ISOLASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK BIJI PINANG

ISOLASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN

EKSTRAK BIJI PINANG

Skripsi

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

Mencapai Derajat Sarjana S-1

Oleh

FITRI ARYANTI

1108010091

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

PERNYATAAN

Yang bertandatangan dibawah ini, saya :

Nama : FITRI ARYANTI

NIM : 1108010091

Program Studi : Farmasi

Fakultas / Universitas : Farmasi/Universitas Muhammadiyah Purwokerto

Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari

proses penelitian saya yang telah dilakukan sesuai dengan prosedur penelitian

yang benar dengan arahan dari dosen pembimbing dan bukan hasil penjiplakan

dari karya orang lain atau terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh

gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis

juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan orang

lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam

daftar pustaka.

Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak di kemudian hari terbukti ada

unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggungjawabkan sesuai dengan

ketentuan yang berlaku.

Purwokerto, Agustus 2015

Yang menyatakan,

INTISARI

FITRI ARYANTI. Isolasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Biji Pinang. Dibawah bimbingan ASMIYENTI DJALIASRIN DJALIL dan RETNO WAHYUNINGRUM.

Latar Belakang : Ekstrak Etanol Biji Pinang memperlihatkan aktivitas antioksidan yaitu IC50 sebesar 0,409 mg/mL yang lebih besar dibandingkan

vitamin C sebagai kontrol positif dengan nilai IC50 sebesar 0,964 mg/mL.

Berdasarkan landasan tersebut membuktikan bahwa ekstrak biji pinang berpotensi sebagai antioksidan tetapi belum ada penelitian yang mengisolasi kandungan kimia dari berbagai macam fraksi pada ekstrak biji pinang. Oleh karena itu perlu dilakukan isolasi kandungan kimia dari beberapa fraksi dan uji aktifitas antioksidan pada ekstrak dan berbagai fraksi biji pinang.

Tujuan Penelitian : Tujuan dari penelitian ini adalah mengisolasi kandungan kimia dari fraksi dan menguji aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi biji pinang.

Metode Penelitian : Penelitian ini dilakukan dengan radikal DPPH untuk ekstrak metanol, fraksi metanol-air, fraksi n-heksan, fraksi etilasetat, fraksi metanol biji pinang dan untuk mengisolasi kandungan kimia dari fraksi metanol menggunakan Kromatografi Lapis Tipis, Kromatografi Lapis Tipis Preparatif dan Spektrofotometri UV-Vis.

Hasil : IC50 pada fraksi metanol adalah yang paling kecil dibandingkan dengan

fraksi metanol-air, fraksi etilasetat dan fraksi n-heksan yaitu 20,738 ppm karena senyawa aktif biji pinang tertarik pada fraksi metanol sehingga aktivitas antioksidannya paling besar. Hasil isolasi menggunakan metode KLT dan KLT Preparatif adalah 84,6 mg yang kemudian diuji aktivitas antioksidan dengan IC50

sebesar 22396,3 ppm.

Kesimpulan : aktivitas antioksidan fraksi metanol lebih baik dibandingkan fraksi metanol-air, fraksi etilasetat dan fraksi n-heksan. Fraksi metanol telah diisolasi yang membuktikan senyawa aktif sebagai antioksidan.

ABSTRACK

with IC50 value of 0.964 mg / mL. Based on these premises proves that areca seed

extract has potential as an antioxidant yet there was no further research that isolate the chemical constituents of the various factions in the areca seed extracts. Therefore it was necessary to isolate chemical constituents of some fractions and antioxidant activity test of the extracts and various fractions of areca seed.

Objective: The objective of this study was to isolate the chemical constituents of the fractions and tested the extracts of antioxidant activity and fractions of areca seed.

Methods of the research: The study was carried out by radical DPPH for the methanol extract, fraction of methanol-water, the fraction of n-hexane, fraction of ethyl acetate, methanol fraction areca seed and to isolate the chemical constituents of the methanol fraction using Thin Layer Chromatography, preparative thin layer chromatography and spectrophotometry UV -Vis.

Results: the result revealed that methanol fraction with IC50 is the smallest

fraction (20.738 ppm) compared by the methanol-water fractions, fractions ethyl acetate and n-hexane fraction. It was because of the active compounds of areca nut adsorbed into methanol fraction. Therefore, those fractions have the greatest antioxidant activity. The method of isolation was using 84.6 mg TLC and TLC Preparative then it tested by the antioxidant activity with IC50 of 22396.3 ppm.

Conclusion: The antioxidant activity of the methanol fraction was better than the methanol-water fractions, fractions ethyl acetate and n-hexane fraction. The Methanol fraction that had been isolated proved the active compounds as antioxidants.

PERSEMBAHAN

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah memberikan

petunjuk dan kemudahan, sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik

dan lancar.

Skripsi ini penulis persembahkan untuk:

Orangtuaku yang selalu memberikan dukungan serta doa yang selalu

mengiringi hidupku dalam menempuh segala hal.

Kakak-kakakku, adikku dan keponakanku yang selalu memberikan

semangat dan motivasi untukku.

