PENYIMPANAN TEMPERATUR RENDAH MEMPENGARUHI METABOLISME ASAM ASKORBAT DARI BUAH TOMAT CERI
Abstrak
Buah tomat merupakan sumber penting asam L-askorbat, yang merupakan senyawa penting dari diet manusia. efek dari praktek luas penyimpanan dingin (5-10C) buah tomat dipantau untuk menentukan dampaknya terhadap konsentrasi dan redoks Status OFL-asam askorbat . Kadar asam askorbat total-yang terawat dengan baik di buah segar dan buah-buahan Dengan perlakukan dingin, sementara di perawatan lain tingkat perusahaan telah sangat berkurang. Namun, kondisi penyimpanan suhu rendah meningkatkan ekspresi sebagian besar gen coding untuk enzim yang terlibat asam askorbat INL-biosintesis dan reaksi redoks. Temuan menunjukkan bahwa kenaikan transkripsi regulasi dalam kondisi stres dingin dari sebagian besar gen coding untuk asam Ascorbat gen biosintesis asam galactono-1,4-lakton dehidrogenase, PDB-D-mannose 3,5-epimerase tetapi juga untuk isoenzim dari askorbat peroksidase, monodehydroascorbate reduktase, enzim reduktase dehydroascorbate, glutathione reductase yang berkorelasi kuat dengan status redoks L-askorbat. Selain itu, buah-buahan disimpan di 10 C menunjukkan tingkat yang lebih tinggi dari akumulasi transkrip MDHAR2, DHAR1, DHAR2, GR1 dan GR2 gen, menunjuk ke sebuah kemampuan yang lebih baik untuk mengelola stres dingin dibandingkan dengan buah-buahan disimpan di 5C.
1. Perkenalan
Pada tumbuhan, asam L- askorbat ( Shigeoka et al. , 2002) metabolisme berkorelasi dengan pertahanan stres oksidatif , sementara akumulasi asa di jaringan tanaman dan organ diubah oleh fenomena fisiologis seperti penuaan , pengembangan ekspansi sel dan , berbagai biotik dan rangsangan abiotik ( Davey et al . , 2006 , 2000) . Sebagian besar peran biologis Asa berasal dari kapasitas yang besar untuk bertindak sebagai pereduksi . Memang , fungsi utama dari ASA untuk detoksifikasi hidrogen peroksida H2O2 di produksi oleh metabolisme selama
fotosintesis dan terutama dalam kondisi stres ( Smirnoff , 2011) .
Tomat menikmati permintaan komersial terus meningkat karena beberapa ciri kualitas penting seperti bahan kering yang lebih tinggi dan tingkat yang lebih tinggi dari padatan terlarut dibandingkan untuk buah tomat berukuran normal. Selain itu, karena tingkat yang lebih tinggi gula dan asam organik, tomat menunjukkan rasa manis dan aroma yang lebih kaya (Raffo et al., 2002). Tomat pematangan adalah rumit dan dipelajari secara ekstensif proses fisiologis, yang terus selama hidup pasca panen buah-buahan (Adams-Phillips et al., 2004). Akibatnya, pasca panen perawatan dan kondisi penyimpanan bisa memiliki efek dramatis pada konten phytonutrisi dan nilai gizi tomat (Javanmardi dan Kubota, 2006). Selama tomat kehidupan pasca panen, Tingkat Asa antara nutrisi lain yang rentan terhadap pengurangan berat yang mengakibatkan kerugian yang signifikan dari nilai gizi. Data penelitian sangat menyarankan bahwa tindakan harus diambil selama hidup pascapanen buah tomat dalam rangka melestarikan tingkat Asa sampai Konsumsi (Oms-Oliu et al., 2011).
