 100 % = 3,73 %
% Kadar abutotal =0,0751
2,0004x 100 % = 3,75 %
% Kadar abu total =0,0758
2,0006 x 100 % = 3,78 %
% Kadar abu total rata-rata = 3,73%+ 3,75%+3,78%
3 = 3,75 %
Kadar abu total ekstrak
% Kadar abutotal =0,0450
2,0005x 100 % = 2,24 %
% Kadar abutotal =0,0500
2,0003x 100 % = 2,49 %
% Kadar abu total =0,0515
2,0002 x 100 % = 2,57 %
% Kadar abu total rata-rata = 2,24%+ 2,49%+2,57%
3 = 2,43 %
% kadar abu total = berat abu (g)
56
% Kadar abu tidak larut asam = berat abu tidak larut asam
berat sampel x 100 %
Lampiran 9. (Lanjutan)
5. Penetapan kadar abu yang tidak larut asam
No
Berat sampel Berat sari
Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak
1 2,0002 g 2,0002 g 0,0140 g 0,0065 g
2 2,0004 g 2,0003 g 0,0160 g 0,0041 g
3 2,0006 g 2,0002 g 0,0174 g 0,0045 g
Kadar abu simplisia
% Kadar abu tidak larut asam =0,0140
2,0002x 100 % = 0,69 %
% Kadar abu tidak larut asam =0,0160
2,0004x 100 % = 0,79 %
% Kadar abu tidak larut asam =0,0174
2,0006x 100 % = 0,86 %
% Kadar abu tidak larut asam rata-rata = 0,69% +0,79%+ 0,86%
3 = 0,78 %
Kadar abu ekstrak
% Kadar abu tidak larut asam =0,0065
2,0002x 100 % = 0,32 %
% Kadar abu tidak larut asam =0,0041
2,0003x 100 % = 0,20 %
% Kadar abu tidak larut asam =0,0045
2,0002x 100 % = 0,22 %
% Kadar abu tidak larut asam rata-rata = 0,32% +0,20%+ 0,22%
57
58
59
60
61
Lampiran 13. Hasil analisis statistik jumlah konsumsi makanan mencit pada minggu ke-1,2,3,4,5,6.
Descriptives
N Mean
Std.
62
Lampiran 13. (Lanjutan)
Tukey HSD
Dependent Variable (I) Kelompok (J) Kelompok
Mean
Satelit kontrol 1.05000 1.33347 .968
Satelit dosis 2000
Satelit kontrol -.81929 1.19800 .983
Satelit dosis 2000
Satelit kontrol -.33571 1.91505 1.000
Satelit dosis 2000
Satelit kontrol -.63000 1.04651 .990
Satelit dosis 2000
mg/kg BB .57571 1.04651 .994
63
Lampiran 13. (Lanjutan)
Independent Samples Test
Levene's
Test for
Equality of
Variances t-test for Equality of Means
64
65
Lampiran 14.(Lanjutan)
Tukey HSD
Dependent
Variable (I) Kelompok (J) Kelompok
66
Lampiran 14. (Lanjutan)
Independent Samples Test
Levene's Test
for Equality of
Variances t-test for Equality of Means
67
Lampiran 15. Hasil analisis statistik berat badan mencit pada minggu ke-1, 2, 3, 4,5,6
Descriptives
N Mean
Std.
Deviation Std. Error
68
Lampiran 15. (Lanjutan)
Tukey HSD
Dependent Variable (I)
Kelompok
Satelit kontrol -.68000 .65712 .901
Satelit dosis 2000
Satelit kontrol -2.81200 2.11923 .768
Satelit dosis 2000
Satelit kontrol -1.29400 2.46737 .995
Satelit dosis 2000
Satelit kontrol -2.15800 2.55314 .956
Satelit dosis 2000
mg/kg BB
69
Lampiran 15. (Lanjutan)
Group Statistics
Variances t-test for Equality of Means
70
Lampiran 16. Hasil analisis statistik kadar ALT mencit
Descriptives
N Mean Std. Deviation Std. Error
Kadar ALT mencit Kontrol 5 36.200 9.2033 4.1158
Dosis 500 mg/kg BB 5 53.000 13.1149 5.8652
Dosis 1000 mg/kg BB 5 77.200 8.9833 4.0175
Dosis 2000 mg/kg BB 5 83.800 8.2583 3.6932
Satelit kontrol 5 36.800 10.5688 4.7265
Satelit dosis 2000 mg/kg BB 5 80.400 9.1542 4.0939
Total 30 61.233 22.3756 4.0852
Tukey HSD
Dependent
Variabel (I) Kelompok (J) Kelompok
Mean Difference (I-J)
Std. Error Sig.
Kadar ALT Kontrol Dosis 500 mg/kg BB -16.8000 6.3304 .123
Dosis 1000 mg/kg BB -41.0000* 6.3304 .000
Dosis 2000 mg/kg BB -47.6000* 6.3304 .000
Satelit kontrol -.6000 6.3304 1.000
Satelit dosis 2000 mg/kg BB
-44.2000* 6.3304 .000
71
Lampiran 17.Hasil analisis statistik berat relatif organ hati, ginjal, dan jantung.