Emon, Lele, Aminah, Icon, Devi, Mas Enggi, Anya, Ghelsa, kelompok

praktikum RA, Bu woro, Pak mamat dan teman-teman seangkatan yang

telah membantu dan selalu memberikan dukungan untukku.

Kedua pembimbing yang selalu membimbing dan memberi nasehat

dengan sabar selama ini

Mba viji, Pindut, Ira, Helmi, Mba Santi, Mba devi,dan teman-teman kos

MOTTO

Dibalik kesulitan ada Kemudahan sesudahnya

Teruslah berfikir positif, karena dengan itu dapat menutupi segala hal-hal negatif

dan segala ketakutan yang menghampiri diri

Dimana ada kemauan, disitu pasti ada jalan menuju kebaikan

PRAKATA

Dengan mengucap Alhamdulillahi Robil’allamin, dan segala puji syukur senantiasa peneliti panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan

rahmat, hidayah dan inayahnya, sehingga peneliti dapat menyusun dan

menyelesaikan skripsi ini. Sholawat dan salam senantiasa tercurahkan kepada

Nabi Besar Muhammad SAW berserta keluarga dan sahabatnya.

Penyelesaian skripsi ini tidak terlepas dari bantuan dan dukungan dari

berbagai pihak yang telah memberikan bantuan yang sangat berarti bagi peneliti,

baik secara moral maupun materi. Untuk itu, peneliti mengucapkan terima kasih

kepada :

1. Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, SH, M.H Rektor Universitas Muhammadiyah

Purwokerto.

2. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si., Apt. Dekan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto.

3. Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil, M.Si. Ketua Bidang Kemahasiswaan Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto dan Dosen Pembimbing

I yang telah membimbing, memotivasi dan mendukung terlaksananya

ujian skripsi dan memberikan kesempatan hingga peneliti selesai studi.

4. Retno Wahyuningrum,S.Farm., M.Si., Apt. Dosen Pembimbing II yang

selalu sabar membimbing dan mengarahkan dalam penyusunan skripsi.

5. Semua pihak yang telah membantu hingga terselesaikannya skripsi ini.

Semoga semua bimbingan, dorongan dan bantuan yang telah diberikan

kepada peneliti mendapatkan pahala dari Allah SWT. Teriring harapan

semoga skripsi ini dapat bermanfaat khususnya bagi peneliti dan pembaca.

Purwokerto, Agustus 2014

RIWAYAT HIDUP

Nama : Fitri Aryanti

NIM / Angkatan : 1108010091 / 2011

Tempat / Tanggal Lahir : Cilacap, 12 April 1992

Jenis Kelamin : Perempuan

Agama : Islam

Alamat : Jln.Jaga desa no.68 Pahonjean, Majenang, Cilacap

Riwayat Pendidikan:

1. Perguruan Tinggi :Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah

Purwokerto (Angkatan 2011)

2. SMA / Tahun Lulus : SMK Farmasi Majenang / Tahun 2010

3. SMP / Tahun Lulus : SMP Negeri 2 Majenang / Tahun 2007

DAFTAR ISI

F. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ... .. 9

G. Uji Antioksidan 1,1 DPPH... ... .. 10

H. Spektrofotometri Ultraviolet-Visible... 11

B. Variabel Penelitian ... 12

1. Variabel Bebas ... 12

2. Variabel Tergantung ... 12

3. Variabel Terkendali ... 12

C. Definisi Variabel Operasional ... 12

D. Waktu dan tempat Penelitian... 13

E. Alat dan Bahan ... 13

F. Prosedur Penelitian... 14

1. Pengumpulan dan Penyiapan Sampel ... 14

2. Determinasi Bahan ... 14

3. Maserasi Biji Pinang ... 14

4. Fraksinasi ... 14

5. Uji Aktivitas Antioksidan ... 15

6. Identifikasi senyawa dengan KLT ... 18

7. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ... 18

8. Uji Aktivitas Antioksidan isolat dengan Spektrofotometri Uv-vis ... 19

F. Identifikasi senyawa menggunakan KLT... 28

G. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif... 30

H. Uji Aktivitas antioksidan Isolat... 30

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Buah Pinang ... 3

Gambar 2. Ektrak Kering biji pinang ... 22

Gambar 3. Scanning (λ maks) larutan DPPH ... 23

Gambar 4. Prinsip penangkapan H oleh DPPH ... 24

Gambar 5. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan ekstrak metanol.... ... 25

Gambar 6. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan fraksi metanol.... ... 25

Gambar 7. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan fraksi metanol-air.... ... 26

Gambar 8. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan fraksi n-heksan.... ... 26

Gambar 9. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan fraksi etilasetat.... ... 27

Gambar 10. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan vitamin C.... ... 27

Gambar 11. Lempeng KLT setelah disemprot H2SO4, NaNO2, FeCl3... ... 29

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Surat determinasi ... 35

Lampiran 2. Perhitungan rendemen ekstrak biji pinang ... 36

Lampiran 3. Tahapan Fraksinasi ... 37

Lampiran 4. Perhitungan Uji daya tangkap radikal bebas (%penghambatan), IC50

dan IC20 dengan radikal DPPH ... 38