Perawatan pasca panen umum buah tomat melibatkan penyimpanan buah-buahan untuk beberapa hari di dekat perkebunan, transportasi truk kulkas di dekat 10C, dan penyimpanan di lemari es domestik sampai konsumsi sekitar 5 C (Kirkland et al., 2009). Sementara penyimpanan suhu rendah dapat melestarikan kualitas gizi buah tomat, itu mapan bahwa itu bisa memicu respon stres. Penyimpanan tersebut dapat menyebabkan cedera mengerikan di buah terkait dengan stres oksidatif yang, pada gilirannya, berkorelasi membran pemisahan fasa lipid membran (Gharezi et al., 2012; Malacrida dkk., 2006; Vega-García et al., 2010). Dingin atau pembekuan stres juga terkait dengan produksi ROS, sementara tanaman dingin aklimatisasi dikaitkan dengan ROS-pemulungan aktivitas enzimatik beberapa enzim termasuk APX (Suzuki dan Mittler, 2006). Di Selain itu, telah ditemukan bahwa temperatur rendah juga merangsang Oksidasi Asa melalui aktivitas APX (Hodges dkk., 2004; Ioannidi et al, 2009.; Malacrida et al., 2006). Selain itu, enzim terlibat dalam mekanisme pemulungan ROS, termasuk glutation reduktase (GR, EC 1.8.1.7) aktivitas, en enzim yang berpartisipasi dalam Asa daur ulang (Malacrida et al., 2006) lebih tinggi setelah penyimpanan
tomat pada 4 C.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki efek dari beberapa perawatan pascapanen umum pada metabolisme Asa selama utama tahap kehidupan pascapanen buah tomat. Hasil penelitian menunjukkan bahwa akumulasi transkrip paling gen yang terlibat dalam Asa biosintesis dan metabolisme secara signifikan lebih tinggi setelah dingin penyimpanan. Tingkat Asa mirip dengan buah-buahan yang melekat serta buah-buahan disimpan pada 5 C dan 10 C untuk periode yang sama. Data menunjukkan bahwa Asa didaur ulang dalam kondisi suhu rendah, yang dikaitkan dengan dingin-diproduksi ROS pembilasan oleh Asa katabolisme. Dengan demikian, tingkat Asa diselenggarakan dalam kedua buah terpasang dan dingin buah dirawat, sedangkan di suhu rendah konsentrasi ASA dipertahankan melalui stimulasi transkripsional Asa metabolisme
2. Bahan dan metode
2.1 . Kondisi bahan tanaman dan pertumbuhan
yang 13,1 cm 11,3 cm 7 cm . Kasus werefilled dengan buah-buahan di tahap kedewasaan komersial . Di dalam unit penyimpanan kelembaban relatif adalah 75 % suhu yang disesuaikan dengan perawatan simulasi kondisi pascapanen umum . Daftar semua perawatan dan bahan tanaman diperlihatkan pada Tabel 1 . Setiap panen dilakukan pada jam 11:00 dan direplikasi tiga kali menciptakan tiga banyak . Sampel segera dibekukan dalam nitrogen cair , homogen menggunakan ulekan dan kemudian disimpan pada 80C.
2.2. Real time analisis ekspresi PCR
Real-time PCR reaksi dilakukan seperti sebelumnya dijelaskan (Tsaniklidis et al., 2012, 2014). Sampel untuk analisis qPCR siap mencampur 1 gr dari setiap lot (dijelaskan di atas). Total RNA diisolasi dari masing-masing sampel menggunakan RNeasy ekstraksi Kit (Qiagen, Hilden Jerman). Kuantitas dan kualitas RNA total yang dinilai dengan analisis spektrofotometri dan elektroforesis, mengukur absorbansi pada 260 nm dan rasio absorbansi 260/280 nm di Nanodrop (Thermo, Wilmington USA) dan oleh 1,5% b / v agarosa gel elektroforesis. Untuk menghilangkan Total DNA, sampel diobati dengan RNase gratis DNaseI (Takara, Otsu Shiga Jepang) sesuai dengan instruksi produsen. Lengkap Penghapusan DNA diuji dengan primer yang dirancang terhadap mana-mana ofUBIQUITIN gen diekspresikan (UBQ), sedangkan S. Lycopersicum genomik DNA digunakan sebagai kontrol positif.