72
Lampiran 17. (Lanjutan)
Tukey HSD
Dependent
Variable (I) Kelompok (J) Kelompok
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
Berat relatif hati Kontrol Dosis 500 mg/kg BB .76400 .62919 .826
Dosis 1000 mg/kg BB .44600 .62919 .979
Dosis 2000 mg/kg BB .32000 .62919 .995
Satelit normal -.07400 .62919 1.000
Satelit dosis 2000
Satelit normal -.03200 .14852 1.000
Satelit dosis 2000
Satelit normal .00000 .07416 1.000
73
Lampiran 18. Hasil pengamatan data konsumsi makanan dan minuman 1. Kelompok kontrol
Minggu I
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
1 20,235 46
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
8 18,334 29
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
74
Lampiran 18. (Lanjutan)
Minggu IV
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
22 20,591 32
2. Kelompok uji (EEDKS dosis 500 mg/kg BB) Minggu I
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
1 18,604 30
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
75
Lampiran 18. (Lanjutan)
Minggu III
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
15 19,130 22
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
22 19,933 32
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
76
Lampiran 18. (Lanjutan)
Minggu II
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
8 20,152 32
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
15 24,961 38
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
77
Lampiran 18. (Lanjutan)
4. Kelompok uji (EEDKS dosis 2000 mg/kg BB) Minggu I
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
1 20,075 46
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
8 16,308 31
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
78
Lampiran 18. (Lanjutan)
Minggu IV
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
22 18,289 32
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
1 19,646 46
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
79
Lampiran 18. (Lanjutan)
Minggu III
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
15 18,561 38
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
22 23,015 50
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
80
Lampiran 18. (Lanjutan)
Minggu VI
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
36 18,401 30
6. Kelompok satelit (EEDKS dosis 2000 mg/kg BB) Minggu I
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
1 21,453 46
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
81
Lampiran 18. (Lanjutan)
Minggu III
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
15 15,977 16
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
22 22,057 32
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
82
Lampiran 18. (Lanjutan)
Minggu VI
Hari ke- Jumlah makanan (g) Jumlah minuman (ml)
36 19,371 32
37 18,532 30
38 21,546 30
39 18,499 38
40 19,496 36
41 21,693 28
42 18,439 28
83
84
85
86
Lampiran 19. (Lanjutan) Minggu IV
87
Lampiran 19. (Lanjutan) Minggu V 6. Kelompok satelit (EEDKS dosis 2000 mg/kg BB)
88
Lampiran 19. (Lanjutan) Minggu IV
No Hari 22 Hari 23 Hari 24 Hari 25 Hari 27 Hari 28 Rata-rata 1 21,7 g 22,0 g 24,0 g 25,8 g 27,8 g 29,8 g 25,18 2 30,8 g 32,6 g 33,7 g 33,2 g 34,7 g 34,3 g 33,21 3 29,2 g 30,2 g 30,5 g 30,7 g 31,3 g 31,7 g 30,6 4 22,5 g 22,7 g 21,2 g 24,7 g 26,8 g 25,3 g 23,53 5 34,5 g 33,8 g 33,9 g 34,1 g 34,8 g 35,0 g 34,35 Minggu V
No Hari 29 Hari 30 Hari 31 Hari 32 Hari 34 Hari 35 Rata-rata 1 33,4 g 32,8 g 30,0 g 30,2 g 29,8 g 29,8 g 31,00 2 34,1 g 33,9 g 33,7 g 34,1 g 34,1 g 34,5 g 34,06 3 32,4 g 27,9 g 23,8 g 28,0 g 28,0 g 28,1 g 28,7 4 23,0 g 23,6 g 23,8 g 25,1 g 25,3 g 25,2 g 24,33 5 35,4 g 34,5 g 34,6 g 33,8 g 33,5 g 33,0 g 34,13
Minggu VI
89
Lampiran 20. Hasil pengamatan data bobot organ relatif 1. Kelompok kontrol
No Hati Jantung Ginjal Kanan Ginjal Kiri
2. Kelompok uji (EEDKS dosis 500 mg/kg BB)
No Hati Jantung Ginjal Kanan Ginjal Kiri
3. Kelompok uji (EEDKS dosis 1000 mg/kg BB)
No Hati Jantung Ginjal Kanan Ginjal Kiri
4. Kelompok uji (EEDKS dosis 2000 mg/kg BB)
90
Lampiran 20. (Lanjutan)
5. Kelompok satelit kontrol
No Hati Jantung Ginjal Kanan Ginjal Kiri
1 5,28 0,48 0,68 0,60
2 4,63 0,43 0,74 0,70
3 4,87 0,46 0,78 0,74
4 4,30 0,39 0,60 0,59
5 6,73 0,58 0,64 0,64
Total 5,16 0,46 0,68 0,65
6. Kelompok satelit (EEDKS dosis 2000 mg/kg BB)
No Hati Jantung Ginjal Kanan Ginjal Kiri
1 4,20 0,47 0,67 0,67
2 4,12 0,47 0,66 0,66
3 3,14 0,35 0,47 0,47
4 7,74 0,70 1,18 1,06
5 5,26 0,53 0,68 0,68
91
Lampiran 21. Gambar makropatologi hati mencit
K1 (1) K1 (2) K1 (3)
K1 (4) K1 (5) K2 (1)
K2 (2) K2 (3) K2 (4)
92
Lampiran 21. (Lanjutan)
K3 (3) K3 (4) K3 (5)
K4 (1) K4 (2) K4 (3)
K4 (4) K4 (5) K5 (1)
K5 (3) K5 (4)
93
Lampiran 21. (Lanjutan)
Keterangan Gambar :
K1 : Kelompok kontrol (Na CMC 0,5%)
K2 : Kelompok uji (EEDKS dosis 500 mg/kg BB) K3 : Kelompok uji (EEDKS dosis 1000 mg/kg BB) K4 : Kelompok uji (EEDKS dosis 2000 mg/kg BB) K5 : Kelompok satelit kontrol (Na CMC 0,5%)
K6 : Kelompok satelit (EEDKS dosis 2000 mg/kg BB )
K6 (1) K6 (2)
K5 (5)