Untai pertama cDNA terbalik ditranskrip oleh Affinity ScriptTM multi Suhu reverse transcriptase menggunakan oligo (Aradhya et al., 2010) primer sesuai dengan petunjuk pabrik (Stratagen, Santa Clara AS). The resultingfirst-untai cDNA kemudian dinormalisasi untuk ekspresi gen ofUBQ rumah tangga. Gen primer spesifik dirancang oleh Beacon desainer v 7.01 software (Premier Biosoft, Palo Alto USA) againstGalLDG, APX (Aoki et al, 2010 (Aoki et al, 2010.);. Najami . et al, 2008), MDHAR (Grantz et al, 1995;.. Li et al, 2010), DHAR (Chen dan Gallie, 2006;. Zou et al, 2006) (. Gilbert et al, 2009), PDB-D-mannose 3,5-epimerase (GME, EC 5.3.1.18) dan UBQ gen (Tabel 2).
Kuantitatif real time Reaksi PCR dilakukan pada sistem MX-3005P (Stratagen, Santa Clara USA) dengan Kapa Cepat Universal 2X qPCR Guru Mix (Kapa, Woburn USA) dan gen spesifik primer. Anil ditetapkan sebesar 60C (45 s), perpanjangan 72C (11s) dan denaturasi pada 95C (3 s) untuk 40 lingkaran, ekstensi akhir diikuti pada 72C selama 5 menit. Primer kekhususan dan formasi primer-dimer dipantau oleh analisis kurva disosiasi dan gel elektroforesis agarosa pada 2% (b / v) gel. Dalam semua sampel diperiksa, sebuah amplikon tunggal terdeteksi. Tingkat ekspresi OFS. lycopersicum UBQgene digunakan sebagai standar internal untuk menormalkan konsentrasi cDNA template. Untuk kuantifikasi relatif ekspresi gen, sebuah modifikasi metode siklus ambang batas komparatif digunakan .
Kelimpahan relatif dari semua transkrip diperkuat dinormalisasi ke tingkat ekspresi konstitutif UBQmRNA . Tingkat transkrip relatif dalam sampel yang berbeda untuk gen yang diinginkan yang dihitung sebagai rasio terhadap transkrip theUBQgene . Data yang dianalisis seperti yang dijelaskan sebelumnya ( Tsaniklidis et al. , 2012) . Efisiensi PCR ( E ) untuk setiap amplikon dihitung menggunakan linear regresi log ( fluoresensi ) per siklus jumlah data, menggunakan Software LinRegPCR . Untuk semua sampel , reaksi qPCR dilakukan dlm rangkap tiga.
2.3. Penentuan asam askorbat
PVP tidak larut (MP Biokimia, Eschwege Jerman). Sampel disentrifugasi pada 13.000 g pada 4C selama 15 menit. Supernatan yang dihapus dan disimpan dalam es; 500 ml media ekstraksi yang ditambahkan ke endapan dan diikuti dengan sentrifugasi kedua. Ekstrak dikumpulkan dan digunakan untuk Asa kuantisasi dengan HPLC. HPLC analisis dilakukan menggunakan sistem Prominence HPLC (Shimadzu, Tokyo Jepang) dilengkapi dengan degasser DGU-20A5, sebuah SPD-M20A UVeVis detektor fotodioda array dan CTO-20A thermo-lain kompartemen kolom. Sebuah alikuot 20 ml ekstrak disuntikkan ke dalam kolom Zorbax Stablebond-C18, 5mm, 250 4.6 mm (Agilent Technologies, Palo Alto USA). Analit sampel dipisahkan menurut Davey et al. (2003) dan penentuan kuantitatif dilakukan berdasarkan pada kurva referensi di 243 nm. Untuk Asa kuantisasi, 250ml 200 mM DTT dalam 250 ml 400 mM Tris-dasar ditambahkan ke 500 ml ekstrak buah, dan diinkubasi selama 15 menit pada suhu kamar; reaksi dihentikan oleh penambahan 250ml 8% o-H3PO4 (Carlo Erba, Rodano Italia) dan Total L - Asa dihitung dengan HPLC . Pure DHA (SigmaeAldrich , St. Louis USA ) digunakan untuk kurva referensi ( 0,1 , 0,5 dan 1 mM masing-masing) .
2.4. APX pengukuran aktivitas
Kegiatan APX Total dinilai menggunakan metode yang diusulkan oleh Panchuk dkk. (2002) dengan sedikit modifikasi. Sebuah sampel jaringan dari 400 mg membeku dalam nitrogen cair, membumi, dicampur dengan 2 ml penyangga ekstraksi yang mengandung 50 mM Na-fosfat (pH 7,0), 0,25 mM EDTA (SigmaeAldrich, St. Louis USA), 2% larut polivinilpirolidon-25 PVP (MP Biokimia, Eschwege Jerman), 10% (b / v) gliserol (SigmaeAldrich, St. Louis USA), dan 4 mM L-Asa dan disentrifugasi pada 13,000gfor 10 menit pada 2C. Supernatan dikumpulkan, disaring dan langsung digunakan untuk estimasi aktivitas APX dengan larutan reaksi yang mengandung 25 mM Na-fosfat (pH 7,0), 0,1 mM EDTA, 0,2 mM H2O2and 4 mM Lasa. Ekstrak protein dari 200ml dengan 850 ml larutan reaksi yang digunakan untuk melakukan pengujian tersebut. Tingkat oksidasi L-Asa photometrically diuji pada 265 nm menggunakan Shimadzu (Tokyo Jepang) UV 160A spektrofotometer UV dan cuvettes (Ratiolab, Dreieich Jerman) di 10 interval menit pada suhu kamar. Konsentrasi yang telah ditetapkan dari ASA yang digunakan untuk kurva referensi.
2.5. DHAR pengukuran aktivitas
Kegiatan DHAR dinilai sesuai dengan metode yang diusulkan byChen dan Gallie (2006) dengan sedikit modifikasi. Sebuah jaringan sampel dari 200 mg dibekukan dalam nitrogen cair, membumi, dan diekstraksi dengan 2 ml buffer ekstraksi yang mengandung 50 mM Tris HCl (pH 7,4), 100 mM NaCl (SigmaeAldrich, St. Louis USA), 2 mM EDTA, 1 mM MgCl2 (MP Biokimia, Eschwege Jerman) dan 0,5% PVP larut dan disentrifugasi pada 13,000gfor 10 menit pada 2C. supernatan dikumpulkan, disaring dan digunakan untuk estimasi kegiatan DHAR dengan campuran reaksi yang berisi 50 mM MESNaOH (pH 6,3) (MP Biokimia, Eschwege Jerman), 2 mM DHA dan 5 mM glutation tereduksi ( SigmaeAldrich , St. Louis USA ) . The Campuran reaksi digunakan bersama dengan ekstrak protein 150ml dalam Total volume 1 ml . Tingkat pengurangan Asa photometrically diuji pada 265 nm menggunakan spektrofotometer Shimadzu UV 160A dan UV cuvettes di 10 interval menit pada suhu kamar. Konsentrasi yang telah ditetapkan dari ASA yang digunakan untuk kurva referensi .
2.6 . Analisis statistik
yang signifikan antara perawatan ditentukan oleh dua arah ANOVA dan post- hoc perbandingan dengan setidaknya perbedaan yang signifikan ( P < 5 % ) .
3. Hasil
3.1. Konsentrasi Asa
Seperti yang diamati inFig. 1, cold storage diawetkan atau sedikit meningkat mengurangi konsentrasi Asa di semua perawatan cold storage tanpa perubahan signifikan total Asa. Jumlah Asa juga meningkat dalam buah-buahan disimpan pada 5 C selama 5 hari dan ditransfer pada suhu kamar selama dua hari lagi (5d5 Cþ2dRT). Sebaliknya, penyimpanan dipanen buah-buahan di dekat perkebunan (NTP) di bawah kondisi yang sama menghasilkan penurunan yang cukup dari tingkat Asa sementara relatif penurunan yang lebih kecil secara total tingkat diamati pada 10d10 Perlakuan C.
Tidak ada perbedaan yang signifikan di tingkat Asa ditemukan. Mengurangi Tingkat Asa berkisar dari 0,99 ke 1.27mm / gr FW, sementara total kadar Asa berkisar dari 1,13 untuk 1.55mM / gr FW. Sekali lagi tingkat terendah adalah ditemukan di NTP, sedangkan perbedaan signifikan yang ditemukan di perawatan lain dengan tingkat yang lebih tinggi diamati pada buah-buahan pada saat jatuh tempo komersial (CM). Meskipun tingkat Asa berbeda di kedua 5 C dan 10 Kondisi penyimpanan C, baik konsentrasi Asa diawetkan secara signifikan dibandingkan dengan buah-buahan NPT (Gbr. 1).
3.2 . Aktivitas enzim yang terlibat dalam Asa katabolisme dan daur ulang 3.2.1 . aktivitas APX
Aktivitas APX signifikan bervariasi antara perlakuan dengan APX tingkat aktivitas mulai 27,1-117,8 mM ASA / gr FW * min ( Gambar . 2H ) . Aktivitas APX tertinggi terdeteksi pada buah NTC , yang menunjukkan konsentrasi Asa terendah, diikuti oleh 5d5 Pengobatan Cþ2dRT. Sebaliknya, aktivitas APX terendah ditemukan dalam buah-buahan disimpan di 10 C selama 5 hari (5d10 C) dan pada 10C selama 10 hari (10d10 C). Dalam semua perawatan lain, diperiksa APX aktivitas tetap konstan.
3.2.2. Kegiatan DHAR
Kegiatan DHAR kurang bervariasi dibandingkan dengan aktivitas APX. Namun, dalam NTP dan 5d10 C buah-buahan, kegiatan itu lebih rendah daripada di lain perawatan, sementara itu meningkat pada buah-buahan disimpan untuk 5d5 C dan untuk 10d10C (Gambar. 4). Nilai aktivitas enzim yang cukup konstan, mulai dari 9,4 ke 13.9mm ASA / gr FW * min.
3.3. Profil ekspresi gen yang terlibat dalam Asa katabolisme dan daur ulang dalam kondisi penyimpanan yang berbeda
3.3.1. Ekspresi gen dari isoenzim APX
3.3.2. Ekspresi gen coding untuk Asa daur ulang isoenzim
Akumulasi transkrip gen coding untuk enzim terlibat dalam teroksidasi pengurangan askorbat secara signifikan lebih tingg setelah penyimpanan di bawah kondisi penyimpanan suhu rendah, dengan pengecualian DHAR dan GR ekspresi dalam buah-buahan disimpan di
5d5 Cþ2dRT mana induksi agak terhambat (Gbr. 3). Di semua sampel yang diperiksa, ekspresi terendah terdeteksi di Sampel NTC. Ekspresi tertinggi untuk semua gen tercatat di 5d10 yang C sampel. Di antara sampel diperlakukan dingin, terendah Ekspresi terdeteksi di 5d5 Cþ2dRT, yang juga menampilkan ekspresi terendah APX1-7genes
3.3.3 . Ekspresi dari GalLDH dan GME gen
GalLDH dan GME gen coding untuk enzim yang terlibat dalam Asa dipamerkan pola yang sama ( Gambar . 5 ) . transkrip akumulasi kedua gen jelas signifikan lebih tinggi pada
sampel di kedua 5d5 C dan 5d10 C. Dalam 10d10 Sampel C, Ekspresi dari GalLDH dan GME signifikan mengurangi meskipun Asa konsentrasi , APX1-7expression dan gen yang terlibat dalam daur ulang Asa yang sangat disajikan . Perlu menyadari bahwa NTC sampel , di mana konsentrasi Asa adalah yang terendah , dipamerkan ekspresi termurah untuk gen yang terlibat dalam biosintesis Asa
4. Diskusi
Asam askorbat merupakan metabolit berat molekul rendah, yang berfungsi sebagai agen antioksidan dalam tanaman, terutama di bawah berbagai kondisi stres (Fotopoulos et al., 2008). Selain signifikan Peran fisiologis Asa memainkan dalam metabolisme tanaman, akumulasi Asa buah-buahan dan sayuran penting untuk diet dan kesehatan manusia
(Davey et al., 2000). Oleh karena itu, perbaikan agronomi dan pelestarian pasca panen dari kandungan vitamin C dalam buah-buahan menerima signifikansi perhatian dari konsumen dan petani. Dalam kedua buah melekat dan buah-buahan tomat diawetkan dingin, sedikit perbedaan konsentrasi Asa berkurang dicatat, sementara Total konten Asa tetap relatif tidak terpengaruh. Meskipun kecil perbedaan tingkat Asa telah ditemukan dalam buah-buahan tomat disimpan untuk 10 hari di 7 C, 15C dan 25 C (Toor dan Savage, 2006), dalam hal ini mempelajari konsentrasi Total Asa dan mengurangi Asa di NPT tomat disimpan dipamerkan penurunan yang signifikan, menunjukkan bahwa ambient suhu mungkin memiliki dampak penting pada tingkat Asa. Ini Hasil ini konsisten dengan temuan di kacang, brokoli dan bayam di mana pengurangan suhu dari ambien ke 4 C selama 14 hari mempertahankan tingkat signifikan Asa (Favell, 1998;. Proietti et al, 2009).
Demikian pula, konsentrasi Asa lebih tinggi selama 14 hari penyimpanan di buah tomat disimpan di 10 C, dibandingkan dengan buah tomat disimpan pada suhu lingkungan (Gharezi et al., 2012). Oleh karena itu, melekat buah-buahan dan tomat cold storage dipertahankan konsentrasi Asa dibandingkan dengan buah tomat disimpan pada suhu kamar, yang merupakan sesuai dengan yang sebelumnya dilaporkan hasil (Oms-Oliu et al., 2011).
ekspresi ofAPX6was lebih tinggi setelah 3 jam pada 4 C dan meningkat secara bertahap hingga 2,5 kali lipat setelah penyimpanan selama 24 jam pada
suhu ini. Selain itu, overekspresi ofAPX6in tomat tanaman hasil dalam peningkatan ketahanan terhadap dingin stres, menyarankan Implikasi langsung dari APX enzim dalam toleransi stres (Duan et al., 2012). Ekspresi gen allAPXhomologue coding untuk APX
isozim dikelompokkan menjadi dua jenis pola ekspresi. The APX1-4 gen yang sangat disajikan dalam sampel disimpan selama 5 hari di low kondisi suhu, whileAPX5-7were signifikan menyatakan dalam sampel disimpan pada 10 C. Selanjutnya, yang terakhir menurun pada Setidaknya sepuluh kali lipat jika dibandingkan dengan gen homolog. Tingkat yang sama dari APX1-4expression juga telah dilaporkan di parthenocarpic dan buah unggulan tomat selama pematangan (Tsaniklidis et al., 2014). Dengan demikian, APX1-4genes tampaknya co-diatur dalam fisiologis tertentu kondisi buah tomat. Perlu memperhatikan bahwa di antara rendah Suhu diperlakukan sampel, ekspresi terendah APX1-7 gen terdeteksi di 5d5 Cþ2dRT, sementara secara bersamaan dengan aktivitas APX tertinggi di antara sampel diperlakukan dingin juga dicatat dalam kondisi yang sama. Dengan cara analog, yang Kegiatan APX tertinggi ditemukan pada sampel NTP, mana yang terendah ekspresi untuk allAPXisoforms terdeteksi. Hasil ini menunjukkan bahwa hubungan yang kompleks ada antara aktivitas enzim APX dan akumulasi transkrip ofAPXgenes dalam buah-buahan yang disimpan dalam kondisi yang berbeda yang mungkin bisa dikaitkan dengan sifat kompleks APX keluarga multi-enzim (Shigeoka et al., 2002). Sebuah inkonsistensi antara aktivitas enzim APX dan gen APX
akumulasi transkrip selama penyimpanan pascapanen di 0 C juga dilaporkan di pir (Cascia et al., 2013). Daur ulang jalur Asa memegang fisiologis penting peran dalam adaptasi tanaman di bawah kondisi stres dingin (Stevens et al., 2008). Meskipun MDHAR1,2isoforms yang berbeda-beda disajikan dalam buah tomat selama pematangan, menunjukkan diskrit peran untuk setiap gen (Tsaniklidis et al., 2014), kedua homolog ikuti pola umum dalam buah-buahan tomat diperiksa dalam penelitian ini. Memang, akumulasi transkrip ofMDHAR1,2was jauh lebih tinggi pada sampel diperlakukan dingin. Namun, sebaiknya MDHAR1is
dinyatakan dalam 5d5 Sampel C, sedangkan MDHAR2is kuat dinyatakan dalam sampel disimpan pada 10 C. Akumulasi transkrip tinggi ofMDHARgenes ini mungkin disebabkan enzim MDHAR asosiasi dalam pemeliharaan tingkat Asa dalam menanggapi stres oksidatif selama dingin (Stevens et al., 2008). Demikian pula, DHAR1,2isoforms tampaknya mengikuti pola yang sebanding dan dengan akumulasi transkrip jauh lebih tinggi pada sampel diperlakukan dingin menunjukkan bahwa stres dingin memiliki efek yang signifikan pada Asa daur ulang. Eltelib dkk. (2011) telah melaporkan peningkatan regulasi yang cukup akumulasi transkrip sebagian dari isoenzim MDHAR dan DHAR di acerola (Malpighia glabra) buah setelah stres dingin jangka pendek. The ofDHARresults berlebih dalam peningkatan yang signifikan dari Tingkat Asa, menunjukkan peran penting dari DHAR di Asa daur ulang (Qin et al., 2011). Relatif kegiatan rumah tangga DHAR di masa sekarang studi harus berkorelasi dengan konsentrasi Asa cukup stabil.
Selanjutnya, dalam 5d10 Sampel C pengurangan aktivitas DHAR adalah mungkin terhubung ke penurunan aktivitas APX dan pengurangan konsekuen teroksidasi Asa. Ekspresi TheGR1,2isoform meningkat dalam sampel menekankan dingin. Meskipun GR1,2can menunjukkan pola yang berbeda di jatuh tempo buah tomat (Tsaniklidis et al., 2014), dalam ekspresi penelitian ini dari kedua Grisoforms meningkat, menunjukkan bahwa jalur daur ulang dari ASA ditingkatkan. Dalam buah tomat, Asa teroksidasi oleh APX enzim dan
C. Hal ini menunjukkan bahwa metabolisme Asa dalam buah tomat lebih mampu untuk mengembalikan kerusakan dingin dalam buah-buahan disimpan pada 10 C tanpa kerugian yang signifikan dalam konten Asa. Konsentrasi Asa dalam buah-buahan tomat dipertahankan mungkin melalui daur ulang, mengoksidasi penghambatan, biosintesis dan masuknya. Di penelitian ini, ekspresi GAlLDHand GMEgenes yang terlibat dalam biosintesis Asa juga dicatat (Smirnoff dan Wheeler, 2000). Data kami menunjukkan bahwa kedua gen umumnya up-diatur karena stres dingin, terutama di 5d5C sampel. Baru-baru ini ditemukan bahwa penindasan GME dalam tomat tanaman mengarah pada penurunan konsentrasi Asa dan keterbelakangan di pertumbuhan, yang mendukung peran fisiologis penting GME
Asa biosintesis pada tanaman tomat (Zhang, 2012). Peningkatan GAlLDH dan GME transkripsi gen dalam sampel diperlakukan dingin terdeteksi dalam penelitian ini dapat mungkin berhubungan dengan Asa fungsi sebagai faktor antioksidan bawah tekanan dingin. Berlawanan dengan Temuan dari penelitian ini, Ioannidi dkk. (2009) telah menemukan Peraturan signifikan up hanya dalam ekspresi GPP, yang terdiri Langkah lain Asa biosintesis dalam tomat ketika mengalami jangka pendek stres dingin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa langkah-langkah tertentu Asa biosintesis jalur tidak bereaksi tepat pukul stres dingin kondisi.
Secara bersama-sama, data yang tersedia menunjukkan bahwa metabolisme ASA ditingkatkan dalam buah-buahan cold storage, sementara tingkat Asa tetap relatif konstan. Studi tentang akumulasi transkrip isoenzim berpartisipasi dalam Asa daur ulang dalam buah-buahan tomat di 10C menunjukkan bahwa pada suhu ini tanaman tomat merespon lebih efisien. Buah Selanjutnya, kedua melekat dan buah-buahan diperlakukan dingin
